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Controle estatístico das análises microbiológicas das águas potáveis e minerais comercializadas na região metropolitana do Recife–Pe

FERNANDES, Amanda Cristiane Gonçalves 18 December 2015 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-07-19T14:38:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO PÓS DEFESA 2 CORRIGIDO.pdf certa amanda.pdf: 2750762 bytes, checksum: a5f1b1ed9aff9a99f178fd6bf82aae1f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T14:38:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO PÓS DEFESA 2 CORRIGIDO.pdf certa amanda.pdf: 2750762 bytes, checksum: a5f1b1ed9aff9a99f178fd6bf82aae1f (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / CAPEs / A falta de confiabilidade da qualidade da água do abastecimento público fez com que a maioria da população passasse a consumir com maior intensidade a água mineral. Para atender uma grande demanda das águas minerais envasadas aumentou–se ao longo dos anos o número de empresas e escavações de poços, até mesmo de forma irregular. Nessa perspectiva, é imprescindível conhecer a qualidade da água que está sendo comercializada pela população com forma de evitar danos à saúde e exigir dos órgãos competentes maiores fiscalizações. O objetivo desta pesquisa é avaliar a qualidade das águas potáveis comercializadas na região metropolitana do Recife–PE, seja através da análise microbiológica de acordo com a portaria nº 2.914/2011 e Resolução 275/2005, seja através dos dados qualitativos obtidos, buscando utilizar técnicas estatísticas adequadas como forma de obtenção de conclusões significativas para esta análise. As amostras foram garrafinhas envasadas de água mineral, pois tratam-se de um dos tipos de água mais comercializadas na região, as quais foram adquiridas de forma aleatória, no comércio local da Região Metropolitana de Recife–PE, no período de Janeiro a Abril de 2015 e no período de Junho a Agosto de 2015. Foram adquiridas um total de 35 garrafinhas que variam entre 300 ml a 500 ml e com 7 variedades de marcas, divididas em 5 unidades com mesmo lote para os dois períodos respectivamente. Para análise de coliformes totais, coliformes fecais/E. Coli, Enterococos e Pseudomonas Aeruginosas utilizou-se a técnica de Tubos Múltiplos adaptada; para contagem de bactérias heterotróficas, foi utilizada a técnica de cultivo em profundidade; para a contagem do pH de cada amostra foi verificado, em triplicata com auxílio de pHmetro. No período de Janeiro a Abril (40%) do total de amostras detectaram presença de Coliformes Totais; Para coliformes fecais/E.coli (8,57%) e Pseudomonas Aeruginosas (37,14%). De acordo com Resolução 275/2005 as amostras A, B e C tiveram suas partidas rejeitadas. Para a contagem de bactérias heterotróficas a Marca A obteve (100%) acima do limite padrão de 500 (UFC/ml) e a marca B obteve (20%). De acordo com a portaria nº 2.914/2011, conclui- se que a partida da marca A está rejeitada e uma amostra da marca B está comprometida. No período de Junho a Agosto (28,57%) do total de amostras detectaram presença de Coliformes Totais. Para coliformes fecais/E.coli obteve-se (0%) e Pseudomonas Aeruginosas (34,28). De acordo com Resolução 275/2005 as amostras A, B, C, D e E tiveram suas partidas rejeitadas. Para a contagem de bactérias heterotróficas as Marca A, B, C e D obtiveram (100%) acima do limite padrão de 500 (UFC/ml). De acordo com a portaria nº 2.914, conclui-se que as partidas das marcas A, B, C e D estão rejeitadas. Para as variáveis quantitativas (pH e Contagem de bactérias heterotróficas) foi utilizado o teste de Shapiro Wilk onde verificou que as mesmas não seguem uma distribuição normal. Através do teste estatístico qui-quadrado pode–se verificar que não houve diferença significativa na associação entre as variáveis estudadas para com os períodos analisados. Não houve variação entre as medições de pH das amostras e nem diferença significativa da medição de pH entre os períodos de Janeiro a Março/2015 e Junho a Agosto/2015. Para comparar os dados em relação aos períodos utilizaram–se estatísticas descritivas, tabelas de frequências e gráficos de Colunas. / The unreliability of public drinking water quality has meant that most people spend consuming more intensely mineral water. To meet a large demand for bottled mineral waters was increased over the years the number of companies and excavation pits, even irregularly. From this perspective, it is essential to know the quality of water being sold by people with a way to avoid damage to health and require the competent bodies larger checks. The objective of this research is to evaluate the quality of drinking water sold in the metropolitan area of Recife-PE, either through microbiological analysis according to the decree No. 2,914 / 2011 and Resolution 275/2005, either through the obtained qualitative data, seeking to use techniques appropriate statistics in order to obtain significant findings for this analysis. Samples were potted bottles of mineral water, as these are one of the types of water most commercialized in the region, which were acquired at random, in the local market in the metropolitan region of Recife-PE in the period from January to April 2015 and from June to August 2015. There were obtained a total of 35 bottles ranging from 300 ml to 500 ml and 7 varieties marks divided into five units of the same batch for two periods respectively. For analysis of total coliforms, fecal coliforms / E. Coli, Enterococci and Pseudomonas Aeruginosa used the multiple tube technique adapted; for counting heterotrophic bacteria, it was used culture technique in depth; to pH count of each sample was checked in triplicate with the aid of pH meter. In the period from January to April (40%) of the total samples detected the presence of Total Coliforms; For fecal coliform / E. coli (8.57%) and Pseudomonas Aeruginosa (37.14%). According to Resolution 275/2005 samples A, B and C had rejected their matches. For heterotrophic bacterial count of the mark A, B, C and D obtained (100%) above the standard limit of 500 (CFU / ml). According to Ordinance No. 2914, it is concluded that the matches of the brands A, B, C and D are rejected. For the quantitative variables (pH and Counting of heterotrophic bacteria) we used the Shapiro-Wilk test which found that they do not follow a normal distribution. Using the chi-square test statistic it can be seen that there was no significant difference in the association between variables towards the periods. There was no variation in pH measurements of samples and no significant difference in pH measurement in the period from January to March / 2015 and June to August / 2015. To compare the data for the periods we used descriptive statistics, frequency tables and columns of graphics.
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Influencia da radiação ionizante (60Co) na manutenção da qualidade fisico-quimica, microbiologica e sensorial de cortes de coxa e file de peito de frango acondicionado em deiferentes sistemas de embalagens / Influence of ionizing radiation (60Co) on the physical-chemical, microbiological and sensory keeping quality characteristics of raw chiken thigh and chiken breast fillets packed in different packaging systems

Miyagusku, Luciana 26 February 2008 (has links)
Orientador: Arnaldo Yoshiteru Kuaye / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-10T19:29:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miyagusku_Luciana_D.pdf: 3536658 bytes, checksum: 4556132ea7365aeee18aa4f6d36aaa0c (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Lotes de amostras de cortes de coxa e de filé de peito de frango, previamente acondicionadas sob diferentes sistemas de embalagens (recobertas por filme de alta permeabilidade ao oxigênio (AR), em vácuo (VC) e em atmosfera modificada (AM) com CO2 e N2) foram submetidas à irradiação ionizante com uma fonte de 60Co. Com o objetivo de avaliar a influência do processo sobre a vida útil e manutenção da qualidade foram avaliados parâmetros físico-químicos, microbiológicos e sensoriais das amostras processadas e armazenadas sob refrigeração a temperatura de 7±1ºC por períodos de 42 dias (AR) e três meses (VC e AM). Os tratamentos das amostras de frango por irradiação não promoveram alteraçao de cor, determinada objetivamente, enquanto a oxidação lipídica, avaliada pelas determinações TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) como indicador, apresentaram tendência de valores crescentes, conforme incremento da dose. Os valores de pH das amostrascontrole coxa/AR,VC e AM e peito/AR,VC e AM não apresentaram diferenças significativas durante todo o período de armazenamento. A aplicação da irradiação às amostras de carne de frango acondicionadas em filme de alta permeabilidade ao oxigênio (coxa/AR e peito/AR) e em filme barreira (coxa/VC, peito/VC, coxa/AM e peito/AM) promoveu uma sensível redução de E.coli, Pseudomonas spp, e enterobacteriaceas totais, porém no sistema de embalagem AR as bactérias láticas e os bolores e leveduras apresentaram maior resistência. Nas amostras acondiciondas em filme com barreira (vácuo e atmosfera modificada) as bactérias láticas foram as mais resistentes. Não foi observado em nenhuma amostra o desenvolvimento de Brochothrix thermosphacta e Listeria monocytogenes durante todo o periodo de armazenamento. Os resultados das análises cromatográficas de substâncias oriundas da degradação lipídica revelaram perfis de compostos voláteis similares para amostras submetidas às três condições de atmosfera. O incremento nas doses de irradiação acima de 3kGy, independente do tipo de sistema de embalagem utilizada, promoveu alteração crescente do odor de queimado no produto revelando assim este valor como limite recomendável para a garantia de uma maior vida útil sem alteração sensorial perceptível. Observou-se uma sensível extensão da vida útil das amostras de coxa/AR em 2,8 vezes, peito/AR em 4,0 vezes e em amostras embaladas em filme barreira (coxa/VC, e peito/VC, coxa/AM e peito/AM) em 6,0 vezes superior ao das amostras-controle. O processo de irradiação demonstrou ser uma ferramenta potencial de utilização para extensão da vida útil e melhoria da qualidade de cortes de frango / Abstract: Samples of raw chicken thigh and chicken breast fillets previously packed in different packaging systems [wrapped in high oxygen-permeable film (AIR), vacuum packed (VC) and CO2 and N2 modified-atmosphere-packed (MA)] were submitted to ionizing radiation delivered by a 60Co unit. A series of physical-chemical, microbiological and sensory parameters were evaluated to assess the effect of the radiation process on the shelf-life and keeping quality of chicken cut samples exposed to radiation and subsequently cold-stored at 5±1ºC for 39 days (AIR) and 3 months (VC and MA). The results of instrumental color assessment trials showed that the radiation treatments investigated in this study did not cause any color changes in any of the radiation-treated chicken cuts. On the other hand, lipid oxidation - measured using the TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) content as indicator ¿ exhibited a gradual increase proportional to the increase of the radiation dose. The pH values of the chicken thigh/AIR, VC and MA and chicken breast/AIR, VC and MA control samples did not exhibit any significant differences throughout the storage period investigated. Irradiation of the chicken meat samples packaged in high oxygen-permeable film (chicken thigh/AIR and chicken breast/AIR) and in barrier film (chicken thigh/VC, chicken breast/VC, chicken thigh/MA and chicken breast/MA) resulted in a considerable reduction of E.coli, Pseudomonas spp and total enterobacteria counts, however, lactic acid bacteria, yeasts and moulds demonstrated higher resistance in the AIR packaging system. In the samples packaged in barrier film (vacuum and modified atmospere) the lactic acid bacteria were identified as the most resistant to radiation. None of the samples showed growth of Brochothrix thermosphacta and Listeria monocytogenes throughout the storage period investigated. The results of chromatographic analyses of substances generated by lipid degradation showed similar compound profiles for the samples submitted to the three atmosphere conditions studied. In addition, no migration of substances from the packaging material to the meat samples was detected. Irrespective of the packaging system, increasing the radiation dose to levels above 3kGy resulted in the development of a burnt odor the intensity of which increased with increasing dose values, thereby indicating 3kGy to be a recommendable limit that ensures a product with a long shelf-life and without sensory perceptible changes. While the shelf-life of the control samples of chicken thigh/AIR and chicken breast/AIR was estimated at 5 days, irradiation with increasing doses of 1,5 to 7,0 kGy was found to result in a 1,8 to 7,4-fold increase in the shelf-life, respectively. The irradiation process demonstrated to be a potentially very useful tool to extend the shelf-life and improve the quality of chicken cuts / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos
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Qualidade microbiológica de água tratada para hemodiálise e caracterização de bactérias patogênicas / Microbiological quality of hemodialysis treated water and characterization of pathogenic bacteria

Souza, Bárbarah Gregório de Araújo 03 February 2015 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-01-21T09:02:19Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bárbarah Gregório de Araújo Souza - 2015.pdf: 1511259 bytes, checksum: 7593040775bbedcf494902d9068b3c8d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-01-21T09:05:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bárbarah Gregório de Araújo Souza - 2015.pdf: 1511259 bytes, checksum: 7593040775bbedcf494902d9068b3c8d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-21T09:05:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bárbarah Gregório de Araújo Souza - 2015.pdf: 1511259 bytes, checksum: 7593040775bbedcf494902d9068b3c8d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-02-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Hemodialysis is a primary treatment for chronic renal patients in the terminal phase. In this therapy, the water is used for the dialysis solution production and dialyzers reuse, and therefore the microbiological quality should be guaranteed, once excessive levels of bacteria are responsible for symptoms such as fever, chills, hypotension and shock, and may even lead to death of patients. Thus, this study aimed to evaluate the water microbiological quality used in hemodialysis centers and characterize isolated pathogenic bacteria from this water. During the months of May and June 2014, were collected in two stages, water samples from four collection points in 12 hemodialysis centers of the cities of Goiania-GO and Aparecida de Goiânia-GO. The protocol followed the microbiological parameters of Board Resolution No. 11/2014, in addition to fecal coliforms, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa research, according to the American Public Health Association. The strains of pathogenic bacteria were characterized phenotypic and genotypically through the antibiogram and Pulsed Field Gel Electrophoresis. Of the 96 water samples, 7.3% were classified contaminated with total coliforms, 1.1% by fecal coliforms, 18.7% by heterotrophic bacteria and 10.4% by P. aeruginosa, the latter being present in 6 hemodialysis centers. E. coli strains were not isolated in the water samples studied. All P. aeruginosa strains were resistant to cefepime and only one strain was also resistant to aztreonam and piperacillin-tazobactam. Genotypic analysis revealed eight different electrophoretic profiles and showed the persistence of the same bacteria clones in the two phases of collection in a hemodialysis center. It can be concluded that the water used in dialysis units has unsatisfactory hygienic and sanitary conditions and pathogenic bacteria strains have antibiotic resistance pattern used in your control and high genetic diversity, revealing the potential health risk to patients undergoing hemodialysis. / A hemodiálise é um tratamento primordial para pacientes renais crônicos em fase terminal. Nesta terapia, a água é utilizada para produção da solução de diálise e para reutilização de dialisadores, e por isso sua qualidade microbiológica deve ser garantida, uma vez que excessivos níveis de bactérias são responsáveis por sintomas como febre, calafrios, hipotensão e choque, podendo levar até mesmo à morte dos pacientes. Sendo assim, este trabalho objetivou avaliar a qualidade microbiológica da água utilizada em centros de hemodiálise e caracterizar bactérias patogênicas isoladas desta água. Durante os meses de maio e junho de 2014, foram coletadas, em duas etapas, amostras de água de quatro pontos de coleta em 12 centros de hemodiálise das cidades de Goiânia-GO e Aparecida de Goiânia-GO. O protocolo microbiológico seguiu os parâmetros da Resolução da Diretoria Colegiada nº 11/2014, além da pesquisa de coliformes termotolerantes, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, de acordo com American Public Health Association. As cepas de bactérias patogênicas foram caracterizadas fenotípica e genotipicamente, por meio do antibiograma e Pulsed Field Gel Electrophoresis. Das 96 amostras de água coletadas, 7,3 % apresentaram-se contaminadas por coliformes totais, 1,1 % por coliformes termotolerantes, 18,7 % por bactérias heterotróficas e 10,4 % por P. aeruginosa, estando esta última presente em 6 centros de hemodiálise. Não foram encontradas cepas de E. coli. Todas as cepas de P. aeruginosa apresentaram perfil de resistência ao cefepime e uma cepa foi resistente também ao aztreonam e piperacilina-tazobactam. A análise genotípica revelou oito perfis eletroforéticos diferentes e mostrou a persistência de clones de uma mesma bactéria na primeira e segunda coleta em um mesmo centro de hemodiálise. Pode-se concluir que a água utilizada nas unidades de tratamento dialítico apresenta condições higiênicossanitárias insatisfatórias e que as cepas de bactérias patogênicas apresentam perfil de resistência à antibióticos utilizados em seu controle e alta diversidade genética, revelando o risco potencial à saúde dos pacientes submetidos à hemodiálise.
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Efeito da radiaÃÃo solar e da salinidade sobre o crescimento de Escherichia coli / Efeito da radiaÃÃo solar e da salinidade sobre o crescimento de Escherichia coli

Hilda Maria Pinheiro de Castro 17 February 2003 (has links)
A Ãgua do mar tem efeito tÃxico sobre o crescimento de bactÃrias entÃricas dentre as quais se incluem a Escherichia coli, reconhecida como indicador microbiolÃgico de poluiÃÃo fecal . Dentre os fatores que afetam a sobrevivÃncia da bactÃria em meio marinho encontram-se a radiaÃÃo solar, salinidade, pH, falta de nutrientes e temperatura. O objetivo desse trabalho foi testar o efeito da radiaÃÃo solar e salinidade sobre a sobrevivÃncia de E. coli. De uma amostra de Ãgua coletada na saÃda da galeria pluvial em frente à Praia do Mucuripe, procedeu-se o isolamento e a identificaÃÃo bioquÃmica de E.coli. Dez frascos transparentes e 10 frascos de cor Ãmbar, esterilizados, contendo 9 mL de Ãgua do mar com salinidade variando de 33 a 35 â, e pH entre 7,23 a 7,56, foram inoculados com 1mL da cultura crescida em TSA e diluÃda em soluÃÃo salina estÃril, de forma que a turbidez correspondesse ao tubo 0,5 da escala de McFarland. Os frascos foram entÃo submetidos a 10 dias de exposiÃÃo à luz solar tendo como controle o mesmo tratamento em ausÃncia de luz. Foram realizados dez experimentos. A sobrevivÃncia da bactÃria foi avaliada segundo o teste da Contagem PadrÃo em Placas (CCP) partindose do tempo T0 (inÃculo inicial) prosseguindo atà o T216 (em horas). Os resultados obtidos mostraram que para o cultivo exposto à luz solar, em dias nublados ou chuvosos, a cepa apresentou contagem em placas atà o tempo T216, e em dias de maior incidÃncia solar houve um decrÃscimo acentuado, com tendÃncias sempre à queda da populaÃÃo. Para o controle, durante o mesmo perÃodo, nÃo houve decrÃscimo significativo. O teste de AnÃlise de VariÃncia (ANOVA) mostrou que hà uma correlaÃÃo entre o tempo de exposiÃÃo da cepa à radiaÃÃo solar e a diminuiÃÃo do nÃmero de cÃlulas de E.coli. / Marine waters have a toxic effect over enteric bacteria, including Escherichia coli which is widely recognized as a microbiological indicator for fecal pollution. Several factors, such as solar radiation, salinity, pH, temperature and nutrients shortage, affect the survival of this bacterium in the marine environment. This work is aimed to study the effect of solar radiation and salinity on the survival of E. coli. An E.coli strain was isolated from a water sample taken from the outfall of a pluvial gallery, in front of the Mucuripe beach, and biochemically identified. Ten sterile transparent flasks and ten sterile amber flasks, each one containing 9 mL of marine water with salinity between 33 and 35â and pH between 7.23 and 7.56, were inoculated with 1 mL of the TSA-grown culture, and diluted with sterile saline until the tube reached a turbidity of 0.5 in the McFarland scale. The flasks were then subjected to 10 days of exposure to solar light, running simultaneously a control experiment following the same treatment conditions in the dark. 10 repetitions of the experiment were performed. The bacterial survival was evaluated by the Standard Plate Count assay (SPC), starting with t = 0 (the initial inoculation) and until t = 216 hours. The results showed a plate count every cloudy or rainy day of solar exposure, while in days of strong solar irradiation a significant decrease of the bacterial population was observed. During the same periods, the controls showed no significant decrease. The variance analysis (ANOVA) used to process the obtained data showed a correlation between the time of exposure to solar radiation and the decrease of E. coli cells.
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AvaliaÃÃo microbiolÃgica e parasitolÃgica nos processos de higienizaÃÃo de alfaces (Lactuca sativa L.) de diferentes cultivos / Microbiology and Parasitology evaluation process of sanitization Lettuce (Lactuca sativa L.) of different cultivars

Eveline de Alencar Costa 30 June 2011 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A sanidade das hortaliÃas que sÃo consumidas cruas à fator relevante à saÃde devendo ser garantida mediante a sanitizaÃÃo com produtos quÃmicos que tenham aÃÃo eficaz na eliminaÃÃo, reduÃÃo e/ou remoÃÃo dos contaminantes presentes. A forma tradicional de higienizaÃÃo de vegetais compreende a lavagem com Ãgua corrente seguida de imersÃo em soluÃÃo de cloro a 200ppm e enxÃgÃe para remover as sujidades remanescentes e resÃduos do produto quÃmico. No entanto, alguns estudos apontam que esta sanitizaÃÃo nÃo garante a inocuidade das hortaliÃas, pois embora reduza a carga microbiana, nÃo à eficiente na eliminaÃÃo de algumas formas parasitÃrias. Diante disso, a presente pesquisa objetivou detectar microrganismos, protozoÃrios, helmintos e artrÃpodes em alfaces (Lactuca sativa, L.), variedade crespa, provenientes de cultivo convencional, orgÃnico e hidropÃnico, na sua forma in natura e apÃs dois mÃtodos de higienizaÃÃo: teste (aplicaÃÃo do detergente e soluÃÃo clorada a 200ppm) e tradicional (uso apenas da soluÃÃo clorada a 200ppm). Todas as alfaces estavam contaminadas por coliformes fecais, porÃm as amostras orgÃnicas e hidropÃnicas apresentaram valores mÃdios dentro do padrÃo estipulado pela legislaÃÃo, (21Â74NMP/g e 24Â40 NMP/g, respectivamente) ao contrÃrio das convencionais (152Â286NMP/g). Em 100% das amostras de alfaces convencionais e orgÃnicas nÃo apresentaram contaminaÃÃo por Salmonella sp., mas 20% das amostras hidropÃnicas estavam contaminadas por esse patÃgeno, sendo classificadas como imprÃprias para consumo. Nas anÃlises parasitolÃgicas foram detectados organismos potencialmente patogÃnicos para o homem: cistos Giardia sp. (2), ovos de Ascaris sp. (6) e ovo de Taenia sp. (1), com seis ocorrÃncias em alfaces convencionais e trÃs em orgÃnicas. Foram ainda detectados cistos de ameba e larvas de nematÃdeos morfologicamente anÃlogos aos que se encontra no homem, porÃm mais provavelmente eram formas de vida livre provenientes da terra. Foram observadas em abundÃncia formas de vida livre entre os protozoÃrios, os helmintos nematÃdeos, e os artrÃpodes (estes com destaque nas alfaces hidropÃnicas) veiculados nas sujidades das alfaces, refletindo a composiÃÃo dos ambientes de cultivo. Avaliando os dois processos de sanitizaÃÃo estudados constatou-se que a mÃdia dos valores de coliforme fecal nos diferentes tipos de alfaces foi menor no mÃtodo teste do que no tradicional, evidenciando maior eficiÃncia. A etapa da prÃ-lavagem reduziu em 60% a contaminaÃÃo inicial de coliformes fecais; a lavagem com detergente foi eficaz quando comparada com a reduÃÃo obtida na etapa seguinte. O mÃtodo tradicional promoveu diminuiÃÃo significativa na contaminaÃÃo inicial de coliformes fecais, no entanto, nÃo houve diferenÃa significativa quando comparada com o mÃtodo teste nem com a etapa da lavagem com detergente isoladamente, comprovando mais uma vez a eficÃcia deste Ãltimo. Para a remoÃÃo das formas de helmintos, protozoÃrios e artrÃpodes em geral, ambos os mÃtodos foram eficientes, sem apresentarem diferenÃa significativa. Quando foram analisadas separadamente as diferentes etapas dos procedimentos de higienizaÃÃo, constatou-se que houve significÃncia estatÃstica para a remoÃÃo de helmintos, com melhor eficiÃncia do procedimento teste, podendo-se sugerir que a higienizaÃÃo realizada apenas com detergente alcanÃaria os mesmos resultados de detergente e cloro. Deste modo, concluÃmos que a higienizaÃÃo teste, tanto para a remoÃÃo de helmintos como para a reduÃÃo de coliformes fecais, apresentou maior eficÃcia. / The vegetables sanity that are eaten raw is a relevant factor to health must be ensured by sanitizing with chemicals that have effective action to eliminate, reduce and / or removal of contaminants. The traditional way of cleaning includes washing vegetables under running water followed by immersion in 200ppm chlorine solution and rinse to remove dirt and remnants of the chemical waste. However, some studies indicate that this sanitization does not guarantee the safety of vegetables, for though while reduces the microbial load, it is not efficient in the elimination of some parasitic forms. Therefore, this study aimed to detect microorganisms, protozoa, helminths and arthropods in lettuce (Lactuca sativa L.), curly variety, from conventional farming, organic and hydroponic, in its fresh form and after two methods of cleaning: test (application of detergent and chlorine solution to 200ppm) and traditional (use of only a 200ppm chlorine solution). All lettuce were contaminated by fecal coliforms, but the hydroponic and organic samples had mean values within the standard stipulated by law, 21Â74NMP/g and 24Â40 NMP/g, respectively) unlike the conventional (152  286NMP/g). In 100% of the samples of conventional and organic lettuces were not contaminated with Salmonella sp. but 20% of hydroponic samples were contaminated by this pathogen, being classified as unfit for consumption. In parasitological analyses were detected in organisms potentially pathogenic to humans: Giardia sp cysts. (2), eggs of Ascaris sp. (6) and eggs of Taenia sp. (1), with six occurrence in three lettuces in conventional and organic. Giardia sp cysts. (2), eggs of Ascaris sp. (6) and eggs of Taenia sp. (1), with six occurrence in three lettuces in conventional and organic. Yet been detected amoeba cysts and larvae of nematodes morphologically similar to those found in man, but more likely were forms of life free from the earth. Forms were observed in abundance among free-living protozoa, nematodes, helminths, and arthropods (especially those in hydroponic lettuce) served in lettuce dirt, reflecting the composition of culture environments. Evaluating the two processes of sanitization studied it was found that the mean of fecal coliform in the different types of lettuce was lower in the test method than the traditional, with increased efficiency. The stage of pre-washing reduced by 60% the initial contamination of fecal coliform, the detergent wash was effective when compared with the reduction achieved in the next step. The traditional method promoted significant decrease in the initial contamination of fecal coliform bacteria, however, no significant difference when compared with the test method or with the step of washing with detergent alone, proving once again its effectiveness. For removal of the forms of helminths, protozoa and arthropods in general, both methods were effective, showing no significant difference. When analyzed separately the different stages of cleaning procedures, it was found that there were significant for the removal of helminths, with better efficiency of the testing procedure, which may suggest that the cleaning with detergent performed only achieve the same results of detergent and chlorine. Thus, we conclude that test hygienization, both for the removal of helminths as to reduce fecal coliform bacteria, showed greater efficacy.
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Efeitos da contagem bacteriana total do leite cru refrigerado sobre os parâmetros físico-químicos, microbiológicos e rendimento durante a vida útil do queijo Minas Frescal / Effects of the total bacterial count of the refrigerated raw milk on the physicochemical parameters, microbiological and yield during the shelf life of the Minas Frescal cheese

Rafaela Torrezan Privatti 29 August 2017 (has links)
A Contagem Bacteriana Total (CBT) é um critério de avaliação da qualidade higiênico-sanitária do leite. O presente estudo teve por finalidade avaliar o efeito da CBT do leite cru refrigerado, sobre as características físico-químicas, microbiológicas e rendimento do queijo Minas Frescal. Utilizaram-se leites com dois níveis de CBT para a fabricação dos queijos: baixa CBT= média de 18.400 UFC/mL e alta CBT= média de 74.100 UFC/mL. As etapas de elaboração dos queijos incluíram a pasteurização do leite, adição dos ingredientes (cloreto de cálcio, cloreto de sódio e coalho), coagulação e obtenção do coágulo, dessoragem, enformagem e embalagem. Os queijos foram embalados em embalagens plásticas e analisados nos dias 1, 7, 14 e 21 após a fabricação e durante esse período foram mantidos em câmara fria a 6°C. A sequência de elaboração dos queijos foi repetida 3 vezes, para cada nível de CBT, totalizando 60 unidades por tratamento. Cinco unidades de queijos foram analisadas por dia, os parâmetros físico-químicos avaliados foram: teores de umidade, proteína e gordura, índices de extensão e profundidade da proteólise, pH, acidez titulável e extensão da lipólise, e os microbiológicos: coliformes termotolerantes, estafilococos coagulase positiva, Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. Utilizou-se um delineamento experimental em parcelas subdivididas em blocos, considerando-se a contagem bacteriana total como efeito principal, os dias de análise como subparcelas e os processamentos como blocos. Nos queijos Minas Frescal não houve interação dos níveis de CBT e período de armazenamentos para os teores de umidade, proteína, gordura e índices de extensão e profundidade da proteólise. Entretanto, houve efeito dos níveis de CBT para as porcentagens médias de proteína e índices de extensão e profundidade da proteólise, com valores superiores para o tratamento com alta CBT, para o teor de umidade houve efeito dos níveis de CBT, com médias de 63,46% e 60,77% para os tratamentos com baixa e alta CBT, respectivamente. Independentemente dos níveis de CBT, houve efeito do período de armazenamento, com decréscimo no teor médio de umidade e elevação nos teores médios de gordura, proteína e índice de extensão da proteólise. Para as características de pH e acidez titulável houve interação para os níveis de CBT e período de armazenamento, a partir do 14° dia. O pH do tratamento com baixa CBT apresentou variação discreta (6,59-6,49), enquanto que para o tratamento com alta CBT houve decréscimo de 6,72 para 6,15, o aumento de acidez foi verificado em ambos os tratamentos, porém em maior grau no grupo de alta CBT. A extensão da lipólise apresentou interação para os níveis de CBT e período de armazenamento, no 21° dia após a fabricação, com aumento no teor de ácidos graxos livres. Salmonella spp. e Listeria monocytogenes não foram encontradas nos queijos, 5,2% das amostras apresentaram coliformes termotolerantes, porém em contagem permitida pela legislação brasileira. No entanto, no 14° dia após a fabricação, 9,56% das amostras apresentaram estafilococos coagulase positiva, em contagens superiores aos padrões legais. O rendimento dos queijos Minas Frescal não sofreu influência dos níveis de CBT. Os resultados do trabalho indicaram que os queijos Minas Frescal produzidos com leites contendo CBT inferior a 50.000 UFC/mL, originam produtos mais estáveis e de melhor qualidade ao longo do período de armazenamento. / The Total Bacterial Count (TBC) is a criterion for the evaluation of hygienic-sanitary quality of milk. The present study had the purpose of evaluating the effect of TBC of the refrigerated raw milk, on the physical-chemical characteristics, microbiological and yield of the Minas Frescal cheese. Milks with two levels of TBC were used for cheese production: low TBC= mean of 18400 CFU/mL and high TBC= mean of 74100 CFU/mL. The manufacture of cheeses included: pasteurization of the milk, addition of ingredients (calcium chloride, sodium chloride and rennet), coagulation, mass cutting, desorption, forming and packaging. The cheeses were packed in plastic bags and analyzed on days 1, 7, 14 and 21 after manufacture and during that period were kept in a cold chamber at 6°C. The sequence of elaboration of the Minas cheeses were repeated 3 times, for each level of TBC, totaling 60 units per treatment. Five cheese units were analyzed per day, the physical-chemical parameters evaluated were: percentages of fat, humidity, protein, extension and depth of proteolysis, pH, titratable acidity and extent of lipolysis, and the micro-organisms evaluated were: thermotolerant coliforms, coagulase-positive staphylococci, Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. A completely randomized block design was used, considering TBC as the main effect, the days of analysis as sub parcels and the processing batches as the blocks. In the Minas Fresch cheese there weren\'t interaction for TBC levels and storage period for humidity, protein, fat contents and extension and depth of proteolysis. However, there were effect for TBC levels and protein percentages and extension and depth of proteolysis, with higher values for treatment with low TBC, for moisture content there was effect for TBC levels, with averages of 63.46% and 60.77% for treatments low and high TBC, respectively. Regardless of TBC levels, there were effect for the storage period, with decreases in the moisture content and elevation in the protein, fat contents and proteolysis extension index. For the characteristics pH and titratable acidity there were interaction for TBC levels and storage period, on day 14, for pH the treatment with low TBC did not present expressive variation (6.59-6.49), while the treatment high TBC presented a decrease from 6.72 to 6.15, the increase of acidity was observed in both treatments, but to a greater extent in the high TBC group. The extent of lipolysis showed interaction for TBC levels and storage period, on day 21, with elevation of content of free fatty acids. Salmonella spp. and Listeria monocytogenes were not found in the cheeses. 5.2% of the samples presented thermotolerant coliforms but in count allowed by the Brazilian legislation. However on the 14th day after the manufacture, 9.56% of the samples presented coagulase-positive staphylococci in scores above legal standards. The yield of the Minas Frescal cheeses was not influenced by TBC levels. The results of the study indicated that Minas Frescal cheeses produced with milks containing TBC of less than 50.000 CFU/mL produce more stable and better quality products throughout the storage period.
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Proteção de fontes de água em unidades de produção e vida familiares (UPVFS) no Sudoeste do Paraná: uma análise das ações desenvolvidas pela ACESI/STR, GETERR/UNIOESTE e EMATER-PR / Protection of water sources in family production and living units (UPVFs) in Southwest Paraná: an analysis of actions developed by ACESI/STR, GETERR/UNIOESTE and EMATER-PR

Schimitz, Luiz Antonio 27 March 2017 (has links)
Submitted by Fabielle Cheuczuk (fabielle.cheuczuk@unioeste.br) on 2017-09-05T14:29:47Z No. of bitstreams: 2 Luiz_Antonio_Shimitz_2017.pdf: 6567127 bytes, checksum: a36c5ab9d7cdbc0f090d04d314377f30 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-05T14:29:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Luiz_Antonio_Shimitz_2017.pdf: 6567127 bytes, checksum: a36c5ab9d7cdbc0f090d04d314377f30 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This research analyzes three projects of protection of springs / wells developed in the Southwest of Paraná by different institutions. For this purpose, 20 wells or wells were selected from the municipalities of Francisco Beltrão and Marmeleiro, considering the protections carried out, the characteristics of the surroundings and microbiological analyzes on water quality. In this dissertation, elements related to water and agricultural activities are discussed; Biological and chemical contamination of water; Diseases due to contact with it, insect ingestion and proliferation, and forms of pollution and water contamination. The problem of agricultural facilities and the inadequate disposal of human sewage in the contamination of springs is also highlighted. Regarding protection techniques, the main models used in the country and at the international level were discussed; The importance of maintaining cleaning, disinfection and the process of monitoring the microbiological quality of the source or protected well. In the experiences of the three projects, the objectives, established goals and techniques chosen by each project were analyzed, as well as the monitoring of water quality during project development. The UPVFs evaluated the maintenance status as well as the environmental situation of the spring environment through macroscopic analysis. In relation to protection techniques, three different types of protection techniques were identified: soil-cement system, spring protection box and vertical pipe, as well as three protections in shallow wells. In the diagnosis of the macroscopic parameters, two springs were classified in class "A" (optimal); Two in class "B" (good); Six in class "C", (reasonable); Three in class "D" (bad) and seven in class "E" (very bad). In this analysis it was detected that there are springs with good protection structures, while others need maintenance or reconstruction. The organoleptic water patterns were excellent in most cases. The location of the springs varies, so that there are protected sources in well preserved Permanent Preservation Areas (PPAs) or with little plant cover due to the existence of agricultural or livestock activities. In other cases, there are wells or wells near homes. In the microbiological analyzes, the results indicated that of the 20 analyzed points, with four samples of water collected by source or well, all the springs presented contaminations by total and thermotolerant coliforms, of which 15 had at least one sample with Escherichia coli contamination. Only five springs did not present this type of contamination. Of the 80 samples, only eight, from six sources, complied with Administrative Rule no. 2,914 / 2011 of the MS, being free of total coliforms and thermotolerant. The waters of the springs that presented the best microbiological quality are inserted in well preserved areas of APP or away from residence and agricultural facilities, or in sources where the farmer (a) performs periodic cleaning. It was concluded that there is a need to program urgent measures to improve the environmental situation of the sources that presented microbiological contaminations, ranging from improvements in protection, cleaning and disinfection, expansion of fenced areas and expansion of APP. In some more serious cases, it is suggested to change from the source to another more environmentally preserved. / Esta pesquisa analisa três projetos de proteção de nascentes/poços desenvolvidos no Sudoeste do Paraná por diferentes instituições. Para tanto, foram selecionadas 20 fontes ou poços dos municípios de Francisco Beltrão e Marmeleiro, considerando as proteções realizadas, as características do entorno e análises microbiológicas sobre a qualidade de águas. Nesta dissertação, são discutidos elementos relacionados à água e às atividades agropecuárias; a contaminação biológica e química da água; doenças devido ao contato com ela, ingestão e proliferação de insetos e formas de poluição e contaminação da água. Também é evidenciada a problemática das instalações agropecuárias e da disposição inadequada do esgoto humano na contaminação das nascentes. Quanto às técnicas de proteção, discutiu-se os principais modelos usados no país e em nível internacional; a importância da manutenção da limpeza, desinfecção e do processo de monitoramento da qualidade microbiológica da nascente ou do poço protegido. Nas experiências dos três projetos, analisaram-se os objetivos, metas estabelecidas e a técnicas escolhidas por cada projeto, bem como se ocorreu monitoramento da qualidade das águas durante o desenvolvimento do projeto. Nas UPVFs avaliou-se o estado de manutenção bem como a situação ambiental do entorno da nascente através das análises dos parâmetros macroscópicos. Em relação às técnicas de proteção, foram identificadas três tipos de técnicas diferentes de proteção de fontes: sistema solo-cimento, caixa protetora de nascente e tubo vertical, além de três proteções realizadas em poços rasos. No diagnóstico dos parâmetros macroscópicos, duas nascentes foram classificadas na classe “A” (ótima); duas na classe “B” (boa); seis na classe “C”, (razoável); três na classe “D” (ruim) e sete na classe “E” (péssima). Nesta análise detectou-se que há nascentes com boas estruturas de proteção, enquanto outras necessitam de manutenção ou reconstrução. Os padrões organolépticos da água estavam excelentes na maioria dos casos. As áreas de localização das nascentes variam, de modo que existem fontes protegidas em Áreas de Preservação Permanentes (APPs) bem preservadas ou com pouca cobertura vegetal devido à existência de atividades agrícolas ou pecuárias. Em outros casos, existem fontes ou poços próximos a residências. Nas análises microbiológicas, os resultados indicaram que dos 20 pontos analisados, com quatro amostras de água coletadas por fonte ou poço, todas as nascentes apresentaram contaminações por coliformes totais e termotolerantes, sendo que 15 delas apresentaram ao menos uma amostra com contaminação por Escherichia coli. Apenas cinco nascentes não apresentaram esse tipo de contaminação. Das 80 amostras, apenas oito, de seis nascentes, atenderam a Portaria nº 2.914/2011 do MS, estando isentas de coliformes totais e termotolerantes. As águas das nascentes que apresentaram melhor qualidade microbiológica estão inseridas em áreas de APP bem conservadas ou afastadas de residência e instalações agropecuárias, ou em fontes onde o(a) agricultor(a) realiza limpezas periódicas. Concluiu-se que há necessidade de implementar medidas urgentes para melhorar a situação ambiental das fontes que apresentaram contaminações microbiológicas, que vão desde melhorias nas proteções, limpeza e desinfecção, ampliação das áreas cercadas e a expansão da APP. Em alguns casos mais graves, sugere-se a troca da nascente por outra ambientalmente mais preservada.
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Efeito adicional do butirato de sódio na alimentação de leitões / Additional effect of sodium butyrate in piglets feeding

Caxias Junior, Osiris Antunes de 11 March 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-10T17:48:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Osiris_Antunes_Caxias_Junior.pdf: 679064 bytes, checksum: 852e69e55b04ad44a7dbe0c22c5025e2 (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the performance, the incidence of diarrhea and rectal microbiological profile in piglets in nursery phase fed diets with and without the addition of sodium butyrate 30% coated. For that, 80 crossbred commercial barrows and gilts were used, with average weight of 9.47 (1.03) kg, in a randomized complete block design with four treatments repeated twice in both blocks, and five pigs of same sex by each experimental unit. Treatments consisted in a combination of two experimental diets with and without inclusion of sodium butyrate coated as a supplementary product to the diet, and both sexes. The experimental diets were based on corn and soybean meal and were added or not 0.1% of sodium butyrate 30% coated to the diets from diet pre-initial I. The final body weight, daily weight gain, daily feed intake and feed conversion were evaluated. There was no significant effect of product tested on animal performance. There was a significant effect (p=0.05) of sodium butyrate in the incidence of diarrhea, where pigs fed diets containing sodium butyrate had lower rates of diarrhea than pigs who did not receive the product. Rectal microbiological profile was determined by quantitative analysis of Escherichia coli, Clostridium sulfite reducers and lactic acid bacteria having reduced count of E. coli from 14th to 28th day but no effect on other microorganisms evaluated. The blood parameters measured in two animals of each experimental unit have been within the normal physiological parameters of the species. The addition of sodium butyrate coated 30% did not affect the performance of piglets in nursery phase in experimental environment with reduced health challenges, however, it was effective in reducing diarrhea-causing gastrointestinal disorders / Este trabalho teve por objetivo avaliar o desempenho, a incidência de diarreia e o perfil microbiológico retal em leitões na fase de creche alimentados com dietas com e sem a adição de butirato de sódio 30% revestido. Foram utilizados 80 leitões, machos e fêmeas mestiços de linhagem comercial, com peso médio inicial de 9,47 (1,03) kg, em delineamento experimental de blocos casualizados com quatro tratamentos repetidos duas vezes nos dois blocos, e com cinco suínos de mesmo sexo por unidade experimental. Os tratamentos foram constituídos pela combinação de duas rações experimentais, com e sem inclusão do butirato de sódio revestido como produto suplementar à dieta, e dois sexos. As rações experimentais, à base de milho e farelo de soja, foram acrescidas ou não de 0,1% do butirato de sódio 30% revestido a partir da dieta pré-inicial I. Foram avaliados o peso corporal final, ganho de peso diário, consumo diário de ração e conversão alimentar. Não houve efeito significativo do produto testado sobre o desempenho dos animais. Houve efeito (p=0,05) do butirato de sódio na incidência de diarreia, em que suínos alimentados com dietas contendo o butirato de sódio apresentaram menores índices de diarreia do que os suínos que não receberam o produto. O perfil microbiológico retal foi determinado com análises quantitativas de Escherichia coli, Clostridium sulfito redutores e bactérias ácido-láticas apresentando redução da contagem de E. coli do 14° ao 28° dia, mas sem efeitos para os outros micro-organismos avaliados. Os parâmetros sanguíneos, mensurados em dois animais de cada unidade experimental, apresentaram-se dentro dos parâmetros fisiológicos normais da espécie. A inclusão do butirato de sódio 30% revestido não alterou o desempenho de leitões na fase de creche em ambiente experimental com reduzidos desafios sanitários, entretanto, foi eficiente na redução de distúrbios gastrointestinais causadores de diarreia
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Doseamento microbiológico de nistatina: desenvolvimento e validação de método empregando leitura cinética em microplaca / Microbiological assay of nistatin: development and validation of a method employing kinetic micro-plate reading

Carmen Rosa Jamil Pedroso 09 September 2014 (has links)
A FDA tem incentivado a indústria farmacêutica a implantar no seu sistema de controle de qualidade métodos rápidos para avaliação do produto durante seu processo de produção e/ou na sua forma final para comercialização. Na indústria farmacêutica, o doseamento microbiológico é amplamente utilizado pelo setor de Controle de Qualidade com objetivo de avaliar a eficácia e segurança do medicamento produzido, principalmente no que diz respeito a produção de antibióticos. No caso desses, a aplicabilidade de métodos rápidos é de suma importância a fim de se obter uma avaliação rápida e confiável do produto, garantindo assim a comercialização de medicamentos com a qualidade e segurança necessárias para o sucesso do tratamento terapêutico. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar método para doseamento microbiológico de nistatina, com leitura cinética em microplaca, perfeitamente intercambiável com o método tradicional de difusão em ágar, porém com redução do tempo de execução e de liberação do resultado final. Os parâmetros definidos para este ensaio foram: utilização de inóculo com 5% de Candida albicans (ATCC 10231), meio de cultura líquido, tempos de 48 horas para crescimento do micro-organismo e 8 horas para leitura das micro-placas, , temperatura de análise de 30 °C e absorbância de 630 nM. Os parâmetros avaliados no processo de validação, de acordo com os códigos oficiais vigentes, demonstraram que o método é sensível, robusto, linear (r = 0,97332), precisão (repetibilidade: 96 %, DPR= 6 % / precisão intermediária: 97 %; DPR = 7 %) e exato ( 97 %, DPR = 7 %). Em comparação ao método de difusão em ágar tradicional, o método desenvolvido demonstrou a mesma eficiência do método já utilizado, contemplando todos os parâmetros do processo de validação, com a vantagem de ser realizado em menor tempo e com o uso reduzido de material de análise, como meio de cultura, padrão e amostra. Em função disso, pode-se concluir que o método desenvolvido e validado além de representar uma tendência mundial, por ser efetuado de modo rápido, eficaz e econômico, é perfeitamente aplicável a rotina laboratorial. / The FDA have been encouraging the pharmaceutical industry to deploy in their system of quality control a rapid method for assessment of the product during its production process and/or in their final form for sale. In the pharmaceutical industry, the microbiological assay is widely used by the Quality Control sector to evaluate the efficacy and safety of the product produced, especially as regards the production of antibiotics. In such case, the applicability of rapid methods is very important in order to obtain a rapid and reliable evaluation of the product, thus ensuring the marketing of medicinal products with the quality and security necessary for the success of therapeutic treatment. The aim of this study was to develop and validate an method for the microbiological assay of Nystatin with kinetic micro-plate reading, perfectly interchangeable with the traditional method of agar diffusion, but with reduced time for implementation and release of the final result. The parameters set for this assay were using 5 % inoculum of Candida albicans (ATCC 10231), liquid culture medium, time of 48 hours for growth of micro-organisms and 8 hours for reading the micro-plate temperature analysis of 30 °C and absorbance of 630 nM. The parameters evaluated in the validation process, according to the current official codes, shows that the method is sensitive, robust, linear (r = 0,97332), precision (repeatability: 96 %, RDS = 6 % / inter-day precision = 97 %, RSD = 7%) and accurate (97 %, RDS = 7%). Compared to the traditional method of diffusion in agar, the developed method demonstrated the same efficiency of the method already used, covering all parameters of the validation process, with the advantage of being performed in less time and with reduced use of material for analysis, as the culture medium and standard sample. As a result, it can be concluded that the method developed and validated besides representing a global trend, being made fast, effective and economical way, is perfectly applicable to routine clinical practice.
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Detecção e contagem de Streptococcus agalactiae em leite bovino pela reação em cadeia da polimerase / Detection and counting of Streptococcus agalactiae in bovine milk by polymerase chain reaction

Nara Ladeira de Carvalho 31 July 2013 (has links)
O objetivo do presente estudo foi: a) comparar dois métodos de detecção e contagem de S. agalactiae, (cultura microbiológica e qPCR) em leite de vacas e de tanques; b) determinar a sensibilidade analítica e a repetibilidade do diagnóstico por qPCR em relação à cultura microbiológica para detecção de S. agalactiae em amostras compostas de leite de vaca e de tanque. Foram utilizadas amostras de leite de vaca (n=31) e de tanque (n=150), as quais foram submetidas à cultura microbiológica e contagem de S. agalactiae por cultura de microbiologia convencional e qPCR. Para avaliar a sensibilidade analítica, foi construída uma curva padrão com amostras de leite desnatado reconstituído estéril contaminado artificialmente com S. agalactiae (ATCC 13813). Em apenas duas amostras não foi possível amplificação de DNA, o que indica que a qPCR foi capaz de detectar S. agalactiae, em 96% e 97%, do leite de vaca e de tanque, respectivamente. Embora a técnica qPCR tenha apresentado alta sensibilidade analítica, não houve equivalência de resultados de contagem S. agalactiae entre os dois métodos propostos. Os coeficientes de variação interensaio utilizados para avaliar a técnica qPCR foram < 5%, o que demonstra que a técnica possui repetibilidade adequada. Portanto, não houve equivalência entre a contagem de S. agalactiae por cultura microbiológica padrão e a técnica de qPCR, provavelmente pela alta sensibilidade da técnica qPCR em quantificar DNA de células inviáveis. No entanto, a qPCR apresentou-se como uma técnica sensível para identificação de S. agalactiae em amostras de leite de vaca e de taque. / The aim of this study was to: a) to compare two methods of detection and enumeration of S. agalactiae (microbiological culture and qPCR) in cow`s milk and bulk tank milks, b) to determine the analytical sensitivity and repeatability of the diagnosis by qPCR in relation to microbiological culture for detection of S. agalactiae on composite samples of cow\'s milk and bulk tank milk. Samples of cow\'s milk (n = 31) and bulk tank milk (n = 150), which were submitted to microbiological culture and enumeration of S. agalactiae by conventional microbiology culture and qPCR. To evaluate the analytical sensitivity, a standard curve was made with samples of sterile reconstituted skim milk artificially contaminated with S. agalactiae (ATCC - 13813). In two samples was not possible the amplification of DNA, indicating that qPCR was able to detect S. agalactiae, 96% and 97% cow\'s milk and bulk tank milk, respectively. Although the technique has presented qPCR high analytical sensitivity, there was no equivalent result of counting S. agalactiae between the two proposed methods. The interassay coefficients of variation technique used to evaluate the qPCR were <5%, which demonstrate that the technique has adequate repeatability. So there was no equivalence between the counts of S. agalactiae by standard microbiological culture and qPCR technique, probably due to the high sensitivity of qPCR technique to quantify DNA of unviable cells. However, the qPCR presented as a sensitive technique for identifying S. agalactiae in samples of cow\'s milk and bulk tank milk.

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