O fungo Sclerotinia sclerotiorum, agente causal do mofo branco, encontra-se disseminado em todo o país e afeta mais de 400 espécies de plantas, dentre elas a cultura da soja, causando danos consideráveis no rendimento. A transmissão do patógeno ocorre por meio de sementes contendo micélio dormente ou pela presença de escleródios no lote, os quais podem permanecer viáveis por um longo período, dificultando o manejo da doença. Este trabalho teve como objetivos verificar a viabilidade do patógeno em sementes durante o armazenamento e seu efeito sobre o poder germinativo; comparar tamanhos de amostras de sementes visando à detecção do fungo; e avaliar a sensibilidade in vitro de S. sclerotiorum a fungicidas. Para avaliação da sobrevivência do patógeno, sementes de soja foram inoculadas, artificialmente, com três isolados de S. sclerotiorum, e armazenadas em duas condições, câmara fria e seca (20 ºC e 45% UR) e ambiente não controlado, durante oito meses. A cada dois meses foram realizados testes de sanidade pelo meio de cultura ágar-bromofenol (Neon), utilizando-se 4 repetições de 100 sementes, e testes de germinação, com 4 repetições de 50 sementes, pelo método do rolo de papel. No experimento de amostragem foram avaliadas dez amostras de sementes de soja pelo método do meio Neon, comparando-se quatro tamanhos de amostra: 400, 800, 1600 e 2400 sementes. Para avaliação da sensibilidade in vitro de S. sclerotiorum a fungicidas, foram utilizados 13 ingredientes ativos, em 7 doses e 5 repetições. Os valores da concentração inibitória de 50% (CI50) e 100% (CI100) foram estimados com base na percentagem de inibição do crescimento micelial. Além disso, realizaram-se a quantificação e pesagem dos escleródios formados após 15 dias de incubação. A presença do patógeno S. sclerotiorum, afetou negativamente a germinação das sementes, com redução média de 32% em relação à testemunha. Verificou-se diferença entre os isolados com relação à agressividade. O patógeno sobreviveu nas sementes em ambos os ambientes de armazenamento, porém, em ambiente controlado a redução na geminação das sementes foi de 14% e na incidência do fungo de 16%, enquanto que, em laboratório, esta redução foi de 23% na germinação e de 62% na incidência. Não houve diferença estatística com relação à quantidade de sementes amostradas na detecção de S. sclerotiorum, entretanto, constatou-se maior frequência de ocorrência do patógeno à medida que o número de sementes amostrado foi maior. Todos os fungicidas foram capazes de reduzir o crescimento micelial de S. sclerotiorum, bem como a produção de escleródios, sendo que os ingredientes ativos piraclostrobina, carbendazim, tiabendazol e tiofanato metílico, além de apresentarem CI50 inferior a 1 mg L-1, também inibiram totalmente a formação de escleródios em concentrações inferiores a 5 mg L-1. / The fungus Sclerotinia sclerotiorum, the causal agent of white mold is spread throughout the country and affects more than 400 species of plants, including soybean, causing considerable decrease in yield. The pathogen transmission occurs through seeds with dormant mycelium or by the presence of sclerotia in the lot, which can remain viable for a longer period, making hard the disease management. This study aimed to verify the viability of the pathogen in seeds during the storage period and its effect on germinative power; compare sizes of seed samples to determine the presence of the fungus; and to evaluate the in vitro sensibility of S. sclerotiorum to fungicides. To determine the pathogen survival, soybean seeds were inoculated artificially with three isolates of S. sclerotiorum, and stored into two conditions, cold and dry chamber (20 °C and 45% RU) and in uncontrolled environment, for eight months. Every two months health tests were performed by culture media bromophenol agar (Neon), using 4 repetition of 100 seeds, and germination tests, with 4 repetition of 50 seeds, by the method of the paper roll. During the experiment of sampling, ten samples of soybean seeds were evaluated by the method of media Neon, comparing four sample sizes: 400, 800, 1600 and 2400 seeds. To evaluate the in vitro sensibility of S. Sclerotinia to fungicides were used 13 active ingredients, in 7 doses and 5 repetitions. The values of the 50% inhibitory concentration (IC50) and 100% (IC100) were estimated based on the percentage inhibition of the mycelial growth. In addition, it was performed the quantification and weighing of sclerotia formed after 15 days of incubation. The pathogen S. sclerotiorum in soybean seeds affected negatively the germination of seeds, with an average reduction of 32% compared to the control. There was difference between the isolates in relation to aggressiveness. The pathogen survived in seeds in both storage environments, however, under controlled environment, the decrease in the germination of the seeds was 14% and in its incidence was 16%, while in laboratory this reduction was 23% in the germination and 62% in the incidence. There was no statistical difference in the quantity of seeds sampled in the detection of S. sclerotiorum, however, a higher frequency of pathogen occurrence was verified as the number of sampled seeds was enlarged. All fungicides were able to reduce the mycelial growth of S. sclerotiorum and sclerotia production, and the active ingredients pyraclostrobin, carbendazim, thiabendazole and thiophanate methyl, besides having IC50 of less than 1 mg L-1 also completely inhibited the formation of sclerotia in concentrations less than 5 mg L-1.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-05T15:38:29Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 489618 bytes, checksum: 7609724ea0ef2f3496bf38ea80688185 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-05T15:38:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 489618 bytes, checksum: 7609724ea0ef2f3496bf38ea80688185 (MD5) Previous issue date: 2015-07-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O mofo-branco (MB), causado pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum, é doença séria em lavouras irrigadas de feijão. O uso de cultivares com resistência parcial ao MB faz parte do manejo da doença, e pode reduzir aplicações de fungicida para seu controle. Avaliou-se a possibilidade de se reduzir as aplicações de fungicida em genótipo com resistência parcial ao MB. Ensaios foram conduzidos em três municípios (Coimbra, Viçosa e Oratórios) da Zona da Mata de Minas Gerais, no outono-inverno, com irrigação por aspersão, em área com histórico de MB. Os tratamentos foram dispostos no arranjo fatorial 3 x 4: genótipos (VC 17, Pérola ou BRSMG Madrepérola) e aplicações de fungicida (0, 1, 2 ou 3). A linhagem VC 17 está entre os genótipos com maior resistência de campo ao MB. A cultivar Pérola apresenta resistência moderada e a cultivar BRSMG Madrepérola é suscetível. O fungicida fluazinam (0,625 L/ha) foi aplicado na floração e repetido entre 7 e 10 dias depois. Foi usado o delineamento em blocos ao acaso, com quatro repetições. Em média, a intensidade (incidência + severidade) do MB variou de baixa (Coimbra) a moderada/alta (Oratórios); e a produtividade de grãos, de 2638 a 3556 kg/ha. Em Viçosa e Oratórios a pressão da antracnose foi alta, e esse foi um dos fatores responsáveis pela menor produtividade dos genótipos Pérola e VC 17, em relação à cultivar BRSMG Madrepérola. Em Viçosa, o VC 17 exibiu menos sintomas de MB que as cultivares Pérola e BRSMG Madrepérola. Em Coimbra e Oratórios, os sintomas de MB nos genótipos VC 17 e Pérola foram semelhantes, mas, em geral, esses genótipos foram menos prejudicados por essa doença que a cultivar BRSMG Madrepérola. Em Oratórios, houve significativa redução dos sintomas de MB com duas aplicações do fungicida, independente do genótipo, enquanto em Coimbra só a BRSMG Madrepérola teve redução do MB, com uma aplicação do fungicida. Em Viçosa, a cultivar BRSMG Madrepérola teve redução da doença com até duas aplicações do fluazinam, enquanto a cultivar Pérola apresentou redução do MB com uma aplicação. Nesse município, o VC 17 não teve redução do MB com o uso de fungicida. Portanto, os resultados de Coimbra, em que houve baixa pressão de MB, e de Viçosa (baixa/moderada intensidade de MB) sustentam, parcialmente, a nossa hipótese de que genótipos com alta resistência parcial ao MB necessitam de menor número de aplicações de fungicida em relação a genótipos com baixa resistência parcial. Entretanto, os resultados obtidos em Oratórios, onde a intensidade do MB foi moderada/alta não sustentam nossa hipótese. Os efeitos da antracnose, além dos efeitos do MB, influenciaram a produtividade, o que comprometeu, em parte, o nosso estudo. Logo, estudos adicionais, com bom controle de doenças foliares, sobretudo com alta pressão do MB, são necessários para testar com maior precisão essa hipótese. / White mold (WM), caused by the fungus Sclerotinia sclerotiorum, is a serious disease in irrigated bean crops. The use of cultivars with partial resistance to WM is part of disease management, and can reduce fungicide applications for its control. We evaluated the possibility of reducing fungicide applications in genotype with partial resistance to WM. Trials were conducted in three districts (Coimbra, Viçosa and Oratórios) of Zona da Mata region, State of Minas Gerais, in the fall-winter, with sprinkler irrigation in an area with a history of WM. The treatments were arranged in factorial 3 x 4: genotypes (VC 17 Pérola or BRSMG Madrepérola) and fungicide applications (0, 1, 2 or 3). The line VC 17 is among the genotypes with higher field resistance to WM. The cultivar Pérola has intermediate resistance and the cultivar BRSMG Madrepérola is susceptible. The fungicide fluazinam (0.625 L/ ha) was applied in the flowering and repeated between 7 and 10 days after. A randomized block design with four replications was used. On average the intensity (severity + incidence) of WM ranged from low (Coimbra) to moderate/high (Oratórios); and grain yield, from 2638 to 3556 kg/ha. In Viçosa and Oratórios, the pressure of anthracnose was high, and this was one of the factors responsible for the lower yield of the genotypes Pérola and VC 17, in relation to the cultivar BRSMG Madrepérola. In Viçosa, the line VC 17 showed fewer symptoms of WM than the cultivars Pérola and BRSMG Madrepérola. In Coimbra and Oratórios, the symptoms of WM in the genotypes VC 17 and Pérola were similar, but in general these genotypes were less affected by this disease than the cultivar BRSMG Madrepérola. In Oratórios, symptoms of WM reduced significantly with two fungicide applications, regardless of the genotype, while in Coimbra only BRSMG Madrepérola has a reduction of WM with one fungicide application. In Viçosa, the cultivar BRSMG Madrepérola had reduction of disease with up to two fluazinam applications, while the cultivarPérola had reduction of WM with one application. In this district, the line VC 17 had no reduction of WM with fungicide. Therefore, the results of Coimbra, where there was low pressure of WM, and Viçosa (low/moderate intensity of WM) support, in part, our hypothesis that genotypes with high partial resistance to WM require fewer fungicide applications compared to genotypes with low partial resistance. However, the results obtained in Oratórios, where the intensity of WM was moderate/high did not support our hypothesis. The effects of anthracnose, besides the effects of WM affected yield, which compromised, in part, our study. Thus, additional studies with good control of foliar diseases, especially with high pressure of WM, are required to test this hypothesis with higher accuracy.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2014-10-08T18:44:27Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Renata Silva Brandão - 2012.pdf: 881645 bytes, checksum: 6eb66647a421b6919caad44ecf9145fd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-10-09T11:25:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Renata Silva Brandão - 2012.pdf: 881645 bytes, checksum: 6eb66647a421b6919caad44ecf9145fd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-09T11:25:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Renata Silva Brandão - 2012.pdf: 881645 bytes, checksum: 6eb66647a421b6919caad44ecf9145fd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2012-09-10 / The fungus Trichoderma spp., is a microorganism naturally found in soil, which presents an important ecological function, as part of the decomposition and mineralization of plant residues, contributing to the availability of nutrients to plants. It is considered also a natural biofungicide, which reduces up to 100% the chances of achieving any fungus culture. The fungus Trichoderma is a fast growing, hence the advantage of use as a biocontrol agent in large scale, produces a variety of antifungal metabolites, including antibiotics and enzymes that degrade the cell wall of certain pathogens, is related to growth promotion in plants and the induction of resistance. The fungus Sclerotinia sclerotiorum is the etiological agent of the disease known as white mold in different cultures, such as soft rot, white mold, tipping pre-emergent and post-emergent plants. It is estimated that about 300 plant species are susceptible to S. sclerotiorum, such as the common bean (Phaseolus vulgaris) and soybean (Glycine max), both of great economic importance. Thus, this work needs to evaluate physiological, biochemical and molecular in common bean using the inductor Trichoderma harzianum against Sclerotinia sclerotiorum. Three isolates of T. harzianum and one isolate S. sclerotiorum were selected for inoculation in bean plants. In plants inoculated with isolates of T. harzianum 475/02 was possible to observe higher values related to the physiological aspects, as the plants inoculated with T. harzianum 479/01 had the highest enzyme activities in the R5 stage. Treatments with more pathogen T. harzianum showed the highest expression of the genes of interest, demonstrating greater efficiency when the two fungi act together. / O fungo Trichoderma spp., é um microrganismo naturalmente encontrado no solo, que apresenta uma importante função ecológica, pois participa da decomposição e mineralização dos resíduos vegetais, contribuindo com a disponibilização de nutrientes para as plantas. Ele é considerado, também, um biofungicida natural, que reduz em até 100% as chances de qualquer fungo atingir a cultura. O Trichoderma é um fungo de crescimento rápido, daí a grande vantagem de utilização como agente de biocontrole em larga escala, produz uma variedade de metabólitos antifúngicos, incluindo antibióticos e enzimas que degradam a parede celular de certos patógenos, está relacionado a promoção de crescimento em plantas e a indução de resistência. O fungo Sclerotinia sclerotiorum é o agente etiológico da doença conhecia como mofo branco em diferentes culturas, como podridão mole, mofo branco, tombamento pré-emergente e pós-emergente de plantas. Estima-se que cerca de 300 espécies vegetais são suscetíveis a S. sclerotiorum, a exemplo do feijoeiro (Phaseolus vulgaris) e da soja (Glycine max), ambas de grande importância econômica. Sendo assim, este trabalho teve por objetivo avaliar aspectos fisiológicos, bioquímicos e moleculares em feijoeiro comum com o uso do indutor Trichoderma harzianum contra Sclerotinia sclerotiorum. Três isolados de T. harzianum e um isolado S. sclerotiorum foram selecionados para inoculação em plantas de feijão. Nas plantas inoculadas com os isolados de T. harzianum 475/02 foi possível observar maiores valores relacionados aos aspectos fisiológicos, já as plantas inoculadas com o T. harzianum 479/01 apresentaram as maiores atividades enzimáticas no estágio R5. Os tratamentos com patógeno mais o T. harzianum, apresentaram as maiores expressões dos genes de β1,3 glucanase, quitinase, peroxidade e lipoxigenase, demonstrando uma maior eficiência na produção quando os dois fungos atuam juntos.

The cultivation of flowers is, in Brazil, very recent and little known species have a high ornamental potential, Cartamus is such a species and there are cultivars for the production of oil and as well as for ornamental pourposes. Being a recent crop in Brazil, little is known about its associated diseases, specially those that affect the seeds and the soil borne, such as white mold that causes great losses to several crops. Six experiments were conducted with the objectives of testing the reaction of the crop to isolates of Sclerotinia sclerotiorum, the biocontrol of S. sclerotiorum and of pathogens associated to the seeds, and the effect of the biocontrollers on cartamus plant growth. Isolates of the pathogen from chrisantemum, lettuce, soybean, and carrots, as well as isolates of Trichoderma sp. (ETSR 20 e TC 1.15) and comercial products of Trichoderma spp. (Agrotrich and Trichodel®) were used. In the reaction test, the cartamus crop was more severely attacked by the isolate obtained from lettuce, which when incorporated to commercial substrate did not promote the development of the disease in plant, but reduced plant growth. Trichodel® was the product that promoted the highest growth of plants when incorporated to the substrate, even in the absence of the pathogen. The product more efficient in controlling seed pathogens was Agrotrich. In the growth of seedlings, the isolates ETSR20 and TC1.15 were the best, when applied to the seeds and the latter promoted the best emergency of seeds in commercial substrate. Therefore, the Trichoderma based products can be used in the control of seed pathogens and growth promotion of cartamus plants as seed or substrate treatment. There are differences in disease severity on cartamus among isolates of S. sclerotiorum from different crops and its presence reduces the crop s growth, even in the absence of visible symptoms / A floricultura, no Brasil, é relativamente recente, existindo espécies pouco conhecidas com alto potencial ornamental. O cártamo é uma delas e possui cultivares tanto para a produção de óleo quanto para ornamentação. Por ser uma cultura recente no Brasil, pouco se conhece sobre as doenças associadas a ela, especialmente as que afetam as sementes e as veiculadas pelo solo, como o mofo branco, que causa grandes prejuízos a diversas culturas. Seis experimentos foram conduzidos com o objetivo de testar a reação da cultura a isolados de Sclerotinia sclerotiorum, o biocontrole de patógenos associados às sementes e de Sclerotinia sclerotiorum e o efeito dos biocontroladores no crescimento de plantas de cártamo. Foram utilizados isolados de Sclerotinia sclerotiorum das culturas do crisântemo, alface, soja e cenoura, e isolados de Trichoderma spp. (ETSR 20 e TC 1.15) e formulados comerciais à base de Trichoderma spp. (Agrotrich e Trichodel®). No teste de reação, a cultura do cártamo foi mais severamente atacada pelo isolado proveniente da alface, o qual, quando incorporado ao substrato comercial, não promoveu o desenvolvimento da doença nas plantas, porém prejudicou seu crescimento. Trichodel® foi o produto que maior crescimento proporcionou às plantas quando incorporado ao substrato, mesmo sem a presença do patógeno. O produto mais eficiente no controle dos patógenos das sementes foi o formulado comercial Agrotrich. No crescimento de plântulas, os isolados ETSR 20 e TC 1.15 se sobressaíram quando aplicados às sementes e este obteve melhor resultado na emergência de plântulas em substrato. Assim, os produtos a base de Trichoderma são viáveis para controle de patógenos de sementes e crescimento de plantas tanto no tratamento de sementes como do substrato. Existem diferenças na severidade da doença em cártamo entre isolados de Sclerotinia sclerotiorum oriundos de diferentes culturas e sua presença reduz o crescimento da cultura, mesmo na ausência de sintomas visíveis

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-04-18T16:16:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 350102 bytes, checksum: f63374577f4c51e4a93a1ed9f2503a88 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T16:16:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 350102 bytes, checksum: f63374577f4c51e4a93a1ed9f2503a88 (MD5) Previous issue date: 2015-07-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Trichoderma spp., antagonistas a vários fitopatógenos, são comumente isoladas do solo, da rizosfera, e como endofíticos. Nosso objetivo foi selecionar isolados de Trichoderma spp. nas culturas do feijão e da soja em Minas Gerais e avaliar o antagonismo a S. sclerotiorum, agente causal do mofo-branco de ambas as culturas. Obtiveram-se 48 isolados, sendo 30 da rizosfera, 11 epifíticos, quatro endofíticos e três de restos culturais. Com base no sequenciamento das regiões ITS, TEF1-α e RPB2, incluíram-se os isolados em oito espécies de Trichoderma: 29 como T. harzianum; 5 como T. koningiopsis; 4 como T. hamatum; 4 como T. atroviride; 2 como T. asperelloides; 2 como T. longibrachiatum; 1 como T. asperellum e 1 como T. neokoningii. Oito isolados inibiram completamente o crescimento do patógeno em teste de pareamento. Oito isolados foram os mais eficientes no crescimento em meio de cultura. Vinte e quatro isolados foram os mais eficientes em parasitar escleródios no solo, com 79-99% de eficiência. Em ágar-água, 31 isolados inibiram a germinação miceliogênica entre 78-100%, e sete isolados inibiram a germinação carpogênica em mais de 85%. Sete isolados inibiram 100% a infecção em folíolos destacados e um isolado inibiu em 79% a infecção em hastes destacadas. Dois isolados de T. harzianum, UN34 e IM2, foram os mais promissores: UN34 por reduzir a sobrevivência e as germinações miceliogênica e carpogênica de escleródios; e IM2 por reduzir a infecção em folíolos e hastes destacados. De acordo com os resultados, existe um potencial dos isolados de Trichoderma spp. no controle biológico de S. sclerotiorum. / Trichoderma spp., antagonists to plant pathogens, are commonly isolated from soil, rhizosphere, and as endophytic. We aimed to select Trichoderma spp. isolates from bean and soybean crops in Minas Gerais and to evaluate their antagonism to S. sclerotiorum, the causal agent of white mold on both crops. We got 48 isolates: 30 rhizospheric, 11 epiphytic, four endophytic, and three isolates from crop debris. Based on the sequencing of ITS, TEF1-α, and RPB2 regions, the isolates were classified in eight Trichoderma species: 29 as T. harzianum, 5 as T. koningiopsis, 4 as T. hamatum, 4 as T. atroviride, 2 as T. asperelloides; 2 as T. longibrachiatum, 1 as T. asperellum, and 1 as T. neokoningii. Eight isolates completely inhibited pathogen growth in dual culture test. Eight isolates were the most efficient in growing in culture medium. Twenty-four isolates were the best in parasitizing sclerotia in soil, with 79-99% of efficiency. In water-agar, 31 isolates inhibited miceliogenic germination from 78-100%, and seven isolates inhibited the carpogenic germination by more than 85%. Seven isolates inhibited 100% infection on detached leaflets and one isolate inhibited 79% infection on detached stems. Two isolates of T. harzianum, UN34 and IM2, were the most promising: UN34 for reducing the survival and both miceliogenic and carpogenic germination of sclerotia; and IM2 for reducing infection in both leaflets and stems. According to the results, there is a potential of the isolates of Trichoderma spp. in the biocontrol of S. sclerotiorum.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 550307 bytes, checksum: 0df08c84d82f26ea26cca91aae2a1b91 (MD5) Previous issue date: 2011-07-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Knowledge about the genetic structure of the population of Sclerotinia sclerotiorum can help decide the most adequate white mold management strategies, especially the development and use of resistant cultivars. The objective of this work was to study the genetic structure of populations of S. sclerotiorum on bean crops in Minas Gerais. We quantified the genetic variability of 127 isolates from four beanproducing regions (subpopulations), based on eight microsatellite markers. There was high genetic variability, with most variation due to differences among individuals within subpopulations. We identified 59 alleles and 65 haplotypes, with 49 haplotypes represented by a single isolate. There was no evidence of random mating in the subpopulations. Highest clonal fraction was recorded for the Zona da Mata subpopulation. The total population is moderately structured. However, there was no genetic differentiation between subpopulations of Noroeste, Zona da Mata, and Triângulo. However, all three subpopulations differed from that of Sul. Six cluster of isolates were detected, with evidence of immigrants among them. Most of the isolates from Sul subpopulation constituted a single group. In other groups there was mixing of individuals from other subpopulations. The high genetic variability observed in the population of S. sclerotiorum warns for greater care in the selection of bean genotypes resistant to white mold. The selection process should be performed in different regions of Minas Gerais in order to minimize the risk of supplanting resistance. / O conhecimento sobre a estrutura genética da população de Sclerotinia sclerotiorum é importante para direcionar as estratégias de controle do mofo-branco do feijoeiro, principalmente o desenvolvimento e uso de cultivares resistentes ao patógeno. Objetivou-se estudar a estrutura genética das populações de S. sclerotiorum em lavouras de feijão em Minas Gerais. Analisaram-se 127 isolados provenientes de quatro regiões produtoras de feijão (subpopulações) em Minas Gerais quanto ao polimorfismo identificado por oito marcadores microssatélites. Houve alta diversidade genética, com maior parte da variação decorrente de diferenças entre indivíduos dentro das subpopulações. Identificaram-se 65 haplótipos, sendo 49 representados por um único isolado e 59 alelos. Não houve evidência de acasalamento aleatório nas subpopulações. Maior fração clonal foi registrada na subpopulação da Zona da Mata. A população está moderadamente estruturada. Contudo, não houve diferenciação genética entre as subpopulações do Noroeste, Zona da Mata e Triângulo Mineiro. Houve diferença da subpopulação Sul em relação às demais. Pela análise de agrupamento detectou-se a existência de seis grupos, com a presença de imigrantes entre eles. A maioria dos isolados da subpopulação Sul constituiu um único grupo. Nos outros grupos houve mistura de indivíduos das diferentes subpopulações. A alta variabilidade genética observada nas populações de S. sclerotiorum, implica em maiores cuidados na seleção de materiais resistentes ao mofo branco. O processo de seleção deve ser realizado em diferentes regiões de Minas Gerais a fim de minimizar os riscos de suplantação de resistência.

The fungus Sclerotinia sclerotiorum causes major losses in the production of beans. Because it is a soil fungus, it is difficult to control and the biological control with Trichoderma sp. is a viable alternative. There are many factors that can interfere with the performance of the antagonist in biological control, such as pH, amount of water in the soil, soil type and nutrients. The latter are present in abundance in the soil by fertilization performed to meet the needs of the crop, but little is known about their interference in the performance of biological control of S. sclerotiorum by the antagonist Trichoderma sp. Thus, the objectives of this study were to evaluate the influence of NPK (nitrogen, phosphorus and potassium) on the growth of different isolates of Trichoderma sp. and S. sclerotiorum in vitro, as well as the performance of Trichoderma sp. on the in vitro and in vivo control of Sclerotinia sp. and to verify the effect of Trichoderma sp. in the NPK uptake by bean plants. The study was conducted in laboratory and greenhouse in Santa Maria, RS, Brazil. The parameters measured were mycelial growth, sporulation of Trichoderma sp. and percentage of control of the pathogen in vitro. In vivo the incidence of white mold, plant height, root length, leaf number, fresh and dry weight of shoot and root and stem diameter of bean plants were evaluated. The population of Trichoderma sp. in soil and NPK content in plant tissue of the shoot bean were also evaluated. The highest micelial growth was achieved by Trichoderma sp. UFSMT16 for all doses of NPK in vitro, differing from the isolate UFSMT17 only at rates of 75 to 125% of NPK. In the quantification of spores of Trichoderma sp., the isolate UFSMT17 had the highest sporulation in the majority of the different doses of NPK. The isolate UFSMT16 obtained better results in the test of paired cultures, with the highest performance at doses of 50, 75 and 100% NPK (notes 1.00, 1.25 and 1.00, respectively). In the final population, Trichoderma sp. UFSMT15.1 obtained higher CFU g-1 soil (1.3 x 104), differing significantly from the isolate UFSMT16 and the control treatment. For the variable content of phosphorus in plant tissue of the shoot, the interaction between Trichoderma sp. in the absence and presence of S. sclerotiorum associated with doses of NPK, there was statistical difference between the isolates of Trichoderma spp. UFSMT15.1, UFSMT16 and the control treatment at the doses of 25 and 125% of NPK, in the presence and at the dose of 25% in the absence of S. sclerotiorum. It was concluded that the levels of nitrogen, phosphorus and potassium (NPK) in the Elad medium influence growth and reproduction of the genus Trichoderma in vitro; isolates of Trichoderma sp. (UFSMT15.1, UFSMT16, and UFSMT17) have higher growth of colonies in vitro than isolates of S. sclerotiorum, regardless of the dose of NPK; the levels of 25, 50, 75,100 NPK and 125% of the growth medium Elad interfere with effective control of S. sclerotiorum by isolates UFSMT15.1, UFSMT16, and UFSMT17 of Trichoderma sp.; the population of Trichoderma sp. is not affected by varying the application of different doses of NPK in soil and the presence of S. sclerotiorum reduced the height of the aerial parts of beans, even without visible symptoms of the disease, while Trichoderma sp. UFSMT15.1 UFSMT16 and increased in soil with low application of NPK; and UFSMT16 and UFSMT15.1 isolates in the presence and absence of S. sclerotiorum in different levels of NPK interfere with the amount of phosphorus in the shoots of beans, but have no significant effect on the content of nitrogen and potassium. / O fungo Sclerotinia sclerotiorum causa grandes perdas na produção de grãos de feijão. Por ser um fungo de solo, é de difícil manejo sendo o controle biológico com Trichoderma sp. uma alternativa viável. Existem muitos fatores que podem interferir no desempenho do antagonista no controle biológico, como pH, quantidade de água no solo, tipo de solo e nutrientes. Estes estão presentes em abundância no solo pela adubação realizada para suprir as necessidades da cultura, porém pouco se sabe sobre a interferência no desempenho do controle biológico de S. sclerotiorum pelo antagonista Trichoderma sp. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram avaliar a influência de doses de NPK (nitrogênio, fósforo e potássio) no crescimento de diferentes isolados de Trichoderma sp. e S. sclerotiorum in vitro, assim como o desempenho de Trichoderma sp. no controle in vitro e in vivo de Sclerotinia sp. e verificar a ação de Trichoderma sp. na absorção de NPK pelo feijoeiro. O trabalho foi realizado em laboratório e casa de vegetação em Santa Maria, RS, Brasil. Os parâmetros avaliados foram crescimento micelial, esporulação de Trichoderma sp. e porcentagem de controle do patógeno in vitro. In vivo foram avaliadas a incidência de mofo branco, altura de planta, comprimento de raízes, número de folhas, massa fresca e seca de parte aérea e raiz e diâmetro de colo de plantas de feijoeiro. Também se avaliou a população de Trichoderma sp. no solo e o teor de NPK em tecido vegetal da parte aérea do feijoeiro. O maior crescimento micelial foi obtido pelo isolado de Trichoderma sp. UFSMT16 para todas as doses de NPK in vitro, diferindo do isolado UFSMT17 somente nas doses de 75 a 125% de NPK. Na quantificação de esporos de Trichoderma sp., o isolado UFSMT17 apresentou a maior esporulação na maioria das diferentes doses de NPK. O isolado UFSMT16 obteve melhor resultado no teste de pareamento de culturas, apresentando o maior desempenho nas doses de 50, 75 e 100% de NPK (notas de 1,00, 1,25 e 1,00, respectivamente). Na população final o isolado de Trichoderma spp. UFSMT15.1 obteve maior média de UFCs g-1 de solo (1,3 x 104), diferindo estatisticamente do isolado UFSMT16 e da testemunha. Para a variável teor de fósforo na parte aérea, na interação entre isolados de Trichoderma sp. na ausência e presença de S. sclerotiorum associados a doses de NPK, observou-se diferença estatística entre os isolados de Trichoderma spp. UFSMT15.1, UFSMT16 e tratamento testemunha nas doses de 25 e 125% de NPK, na presença e na dose de 25% na ausência de S. sclerotiorum. Concluiu-se que as doses de nitrogênio, fósforo e potássio (NPK) no meio de cultura Elad interferem no crescimento e reprodução do gênero Trichoderma in vitro; os isolados de Trichoderma sp. (UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17) têm maior crescimento de colônias in vitro, do que os isolados de S. sclerotiorum, independente da dose de NPK; as doses de 25, 50, 75,100 e 125% NPK da estabelecida para o meio de cultura Elad interferem na eficácia de controle de S. sclerotiorum pelos isolados UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17 de Trichoderma sp.; a população de Trichoderma sp. não é afetada pela variação da aplicação de diferentes doses de NPK em solo; a presença de S. sclerotiorum diminuiu a altura de parte aérea do feijoeiro, mesmo na ausência de sintomas visíveis da doença, enquanto que os isolados de Trichoderma sp. UFSMT15.1 e UFSMT16 aumentaram em solo com baixa aplicação de NPK; os isolados UFSMT15.1 e UFSMT16 na presença e ausência de S. sclerotiorum em diferentes doses de NPK interferem na quantidade de fósforo na parte aérea do feijoeiro, porém não apresentam efeito significativo no teor de nitrogênio e potássio.

Made available in DSpace on 2017-07-21T18:53:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonio Carlos Prestes Pereira.pdf: 1053454 bytes, checksum: 52e924eda49d19a3259e2ed89de1ae71 (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / The Brazilian annual production of white mold cheese is around 2,170 tons, the Brie type totals 75% of the production whereas the Camembert type totals 25%; most of the production comes from the states of Minas Gerais and Paraná. Nonetheless, Brazilian legislation does not have a specific Technical Regulation for the Identity and Quality (RTIQ in the Portuguese acronym) for these types of fine cheese, which makes it difficult to have a national standard product “Type”. The aim of this study is to describe the physico-chemical and microbiological properties of these kinds of cheese based on the current official legislation and on an analytical methodology. In addition, the study proposes a specific RTIQ (Technical Regulation for Identity and Quality) for humidity, fat, protein, defatted dry extract, ash, calcium and sodium. The study used a descriptive and experimental methodological approach, which included the collection of Brie and Camembert cheese samples from the summer and winter productions, and a French sample of the same types of cheese to learn about the composition of through the year. The average weight of Brie cheese was 119.87 g, with an average height of 30.31 mm and an average diameter of 131,28 mm. The average whiteness index (WI) of the surface was 70.63 and 89.37 for the center. The texture profile in average values was as follows: -590.12 g for adhesion, 0.88 g, 0.73 for hardness, 0.73 for cohesiveness, 151,86 for chewiness and 0.26 for resilience. The physico-chemical composition of Brie heese in a 95% reliable interval was the following: moisture between 41.80 and 53.10 g.100g-1, fat between 49,65 and 62,59 g.100g-1, defatted dry extract 19.43 and 23.23 g.100g-1, protein between 14.20 and 20.00 g.100g-1, carbohydrate between 1.80 and 7.60 g.100g-1, ashes between 2.80 and 3.40 g.100g-1, the amount of sodium ranged between 112.80 and 661.20 mg.100g-1 and an amount of calcium between 323.90 and 848.10 g.100g-1. The average weight of Camembert cheese was 195.74 g, with an average height of 33.44 mm and an average diameter of 88.05 mm. The average whiteness index (WI) for the surface was 91.82 and 72.29 for the center. The texture profile in average values was as follows: -380.15 g for adhesion, 0.60 g for hardness, 0.50 for cohesiveness, 158,87 for chewiness and 0.19 for resilience. The physico-chemical composition of Camembert cheese presented in a 95% reliable interval moisture between 31.10 and 57.50 g.100g-1, fat between 52,43 and 63,3 g.100g-1, defatted dry extract from 20.13 to 23.20 g.100g-1, protein from 14.27 to 19.73 g.100g-1, carbohydrate from 0.80 to 5.44 g.100g-1, ashes from 3.09 to 4.05 g.100g-1, the amount of sodium ranged between 72.50 and 577.50 mg.100g-1 and, an amount of calcium between 282.80 and 788.80 mg.100g-1. L. monocytogenes was found in a sample of Camembert cheese. The other samples of both types of cheese presented a microbiological profile within the parameters set by the national legislation. / O Brasil possui produção anual de aproximadamente 2.170 ton dos queijos Tipo Brie (75%) e Tipo Camembert (25%), localizada principalmente nos estados de Minas Gerais e do Paraná. Entretanto, a legislação brasileira não contempla o Regulamento Técnico de Identidade e Qualidade (RTIQ) específico para esses queijos finos, o que dificulta a padronização de um produto “Tipo” nacional. Este trabalho visa a caracterização físico-química e microbiológica desses queijos, com base na legislação e metodologia analítica oficial vigente, bem como propor um RTIQ específico, umidade, gordura, proteína, extrato seco desengordurado, cinzas, cálcio e sódio. Foi utilizado o método descritivo e experimental, por meio do qual foram coletadas amostras de queijos referentes às estações verão e inverno e amostra francesa para que, dessa forma, se conheça a composição ao longo do ano desses produtos. A média de peso do queijo Tipo Brie foi de 119,87 g, com altura média de 30,31 mm e diâmetro médio de 131,28 mm. A média do Índice de Brancura (WI) para superfície foi 70,63 e 89,37 para o centro. O perfil de textura em valores médios foi de -590,12 g.s para adesividade, 0,88 g para dureza, 0,73 para coesividade, 151,86 para mastigabilidade e 0,26 para resilência. A composição físico-química do queijo Tipo Brie apresentou, através do intervalo de confiança a 95%, umidade entre 41,80 e 53,10 g.100g-1, gordura entre 49,65 a 62,59 g.100g-1, extrato seco desengordurado (ESD) 19,43 a 23,23 g.100g-1, proteínas entre 14,20 a 20,00 g.100g-1, carboidratos entre 1,80 a 7,60 g.100g-1, cinzas entre 2,80 a 3,40 g.100g-1, teor de sódio entre 112,80 a 661,20 mg.100g-1, teor de cálcio entre 323,90 a 848,10 mg.100g-1. A média de peso do queijo Tipo Camembert foi de 195,74 g, com altura média de 33,44 mm e diâmetro médio de 88,05 mm. A média do Índice de Brancura (WI) para superfície foi 91,82 e 72,29 para o centro. O perfil de textura em valores médios foi de -380,15 g.s para adesividade, 0,60 g para dureza, 0,50 para coesividade, 158,87 para mastigabilidade e 0,19 para resilência. A composição físico-química do queijo Tipo Camembert apresentou, através do intervalo de confiança a 95%, umidade entre 31,10 a 57,50 g.100g-1, gordura entre 52,43 a 63,37 g.100g-1, extrato seco sengordurado (ESD) 20,13 a 23,20 g.100g-1, proteínas entre 14,27 a 19,73 g.100g-1, carboidratos entre 0,80 a 5,44 g.100g-1, cinzas entre 3,09 a 4,05 g.100g-1, teor de sódio entre 72,50 a 577,50 mg.100g-1, teor de cálcio entre 282,80 a 788,80 mg.100g-1. Foi detectada uma amostra de queijo Tipo Camembert com L. monocytogenes. As demais amostras de ambos os queijos apresentaram perfil microbiológico dentro do preconizado pela legislação nacional.

Made available in DSpace on 2017-07-25T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdilaineGrabicoski.pdf: 3057508 bytes, checksum: 91f718973e4409c8611259602683583d (MD5) Previous issue date: 2012-02-09 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / The white mold disease, caused by the fungus Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary, responsible for large losses in soybean (Glycine max (L.) Merrill). The pathogen has more than 400 hosts and presents the formation of a resistance structure (sclerotia), difficulting the disease control, thus increasing the importance of the pathogen in Brazilian agriculture. The seeds are the main spreading disease means, a quickly and correct presence detection of the pathogen is important to control the white mold, especially for non-infested areas by the pathogen. In this study, 57 S. sclerotiorum isolates were morphological and pathologically characterized to assess variations within the specie. Also was developed a method to detect the pathogen directly from seed-soak liquor of infected soybean seeds, through PCR. The proposed method was compared to the traditional recommended methods. The pathogen isolates showed some morphological variations among themselves, as the number and weight of the formed sclerotia. Pathologically, were observed two and seven pathogenic levels second, respectively, the soybean inoculation on the stem and on the detached trifoliate leaves. By the detection method, it was possible to detect one seed artificially contaminated in the sample with 400 total seeds. In naturally contaminated seeds, was possible to detected the pathogen presence in a sample that, according to the method of incubation on paper roll and on Neon-S medium, respectively, presented 1 and 3 seeds contaminated in four hundred seeds. The proposed methodology is promising for the detection of S. sclerotiorum, however, requires optimization because many false negative results were obtained, mainly due to substances released by the seeds that inhibited the PCR reaction. The use of filter in the samples has presented as a possible tool to overcome the PCR inhibitors. For the optimization of the method, increase the size of seed samples, use of filters, others techniques such as nested PCR, Real-Time PCR and DNA probes can help overcome these difficulties. / O Mofo branco, doença causada pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary, vem causando grandes prejuízos na cultura da soja (Glycine max (L.) Merrill) e, por apresentar mais de 400 hospedeiros e a formação de uma estrutura de resistência (escleródios), o seu controle torna-se difícil, aumentando a importância do patógeno para a agricultura brasileira. As sementes são o principal meio de disseminação da doença, detectar rápido e corretamente a presença do patógeno nas mesmas é importante no controle do Mofo branco, principalmente, para não infestar áreas isentas do patógeno. No presente trabalho, 57 isolados de S. sclerotiorum foram caracterizados morfológica e patologicamente para avaliar variações dentro da espécie. Também se desenvolveu uma metodologia de detecção do patógeno em sementes de soja embebidas, através de PCR diretamente do líquido de embebição das mesmas. Comparou-se a metodologia proposta com as tradicionais recomendadas para o patógeno. Os isolados do patógeno apresentaram algumas variações morfológicas entre si, como quantidade e peso dos escleródios formados. Patologicamente, foram verificados dois e sete níveis de patogenicidade segundo, respectivamente, a inoculação dos isolados na haste e em trifólios destacados de plantas de soja. Diretamente a partir do líquido de embebição das sementes, foi possível detectar uma semente artificialmente contaminada em 400 sementes totais. Em sementes naturalmente contaminadas, detectou-se a presença do patógeno em amostra que, segundo o método de incubação em rolo de papel e em Neon-S apresentava, respectivamente, 1 e 3 sementes contaminadas em quatrocentas totais. A metodologia proposta é promissora para a detecção de S. sclerotiorum, no entanto, necessita de otimização, pois muitos resultados falsos-negativos foram obtidos, principalmente devido a substâncias liberadas pelas próprias sementes que inibiram a reação de PCR. A utilização de um filtro nas amostras apresentou-se como uma possível ferramenta para driblar os inibidores de PCR. Para a otimização do método, técnicas como Nested-PCR, Real-Time PCR, utilização de sondas de DNA, aumento no tamanho de amostras de sementes e a utilização dos filtros podem ajudar a superar essas dificuldades.

Made available in DSpace on 2017-07-25T19:30:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carlos Rafael Wutzki.pdf: 1863942 bytes, checksum: 92b287f4925fa1855b1c0d218fc2bb5e (MD5) Previous issue date: 2014-02-07 / The white mold of soybean, caused by Sclerotinia sclerotiorum, is causing great damage to the soybean crop in Brazil. It is a polyphagous fungus hard to control because it produces resistance structures called sclerotia, which can remain viable in the soil for several years. Aiming its control, various management strategies should be used as the control with alternative substances, biological control agents and fungicides. Thus, nine experiments were conducted in naturally infested areas by white mold in 2011/12 season in the counties of Arapoti/PR, Mauá-da-Serra/PR and Pinhão/PR, with an experiment of alternated control, a biological control and one of chemical control conducted at each site. The variables analyzed were incidence, severity, yield and numbers of sclerotia produced. The objective of the experiments of alternative control was to assess different alternative substances, foliar sprayed, isolated or combined with the fungicide fluazinam, for control of white mold in soybean. The alternative substances applied were sodium dichloroisocyanurate, benzalkonium chloride, pyrolysis extract, sodium hypochlorite, cobalt + molybdenum, sucrose, sodium bicarbonate and acibenzolar-S-methyl. As conclusions, it was observed that alternative substances applied in combination with the fungicide fluazinam provided lower severity of white mold in soybeans on the experiment conducted in Pinhão – PR, and fungicide fluazinam applied alone or in combination with alternative substances was effective in control of white mold in soybeans in locations with high incidence of the disease. The objective of the experiments of biological control was to evaluate different biological control agents sprayed foliar compared to the untreated control and the fungicide Fluazinam for control of white mold in soybean. The biological control agents used were: Thichoderma harzianum SC; Thichoderma asperellum EC; Thichoderma asperellum WG; Coniothyrium minitans and Bacillus subtilis. As conclusion, the biological control agents were not effective in controlling white mold of soybean in the conditions that were tested, and the fungicide fluazinam demonstrated lower incidence and severity of disease and higher yield of soybean when applied in areas with high potential inoculum. Finally, the objective of the experiments of chemical control was to verify the efficiency of the control of white mold in soybeans with the use of fungicides applied alone, in rotation, at different growth stages and in a mixture of two active ingredients. The fungicides used were carbendazim, thiophanate methyl, procymidone and fluazinam. As conclusion, the use of fungicides were effective in controlling the incidence and production of sclerotia of S. sclerotiorum in soybean, especially the combinations that had two or more applications of the active ingredient Fluazinam. / O mofo branco da soja, causada pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum, vem causando grandes danos na cultura da soja no Brasil. Trata-se de um fungo polífago de difícil controle, pois produz estruturas de resistência denominadas escleródios, que podem permanecer viáveis no solo por vários anos. Visando seu controle, várias estratégias de manejo devem ser utilizadas, como o controle com substâncias alternativas, agentes de controle biológico e fungicidas. Diante disso, foram conduzidos nove experimentos em áreas naturalmente infestadas pelo mofo branco na safra 2011/12 nos municípios de Arapoti/PR, Mauá-da-Serra/PR e Pinhão/PR, sendo um experimento de controle alternativo, um de controle biológico e um de controle químico conduzidos em cada local. As variáveis analisadas foram incidência, severidade, rendimento e o número de escleródios produzidos. O objetivo dos experimentos de controle alternativo foi avaliar diferentes substâncias alternativas pulverizadas via foliar, isoladamente ou em combinação com o fungicida fluazinam para o controle do mofo branco em soja. Nos experimentos de controle alternativo as substâncias utilizadas foram: dicloroisocianurato de sódio, cloreto de benzalcônio, extrato pirolenhoso, hipoclorito de sódio, cobalto + molibdênio, sacarose, bicarbonato de sódio e acibenzolar-S-metil. Concluiu-se que as substâncias alternativas aplicadas em associação com o fungicida fluazinam proporcionaram menor severidade do mofo branco na cultura da soja no experimento conduzido em Pinhão – PR e a aplicação do fungicida fluazinam isolado ou em associação com as substâncias alternativas foi eficiente no controle do mofo branco na cultura da soja nos locais com alta incidência da doença. O objetivo dos experimentos de controle biológico foi avaliar diferentes agentes de controle biológico pulverizados via foliar em comparação ao tratamento controle e ao fungicida fluazinam para o controle do mofo branco em soja. Os agentes de controle biológico utilizados foram: Thichoderma harzianum SC; Thichoderma asperellum EC; Thichoderma asperellum WG; Bacillus subtilis e Coniothyrium minitans. Conclui-se que os agentes de controle biológico não foram eficazes no controle do mofo branco da soja nas condições em que foram testados e que o fungicida fluazinam proporcionou menor incidência e severidade do doença quando aplicado em áreas com elevado potencial de inóculo. E finalmente, o objetivo dos experimentos de controle químico foi verificar a eficiência de controle do mofo branco na soja com o uso de diferentes fungicidas aplicados isoladamente, em rotação, em diferentes estádios fenológicos e em mistura de dois princípios ativos. Os fungicidas utilizados foram carbendazim, tiofanato metílico, fluazinam e procimidona. Concluiu-se que os fungicidas testados proporcionaram menores níveis de incidência e menor produção de escleródios, principalmente as combinações que possuíam duas ou mais aplicações do princípio ativo fluazinam.