INTRODUÇÃO: As adaptações cardiovasculares decorrentes do treinamento físico aeróbio de natação são bem descritas na literatura, entre ela temos a angiogênese. O treinamento físico aeróbio é um dos estímulos que promove angiogênese. Os microRNAs (miRNAs) são uma classe de RNA não codificadora de proteínas de diferentes células em diversos tecidos e estão envolvidos em processos angiogênicos, mas o papel dos miRNAs na angiogênese cardíaca decorrente ao treinamento aeróbico ainda não foi esclarecido. OBJETIVO: Analisar os efeitos de diferentes volumes de treinamento físico de natação sobre a expressão de microRNAs envolvidos na angiogênese cardíaca de ratos. MATERIAIS E MÉTODOS: Ratas Wistar (n=21) foram divididas em grupos Sedentário (SC), Treinado 1 (P1): natação 60min/dia, 5x/sem/10sem, com 5% de sobrecarga, Treinado 2 (P2): mesmo protocolo P1 até a 8ªsem, 9ªsem 2x/dia, e na 10ªsem 3x/dia. Após o período de treinamento, os corações foram retirados e o RNA total foi isolado para a análise da expressão de miRNAs no coração por microarray de miRNA e os miR-126, -let-7f, -221 e -222 foram confirmados por RT-PCR em tempo real. Analisamos ainda os alvos do miR-126, Spred-1 e PI3KR2, e a expressão de proteínas que compõem as vias de sinalização em que esses alvos interferem por Western Blotting. Avaliamos também: Frequência cardíaca (FC) e pressão arterial (PA) por pletismografia caudal, VO2 pico, hipertrofia cárdica (HC) pelo peso do Ventrículo esquerdo/Peso corporal (mg/g), razão capilar/fibra (C/F) por histologia, expressão proteica de VEGF e seus receptores. RESULTADOS: O treinamento aeróbico diminuiu a FC sem alterar a PA, VO2 pico aumentou 11% e 15% em P1 e P2, a HC foi de 17% e 30% em P1 e P2, a razão C/F aumentou 57% e 100% em P1 e P2, acompanhada de um aumento da expressão de VEGF (P1 =42%, P2 =109%). A expressão do miR-let-7f foi aumentada em P2 (140%) comparado aos outros dois grupos (SC = 100%; P1 = 113%), o miR- 221 teve sua expressão diminuida em ambos os grupos treinados comparados xiii ao grupo SC (SC = 100%; P1 = 71%; P2 = 74%), o miR-222 não apresentou diferença na sua expressão entre os grupos (SC = 100%; P1 = 76%; P2 = 81%) e a expressão do miR-126 foi aumentada em P1 (126%) e P2 (142%) comparados ao grupo SC, a expressão de ambos os alvos desse miRNA foi diminuida nos grupos treinados (Spred-1 SC = 100 ± 12,4; P1 = 60 ± 5,6; P2 = 61 ± 8,4; PI3KR2 100 ± 12,3; P1 = 61 ± 12,3; P2 = 21 ± 7,1). Essa diminuição da expressão dos alvos desse miRNA favoreceu um aumento da expressão de proteínas pertencentes as vias de sinalização da PIK3 e MAPKs. CONCLUSÃO: O treinamento aeróbico foi eficaz em promover um aumento da angiogênese cardíaca comprovada por uma maior razão capilar/fibra no coração dos animais treinados e por maior expressão proteica de VEGF, sendo ainda mais evidente nos animais que realizaram um maior volume de treinamento. Os miRNAs relacionados à angiogênese parecem estar envolvidos na regulação desse processo. Além disso, o miR-126 parece ser um dos principais miRNAs envolvidos nesse processo / INTRODUCTION: The cardiovascular adaptations resulting from aerobic physical swimming training are well described in the literature, between these adaptations we have the angiogenesis. The aerobic physical training is one of the stimulus that promotes angiogenesis. The micro RNAs are a class of non coding protein RNAs of different cells in different tissues and are involved in angiogenic processes, but the role of micro RNAs in cardiac angiogenesis due to aerobic training is not clear. OBJECTIVE: To analyze the effects of different volumes of swimming physical training on the expression of micro RNAs involved in angiogenesis in heart of rats. MATERIALS AND METHODS: Wistar female rats (n=21) were divided into groups Sedentary (SC), Trained 1 (P1): 60min/day swimming, 5x/week/10weeks with 5% overload, Trained 2 (P2): same protocol of P1 until the 8th week, 9th week 2x/day, and at 10th week 3x/day. After the training period, the hearts were removed and the total RNA was isolated to analyze the miRNAs expression in the heart by microarray of miRNA and the miRs-126, -let-7f, -221 and -222 were confirmed by real time RT-PCR. We also analyzed the targets miR-126, Spred-1 and PI3KR2, and the protein expression that form the signaling pathways that affect those targets by Western Blotting. We evaluated: heart rate (HR) and blood pressure (BP) by tail plethysmography, peak VO2, cardiac hypertrophy (CH) by weight left ventricle/ corporal weight (mg/g), capillary/fiber (C/P) ratio for histology, VEGF protein expression and its receptors. RESULTS: The aerobic training decreased the HR without change the BP, peak VO2 increased 11% and 15% in P1 and P2, the HR was 17% and 30% in P1 and P2, the ratio C/F increased 57% and 100% in P1 and P2, followed by an increase of VEGF expression (P1=42%, P2=109%). The miR-let-7f had its expression increased in P2 (140%) compared to the other two groups (SC = 100%; P1 = 113%), o miR-221 had its expression decreased in both trained groups compared to SC group (SC = 100%; P1 = 71%; P2 = 74%), the miR-222 showed no difference on its expression between the groups (SC = 100%; P1 = 76%; P2 = 81%) and the miR-126 expression xv was higher in P1 (126%) and P2 (142%) compared to SC group, the expression of both targets of this miRNA was decreased on trained groups (Spred-1 SC = 100 ± 12,4; P1 = 60 ± 5,6; P2 = 61 ± 8,4; PI3KR2 100 ± 12,3; P1 = 61 ± 12,3; P2 = 21 ± 7,1). This decrease of expression of this miRNA targets favor an increase of protein expression belonging to the PIK3 and MAPKs signaling pathways. CONCLUSIONS: The aerobic training was effective on promoting an increased of cardiac angiogenesis comproved by a higher ratio capillary/ fiber on the heart of trained animals and by a higher VEGF protein expression, being even more evident in animals that realized a higher volume training. The miRNAs related to angiogenesis seem to be involved in the regulation of this process. Besides that, the miR-126 seems to be one of the principal miRNA involved on this process

Tumores são definidos como microambientes compostos não só pelas células malignas, mas também por células endoteliais, fibroblastos e leucócitos, que promovem o crescimento tumoral e a angiogênese. Galectina-3, uma proteína que se liga a b- galactosídeos, é abundantemente expressa por monócitos/macrófagos, dentre outros leucócitos. Inúmeras evidências sugerem que galectina-3 atua como uma molécula reguladora da resposta inflamatória. Tendo em vista que o infiltrado inflamatório pode promover a progressão de tumores, o objetivo do presente trabalho foi avaliar se galectina-3, expressa tanto pela célula tumoral como pelas células estromais, modula o crescimento de melanoma. Para tal, células de melanoma murino Tm1 foram transfectadas com o gene de galectina-3. Ambos clones celulares (galectina-3 positivos e negativos) foram injetados na intrafáscia ou no subcutâneo de camundongos (fêmeas) C57BL/6 selvagens e/ou nocautes para o gene de galectina-3 para análise da implantabilidade e crescimento tumoral. Com relação à implantabilidade, não foi observado diferenças no estabelecimento de uma massa tumoral proliferativa em animais selvagens inoculados com células Tm1 transfectadas ou não com o gene de galectina-3 em animais selvagens. Em relação a taxa de crescimento dos tumores, nenhum animal nocaute inoculado com células Tm1 galectina-3 positivas apresentou tumores de dimensões mensuráveis até o 11º dia pós-inóculo. Independente do nível de expressão de galectina- 3 pela célula tumoral, os tumores originados nos animais nocautes apresentavam menor massa em gramas comparados ao grupo selvagem, sugerindo que galectina-3 expressa pelas células estromais promove o crescimento tumoral. Ainda, os tumores originados nos animais nocautes e no grupo selvagem inoculado com células Tm1 galectina-3 positivas apresentavam menor extensão de área necrótica do que os animais selvagens inoculados com células Tm1 galectina-3 negativas. Interessantemente, os animais selvagens e nocautes inoculados com células Tm1 galectina-3 positivas apresentaram tumores com menor área vascular e menor número de estruturas vasculares funcionais quando comparados aos animais selvagens inoculados com células Tm1 galectina-3 negativas. A análise de expressão gênica nos tumores mostrou que os níveis relativos de RNAm de VEFG (fator de crescimento de endotélio vascular) foram menores nos animais inoculados com células Tm1 galectina-3 positivas em relação aos inoculados com células Tm1 galectina-3 negativas, indicando que galectina-3 expressa pelas células tumorais atua como uma molécula anti-angiogênica. Finalizando, o presente trabalho sugere que galectina-3 pode atuar como uma molécula pró- ou anti-tumoral, dependendo do tipo celular que a expressa no microambiente tumoral. / Tumors have been described as microenvironments composed not only by malignant cells, but also by endothelial cells, fibroblasts and leukocytes, which can promote tumor growth and angiogenesis. Galectin-3, a b-galactoside binding protein, is expressed by monocytes/macrophages and others leukocytes. In fact, several lines of evidence suggest that galectin-3 act as master regulators of the inflammatory response. Based on the fact that the inflammatory infiltrate can promote tumor progression, the proposal of this study was to evaluate if galectin-3, either from tumor or stromal cells could modulate melanoma growth. Tm1 murine melanoma cell line was transfected with the galectin-3 gene. Both clones (galectin-3 negative and positive) were injected in the foot pad or subcutaneous in female C57BL/6 wild-type (WT) and galectin-3 knock-out (KO) mice to tumor engraftment and growth analysis. There was no difference in the tumor engraftment between animas injected with Tm1 galectin-3 positive or negative cells. In addition, any knock-out mice injected with galectin-3 positive cells had measurable tumors up to day 11 post inoculation. Regardless the galectin-3 expression level in the melanoma cell, tumors from galectin-3 KO mice were smaller than those from WT animals, suggesting that galectin-3 expressed by stromal cells promotes tumor growth. Moreover, tumor necrotic area was smaller in KO mice and in wild-type animals injected with Tm1 galectin-3 positive cells compared to wild type animals injected with Tm1 galectin-3 negative cells. Interestingly, both vascular area and the number of functional vessels in animals injected with galectin-3 positive Tm1 cells were smaller in WT as well as in KO mice compared to the same animals injected with galectin-3 negative Tm1 cells. Gene expression analysis showed that VEGF (vascular endothelial growth factor) mRNA levels were smaller in wild type animals injected with Tm1 galectin-3 positive cells compared to those injected with Tm1 galectin-3 negative cells, indicating that galectin-3 expressed by tumor cells can act as an anti-angiogenic molecule. The present study suggests that galectin-3 can act either as a pro or antitumoral molecule, depending on which type of cell (tumoral or stromal) this lectin is expressed within tumor microenvironment.

INTRODUÇÃO: A propriedade de induzir angiogênese torna o omento um promissor pedículo para pré-fabricar retalhos. OBJETIVO: Estabelecer a área abdominal a ser pré-fabricada por um pedículo omental e analisar o potencial de pré-fabricação (PPF) conforme o tempo de espera entre a introdução do pedículo e a elevação do retalho. MÉTODOS: Foram utilizados 44 coelhos divididos em quatro grupos (A, B, C e D). No grupo A, um fragmento de pele, tecido subcutâneo e músculo cutâneo abdominal foi totalmente separado e ressuturado. Nos demais grupos, um pedículo omental, contendo os vasos gastromentais ligados distalmente, com área equivalente a 9 cm² foi transposto e suturado ao músculo cutâneo abdominal. Um segundo procedimento de incisão e elevação de um retalho contendo pele, subcutâneo e músculo cutâneo abdominal pediculado apenas pelo omento transposto, foi realizado, variando apenas o período de espera entre os dois procedimentos de 7, 21 e 56 dias para os grupos B, C e D respectivamente. Após 15 dias do último procedimento, os retalhos foram visualizados e as áreas viáveis foram calculadas através do programa de computador Image Tool®. Cortes de áreas viáveis foram imunocoradas pelo anti-CD31 para cálculo da densidade microvascular (DMV). RESULTADOS: Os valores médio e máximo das áreas viáveis no grupo D foram respectivamente 45,29 cm² e 99,37 cm² (PPF mediano = 5,03 e PPF máximo = 11,04). Não houve diferença significativa entre as áreas viáveis do grupo D e C. As médias da DMV dos grupos B, C e D foram respectivamente 24,54 vasos/mm², 33,20 vasos/mm² e 27,03 vasos/mm² e maiores do que as médias da DMV das áreas controles de 14,63 vasos/mm², 17,33 vasos/mm² e 18,12 vasos/mm². No grupo A, houve necrose total em todos os retalhos. CONCLUSÃO: O PPF mediano do pedículo omental foi de 5,03 vezes sua área e o tempo de espera para o segundo procedimento foi de, no mínimo, 21dias / INTRODUCTION: The angiogenic induction property of the omentum makes it a promising pedicle to prefabricate flaps. OBJECTIVE: To establish the abdominal area to be prefabricated by the omental pedicle and to analyze the prefabricate potential according to the time delay between the pedicle introduction and the flap release. METHODS: 44 rabbits were divided into four groups (A, B, C and D). In group A, a piece of skin, subcutaneous tissue and abdominal cutaneous muscle has been fully released and sutured again in its place. In other groups, a 9 cm2 omental pedicle containing the gastromental vessels distally tied has been transposed and sutured to abdominal cutaneous muscle. A second procedure, an incision and release of the flap that contained skin, subcutaneous and cutaneous abdominal muscle pediculated only by the omentum, has been carried out. The only variation was the time delay between the two procedures: 7, 21and 56 days for groups B, C and D, respectively. The flaps have been inspected 15 days after the last procedure, and the viable areas have been estimated using the software Image Tool®. The pieces of viable area have been immunostained using anti-CD31 allowing the estimation of the microvascular density. RESULTS: The mean and maximum viable areas in group D were 45.29 cm2 and 99.37 cm2 respectively (average prefabricate potential = 5.03 and maximum prefabricate potential = 11.04). There was no significant difference between the viable areas in groups C and D. The mean microvascular densities of groups B, C and D were 24.54 vessels/mm2, 33.20 vessels/mm2 and 27.03 vessels/mm2 respectively. This was higher than the mean microvascular densities of the control areas, which were 14.63 vessels/mm2, 17.33 vessels/mm2 and 18.12 vessels/mm2. In group A, there were total necrosis in all flaps. CONCLUSION: The prefabricate potential of the omentum was found to be 5.03 times its area and the delay time for the second procedure was, at least, 21 days

Orientador: Valéria Helena Alves Cagnon Quitete / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T04:47:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kido_LarissaAkemi_M.pdf: 14026607 bytes, checksum: 4b5dcdcd04b3cf312f7b62cb4cf2ac2b (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A senescência está associada a mudanças significativas no ambiente hormonal, sendo fator causador de alterações morfofuncionais na próstata. Os diferentes processos biológicos que ocorrem na próstata são regulados por polipeptídeos, dentre esses os fatores de crescimento do endotélio vascular (VEGF) e Endostatina, relacionados à angiogênese. Além disso, inibidores da enzima 5_ redutase-II, como a finasterida, tem papel importante no combate às doenças prostáticas. Assim, os principais objetivos desse estudo foram avaliar os efeitos estruturais e moleculares das terapias antiangiogênicas e da finasterida sobre a próstata ventral de camundongos durante a senescência. Noventa camundongos machos FVB de 18 e 52 semanas de idade foram divididos nos seguintes grupos: Jovem (JV) e Senil (SEN), os quais receberam injeções de Solução Fisiológica 0,9% (5 mL/Kg/dia s.c.); Finasterida (FIN): injeções de Finasterida (20 mg/Kg, s.c.); SU5416 (SU): SU5416 (6 mg/Kg, i.p.); TNP-470 (TNP): injeções de TNP-470 (15 mg/Kg, s.c.), e SU5416 + TNP-470 (SU+TNP): os mesmos tratamentos dos grupos SU e TNP. Após 21 dias de tratamento, amostras do lobo ventral da próstata foram coletadas e submetidas às análises morfológicas, imunohistoquímicas e Western Blotting. Os resultados demonstraram alterações moleculares e estruturais no microambiente prostático durante a senescência, como atrofia presença de células inflamatórias, e lesões proliferativas, as quais foram interrompidas e ou bloqueadas através dos tratamentos com as drogas antiangiogênicas e pela finasterida. Os resultados moleculares revelaram no grupo senil a diminuição das reatividades para AR e Endostatina, e aumento para ER-_, ER-_ e VEGF, quando comparados aos camundongos jovens. Os camundongos dos grupos tratados com finasterida, SU5416 e SU5416+TNP-470, quando comparados aos do grupo senil, demonstraram de forma geral diminuição das reatividades de VEGF e ER-_ e aumento de ER-_. Já o tratamento com TNP-470 foi marcado principalmente pela redução da reatividade e dos níveis protéicos de AR e ER-_, quando comparado aos grupos jovem e senil. Desta maneira, conclui-se que a senescência favoreceu a ocorrência de alterações estruturais e/ ou funcionais que sugerem o aparecimento de lesões malignas, em virtude do desequilíbrio na sinalização entre epitélio e estroma. O tratamento com finasterida, SU5416 e SU5416+TNP- 470 mostraram-se mais ativos na regulação dos processos proliferativos através da via estrogênica / Abstract: Senescence is associated with significant changes in the hormonal environment and is a cause of morphological and functional changes in the prostate. The different biological processes that occur in the prostate are influenced by different factors such as vascular endothelial growth factor (VEGF) and Endostatin, related to angiogenesis. Also, 5_-reductase inhibitors, such as finasteride, play an important role in treatment of prostatic diseases. Thus, the aims of this study were to evaluate the structural and molecular effects of antiangiogenic therapies and finasteride on the ventral prostate of mice during senescence. Ninety 52 and 18 week old male FVB mice, were divided into groups: Young (YNG) and Senile (SEN) groups, which received 0.9% saline (5 mL/kg/day sc) injections; Finasteride (FIN) group: Finasteride (20 mg/kg, sc); SU5416 (SU) group: SU5416 (6 mg/kg, ip) injections; TNP-470 (TNP) group: TNP-470 (15 mg/kg, sc) injections and SU5416+TNP-470 (SU+TNP470) group: The same treatment as the SU and TNP-470 groups. After 21 days of treatment, samples of the ventral lobe of the prostate were collected and analyzed for morphological, immunohistochemical and Western Blotting analyses. The results demonstrated structural and molecular changes in the prostatic microenvironment during senescence, such as atrophy, inflammatory cells, and proliferative lesions, which were interrupted and/or blocked by treatment with antiangiogenic drugs and finasteride. The molecular results revealed decreased reactivity for AR and Endostatin, and an increase for ER-_, ER-_ and VEGF in the senile group, when compared to young mice. The mice in the groups treated with finasteride, SU5416 and SU5416 + TNP-470, when compared to the senile group, showed in general decreased VEGF and ER-_ reactivities and increased ER-_ reactivity. The treatment with TNP-470 however, was marked mainly by reduced AR and ER-_ reactivity and protein levels, when compared to young and senile groups. Thus, it can be concluded that senescence contributed to the occurrence of structural and/or molecular alterations that suggest the onset of malignant lesions, due to the imbalance in the signaling between the epithelium and stroma. Treatments with finasteride, SU5416 and SU5416+TNP-470, were active in the regulation of proliferative processes by means of the estrogen pathways / Mestrado / Anatomia / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Karina Gottardello Zecchin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-19T22:07:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gomes_CamillaBorgesFerreira_M.pdf: 2172456 bytes, checksum: 5dd9bb49385077ce4213db57e518b145 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O comprometimento ósseo em pacientes com câncer é responsável por significativas morbidade e redução da qualidade de vida, principalmente quando se trata de câncer de mama, no qual o esqueleto é o principal sítio de desenvolvimento das metástases. Bisfosfonatos (BPs) contendo ou não nitrogênio são os principais agentes usados no combate à perda óssea como na osteoporose, uma vez que induzem apoptose de osteoclastos. Recentemente foram demonstradas ações antitumoral e antiangiogência dos BPs, in vitro e in vivo. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi analisar e comparar os efeitos antitumorais e antiangiogênicos de BP que não contêm nitrogênio (clodronato, CLO) e BP contendo nitrogênio (ácido zoledrônico, ZOL), em linhagem celular derivada de câncer de mama, MCF-7, e em culturas de células endoteliais. Os resultados mostram que ZOL reduziu a proliferação das MCF-7 de maneira dose-dependente, com aumento do número de células nas fases G0/G1, sem alterar a viabilidade. Paralemamente, CLO não mostrou nenhum efeito sobre as células tumorais. O tratamento de células endoteliais de coelho, RAEC, com ZOL ou CLO reduziu a proliferação celular derivada, sem alterar sua viabilidade. Células endoteliais humanas HUVEC mostraram 15% de redução da viabilidade quando tratadas com ZOL, enquanto CLO não mostrou efeitos citotóxicos. A incubação de células HUVEC com meio condicionado por células MCF-7 tratadas com ZOL culminou na redução da proliferação das células endoteliais e na redução da formação de estruturas semelhantes a vasos, in vitro. Esse mesmo meio condicionado pelas células tumorais tratadas com ZOL resultou em menor proliferação de células provenientes de aorta murina, em ensaio ex vivo. Ensaios de imunoabsorbância revelaram diminuição nos níveis de VEGFA total nesse meio condicionado, assim como aumento da quantidade da isoforma antiangiogênica VEGFA165b, após tratamento das MCF-7 com ZOL. Por último, o tratamento das células MCF-7 com ZOL modulou a expressão de VEGFA total e de suas isoformas. Em conjunto, estes achados mostram que ZOL exibe ação antitumoral e antiangiogênica em células de câncer de mama e em células endoteliais. Tais dados contribuem para um maior esclarecimento sobre os mecanismos de ação dos BPs, permitindo buscas por melhorias no uso desses agentes como coadjuvantes na quimioterapia, a fim de minimizar a morbidade decorrente de metástases ósseas em tumores malignos / Abstract: Patients with cancer frequently develop bone metastasis, resulting in considerable morbidity and affecting quality of life. This is particularly important considering breast cancer, in which skeletal is the main site for metastasis. Non-nitrogen-containing and nitrogen-containing bisphosphonates (BPs) are the mainly agents to treat bone loss due to osteoporosis, Paget disease, bone metastasis, multiple myeloma, hypercalcemia and osteogenesis imperfecta. BPs impair bone loss by inducing apoptosis in osteoclasts. Recently it was shown anti-tumoral and anti-angiogenic effects of BPs, in vitro and in vivo. The present study aim to analyze and compare the anti-angiogenic pathway of the non-nitrogen-containing BP, clodronate (CLO), and the nitrogen-containing BP, zoledronic acid (ZOL), using estrogen receptor-positive breast cancer cell line, MCF-7, and endothelial cells. ZOL treatment reduced MCF-7 cell proliferation and induced cell cycle arrest in a dose-dependent manner, while CLO did not affect these cells. Treatment with ZOL or CLO also reduced RAEC cells proliferation, without changes in cell viability. HUVEC cells showed reduced viability after incubation with ZOL, but not with CLO. The conditioned medium by MCF-7 ZOL-treated cells reduced the formation of blood vessels in vitro and proliferation of HUVEC cells, together with lower endothelial cells proliferation derived from mouse aortic rings. Enzyme-linked immunoabsorbent assay showed reduction of ~25% in VEGFA levels, and increased amount of VEGFA165b isoform in the conditioned medium by ZOL-treated MCF-7 cells. The nitrogen-containing BP also modulated the expression of mRNAs for VEGF in MCF-7 treated cells. In all assays, CLO showed less anti-angiogenic properties when compared with ZOL. Data provided from this study amplify the knowledge of BPs actions, contributing for new approaches of bone metastases in malignant tumors / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia

Orientadores: Eliane Maria Ingrid Amstalden, Mauricio Etchebehere / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T18:23:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cintra_FranciscoFontes_D.pdf: 8878005 bytes, checksum: 10099149390ddadf73aa7dcc9cbabe33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução: Os condrossarcomas são tumores cartilaginosos com manifestações clínicas e morfológicas diversas. A identificação do comportamento biológico em processos neoplásicos é essencial para definir a conduta terapêutica e a estimativa prognóstica. Distinguir condrossarcoma de baixo grau de encondroma é difícil. A angiogênese tem sido relacionada à taxa de crescimento tumoral e prognóstico, e a expressão de marcadores, como a COX-2, com o comportamento biológico. A análise da angiogênese induzida pelo tumor e da imuno-expressão da COX-2 poderia auxiliar na determinação do prognóstico do paciente, bem como na distinção entre encondroma e condrossarcoma de baixo grau. Objetivos: estudar o valor da angiogênese, do uso de marcadores de estimativa de índole biológica maligna e padrão arquitetural dos vasos (padrão vascular), por meio da técnica de imuno-histoquímica, no diagnóstico diferencial do encondroma e condrossarcoma de baixo grau, assim como na estimativa do prognóstico dos pacientes com estes tumores. Métodos: 21 encondromas e 58 condrossarcomas convencionais foram selecionados para este estudo, sendo separados em 3 grupos: I- 21 encondromas; II- 31 condrossarcomas grau 1; III- 27 condrossarcomas graus 2 e 3. Os espécimes foram estudados quanto às suas características histopatológicas, marcadores de angiogênese (VEGF, CD34 e CD105) e expressão da COX-2. As informações clínicas foram resgatadas dos prontuários. Os tumores foram avaliados de forma cega e simultânea, por dois observadores, para a escolha de cinco áreas com a maior concentração de células/vasos imuno-marcados ("hot-spots"), definidas em consenso, em aumento de X400. A estimativa da expressão do VEGF e da COX-2 foi mensurada por meio da contagem das células positivas e negativas nas áreas de maior expressão ("hot spots") e determinada a proporção média. A vascularização foi aferida com o marcador CD34, utilizando-se do método de Chalkley. A análise da neoangiogênese foi medida por meio do anticorpo anti-CD105. A avaliação do padrão vascular dos tumores foi feita segundo o método de Kalinski. Os resultados foram tabulados e tratados por métodos estatísticos. Resultados: Foi encontrada associação entre evolução desfavorável e as seguintes variáveis: 1- condrossarcomas de moderado e alto graus; 2- localização em ossos chatos; 3- alta densidade microvascular; 4- padrão arquitetural caracterizado por diminuição do tamanho dos lóbulos com aumento de vasos na sua periferia (subtipo B de Kalinski) ou franca vascularização intra-lobular (subtipo C de Kalinski). Também foi observada associação entre o aumento da angiogênese e condrossarcomas de ossos chatos. Houve correlação entre aumento da densidade microvascular e hiperexpressão da COX-2. A hiperexpressão do VEGF relacionou-se com os padrões vasculares Kalinski B e C. As variáveis analisadas não permitiram diferenciar condrossarcoma de baixo grau de encondroma. Não foi encontrada associação entre o prognóstico e idade, sexo, ou expressão da COX-2, CD105 e VEGF. Conclusão: A avaliação da densidade microvascular e do padrão vascular podem ser uma ferramenta prognóstica adicional no manejo de pacientes com condrossarcoma. A densidade microvascular maior em condrossarcomas de ossos chatos pode estar associada à evolução desfavorável, nesta localização. Nenhuma das variáveis estudadas mostrou-se útil para diferenciar os condrossarcomas de baixo grau dos encondromas / Abstract: Background: Chondrosarcomas are a heterogeneous group of cartilaginous tumors with varied clinical and morphological features. Like any other cancer, the distinction between benign and malignant nature, in cartilaginous bone tumors, is essential for the determination of treatment modality and prognosis evaluation. The distinction between enchondroma and grade 1 chondrosarcoma is very difficult. Angiogenesis has been associated with tumor growth and prognosis, and the expression of COX-2, with the biological nature. Analysis of tumor-induced angiogenesis and immuno-expression of COX-2 could possibly assist in determining patient prognosis as well as distinguish between enchondroma and low grade chondrosarcoma. Objectives: To study the value of immunohistochemical markers of angiogenesis, biological malignancy in the differential diagnosis of cartilaginous tumors and architectural vascular pattern, as well as in estimating prognosis of patients. Methods: 21 enchondromas and 58 conventional chondrosarcomas were chosen and classified in three groups: I- enchondromas (n=21); II- low grade chondrosarcomas (n=31); III- moderate and high grade chondrosarcomas (n=27). All specimens were evaluated for their clinical findings, histopathological markers of angiogenesis (VEGF, CD34 and CD105) and expression of COX-2. The clinical data were retrieved from the medical records. Tumors were evaluated, blindly and simultaneously, by two observers for the analysis of the immunohistochemical preparations. VEGF and COX-2 immunostaining evaluation was determined by the proportion of positive cells in five "hot spots", defined by consensus, in X400 magnification. For CD34 and CD105, five areas were chosen with the highest concentration of micro-vessels ("hot spots"), through the use of the Chalkley graticule for counting. We further evaluated the vascular pattern of the tumor according to Kalinski. The results were tabulated for statistical analysis. Results: Fourteen patients had poor evolution (recurrence, metastasis and death). There were no significant differences regarding the follow-up time between groups. The following factors were statistically associated with poor prognosis: 1- chondrossarcomas of intermediate and high grades; 2- localization in flat bones; 3- increased micro-vascular density (over-expression of CD34); 4- tumor architectural pattern characterized by decrease of the size of the lobules with increased vascularization in their periphery (Kalinski vascular pattern B) and marked intra-lobular vascularization (Kalinski vascular pattern C). A positive association was found between increased angiogenesis and flat bones chondrosarcomas. COX-2 expression was high in tumors with high microvascular density. VEGF over-expression correlated with Kalinski B/C vascular patterns. None of the variables proved to be useful to differentiate low-grade chondrosarcoma from enchondroma. No statistical correlation was found between the prognosis and the following variables: age, gender, and expression of COX-2, CD105 and VEGF. Conclusion: Evaluation of microvessel density and vascular pattern can be useful as additional prognostic tools in the management of patients with chondrosarcoma. Higher microvessel density in chondrosarcomas of flat bones may be associated with unfavorable outcome in this location. None of the variables studied in this work proved useful to differentiate low-grade chondrosarcomas from enchondromas / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Maria Helena Andrade Santana / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química / Made available in DSpace on 2018-08-20T11:59:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferre-Souza_Viviane_D.pdf: 26854945 bytes, checksum: 441886ad35f5447c17df51c40a2db348 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O ácido hialurônico (AH) é um polissacarídeo natural composto de unidades dissacarídeas alternadas entre o N-acetil-D-glicosamina e o ácido D-glicurônico que desempenha um papel fundamental na manutenção da integridade tecidual, facilitando a adesão e diferenciação de células durante a inflamação, e o reparo de feridas com formação de vasos sanguíneos. A espécie vegetal Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot é encontrada em quase todo o Brasil e são atribuídos a ela propriedades terapêuticas para enfermidades da pele. Técnicas de micro e nanoencapsulação são empregadas através de processos químicos, físicos ou fisico-químicos visando o aumento das interações com tecidos, pelo aumento da área superficial. Neste trabalho, foi proposto o estudo de variáveis operacionais para a produção de micro e nanopartículas de AH através do método de emulsão a/o reticuladas com dihidrazida adípica (ADH), com encapsulação do extrato vegetal da Arrabidaea chica para avaliação da atividade angiogênica e cicatrizante. Os resultados obtidos mostraram que a formação e propriedades físico-químicas das partículas de AH produzidas por emulsificação são diretamente relacionadas com a velocidade de agitação, ao pH e a razão do reticulante e do extrato bruto com o AH. Ensaios in vitro em fibroblastos humanos tanto com as partículas vazias como com o extrato da A. chica não apresentaram toxicidade celular, e ensaios in vivo realizados em CAM, tegumento do dorso de camundongos e dorso de ratos evidenciaram o efeito angiogênico das micro e nanopartículas formadas com indução da formação de novos vasos sanguíneos, imprescindível para o processo de cicatrização. Concluímos assim que a encapsulação beneficiou e potencializou a atividade cicatrizante do extrato bruto da A. chica contribuindo para o desenvolvimento de novas formulações para aplicações farmacêuticas e cosméticas / Abstract: The hyaluronic acid (HA) is a natural polysaccharide composed of alternating units dissacarídeas between the N-acetyl-D-glucosamine and Dglucuronic acid. HA plays a key role in the maintenance of tissue integrity, facilitating adhesion and cell differentiation during inflammation, wound repair, and with the formation of blood vessels. The vegetable species Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot is found throughout Brazil and it is assigned therapeutic properties for skin diseases. The Micro and nanoencapsulation of active compounds tend to increase their efficiency of action for providing protection and greater interaction with tissues due to its high surface area. In this work we studied the influence of operational variables for the production of micro and nanoparticles of HA through of w / o emulsification and crosslinking with adipic dihydrazide (ADH). The Arrabidaea chica vegetable extract was encapsulated in HA micro and nanoparticles and the angiogenic activity and healing evaluated. The results showed that the formation and physicochemical properties of HA particles produced by emulsification are directly related to the stirring still, pH and both ratios ADH and crude extract with AH. In vitro assays in human fibroblast cells with empty or encapsulating the A. Chica extract showed no cellular toxicity. In vivo assays performed in CAM, mouse back tegument and mice demonstrated the angiogenic effect of micro and nanoparticles formed with induction of the formation of new blood vessels essential to the healing process.From these results we conclude that the encapsulation benefited and enhanced the healing activity of the crude extract of A. chica contributing to the development of new formulations for pharmaceutical and cosmetic applications / Doutorado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Doutora em Engenharia Quimica

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Sonia Maria Oliani / Banca: Flávia Cristina Rodrigues Lisoni / Banca: Dorotéia Rossi Silva Souza / Banca: Marina Gobbe Moschetta / Resumo: O câncer de mama apresenta alta incidência e alta taxa de mortalidade devido a rápida progressão tumoral e disseminação metastática que ocorrem com o incentivo da angiogênese. MicroRNAs (miRNAs) são pequenas moléculas de RNA mensageiro (RNAm) não codificantes que desempenham papel fundamental na regulação gênica. A desregulação dessas moléculas está relacionada com a iniciação e progressão de diferentes tipos tumorais humanos, incluindo o câncer de mama. Existem fortes evidências de miRNAs atuando como oncogenes e supressores tumorais, regulando o processo de angiogênese, crescimento tumoral e metástase. É neste cenário que a melatonina, hormônio secretado pela glândula pineal, vem ganhando destaque como potencial tratamento contra o câncer de mama por apresentar efeitos oncostáticos, antiangiogênicos, além de atuar na regulação da expressão de miRNAs. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial valor terapêutico da melatonina na regulação do supressor tumoral miR148a-3p e relação com a progressão tumoral e angiogênese. Inicialmente, células tumorais de mama MDA-MB-231 foram cultivadas nas condições experimentais controle e tratamento com melatonina (1 mM). O PCR Array foi realizado para análise da expressão de 84 miRNAs relacionados com o câncer de mama e, após análise em banco de dados e literatura, o miR-148a-3p foi selecionado para validação. As células MDA-MB-231 foram cultivadas em quatro grupos experimentais: controle, tratamento com melatonina (1 mM),... / Abstract: Breast cancer has a high incidence and high mortality rate due to rapid tumor progression and metastatic dissemination that occur with the encouragement of angiogenesis. MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding messenger RNA (mRNA) molecules that play a key role in gene regulation. Deregulation of these molecules is related to the initiation and progression of different human tumor types, including breast cancer. There is strong evidence for miRNAs acting as oncogenes and tumor suppressors, regulating the process of angiogenesis, tumor growth and metastasis. It is in this scenario that melatonin, a hormone secreted by the pineal gland, has been gaining prominence as a potential treatment against breast cancer for having oncostanic and antiangiogenic effects, in addition to regulating the expression of miRNAs. Thus, the objective of this study was to evaluate the potential therapeutic value of melatonin in the regulation of the tumor suppressor miR-148a-3p and its relation to tumor progression and angiogenesis. Initially, MDA-MB-231 breast tumor cells were cultured under the experimental control and treatment conditions with melatonin (1 mM). The PCR Array was performed to analyze the expression of 84 miRNAs related to breast cancer and, after analysis in the database and literature, miR-148a-3p was selected for validation. MDA-MB-231 cells were cultured in four experimental groups: control, treatment with melatonin (1 mM), overexpression of miR-148a-3p and control of the ... / Doutor

Introdução: A cicatrização subconjuntival excessiva é a maior causa de falha cirúrgica no glaucoma. Uma vez que o ácido rosmarínico apresenta ação antifibrótica, é interessante avaliar seu uso como adjuvante na cirurgia filtrante do glaucoma. Objetivos: Comparar os achados clínicos e histopatológicos e a expressão gênica de fatores relacionados à cicatrização tecidual entre coelhos submetidos à cirurgia antiglaucomatosa experimental (CAGE) e tratados com injeções subconjuntivais de ácido rosmarínico ou com injeções de solução salina 0,9%. Material e Métodos: Estudo experimental intervencionista, do tipo ensaio clínico randomizado, no qual 41 coelhos New Zealand foram submetidos à CAGE no olho direito e divididos em dois grupos de tratamento: grupo A (n=21), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de solução salina 0,9% e grupo B (n=20), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de ácido rosmarínico 15 mg/ml (3 dias antes da cirurgia, ao final desta e a cada 3 dias até a eutanásia). Os efeitos do tratamento foram avaliados com cinco dias (grupos A1 e B1) e com 15 dias (grupos A2 e B2) por meio da avaliação da pressão intraocular (PIO) com Tonopen, de aspectos da ampola filtrante com base no Moorfields Bleb Grading System, do estudo histopatológico (contagem de neutrófilos/campo, vasos/campo, densidade de colágeno corado com Sirius Red, imuno-histoquímica anti--actina e anti-VEGF) e do RT-PCR (colágeno tipo 1 alfa-1 COL1A1 e TGF-2). As fotomicrografias foram avaliadas quantitativamente com o software ImageJ® 1.36 (Sirius Red, -actina e VEGF) e os dados comparados por testes não paramétricos, sendo p<0,05 considerado estatisticamente significativo. Resultados: Não houve diferença significativa nas comparações da PIO entre os grupos. Nas avaliações da ampola filtrante, apenas o grupo B2 apresentou maiores escores de área central (p=0,0004), área máxima (p=0,0007) e altura (p=0,0239). Os grupos B1 (p<0,0001) e B2 (p=0,0011) apresentaram escores significativamente menores no parâmetro vascularização que os seus respectivos controles. Houve diminuição significativa de neutrófilos/campo somente no grupo B2 (p=0,0159). O número de vasos/campo também foi significativamente menor nos grupos B1 e B2, em comparação aos seus respectivos controles (p=0,0079 e p=0,0345, respectivamente). Não foram observadas diferenças significativas na coloração com Sirius Red e na imuno-histoquímica para anti--actina entre os grupos, porém o grupo B1 apresentou menor marcação anti-VEGF (p=0,0190). As análises por RT-PCR para TGF-2 e COL1A1 não demonstraram diferenças entre os grupos, com exceção do grupo B2, que apresentou maior expressão de COL1A1 quando comparado ao seu controle (p=0,0159). Conclusões: Os resultados apontaram para os potenciais efeitos anti-inflamatórios e moduladores da neovascularização do ácido rosmarínico em cirurgias antiglaucomatosas. Apesar do grupo B demonstrar melhor aspecto clínico (exceto a PIO, que não demonstrou diferença entre os grupos), a ação antifibrótica do ácido rosmarínico não pôde ser comprovada. / Introduction: Excessive subconjunctival scarring is a major cause of surgical failure in glaucoma. Since rosmarinic acid has antifibrotic action, we evaluate its usage as an adjunctive treatment to glaucoma filtration surgery. Objectives: To compare clinical, histopathological and expression of factors related to the healing process between rabbit underwent experimental glaucoma surgery (EGS) and treated with subconjunctival injections of rosmarinic acid or with saline solution 0.9%. Methods: Interventional experimental study (randomized clinical trial) in which 41 New Zealand rabbits were submitted to EGS in the right eye and divided into two treatment groups: group A (n=21) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of saline solution 0.9% and B (n=20) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of rosmarinic acid 15mg/ml (three days prior to surgery, at the end of surgery and every three days until euthanasia). Treatment effects were assessed after five days (groups A1 and B1) and 15 days (groups A2 and B2) by evaluation of intraocular pressure (IOP) with Tonopen and bleb characteristics based on the Moorfields Bleb Grading System, as well as histopathology analysis (neutrophil/field count; vessels/field count; collagen density after stained with Sirius Red; and anti--actin and anti-VEGF immunohistochemistry) and by RT-PCR (for collagen type 1 alpha 1 - COL1A1 and TGF-2). The photomicrographs were evaluated quantitatively with ImageJ® 1.36 software (Sirius Red, -actin and VEGF) and data were compared through non-parametric tests, considering p<0.05 as statistically significant. Results: No significant difference was observed in IOP measurements between groups. Group B2 displayed significant higher scores of bleb central area (p=0.0004), maximum area (p=0.0007) and height (p=0.0239). Both B1 (p<0.0001) and B2 (p=0.0011) groups presented significantly lower vascularization scores than their respective controls. A significant decrease in neutrophils/field counting was observed only in group B2 (p=0.0159), however vessels/field counting was significantly lower in groups B1 and B2, compared to their controls (p=0.0079 and p=0.0345, respectively). No significant differences were observed in the collagen staining with Sirius Red and in the anti--actin immunohistochemistry between the all groups comparison, but group B1 displayed lower anti-VEGF measurement (p=0.0190) than group A1. RT-PCR analysis for TGF-2 and COL1A1 showed no difference between groups, except by group B2, which presented higher expression of COL1A1, compared to its control (p=0.0159). Conclusions: The findings point to the potential anti-inflammatory and anti-neovascular effects of rosmarinic acid in glaucoma surgery. Although group B show better clinical aspect (except IOP, which showed no difference between groups), the antifibrotic action of rosmarinic acid could not be proved.

Introdução: A cicatrização subconjuntival excessiva é a maior causa de falha cirúrgica no glaucoma. Uma vez que o ácido rosmarínico apresenta ação antifibrótica, é interessante avaliar seu uso como adjuvante na cirurgia filtrante do glaucoma. Objetivos: Comparar os achados clínicos e histopatológicos e a expressão gênica de fatores relacionados à cicatrização tecidual entre coelhos submetidos à cirurgia antiglaucomatosa experimental (CAGE) e tratados com injeções subconjuntivais de ácido rosmarínico ou com injeções de solução salina 0,9%. Material e Métodos: Estudo experimental intervencionista, do tipo ensaio clínico randomizado, no qual 41 coelhos New Zealand foram submetidos à CAGE no olho direito e divididos em dois grupos de tratamento: grupo A (n=21), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de solução salina 0,9% e grupo B (n=20), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de ácido rosmarínico 15 mg/ml (3 dias antes da cirurgia, ao final desta e a cada 3 dias até a eutanásia). Os efeitos do tratamento foram avaliados com cinco dias (grupos A1 e B1) e com 15 dias (grupos A2 e B2) por meio da avaliação da pressão intraocular (PIO) com Tonopen, de aspectos da ampola filtrante com base no Moorfields Bleb Grading System, do estudo histopatológico (contagem de neutrófilos/campo, vasos/campo, densidade de colágeno corado com Sirius Red, imuno-histoquímica anti--actina e anti-VEGF) e do RT-PCR (colágeno tipo 1 alfa-1 COL1A1 e TGF-2). As fotomicrografias foram avaliadas quantitativamente com o software ImageJ® 1.36 (Sirius Red, -actina e VEGF) e os dados comparados por testes não paramétricos, sendo p<0,05 considerado estatisticamente significativo. Resultados: Não houve diferença significativa nas comparações da PIO entre os grupos. Nas avaliações da ampola filtrante, apenas o grupo B2 apresentou maiores escores de área central (p=0,0004), área máxima (p=0,0007) e altura (p=0,0239). Os grupos B1 (p<0,0001) e B2 (p=0,0011) apresentaram escores significativamente menores no parâmetro vascularização que os seus respectivos controles. Houve diminuição significativa de neutrófilos/campo somente no grupo B2 (p=0,0159). O número de vasos/campo também foi significativamente menor nos grupos B1 e B2, em comparação aos seus respectivos controles (p=0,0079 e p=0,0345, respectivamente). Não foram observadas diferenças significativas na coloração com Sirius Red e na imuno-histoquímica para anti--actina entre os grupos, porém o grupo B1 apresentou menor marcação anti-VEGF (p=0,0190). As análises por RT-PCR para TGF-2 e COL1A1 não demonstraram diferenças entre os grupos, com exceção do grupo B2, que apresentou maior expressão de COL1A1 quando comparado ao seu controle (p=0,0159). Conclusões: Os resultados apontaram para os potenciais efeitos anti-inflamatórios e moduladores da neovascularização do ácido rosmarínico em cirurgias antiglaucomatosas. Apesar do grupo B demonstrar melhor aspecto clínico (exceto a PIO, que não demonstrou diferença entre os grupos), a ação antifibrótica do ácido rosmarínico não pôde ser comprovada. / Introduction: Excessive subconjunctival scarring is a major cause of surgical failure in glaucoma. Since rosmarinic acid has antifibrotic action, we evaluate its usage as an adjunctive treatment to glaucoma filtration surgery. Objectives: To compare clinical, histopathological and expression of factors related to the healing process between rabbit underwent experimental glaucoma surgery (EGS) and treated with subconjunctival injections of rosmarinic acid or with saline solution 0.9%. Methods: Interventional experimental study (randomized clinical trial) in which 41 New Zealand rabbits were submitted to EGS in the right eye and divided into two treatment groups: group A (n=21) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of saline solution 0.9% and B (n=20) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of rosmarinic acid 15mg/ml (three days prior to surgery, at the end of surgery and every three days until euthanasia). Treatment effects were assessed after five days (groups A1 and B1) and 15 days (groups A2 and B2) by evaluation of intraocular pressure (IOP) with Tonopen and bleb characteristics based on the Moorfields Bleb Grading System, as well as histopathology analysis (neutrophil/field count; vessels/field count; collagen density after stained with Sirius Red; and anti--actin and anti-VEGF immunohistochemistry) and by RT-PCR (for collagen type 1 alpha 1 - COL1A1 and TGF-2). The photomicrographs were evaluated quantitatively with ImageJ® 1.36 software (Sirius Red, -actin and VEGF) and data were compared through non-parametric tests, considering p<0.05 as statistically significant. Results: No significant difference was observed in IOP measurements between groups. Group B2 displayed significant higher scores of bleb central area (p=0.0004), maximum area (p=0.0007) and height (p=0.0239). Both B1 (p<0.0001) and B2 (p=0.0011) groups presented significantly lower vascularization scores than their respective controls. A significant decrease in neutrophils/field counting was observed only in group B2 (p=0.0159), however vessels/field counting was significantly lower in groups B1 and B2, compared to their controls (p=0.0079 and p=0.0345, respectively). No significant differences were observed in the collagen staining with Sirius Red and in the anti--actin immunohistochemistry between the all groups comparison, but group B1 displayed lower anti-VEGF measurement (p=0.0190) than group A1. RT-PCR analysis for TGF-2 and COL1A1 showed no difference between groups, except by group B2, which presented higher expression of COL1A1, compared to its control (p=0.0159). Conclusions: The findings point to the potential anti-inflammatory and anti-neovascular effects of rosmarinic acid in glaucoma surgery. Although group B show better clinical aspect (except IOP, which showed no difference between groups), the antifibrotic action of rosmarinic acid could not be proved.