Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2016. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-01-25T12:07:36Z No. of bitstreams: 1 2016_AlineMarcelinoArouca.pdf: 8140076 bytes, checksum: 8461a8923e34db6f1803418d25d0380b (MD5) / Approved for entry into archive by Ruthléa Nascimento(ruthleanascimento@bce.unb.br) on 2017-03-03T17:44:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_AlineMarcelinoArouca.pdf: 8140076 bytes, checksum: 8461a8923e34db6f1803418d25d0380b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-03T17:44:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_AlineMarcelinoArouca.pdf: 8140076 bytes, checksum: 8461a8923e34db6f1803418d25d0380b (MD5) / Com o desenvolvimento da munição não-tóxica (NTA), a identificação do de resíduos de tiro (GSR) por Microscopia Eletrônica de Varredura acoplada à Espectroscopia de Raios X por Dispersão de Energia (MEV/EDS) foi prejudicada, sendo que adição de um marcador luminescente à munição tornou-se uma alternativa para identificar resíduos de tiro provenientes de munições NTA. Apesar dos marcadores apresentarem excelentes resultados na identificação de resíduos provenientes da munição NTA, pouco se sabe acerca da sua toxicidade, sendo desejável que esses sejam atóxicos. Dois fatores são avaliados nesse trabalho: os subprodutos formados pelo disparo de uma arma de fogo municiada com NTA marcada e o tamanho das partículas dos marcadores formadas após o disparo. Foi possível determinar uma variedade de compostos orgânicos que apresentam uma toxicidade relativa, contudo, muitos deles estão ligados à degradação da pólvora utilizada. Com relação ao tamanho das partículas, foi possível determinar que tanto a munição NTA, quanto a munição NTA marcada apresentam uma maior quantidade de partículas menores que 2,5 micrômetros, indicando uma certa toxicidade. Contudo, como a adição do marcador não alterou, de forma significativa, os padrões de dispersão das partículas, quando comparados com os padrões de dispersão da NTA, pode-se inferir que a toxicidade da munição marcada não foi alterada. A segunda parte desse trabalho consiste na aplicação dos marcadores desenvolvidos pelo nosso grupo em uma série de experimentos para simular rotinas forenses, para avaliarmos o comportamento dos resíduos de tiro luminescentes (LGSR). Foi testada a viabilidade do uso do padrão de dispersão do LGSR para estimar a distância de disparo e identificar a posição do atirador, com a realização de testes cegos. Em todos os casos testados, a posição do atirador e a distância em que o tiro foi deflagrado foi determinada com precisão, mesmo para tiros distantes. Além disso, foi avaliada a influência do tipo de arma (diferentes pistolas) no padrão de dispersão LGSR, no qual foi possível verificar que os diferentes tipos de mecanismos não alteram a formação do resíduo luminescente. Finalmente, também foi avaliado se as partículas luminescentes podem ser transferidas por contato direto (aperto de mão). Determinou-se que elas podem ser submetidas à transferência secundária e terciária, influenciando o modo que esta evidência deve ser interpretada na análise de uma cena de crime. / With the introduction of non-toxic ammunition (NTA), gunshot residue (GSR) identification by Scanning Electron Microscopy/Energy Dispersive X ray analysis (SEM/EDS) was impaired, in which, the use of a luminescent marker has become an alternative to identify shooting residue. Despite the markers present excellent results in GSR from NTA ammunition, little is known about its toxicity, requiring that these are non-toxic. Two factors are evaluated in this work: the by-products formed by firing a firearm loaded with marked NTA ammunition and the particle size formed after the shot. It was possible to determine a variety of organic compounds which have a relative toxicity, however, many of them are connected to the degradation of the gunpowder used. The particle size, it was determined that both NTA ammunition marked as NTA ammunition have a greater amount of particles smaller than 5 microns, indicating a degree of toxicity. However, since the addition of the marker did not alter significantly the dispersion patterns compared to NTA, the toxicity of ammunition marked was considered the same as the NTA. The second part of this work consists of applying the markers developed by our group in a series of experiments to simulate forensic routines to evaluate the behavior of luminescent GSR (LGSR) To determinate the performance of the markers developed by our group, a series of experiments were conduct to mimic forensic routines and determinate the luminescent gunshot residue (LGSR) behavior. It was evaluated the viability of the use of LGSR dispersion pattern to estimate the shooting distance and identify the position of the shooter, as the realization of blind tests. In all cases, the position of the shooter and the distance at which the shot was triggered was accurately determined, even for distant shots. Furthermore, the influence of the type of weapon (different pistols) in LGSR dispersion pattern was evaluated, in which it was possible to verify that different types of mechanisms do not alter the formation of the luminescent residue. Finally, it was also evaluated if the luminescent particle can be transferred by direct contact (handshake). It was determined that the luminescent particle can undergo secondary and tertiary transfer, influencing the way which this evidence should be interpreted in the analysis of a crime scene.

Orientador : Prof. Dr. Ciro Alberto de Oliveira Ribeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia e Conservação. Defesa: Curitiba, 24/03/2015 / Inclui referências / Resumo: O rio Iguaçu é o maior do estado do Paraná e o segundo rio urbano mais poluído do Brasil. A avaliação de ecossistemas aquáticos tem utilizado com frequência peixes como bioindicadores de contaminação. No presente estudo, foi utilizada uma espécie de peixe onívora e endêmica da bacia do rio Iguaçu, Astyanax bifasciatus. Biomarcadores são indicadores baseados em respostas mensuráveis, como alterações bioquímicas, celulares, moleculares ou mudanças fisiológicas nas células, fluidos corpóreos, tecidos ou órgãos de um organismo, sendo indicativos da exposição a xenobióticos. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a qualidade da água dos reservatórios presentes ao longo do baixo rio Iguaçu: Foz do Areia, Segredo, Salto Santiago, Salto Osório e Salto Caxias, através do uso de biomarcadores de contaminação ambiental em A. bifasciatus. Os espécimes foram coletados nos períodos de verão e inverno de 2013. Após serem anestesiados, foram obtidos dados biométricos dos peixes para a obtenção do Índice Hepatossomático (IHS) e do Fator de Condição (K). Para as análises bioquímicas, amostras de fígado foram coletadas e congeladas em nitrogênio líquido a fim de avaliar a peroxidação de lipídeos e a atividade da glutationa S-transferase e da catalase. Além disso, foram coletados músculo e cérebro, destinados para análises neurotóxicas, com base na atividade da acetilcolinesterase. Para as análises histopatológicas em fígado, as amostras foram preservadas em ALFAC e analisadas através de microscopia de luz, enquanto as brânquias foram fixadas em glutaraldeído (3%) tamponado em cacodilato de sódio (0,1 M, pH 7,2-7,4) e analisadas por microscopia eletrônica de varredura. A fim de avaliar a genotoxicidade, foi coletado sangue para o Teste de Micronúcleo Písceo e para o Ensaio Cometa. Além disso, análises químicas foram realizadas em água, sedimento e tecido (músculo) para quantificação de metais, e na bile para determinação de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos. Os exemplares da espécie A. bifasciatus provenientes dos cinco reservatórios estudados apresentaram alterações medidas através dos biomarcadores que podem ser relacionadas com a baixa qualidade da água, demonstrando que o rio Iguaçu é impactado por xenobióticos, com variações em diferentes épocas do ano. Os resultados deste estudo mostram a importância da ecotoxicologia na avaliação ambiental, e que a integração de diferentes tipos de biomarcadores permite uma visão mais precisa da real situação em que determinado ambiente aquático se encontra. Além disso, os resultados encontrados sugerem a existência de fontes adicionais de contaminação ao longo do baixo rio Iguaçu, e não atribuídas somente à região metropolitana de Curitiba. O rio Iguaçu, além de apresentar unidades de conservação ao longo de seu leito, possui diversas espécies endêmicas, sendo que a manutenção da sua integridade é de extrema importância a sua conservação e manejo. Palavras-chave: biomonitoramento, biomarcadores, Astyanax bifasciatus, rio Iguaçu. / Abstract: Iguaçu river is the largest one in the Paraná state and the second most polluted urban river in Brazil. The studies of aquatic toxicology has frequently used fish as bioindicators of contamination. In the current work was used the species Astyanax bifasciatus, an omnivorous endemic fish species from Iguaçu basin. Biomarkers are indicators based on measurable responses as molecular, biochemical and cellular changes, or even physiological variations in body fluids, tissues or organs, indicating chemical exposure. The aim of the present study was to evaluate the water quality of the reservoirs present along the lower Iguaçu river: Foz do Areia, Segredo, Salto Santiago, Salto Osório and Salto Caxias, through the use of environmental contamination biomarkers in Astyanax bifasciatus. The specimens were collected at the summer and winter of 2013. After anesthesia, the biometric data were measured for obtaining hepatosomatic index (HSI) and the condition factor (K). For the biochemical analyzes, a liver portion was sampled and frozen at liquid nitrogen to assess further lipid peroxidation levels and the glutathione S-transferase and catalase activity. Moreover, muscle and brain were preserved as described above for neurotoxic analysis (acetylcholinesterase activity). To histopathological analyzes in liver, samples were preserved in ALFAC and analyzed by conventional light microscopy, while gills were fixed in glutaraldehyde solution (3%) buffered by cacodilic acid (0.1M, pH 7.2-7.4) and analyzed by scanning electron microscopy JEOL. To assess the genotoxicity, blood was sampled for Piscine Micronucleus test and Comet assay. The chemical analysis were obtained from muscle, water and sediment to metals and in bile to polycyclic aromatic hydrocarbons concentrations. The specimens of A. bifasciatus sampled at the five reservoirs showed some alterations that permit to classify the poor water quality. These results demonstrate that Iguaçu river is impacted by xenobiotics, with variations at different seasons. In addition, the results clearly demonstrated how useful the biomarkers are in the environmental studies, and the integration among them allows a more accurately view of the real situation in the studied area. Furthermore, the results suggest the existence of additional sources of contamination along the river, not only attributed to the Curitiba metropolitan region, as described by governmental reporters. Iguaçu river, besides presenting protected areas along the basin, has several endemic fish species, and the maintenance of its integrity is extremely important to conservation and risk of exposure to fish population and even to human population. Keywords: biomonitoring, biomarkers, Astyanax bifasciatus, Iguaçu river.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2015-05-15T18:02:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Rodrigo_Oliveira_2012_CBiol.pdf: 2594061 bytes, checksum: 6a3318fa749532683f2f56edde3b47ec (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-15T18:02:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Rodrigo_Oliveira_2012_CBiol.pdf: 2594061 bytes, checksum: 6a3318fa749532683f2f56edde3b47ec (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / A família Bromeliaceae é uma das mais diversificadas no território brasileiro e conta com cerca de 1.200 espécies das quais 1.024 são endêmicas. Esses vegetais apresentam muitas associações ecológicas não observáveis em outros grupos de plantas, como a ocorrência de tanques na base de suas rosetas e a polinização primariamente por beija-flores ou morcegos. Encholirium spectabile Mart. Ex Schult. f. é uma bromélia que apresenta uma correlação direta com afloramentos rochosos do Nordeste Brasileiro. Esta espécie possui uma grande plasticidade morfológica regional, sendo tratada como um complexo específico, fato que resultou na descrição incorreta de outros binômios relacionados, como E. pernambucanum L.B.Sm. & Read e E. hoehneanum L.B. Sm. Plantas estritamente rupícolas são tratadas como modelos para estudos de irradiação adaptativa, bem como para correlações entre a vegetação e mudanças climáticas ocorrentes no passado. Vários marcadores moleculares têm sido aplicados nesse sentido, entre eles marcadores do tipo Fingerprinting de DNA, incluindo marcadores DAF (DNA Amplification Fingerprinting, Impressão Genômica do DNA Amplificado) e ISSR (Inter Simple sequence Repeat; Repetição Entre Sequências Simples). Indivíduos de nove populações de E. spectabile foram coletados, sendo distribuídos de norte a sul do Nordeste brasileiro, com populações nos estados da Paraíba, Pernambuco, Bahia e Sergipe. Nesse estudo 99 loci polimórficos foram gerados. A amostragem apresentou heterozigosidade total de 0,3417, semelhante à reportada para outras espécies de Encholirium como E. subsecundum Mez. Dois grupos genéticos foram encontrados a partir de uma análise Bayesiana de agrupamentos (k=2) distribuídos regionalmente, resultado também evidenciado pelo agrupamento gerado pelo método de Neighbor-joining. A análise da estrutura genética mostrou que existem diferenças significativas entre as populações (Fst = 0,3781), porém pouca correlação entre distância genética e distância geográfica foi observada (r = 0,3578, p >= 0,033), não sendo assim considerada. O compartilhamento de diversidade verificado pelo teste de AMOVA mostrou que a maior parte da diversidade está presente dentro das populações, o que é esperado para vegetais com reprodução clonal. A irradiação da espécie deve ter ocorrido do sul para norte, com dispersão em um modelo de ilhas. Este estudo concluiu que apesar da grande variação morfológica existente nesse complexo específico, E. spectabile compreende uma única espécie, onde cada morfotipo deve ser considerado como uma unidade para conservação in situ.

Orientador : Fatima Aparecida Bottcher Luiz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T17:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Heinrich_JulianaKarinaRuiz_M.pdf: 18386840 bytes, checksum: c19d3d316185e0ce073e85707046d04e (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Marcadores para a caracterização biológicade tumores de ovário borderfíne são pouco explorados. Assim sendol foram investigados o marcador tumoral CA125 e o oncogene HER-2jneuatravés de ensaios imunohistoquímicos(lHQ) e de hibridização ín sítu por fluorescência (FISH). Foram incluídos 45 tumores serosos e mucinosos de estágios clínicos 11II e TIl.A expressão de CA125foi positiva em 49% dos casos (22/45) e pôde ser associada ao tipo seroso. Embora superexpressão da proteína Her-2jneu não tenha sido encontrada através de lHQI resultados alterados de F1SHforam encontrados em 16% dos casos (7/45). Os ganhos foram detectados em baixo número de cópias (máximo de 4/célula) e, assim, não foram considerados como amplificação. Não foi encontrada associação entre a expressão do marcador CA125e os resultados de FISH,bem como entre este último e o tipo histológico. Por outro ladol resultados anormais de FISH representados por extensa aneussomia do cromossomo 17 puderam ser associados ao estágio clínico avançado. Mesmo na ausência de confirmação estatístical os dois casos que apresentaram recidiva eram do tipo serosol estágio clínico TI11positivos para CA125e apresentaram anomalias por FISH. Os dados apresentados sugerem que HER-2/neupOde não estar envolvidona iniciação desses tumores masl possivelmentel na progressão destes para fenótipos mais agressivos / Abstract: Since Borderline Ovarian Tumors (BOTs) biological markers and behavior are not well understood, we studied CA125and HER2-neugene status by either immunohistochemical and fluorescence in situ hybridization of 45 mucinous and serous borderline specimensof clinical stage l, TI and TIl. CA 125 expression was found in 49% of the samples(22/45) and associatedwith serous histological type. Although HER2 protein overexpression was not found with the HercepTest immunohistochemical assay, abnormal FISHresults were detected in 16% (7/45) involving specific chromosome 17 gain, specific HER2gain or both chromosome and gene gain. The gains for either gene or chromosome were detected at low levels (maximum 4 copies/cell)and in a low percentageof cellsper specimenor analyzed area which was consideredgene copy number gain and not gene amplification. Association was not found between CA 125 expression and HER2 FISH status. No significant relationship was found between FlSH status and histological type. Abnormal FISH results were associated to advanced clinical stage. Even in the absence of statistical support, the two patients with tumor recurrence had a serous histological type, clinical stage lTI, CA125 positive tumor with both gene and chromosome gains. The data suggest that the HER2-neugene may not be involved on tumor initiation but on its progression / Mestrado / Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Edi Lucia Sartorato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T16:44:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Braganca_WelbeOliveira_M.pdf: 5963364 bytes, checksum: bfc4d02101133b82c4e26b87ba00ecd6 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Mendel, pelo pioneirismo em oito anos de pesquisa com cruzamentos de ervilhas, é considerado o pai da Genética, porém, quando foi eleito abade, em 1868, encerrou precocemente sua carreira. Seus excepcionais manuscritos permaneceram esquecidos por mais de 30 anos. Quando William Sutton e Theodor Boveri estabeleceram a localização dos genes nos cromossomos, as conclusões póstumas de Mendel receberam a devida relevância científica (HAUSMANN, 2000), derrubando conceitos arcaicos, os quais preconizavam que a transmissão hereditária se dava pela mistura de humores, mais precisamente pelo sangue (MIYAJIMA, 2001). A análise do DNA revolucionou o campo da Biologia da identificação. A necessidade de pequenas quantidades de tecido, a estabilidade do DNA e o alto grau de precisão das análises químicas contribuíram para a evolução da tipagem do DNA. O uso das análises do DNA está alterando rapidamente a maneira como a tipagem genética é conduzida em casos de paternidade, estupro e homicídios, na avaliação de desastres em massa, no estudo de caça, reprodução e população de animais, nas análises médicas e na disputa de patentes (Budowle, 2000). Para serem efetivas, as técnicas desenvolvidas por laboratórios especializados devem ser padronizadas para serem prontamente usadas. A quantidade e a qualidade limitada das amostras biológicas forenses exigem que os métodos de tipagem do DNA sejam sensíveis. Os protocolos tendem a ser poupados de passos desnecessários e otimizados. O tempo e os custos devem ser reduzidos, e a confiabilidade e sensibilidade maximizadas (Budowle, 2000). Este trabalho teve como objetivo desenvolver, otimizar procedimentos e correlacionar técnicas encontradas na literatura que puderam ser adaptadas e se mostraram úteis para tipar amostras referenciais, estando em boas condições para os testes de paternidade, bem como amostras achadas nas cenas dos crimes que foram expostas ao meio ambiente. Devido à demanda por técnicas de análise confiáveis, as práticas e os procedimentos usados nos estudos forenses podem guiar os cientistas em outras disciplinas no desenvolvimento e emprego de metodologias válidas e confiáveis. Buscamos também nesse trabalho, avaliar e comparar os diferentes métodos para verificação de paternidade e sua validade para cada tipo de material biológico estudado, propondo uma metodologia padrão para testes de paternidade em cada tipo específico de tecido, avaliando os diferentes métodos de extração de DNA propostos na literatura, procurando adaptá-los e otimizá-los, além de desenvolver novos métodos, fornecendo importantes ferramentas para a crescente área científica da biologia forense / Abstract: Mendel, for his pioneer work in eight years of research with crossings of peas, is considered the father of Genetic, however, when elected abbot, in 1868, he contained his early career. His exceptional manuscripts were forgotten for more than 30 years. When William Sutton and Theodor Boveri established the location of the genes in the chromosomes, the posthumous conclusions of Mendel received the due scientific relevance, overthrowing archaic concepts, which extolled that the hereditary transmission occurred for the mixture of humors, more precisely for the blood. The analysis of DNA revolutionized the field of Biology of identification. The need of small amounts of biological samples, the stability of DNA and the high degree of precision of the chemical analyses contributed to the evolution of the typing of DNA. The use of the analyses of DNA is altering the way quickly as the genetic typing is driven in cases of paternity, rape and homicides, in the evaluation of disasters in mass, in the hunting studies, reproduction and population of animals, in the medical analyses and in the dispute of patents. To be effective, the techniques developed by specialized laboratories should be standardized to be used. The limited amount and quality of the forensic biological samples demand that the methods of typing of DNA to be sensitive. The protocols tend to be saved of necessary steps and optimized. The time and the costs should be reduced, and the reliability and sensibility maximized. This work had as objective develop, optimize procedures and to correlate techniques found in the literature that could be adapted and were shown useful for typing referential samples, being in good conditions for the tests of paternity, as well as samples found in the scenes of the crimes that were exposed to the environment. Due to the demand for reliable analysis techniques, the practices and the procedures used in the forensic studies can guide the scientists in other disciplines in the development and use of valid and reliable methodologies. We also looked for in this work, to evaluate and to compare the different methods for verification of paternity and its validity for each type of studied biological material, proposing a methodology pattern for tests of paternity in each specific type of fabric, evaluating the different methods of extraction of DNA proposed in the literature, trying to adapt them and to optimize them, besides developing new methods, supplying important tools for to the growing scientific area of the forensic biology / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Ricardo Ribeiro Rodrigues, Luis Eduardo Aranha Camargo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:30:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Penha_AlessandradosSantos_D.pdf: 2371831 bytes, checksum: a332d590f5baf18468a2a50c8618c74f (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6311_1.pdf: 2366152 bytes, checksum: f5adb8c408d8ad59c55286f77bfa694a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / A Paracoccidioidomicose é uma importante causa de morbidade, levando à morte em alguns casos. Essa doença é provocada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis e seu diagnóstico clínico é inespecífico. Recentemente, no nosso laboratório foi isolado e sequenciado um fragmento de DNA de 850pb obtido pela técnica de RAPD, presente em cepas de P. brasiliensis com morfologia típica, e virulentas quando inoculadas em camundongos, que não estava presente em cepas de morfologias atípicas não virulentas. O objetivo desse trabalho foi caracterizar este fragmento através da subclonagem em vetor de expressão pGEX e a produção da proteína recombinante cognata em hospedeiro heterólogo. A proteína expressa reagiu com soro de camundongo infectado com P.brasiliensis e a análise do BLASTx revelou homologia com um domínio de uma flavina-monoxigenase (Flavin-binding monooxygenase-like ou FMO) hipotética do fungo Neurospora crassa. A seqüência completa do DNA de ceja1 ainda precisa ser obtida e sequenciada para que seja, de fato, atribuída a esta seqüência a atividade de uma monooxigenase. Contudo, os resultados sugerem que as cepas de P. brasiliensis estocadas por longos períodos (2-3 décadas) sob uma camada de óleo na coleção de culturas de fungos do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro tenham uma redução, se não abolição, na atividade das monooxigenases

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:07:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6408_1.pdf: 500352 bytes, checksum: 85458507aeff558a6d3cea6b1fe0801a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Desde a descoberta de que a proteína CCR5 serve como co-receptor de superfície celular para o vírus HIV-1 em células CD4, o gene que codifica essa proteína tem sido tema central de estudos genéticos na patogênese da AIDS. Uma deleção de 32pb neste gene fornece uma proteção contra a infecção pelo HIV-1 em homozigotos para este alelo na transmissão sexual. Este trabalho tem como finalidade detectar e comparar as freqüências desta deleção nos indivíduos normais e infectados pelo vírus em Pernambuco. Para tanto, foram coletados sangue venoso de 251 indivíduos não aparentados de Pernambuco e de 260 indivíduos infectados pelo HIV-1 do Hospital Correia Picanço/PE. O DNA foi extraído por mini saltingout e digestão com proteinase K. A PCR foi realizada utilizando programa de amplificação e primers específicos. Os fragmentos amplificados foram submetidos a PAGE desnaturante a 7%, e coloração com AgNO3. A freqüência do alelo mutante ccr5Δ32 foi de 0,042 na amostra controle e na amostra de pacientes infectados. A amostra controle está em desequilíbrio de Hardy-Weinberg, com excesso de homozigotos para a deleção, sugerindo a ocorrência de seleção a favor dos homozigotos. Fora a ação de seleção natural, apenas o fluxo gênico explicaria este desequilíbrio. No entanto não há registros de migração recente de europeus para o Nordeste brasileiro. Não está descartada a possibilidade do desequilíbrio observado ter sido causado por outros fatores que não o HIV. Dos indivíduos infectados, 22 eram heterozigotos e nenhum era homozigoto para deleção

Con la finalidad de contribuir a los programas de mejoramiento genético para camélidos sudamericanos, se buscó determinar la variabilidad genética y el nivel de endogamia de dos rebaños de reproducción de alpacas (Vicugna pacos) huacayas blancas de reciente formación, pertenecientes al Centro Piloto de Mejoramiento Genético Munay Paqocha y el Fundo Itita, de la Sociedad Peruana de Criadores de Alpacas y Llamas (SPAR)-Puno; así como realizar su genotipificación e identificación de marcadores STR útiles para la determinación de pruebas de paternidad y parentesco. Se evaluaron 10 marcadores STR a partir de sangre y folículos pilosos de 183 individuos colectados al azar. El total de la población presentó un alto nivel de variabilidad alélica, y alelos exclusivos entre poblaciones con frecuencias menores al 1,5%, en los loci LCA37, LCA90, LCA5, VOLP92, YWLL36, YWLL44 y YWLL08. En este estudio se propone el uso de tres marcadores adicionales, VOLP92, LCA94, LCA90, para los análisis de variabilidad genética en alpacas. Los valores de FIS (0,016), y FST (0,003) reflejaron bajo niveles de endogamia. El rebaño del Fundo Itita presentó una mayor Ho (0,858) respecto a la He (0,848), mientras que por el contrario el rebaño del Centro Munay Paqocha presentó un menor valor de la Ho (0,815) respecto a la He (0,848), con una tendencia al déficit de heterocigotos. Los 10 marcadores presentaron una probabilidad de exclusión de parentesco adecuada, con un valor superior al 99,9%, cuando se conoce el genotipo de ambos padres, y un poder de discriminación mayor a 0,90. Además, se alcanzó un valor PEC de 0,999 considerando solo los marcadores YWLL08, YWLL44, LCA37, YWLL36, LCA8; siendo YWLL08 el de mayor valor (0,885). La prueba de filiación permitió detectar mayores errores de asignación de maternidad (13,04%) y paternidad (30,4%) en el rebaño del Fundo Itita, respecto al Munay Paqocha con errores de designación de maternidad de 7,69% y de paternidad de 17,95%, concluyendo que este centro posee un mejor registro de empadres. Palabras clave: STR, camélidos sudamericanos, heterocigosidad, coeficiente de endogamia, probabilidad de exclusión

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / La preeclampsia (PE) es una de las complicaciones más frecuentes del embarazo, siendo una de las principales causas de morbi-mortalidad materna y perinatal. A pesar de la importancia de este síndrome, el conocimiento que se tiene sobre su etiopatogenia es limitado. Sin embargo, existen diversas teorías que incluyen la participación de factores genéticos, nutricionales, vasculares y autoinmunes. Existe evidencia que indica que el estrés oxidativo de la placenta está involucrado en la fisiopatología de la PE y se le ha propuesto como promotor de disfunción de células endoteliales y de un desarrollo insuficiente de la placenta, por una disminución de la angiogénesis normal, ambos característicos en los casos de PE. El presente estudio incluyó 220 muestras sanguíneas obtenidas de 1051 pacientes con control perinatal completo, que acudieron a la Unidad de Medicina Fetal del Hospital Clínico de la Universidad de Chile con 11-14 semanas de gestación entre los meses de Agosto 2004 y Marzo 2006. Las pacientes resultantes después de aplicar los criterios de exclusión detallados más adelante, se separaron en 3 grupos: preeclámpticas (32), pacientes con restricciones de crecimiento fetal (45) y el grupo control (143). Las determinaciones incluyeron: concentración de marcadores de estrés oxidativo (ácido úrico y MDA), marcadores de disfunción endotelial (PAI-1, PAI-2, ICAM, VCAM) y marcadores de actividad angiogénica (sFlt1, PIGF) en plasma de mujeres embarazadas durante el primer tercio de la gestación. Para esto se utilizaron las técnicas de HPLC, espectrofotometría, ELISA y FRAP. El análisis estadístico se realizó mediante la prueba t de Student (p<0,05) y prueba de correlación de Pearson (p<0,05). Se incluyó un control obtenido de forma aleatoria por cada paciente con patología. Los resultados mostraron que el promedio para sFlt1 en el grupo de pacientes con PE (1846,05 ± 222,30 nM/ml) fue estadísticamente diferente del grupo control (1176,44 ± 131,61 nM/ml) (p = 0,016). Para las demás variables no se observaron diferencias significativas entre los grupos. Al aumentar los niveles séricos de sFlt1, los niveles séricos de FRAP disminuyen (r = -0,56; p = 0,002), lo que indica que existe una relación inversa entre estas 2 variables. Las demás variables no presentaron correlación estadísticamente válida en esta edad gestacional. De esto se deduce que existe asociación entre la concentración plasmática de esta variable y la presentación de la enfermedad. Se concluye que de las variables medidas precozmente, la única que se encuentra asociada a la presentación de la enfermedad en este estado de gestación precoz es sFlt1. Con esto se confirma la participación de esta molécula en la patogénesis de la PE, lo cual deja abierto el tema a nuevos estudios que se realicen en etapas tempranas de gestación y que comprendan tratamientos posibles de realizar en una etapa temprana con miras a la prevención de la enfermedad / Proyecto FONDECYT N°1050482