Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-01Bitstream added on 2014-06-13T19:02:15Z : No. of bitstreams: 1 almeida_lbc_dr_mar.pdf: 963171 bytes, checksum: 3ea72bbbb0f57b1a8aff7364e4a1db5f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A pesquisa investiga a formação de docentes do ensino médio visando o trabalho com a educação para a mídia, fundamental para o alcance da meta inscrita nos documentos norteadores da educação brasileira, visando o desenvolvimento da competência de localizar e usar seletivamente a informação, bem como do uso da comunicação social para a manifestação de ideias pelos cidadãos brasileiros, possibilitando o desenvolvimento individual, das comunidades e da democracia. O projeto, iniciado a partir do interesse de unidades escolares, contou com a participação de profissionais da rede pública paulista de educação, alocados em escolas do município de Bauru. Participaram tanto professores experientes quanto iniciantes, oriundos de diversas áreas do saber, nos anos de 2009 e 2010. A especificidade do projeto centrou-se na intenção das escolas de desenvolver atividades que articulassem os conteúdos curriculares aos conceitos de educação para a mídia, terreno pouco explorado por projetos na área. Adotou-se a metodologia da pesquisa-ação por permitir a construção conjunta de saberes e a participação dos docentes, de forma ativa, nas decisões sobre o próprio processo de formação. Um protótipo de currículo europeu, chancelado pela UNESCO, para a mídia-educação norteou a formação docente e o planejamento das atividades pedagógicas. As oficinas tiveram como resultado a elaboração de planos de aula nas áreas de linguagens, matemática, educação física, filosofia e educação artística, que aplicados em sala de aula demonstraram ser relevantes para o processo de aprendizagem. No processo de construção, análise e aplicação dos mesmos pelos docentes, foram observadas lacunas no referencial adotado que, considerando a realidade brasileira, não provê abordagem suficientemente... / This paper presents a continuing education project aimed to the training of teachers from public high schools to act as media educators, fundamental to achieving the goal enshrined in the documents guiding the Brazilian education, to develop the competence to find and use information selectively, as well as the use of media for the expression of ideas by Brazilian citizens, enabling the development of communities, individuals and democracy. It was started at the request of schools from the city of Bauru, São Paulo, and was developed in the years 2009 and 2010 with both experienced and beginners professionals, from different fields of knowledge. Project‟s specificity consisted in attending schools demand for activities that articulate the curricular contents to media education, hardly ever theorized and grounded in our country. By allowing the joint construction of knowledge and participation of teachers actively in decisions about their own training process, the methodology of participatory research was chosen. The benchmark used was a European prototype curriculum for media education, sanctioned by UNESCO that guided the planning of teacher training and educational activities. The workshops have resulted in the development of twelve lesson plans in the areas of languages, mathematics, physical education, philosophy and art education. Applied in the classroom, they proved to be relevant to students, enabling them to understand the contents. Nevertheless, during the process of building, analyzing and implementing the plans by the teachers, theoretical gaps in the prototype curriculum were observed concerning the formation of teachers for Brazilian reality, the document was not able to provide in-depth approach for teachers to: a) fully understand the cultural processes that underlie the students‟ and their own... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-16Bitstream added on 2014-06-13T19:21:21Z : No. of bitstreams: 1 cazedey_ecl_dr_arafcf.pdf: 1526451 bytes, checksum: f2ff5b99cedc0ed04b40c40e1fcec71b (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O orbifloxacino é uma fluorquinolona antimicrobiana de terceira geração aprovada para o uso veterinário em vários países. Este antimicrobiano possui excelente farmacocinética, com biodisponibilidade oral quase completa e é utilizado no tratamento de infecções causadas por bactérias Gram-negativas, incluindo Enterobacteriaceae e espécies Pseudomonas-resistentes e também por micro-organismos Gram-positivos e Mycoplasma sp. Muitos estudos têm demonstrado que o orbifloxacino é eficaz contra diversos patógenos apresentando baixa concentração inibitória mínima. A importância de se desenvolver e validar métodos analíticos para este fármaco é justificada por seu potencial terapêutico e grande emprego em terapias anti-microbianas, assim como pelo conhecimento de que a baixa qualidade dos produtos anti-infecciosos está relacionada ao desenvolvimento de cepas resistentes, como consequência da administração de doses subterapêuticas. Neste trabalho foram desenvolvidos ensaios para a análise qualitativa de orbifloxacino utilizando a espectrofotometria nas regiões do UV/VIS/IV, cromatografia líquida de alta eficiência, análise térmica, cromatografia em camada delgada e outros métodos gerais para caracterização da substância química de referência (SQR) e comprimidos de orbifloxacino. Técnicas analíticas, espectrofotométrica no UV, indicativa de estabilidade por cromatografia líquida de alta eficiência e microbiológicas – difusão em ágar e turbidimétrica foram utilizadas para o desenvolvimento e validação dos métodos para determinação quantitativa deste fármaco na forma farmacêutica... / Orbifloxacin, a new synthetic third-generation fluoroquinolone antimicrobial drug, was developed exclusively for use in veterinary medicine. This antimicrobial agent has an excellent pharmacokinetics with oral bioavailability almost complete and it is used in treatment of infections caused by Gram-negative bacteria, including Enterobacteriaceae and Pseudomonas-resistant species and also by Gram-positive microorganisms and Mycoplasma sp. Many studies have shown that orbifloxacin is effective against many pathogens and has low minimum inhibitory concentration. Analytical methods for quantitative determination of orbifloxacin are important due to its therapeutic potential and wide use in antimicrobial therapy. Moreover, it is known that the poor quality of antibiotic product is direct related to development of resistant strains, as consequence of sub therapeutic doses administration. Thus, it is important to develop efficient analytical methods for quality control commercialized products. In this work were developed methods for qualitative analysis of orbifloxacin using UV/VIS/IR spectrophotometry, high performance liquid chromatography, thermal analysis, thin-layer chromatography and other general methods for characterization of API and tablets of orbifloxacin. Analytical methods such as UV spectrophotometry, stability-indicating high performance liquid chromatography and microbiological – agar diffusion and turbidimetry were developed and validated for quantitation of this drug in tablets. All... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-01Bitstream added on 2014-06-13T20:42:47Z : No. of bitstreams: 1 saito_cln_dr_assis.pdf: 1235097 bytes, checksum: 9998bd8a8d2da9ec2ac95cf3d993360e (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Il est chaque fois plus évident le besoin d amplifier les études sur les genres médiatiques capables de développer des outils théoriques et pratiques qui puissent contribuer pour l apprentissage de la lecture visuelle (multiletramento) du professeur de Langue Portugaise. L avènement de nouvelles médias exige du professionnel de Lettres qu il soit apte à développer un travail avec le langage qui recouvre non seulement la materialité linguistique, mais aussi la visuelle. Toutefois, la dificulté que le professeur subit pour sauter de pratiques pédagogiques strictement tournées au langage verbal vers le langage non-verbal, constitue l un des problèmes qui imposent des mesures d urgence dans les politiques d éducation, dans l organisation des curricula et programmes, dans le renouvelement des cours de Lettres et dans la formation continue de professeurs en service. Ainsi, dans la tentative de contribuer pour liquider le manque des points de vues tournés au traitement du visuel et, sous le biais de la notion de genre discursi bakhtinienne fondées sur les apports théoriques et metodologiques de la sémiotique greimassienne, de la sémiotique du visuel et de la théorie de la Figurativité de D Ávila, ce travail de recherche a analysé l adaptation du filme «Homme-Araignée II», en bande dessinée. De cette analyse, l on a conclu que (1) quoiqu il paraisse que ce filme porte sur une nouvelle proposition d aventure de fiction scientífique, dans son essence, il suit les modèles classiques des bandes dessinées de super-héros; (2) les bandes dessinées constituent un système narratif composé de deux sémiotiques, l une visuelle, 1 autre verbale, qui agissent en interaction constante (syncrétiquement). / Está cada vez mais evidente a necessidade de ampliação dos estudos sobre gêneros midiáticos que sejam capazes de desenvolver instrumentais teóricos e práticos que contribuam para o letramento visual (multiletramento) do professor de Língua Portuguesa. O advento de novas mídias exige, do profissional em Letras, estar necessariamente apto a desenvolver um trabalho com a linguagem que envolva não só a materialidade lingüística, mas também a visual. Entretanto, a dificuldade que o professor tem para saltar de práticas pedagógicas estritamente direcionadas para a linguagem verbal em direção ao não-verbal constitui um dos problemas que impõem medidas urgentes nas políticas educacionais, na organização dos currículos e programas, na reformação dos cursos de Letras e na formação continuada de professores em serviço. Assim, na tentativa de contribuir para sanar a falta de enfoques direcionados ao tratamento do visual e, sob o viés da noção de gênero discursivo bakhtiniana fundamentada nos aportes teóricos e metodológicos da semiótica greimasiana, da semiótica do visual e da teoria da figuratividade, este trabalho de pesquisa analisou a adaptação do filme Homem-Aranha II em quadrinhos. Dessa análise, concluiu-se que: (1) apesar de parecer que o filme Homem-Aranha II trata de uma nova proposta de aventura de ficção científica, na sua essência segue os padrões clássicos das histórias em quadrinhos de super-heróis; (2) os quadrinhos constituem um sistema narrativo composto por duas semióticas, a visual e a verbal, que atuam em constante interação (sincreticamente); entretanto, alguns elementos da mensagem são passados exclusivamente pelo verbal, mas outros têm na linguagem visual a sua fonte de transmissão - como é o caso das projeções actanciais...

Orientador : Prof. Dr. Leonardo Magalhães Cruz / Coorientador : Prof. Dr. Luciano Fernandes Huergo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Educação Profissional e Tecnológica, Programa de Pós-Graduação em Bioinformática. Defesa: Curitiba, 10/03/2017 / Inclui referências : f. 50-52 / Resumo: A utilização da espectrometria de massa MALDI-TOF permite a identificação de microrganismos através da geração de espectros de massa, representando um perfil característico de sinais obtidos a partir de peptídeos ionizados de células inteiras ou extratos celulares. A comparação de espectros de massa obtidos de microrganismos desconhecidos contra um banco de dados de espectros de massa para microrganismos conhecidos, permite sua identificação. Essa utilização permite o usufruto de algumas vantagens frente a algumas limitações da técnica padrão, tal como agilidade na análise e redução de custos. Entretanto, faltam alternativas gratuitas aos softwares proprietários capazes de suprir características chaves na análise dos dados extraídos por tal técnica. Para auxiliar nessa análise nós criamos o JMSA, que é uma ferramenta de análise dos picos de um espectro de massa. O JMSA é capaz de facilitar a visualização comparativa, incluir dados descritivos de amostras. O JMSA também pode executar uma comparação de similaridade entre espectros selecionados. Desta forma o programa foi capaz de identificar um espectro, dado como desconhecido, em nível de espécie. O programa é capaz de ser executado consumindo poucos recursos nos principais sistemas operacionais que suportem Java, tal como MacOSX, Linux e Windows. Palavras-chave: Espectrometria de massa, Identificação de microrganismos, Análise de espectros de massa, MALDI-TOF, Desenvolvimento de software, Java. / Abstract: The use of MALDI-TOF mass spectrometry allows microorganism identification by generating mass spectra representing a characteristic profile of signals from ionized whole cell peptides or cell extracts. Comparing of mass spectra obtained from unknown microorganisms with a database of mass spectra for known microorganisms allows their identification. This usage allows the exploitation of some advantages over some limitations of the standard technique, such as agility in the analysis and reduction of costs. However, there is a lack of free alternatives to proprietary software capable of supplying key characteristics in its extracted data analysis. To assist in this analysis we have created the JMSA, which is a tool for analyzing the peaks of a mass spectrum. The JMSA is able to facilitate comparative visualization as well as include descriptive sample data. JMSA can also perform a similarity comparison of selected spectra. In this way the program was able to identify a spectrum, given as unknown, at species level. The program is able to run by consuming few resources on major operating systems that support Java, such as MacOSX, Linux and Windows. Key-words: Mass spectrometry, Identification of microorganisms, Mass spectrum analysis software, MALDI-TOF, Software development, Java.

Resumo: Esta pesquisa busca compreender como é construída a situação de (in)visibilidade do Movimento Aprendizes da Sabedoria (MASA), que organiza detentores de ofícios tradicionais de cura (benzedeiras, benzedores, costureiros e costureiras de machucadura, etc.) na região centro-sul do Paraná desde 2008. O trabalho parte da hipótese de que a invisibilidade sofrida pelos movimentos sociais é política e tem relação direta com o estreitamento das portas do sistema político, não dependendo exclusivamente de sua entrada na cena pública e do acesso aos meios de comunicação de massa. Assim, procura sistematizar os processos políticos que favorecem o empoderamento do grupo e também caracterizar os processos de comunicação desenvolvidos pelo MASA em seus contextos de mobilização, com destaque para sua relação com o capital social e a comunicação pública. Em relação aos procedimentos metodológicos, adota-seoestudodecasoúnicointegrado,na perspectiva de classificação do MASA enquanto movimento social.Além disso, há odesenvolvimentodesua relaçãocom as noções deempoderamento, capitalsocial eacomunicaçãopúblicacomosubunidades. A partir disso, o estudo aponta os movimentos sociais como um espaço de mobilização permanente, numa relação bastante complexa com suas bases e também em relações sociais com outros atores através de redes, objetivandoconquistar o empoderamento formal (como aprovação das leis e aberturas de espaços de diálogo com o Estado), poderes identitários, econômicos, sociais, políticos e a capacidade de tomar decisões efetivas para uma resolução de seus problemas e conflitos.

Orientador : Prof. Dr. Christian Johann Losso Hermes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Mecânica. Defesa: Curitiba, 31/07/2015 / Inclui referências : fls. 111-115 / Área de concentração: Fenômenos de transportes e mecânica dos sólidos / Resumo: O transporte de detergente entre compartimentos e através do tecido durante o processo de lavagem em lavadoras domésticas de carregamento superior (eixo vertical) são estudados no presente trabalho. Uma metodologia experimental foi desenvolvida com o intuito de observar a variação temporal da concentração de detergente em cada compartimento como também numa sonda que simula uma peça real de tecido. Realizou-se um experimento fatorial completo o qual evidenciou que o local de inserção do detergente assim como a velocidade de agitação são os fatores determinantes do processo. Criou-se um modelo transiente global para simular o transporte advectivo-difusivo do detergente. As equações diferenciais ordinárias foram resolvidas numericamente utilizando um algoritmo de incremento de tempo adaptativo. Os parâmetros de fechamento adotados no modelo foram obtidos através dos dados experimentais, o que evidencia o caráter semi-empírico do modelo. As previsões do modelo para a variação temporal da concentração de detergente e os dados experimentais tiveram concordância dentro de uma faixa de incerteza de medição (~15%) para a maior parte dos casos vistos. Palavras-chave: Transferência de massa. Análise experimental. Simulação transiente. Transporte de detergente. Lavadora de roupa. / Abstract: The detergent transport between the compartments and through the garments during the washing process in household top-load washing machines is investigated. An experimental methodology was put forward for evaluating the time evolution of the detergent concentration in each compartment, and also in a probe enveloped by a cottonlinen that emulates the garments. The experiments were carried out following a full factorial experiment, pointing out the detergent insertion location and the agitation speed as the rate-determining factors. A lumped transient model was advanced for the advective-diffusive transport of detergent. The set of ODEs was solved numerically through an adaptive time-step algorithm. The closing parameters required by the model were reduced from the experimental data, thus providing the model with a semi-empirical character. The model predictions for the time evolution of the detergent concentration and the experimental data agreed to within the range of the measurement uncertainties (~15%) for the cases majority. Keywords: Mass transfer. Experimental analysis. Transient simulation. Detergent transport. Washing machine.

Resumo: Medidas hipertensivas em idades precoces têm sido associadas às alterações do estilo de vida em crianças e adolescentes, exemplificadas pelo maior nível de sedentarismo e menor qualidade alimentar.A proposta deste trabalho foi verificar a relação entre o nível de atividade física, a obesidade corporal e a ingestão de sódio com medidas hipertensivas arteriais em escolares.Participaram do estudo 1496 escolaresde 10 a 19 anos, de ambos os gêneros, da rede municipal de Curitiba (PR).Foi calculado o índice de massa corporal, acessados o nível de atividade física pelo Three Day Physical Activity Recall (3DPAR)e o consumo alimentar por Questionário Semiquantitativo de Frequência Alimentar (QSFA).Foram usados testes não-paramétricos de Mann-Whitney, Qui-quadrado, odds ratio(OR) e correlação de Pearson, com intervalo de confiança de 95% e nível de significância de 5%. A amostral final foi de 1105 indivíduos (55,0% meninas) com média de idade 12,61±1,47 anos. Destes 46,2% eram inativos,principalmente as meninas (53,0%) em relação aos meninos (38,0%;p<0,0001). A distribuição do índice de massa corporal foi semelhante entre os gêneros, sendo 47,2% entre todos apresentaram excesso de peso (29,9% sobrepeso e 17,4% obesidade). A obesidade central foi maior em meninas e em inativos (30,5%) do que em ativos (24,9%; p<0,05) estando presente em 27,5% do total de avaliados.A frequência de níveis pressóricos hipertensivos foi de 17,8% nos escolares, sem diferença entre gêneros ou nível de atividade física. Os gêneros foram analisados conforme o nível de atividade física, em meninas ativas (47,0%), meninas inativas (53,0%), meninos ativos (62,0%) e meninos inativos (38,0%). A força de associação dos níveis hipertensivos aliados com o excesso de peso foi OR de 3,76 em meninos ativos e 5,35 em inativos, em relação aos pares eutróficos(p<0,0001),magnitude não observada nas meninas (ativas OR=2,78; inativas OR=2,33). A mediana do consumo de sódio dos escolaresfoi de 3,18 g/d, com correlação moderada negativa com a PAS e positiva com a PAD. Os alimentos que mais contribuíram para o consumo de sódio foram o pão e a pizza.A probabilidade para pressão arterial elevada com consumo elevado de sódio foi mais expressiva na condição de excesso de peso (meninos OR=3,71; meninas OR=2,69) do que na inatividade física(meninos OR=1,06; meninas OR=0,67). Conclui-se que metade dos escolares apresentou sedentarismo. A obesidade central apresentou-se maior nas meninas. A presença de excesso de peso demonstrou associação com níveis hipertensivos em ambos os gêneros.Em meninos inativos apresentou quatro vezes maiorrisco de níveis hipertensivos,uma vez e meia maior que os ativos na mesma condição. O consumo energético diário foi 170% superior aos valores previstos para faixa etária e dois terços dos escolares consomem sódio em excesso.Apizza e o pão francês foram identificados como os alimentos de maior freqüência de consumo e de elevada correlação com o sódio ingerido, sem correlação com os níveis pressóricos.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:56:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6660.pdf: 2095058 bytes, checksum: 2ae2e381daf7578fa7d9306ec6a15607 (MD5) Previous issue date: 2015-03-12 / Financiadora de Estudos e Projetos / The objective of this work is the development of a rotary type dryer for drying leaves. This dryer was built with the purpose of ensuring a proper mixing of the leaves during drying, to obtain a final product with homogeneous moisture and good quality. The dryer consists of a cylinder built with perforated metal screen, coupled to a motor which allows its rotation around the cylinder axis. Air supplied by a blower is heated and fed through the cylinder side walls, perpendicularly to its axis. For drying of eucalyptus leaves, it was evaluated the reproducibility of the data and the homogeneity of the rotary drying basket in comparison to fixed-bed drying configurations using different forms of contact between the air and the material, and also to the conventional rotary drum dryer. To evaluate the quality of the final product, it was analyzed the influence of drying in color of leaves, extracted oil content and the concentration of citronellal in the oil. The kinetic data showed good reproducibility between the repetitions in the range of conditions investigated. It was observed that the set of leaves increased in volume during drying in the rotating basket, and the whole volume of dried leaves was 3-fold the fresh leaves volume. The tests indicated that the rotating basket provided uniform drying of the leaves as compared to drying in fixed beds and conventional rotary drum dryer, with small variation of moisture and average final moisture of 7.3 ± 0.3 % in drying of 50 g of leaves. For a good performance in drying eucalyptus, the volume of fresh leaves should not exceed 10% of the basket volume. The drying in the rotating basket have not provoked browning of the leaves and did not influence the essential oil content. / O objetivo deste trabalho é o desenvolvimento de um secador para a secagem de folhas, tipo rotativo. Este secador foi construído com a finalidade de permitir uma boa mistura das folhas durante a secagem, de forma a obter um produto final com umidade homogênea e boa qualidade. O secador consiste de um cilindro construído de tela metálica perfurada, acoplado a um motor que permite a sua rotação em torno do eixo do cilindro. O ar fornecido por um soprador é aquecido e alimentado através das paredes laterais do cilindro, no sentido perpendicular ao seu eixo. Para a secagem de folhas de eucalipto, foram avaliadas a reprodutibilidade dos dados e a homogeneidade da secagem no cesto rotativo em relação à secagem em leitos fixos usando diferentes formas de contato entre o ar e o material, e também ao secador rotativo convencional. Para a avaliação da qualidade do produto final, foi analisada a influência da secagem na cor das folhas, no teor de óleo extraído e na concentração de citronelal presente no óleo. Os dados de cinética foram reprodutíveis entre as repetições na faixa de condições investigada. Observou-se que o conjunto de folhas aumenta de volume durante a secagem no cesto rotativo, sendo o volume do conjunto de folhas secas até 3 vezes superior ao volume do conjunto das folhas in natura. Os testes indicaram que o cesto rotativo proporciona a secagem uniforme das folhas se comparada à secagem em leitos fixos e em secador rotativo convencional, com variação muito pequena entre as umidades, e umidade final média de 7,3±0,3% para 50 g de folhas. Constatou-se que para uma boa operação na secagem de folhas de eucalipto, o volume de folhas in-natura não deve ultrapassar 10% do volume útil do secador. A secagem no secador tipo cesto rotativo não provocou o escurecimento das folhas e não influenciou o teor de óleo essencial.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-11Bitstream added on 2014-06-13T19:45:09Z : No. of bitstreams: 1 sudano_mj_dr_botfmvz.pdf: 2445410 bytes, checksum: b31fdea0d1a6b4b576d49b7e856ede8a (MD5) / Objetivo deste experimento foi estudar os mecanismos envolvidos na sobrevivência à criopreservação de embriões Bos taurus indicus (Nelore) e Bos taurus taurus (Simental) produzidos in vitro (PIV) e in vivo (TE). Em um arranjo fatorial 2 x 2, duas subespécies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) e duas origens (PIV vs TE) foram utilizadas para testar a hipótese de que a capacidade de sobrevivência após a criopreservação é um evento multifatorial, e que a composição lipídica e o padrão de expressão gênica global afetam a criotolerância embrionária. Vacas Nelore (N=14) e Simental (N=14) foram submetidas a OPU e os oócitos recuperados (N=840 e 450, respectivamente) foram submetidos a MIV, FIV e CIV. Além disso, vacas Nelore (N=7) e Simental (N=8) foram submetidas a superestimulação ovariana, IATF e lavagem uterina. Os embriões PIV (N=349 e N=105) e TE (N=80 e N=74), respectivamente Nelore e Simental, foram submetidos as técnicas de vitrificação (N=70-94), coloração de Sudan Black (n=30), espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-MS; N=8 por grupo), microarray genômico (Nelore PIV N=4, Nelore TE N=4, Simental PIV N=3, Simental TE N=3) e validação no qPCR (N=8 por grupo). Modelos univariados (PROC LOGISTIC e PROC GLIMMIX- SAS 9.2) e multivariados (análise dos componentes principais-PCA- Piruete v.3.11 e MetaboAnalyst) foram utilizados na análise estatística. A análise do Microarray genômico procedeu-se no FlexArray 1.6.1.1. Genes com “fold change” de 1,5 e P≤0,05 foram considerados diferentemente expressos. Embriões Simental apresentaram maior sobrevivência após a vitrificação que os Nelore (34,6 vs 20,2%; P<0,05). Apesar disso, os embriões Simental apresentaram maior conteúdo lipídico do que os Nelore (3,4±0,3 vs 2,4±0,3 intensidade de cinza x 10-4 / μm3 ; P<0,05)... / The objective was to study mechanisms involved in the post-cryopreservation survival of Bos taurus indicus (Nellore) and Bos taurus taurus (Simmental) in vitro (IVP) and in vivo (ET) produced embryos. In a 2x2 factorial experimental design, two subspecies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) and two origins (PIV vs ET) were used to test the hypotheses that the postcryopreservation embryo survival capacity is a multifactorial event and that the lipid composition and the global gene expression pattern affect embryo cryotolerance. Nellore and Simmental cows (N=14) were submitted to OPU sessions and recovered oocytes (840 and 450, respectively) underwent IVM, IVF and IVC. Moreover, Nellore (N=7) and Simmental (N=8) cows were submitted to ovary superstimulation, FTAI, and uterine flushing. The IVP (N=349 and N=105) and ET (N=80 and N=74) embryos, Nellore and Simmental respectively, were used in the vitrification (N=70-94), Sudan Black B stain (N=30), matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDIMS) (N=8 per group), genomic microarray (Nellore IVP N=4, Nellore ET N=4, Simmental IVP N=3, Simmental ET N=3) and qPCR (N=8 per group) techniques. Univariate (PROC LOGISTIC and PROC GLIMMIX, SAS 9.2) and multivariate (PCA - Piruete v.3.11 and MetaboAnalyst) models were used for the statistical analysis. Microarray data analysis was performed in FlexArray 1.6.1.1 software. Genes with a fold change of at least 1.5 and a probability of P<0.05 were considered differentially expressed. Simmental embryos had higher post-vitrification survival (34.6 vs 20.2%; P<0.05) compared with Nellore. Nevertheless, Simmental embryos had higher lipid content than Nellore (3.4±0.3 vs 2.4±0.3 gray intensity x 10-4 / μm3; P<0.05). When compared ET with PIV embryos, it was observed that the former had higher post-vitrification... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-07Bitstream added on 2015-04-09T12:48:12Z : No. of bitstreams: 1 000811792.pdf: 1023358 bytes, checksum: 49599a5390d29b3a15373b7de0d79c48 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Neste trabalho foram estudados os sistemas enzimáticos hidrolítico e oxidativo do ascomiceto termotolerante Myceliophthora thermophila M.7.7. Seis diferentes secretomas foram avaliados por espectroscopia de massas que identificou o total de 187 proteínas confirmando a presença do clássico sistema enzimático hidrólitico revelando também a produção de enzimas do sistema oxidativo de degradação. As enzimas mais abundantes foram celobiose desidrogenase e glicosídeo hidrolase família 7 secretadas principalmente nos bagaços de cana-de-açúcar in natura e explodido a vapor. A abundante produção de glicosídeo hidrolases foi identificada quando polissacarídeos de hemiceluloses foram a fonte de carbono empregada, mostrando que o produção de enzimas é substrato específica. O isolamento, a caracterização bioquímica e o estudo cinético enzimático de uma β-glicosidase do M. thermophila M.7.7. também foram realizados. A β-glicosidase purificada apresentou excelentes parâmetros para sua aplicabilidade como enzima suplementar a coquetéis enzimáticos ou até mesmo sua clonagem e expressão em organismos deficientes em β-glicosidase. Experimentos de hidrolíse enzimática também foram executados empregando o extrato bruto de M. thermophila, que resultou em uma conversão de 21% em bagaço in natura e 16% em celulose comercial mesmo com baixa carga de proteínas, indicando maior especificidade e sinergia do complexo enzimático à polímeros de celulose com maior índice de cristalinidade e grau de polimerização em sua estrutura / In terms of the here presented PhD research project the hydrolytic and oxidative enzymatic properties from the ascomycota and themotolerant fungae Myceliophthora thermophila M.7.7. were investigated in detail. Six different secretomes were analysed by mass spectroscopy and 187 proteins were identified. Within these proteins beside already known and expected enzymes also several oxidative active enzymes were confirmed. Enzymes belonging to the cellobiose dehydrogenase and glycoside hydrolase family 7 were most abundant, when in natura and steam exploded sugar cane bagasses were used as carbon source. Particular a high abundance of glycoside hydrolases was identified when a mixture of hemicelluloses was applied as sole carbon source. In this case the secretome analysis showed a substrate-specific secretion for this fungae. The isolation, purification and characterization of a β-glycosidase from M. thermophila M.7.7. showed and confirmed excellent enzymatic charateristics and parameters for future potential applications as a supplemental enzyme in enzyme cocktails, or implimanting by molecular biology in organisms deficient in β-glucosidase. Even at low protein concentration the enzymatic hydrolysis, utilizing the crude extract, resulted in a conversion of approx. 21% in natura bagasse and approx. 16% in commercial cellulose, indicating a high specificity and synergy of the enzyme complex to cellulose polymers with a higher degree of polymerization and crystallinity index in its structure