No período de março a maio de 2001, foram realizados os exames ultra-sonográficos em 88 ovelhas do Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia. Os animais foram examinados entre o 19°. e 33°. dia de gestação pela ultra-sonografia transretal com exames executados em dias alternados, e do 25°. ao 45°. dia pelo detector de prenhez para pequenos ruminantes (DPPR-80®). O diagnóstico foi considerado positivo pela ultra-sonografia transretal através da visualização do saco gestacional e embrião. Após o 25°. dia de gestação foi observado também o batimento cardíaco. Pelo detector de prenhez, a auscultação do batimento cardíaco embrionário, cuja freqüência é de 160 a 200 batimentos por minuto, foi dado como diagnóstico de gestação positivo. Dentre 88 fêmeas acasaladas, 3 abortaram durante o experimento e foram retiradas do grupo. Das 85 fêmeas restantes, 64 pariram. O diagnóstico de prenhez através da ultra-sonografia transretal apresentou 35,29% de acurácia no 19°.dia de gestação, culminando em 82,35% no 31°. dia de gestação. Pelo detector de prenhez, a acurácia foi de 24,71% no 25°.dia de gestação e 34,12% no 45°. dia. Foi possível visualizar os batimentos cardíacos do embrião pela ultra-sonografia transretal à partir do 21°. dia de gestação e os primeiros placentomas foram observados ao redor do 25°. dia de gestação. A ultra-sonografia transretal mostrou-se um método superior ao detector de prenhez para pequenos ruminantes, para diagnóstico precoce de gestação em ovelhas. / Ultrasonography was performed in 88 ewes from Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia, São Paulo state, from march to may, 2001. Animais were examined from 19°. to 33°. days of pregnancy by transrectal ultrasonography in alternate days examinations, and by pregnancy detector for small ruminants (DPPR-80®) from 25°. to 45°. day. Positive diagnostic by transrectal ultrasonography was obtained after yolk sac visualization. The embryo heartbeat was observed after 25 day of pregnancy. The positive diagnostic was obtained by pregnancy detector when embrionic heart rate was 160 to 200 beats/minute. Births confirmed the examinations. Three abortions occurred during the experiment and these females were excluded from the group. From 85 ewes examined, 64 lambed. The transrectal ultrasonography accuracy in 19°. day of pregnancy was 35,29%, with higher rate (82,53%) in 31°. day. The doppler accuracy in 25°. day was 24,71% and 34,12% in 45°. day. Embryo heartbeat was detected by transrectal ultrasonography after 21 days of pregnancy and the first placentoms were observed after 25 days of pregnancy. In conclusion, transrectal ultrasonography was better than doppler in early pregnancy diagnosis in sheep.

A sífilis é uma doença infecciosa, cujo agente etiológico é o Treponema pallidum. Pode ser transmitida sexualmente ou verticalmente, via placenta. Seus estágios variam entre sífilis primária, sífilis secundária, sífilis latente e sífilis congênita. Dentre os diagnósticos mais eficazes, encontram-se os testes sorológicos, porém os falsos positivos e falsos negativos no estágio primário levam à procura de uma forma mais eficaz de se determinar, precocemente, a doença. Além disso, por várias razões, nem sempre o profissional clínico suspeita das lesões presentes na mucosa oral, cogitando de outras hipóteses diagnósticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar imuno-histoquimicamente e histoquimicamente lesões bucais biopsiadas cujo aspecto histológico levou à suspeita de sífilis, buscando identificar os microorganismos, bem como correlacionar o quadro sorológico quando positivo. Para o estudo foram incluídas 34 lesões suspeitas de sífilis, que foram submetidas à reação imuno-histoquímica com o anticorpo anti-treponema e técnica histoquímica de coloração pela prata. Dos 34 casos avaliados 13 foram positivos para o anticorpo anti-treponema, todos posteriormente diagnosticados como sífilis secundária, com positividade sorológica, exceto por um caso em que a sorologia não foi realizada. Quando se comparou os métodos de diagnóstico, a técnica de coloração por prata obteve sensibilidade de 46,15% e a de imuno-histoquímica foi de 92,3%. Os aspectos histológicos variaram em um grande número de achados, dentre eles: intensa exocitose, infiltrado inflamatório predominantemente plasmocitário (justaepitelial e perivascular), áreas de ulceração, epitélio paraqueratinizado, edema, espongiose e hiperplasia epitelial. A marcação imuno-histoquímica dos treponemas foi, principalmente, epitelial (61,5%) e esse método se mostrou um meio de diagnóstico rápido, simples e eficiente no diagnóstico de lesões orais de Sífilis. / Syphilis is an infectious disease, whose etiologic agent is Treponema pallidum. It can be transmitted sexually or vertically via the placenta. Its stages include primary syphilis, secondary syphilis, latent syphilis and congenital syphilis. Among the diagnoses most effective are the serological tests, but false positives and false negatives in the primary stage lead to demand for a more effective way to determine the disease earlier. In addition, for various reasons, not always the professional clinical suspicion of lesions present in the oral mucosa, thinking in other possible diagnoses. The objective of this study was to identify microorganisms and set the best way forward to a diagnostic framework confirmed positive serology. The results for syphilis lesions in the oral mucosa corresponded to 13 cases, all of secondary iinjuries,with positive serology for syphilis and in only one of them serology had not been held. In a comparison of diagnostic methods, the technique of silver staining achieved sensitivity of 46.15% and immunohistochemistry was 92.3%. The histological features varied in a large number of findings, including: intense exocytosis, inflammatory infiltrate, predominantly plasmacytic (banda-like and infiltrate perivascular), areas of ulceration, parakeratinized epithelium, edema, spongiosis and epithelial hyperplasia. The immunohistochemical staining of treponemes was mainly epithelial (61.5%) and this method was a rapid, simple and efficient means in the diagnosis of oral lesions of syphilis.

INTRODUÇÃO: A exposição ao estresse precoce (EP) pode estar associada à depressão na vida adulta. Evidencias demonstram que alterações na capacidade regulatória do eixo hipotálamo-pituitária-adrenal (HPA) sejam subjacentes a essa associação. Pacientes depressivos com EP tendem a apresentar quadros clinicamente mais graves, com pior prognóstico e resposta limitada aos tratamentos usuais. Não se sabe ainda como é o perfil cognitivo desses pacientes e como as alterações na atividade do eixo HPA impactam no desempenho neuropsicológico. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi investigar a atividade do eixo HPA, através dos níveis de cortisol basal, e as funções cognitivas em pacientes depressivos com história de estresse precoce. METODO: Integrou a amostra total do estudo 107 sujeitos, sendo 77 pacientes depressivos e 30 sujeitos saudáveis com idade entre 21 e 60 anos de ambos os sexos. Foram incluídos pacientes com diagnóstico confirmado de episódio depressivo maior e gravidade de sintomas pelo menos moderada no momento das avaliações. O Questionário de Traumas na Infância (CTQ) avaliou a história de EP dividindo a amostra de pacientes em dois grupos, um com estresse precoce (EP+) e outro sem estresse precoce (EP-). Os participantes foram avaliados quanto a gravidade de sintomas psiquiátricos relacionados ao quadro depressivo, quanto à impulsividade e ao temperamento afetivo. A avaliação neuropsicológica incluiu testes de memória verbal, memória visuoespacial, memória de trabalho, atenção sustentada e dividida, além de medidas de controle inibitório, flexibilidade cognitiva, fluência verbal e QI. Na avaliação endócrina cinco amostras de cortisol salivar e de uma amostra de cortisol plasmático foram analisadas para a avaliação da atividade do eixo HPA. RESULTADOS: Setenta e dois por cento dos pacientes depressivos apresentaram EP. A história de EP influenciou o início mais precoce dos quadros depressivos (p=0,03). Não foram encontradas diferenças entre os grupos de pacientes na gravidade de sintomas psiquiátricos, comorbidades clínicas. Não encontramos diferenças entre os pacientes EP+ e EP- comparados a controles no temperamento hipertímico. Na avaliação da atividade do eixo HPA, o grupo EP+ apresentou perda do ritmo circadiano (RC) de cortisol em relação ao grupo controle, além de aumento dos níveis de cortisol salivar às 22h em comparação ao grupo EP- (p=0,04) e uma tendência comparado ao grupo controle (p=0,06). No desempenho neuropsicológico, os pacientes EP+ apresentaram prejuízos em relação aos controles em todos os subdomínios cognitivos avaliados (p<0,05 para todos os escores), exceto memória visuoespacial (p=0,13). Em contraste, os pacientes EP- mostraram déficits apenas em memória de trabalho (p=0,006), alternância atencional (p=0,01) e controle inibitório (p=0,004) comparados aos controles. Na comparação entre os grupos de pacientes, os EP+ apresentaram déficit na nomeação de cores (p=0,01) e uma tendência de prejuízo na memória verbal tardia (p=0,07). Entre os pacientes EP+ encontramos correlações moderadas entre a diminuição da variabilidade nos níveis de cortisol salivar no RC com os prejuízos na flexibilidade cognitiva (?=0,61; p=0,002) e com o controle inibitório (?=0,42; p=0,048). CONCLUSÃO: Nossos achados apontam para um perfil endócrino e neuropsicológico distinto nos pacientes EP+ em comparação com pacientes com depressão EP- e controles. A combinação da história de EP à depressão resultou em inicio mais precoce da doença, prejuízos cognitivos abrangentes e perda na manutenção do ritmo circadiano de cortisol. / BACKGROUND: Exposure to early-life stress (ELS) may be associated with depression in adulthood. Evidence shows that changes in the regulatory capacity of the hypothalamicpituitary-adrenal axis (HPA) underlie association. Patients with ELS usually are more clinically ill, showing poorer prognosis and limited response to usual treatments. It is not known yet what the cognitive profile of those patients is and how changes in the HPA axis activity would impact on cognitive functioning. AIM: The aim of this study was to investigate the HPA axis activity through basal cortisol levels and cognitive functions mediated by the hippocampus and the prefrontal cortex in depressed patients with early stress history. METHOD: Study total study sample was 107 subjects, 77 depressed patients and 30 healthy subjects aged between 21 and 60 years of both sexes. Patients had diagnosis confirmed for major depressive episode with symptom severity at least moderate by the time of the evaluations. We used the Childhood Trauma Questionnaire (CTQ) to assess the ELS history splitting the patient sample into two groups, one with early life stress (ELS+) and the other without early stress (ELS-). Participants were assessed for severity of psychiatric symptoms related to depression, such as impulsivity and affective temperament. The neuropsychological evaluation included tests for verbal memory, visuospatial memory, working memory, sustained and divided attention, inhibitory control measures, cognitive flexibility, verbal fluency, and IQ. For the endocrine assessment five samples of salivary cortisol and plasma cortisol were analyzed to evaluate HPA axis functioning. RESULTS Seventy-two percent of depressive patients had ELS. ELS itself influenced earlier onset of depressive disorders in patients (p = 0.03). Most of the affective temperaments are more prominent in patients with mood disorders than health controls. Regarding the assessment of the HPA axis activity, ELS + group showed lack of cortisol circadian rhythm (CR) compared to the control group. We also found increased salivary cortisol levels at 22 pm compared to the EP- group (p = 0.04) and a trend toward the control group (p = 0.06). In neuropsychological performance, patients EP + showed deficits compared to controls in all of the cognitive subdomains evaluated (p <0.05 for all test scores) except visuospatial memory (p = 0.13). In contrast, ELS-patients showed worse performance only in working memory (p = 0.006), attentional switching (p = 0.01) and inhibitory control (p = 0.004) compared to controls. Comparisons between patient groups showed that EP + patients had a deficit in color naming (p = 0.01) and a trend toward delayed verbal memory (p = 0.07). We found moderate positive correlations for EP+ patients between decreased variation in salivary cortisol levels in the CR and impairments in cognitive flexibility (? = 0.61; p = 0.002) and also to inhibitory control ( ? = 0.42, p = 0.048). CONCLUSION: Our findings indicate a distinct endocrine and neuropsychological profile in patients ELS + compared to depressed EP-. The combination of ELS history and depression resulted in early onset of the depression symptoms, comprehensive cognitive impairment in tasks related to the CPF and hippocampus, and failure in maintaining the circadian rhythm of cortisol.

INTRODUÇÃO Na puberdade, tanto fisiológica quanto precoce, um dos eventos marcantes é o estirão de crescimento. Análogos do GnRH tem sido utilizado como tratamento da puberdade precoce central (PPC) tendo como consequência o bloqueio do eixo gonadal e diminuição da velocidade de crescimento, porém mantém níveis séricos elevados de IGF-I e IGFBP-3. Não existem relatos sobre a expressão do IGF1R durante a puberdade. Considerando-se que este poderia ser um ponto de regulação da velocidade de crescimento, o presente estudo propõe avaliar a expressão do IGF1R em meninas com PPC antes e durante o tratamento. MÉTODOS: Avaliamos meninas com PPC que foram divididas em dois grupos: Grupo A foi constituído por 16 meninas avaliadas antes do início do tratamento com idade média de 8,0+-0,7anos e o Grupo B constituído por 16 pacientes em uso regular do análogo do GnRH com idade média de 9,4+-0,8 anos. O grupo controle foi composto por 18 crianças saudáveis, pré-púberes com idade média 7,1+-1,3 anos. RESULTADOS: A expressão do mRNA do gene do IGF1R foi maior no grupo B quando comparado ao grupo A (p= 0,04) e ao grupo controle (p=0,004). Não foi observado diferença estatística entre o Grupo A e o grupo controle (p=0,17). Os níveis séricos de IGF-I e IGFBP3 assim como a relação molar IGF-I/IGFBP3 foram significativamente maiores no grupo A em relação ao grupo controle. (p<0,0001). Não encontramos diferença nas concentrações de IGF-I, IGFBP3 ou na relação molar entre os grupos A e B. O grupo controle apresentou níveis mais elevados de IGFBP1 quando comparado com os grupos A e B (p<0,001). Ao compararmos somente os grupos A e B, o grupo B apresentou número estatisticamente maior de valores indetectáveis de IGFBP1 quando comparado com o grupo A (p=0,01) mostrando uma tendência a valores menores no grupo B. A dosagem de insulina foi significativamente menor no grupo controle quando comparado ao grupo A (p<0,001) e não apresentou diferença entre os grupos A e B. Ao analisarmos os 3 grupos (controle, A e B) não encontramos a correlação negativa entre insulina e IGFBP-1. Essa correlação aparece quando avaliamos somente o grupo controle e o grupo A (r= - 0,5; p=0,007) e desaparece quando acrescentamos o grupo B na análise. CONCLUSÃO: As variações nas concentrações séricas de IGF-I, IGFBP-3, IGFBP-1 e insulina não explicam a desaceleração da velocidade de crescimento durante o tratamento de meninas com puberdade precoce central com análogos do GnRH. O aumento da expressão do IGF1R parece refletir uma redução da sinalização intracelular do IGF1R com consequente diminuição da bioatividade do IGF-I em um mecanismo de feedback de alça ultra curta. O aumento da secreção do hormônio de crescimento devido a redução do feedback negativo na hipófise, explica as concentrações encontradas de IGF-I, IGFBP3 e IGFBP1.Estudos outros serão necessários para confirmar esta hipótese, avaliando diferentes pontos de sinalização na cascata pós-receptor / BACKGROUND: Growth spurt is a major event in central precocious puberty (CPP). GnRH analogues (GnRHa) treatment inhibit gonadal axis and decrease height velocity. However, serum IGF-I and IGFBP-3 remain high as before treatment. No reports regarding IGF type 1 receptor (IGF1R) in CPP is available. Considering that this could be a point of regulation of height velocity, the present study aims to study IGF1R mRNA expression in girls with CPP before and during GnRHa treatment. MÉTHODS: Sixteen girls with CPP (8.0±0.7yr) were evaluated before treatment (Group A) and sixteen (9.4±0.8yr) in use of GnRHa (Group B). Age-matched pre pubertal children were studied as controls (n=18). Fasting blood sample were collect for IGF1R mRNA expression analysis in peripheral lymphocytes (RT-PCR) and serum IGF-I, IGFBP-3, IGFBP-1 and insulin determination. RESULTS: The expression of IGF1R mRNA was higher in Group B than in Group A (p=0.04) and Controls (p=0.004). No difference was observed between Groups A and Controls. IGF-I, IGFBP-3 and IGF-I/IGFBP3 molar ratio were similar in Group A and B but higher than in Controls (p<0.0001). IGFBP-1 was higher (p<0.0001) in Controls than in Groups A and B. When we compare only Groups A and B, group B showed more IGFBP1 undetectable values than group A (p = 0.01) showing a tendency to lower values in group B. Insulin levels were lower in Controls than in Group A (p<0.001), but no difference were observed between Groups B and A. Negative correlation was found between insulin and IGFBP-1 when controls and Group A were put together (r= -0.5; p=0.007). This correlation disappear if Group B is included in the analysis. CONCLUSION: Serum concentrations of IGF-I, IGFBP-3, IGFBP-1 and insulin do not explain the decrease in height velocity during CPP treatment with GnRH analogue. The increase in IGF1R mRNA expression suggest impairment of IGF-I signaling and compensatory up regulation of the IGF1R. Increased GH concentrations due to reduction of IGF-I feedback could explain the IGF-I, IGFBP-3 and IGFBP-1 findings. Other studies are necessary to confirm this hypothesis by studying different signaling points in post-receptor cascade

No período de março a maio de 2001, foram realizados os exames ultra-sonográficos em 88 ovelhas do Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia. Os animais foram examinados entre o 19°. e 33°. dia de gestação pela ultra-sonografia transretal com exames executados em dias alternados, e do 25°. ao 45°. dia pelo detector de prenhez para pequenos ruminantes (DPPR-80®). O diagnóstico foi considerado positivo pela ultra-sonografia transretal através da visualização do saco gestacional e embrião. Após o 25°. dia de gestação foi observado também o batimento cardíaco. Pelo detector de prenhez, a auscultação do batimento cardíaco embrionário, cuja freqüência é de 160 a 200 batimentos por minuto, foi dado como diagnóstico de gestação positivo. Dentre 88 fêmeas acasaladas, 3 abortaram durante o experimento e foram retiradas do grupo. Das 85 fêmeas restantes, 64 pariram. O diagnóstico de prenhez através da ultra-sonografia transretal apresentou 35,29% de acurácia no 19°.dia de gestação, culminando em 82,35% no 31°. dia de gestação. Pelo detector de prenhez, a acurácia foi de 24,71% no 25°.dia de gestação e 34,12% no 45°. dia. Foi possível visualizar os batimentos cardíacos do embrião pela ultra-sonografia transretal à partir do 21°. dia de gestação e os primeiros placentomas foram observados ao redor do 25°. dia de gestação. A ultra-sonografia transretal mostrou-se um método superior ao detector de prenhez para pequenos ruminantes, para diagnóstico precoce de gestação em ovelhas. / Ultrasonography was performed in 88 ewes from Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia, São Paulo state, from march to may, 2001. Animais were examined from 19°. to 33°. days of pregnancy by transrectal ultrasonography in alternate days examinations, and by pregnancy detector for small ruminants (DPPR-80®) from 25°. to 45°. day. Positive diagnostic by transrectal ultrasonography was obtained after yolk sac visualization. The embryo heartbeat was observed after 25 day of pregnancy. The positive diagnostic was obtained by pregnancy detector when embrionic heart rate was 160 to 200 beats/minute. Births confirmed the examinations. Three abortions occurred during the experiment and these females were excluded from the group. From 85 ewes examined, 64 lambed. The transrectal ultrasonography accuracy in 19°. day of pregnancy was 35,29%, with higher rate (82,53%) in 31°. day. The doppler accuracy in 25°. day was 24,71% and 34,12% in 45°. day. Embryo heartbeat was detected by transrectal ultrasonography after 21 days of pregnancy and the first placentoms were observed after 25 days of pregnancy. In conclusion, transrectal ultrasonography was better than doppler in early pregnancy diagnosis in sheep.

Introdução: Ainda que curável, a Tuberculose (TB) permanece no cenário epidemiológico mundial e nacional e parece estar distante de ser eliminada, uma vez que sua relação com as iniquidades sociais é inegável. Estima-se que, em 2015, 3 milhões de pessoas não tiveram a doença diagnosticada. O diagnóstico precoce é fundamental como uma estratégia preventiva para se evitar mortes e sofrimento, rompendo a cadeia de transmissão. No Município de São Bernardo do Campo-SP, a busca ativa de sintomáticos respiratórios tem se apresentado abaixo das metas estimadas. Objetivo: Elaborar um plano de intervenção para o aprimoramento da busca ativa de sintomáticos respiratórios no âmbito da Atenção Primária. Método: Trata-se de pesquisa-ação, realizada com 14 profissionais de saúde: coordenadores de unidade básica de saúde, médicos, enfermeiros, técnicos de enfermagem e agentes comunitários, representando um Território de Saúde do Município. À luz das diretrizes da Política Nacional da Atenção Básica e do Programa Nacional de Controle da Tuberculose, por meio de grupo focal, com sessões realizadas em 2016, a detecção precoce e a busca ativa de sintomáticos respiratórios foram problematizadas, tendo sido elaborado um plano de intervenção para reverter a situação de baixa busca ativa nas unidades básicas de saúde. Resultados: Os depoimentos dos participantes revelam que a TB ainda carreia estigma e preconceito, que dificultam a busca ativa de casos. Verificou-se que a busca ativa é expressivamente atribuída ao agente comunitário e não envolve outros membros da equipe; também se verificou a não utilização de espaços estratégicos na unidade de saúde para estimular a interação com a população e informá-la a respeito do agravo. Outro aspecto que emergiu refere-se ao diagnóstico da doença, realizado em unidades de pronto atendimento e de urgência e não no âmbito da atenção primária. Ademais, os profissionais de saúde reivindicam capacitação para a abordagem da TB, incluindo a incorporação de tecnologias leves na busca ativa. Elaborou-se um plano de intervenção com ações intra e extra-muros, além de indicar-se a necessidade de monitoramento dos indicadores epidemiológicos no âmbito institucional. Tratando-se de pesquisa-ação, algumas ações relacionadas à busca ativa de casos já tiveram início, envolvendo todas as unidades básicas de saúde. Conclusão: O plano de intervenção construído contribuirá para o controle da TB na região. Ainda assim, entende-se que o controle da doença requer intervenções amplas e que envolvem a qualificação dos profissionais de saúde, a participação da população e, sobretudo, políticas intersetoriais que modifiquem as condições sociais e de vulnerabilidade. / Introduction: Although curable, Tuberculosis (TB) remains in the worldwide and national epidemiological scenery and seems to be far from being eliminated, since its relationship with social inequalities is undeniable. It is estimated that in 2015, 3 million people did not have the disease diagnosed. The early diagnosis is essential as a preventive strategy to prevent deaths and suffering, breaking the transmission chain. In São Bernardo do Campo SP, the active search for respiratory symptoms has been shown below the estimated targets. Objective: To elaborate a plan of action to improve the active search for respiratory symptoms within the Primary Attention. Method: It is an action-research, performed with 14 health professionals: coordinators of basic health units, doctors, nurses, nursing technicians and community workers, representing a City Health Territory. In the light of the guidelines of the National Policy of Primary Attention and the National Program for Tuberculosis Control, through focus group, with sessions held in June of 2016, the question related to the early detection and active search for respiratory symptoms was questioned, having the plan of action been drawn up to reverse the situation in the basic health units. Results: The statements of the participants reveal that TB still carries stigma and prejudice, which hinder the active search for cases. It was found that the active search is significantly attributed to the community worker and does not involve other team members; there was also no use of the strategic spaces in the health unit to encourage interaction with the population and inform them about the grievance. Another aspect that has emerged concerns the diagnosis of the disease, conducted in emergency care and emergency units and not as part of the primary attention. In addition, health professionals claim training for TB approach, including the active search, mainly as regards the use of lightweight technologies. It was developed an intervention plan with intra and extramural actions, besides to indicate the need for monitoring epidemiological indicators at the institutional level. As an action-research, some actions related to the active search for cases already started, involving all basic health units. Conclusion: The intervention plan will contribute to the control of TB in the region, and it is understood that the control of the disease requires broad interventions, which involve the training of health professionals, public participation and, especially, intersectoral policies to modify social and vulnerability conditions.

Como a incidência de obesidade em crianças têm aumentado e a leptina é um fator permissivo para o início da puberdade, os níveis circulantes de leptina elevados se tornaram um fator comum que pode causar um adiantamento da puberdade. Entretanto, o aumento no acúmulo de gordura nos organismos está associado à resistência ao hormônio leptina. Atualmente existem poucas informações sobre como a sensibilidade a esse hormônio afeta o desenvolvimento sexual. Portanto, este projeto teve como objetivo investigar como diferentes modelos de sensibilidade ou resistência à leptina agem na puberdade de camundongos fêmeas. Técnicas como acompanhamento in vivo das diferentes fases da maturação sexual e da composição corporal, testes de sensibilidade à leptina, testes de tolerância à glucose e à insulina, e PCR em tempo real foram utilizadas. Animais com maior peso corporal desde a infância apresentaram adiantamento da maturação sexual, maior acúmulo de gordura corporal e alterações na expressão de genes metabólicos. Já animais que sofreram inativação do gene Socs3 no sistema nervoso central ou em células que expressam o receptor de leptina, apresentaram um atraso na maturação sexual e alterações na expressão de genes relacionados ao consumo alimentar, porém nos casos de inativação em células Kiss1, os animais não apresentaram nenhum tipo de alteração. Dessa forma, concluímos que o peso corporal é mais importante para o desencadear da maturação sexual do que a sensibilidade do organismo ao hormônio leptina, sugerindo que a leptina atua na maturação sexual de forma indireta sobre o eixo hipotálamo hipófise gonadal. Além disso, na análise da expressão de genes ao longo do desenvolvimento traçamos um perfil de genes associados à reprodução e metabolismo, que servirão de base para comparação para outros estudos. / As the incidence of obesity in children has increased and leptin is a permissive factor for the onset of puberty, elevated circulating leptin levels have become a common factor that may cause puberty to progress. However, the increase in fat accumulation in organisms is associated with resistance to the hormone leptin. There is currently little information on how sensitivity to this hormone affects sexual development. Therefore, this project aimed to investigate how different models of leptin sensitivity or resistance act in the puberty of female mice. Techniques such as in vivo monitoring of the different stages of sexual maturation and body composition, leptin sensitivity tests, glucose and insulin tolerance tests, and real-time PCR were used. Animals with higher body weight since childhood presented an advance of sexual maturation, greater accumulation of body fat and alterations in the expression of metabolic genes. On the other hand, animals that underwent inactivation of the Socs3 gene in the central nervous system or cells expressing the leptin receptor showed a delay in sexual maturation and alterations in the expression of genes related to food consumption, but in cases of inactivation in Kiss1 cells, animals did not present any type of change. Thus, we conclude that body weight is more important for the onset of sexual maturation than the body\'s sensitivity to the hormone leptin, suggesting that leptin acts indirectly on sexual maturation on the hypothalamus - pituitary - gonadal axis. In addition, in the analysis of gene expression along the development we have traced a profile of genes associated with reproduction and metabolism, which will serve as a basis for comparison to other studies.

Na mucosa gástrica, cinco tipos compõe o epitélio gástrico: mucosas superficiais, parietais (CP), mucosas do colo (CMC), endócrinas e zimogênicas (CZ). As CMC originam as células CZ por transdiferenciação e a população de CP é importante para que o processo ocorra.Durante a transdiferenciação observamos células com características de CMCs e CZs, denominadas células em transição (CT) que ocupam o segmento entre o colo e a base da glândula. Essa transição entre células e a presença de CP são essenciais para a homeostase da base da glândula. Porém, estudos mostram que alterações no padrão alimentar influenciam a organização do epitélio gástrico de ratos, e o desmame precoce (DP) modifica a dinâmica de proliferação, migração e maturação das células. Nosso objetivo foi avaliar os efeitos imediatos do DP sobre as populações de CMC, CZ, CT e CP, e investigar se tais efeitos são mantidos até a vida adulta. Para isso, ratos Wistar (CEUA ICB USP 18/2015) foram divididos em dois grupos: amamentado controle (A) (permaneceram com a mãe até 21 dias), e DP (separados das mães aos 15 dias). O estômago foi coletado aos 18, 30 e 60 dias de vida pósnatal. Em cortes histológicos, verificamos que o índice de CP não foi alterado pelo DP, porém a distribuição dessa célula na glândula foi modificada aos 18 e 30 dias. Sob microscopia de fluorescência e confocal, observamos que o DP aumentou a população de CMC (GSIIFITC+) aos 18 dias (A vs DP; P<0,01), e de CZ (Mist1-Cy3+) aos 18 e 60 dias (A vs DP; P<0,05). O número de CT/campo (GSII-FITC+Mist1-Cy3) não se alterou após o DP, evidenciando que o segmento de transição entre o colo e a base da glândula representa um importante controle de tamanho populacional. Para avaliar o comportamento de CT em relação ao seu destino (CZ) e sua origem (CMC), analisamos o índice de CT sobre essas populações. Sobre o destino, devido à ausência de resposta no número de CT/campo e ao aumento de CZ nos animais DP, o índice CT/CZs variou aos 18 e 30 dias. No entanto, o índice de CT/CMC (origem) não foi alterado pelos tratamentos nas diferentes idades. Sob microscopia eletrônica de transmissão, avaliamos as características ultraestruturais das CMC, CT e CZ aos 18 dias, e observamos principalmente as organelas envolvidas na reorganização das células durante a transdiferenciação. Nosso estudo mostrou que o desmame precoce acelera a diferenciação celular e muda a distribuição de células mucosas do colo e zimogênicas na glândula gástrica, porém esse processo ocorre com preservação do tamanho compartimento de transição e do número de células parietais. Assim, podemos sugerir que o desmame precoce aumenta a população de células zimogênicas por meio de uma passagem mais rápida entre a região do colo e da base, na presença de células parietais, e esse mecanismo seria acionado logo após a transição da dieta, podendo manter-se ativo até a vida adulta. / Five epithelial cell types are found in the gastric mucosa: surface mucous, parietal (PC), mucous neck (MNC), endocrine, and zymogenic (ZC). The MNC originates ZC through transdifferentiation, and the presence of PC is important for the process. During transdifferentiation, we observe cells that present characteristics from MNC and ZC that are identified as transition cells (TC). They occupy the area between the neck and base of the gastric gland. The transition between these cells and the presence PC are essential for homeostasis at the base of the gland. However, studies show that changes in dietary pattern influence the organization of rat gastric epithelium, and early weaning (EW) modifies the proliferation, migration and maturation dynamics of these cells. Our aim was to evaluate the immediate effects of EW on the populations of MNC, ZC, TC and PC, and to investigate if such effects are maintained until adult life. To that, Wistar rats (CEUA ICB USP 18/2015) were divided into two groups: suckling control (S) (pups remained with the mother until 21 days), and EW (pups were separated from mother at 15 days). The stomach was collected at 18, 30 and 60 postnatal days. After analyses of histological sections, we verified that PC indices were not altered by EW, but the distribution of this cell was modified at the 18 and 30 days. By fluorescence and confocal microscopy, we determined that EW increased MNC population at 18 days (A vs PD, P <0.01), and ZC at 18 and 60 day (A vs DP; P <0.05). TC number/field did not change after EW, indicating that the transition between neck and gland base is under an important population control. In order to evaluate the behavior of TC regarding its final differentiation (ZC) and origin (MNC), we calculated TC index on these populations. In relation to ZC, we found a variation in TC index at 18 and 30 days, specially because TC number did not change, whereas ZC population increased. However, the TC index on GSII + cells (origin) was not altered by treatments throughout growth and ageing. Finally, under electron microscopy, we studied the ultra structure of MNC, TC and ZC and observed the reorganization of secretory apparatus during transdifferentiation at 18 days. Thus, we can suggest that EW increases ZC population through a rapid traffic through transition compartment between neck and base, in the presence of parietal cells, and such mechanism would be triggered soon after dietary transition and be kept activated until adult life.

RÉSUMÉ Les protéines associées à la gestation (PAGs) constituent une grande famille de protéinases aspartiques exprimées dans les cellules épithéliales de la couche superficielle du placenta des artiodactyles et plus précisément dans les granules des cellules binucléées. Des investigations par biologie moléculaire (clonage et séquençage) ont permis de montrer que les protéines de la gestation font partie de la grande famille des protéases aspartiques tout comme le pepsinogène, la pepsine, la chymosine, les cathepsines D et E, et la rénine. La détermination des concentrations en PAG par radioimmunoassay dans le sérum ou dans le plasma est actuellement employée comme méthode sérologique spécifique pour le diagnostic de gestation chez le bovin dès le 28e jour après la conception. Au-delà de ce délai, les dosages des PAGs peuvent également être utilisés pour assurer le suivi de la gestation notamment dans le cadre de létude de la mortalité embryonnaire précoce ou tardive et de la mortalité ftale. Au moment dentreprendre nos investigations expérimentales, une attention particulière a été portée à notre maîtrise des systèmes de dosages radioimmunologiques notamment dans les zones des faibles concentrations de PAG caractérisant le premier trimestre de la gestation chez les bovins. Cest ainsi que les deux premières études sur lesquelles repose ce travail de thèse ont visé à tester de nouveaux antisérums dirigés contre la PAG et à comparer leurs performances en milieu sérique ou plasmatique. Ensuite, cinq différents systèmes de dosages (utilisant différents antisérums) ont été comparés quant à leur sensibilité, spécificité, exactitude des diagnostics positifs et exactitude des diagnostics négatifs, sur des séries de plasmas provenant de femelles non gestantes et de femelles gestantes durant le premier trimestre de la gestation. Dans une troisième étude, les concentrations de PAG, LH et prolactine ont été interprétées en fonction dune classification basée sur le niveau de progestérone mesuré chez les femelles à jour 21. Dans la première étude, lobjectif a été de déterminer les paramètres de limite minimale de détection, reproductibilité, exactitude, spécificité et parallélisme des dilutions caractérisant les cinq systèmes radioimmunologiques différents : RIA-497, RIA-706, RIA-780, RIA-809 et RIA-Pool. Ensuite, leur capacité à distinguer les femelles non gestantes et gestantes prélevées au 30e jour suivant linsémination artificielle a été analysée dans le détail. Létude a été menée sur un effectif de 40 femelles de race Holstein-Frisonne dâge et de parité mélangés dont la gestation a été confirmée par exploration rectale réalisée entre le 2e et le 3e mois après linsémination. Un groupe contrôle composé de dix vaches maintenues en stabulation entravée confirmées non gestantes par examen échographique et exploration rectale a été utilisé simultanément. Les caractéristiques générales des différents systèmes étaient satisfaisantes. Leur spécificité était excellente à lexception du système RIA-809 ayant montré une très légère interférence de lacide syalique et de lhCG. Les concentrations mesurées dans le plasma des femelles non gestantes sont restées inférieures à 0,5 ng/mL excepté celles qui étaient mesurées dans les systèmes RIA-780 et RIA-809. Seuls les systèmes RIA-497, RIA-706 et RIA-Pool ont fourni des valeurs de sensibilité, spécificité, exactitude des diagnostics positifs, exactitude des diagnostics négatifs égales à 100%. Dans la deuxième étude, les cinq systèmes de dosage ont été utilisés pour déterminer les concentrations de PAG dans le plasma aux jours 30, 45, 60 et 80. Les corrélations ont été calculées entre les systèmes ainsi que les rapports de concentrations mesurées par chacun deux : les systèmes RIA-706, RIA-780, RIA-809 et RIA-Pool ont révélé des valeurs plus élevées que le RIA-497 à tous les stades étudiés. La troisième étude a visé à vérifier une hypothèse formulée à plusieurs reprises par différents auteurs : le niveau de concentration en progestérone atteint en début de gestation est-il susceptible dinteragir avec les concentrations de protéines trophoblastiques, de LH et de prolactine mesurées plus tard durant le premier trimestre de la gestation ? Dans cette étude, nous avons déterminé les concentrations de lensemble des paramètres sur les prélèvements correspondant aux jours 0, 21, 30, 45, 60 et 80 de 37 femelles gestantes. Les femelles ont été réparties en deux sous groupes : celles dont la progestérone au jour 21 était inférieure à la moyenne (Low-P4) et celles dont la même progestérone était supérieure à la moyenne au jour 21 (High-P4). Lorsque les deux sous groupes ont été suivis aux périodes ultérieures (jours 30, 45, 60 et 80), il est apparu que les concentrations de PAG ont eu tendance à être plus élevées dans tous les systèmes chez les vaches du groupe High-P4. Une différence significative est atteinte en utilisant le RIA-497 au jour 80. Les concentrations en LH et prolactine ont eu tendance à être plus faibles à toutes les périodes chez les vaches faisant partie du groupe High-P4. La différence a été significative pour la LH à jour 60 et pour la prolactine à jour 21. Dans leur ensemble, les résultats de ce travail montrent que le diagnostic de gestation peut être amélioré (sensibilité, spécificité, exactitude des diagnostics positifs, exactitude des diagnostics négatifs) en sélectionnant soigneusement les antisérums et en les mélangeant de façon appropriée. Ces systèmes sont utilisables pour suivre les concentrations de PAG durant le premier trimestre de la gestation, les résultats étant fortement corrélés tout en montrant des profils différents. Associées au dosage de la progestérone, de la LH et de la prolactine, les investigations sur les PAGs permettent de progresser dans létude des régulations qui relient lhypophyse, les gonades et le trophoblaste durant le premier trimestre de la gestation. SUMMARY Pregnancy Associated Glycoproteins (PAGs) constitute a large family of aspartic proteinases expressed in the outer epithelial cells layer of the placenta of eutherian species and more precisely in the granules of the binucleate cells. Investigations by molecular biology (cloning and sequencing) showed that the PAGs are part of the great family of the aspartic proteases like pepsinogen, pepsin, chymosin, cathepsins D and E, and renin. The determination of the concentrations in PAG by radioimmunoassay in serum or plasma is currently used as specific serological method for the diagnosis of gestation at day 28 after conception. Beyond this time, PAGs assays can also be used to ensure the follow-up of gestation in particular during the study of early or late embryonic mortality and early foetal mortality. When we started our experimental investigations, a special attention was paid to our control of radioimmunoassay systems especially in the zones with low concentrations of PAG which characterize the first trimester of bovine gestation. Thus the first two studies on which this work was based, aimed testing new antisera raised against PAG, and comparing their performances in seric or plasmatic medium. Then, five various assays (using different antisera) were compared as for their sensitivity, specificity, exactitude of the positive diagnoses and exactitude of the negative diagnoses, on series of plasmas from nonpregnant and pregnant females during the first trimester of gestation. In a third study, the concentrations of PAG, LH and prolactin were interpreted according to a classification based on the progesterone level measured in females at day 21. In the first study, the objective was to determine the parameters of minimal limit of detection, reproducibility, exactitude, specificity and parallelism of dilutions characterizing the five different radioimmunoassay systems: RIA-497, RIA-706, RIA-780, RIA-809 and RIA-Pool. Then, their capacity to discriminate non-pregnant and pregnant females investigated at day 30 after artificial insemination was also analyzed in detail. The study was undertaken on 40 Holstein-Friesian females of different age and parity, and whose gestation was confirmed by rectal exploration carried out between the second and the third month after insemination. A control group of ten cows maintained in stabling, confirmed non-pregnant by ultrasonography and rectal exploration, was used simultaneously. The general characteristics of the various systems were satisfactory. Their specificity was excellent except for system RIA-809 which shown a small interference of syalic acid and hCG. The concentrations measured in the plasma of non-pregnant females remained lower than 0.5 ng/mL except those which were measured in systems RIA-780 and RIA-809. Only the systems RIA-497, RIA-706 and RIA-Pool provided values of sensitivity, specificity, exactitude of the positive diagnoses, exactitude of the negative diagnoses equal to 100%. In the second study, all five systems were used in order to determine the concentrations of PAG in plasma at days 30, 45, 60 and 80. The correlations were calculated between the systems as well as the ratios of concentrations measured by each one of them: systems RIA-706, RIA-780, RIA-809 and RIA-Pool revealed higher values than the RIA-497 at all the studied stages. The third study aimed to check a hypothesis formulated by various authors: is the concentration level of progesterone reached at beginning of gestation likely to interact with the concentrations of trophoblastic proteins, LH and prolactin measured later during the first trimester of gestation ? In this study, we determined concentrations of the whole parameters on samples corresponding to days 0, 21, 30, 45, 60 and 80 of 37 pregnant females. The females were divided into two groups: those whose progesterone at day 21 was lower than the average (Low-P4) and those whose progesterone was higher than the average at day 21 (High-P4). When both groups were investigated at later periods (days 30 and 80), it appeared that the concentrations of PAG tended to be higher in all systems in the cows of the High-P4 group. A significant difference was raised by using RIA-497 at day 80. The concentrations in LH and prolactin lead to be weaker during all the periods in the cows of the High-P4 group. The difference was significant for LH at day 60 and for prolactin at day 21. In conclusion, the results of this work show that the diagnosis of gestation can be improved (sensitivity, specificity, exactitude of the positive diagnoses, exactitude of the negative diagnoses) by selecting the antisera carefully and by mixing them in a suitable way. These systems are usable to follow the concentrations of PAG during the first trimester of gestation, the results are strongly correlated while showing different profiles. Combined to assays of progesterone, LH and prolactin, the investigations on PAGs make progress in the study of the regulations between pituitary gland, gonads and the trophoblast during the first trimester of gestation.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000343598-Texto+Completo-0.pdf: 387588 bytes, checksum: 379d42ecb8053a9bd0437dab2f95565b (MD5) Previous issue date: 2005 / Introduction: In 2004 the Brazilian National Health System (NHS) spent 25% of its expenditures on hospitalizations for elderly people (8,46% of the population). The instrument of probability of readmission to hospital (PRH) can offer preventive arrangements and care, allowing this population to have a better quality of life and consequently reducing NHS’ costs. Objective: To test the effectiveness of PRH in predicting the risk of hospitalization in six months aiming at approaching elderly NHS users who receive home care service by Communitarian Agents of Health. Methods: A six months population based cohort study. Elderly people ( 60 years), noninstitutionalized, in the city of Progresso, Rio Grande do Sul, Brazil. The PRH is composed by eight objective questions based on its logistic formula which generates a value between 0 and 1. In relation to the risk of hospitalization, the elderly people were classified in: low, medium, medium-high and high risk. The ROC curve was calculated in order to evaluate the accuracy of the PRH. Results: From 515 elderly people interviewed, 56,1% were women and 10,1% were hospitalized. The high risk group had a frequency of hospitalization 6,5 times higher than the low risk group. The PRH 0,4 cut-off score respectively has 42,3% and 84,7% of sensibility and specificity. Conclusion: The PRH predicts with accuracy the risk of hospitalization in six months and can be employed to approach elderly users in home care services. / Introdução: Em 2004, o Sistema Único de Saúde (SUS) do Brasil gastou 25% das suas despesas com hospitalizações de pessoas idosas (8,46% da população). O Instrumento de Predição de Risco de Admissão Hospitalar Repetida (PRA) pode oferecer medidas e cuidados preventivos, permitindo a essa população uma melhor qualidade de vida e, conseqüentemente, a redução de custos para o SUS. Objetivo: Testar a efetividade do PRA em predizer o risco de hospitalização em seis meses, visando à captação dos usuários idosos do SUS pelos atendimentos domiciliares dos Agentes Comunitários de Saúde. Métodos: Estudo de coorte de base populacional com seguimento de seis meses. Idosos (≥60 anos), não-institucionalizados, na cidade de Progresso, Rio Grande do Sul, Brasil. O PRA é constituído por oito perguntas objetivas que, a partir de sua fórmula logística, gera um valor de 0 a 1. Quanto ao risco de hospitalização, os idosos foram classificados em: baixo, médio, médio-alto e alto risco. Calculou-se a Curva de ROC para avaliar a acurácia do PRA. Resultados: De 515 idosos entrevistados, 56,1% eram mulheres e 10,1% foram hospitalizados. O grupo de risco alto teve uma freqüência de internação hospitalar 6,5 vezes superior em relação àquela do grupo de risco baixo. O ponto de corte do PRA 0,4 possui 42,3% e 84,7% de sensibilidade e especificidade respectivamente. Conclusão: O PRA prediz com acurácia o risco de hospitalização em seis meses, podendo ser utilizado na captação do usuário idoso nos atendimentos domiciliares.