Introdução Os fumantes inalam grandes quantidades de partículas de carbono, o que pode contribuir para efeitos adversos pulmonares e sistêmicos. É sabido que os macrófagos alveolares (MA) desempenham um papel extremamente importante no reconhecimento e processamento de qualquer material estranho inalado e são as células predominantes que processam e removem partículas inaladas. Existe também a deposição superficial a longo prazo do carbono observado nos pulmões de fumantes em autópsias. Atualmente, a distribuição e retenção de partículas de fumo derivadas de cigarros quando a pessoa também está exposta a níveis elevados de poluição do ar ainda não é clara. Portanto, procurou-se avaliar a carga de carbono nos MA e a deposição de superfície pulmonar em uma população exposta a alta poluição atmosférica (São Paulo), tanto em fumantes como não-fumantes. Métodos Uma coorte de 72 sujeitos post mortem foi obtida do Serviço de Verificação de Óbitos da Capital da Universidade de São Paulo (SVOC). As imagens das superfícies pulmonares foram obtidas sob condições padrão e pequenos fragmentos de tecido pulmonar foram coletados para análise de macrófagos usando a técnica de esfregaço. A superfície total de negro de carbono foi analisada utilizando o programa Imagem J (National Institute of Health, MD, EUA), teste cego ao fumo. A absorção interna de carbono nos MA foi medida utilizando o programa Image Pro Plus (The Proven Solution, Media Cybernetics Inc., EUA). A aprovação ética foi obtida. A média de negro de carbono de macrófagos tanto em fumantes como em não-fumantes foi analisada utilizando teste de Mann Whitney e expressa como intervalo interquartil (IQR). Resultados Os fumantes têm um nível significativamente mais elevado de negro de carbono nos macrófagos alveolares (103.4 (IQR 29.44 to 226.3) vs. 9.27 (IQR 3.1 to 85.13) um2, P < 0.001)103.4um2. Não houve diferença significativa entre a área média de deposição superficial de carbono nos pulmões de fumantes e não fumantes de 6, 74 cm2 (IQR 3, 47 a 10, 02) versus 5, 20 cm2 (IQR 2, 29 a 7, 54) P=NS. Conclusão O teor de carbono nos MA é claramente muito maior nos fumantes do que os nãofumantes. No entanto, a análise da superfície pulmonar não mostrou diferença significativa. Isso pode indicar que, em uma área de alta poluição do ar, o principal fator que contribui para a deposição de carbono no pulmão a longo prazo é a exposição à poluição com efeitos limitados da exposição à fumaça de cigarro. O preto de carbono nos MA ainda aparece significativamente influenciado pela exposição à fumaça de cigarro / Rationale Smokers inhale large amounts of carbonaceous particulate matter, which may contribute to pulmonary and systemic adverse effects. It is clear that alveolar macrophages (AM) play a critically important role in the recognition and processing of any inhaled foreign material and are the predominant cells that process and remove inhaled particulate matter from the lung. There is also long-term surface deposition of carbon seen in the lungs of smokers at post-mortem. At present the distribution and retention of cigarette smoke-derived particulate matter when the person is also exposed to high levels of background air pollution is unclear. Therefore we sought to assess both AM carbon loading and lung surface deposition in a population exposed to high background air pollution (São Paulo) in both smokers and non-smokers. Methods A cohort of 72 post-mortem subjects was obtained from São Paulo Autopsy Centre (SVOC). Images of lung surfaces were obtained under standard conditions and small fragments of lung tissue were collected for macrophage analysis using smear technique. The total surface black carbon was analysed using Image J (National Institute of Health, MD, USA), blinded to smoking status. Internal AM carbon uptake was measured using Image Pro Plus (The Proven Solution, Media Cybernetics Inc., USA). Ethical approval was obtained. Mean macrophage black carbon in both smokers and non-smokers was analysed using Mann Whitney and expressed as median (IQR). Results Smokers have a significantly higher level of mean macrophage black carbon (103.4 (IQR 29.44 to 226.3) vs. 9.27 (IQR 3.1 to 85.13) um2, P < 0.001)103.4um2. There was no significant difference between the mean area of surface deposition of carbon in the lungs of smokers and non-smokers 6.74 cm2 (IQR 3.47 to 10.02) versus 5.20cm2 (IQR 2.29 to 7.54) P=NS. Conclusion AM carbon content is clearly much higher in the smokers than the non-smokers. However the lung surface analysis showed no significant difference. This could indicate that in an area of high air pollution the main contributing factor to long term lung carbon deposition is pollution exposure with limited effects from cigarette smoke exposure. AM black carbon still appears significantly influenced by cigarette smoke exposure

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In this work, in vitro and in vivo effects of the Eugenia dysenterica DC. leaf hydroalcoholic extract (EDE) on AMJ2-C11 cell line and mice exposed to Cr(VI), respectively, were investigated. In parallel, the antioxidant activity of EDE was also investigated by the methods of 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH•) free radical capturing and co-oxidation of β-caroteno/linoleic acid. In vitro, pre-treatment of AMJ2-C11 cells with EDE (20, 40 ou 80 μg/mL) followed by exposure to Cr(VI) (100, 250 ou 500 μM) resulted in a concentration-dependent increase of cell viability. Furthermore, mechanistic studies of flow cytometry (cell cycle, annexin V, active caspases, ROS and rhodamine 123) and cell morphology showed that the EDE protected the cells from apoptosis triggered by Cr(VI), and reduced the ROS intracellular levels and prevented the loss of mitochondrial membrane potential. Additionally, significant antioxidant potential of EDE was observed. In vivo, prophylactic treatment for 10 days with EDE (50, 100 ou 200 mg/kg/day) and subsequent exposure to a sublethal dose of Cr(VI) (30 mg/kg) induced a decrease in Cr levels in the kidneys, liver and plasm, besides preventing liver and kidney changes caused by this metal. Moreover, treatment of animals with EDE (50, 100, 125, 200, 250 ou 500 mg/kg/day) followed by exposure to a lethal dose of Cr(VI) (50 mg/kg) induced an increase in the survival of exposed animals, especially at the doses of 50, 100 and 125 mg/kg. Therefore, the present study demonstrated that the EDE showed in vitro and in vivo effect against Cr(VI)-induced oxidative toxicity. / O cromo hexavalente [Cr(VI)] é um metal tóxico capaz de desencadear eventos toxicológicos no organismo, pois ultrapassa as membranas celulares e promove o aumento da produção de espécies reativas de oxigênio (ERO). Esses produtos, por sua vez, danificam as macromoléculas celulares, inibindo suas funções e favorecendo a morte celular por apoptose. Em vista disso, acredita-se que o uso de antioxidantes pode minimizar os danos induzidos por este metal. Nesse contexto, a espécie vegetal Eugenia dysenterica DC. (Myrtaceae), nativa do bioma Cerrado, tem sido estudada por apresentar altos níveis de polifenóis, substâncias que reconhecidamente têm potencial antioxidante. Ademais, é tradicionalmente utilizada na medicina popular e apresenta importância alimentar e econômica. Assim, neste trabalho, os efeitos in vitro e in vivo do extrato hidroalcoólico das folhas da Eugenia dysenterica (EED) sobre a linhagem celular AMJ2-C11 e em camundongos expostos ao Cr(VI), respectivamente, foram investigados. Em paralelo, a atividade antioxidante do EED também foi investigada através dos métodos de captura do radical livre 2,2-difenil-1-picrilidrazila (DPPH•) e da co-oxidação do β-caroteno/ácido linoléico. In vitro, o pré-tratamento das células AMJ2-C11 com EED (20, 40 ou 80 μg/mL) seguido de exposição ao Cr(VI) (100, 250 ou 500 μM) resultou em um aumento da viabilidade celular, de forma concentração dependente. Além disso, estudos mecanísticos utilizando citômetro de fluxo (ciclo celular, anexina V, caspases ativas, ERO e rodamina 123) e de morfologia celular evidenciaram que o EED protegeu as células da apoptose desencadeada pelo Cr(VI), além de reduzir os níveis intracelulares de ERO e impedir a perda do potencial de membrana mitocondrial. Adicionalmente, foi observado relevante potencial antioxidante do EED. In vivo, o tratamento profilático por 10 dias com EED (50, 100 ou 200 mg/kg/dia) e subsequente exposição a uma dose subletal de Cr(VI) (30 mg/kg) promoveu redução dos níveis de Cr nos rins, fígado e plasma, além de prevenir alterações hepáticas e renais causadas por esse metal. Além disso, o tratamento dos animais com EED (50, 100, 125, 200, 250 ou 500 mg/kg/dia) seguido de exposição a uma dose letal de Cr(VI) (50 mg/kg) promoveu um aumento da sobrevida dos animais expostos, principalmente nas doses de 50, 100 e 125 mg/kg. Por conseguinte, o presente estudo demonstrou que o EED

Introdução: Este estudo foi realizado com o intuito de avaliar efeitos da acupuntura sobre os pacientes com asma leve e moderada persistentes com o uso de beta-2 agonista ou corticoide inalatório. Métodos e casuística: Trata-se de um estudo prospectivo, duplo-cego, randomizado e cruzado com dois braços. Os 74 pacientes com diagnóstico de asma leve/moderada, de acordo com a classificação de GINA 2002/2003, foram divididos em dois grupos, sendo 31 do Grupo I, e 43 do Grupo II inicialmente. Foram realizadas consultas médicas e exames que incluíram espirometria, citologia de escarro induzido, NO expirado, preenchimento de escala de sintoma, questionários de qualidade de vida de asma e de SF 36, e realização de peak-flow, dependendo da Fase do protocolo. A Fase I constituiu-se dos exames pré-intervenção. Na Fase II, foram realizadas 10 sessões de Acupuntura Real no Grupo I e 10 sessões de Acupuntura Sham no Grupo II, na Fase III, houve 4 semana de washout, na Fase IV, houve a troca de técnicas de acupuntura, sendo uma sessão por semana e, na Fase V, realização dos exames. Resultados: Não há diferença nos critérios de avaliação no pré-tratamento entre dois grupos, com exceção de maior celularidade inflamatória no Grupo II. No entanto, houve uma redução significativa de eosinófilos (p = 0,035) e neutrófilos (p = 0,047), e aumento de macrófagos (p = 0,001), melhora da medida de volume do peak-flow (p = 0,01) na fase IV do Grupo II. No Grupo I, na avaliação de escala de sintomas diária, havia menor uso de medicação de resgate (p = 0,043) na Fase II, e, depois de receber a Acupuntura Sham na Fase IV, havia menos tosse (p = 0,007), menos chiado (p = 0,037), menos dispneia (p < 0,001) e menor uso de medicação de resgate (p < 0,001). No Grupo II, após receber o tratamento com a Acupuntura Sham na Fase II, houve diminuição de tosse (p = 0,037), de chiado (p = 0,013) e de dispneia (p = 0,014), e, na Fase IV, havia menos tosse (p = 0,040), sibilos (p = 0,012), dispneia (p < 0,001) e menos despertares noturnos (p = 0,009). Nos questionários de qualidade de vida de asma e de SF 36, foram encontrados alguns aspectos de melhora significantes na Acupuntura Sham dos dois grupos em relação à Fase I, mas os resultados da Acupuntura Real tiveram maiores índices de melhora em relação aos resultados da Acupuntura Sham nos dois grupos. Mas não há diferença significativa entre os dois na qualidade de vida de SF 36. Entretanto, não houve alteração de avaliação de espirometria e de óxido nítrico expirado. Conclusão: Este estudo demonstrou que o uso de Acupuntura Real num grupo de pacientes com a celularidade mais inflamatória teve melhor resultados de sintomas diários, tais como dispneia e despertar noturno, de medida de volume de peak-flow matutina, e de avaliação de qualidade de vida em asma e SF36, além da diminuição quantitativa de neutrófilos e de eosinófilos, com aumento de macrófagos, que justificam os efeitos anti-inflamatórios e imunitários. A acupuntura é uma terapia segura, não havendo nenhum efeito colateral observado neste projeto que possa interferir com a vida cotidiana e pode ser de grande auxílio no alívio de sintomas, com melhora de qualidade de vida e, possivelmente, pode ter uma ação na modulação do processo inflamatório de vias aéreas / Introduction: This survey has been conducted in order to evaluate the effects of acupuncture in patients with persistent mild and moderate asthma (according to GINA criteria 2003), using beta agonist and/or inhaled glucocorticoid. Methods and patients: This is a prospective, double blinded, randomized and cross-over study with two branches: 74 patients diagnosed with mild and moderate asthma were divided into two groups: Group I with 31, initiating with real acupuncture and Group II, starting with sham acupuncture. Medical interview and laboratory tests including spirometry, induced sputum citology, exhaled NO measurement, quality of life questionnaire (SF-36 and QQL), besides, daily symptom scores and measurement of peak-flow were performed, in the beginning of the study, and in the end of each phase of treatment. Phase I: laboratory tests and other qualitative measurements. There were 10 real acupuncture weekly sessions to Group I and 10 sham acupuncture sessions to Group II in Phase II. On the other hand, in the Phase IV, there was an exchange between Group I and Group II, which was receiving real acupuncture started to receive sham, and vice-versa, the number of sessions remained the same (10 weekly sessions). Phase III, during the interval between Phase II and Phase IV, there was an interval of 4 weeks of washout. Phase V: laboratory tests and other qualitative measurements. Results: There was no difference beween both the groups in all criteria of evaluation pré treatment, with only na exception: in the Group II there was large inflammatory cell counts. However, there was a significant reduction in eosinophils (p = 0.035) and neutrophils (p = 0.047), and increase of macrophages (p = 0.001), improved peak-flow measurement in the morning (p = 0.01) in Group II (started with sham) in Phase IV. In Daily Symptons Score, there was a significant reduction in use of rescue medication (p = 0.043) in Group I (real acupuncture) in Phase II and after received sham acupuncture (Phase IV), there were less cough (p = 0.007), less wheezing (p = 0.037), less dyspnea (p < 0.001) e less use of rescue medication (p < 0.001). In Group II, after received sham (Phase II), there were less cough (p = 0.037), less wheezing (p = 0.013) and less dyspnea (p = 0.014). In Phase IV, less cough (p = 0.040), wheezing (p = 0.012), dyspnea (p < 0.001) and less nocturnal awakening (p = 0.009). In the questionnaires of quality of life SF-36 and QQL, several domains were found to be improved after received sham acupuncture in both groups, comparing phase II against phase I, but the results found after received real acupuncture were better than sham in both groups. Although there was no statistic difference between both groups. However, there was no difference in exhaled NO and spirometry measurement. Conclusion: This survey demonstrated that the use of real acupuncture in a group of patients with large inflammatory cells counts could have contributed to reduce symptoms, improve quality of life, improved peak-flow measurement in the morning and reduced inflammatory cells count in induced sputum, therefore, acupuncture is a safe healing techniques, presented no adverse effects observed in this study, and could of great help in treatment of patients with mild and moderate asthma

Introdução: Este estudo foi realizado com o intuito de avaliar efeitos da acupuntura sobre os pacientes com asma leve e moderada persistentes com o uso de beta-2 agonista ou corticoide inalatório. Métodos e casuística: Trata-se de um estudo prospectivo, duplo-cego, randomizado e cruzado com dois braços. Os 74 pacientes com diagnóstico de asma leve/moderada, de acordo com a classificação de GINA 2002/2003, foram divididos em dois grupos, sendo 31 do Grupo I, e 43 do Grupo II inicialmente. Foram realizadas consultas médicas e exames que incluíram espirometria, citologia de escarro induzido, NO expirado, preenchimento de escala de sintoma, questionários de qualidade de vida de asma e de SF 36, e realização de peak-flow, dependendo da Fase do protocolo. A Fase I constituiu-se dos exames pré-intervenção. Na Fase II, foram realizadas 10 sessões de Acupuntura Real no Grupo I e 10 sessões de Acupuntura Sham no Grupo II, na Fase III, houve 4 semana de washout, na Fase IV, houve a troca de técnicas de acupuntura, sendo uma sessão por semana e, na Fase V, realização dos exames. Resultados: Não há diferença nos critérios de avaliação no pré-tratamento entre dois grupos, com exceção de maior celularidade inflamatória no Grupo II. No entanto, houve uma redução significativa de eosinófilos (p = 0,035) e neutrófilos (p = 0,047), e aumento de macrófagos (p = 0,001), melhora da medida de volume do peak-flow (p = 0,01) na fase IV do Grupo II. No Grupo I, na avaliação de escala de sintomas diária, havia menor uso de medicação de resgate (p = 0,043) na Fase II, e, depois de receber a Acupuntura Sham na Fase IV, havia menos tosse (p = 0,007), menos chiado (p = 0,037), menos dispneia (p < 0,001) e menor uso de medicação de resgate (p < 0,001). No Grupo II, após receber o tratamento com a Acupuntura Sham na Fase II, houve diminuição de tosse (p = 0,037), de chiado (p = 0,013) e de dispneia (p = 0,014), e, na Fase IV, havia menos tosse (p = 0,040), sibilos (p = 0,012), dispneia (p < 0,001) e menos despertares noturnos (p = 0,009). Nos questionários de qualidade de vida de asma e de SF 36, foram encontrados alguns aspectos de melhora significantes na Acupuntura Sham dos dois grupos em relação à Fase I, mas os resultados da Acupuntura Real tiveram maiores índices de melhora em relação aos resultados da Acupuntura Sham nos dois grupos. Mas não há diferença significativa entre os dois na qualidade de vida de SF 36. Entretanto, não houve alteração de avaliação de espirometria e de óxido nítrico expirado. Conclusão: Este estudo demonstrou que o uso de Acupuntura Real num grupo de pacientes com a celularidade mais inflamatória teve melhor resultados de sintomas diários, tais como dispneia e despertar noturno, de medida de volume de peak-flow matutina, e de avaliação de qualidade de vida em asma e SF36, além da diminuição quantitativa de neutrófilos e de eosinófilos, com aumento de macrófagos, que justificam os efeitos anti-inflamatórios e imunitários. A acupuntura é uma terapia segura, não havendo nenhum efeito colateral observado neste projeto que possa interferir com a vida cotidiana e pode ser de grande auxílio no alívio de sintomas, com melhora de qualidade de vida e, possivelmente, pode ter uma ação na modulação do processo inflamatório de vias aéreas / Introduction: This survey has been conducted in order to evaluate the effects of acupuncture in patients with persistent mild and moderate asthma (according to GINA criteria 2003), using beta agonist and/or inhaled glucocorticoid. Methods and patients: This is a prospective, double blinded, randomized and cross-over study with two branches: 74 patients diagnosed with mild and moderate asthma were divided into two groups: Group I with 31, initiating with real acupuncture and Group II, starting with sham acupuncture. Medical interview and laboratory tests including spirometry, induced sputum citology, exhaled NO measurement, quality of life questionnaire (SF-36 and QQL), besides, daily symptom scores and measurement of peak-flow were performed, in the beginning of the study, and in the end of each phase of treatment. Phase I: laboratory tests and other qualitative measurements. There were 10 real acupuncture weekly sessions to Group I and 10 sham acupuncture sessions to Group II in Phase II. On the other hand, in the Phase IV, there was an exchange between Group I and Group II, which was receiving real acupuncture started to receive sham, and vice-versa, the number of sessions remained the same (10 weekly sessions). Phase III, during the interval between Phase II and Phase IV, there was an interval of 4 weeks of washout. Phase V: laboratory tests and other qualitative measurements. Results: There was no difference beween both the groups in all criteria of evaluation pré treatment, with only na exception: in the Group II there was large inflammatory cell counts. However, there was a significant reduction in eosinophils (p = 0.035) and neutrophils (p = 0.047), and increase of macrophages (p = 0.001), improved peak-flow measurement in the morning (p = 0.01) in Group II (started with sham) in Phase IV. In Daily Symptons Score, there was a significant reduction in use of rescue medication (p = 0.043) in Group I (real acupuncture) in Phase II and after received sham acupuncture (Phase IV), there were less cough (p = 0.007), less wheezing (p = 0.037), less dyspnea (p < 0.001) e less use of rescue medication (p < 0.001). In Group II, after received sham (Phase II), there were less cough (p = 0.037), less wheezing (p = 0.013) and less dyspnea (p = 0.014). In Phase IV, less cough (p = 0.040), wheezing (p = 0.012), dyspnea (p < 0.001) and less nocturnal awakening (p = 0.009). In the questionnaires of quality of life SF-36 and QQL, several domains were found to be improved after received sham acupuncture in both groups, comparing phase II against phase I, but the results found after received real acupuncture were better than sham in both groups. Although there was no statistic difference between both groups. However, there was no difference in exhaled NO and spirometry measurement. Conclusion: This survey demonstrated that the use of real acupuncture in a group of patients with large inflammatory cells counts could have contributed to reduce symptoms, improve quality of life, improved peak-flow measurement in the morning and reduced inflammatory cells count in induced sputum, therefore, acupuncture is a safe healing techniques, presented no adverse effects observed in this study, and could of great help in treatment of patients with mild and moderate asthma