The colorectal cancer (CRC) is the third most common malignancy in the world and in Brazil, the fifth most diagnosed and the third cause of cancer deaths. The detection of molecular markers in peripheral blood applies to the early diagnosis of cancer, before and after surgery, reducing the time of identification of CCR and improving the treatment, it is less invasive and reducing costs. This work is quantified by Real Time PCR in absolute and direct, free of DNA fragments found in the serum of patients with colorectal cancer, thereby determining values that characterize the condition of carrier of tumor. For this, a method was developed in which the measurement used as reference samples of the actual fragments ALU115 and ALU247 purified and quantified. We studied 3 major groups: Control, with healthy volunteers; surgery, patients who have already been submitted to surgical removal of colorectal tumor and non-surgery, patients who have not removed the tumor through surgery. Observing the results we note that the groups differ mainly by the values of quantification ALU247. For the control group, the limits were between 91 fentogramas and 1.55 picograms. The non operated group had amounts ranging from 8.02pg to 23.54pg and the group operators, 80fg to 5.95pg. In contrary, the results presented by quantification ALU115 did not set limits defined capable of differentiating at least one of the groups. The control group presented as limits 2pg and 69.45pg and the non operated group, 9.71pg and and 381.56pg, the group operated, 10.69pg and 196.85pg. The non operated group showed a mean significant when compared to the other two groups, but showed minor differences in the quantification ALU247 (14.62 ± 4.73 pg - p <0.05). It could be concluded that direct measurement, using reference concentrations of the fragments themselves ALU115 and ALU247 is a simple methodology, low cost and with reliable results. Moreover, the quantification ALU247 is able to identify the condition of carrier of tumor. / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / O câncer colorretal (CCR) é a terceira neoplasia maligna mais frequente no mundo, sendo no Brasil a quinta mais diagnosticada e a terceira causa de morte por câncer. A detecção de marcadores moleculares no sangue periférico aplica-se ao diagnóstico precoce de neoplasias, antes e após procedimento cirúrgico, diminuindo assim o tempo de identificação do CCR e melhorando o tratamento, que se torna menos invasivo e diminuindo os custos. O objetivo deste trabalho é quantificar, através da PCR em Tempo Real de forma absoluta e direta, os fragmentos de DNA Livre encontrados no soro de pacientes com câncer colorretal, determinando assim valores que caracterizam a condição de portador de tumor. Para isso, foi desenvolvido um método em que a quantificação utiliza como amostras de referências os próprios fragmentos ALU115 e ALU247 purificados e quantificados. Foram estudados 3 grandes grupos: Controle, com voluntários saudáveis; Operados, pacientes que já se submeteram à cirurgia para retirada de tumor colorretal; e Não-Operados, pacientes que ainda não retiraram o tumor através de cirurgia. Observando os resultados podemos notar que os grupos se diferenciam principalmente através dos valores da quantificação ALU247. Para o grupo Controle, os limites ficaram entre 91 fentogramas e 1,55 picogramas. O grupo Não-Operados apresentou quantidades que vão de 8,02pg a 23,54pg e, o grupo Operados, de 80fg a 5,95 pg. De forma contrária, os resultados apresentados pela quantificação ALU115 não permitiram estabelecer limites definidos capazes de diferenciar pelo menos um dos grupos. O grupo Controle apresentou como limites 2pg e 69,45pg; o grupo Não-Operados, 9,71pg e 381,56pg e; o grupo Operados, 10,69pg e 196,85pg. O grupo Não-Operados apresentou uma média significativa quando comparado aos outros dois grupos, porém apresentou menor heterogeneidade na quantificação ALU247 (14,62pg ± 4,73 - p<0,05). Foi possível concluir que a quantificação direta, utilizando como concentrações de referência os próprios fragmentos ALU115 e ALU247, mostrou-se uma metodologia simples, de baixo custo e com resultados confiáveis. Além disso, a quantificação ALU247 é capaz de identificar a condição de portador de tumor.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Mato Grosso - FAPEMAT / O cancer colorretal (CCR) e a segunda neoplasia maligna mais prevalente no mundo, sendo quarto tumor mais incidente entre os homens e o terceiro entre as mulheres. Aproximadamente 608.700 mortes por ano sao atribuidas a esta causa. Sua etiologia multifatorial envolve complexa interacao entre fatores ambientais e geneticos, o que resulta em um risco acumulado de 6% de desenvolver CCR ao longo da vida. Os fatores prognosticos histopatologicos habitualmente utilizados como parametros de tratamento e prognostico tem divergencias inerentes ao metodo. Mesmo com tratamento adequado, aproximadamente 40% dos pacientes com CCR apresentarao recidivas, muitas vezes sem haver fatores de mau prognostico previos tornando necessaria a busca por novos marcadores mais precisos e uniformes. Dentre estes, os polimorfismos geneticos surgem como candidatos a fatores de risco para etiologia, prognostico e resposta terapeutica, porem com resultados nao consensuais, nao havendo no Brasil muitas informacoes e nenhuma em Mato Grosso. O objetivo deste estudo foi identificar as frequencias dos polimorfismos dos genes TP53 codon 72 G>C (Arg/Pro) (rs1042522) e VEGFA: -1498C>T (rs833031), -634G>C (rs2010963), +936C>T (rs3025039) e investigar suas associacoes com fatores prognosticos clinicos, anatomopatologicos e a sobrevida, por meio de estudo epidemiologico tipo coorte prospectivo constituido por 131 pacientes operados consecutivamente por CCR em Cuiaba- Mato Grosso. O DNA foi extraido de sangue periferico e sua amplificacao e discriminacao alelica para cada polimorfismo estudado foi realizada atraves da tecnica de reacao em cadeia de polimerase em tempo real. A analise de associacao entre as variaveis categoricas foi feita atraves da regressao logistica, a sobrevida pelo metodo de Kaplan e Meier e para a analise multivariada a regressao de Cox. Os resultados mostraram que as frequencias dos polimorfismos dos genes TP53 e VEGFA foram semelhantes as encontradas nos diferentes estudos. Conclusao: Houve associacao entre o genotipo C/C do VEGFA-1498C>T e metastase hepatica (p=0,048) e entre o genotipo C/T do VEGFA+936C>T com invasao perineural (p=0,026). Os genotipos C/T (HR=2,79) e C/C (HR=4,67) do gene VEGFA -1498C>T e C/C (HR=3,76) do gene VEGFA -634C>G atuaram como fatores prognosticos independentes para o risco de obito / Colorectal cancer (CRC) is the second most prevalent malignancy in the world being the fourth most frequent tumor among men and third among women. Approximately 608,700 deaths per year are attributed to this cause. Multifactorial etiology involves a complex interaction between genetic and environmental factors, resulting in a 6 % cumulative risk of developing CRC lifelong. The histopathological prognostic factors commonly used as parameters of treatment and prognosis have differences inherent to the method. Even with proper treatment, approximately 40 % of patients with CRC present recurrences, often with no previous risk factors for poor prognosis making it necessary to search for new markers more accurate and uniform. Among these markers, genetic polymorphisms arise as candidate to risk factor for etiology, prognosis and response to therapy, but the results were not consensual, not having a lot of information in Brazil and none in Mato Grosso. The aim of this study was to identify the frequencies of polymorphisms of TP53 codon 72 G> C (Arg/Pro) (rs1042522) and VEGFA : -1498C > T (rs833031) , -634G > C (rs2010963) , +936 C > T (rs3025039) and investigate their associations with clinical prognostic factors, pathological and survival through epidemiological prospective cohort consisting of 131 patients consecutively operated by CRC in Cuiabá, Mato Grosso . DNA was extracted from peripheral blood and its amplification and allelic discrimination for each polymorphism was performed using the technique of polymerase chain reaction in real time. The analysis of association between categorical variables was performed using logistic regression, survival by Kaplan and Meier method and multivariate analysis for the Cox regression. Results showed that the frequencies of polymorphisms of TP53 and VEGFA were similar to those in different studies. An association between genotype C / C of VEGFA -1498C > T and liver metastasis (p = 0.048) and between genotype C / T VEGFA +936 C> T with perineural invasion (p =0.026). The genotype C / T (HR = 2.79) and C / C (HR = 4.67) gene VEGFA -1498C > T and C / C (HR = 3.76) gene VEGFA -634C > G acted as independent prognostic factors for the risk of death by CRC. / FAPEMAT: 732622/2008 / FAPEMAT: 752508/2011 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-29. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:24Z : No. of bitstreams: 1 Publico-00205.pdf: 1087268 bytes, checksum: 8ae7e5f6bdd855e97595278010953ec4 (MD5) / Objetivo: Analisar as expressoes imunohistoquimicas das proteinas p53, bcl-2 e Ki-67 no adenocarcinoma colorretal, correlacionando-as com os fatores prognosticos clinico-patologicos. Metodo: Foram confeccionados blocos de parafina de TMA com tecido de adenocarcinoma colorretal ressecados cirurgicamente em 82 pacientes no Hospital Sao Paulo da UNIFESP/EPM, de 2002 a 2005, nao submetidos a radio ou quimioterapia. Cortes de 4 ƒÊm foram submetidos a reacao imunohistoquimica e obtidos escores de intensidade das imunoexpressoes, que foram correlacionados com o grau de diferenciacao celular, estadiamento, tempo livre de doenca, recidiva, sobrevida e mortalidade especifica entre si e com os dados de sobrevida dos pacientes. As variaveis do estudo foram analisadas pelos testes do qui-quadrado e de Kaplan-Meier para verificar as associacoes com os marcadores. A significancia das diferencas entre as curvas do tempo livre de doenca e da sobrevida foi analisada pelos testes de Logrank e Wilcoxon. Resultados: A expressao imunohistoquimica da p53 foi positiva em 70 tumores (85,4%) e negativa em 12 (14,6%). A bcl-2 foi positiva em 26 tumores (31,7%) e negativa em 56 (68,3%). A expressao imunohistoquimica da Ki-67 foi positiva em 62 tumores (75,6%), sendo em 20 (24,4%) negativa. Nao houve correlacao estatisticamente significante entre as expressoes imunohistoquimicas dos marcadores analisadas separadamente ou em conjunto, envolvendo o grau de diferenciacao celular, estadiamento, tempo livre de doenca, sobrevida e mortalidade especifica. Com relacao a recidiva, observou-se uma correlacao estatisticamente significante com a expressao imunohistoquimica positiva da Ki-67 (p= 0,035). Conclusao: A expressao imunohistoquimica positiva da Ki-67 no cancer colorretal esta relacionada com a incidencia de recidiva da doenca. / Purpose: To analyse the immunohistochemical expressions of the proteins p53, bcl-2 e Ki-67 in colorectal adenocarcinoma and correlate it with the clinical pathological prognostic factors. Methods: A TMA paraffin block was constructed with colorectal carcinoma tissue of 82 patients who had undergone surgery in the Hospital Sao Paulo-UNIFESP, from 2002 to 2005, submitted neither to chemo or radiotherapy. Four ìm sections from the was submitted to immunohistochemistry and immunoexpression staining scores were obtained, than was correlated with the degree of cellular differential, stage, relapse-free survival, relapse, survival and specific mortality. The variables of the study were analyzed by tests of the qui-square and Kaplan-Meyer to verify the markers association. The significance of the differences between the curves of relapse-free survival and of the overall survival was analyzed by tests of lgrank and Wilcoxon. Results: The immunohistochemical expression of the p53 was found to be positive in 70 tumours (85,4%) and negative in 12 (14,6%). The bcl-2 was found to be positive in 26 (31,7%) and negative in 56 (68,3%). The immunohistochemical expression of the ki-67 was found to be positive in 62 (75,6%) and negative in 20 (24,4 %). There was no correlation statistically significant between the markers expressions separately and in conjunction, involving the degree of cellular differentiation, stage, relapse-free survival, survival and specific mortality. With respect the relapse, there was a correlation statistically significant with the positive expression of the ki-67 (p53=0,035). Conclusion: The immunohistochemical expression of the Ki-67 in colorectal cancer is related to the incidence of the relapse of the disease. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-31 / Objetivo: Avaliar o significado prognóstico do marcador tumoral c-met/HGF, através da técnica imuno-histoquímica, em doentes portadores de adenocarcinoma colorretal submetidos a tratamento cirúrgico. Métodos: Estudo retrospectivo de 286 doentes,portadores de adenocarcinoma colorretal, atendidos e operados no Hospital do Câncer de Barretos, de 1993 a 2002. A expressão tissular do marcador tumoral foi avaliada utilizando-se o anticorpo monoclonal antiproteína c-met/HGF, com a técnica da estreptavidina-biotina-peroxidase. A análise da positividade do marcador foi feita de maneira semiquantitativa e a leitura das lâminas, realizada por três patologistas, de forma independente e sem prévio conhecimento dos dados clínicos e histopatológicos dos doentes. Resultados: Do total de 286 doentes analisados, o marcador foi positivo em 236 (78,8%) e negativo em 50 (21,2%). Houve diferença, estatisticamente significante (p=0.004), entre os estádios l e lV, na sobrevida global (p=0.009) e no coeficiente de mortalidade por câncer (p=0.022), porém não se identificou associação do marcador com a ocorrência de recidivas (p=0.89) e o intervalo livre de doença (p=0.91). Conclusão: O marcador tumoral c-met/HGF demonstrou significância estatística, em relação à sua expressão, nos estádios l e lV da doença, na sobrevida global e no coeficiente de mortalidade por câncer, porém não se associou de forma significante com as outras variáveis prognósticas estudadas. / Objective: To evaluate the prognostic meaning of the c-met/HGF tumoral marker, through the immunohistochemical technique, in patients with colorectal adenocarcinoma who have been subjected to surgical treatment. Methods: A retrospective descriptive study of 286 patients with colorectal adenocarcinoma, who have been seen and operated at Barretos Cancer Hospital, from 1993 to 2002. The tissular expression of the tumoral marker was evaluated using the cmet/ HGF anti-protein monoclonal antibody through the estreptavidin-biotinperoxidase technique. The positivity analysis of the marker was semiquantitative, and plate reading was independently carried out by three pathologists with no previous knowledge on clinical and histopathological data of patients. Results: Out of a total of 286 patients, the marker was positive in 236 (78.8%) and negative in 50 (21.2%). It was found statistically significant difference (p=0.004) between stages l and lV, at global life span (p=0.009), and at cancer mortality rate (p=0.022); however, there was no association between the marker and recurrence (p=0.89) or the marker and disease-free period (p=0.91). Conclusion: c-met/HGF has shown significance as a tumoral marker in stages l and lV of the disease, at global life span, and at cancer mortality rate; however, there was no significant association with the remaining prognostic variables that have been studied. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O câncer é a principal causa de morte nos paises economicamente desenvolvidos e a segunda em paises em desenvolvimento, resultado, em parte, da grande falta de especificidade dos tratamentos atualmente disponíveis. Por outro lado, uma aplicação clínica muito específica, denominada letalidade sintética, foi recentemente proposta. Nesta abordagem terapêutica os inibidores de poli(ADP-ribose) polimerases (PARP), também conhecidos como PARPis, mostraram-se capazes de induzir a morte celular seletiva em células tumorais com defeitos em BRCA1 e BRCA2 (ambas envolvidas no reparo de quebras duplas - DSBR). Assim, a excitante possibilidade de eliminar as células cancerígenas de maneira seletiva fez com que os PARPis passassem de interessantes ferramentas moleculares às mais promissoras drogas anticâncer da atualidade. Contudo, os mecanismos básicos envolvidos na citotoxicidade dos PARPis continuam pouco conhecidos e suas aplicações restritas a um pequeno grupo de cânceres. Por este motivo, neste trabalho, a citotoxicidade do Olaparib (um inibidor de PARP) foi investigada em um painel de linhagens de câncer colorretal (CRC). Os resultados demonstraram que o Olaparib é uma droga de ação lenta, cuja citotoxicidade pode ser modulada por defeitos genéticos em MLH1 (envolvido no reparo de bases mal-emparelhadas) e no supressor tumoral PTEN. Por outro lado, observou-se que o fenótipo MSI (Instabilidade de microssatélites) e os defeitos genéticos em p53 não influenciaram a citotoxicidade do Olaparib. Além disso, linhagens com resistência adquirida a Oxaliplatina (Oxp) e a 5-Fluorouracil (5- Fu) não apresentaram efeito refratário ao Olaparib, enquanto que linhagens com resistência adquirida a SN-38 (metabólito ativo do Irinotecano) apresentaram um forte efeito refratário. Finalmente, as associações de Oxp ou 5-Fu com Olaparib foram capazes de sensibilizar células com resistência relativa e adquirida. Juntos, estes resultados sugerem uma série de novas possibilidades para o emprego de inibidores de PARP no tratamento de CRC. / Cancer is the main cause of death in developed countries and the second in lessdeveloped countries, that results in part from the low specific treatments available. However, a very specific therapeutic approach, called synthetic lethality, was recently proposed. The best documented synthetic lethal interaction was reported between poly(ADP-ribose) polymerases inhibitors (PARPis) and defects in BRCA1 and BRCA2 (both involved in double-strand break repair - DSBR), which may induce selective cancer cells death. Therefore, the exciting possibility to selectively kill cancer cells has been moving PARPis from interesting molecular tools to the forefront of cancer therapy research. However, the basic mechanisms involved in PARPis cytotoxicity are still poorly studied and its clinical applications are restricted to a small number of malignances. Herein, the Olaparib (PARPi) cytotoxicity was investigated in a colorectal cancer (CRC) cell line panel. The results demonstrated that Olaparib is a slow action drug, which may have its effects increased in cells with MLH1 (involved in mismatch repair) and PTEN (tumor supressor) defects. On the other hand, neither the MSI (microsatellite instability) phenotype nor the p53 defects were observed to influence on Olaparib cytotoxicity. Further, neither Oxp nor 5-Fu resistant cell lines presented cross-resistance to Olaparib, whereas a pronounced cross-resistance was observed for SN-38 (Irinotecan metabolite) resistant cell line. Finally, Olaparib associations with Oxaliplatin or 5-Fluorouracil were shown to sensitize cells with both relative and acquired resistances. Together, these results suggest a series of new possible uses for PARP inhibitors in CRC treatment.

Trata-se de um estudo de abordagem qualitativa sob a perspectiva antropológica, que teve como objetivo apreender os sentidos da experiência cirúrgica de ressecção do câncer colorretal (CCR) e suas consequências na perspectiva do paciente. Utilizou-se o referencial teórico da antropologia interpretativa e o método etnográfico para apreender a experiência de treze pacientes em tratamento cirúrgico por CCR, que foram entrevistados em dois momentos, no pré e pós-operatórios, na unidade de internação de um hospital terciário. A coleta de dados ocorreu no período de junho a dezembro de 2012, por meio de entrevistas semiestruturadas gravadas em áudio, observações participantes e anotações em um diário de campo, cujos dados foram analisados por meio da análise de conteúdo indutiva. Os dados foram decodificados em dois núcleos temáticos, denominados de \"Esperança de cura pelo tratamento cirúrgico\" e \"Busca de confirmação de cura pela cirurgia\". No primeiro núcleo temático, da experiência de adoecimento relatada pelos pacientes foram extraídos os principais aspectos como o momento do aparecimento dos sintomas e do problema, a busca por atendimento à saúde e a suspeita do câncer, a notícia do diagnóstico oncológico, as expectativas e preocupações sobre o tratamento cirúrgico indicado, as consequências, os insucessos dos tratamentos prévios e a possibilidade da estomia intestinal. Com a interpretação destes dados verificamos que, independente dos acontecimentos, os pacientes buscam agregar informações, comportamentos e fatos para a manutenção da esperança de cura com a ressecção do CCR e consideram a estomia intestinal como uma necessidade para a possibilidade de cura. No segundo núcleo temático abordamos a experiência com o tratamento cirúrgico, no qual emergiram as expectativas em relação à ressecção do CCR, a utilização de estratégias de enfrentamento como redes de apoio, suporte profissional e atitudes otimistas na busca por confirmação de cura do câncer com a cirurgia e a estomia intestinal determina a gravidade do seu problema de saúde, contudo conseguem voltar a pensar em projetos de vida futuros. Com a interpretação destes dois núcleos temáticos, apreendemos que a cirurgia é considerada a única chance de cura para conseguirem retomar a sua vida familiar e cotidiana, e para tanto, buscam superar o estigma do câncer e todos os acontecimentos decorrentes do tratamento cirúrgico e do ambiente hospitalar, com canalização dos seus esforços para manter a esperança de que tudo dará certo. No pós-operatório, os pacientes buscam pistas sobre o sucesso da cirurgia e a sua evolução clínica passa a ser o indicativo da obtenção de cura para a nova chance de vida e surge a preocupação de aprendizagem dos cuidados com a estomia intestinal. Os resultados deste estudo poderão contribuir na melhoria do planejamento da assistência perioperatória ao paciente com CCR, com atendimento das suas necessidades / This is a qualitative study from the perspective of anthropology, which aimed to understand the meanings of the experience of surgical resection of colorectal cancer (RCC) and its impact on the patient\'s perspective. The theoretical framework of interpretive anthropology and ethnographic method to capture the experience of thirteen patients in surgical treatment for RCC has been used, who were interviewed on two occasions, before and after surgery, in the inpatient unit of a tertiary hospital. Data collection occurred from June to December 2012, through semi-structured interviews recorded on audio, participant observations and notes in a diary, and data were analyzed using inductive content analysis. The data were decoded in two thematic groups, called \"Hope for healing through surgical treatment\" and \"Seeking confirmation f the cure by surgery.\" \". In the first thematic group, the experience of illness reported by patients, the main aspects such as time of onset of symptoms and the problem were extracted, the search for health care and suspicion of cancer, the news of the cancer diagnosis, expectations and concerns about surgical treatment indicated, the consequences of the failure of previous treatments and the possibility of permanent intestinal ostomy. With the interpretation of these data it was found that regardless the events, patients seek to add information, facts and behaviors to maintain hope of cure with resection of RCC and consider the intestinal ostomy a necessity for the possibility of healing. In the second thematic group the experience with surgical treatment in which emerged the expectations for resection of RCC was addressed, the use of coping strategies such as support networks, professional support and optimistic attitudes in seeking confirmation of curing cancer with ostomy surgery and determine the severity of the health problem, however patients can think about future life plans again. With the interpretation of these two theme groups, we can see that the surgery is considered the only chance of cure and this way patients will be able to have their family life back, and therefore, they seek to overcome the stigma of cancer and all events resulting from surgical treatment and hospital environment, thus, channeling their efforts to keep the hope that everything will be alright. Postoperatively, patients seek clues about the success of surgery and clinical evolution becomes the target of achieving cure for the new chance of life and the concern of ostomy care occurs. The results of this study will contribute to the improvement of perioperative care planning for patients with RCC, with their needs attended

O câncer é a principal causa de morte nos paises economicamente desenvolvidos e a segunda em paises em desenvolvimento, resultado, em parte, da grande falta de especificidade dos tratamentos atualmente disponíveis. Por outro lado, uma aplicação clínica muito específica, denominada letalidade sintética, foi recentemente proposta. Nesta abordagem terapêutica os inibidores de poli(ADP-ribose) polimerases (PARP), também conhecidos como PARPis, mostraram-se capazes de induzir a morte celular seletiva em células tumorais com defeitos em BRCA1 e BRCA2 (ambas envolvidas no reparo de quebras duplas - DSBR). Assim, a excitante possibilidade de eliminar as células cancerígenas de maneira seletiva fez com que os PARPis passassem de interessantes ferramentas moleculares às mais promissoras drogas anticâncer da atualidade. Contudo, os mecanismos básicos envolvidos na citotoxicidade dos PARPis continuam pouco conhecidos e suas aplicações restritas a um pequeno grupo de cânceres. Por este motivo, neste trabalho, a citotoxicidade do Olaparib (um inibidor de PARP) foi investigada em um painel de linhagens de câncer colorretal (CRC). Os resultados demonstraram que o Olaparib é uma droga de ação lenta, cuja citotoxicidade pode ser modulada por defeitos genéticos em MLH1 (envolvido no reparo de bases mal-emparelhadas) e no supressor tumoral PTEN. Por outro lado, observou-se que o fenótipo MSI (Instabilidade de microssatélites) e os defeitos genéticos em p53 não influenciaram a citotoxicidade do Olaparib. Além disso, linhagens com resistência adquirida a Oxaliplatina (Oxp) e a 5-Fluorouracil (5- Fu) não apresentaram efeito refratário ao Olaparib, enquanto que linhagens com resistência adquirida a SN-38 (metabólito ativo do Irinotecano) apresentaram um forte efeito refratário. Finalmente, as associações de Oxp ou 5-Fu com Olaparib foram capazes de sensibilizar células com resistência relativa e adquirida. Juntos, estes resultados sugerem uma série de novas possibilidades para o emprego de inibidores de PARP no tratamento de CRC. / Cancer is the main cause of death in developed countries and the second in lessdeveloped countries, that results in part from the low specific treatments available. However, a very specific therapeutic approach, called synthetic lethality, was recently proposed. The best documented synthetic lethal interaction was reported between poly(ADP-ribose) polymerases inhibitors (PARPis) and defects in BRCA1 and BRCA2 (both involved in double-strand break repair - DSBR), which may induce selective cancer cells death. Therefore, the exciting possibility to selectively kill cancer cells has been moving PARPis from interesting molecular tools to the forefront of cancer therapy research. However, the basic mechanisms involved in PARPis cytotoxicity are still poorly studied and its clinical applications are restricted to a small number of malignances. Herein, the Olaparib (PARPi) cytotoxicity was investigated in a colorectal cancer (CRC) cell line panel. The results demonstrated that Olaparib is a slow action drug, which may have its effects increased in cells with MLH1 (involved in mismatch repair) and PTEN (tumor supressor) defects. On the other hand, neither the MSI (microsatellite instability) phenotype nor the p53 defects were observed to influence on Olaparib cytotoxicity. Further, neither Oxp nor 5-Fu resistant cell lines presented cross-resistance to Olaparib, whereas a pronounced cross-resistance was observed for SN-38 (Irinotecan metabolite) resistant cell line. Finally, Olaparib associations with Oxaliplatin or 5-Fluorouracil were shown to sensitize cells with both relative and acquired resistances. Together, these results suggest a series of new possible uses for PARP inhibitors in CRC treatment.

Orientador: Iscia Teresinha Lopes-Cendes, Carmen Passos Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T07:38:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Viana_DaniloVilela_M.pdf: 17449794 bytes, checksum: 5628cf41f1e3b3dae3d2ad85bb64f5d4 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O câncer de cólon e reto é a quinta causa de mortalidade por câncer no Brasil. Sua taxa de mortalidade vem apresentando um aumento contínuo desde 1979. Entre os fatores de risco mais importantes para essa doença está a história familial de câncer de cólon e reto ou de pólipos adenomatosos. O propósito do presente estudo foi investigar a qualidade das histórias familiais (HF) registradas nos prontuários médicos e estimar a freqüência dos agregados familiais e das síndromes hereditárias de câncer nos pacientes com diagnóstico de câncer de cólon e reto atendidos no Hospital de Clínicas da UNICAMP. Um estudo retrospectivo foi delineado para avaliar os prontuários dos pacientes que tinham confirmação histopatológica do diagnóstico de adenocarcinoma de cólon ou reto. Inicialmente, 415 prontuários que apresentavam codificação para a doença foram selecionados a partir do livro de cirurgias e de uma lista de pacientes atendidos nos ambulatórios de oncologia clínica, radioterapia e proctologia. Foram excluídos 104, sendo realizada a revisão de 311 prontuários. Numa segunda fase do estudo todos esses pacientes foram convocados para um entrevista com médico geneticista para obtenção de nova história familial, e comparação subseqüente dos dados, na qual a história familial previamente registrada foi classificada como completa ou incompleta. Dentre os 311 prontuários revisados, 193 (62%) tinham HF de câncer registrada. No total, 95 pacientes compareceram à entrevista, dos quais 66 tinha HF registrada no seu prontuário para que fosse feita comparação. Dessas 66 HF, 21 (32%) puderam ser consideradas completas e 45 (68%) incompletas. Pelo menos um critério clínico para câncer hereditário foi preenchido por 39 pacientes. Agregação familiar de CCR foi encontrada em 19% dos indivíduos entrevistados. Estes achados demonstram que a coleta e o correto preenchimento das histórias familiais nos prontuários dos pacientes com câncer são freqüentemente negligenciados, o que poderia influenciar negativamente na qualidade da assistência médica a eles prestada. As formas hereditárias de câncer hereditário, em especial a síndrome de Lynch (câncer colorretal hereditário sem polipose - HNPCC), são subdiagnosticadas, impossibilitando que medidas preventivas e diagnóstico precoce sejam oferecidos às suas famílias. / Abstract: Colorectal cancer is the 5th mortality cause by cancer in Brazil, and has been showing a continuous increase in mortality since 1979. Among the most important risk factors for this disease is family history of CRC or adenomatous polyps. The purpose of the present study was to investigate family histories (FH) recorded in medical charts for completeness and accuracy and to estimate the frequency of cancer aggregates and cancer syndromes in colorectal cancer patients treated in a general hospital. A retrospective study was assembled to evaluate archived charts of patients with pathological diagnosis of colorectal adenocarcinoma. Four hundred and fifteen medical records with ICD-10 coding of colorectal cancer were selected from the list of pacients who had had consultation in the clinical oncology, radiation oncology or proctology clinics, from which 104 were excluded because of misclassification or unconfirmed diagnosis. 311 charts were fully reviewed, and these patients invited for a personal interview by a medical geneticist. FH obtained from chart reviews were compared to data obtained from personal interviews and subsequently classified as complete or incomplete. Among the 311 charts, 193 (62%) had FH of cancer recorded. Overall, 95 patients attended the interviews, 66 of whom had a FH recorded in their hospital charts allowing accuracy comparisons. Of these, 21/66 (32%) FH could be considered complete and 45/66 (68%) incomplete. Thirty-nine patients met at least one criterion for hereditary cancer. Familial aggregates of colorectal cancer were found in 18 families (19%). In conclusion, the data in this study showed that FH in medical charts were often flawed or carried important omissions, which could influence negatively medical attention delivered to patients, and that hereditary forms of cancer, especially hereditary non-polyposis colorectal cancer, were underdiagnosed, making it impossible to extend the benefits of early diagnosis and preventive measures to at risk family members. / Mestrado / Genetica Medica / Mestre em Ciências Médicas

Introdução: O Câncer Colorretal (CCR) localmente avançado é caracterizado pela aderência ou invasão do tumor primário a órgãos ou estruturas vizinhas. Nesses pacientes, a realização de cirurgia alargada por meio de ressecção multivisceral em bloco constitui a melhor alternativa para prover perspectivas de cura. Os objetivos desse estudo foram estimar a incidência das lesões localmente avançadas em nosso meio, avaliar os resultados operatórios e investigar os fatores que influenciaram o prognóstico. Pacientes e Métodos: realizou-se estudo coorte retrospectivo incluindo 679 pacientes com CCR que foram submetidos a tratamento cirúrgico entre 1995 a 2007. Foram anotados dados clínicos (idade, sexo e co-morbidades), cirúrgicos e histológicos (localização da neoplasia, órgãos adjacentes comprometidos e disseminação tumoral) dos pacientes portadores de neoplasia colorretal localmente avançada. Os índices de sobrevida foram estimados pela curva de Kaplan Meier considerando apenas os doentes que foram submetidos à operações com intenção curativa. Resultados: 90 pacientes (13,2%) com tumor localmente avançado foram identificados. A idade média foi de 59 anos e houve predomínio no sexo feminino (61%). A distribuição topográfica demonstrou que 66% dos tumores localizavam-se no cólon e 34% no reto. A distribuição quanto ao sexo revelou maior prevalência dos tumores retais entre as mulheres (77%; p=0,02). Complicações no pós-operatório foram registradas em 25,6% dos doentes, representados principalmente por deiscência e/ou infecção da parede abdominal (22%), íleo prolongado (14,8%) e deiscência de anastomose (11,1%). A mortalidade peri-operatória foi de 3,3%. Os órgãos mais freqüentemente envolvidos foram o intestino delgado (19,9%), bexiga (16,4%) e útero (12,9%). Quanto à penetração tumoral, foram detectadas lesões T4 em 58% e lesões T3 em 42%. A sobrevida de 5 anos foi menor entre os tumores T4 em relação às lesões T3 (50% vs. 75%; p=0,01). Em média, 21,6 linfonodos (LN) foram ressecados durante os procedimentos e o envolvimento linfonodal pela neoplasia determinou sobrevida menor (35% LN+ vs. 80%LN -; p=0,004). Observou-se também redução dos índices de sobrevida associados a outros fatores como a presença da invasão vascular, linfática e perineural (35% vs. 80%; p=0,02), e localização retal dos tumores quando comparada às lesões colônicas (45% vs. 65%; p=0,01). Por outro lado, o caráter neoplásico (59%) ou inflamatório (41%) das aderências não influenciou significativamente os índices de sobrevida (55% vs. 65%, p=0,60). Conclusão: 1) durante o período de estudo, detectaram-se lesões localmente avançadas em 13,2% dos pacientes; 2) ocorreram complicações operatórias em 25% dos procedimentos; 3) a sobrevida dos pacientes submetidos a operações com intenção curativa sofreu impacto negativo na presença de maior penetração na parede, invasão vascular, linfática e perineural, nos tumores de localização retal e naqueles com linfonodos comprometidos; 4) outras variáveis como tipo histológico, grau de diferenciação tumoral, número de órgãos ressecados, transfusão de sangue e caráter das aderências entre órgãos não influenciaram as chances de sobrevida / Locally advanced colorectal tumors are characterized by adherence or invasion of the primary tumor into surrounding structures and organs. For these patients, an en-bloc multivisceral resection represents the best alternative for cure. The aims of this study were to estimate the incidence of locally advanced lesions in our service, to evaluate operative results and to investigate factors that could influence prognosis. A retrospective cohort study was performed including 679 patients with colorectal cancer (CRC) who underwent surgery from 1995 to 2007. Clinical (age, gender, comorbidities), surgical and histological (tumor location, involved organs and tumor spreading) data were collected from patients with locally advanced colorectal cancer. Survival rates were estimated by the Kaplan-Meier curve considering only patients who underwent curative procedures. Ninety patients (13.2%) with locally advanced tumors were identified. Average age was 59 years and there was a female predominance (61%). Regarding topographic distribution, 66% of the lesions were colonic and 34% were located in the rectum. Gender distribution showed a higher prevalence of rectal tumors among women (77%; p=0.02). Postoperative morbidity occurred in 25.6% of the patients, the most common being abdominal wall infection (22%), prolonged ileus (14.8%) and anastomosis dehiscence (11.1%). Mortality rate was 3.3%. Involvement of adjacent organs was more frequently detected with the small intestine (19.9%), bladder (16.4%) and uterus (12.9%). Concerning tumor penetration, there were detected T4 lesions in 58% and T3 lesions in 42%; Five years survival was smaller in the former lesions (50% vs. 75%; p=0.01). During surgery 21.6 lymph nodes were resected on average, and the presence of positive nodes determined shorter survival (35% vs. 80%, p=0.004). It was also observed shorter survival rates associated with other factors such as the presence of vascular, lymphatic, and perineural invasion (35% vs. 80%, p=0.02) and rectal tumor location compared to colonic ones (45% vs. 65%, p=0.01). On the other hand, the neoplastic (59%) or inflammatory nature (41%) of adhesions did not significantly influence survival rates (55% vs. 65%, p=0.60). During the period of study it was possible to conclude that 1) locally advanced lesions represented 13.2% of the patients; 2) there were operative complications in 25% of the procedures; 3) survival of patients undergoing curative-intended surgery had a negative impact with deeper tumor wall penetration, vascular, lymphatic and/or perineural invasion, rectal location (compared to colonic) and positive lymph nodes. 4) other variables such as histological type, tumoral differentiation and number of resected organs, blood transfusion and character of adhesions between organs did not affect chances of survival

A Quimioterapia antineoplásica (QtA) adjuvante para câncer colorretal (CCR) traz consequências fisiológicas e psicossociais como os eventos adversos (EA) gastrintestinais e dermatológicos, que podem trazer dificuldades na utilização de equipamentos para os pacientes com estomia intestinal. Este estudo teve por objetivos analisar a produção científica nacional e internacional sobre os EA gastrintestinais e dermatológicos para pacientes com CCR em QtA adjuvante; e estabelecer as recomendações em relação à indicação de equipamentos coletores e adjuvantes para os pacientes com estomia intestinal por CCR, assim como para os cuidados com a estomia intestinal e o manejo destes equipamentos durante a QtA, com base nas evidências científicas. Trata-se de uma Revisão Integrativa, fundamentada na Prática Baseada em Evidências, cuja pergunta formulada foi: Quais os EA gastrintestinal e dermatológico decorrentes da quimioterapia adjuvante em pacientes com câncer colorretal? Os descritores utilizados para as buscas foram Neoplasias Colorretais, Quimioterapia, Toxicidade, Efeitos adversos, nas bases de indexação eletrônica PubMed, Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS), Cumulative Index to Nursing and Allied Health (CINAHL), e Excerpta Médica (EMBASE), mediante os critérios de inclusão: estudos que abordassem a ocorrência e o tratamento de EA gastrintestinais ou dermatológicos em pacientes com CCR em QtA adjuvante; e estudos publicados em inglês, português ou espanhol, sem corte temporal de publicação; obtidos na íntegra via Biblioteca Central do Campus de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo; e os critérios de exclusão que foram estudos em modelo animal e modelo in vitro; estudos sobre metástases associadas ao tumor primário colorretal. Do total de 4.021 artigos científicos, resultantes das buscas, foram selecionados mediante os critérios de inclusão e exclusão, 20 estudos que constituíram a amostra final, sendo que todos foram publicados em inglês, com níveis de evidência pouco fortes em 65% (IV e VI) e cujos aspectos abordados foram categorizados em quatro temáticas: Diarreia e demais EA gastrintestinais; Diarreia e EA Gastrodermatológicos; EA Gastrintestinais; e EA Dermatológicos. No tema Diarreia e demais EA gastrintestinais evidenciou-se diarreia, náusea, perda de apetite e constipação, vinculados à QtA adjuvante com 5-FU, capecitabina e irinotecano. No tema Diarreia e EA Gastrodermatológicos evidenciou-se síndrome palmar-plantar, outras afecções cutâneas (eritema, úlcera, descamação, prurido, eritema, bolha), estomatite, edema das mãos/face/boca, e hipersensibilidade por capecitabina e oxaliplatina. No tema EA Gastrintestinais verificamos que náusea e vômito foram mais frequentes e relacionados à oxaliplatina. No tema EA Dermatológicos, evidenciou-se rash cutâneo, rubor, prurido, reações alérgicas, síndrome palmar-plantar nos esquemas com 5-FU, capecitabina, oxaliplatina e irinotecano. Considerando estas evidências e a necessidade de utilização de equipamentos coletores do paciente com estomia intestinal por CCR em QtA adjuvante, a assistência de enfermagem especializada deve assegurar a demarcação de estoma, ensino do autocuidado sobre EA e seu manejo, indicação e fornecimento de equipamentos coletores e adjuvantes, que atendam as suas necessidades, assim como o desenvolvimento de protocolos para avaliação dos EA gastrintestinais e dermatológicos durante a QtA adjuvante / The antineoplastic chemotherapy for adjuvant colorectal cancer (ACC) brings physiological and psychosocial consequences such as gastrointestinal and dermatologic adverse events (AE), which can cause difficulties in using equipment for patients with ostomy. This study aimed to analyze the national and international scientific literature on the gastrointestinal and dermatological EA for patients with CRC in adjuvant chemotherapy; and establish recommendations regarding the indication of equipment supplies and also aid for patients with ostomy by CRC, as well as for ostomy care and management of this equipment during the chemotherapy, based on scientific evidence. This is an integrative review, based on the evidence-based practice, whose question was: What are the gastrointestinal and dermatological EA resulting from adjuvant chemotherapy in patients with colorectal cancer? The descriptors used for the search were Colorectal neoplasms, Drug therapy, Toxicity, and Adverse effects, in electronics PubMed indexing bases, Latin American and Caribbean Health Sciences (LILACS), Cumulative Index to Nursing and Allied Health (CINAHL) and Excerpta Medical (EMBASE) by the inclusion criteria: studies that addressed the occurrence and treatment of gastrointestinal or dermatological EA in patients with CRC in adjuvant chemotherapy; and studies published in English, Portuguese or Spanish, without temporal cutting time publication; obtained in entirety at Ribeirão Preto Campus Central Library of the University of São Paulo; and the exclusion criteria were studies in animal models and in vitro model; studies on colorectal metastases associated with primary tumor. Of the total of 4,021 scientific articles resulting from the searches, they were selected by the inclusion and exclusion criteria, 20 studies which formed the final sample, all of which have been published in English, with little strong evidence levels 65% (IV and VI) and whose addressed aspects were categorized into four themes: Diarrhea and other gastrointestinal EA; Diarrhea and gastrointestinal and dermatologic EA; Gastrointestinal EA; Dermatologic EA. In the subject Diarrhea and other gastrointestinal EA became evident diarrhea, nausea, loss of appetite and constipation linked with adjuvant 5-FU, capecitabine, and irinotecan. On the topic diarrhea and Gastrointestinal and dermatologic EA showed up hand-foot syndrome, other skin disorders (erythema, ulcers, peeling, itching, erythema, and bubble), and stomatitis, swelling of the hands / face / mouth, and hypersensitivity oxaliplatin and capecitabine. On the topic Gastrointestinal EA were found that nausea and vomiting were more frequent and related to oxaliplatin. On the topic of Dermatological EA, evidence of skin rash, redness, itching, allergic reactions and palmar-plantar syndrome in the schemes with 5-FU, capecitabine, oxaliplatin and irinotecan. Considering this evidence and the need for equipment supplies in patients with ostomy by CRC in chemotherapy, specialized nursing care to ensure the demarcation of stoma, self-care education on EA and its management, display and supply collectors equipment and adjuvants that meet their needs, as well as the development of protocols for evaluation of gastrointestinal and dermatological EA during adjuvant chemotherapy.