Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000426083-Texto+Completo-0.pdf: 828024 bytes, checksum: 601aad48a152b2cc39f9d4786d51174c (MD5) Previous issue date: 2010 / Objectives: Investigate the expression of Hsp70 and the relation between cellular proliferation and apoptosis from immunohistochemical index of Caspase-3 and Ki-67 in tecidual samples of women with invasive ductal carcinoma with and without presence of linfonodal metastasis, treated on a school hospital, in comparison with breast tissue samples of patients with diagnosis of mammary fibrocystic variation treated at the same hospital. Material and Methods: Performed a transversal study, being arrenged 25 patients with diagnosis of invasive ductal carcinoma of the breast with presence of axilar linfonodal metastasis, 25 patients with invasive ductal carcinoma of the breast without presence of linfonodal metastasis and 10 patients with diagnosis of mammary fibrocystic variation, wich became our control group. Using immunohistochemical techniches, we observed the expression of Hsp70, Caspase-3 and Ki-67 and the relation between cellular proliferation rate and apoptosis in the studied groups. Results: The annalysis of Hsp70 showed significant diference in the linfonodal tissue among patients with diagnosis of breast cancer, and its expression was higher at the group without presence of linfonodal envolvement. As we evaluated cellular proliferation rate by using expression of Ki-67, we noticed significant difference between the three groups studied. At the breast and linfonodal tissues from patients without axilar envolvement, we noticed a higher level of positivity for Caspase-3.The relation between cellular proliferation rate and apoptosis showed significant difference only as we compare groups with invasive ductal breast cancer from control patients. On the other hand, this relation does not show any difference among the groups with diagnosis of breast cancer. Conclusion: The data about Hsp70 posititivity in the linfonodal tissue suggest that this protein may be associated with a local protection against breast cancer at those areas. The relation between cellular proliferation rate and apoptosis should not be used as an indicator of patient´s prognosis at this time. / Objetivos: Investigar a expressão de Hsp70 e a razão entre proliferação celular e apoptose através da expressão imunoistoquímica de Caspase-3 e Ki-67 nas amostras teciduais de mulheres com carcinoma ductal invasor de mama com e sem presença de metástase linfonodal, tratadas em um hospital terciário de ensino, em comparação com amostras de pacientes com diagnóstico de alteração fibrocística no tecido mamário. Materiais e Métodos: Realizado um estudo do tipo transversal, sendo selecionados para o presente trabalho 25 pacientes com diagnóstico de carcinoma ductal invasor de mama com presença de metástase axilar, 25 pacientes com carcinoma ductal invasor de mama sem presença de metástase axilar e 10 pacientes com diagnóstico de alteração fibrocística da mama, que neste trabalho serviram como grupo controle. Através de técnicas de imunoistoquímica, foram avaliadas as expressões de Hsp70, Caspase-3 e Ki-67 e calculada a razão entre a taxa de proliferação celular e apoptose dos grupos estudados. Resultados: A análise de Hsp70 mostrou diferença significativa no tecido linfonodal entre as pacientes com câncer de mama, estando sua expressão aumentada no tecido sem presença de metástase tumoral. Ao avaliarmos a proliferação celular através do marcador Ki-67, evidenciamos diferença significativa entre os três grupos estudados. No tecido mamário e linfonodal das pacientes sem metástase atilar evidenciamos um maior percentual de positividade para Caspase-3.A mensuração da razão entre proliferação celular e apoptose mostrou diferença significativa somente ao compararmos os grupos com carcinoma ductal invasor de mama ao grupo controle. Entretanto a razão não difere entre os grupos com diagnóstico de câncer de mama. Conclusão: Os dados sobre a positividade de Hsp70 no tecido linfonodal sugerem que essa proteína pode estar associada a uma proteção focai contra a proliferação tumoral nessas áreas. Por outro lado, a razão entre proliferação celular e apoptose não deve ser usada como indicador de prognóstico da doença até o momento.

En estudios anteriores se ha observado que algunas hidroquinonas, que poseen un núcleo naftaleno con la característica de tener el grupo hidroxilo conjugado con un sustituyente carbonilo, presentan actividad antitumoral. En este trabajo se muestran los efectos de una serie de hidroquinonas triciclicas y tetracíclicas relacionadas estructuralmente. Los resultados sobre la viabilidad celular se obtuvieron a través de técnicas colorimétricas con MTT en las células tumorales : de adenocarcinoma mamario de ratón TA3 y su variante multirresistente TA3-MTXR además de leucémicas de linfoblasto agudo CCRF-CEM y su variante resistente CEM/C2. También se realizaron ensayos en las células normales VERO. Complementariamente, se realizaron mediciones polarográficas para establecer la capacidad inhibitoria de los compuestos sobre la respiración celular de las células tumorales TA3 y TA3-MTX-R. La mayor potencia la mostró una de las hidroquinonas tricíclicas, DA7P1, obteniendo con ella inhibiciones a concentraciones del orden µM.

A diferenciação entre o café orgânico e convencional tem aumentado devido á crescente demanda e alto consumo de alimentos saudáveis que contêm compostos com potencial antioxidante, que têm sido associadas com a redução de doenças crônicas, como o câncer. Devido a essa grande importância, este trabalho teve como objetivo avaliar a composição química das amostras de café orgânico e convencional, além dos seus efeitos anticarcinogênico/carcinogênico, antioxidantes e das suas repercussões sobre a composição mineral hepática, in vivo. Para as avaliações in vivo, foi conduzido experimento com duração de doze semanas, incorporando o café nas rações dos animais na forma de infuso (5; 10; 20% m/v) e de pó de café (4% m/m). Para as avaliações toxicológicas os animais foram submetidos ou não, a lesões no cólon, induzidas por DMH. No final do experimento coletou-se cólon, sangue e fígado de todos os animais para análises de lesões pré-neoplásicas, parâmetros bioquímicos, estresse oxidativo e composição mineral hepática. Para avaliação da composição química dos manejos orgânico e convencional, foi realizada determinação dos teores de Cu, Fe e Zn por FAAS e análise quantitativa de ácidos clorogênicos, ácido cafeico, cafeína e trigonelina por HPLC. Quanto às análises de minerais no pó de café, encontrou-se maiores teores no manejo convencional. Os infusos tiveram diferenças apenas nos teores de Zn, sendo que o infuso orgânico 20% apresentou maior teor. Os teores de ácidos clorogênicos, cafeína e trigonelina tiveram teores mais altos no manejo orgânico. Apesar das diferenças químicas entre os manejos, os cafés na forma de infuso, em todas as concentrações utilizadas, tiveram efeito antioxidante verificado através da redução de MDA. Entretanto, não foram capazes de provocar proteção/lesão nos cólons. Além disso, não produziram alterações significativas no teor de minerais dos fígados, nem nos níveis de uréia, creatinina, colesterol, triglicérides, glicose, AST e ALT. Assim, os resultados encontrados indicam que apesar das diferenças na composição química, os cafés, orgânico e convencional, tiveram efeitos antioxidantes quando ingeridos na forma de infuso e não apresentaram riscos para a saúde. / The distinction between conventional and organic coffee has great due to increasing demand and high consumption of healthy foods that contain compounds with antioxidant potential, which have been associated with the reduction of chronic diseases, such as cancer. Because of this importance, this study aimed to evaluate the chemical composition of samples of organic and conventional, in addition to its anticarcinogenic/carcinogenic effects, antioxidant and its impact on the mineral composition of liver, in vivo. For the evaluations in vivo experiment was conducted for twelve weeks, incorporating the coffee in the diets of animals in the form of infusion (5, 10, 20% w/v) and powder coffee (4% m / m). For toxicological tests animals were submitted or not, the lesions in the colon induced by DMH. At the end of the experiment were collected colon, blood and liver of all animals for analysis of preneoplasic lesion, biochemical parameters, oxidative stress and liver mineral composition. To evaluate the chemical composition of organic and conventional managements, determination was made of Cu, Fe and Zn by FAAS and quantitative analysis of chlorogenic acid, caffeic acid, caffeine and trigonelline by HPLC. Analyses of minerals in the powder coffee, we found higher levels in the conventional management. The infusions were only differences in the levels of Zn, and 20% organic, the organic had the highest amount. The content of chlorogenic acids, caffeine and trigonelline levels were higher in organic management. Despite the chemical differences between the managements, the coffees in the form of infusion in all concentrations, antioxidant effects were observed through the reduction of MDA. However, they were unable to induce protection/lesion in the colon. Also, do not produce significant changes in mineral content of the liver, nor in the levels of urea, creatinine, cholesterol, triglycerides, glucose, AST and ALT. Thus, our results indicate that despite differences in chemical composition, coffes, organic and conventional, have antioxidant effects when ingested in the form of infusion and did not present a risk to health. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-16Bitstream added on 2014-06-13T20:48:47Z : No. of bitstreams: 1 rodrigues_mmp_me_botfmvz.pdf: 498195 bytes, checksum: c6d0362fac624d7b6051d886cab51a18 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As lesões prostáticas em cães vêm sendo cada vez mais estudadas, uma vez que esta espécie é considerada modelo experimental para afecções prostáticas no homem. As principais são a hiperplasia prostática benigna (HPB), prostatites, cistos e o adenocarcinoma. Recentemente tem se dado atenção às lesões pré-neoplásicas, dentre elas a neoplasia intra-epitelial prostática (PIN) e a atrofia inflamatória proliferativa (PIA). Alguns marcadores imunoistoquímicos são utilizados com o objetivo de avaliar o desenvolvimento de câncer prostático a partir de lesões pré-neoplásicas. A cicloxigenase-2 (COX-2) apresenta papel fundamental na resposta inflamatória e, esta pode ter relação com o desenvolvimento do câncer, além de induzir estímulos mitogênicos, enquanto que o fator de crescimento transformador-ß (TGF-ß) induz a angiogênese e inibe a proliferação celular, sendo considerado um mediador do crescimento prostático. No presente trabalho estes marcadores foram utilizados com o objetivo de correlacionar lesões não neoplásicas, pré-neoplásicas e neoplásicas. Os resultados obtidos mostram que as neoplasias e as lesões pré-neoplásicas expressam grande quantidade de COX-2 e TGF-ß, o que permite afirmar o papel destas proteínas no desenvolvimento do câncer prostático em cães. / Prostatic lesions in dogs are being studied more and more, since the dogs are considered na experimental model for prostatic diseases in humans. The main prostatic diseases are benign prostatic hyperplasia (BPH), prostatic inflammation, cysts and adenocarcinoma. Pre neoplastic lesions are being studied, among them prostatic intra epithelial neoplasia (PIN) and prostatic inflammatory atrophy (PIA). Immunohistochemistry markers are used to evaluate prostatic cancer from pre neoplastic lesions. COX-2 has the main role in inflammatory response and can be involved in cancer development, because induces mitosis, and TGF-ß) induces angiogenesis and inhibits cellular proliferation, and is considered a prostatic growth mediator. In this study, these markers were used to correlate non neoplastic lesions, pre neoplastic lesions and prostatic cancer. Our results show that neoplastic and pre neoplastic lesions express high amounts of COX-2 and TGF-ß, witch allows us to confirm the involvement of these proteins in prostatic cancer development in dogs.

INTRODUÇÃO: o câncer de mama é uma doença heterogênea. Há necessidade de critérios diagnósticos e prognósticos mais refinados. O emprego da imunohistoquímica, através do painel prognóstico, fez despontar a figura do carcinoma triplonegativo e, da mesma forma, a histogenética trouxe à evidência o carcinoma basal. Paralelamente, o conhecimento sobre a origem biológica das neoplasias e da sua heterogeneidade vem sendo acentuadamente debatido através do tema das células-tronco tumorais. OBJETIVOS: investigar a prevalência de carcinomas basais e pentanegativos, numa amostra de carcinomas triplonegativos, e estabelecer associações com a expressão de células-tronco tumorais nestes tumores. Verificar diferenças entre estes subtipos com as variáveis clinicopatológicas. MÉTODOS: 94 carcinomas mamários triplonegativos foram testados para CK5/6, HER1, CD44 e CD24. As expressões desses marcadores por imuno-histoquímica automatizada foram avaliadas através de escore simples de positividade (porcentagem de células) e correlacionadas com os dados clínico-patológicos e análise de sobrevivência. RESULTADOS: carcinomas basais apresentam maior grau tumoral que carcinomas pentanegativos (p=0,004). A negatividade para CD44 (p=0,007) e o perfil CD44- CD24+ (p=0,013) foram associados com maior invasão vascular entre carcinomas triplonegativos. A expressão de CD44 foi associada aos carcinomas basais (p=0,007). O perfil CD44-CD24-/low foi associado aos carcinomas pentanegativos (p=0,04). Nenhuma das variáveis em estudo foi associada com os desfechos clínicos. CONCLUSÃO: Carcinomas mamários basais e pentanegativos são subtipos tumorais bastante próximos. Nosso estudo é o primeiro desenhado especificamente para avaliar a presença células tronco-tumorais mamárias entre carcinomas basais e pentanegativos, onde o perfil CD44-CD24-/low foi associado ao subtipo pentanegativo, e o perfil CD44-CD24+ à invasão vascular, resultados que merecem confirmação por histogenética em estudos de maior porte. / INTRODUCTION: Breast cancer is a heterogeneous disease, and there is a need for more refined diagnostic and prognostic criteria. Immunohistochemistry, as a breast prognostic panel, has given rise to triple-negative carcinoma, as well as histogenetics highlighted basal carcinoma. Concomitantly, the understanding of the biological origins of neoplasia and its heterogeneity has been strongly debated through the theme of cancer stem cells. OBJECTIVES: To investigate the prevalence of basal and penta-negative carcinomas in a sample of triple-negative carcinomas and to establish associations with cancer stem cells (CD44/CD24 expression profiles) and the clinicopathological variables within these tumors. METHODS: Ninety-four triplenegative breast carcinomas were tested for CK5/6, HER1, CD44 and CD24. The expression of these markers was evaluated by automated immunohistochemistry using a simple positivity score (percentage of cells) and was correlated with the clinicopathological and survival analysis data. RESULTS: Basal carcinomas had higher tumor grades than penta-negative carcinomas (p=0.004). CD44 negativity (p=0.007) and the CD44-CD24+ phenotype (p=0.013) were associated with increased vascular invasion amongst the triple-negative carcinomas. CD44 expression was associated with basal carcinomas (p=0.007). The CD44-CD24-/low phenotype was associated with penta-negative carcinomas. None of the variables in the study were associated with clinical outcome. CONCLUSION: Basal and penta-negative breast carcinomas are closely related tumor subtypes. Our study is the first to be specifically designed to assess the presence of breast cancer stem cells in basal and pentanegative carcinomas. The CD44-CD24-/low phenotype was associated with the pentanegative subtype, and the CD44-CD24+ phenotype was associated with vascular invasion. These results require histogenetic confirmation in larger studies.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000399864-Texto+Completo-0.pdf: 2357842 bytes, checksum: 33aacb0348512c8221c086f9eb4b8def (MD5) Previous issue date: 2008 / Presence of cervical metastases is the most important prognostic factor in squamous cell carcinoma of the oral cavity (OSCC). Recently, other clinical and molecular factors have been sought in order to improve prognostic capabilities in this disease. The aim the present study is to evaluate the impact of tissue factor (TF) expression and microvessel density (MVD) as predictors of cervical metastases in these neoplasms. Immunohistochemistry techniques were used to assess the expression of TF and to quantify MVD (through expression of CD34) in 53 patients with OSCC who were treated surgically by the author. These findings, as well as other clinical and pathological variables, were correlated with the presence or absence of cervical metastases. TF was expressed in all but three cases; it was highly expressed (more than 50% of tumor cells showing intense expression) in 13 patients (24. 5%), but TF expression was not correlated with the presence of cervical metastases. MVD ranged from four to 47. 8 vessels per high power field (200X) in selected hot spots, with an average of 18. 47 vessels. Increased MVD (more than 20 vessels) was present in 21 patients (39. 6%), but also did not correlate with the presence of positive cervical nodes. Clinical stage, neuronal infiltration and intravascular embolization were the most important predictors of cervical metastases. This study focuses, for the first time, the expression of TF as a prognostic factor in OSCC. Its expression was not a significant predictor of cervical metastases in OSCC. Likewise, MVD was not correlated with cervical metastases. Further studies are needed to determine new molecular markers capable of improving prognostic accuracy of conventional clinical and pathologic prognostic factors in OSCC. / A presença de metástase cervical é o fator prognóstico mais relevante no carcinoma epidermóide de boca. Fatores clínicos e histológicos estão associados com o desenvolvimento da metástase cervical, porém a pesquisa de fatores moleculares está sendo amplamente realizada nos últimos anos. O objetivo deste estudo é avaliar a associação da expressão do fator tecidual e da densidade microvascular como fatores de risco para a presença de metástase cervical nestas neoplasias. A expressão do fator tecidual e a densidade microvascular foram aferidas pela técnica de imunoistoquímica e suas associações com a presença de metástase cervical foram estudadas em 53 pacientes com diagnóstico de carcinoma epidermóide de boca tratados cirurgicamente pelo autor. Características clínicas e histológicas também foram pesquisadas e associadas com a presença de metástase cervical. Somente três casos não expressaram o fator tecidual. A alta expressão do fator tecidual, mais de 50% das células tumorais intensamente coradas, foi encontrada em 13 pacientes (24,5%). A densidade microvascular por paciente variou entre 4 e 47,8 vasos, com uma média de 18,47 vasos. A alta densidade microvascular (mais de 20 vasos por paciente) ocorreu em 21 pacientes (39,6%). O estadiamento clínico, a infiltração neuronal e as embolizações vasculares foram os fatores preditivos de metástase de maior relevância. Este estudo descreve pela primeira vez a expressão do fator tecidual como fator prognóstico de metástase e de óbito no carcinoma epidermóide de boca. Os resultados indicam que a expressão do fator tecidual e a densidade microvascular não estão associados com a presença de metástase cervical. Estudos adicionais são necessários para determinar novos marcadores moleculares capazes de melhorar a acurácia do prognóstico, comparados aos fatores clínicos e histológicos de prognóstico do carcinoma epidermóide de boca já estabelecidos.

INTRODUÇÃO: o câncer de mama é uma doença heterogênea. Há necessidade de critérios diagnósticos e prognósticos mais refinados. O emprego da imunohistoquímica, através do painel prognóstico, fez despontar a figura do carcinoma triplonegativo e, da mesma forma, a histogenética trouxe à evidência o carcinoma basal. Paralelamente, o conhecimento sobre a origem biológica das neoplasias e da sua heterogeneidade vem sendo acentuadamente debatido através do tema das células-tronco tumorais. OBJETIVOS: investigar a prevalência de carcinomas basais e pentanegativos, numa amostra de carcinomas triplonegativos, e estabelecer associações com a expressão de células-tronco tumorais nestes tumores. Verificar diferenças entre estes subtipos com as variáveis clinicopatológicas. MÉTODOS: 94 carcinomas mamários triplonegativos foram testados para CK5/6, HER1, CD44 e CD24. As expressões desses marcadores por imuno-histoquímica automatizada foram avaliadas através de escore simples de positividade (porcentagem de células) e correlacionadas com os dados clínico-patológicos e análise de sobrevivência. RESULTADOS: carcinomas basais apresentam maior grau tumoral que carcinomas pentanegativos (p=0,004). A negatividade para CD44 (p=0,007) e o perfil CD44- CD24+ (p=0,013) foram associados com maior invasão vascular entre carcinomas triplonegativos. A expressão de CD44 foi associada aos carcinomas basais (p=0,007). O perfil CD44-CD24-/low foi associado aos carcinomas pentanegativos (p=0,04). Nenhuma das variáveis em estudo foi associada com os desfechos clínicos. CONCLUSÃO: Carcinomas mamários basais e pentanegativos são subtipos tumorais bastante próximos. Nosso estudo é o primeiro desenhado especificamente para avaliar a presença células tronco-tumorais mamárias entre carcinomas basais e pentanegativos, onde o perfil CD44-CD24-/low foi associado ao subtipo pentanegativo, e o perfil CD44-CD24+ à invasão vascular, resultados que merecem confirmação por histogenética em estudos de maior porte. / INTRODUCTION: Breast cancer is a heterogeneous disease, and there is a need for more refined diagnostic and prognostic criteria. Immunohistochemistry, as a breast prognostic panel, has given rise to triple-negative carcinoma, as well as histogenetics highlighted basal carcinoma. Concomitantly, the understanding of the biological origins of neoplasia and its heterogeneity has been strongly debated through the theme of cancer stem cells. OBJECTIVES: To investigate the prevalence of basal and penta-negative carcinomas in a sample of triple-negative carcinomas and to establish associations with cancer stem cells (CD44/CD24 expression profiles) and the clinicopathological variables within these tumors. METHODS: Ninety-four triplenegative breast carcinomas were tested for CK5/6, HER1, CD44 and CD24. The expression of these markers was evaluated by automated immunohistochemistry using a simple positivity score (percentage of cells) and was correlated with the clinicopathological and survival analysis data. RESULTS: Basal carcinomas had higher tumor grades than penta-negative carcinomas (p=0.004). CD44 negativity (p=0.007) and the CD44-CD24+ phenotype (p=0.013) were associated with increased vascular invasion amongst the triple-negative carcinomas. CD44 expression was associated with basal carcinomas (p=0.007). The CD44-CD24-/low phenotype was associated with penta-negative carcinomas. None of the variables in the study were associated with clinical outcome. CONCLUSION: Basal and penta-negative breast carcinomas are closely related tumor subtypes. Our study is the first to be specifically designed to assess the presence of breast cancer stem cells in basal and pentanegative carcinomas. The CD44-CD24-/low phenotype was associated with the pentanegative subtype, and the CD44-CD24+ phenotype was associated with vascular invasion. These results require histogenetic confirmation in larger studies.

INTRODUÇÃO: o câncer de mama é uma doença heterogênea. Há necessidade de critérios diagnósticos e prognósticos mais refinados. O emprego da imunohistoquímica, através do painel prognóstico, fez despontar a figura do carcinoma triplonegativo e, da mesma forma, a histogenética trouxe à evidência o carcinoma basal. Paralelamente, o conhecimento sobre a origem biológica das neoplasias e da sua heterogeneidade vem sendo acentuadamente debatido através do tema das células-tronco tumorais. OBJETIVOS: investigar a prevalência de carcinomas basais e pentanegativos, numa amostra de carcinomas triplonegativos, e estabelecer associações com a expressão de células-tronco tumorais nestes tumores. Verificar diferenças entre estes subtipos com as variáveis clinicopatológicas. MÉTODOS: 94 carcinomas mamários triplonegativos foram testados para CK5/6, HER1, CD44 e CD24. As expressões desses marcadores por imuno-histoquímica automatizada foram avaliadas através de escore simples de positividade (porcentagem de células) e correlacionadas com os dados clínico-patológicos e análise de sobrevivência. RESULTADOS: carcinomas basais apresentam maior grau tumoral que carcinomas pentanegativos (p=0,004). A negatividade para CD44 (p=0,007) e o perfil CD44- CD24+ (p=0,013) foram associados com maior invasão vascular entre carcinomas triplonegativos. A expressão de CD44 foi associada aos carcinomas basais (p=0,007). O perfil CD44-CD24-/low foi associado aos carcinomas pentanegativos (p=0,04). Nenhuma das variáveis em estudo foi associada com os desfechos clínicos. CONCLUSÃO: Carcinomas mamários basais e pentanegativos são subtipos tumorais bastante próximos. Nosso estudo é o primeiro desenhado especificamente para avaliar a presença células tronco-tumorais mamárias entre carcinomas basais e pentanegativos, onde o perfil CD44-CD24-/low foi associado ao subtipo pentanegativo, e o perfil CD44-CD24+ à invasão vascular, resultados que merecem confirmação por histogenética em estudos de maior porte. / INTRODUCTION: Breast cancer is a heterogeneous disease, and there is a need for more refined diagnostic and prognostic criteria. Immunohistochemistry, as a breast prognostic panel, has given rise to triple-negative carcinoma, as well as histogenetics highlighted basal carcinoma. Concomitantly, the understanding of the biological origins of neoplasia and its heterogeneity has been strongly debated through the theme of cancer stem cells. OBJECTIVES: To investigate the prevalence of basal and penta-negative carcinomas in a sample of triple-negative carcinomas and to establish associations with cancer stem cells (CD44/CD24 expression profiles) and the clinicopathological variables within these tumors. METHODS: Ninety-four triplenegative breast carcinomas were tested for CK5/6, HER1, CD44 and CD24. The expression of these markers was evaluated by automated immunohistochemistry using a simple positivity score (percentage of cells) and was correlated with the clinicopathological and survival analysis data. RESULTS: Basal carcinomas had higher tumor grades than penta-negative carcinomas (p=0.004). CD44 negativity (p=0.007) and the CD44-CD24+ phenotype (p=0.013) were associated with increased vascular invasion amongst the triple-negative carcinomas. CD44 expression was associated with basal carcinomas (p=0.007). The CD44-CD24-/low phenotype was associated with penta-negative carcinomas. None of the variables in the study were associated with clinical outcome. CONCLUSION: Basal and penta-negative breast carcinomas are closely related tumor subtypes. Our study is the first to be specifically designed to assess the presence of breast cancer stem cells in basal and pentanegative carcinomas. The CD44-CD24-/low phenotype was associated with the pentanegative subtype, and the CD44-CD24+ phenotype was associated with vascular invasion. These results require histogenetic confirmation in larger studies.

Orientador: André Almeida Schenka / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T04:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RodrigoVismaride_M.pdf: 21638955 bytes, checksum: 23e75fa9b7ece343f54fcfd2dcaea03c (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O câncer de mama é a neoplasia maligna mais frequente no mundo. A hipótese da célula-tronco neoplásica (CTN) é um novo paradigma de carcinogênese. A imunoistoquímica (IHC) é um método de escolha para detecção de CTN em tecidos parafinizados, com as seguintes vantagens: (1) maior adaptação à rotina diagnóstica; (2) menor custo; (3) menor complexidade. Entretanto, há poucos estudos de marcadores imunoistoquímicos CTN na literatura, a maioria com poucos pacientes e resultados controversos. Um painel de marcadores imunoistoquímicos CTN foi usado em 74 casos de câncer mamário, os quais foram diagnosticados, tratados e acompanhados no UNACON- Poços de Caldas, de 2004 a 2006. Objetivos: (1) descrever quali e quantitativamente um amplo painel imunoistoquímico de anticorpos; (2) estabelecer associações entre marcadores CTN e fatores clínicos, patológicos e prognósticos / preditivos de resposta terapêutica; (3) estabelecer o impacto da expressão de marcadores CTN na sobrevida e recidiva tumoral; (4) estabelecer possíveis correlações intermarcadores. Métodos: Foram testados em cortes de TMA, obtidos a partir dos blocos de parafina originais contendo os tumores mamários, os seguintes anticorpos: CD34, c-kit, CD10, SOX-2, Oct 3/4, p63, CD24, CD44, CD133 e ESA/EPCAM. Fotomicrografias foram obtidas das lâminas de imunoistoquímica dos TMAs e as células positivas foram contadas. As variáveis clínicas, patológicas e prognósticas / preditivas de resposta terapêutica foram obtidas dos prontuários médicos. Resultados e conclusões: A média de idade das pacientes foi de 57 anos (28-84), o IMC médio (índice de massa corpórea) foi 27 (13-39), 6,8% eram tabagistas, 58,9% eram menopausadas e 10,8% referiram história familiar de câncer. O acompanhamento clínico médio foi de 52 meses, com recidiva em 28,6% dos casos, tempo médio de recidiva de 37 meses e óbito de 26,7% das pacientes. Os principais anticorpos imunoistoquímicos CTN neste estudo foram CD24, CD44, CD133 e ESA. Os demais anticorpos foram positivos em menos de 15% dos casos. Pelo menos um marcador CTN foi expresso em 85% dos casos. O principal anticorpo CTN individualmente positivo foi o CD44, em 60,8% dos casos. Por motivos didáticos, 2 perfis CTN foram definidos: (1) CD24 - / CD44+ e (2) CD133+ / ESA+. O primeiro perfil CTN foi mais frequente: (1) nas pacientes acima dos 40 anos; (2) em tumores menores de 2,0 cm; (3) em estádios clínicos iniciais (I e II); (4) e sua positividade elevou o risco de óbito em cerca de 4 vezes. A expressão de qualquer marcador CTN foi mais frequente nos graus histológicos elevados (2 e 3). A expressão isolada de CD133 foi mais frequente nas pacientes menopausadas, a expressão isolada de CD24 foi mais frequente nos tumores maiores que 2,0 cm e a expressão isolada de CD44 foi mais frequentes nas pacientes acima de 40 anos de idade. Não foram observadas correlações intermarcadores significativas. Portanto, a imunoistoquímica é um método de baixa sensibilidade para detectar marcadores CTN no câncer mamário humano, limitando a sua análise quantitativa. Por este motivo, não há evidências suficientes que apoiem o valor clínico dos marcadores CTN / Abstract: Breast cancer is the most frequent malignant neoplasm in the world. The neoplastic stem-cell hypothesis (NSC) is a new paradigm of carcinogenesis. Immunohistochemistry (IHC) is a elegible method to detect NSC in paraffinized tissue, with the following advantages: (1) more adaptable to diagnostic routine, (2) lower cost, (3) lower complexity. Though, there are few researches in the literature analysing the NSC antibodies in human breast cancer, the majority with few patients and controversial results. A IHC pannel of NSC markers was used in 74 breast cancer cases, which were diagnosed, treated and followed in Poços de Caldas Cancer Hospital (UNACON), from 2004 to 2006. The present study aims to: (1) describe a large IHC pannel of NSC antibodies, quantitatively and qualitatively; (2) establish associations between NSC markers and clinical, pathological and prognostic / predictive therapeutic response factors; (3) establish the impact of NSC markers expression to the survival and to the tumor relapse; (4) establish possible intermarkers correlations. Methods: The IHC antibodies CD34, c-kit, CD10, SOX-2, Oct 3/4, p63, CD24, CD44, CD133 and ESA/EPCAM were tested in tissue microarrays (TMA) sections, obtained from the original paraffin blocks of breast tumors. Photomicrographies were obtained from the immunohistochemistry TMA slides. The positive cells were counted. Clinical, pathological and prognostic / predictive therapeutic response variables were obtained from the medical records. Results and conclusions: The median patient age was 57 years (range 28-84), the median BMI (body mass index) was 27 (range 13-39), 6,8% were smokers, 58,9% were in menopause and 10,8% related familial cancer history. The median follow-up was 52 months, with tumor relapse in 28,6% of the cases, median relapse time of 37 months and death of 26,7% of the patients. The mainly positive NSC immunohistochemistry antibodies in our study were CD24, CD44, CD133 and ESA. The others antibodies were positive in less of 15% of the cases. At least one NSC marker was expressed in 85% of the cases. The mainly individual positive NSC antibody was CD44, in 60,8% of the cases. For didatic reasons, two NSC profiles were defined: (1) CD24 - / CD44+ cells and (2) CD133+ / ESA+ cells. The first NSC profile was more frequent in: (1) patients older than 40 years; (2) tumors smaller than 2,0 cm; (3) beginning tumor clinical stages (I and II); (4) and this expression rise the death risk in about 4 times. The second NSC profile rise the relapse tumor risk in about 3,75 times. Anyone NSC antibody expression was more frequent in high histologic grades of tumor (2 and 3). Isolated CD133 expression was more frequent in menopaused patients, isolated CD24 expression was more frequent in tumors larger than 2,0 cm and isolated CD44 expression was more frequent in patients upper than 40 years. No significant intermarkers correlations were observed. Thus, immunohistochemistry is a low sensibility method to detect NSC markers in human breast cancer, limiting the quantitative analysis of them. For this reason, there is not sufficient evidences to support the clinical value of NSC markers / Mestrado / Fisiopatologia Médica / Mestre em Ciências

Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T19:05:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rossanese_LillianBarbosadeQueiroz_D.pdf: 6549748 bytes, checksum: 054df2cab96a347008ff6d310b9dcfa9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Mutações germinativas no gene APC (Polipose adenomatosa coli) são responsáveis pela ocorrência de polipose adenomatosa familiar (PAF). Mutações somáticas levam à transformação maligna de adenomas. O objetivo desse trabalho foi identificar mutações germinativas no gene APC. No presente estudo, 20 pacientes com PAF foram estudados. A determinação das mutações germinativas no APC foi realizada por meio de sequenciamento, e as mutações foram comparadas com marcadores clínicos (sexo, idade no momento do diagnóstico, tabagismo, estádio TNM, classificação Coller-Astler e o grau de diferenciação do adenocarcinoma). Os dados foram comparados por meio do programa SPSS , com o teste de Fisher e teste de ?2 , considerando ? = 0,05. De acordo com os principais resultados da nossa amostra, 16 alelos com mutações deletérias (80 % dos pacientes) foram identificados, enquanto 7 (35%) pacientes não tinham mutações deletérias. Houve um predomínio de mutações nonsense (45% dos pacientes) e de mutações frameshift (20% dos pacientes). Não houve significância estatística entre as mutações germinativas identificadas e as variáveis clínicas consideradas em nosso estudo. Apenas a fase TNM foi associada com a presença de mutações deletérias. Os portadores com mutações deletérias tinha uma OR , 0,086 ( IC = 0,001-0,984 ); TNM I + II em comparação com III + IV , quando comparado com os pacientes sem mutações deletérias identificados. Neste estudo, demonstramos a heterogeneidade molecular de mutações germinativas no APC em portadores de PAF e a dificuldade para realizar diagnóstico molecular em uma população brasileira / Abstract: Adenomatous polyposis coli (APC) germline mutations are responsible for the occurrence of familial adenomatous polyposis (FAP). Somatic mutations lead to malignant transformation of adenomas. In this context, considering the significance of APC germline mutations in FAP, we aimed to identify APC germline mutations. In the present study, 20 FAP patients were enrolled. The determination of APC germline mutations was performed using sequencing, and the mutations were compared with clinical markers (gender, age at diagnosis, smoking habits, TNM stage, Astler-Coller stage, degree of differentiation of adenocarcinoma). The data were compared using the SPSS program, with the Fisher's exact test and ?2 test, considering ?=0.05. According to the main results in our sample, 16 alleles with deleterious mutations (80% of the patients) were identified while 7 (35%) patients had no deleterious mutations. There was a predominance of nonsense (45% of the patients) and frameshift (20% of the patients) mutations. There was no statistical significance between the APC germline mutations identified and the clinical variables considered in our study. Only TNM stage was associated with the presence of deleterious mutations. Patients with deleterious mutations had an OR, 0.086 (IC=0.001-0.984); TNM stage I + II in comparison with III + IV, when compared with the patients with no deleterious mutations identified. In this context, as a conclusion, we demonstrated the molecular heterogeneity of APC germline mutations in FAP and the difficulty to perform molecular diagnostics in a Brazilian population, considering the admixed population analyzed / Doutorado / Clinica Medica / Doutora em Ciências