A sepse é considerada uma doença complexa e frequentemente associada à disfunção de múltiplos órgãos e sistemas[1]. A sua apresentação clínica é muito heterogênea, com muitos sinais e sintomas que podem nos levar a outros diagnósticos de origem não infecciosa[2]. Muitos casos são reconhecidos tardiamente e os pacientes são frequentemente tratados de forma heterogênea e errônea, principalmente quando tratados fora do ambiente da UTI. Devido às altas taxas de mortalidade e dos custos hospitalares principalmente em pacientes com diagnóstico de sepse grave e choque séptico, foi elaborado um guia para diagnóstico e tratamento em 2004 e atualizado em 2008, denominado “Surviving Sepsis Campaign (SSC) Guidelines for Management of Severe Sepsis and Septic Shock”[3, 4]. O objetivo desse guia era reduzir a mortalidade em 25% em cinco anos. Os seus idealizadores orientavam a formulação de protocolos ou pacotes clínicos baseados nas suas recomendações[3-5]. O presente estudo visa responder se o emprego de medidas assistenciais pré-definidas contidas no pacote da abordagem da sepse grave e choque séptico podem acarretar em uma melhora no tratamento e consequentemente nos custos e no prognóstico desse grupo de pacientes.

Resumo não disponível.

Introdução: As doenças mitocondriais apresentam características heterogêneas devido à própria natureza e função da mitocôndria, que possui o seu próprio DNA (mtDNA). A disfunção mitocondrial pode afetar um único órgão ou ser uma doença multissistêmica, de manifestação na infância ou na vida adulta, podendo ter um padrão de herança materna ou mendeliana. O diagnóstico é complexo e requer uma investigação criteriosa, passo-a-passo, com atenção a história clínica, exames laboratoriais, neuroimagem e, muitas vezes, a biópsia muscular para análise histoquímica, bioquímica e genética. A análise molecular é fundamental na definição do diagnóstico e os protocolos propostos até o momento são, geralmente, direcionados para um grupo de pacientes com características clínicas homogêneas. Objetivos: os objetivos deste trabalho foram: a) propor um protocolo combinando dados clínicos e laboratoriais para indicar a melhor forma de investigação molecular de pacientes com suspeita clínica de doença do DNA mitocondrial, b) Comparar os achados clínicos e laboratoriais nos pacientes com e sem mutação no mtDNA, c) avaliar quais são os fatores clínicos preditivos de mutação no mtDNA que podem ser utilizados como sinalizadores para o médico decidir quando deve ser realizado um procedimento diagnóstico invasivo e de alto custo, c) estimar a proporção de mtDNA mutado, através da técnica PCR em tempo real em um grupo de pacientes com deleção, correlacionando com a idade de início dos sintomas e gravidade de manifestações clínicas, d) relatar achados de RNM com espectroscopia por emissão de prótons em pacientes com deleção no mtDNA. Pacientes, material e métodos: Foram selecionados, no ambulatório de doenças mitocondriais do HCPA, 43 pacientes com suspeita clínica de doença mitocondrial. Esse pacientes foram submetidos à análise, por etapas, de 5 mutações de ponto no mtDNA de leucócitos, de deleção no mtDNA de músculo e ao sequenciamento do tRNAleu e tRNAlys. Os pacientes com resultados positivos e negativos para mutações do mtDNA foram então comparados em relação às suas características clínicas e laboratoriais. Foram selecionados 11 pacientes para a determinação da percentagem relativa de deleção do mtDNA no tecido muscular e 3 pacientes para a descrição da RNM com espectroscopia. Resultados – Foram encontradas mutações no mtDNA em 17 pacientes (39.9%) distribuídas da seguinte forma: 4 pacientes com MELAS (A3243G), 1 paciente com síndrome de Leigh (T8993C) e 12 pacientes com deleções no mtDNA. As características significativamente mais freqüentes no grupo de pacientes com mutação no mtDNA comparados com os demais foram: miopatia (p=0,032), retinopatia pigmentar (p=0,007), oftalmoplegia e ptose (p=0,002), baixa estatura (p=0,04), hipotrofismo (p=0,033) e acidose lática (p=0,006). A quantificação do mtDNA pela técnica de PCR em tempo real foi realizada em 11 amostras de músculo de pacientes com deleção no mtDNA e com diferentes manifestações clínicas. Não houve correlação entre a percentagem relativa de deleção no mtDNA com os fenótipos clínicos (PEO, KSS e encefalomiopatia associado à doença multissistêmica), bem como com a idade de início das manifestações clínicas. A RNM com espectroscopia por emissão de prótons realizada em três pacientes com deleção no mtDNA associada a um quadro clínico não clássico mostrou achados distintos para cada paciente, sendo comum a todos as lesões cerebrais e a presença do pico invertido de lactato. Conclusões - A criteriosa seleção clínica e laboratorial se mostrou apropriada e o protocolo empregado se mostrou eficiente, uma vez que a mutação no mtDNA pode ser detectada em 17 dos 43 pacientes com suspeita de doença mitocondrial. Os pacientes positivos para deleção no mtDNA apresentaram algumas características clínicas preditivas para doença do mtDNA, o que pode ser importante na indicação de um procedimento invasivo (biópsia muscular) e de alto custo. A técnica e PCR em tempo real pode ser utilizado para quantificar a percentagem relativa de mtDNA deletado, porém para o diagnóstico das deleções, essa técnica deve ser realizada de forma complementar à técnica tradicional (Southern blot). O número amostral ainda é pequeno para correlacionar a quantidade relativa de mtDNA deletado com as síndromes mitocondriais clássicas e não clássicas. A RNM com espectroscopia por emissão de prótons, por possibilitar a detecção do lactato cerebral, parece ter utilidade na avaliação clínica de pacientes com suspeita clínica de doença mitocondrial, mesmo quando o quadro não é clássico.

La investigación fue cualitativa con bordaje descriptivo, tuvo como objetivos: describir y analizar las apreciaciones de los estudiantes de obstetricia sobre los problemas éticos y bioéticos que se generan desde el aula hasta la práctica hospitalaria en una universidad privada del distrito de Chiclayo. Participaron 13 estudiantes universitarios de la carrera profesional de obstetricia, para la recolección de datos se usó el cuestionario con preguntas abiertas y la información recolectada se procesó por análisis de contenido temático. En el desarrollo de la investigación se guardaron los principios éticos y de rigor científicos. Posterior al análisis se obtuvieron tres categorías: deterioro del respeto como actitud ética fundamental con las subcategorías: deterioro del respeto en el ámbito docente-clínico y tendencias egoístas con escasa unidad. Incorrecciones éticas en el ejercicio docente con las subcategorías desatino en la formación de los estudiantes con las subcategorías: reproches ante injusticias docentes, desmotivando la práctica de valores y la improvisación de la enseñanza y como última categoría. Adjetivando problemas éticos y bioéticos en la práctica clínica. Entre las consideraciones finales; los problemas éticos y bioéticos apreciados por estudiantes de obstetricia de una universidad particular de Chiclayo emergen del comportamiento libre y voluntario de profesores y estudiantes y de la manera como autorregulan su conducta con apoyo la ética. / Tesis

El debate bioético actual señala los problemas que se originan en las estrechas relaciones establecidas entre la industria farmacéutica y los profesionales médicos, por ello resulta de necesidad indagar cuáles son los conflictos éticos y legales en esta interrelación. La presente investigación de tipo cualitativa documentaria describe la situación actual, los conflictos y las formas de tratamiento existentes en la relación diaria entre los médicos y la industria farmacéutica. Bajo la metodología de análisis triangular de Sgreccia se analizan las diversas formas de interacción de dicha relación que pueden percibirse como transgresiones a las normas éticas y morales en pro de la obtención de beneficios y se señalan los principales lineamientos del derecho al respecto. El conflicto ético y/o legal en la relación del médico con la industria farmacéutica se produce cuando se pasa por alto que el fin supremo del acto médico es la persona humana solicitante de atención médica. Cuando la aplicación práctica de los conocimientos y la tecnología disponible es llevada a cabo anteponiendo intereses secundarios u obligaciones reales o sentidas, producto de la relación con la industria farmacéutica, entonces se instrumentaliza al paciente y se le convierte en un medio para lograr un fin subalterno que no se condice con la esencia de la profesión médica. El trabajo concluye con la elaboración de una propuesta de conducta ética en la relación médico-industria. / Tesis

Objetivos: La investigación tuvo como propósito, conocer la percepción del interno y residente, de aspectos del profesionalismo médico en establecimientos de salud del departamento de Lambayeque; establecer perfil del estudiante, incidencia de valores según eje temático, según categoría: interno o residente. Material y métodos: diseño transversal, descriptivo, muestreo no probabilístico por conveniencia, con aplicación de cuestionario validado. Resultados del universo de la población sujeto del estudio 210 distribuido en: 126 internos y 94 residentes, el porcentaje de respuesta fue 94.4% y 71.2% respectivamente. Quedando el tamaño de la muestra en 186 correspondiendo a residentes 67, internos 119. Observancia de profesionalismo: 57.7% y 54.6 % según residente e interno respectivamente. Conducta profesional según residente veracidad al hablar con sus pacientes, preocuparse por el dolor de los pacientes, esforzarse por minimizarlo, observar dignidad humana y confidencialidad, escuchar al paciente con empatía 71%. Según interno: veracidad al hablar con sus pacientes 71.4%, sienten la responsabilidad de actualizar conocimientos y destrezas 69.7%, observar dignidad humana y confidencialidad 59.7%, usar crítica constructiva en lugar de murmurar a las espaldas de sus colegas 38.7 % a 36.2% según interno y residente respectivamente. Existen diferencias estadísticamente significativas entre la percepción de internos y residentes el profesional médico se preocupa frente al dolor y la angustia del paciente (χ² 9.4, p 0,024), tratan a otros miembros del equipo, especialmente a estudiantes y subordinados con respeto (χ² 14,3, p 0,007). Referido a atributos interno: honor e integridad 58.8 % de respeto 56.3%, altruismo 54.5%, responsabilidad 53.3%, justicia 52.1%, excelencia 51%. Residente: altruismo 65.2%, respeto 62.3%, justicia 59.4%, honor e integridad 56.5%, responsabilidad 52.1%, excelencia 51.7%. La observancia de profesionalismo médico presenta frecuencias por debajo del 58%. Las más bajas puntuaciones son reportadas desde la perspectiva del interno. Conclusiones: los médicos tratantes deben preocuparse acerca de su comportamiento y actitudes en la interacción con colegas, estudiantes y pacientes, debido al impacto que ellos tienen en su futuro profesional. / Tesis

Orientador : Prof. Dr. Élcio Juliato Piovesan / Co-orientador : Prof. Dr. Marcos Christiano Lange / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 29/01/2016 / Inclui referências : f. 42-44 / Resumo: As características evolutivas das cefaleias primárias, em pacientes portadores de aneurisma cerebral roto embolizado, não têm sido investigado até o momento. Avaliamos o padrão da cefaleia em pacientes que sofreram ruptura de aneurisma cerebral e tratamento endovascular, no período de um ano antes da ruptura, e avaliamos prospectivamente o comportamento da cefaleia por até 12 meses após tratamento endovascular. O objetivo do estudo foi avaliar a influência do tratamento endovascular do aneurisma intracraniano roto, no padrão da cefaleia primária prévia ou o no surgimento de algum novo tipo de cefaleia. Sessenta pacientes foram avaliados no período de 1º de junho de 2013 a 1º de junho de 2014, seguindo um questionário de cefaléia elaborado pelos autores e aplicado no momento do internamento. Esses pacientes foram contatados em 3, 6 e 12 meses após o tratamento para finalizar o estudo preenchendo este questionário. Dos pacientes estudados 37 apresentavam cefaleia antes da ruptura, sendo 16 com cefaleia do tipo tensional, 11 com migrânea sem aura, 9 migrânea com aura e 1 com características inespecíficas. Houve redução significativa da frequência da dor por até 12 meses em portadores de cefaleia do tipo tensional e migrânea sem aura, também houve redução da intensidade da dor, no mesmo período, nos 3 grupos de pacientes. Concluímos que houve redução das cefaleias primárias após tratamento endovascular do aneurisma cerebral roto. Palavras-chave: aneurisma cerebral; cefaleia; migrânea / Abstract: The characteristics of primary headaches in patients with ruptured brain aneurysm embolization have not been well understood. We evaluated the pattern of headache in patients who suffered a ruptured cerebral aneurysm and endovascular treatment within one year before the rupture, and prospectively evaluated the characteristics of headache for up to 12 months after endovascular treatment. This study was conducted to evaluate the influence of endovascular treatment of ruptured intracranial aneurysm, the pattern of previous primary headache or the emergence of a new type of headache. Methods: Sixty patients were evaluated during the period from June 1st, 2013 to June 1st, 2014, and a questionnaire with questions about headache was applied at the time of admission. These patients were contacted 3, 6 and 12 months after treatment to complete the study by filling out follow-up questionnaire on the headache. Results: 60 patients were evaluated, but only 37 had headache before the rupture, 16 with tension-type headache, 11 with migraine without aura, 9 with migraine with aura with and 1 with nonspecific characteristics. There was a significant reduction in the frequency of pain for up to 12 months for patients with tension-type and migraine without aura, but there was a reduction in pain intensity over the same period in 3 groups of patients. Conclusion: there was a reduction of the primary headache after endovascular treatment of ruptured brain aneurysm. Key words: cerebral aneurysm; headache; migraine

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-25Bitstream added on 2014-06-13T20:50:03Z : No. of bitstreams: 1 cardoso_ra_me_botfm.pdf: 896730 bytes, checksum: 97ac1a0ea8e45d9861c31c7feaac2ecb (MD5) / Fundação para o Desenvolvimento Médico e Hospitalar (Famesp) / A tecnologia de produção de anticorpos monoclonais revolucionou a investigação diagnóstica, especialmente a análise dos grupos sanguíneos em imuno-hematologia. O polimorfismo das hemácias humanas torna a produção de novos insumos extremamente necessária. Dentre os sistemas de grupos sanguíneos descritos, o sistema Rh tem se mostrado um dos mais complexos pela vasta composição de antígenos. Analisando aspectos estruturais do antígeno D associado às técnicas de biologia molecular, identificam-se numerosas variantes deste antígeno por trocas de DNA entre genes similares levando a alteração de epítopos e consequentemente de padrão de expressão fenotípica na superfície das hemácias. Desvendar e identificar estas variantes com insumos biotecnológicos desenvolvidos no país foi o desafio desta pesquisa, onde anticorpos monoclonais contra antígenos eritrocitários foram produzidos através de fusão celular, utilizando-se células de baço de camundongos BALB/c imunizados com hemácias fenótipo D categoria IVa. Nove fusões foram realizadas e os sobrenadantes de cultura foram triados por teste de hemaglutinação em microplacas. Foram congelados e mantidos em nitrogêncio líquido 41 híbridos. Estes híbridos foram clonados e mantidos em meio de cultura para a obtenção dos anticorpos monoclonais, resultando em 12 clones IgG1, 5 IgG2a e 10 IgM. Os clones foram selecionados para produção de líquido ascítico, através da injeção dos clones em camundongos BALB/c. Os anticorpos monoclonais produzidos, inicialmente não demonstraram a especificidade foco do presente trabalho que foi a produção de anticorpos anti-D, no entanto, os hibridomas podem ter secretado diferentes especificidades de anticorpos monoclonais, de acordo com os antígenos presentes na membrana das hemácias utilizadas para a imunização dos camundongos. Uma segunda fase da pesquisa está sendo... / The blood groups analyses in immunohematology have been highly benefited based on the advance of the monoclonal antibody technology improvement on diagnostics investigation. The human red blood cell polymorphism increases the need for new alternatives. The Rh system blood group is the most complex of all, due to the vast antigenic composition. When analyzing the structural aspects of the D antigen in combination with the molecular techniques, based upon DNA exchange between similar genes it is possible to identify a huge number of partial D variants, this situation leads to a change of epitopes and hence the red blood cell phenotypic expression pattern. Unveil and identify these variables through the use of local biotechnology was the challenge of this research. Monoclonal antibodies against human red blood cell were produced by cell fusion, using spleen cells from immunized BALB/c mice and DIVa red blood cells. Nine fusions had been made and the culture supernatants were selected to the hemaglutination test using microplates. Forty-one hybrids had been frozen and kept in liquid nitrogen. These hybrids had been cloned and kept in the culture to collect monoclonal antibodies, resulting in 12 IgG1, 5 IgG2a e 10 IgM. The clones had been selected for ascitic fluid production, by injection in BALB/c mice. The monoclonal antibodies produced initially had not produced the anti-D as expected by the research. However, the hibrydomas could have created different specificities of monoclonal antibodies, according to the antigen located in the donor red blood cells membrane used in the mice’s immunization. The second phase of the research is being done to confirm the monoclonal antibodies specificities produced through the deployment of new tests to immunoglobulin identification

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:08:59Z : No. of bitstreams: 1 sabino_js_me_botfm.pdf: 566217 bytes, checksum: 240c61c93ab7c7cbdc92982de0adea0d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Secretaria do Estado da Saúde de São Paulo / O Sistema Rh é constituído por 48 antígenos eritrocitários, sendo o antígeno Rh D, considerado o mais imunogênico seguido dos antígenos c, E, C, e. A probabilidade de imunização por Rh D é muito mais alta quando comparada com outros antígenos de grupos sanguíneos humano que ocasionalmente produzem anticorpos irregulares, tornando esse sistema de grande importância clínica. O antígeno Rh D é composto por 37 epítopos, formando um mosaico. Qualquer mudança de aminoácidos em uma parte da proteína pode afetar a expressão da seqüência de epítopos ou resultar em novos epítopos. Por isso, os antígenos do grupo sanguíneo Rh D podem apresentar variações de sua expressão na membrana eritrocitária. As hemácias com fenótipo Rh D fraco diferem quantitativamente das células Rh D positivas normais, por serem definidas como tendo todos os epítopos Rh D presentes, porém com uma redução dos níveis de antígeno Rh D. As hemácias Rh D parcial diferem qualitativamente das células Rh D positivas normais, pois carecem de um ou mais epítopos que formam o antígeno Rh D. Em geral, os fenótipos Rh D parcial se expressam devido à presença de genes híbridos, os quais ocorrem predominantemente em indivíduos de origem africana. O número de amostras classificadas como Rh D fraco e Rh D parcial depende das características do reagente utilizado para a fenotipagem Rh D. Anteriormente os reagentes utilizados eram os policlonais, porém atualmente, com a descoberta do anticorpos monoclonais e a dificuldade de obtenção dos policlonais, tem-se utilizado apenas os reagentes monoclonais. Desde então, diferenças entre a reatividade de vários reagentes, especialmente na detecção de Rh D fraco e Rh D parcial, têm criado uma discussão sobre o teste adequado para doadores de sangue, pacientes e receptores. / The Rh System is constituted by 48 red cells antigens, where the Rh D antigen is considered the most immunogenic followed by c, E, C, e antigens. The probability of immunization by Rh D is higher when is compared with other human sanguineous groups antigens, that occasionally produce irregular antibodies, what makes this system very important clinically. The antigen Rh D is composed by 37 epitopes, which forms a mosaic. Any amino acid change in a protein part can affect the expression of the epitopes sequence or results in new epitopes. Therefore, the sanguineous group Rh D antigens can present variations in the red cells membrane expression. The red cells with weak D phenotype are quantitatively different from the Rh D normal positive cells, because of the presence of all epitopes in their definition, but with a reduction of Rh D antigen levels. The red cells D partial are qualitatively different from the Rh D normal positive cells, because they need one or more epitopes that form Rh D antigen. In general, the partial D phenotype occurs due to the presence of hybrid genes, which occur predominantly in African individuals. The number of classified samples as weak D and partial D depends on the reagent used for the Rh D phenotyping characteristics. Previously the used reagents were polyclonal, but currently, with the discovery of the monoclonal antibodies and the difficulty of attainment of the polyclonal, it has been used only monoclonal reagents. Since then, differences between the reactivity of many reagents, especially in the detention of weak D and partial D, have been created a discussion about the apropriated tests for blood donators, patients and receivers.

As beta-lactamases de espectro ampliado (ESBL) representam um importante mecanismo de resistência aos beta-lactâmicos. Essas enzimas disseminaram-se entre membros da família Enterobacteriaceae que causam infecções relacionadas à assistência à saúde, especialmente as nosocomiais. Objetivos: (a) Determinar a prevalência de Escherichia coli e Klebsiella spp produtores de ESBL de origem hospitalar e comunitária; (b) Verificar a origem dos isolados (amostra clínica e unidade de internação); (c) Avaliar a acurácia dos testes fenotípicos de detecção de ESBL; (d) Determinar os perfis de sensibilidade aos antimicrobianos; (e) Determinar os genes de beta-lactamase; (f) Avaliar o modo de disseminação e; (g) Realizar experimentos de transferência de resistência. Material e métodos: Foram avaliados 1346 isolados (1162 E. coli, 180 K. pneumoniae e 4 K. oxytoca), de pacientes internados e ambulatoriais, entre abril de 2003 a maio de 2006, em Caxias do Sul. Um isolado/paciente foi incluído e a infecção hospitalar definida pelo CDC (Centers for Diseases Control and Prevention). Pelo método disco-difusão, conforme CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) identificou-se os produtores de ESBL (triagem: aztreonam, cefotaxima, ceftazidima, ceftriaxona e cefpodoxima e confirmatório: cefpodoxima, ceftazidima, cefotaxima, com e sem ác. clavulânico). A cefepima foi incluída nos testes. Os isolados foram submetidos a testes de sensibilidade aos antimicrobianos, por disco-difusão, segundo a CLSI; ao método de PCR para detecção dos genes bla TEM, bla SHV, bla CTX-M e; à tipagem por PGFE. A cepa E. coli αDH, como receptora, foi usada na conjugação e os transconjugantes pesquisados para produção de ESBL e perfil de sensibilidade. Resultados: As prevalências de ESBL em nível hospitalar foram: K. pneumoniae (43,7%) e E. coli (6,7%) e a comunidade, respectivamente, de 2,6% e 0,4%. As vias aéreas (escarro, aspirado traqueal, lavado broncoalveolar) , sangue e urina, e as UTIs e Clínica-Cirúrgicas foram as amostras clínicas e unidades de internação com os maiores percentuais de isolados produtores de ESBL. Independente da bactéria analisada, a ceftazidima foi o substrato com o pior desempenho nos testes. Já a cefpodoxima, a cefotaxima, a ceftriaxona e o aztreonam apresentaram sensibilidade de 100% e especificidade >94,0% para isolados de Klebsiella spp. Para E. coli a cefpodoxima foi o melhor substrato (sensibilidade de 100,0% e especificidade de 75,0%). A cepefima apresentou excelente desempenho. Os isolados de Klebsiella spp produtores de ESBL apresentaram taxas de resistência superiores àqueles apresentados pelos isolados não produtores de ESBL, para vários antimicrobianos beta-lactâmicos e não beta-lactâmicos. Independente da produção de ESBL esses isolados foram sensíveis aos carbapenêmicos e tigeciglina. Foram detectados em E. coli e Klebsiella spp com fenóitpo ESBL os genes de beta-lactamase blaTEM (89,0%), blaCTX-M (75,6%) e blaSHV (35,4%). Foram identificados 22 padrões de PFGE, sendo 11 com mais de um isolado. Esses padrões envolveram 50 isolados de K. pneumoniae produtores de ESBL, com alta disseminação intra-hospitalar entre as unidades de internação do hospital e por período superior a um ano. Os transconjugantes apresentaram fenótipo de ESBL e resistência aos aminoglicosídeos. Conclusões: Nossos resultados mostraram que a produção de ESBL constitui um problema essencialmente nosocomial. Concluímos que a adição da cefepima nos testes de detecção de ESBL leva a um aumento significante na acurácia para E. coli. No entanto, os isolados produtores de ESBL do gênero Klebsiella representam o maior problema no hospital. Esses apresentaram ampla variabilidade genômica, indicando forte pressão seletiva de antimicrobianos, mas também disseminação multiclonal, indicando transmissão cruzada e uma situação de endemia dessas bactérias no hospital. Por fim, nossos resultados indicaram uma fácil disseminação de plasmídeos multirresistentes, o que pode representar um impacto importante nas opções terapêuticas para o tratamento de infecções por bactérias produtoras de ESBL. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-05-23T19:16:15Z No. of bitstreams: 1 Tese Claudia Wollheim.pdf: 783754 bytes, checksum: 3ec34679603cc7ab1e9b4dffac5e5855 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-23T19:16:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Claudia Wollheim.pdf: 783754 bytes, checksum: 3ec34679603cc7ab1e9b4dffac5e5855 (MD5) / The extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) represent an important mechanism of resistance to beta-lactam antibiotics. Such enzymes have spread among members of the Enterobacteriaceae family, which are responsible for infections related to health care, particularly nosocomial infections. Objectives: (a) To determine the prevalence of ESBL producing Escherichia coli and Klebsiella spp of hospital and community origin; (b) To verify the origin of the isolates (clinical sample and internment unit); (c) To evaluate the accuracy of the phenotypic tests for ESBL detection; (d) To determine the sensitivity profiles to antimicrobial drugs; (e) To identify the beta-lactamase genes; (f) To evaluate the dissemination way and; (g) To perform experiments of resistance transfer. Materials and Methods: 1,346 isolates were evaluated (1,162 E. coli, 180 K. pneumoniae and 4 K. oxytoca), from inpatient and outpatients, between April 2003 and May 2006, in Caxias do Sul. One isolate/patient was included and the nosocomial infection defined by the CDC (Centers for Diseases Control and Prevention). By means of the disc-diffusion method, according to the CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute), the ESBL producers were identified (screening: aztreonam, cefotaxime, ceftazidime, ceftriaxone, and cefpodoxime and confirmation: cefpodoxime, ceftazidime, cefotaxime, with and without clavulanic acid). Cefepime was included in the tests. The isolates were submitted to sensitivity tests to antimicrobial drugs, using disc-diffusion, defined by CLSI; to PCR for detecting the bla TEM, bla SHV, bla CTX-M genes, and; to PGFE typification. The E. coli a-DH strain was used as the receptor in conjugation experiments and the transconjugants were analyzed with regards to ESBL production and sensitivity profile. Results: The ESBL prevalences at the hospital level were: K. pneumoniae (43.7%) and E. coli (6.7%) and at the community, 2.6% and 0.4%, respectively. The airways (sputum, traqueal aspiration and broncoalveolar lavage), blood, and urine, and the ICUs and surgical units were the clinical samples and the internment units presenting the largest percentages of ESBL producing isolates. Independently of the bacterium, ceftazidime was the substrate which provided the poorest results in the tests. On the other hand, cefpodoxime, cefotaxime, ceftriaxone, and aztreonam showed 100% sensitivity and specificity >94.0% for Klebsiella spp isolates. For E. coli, the best substrate was cefpodoxime (100% sensitivity and 75.0% specificity). Cefepime presented excellent performance. The ESBL producing Klebsiella spp isolates showed higher resistance rates than the ESBL non-producing strain, for several antimicrobial drugs, either beta-lactamic or not. Irrespectively of ESBL production, these isolates showed sensitivity to carbapenems and tigecyiclin. In the E. coli and Klebsiella spp with the ESBL phenotype, the beta-lactamase genes blaTEM (89.0%), blaCTX-M (75.6%) e blaSHV (35.4 %). Were detected. 22 PFGE patterns were identified, 11 with more than one isolate. These clones comprised 50 isolates of ESBL producing K. pneumoniae, with high intra-hospital dissemination among the internment units and for times longer than one year. The transconjugants presented the ESBL phenotype and resistance to aminoglycosides. Conclusions: Our results have shown that ESBL production constitutes an essentially nosocomial problem. We conclude that the addition of cefepime to the ESBL detection tests significantly enhances the accuracy of the test when applied to E. coli. However, the ESBL producing isolates of the genus Klebsiella represent the main problem in the hospital. These isolates presented great genomic variability, indicating strong selective pressure by antimicrobial drugs, but also multiclonal dissemination, which indicates cross-transmission and an endemic situation of these bacteria in the hospital. Finally, our results indicate an easy spreading of multi-resistant plasmids, what can represent an important impact on the therapeutic options for the treatment of ESBL producing bacteria.