Orientador: Reginaldo José Donatelli / Coorientador: Carlos Barros de Araújo / Banca: Luiz Octavio Marcondes Machado / Banca: Fátima Knoll / Resumo: O capítulo teve como objetivo descrever o comportamento reprodutivo de Pionites leucogaster leucogaster e Pionites melanocephalus melanocephalus em cativeiro. Para isso foram coletados dados a partir de observações dos comportamentos das aves dentro e fora dos ninhos, principalmente durante a estação reprodutiva. Para a obtenção de dados do interior da caixa ninho, foram instaladas câmeras de infravermelho no interior dos mesmos. Dentre os comportamentos associados à reprodução foram constatados, para ambas as espécies: a corte (exceto para Pionites m. melanocephalus), o cortejo alimentar, a cópula e o cuidado dos pais para com a prole, além de outros dados biológicos como a postura dos ovos, o período de incubação e a eclosão. Verificamos que as fêmeas das espécies estudadas realizam a postura de quatro ovos e são exclusivamente responsáveis pela incubação dos mesmos, neste período, são totalmente dependentes do macho com relação à alimentação. As marianinhas apresentam períodos longos de incubação e a eclosão dos ovos ocorre de forma assincrônica. Comportamentos como cortejo alimentar (registrado somente na fase de pré-postura), a transferência de alimento e o alisamento das penas (comportamentos muito observados durante toda a estação reprodutiva) são importantes interações que têm papel fundamental na manutenção da coesão entre o casal. Além de utilizarem o ninho na estação reprodutiva, as marianinhas utilizam as cavidades como dormitório durante todo o ano / Abstract: Not available / Mestre

A influência da oferta do alimento no ciclo de vida e considerando a estrobilização de Nausithoe aurea Silveira & Morandini, 1997 foi estudada. A espécie foi representada por indivíduos de 5 localidades brasileiras, abrangendo quase toda a distribuição conhecida da espécie. Apoiados por protocolo de jejum-alimentação, com duração de 105 dias, estabelecido a partir de um projeto piloto, os cifístomas foram observados quanto à indução da estrobilização ou então sua ausência diante de jejum muito prolongado. Os cifistomas foram divididos em 4 gripos, de 30 indivíduos cada, sendo estes acompanhados em 2 fases (\"ômega\" e \"psi\"). Os cifistomas apresentaram uma indução de estrobilização muito representativa nos períodos de alimentação. A quantidade de alimento não foi o fator mais importante na indução do início da estrobilização, mas a disponibilidade de alimento, em comparação com a sua ausência foi um forte indutor. Assim, um teste de outro fator indutor da estrobilização foi realizado, bem como algumas características que acompanham todo o fenômeno de estrobilização nesta espécie. / The influence of food availability in the life cycle and considering strobilation of Nausithoe aurea Silveira & Morandini, 1997 was studied. The species was represented by polyps from 5 Brazilian localities, covering most of the known distribution area of the species. Based in a protocol of hunger-feeding, lasting over 105 days, established following a pilot project, the scyphistomae were observed in regard to the induction of strobilation or its absence due to prolonged starvation. The scyphistomae were divided in 4 groups, of 30 individuals each, and these groups followed in two phases ( and ). The scyphistomae showed intense strobilation during the feeding periods. The amount of food was not the most important factor leading to strobilation, but the availability of food, compared with its absence was a strong inducing factor. Therefore, a test for another inducing factor was accomplished, as well as for some features present during the complete strobilation phenomena for this species.

O estudo de adaptações deve levar em conta que a forma das características dos organismos afeta os desempenhos de mais de uma função, sendo, portanto, modificada por mais de uma pressão seletiva. Estas diferentes demandas podem ser conflitantes, como no caso da seleção convergente para mimetismo contra a seleção divergente para o isolamento reprodutivo. As borboletas Heliconius utilizam o padrão de coloração de advertência das asas também para o reconhecimento de parceiros, o que acaba por gerar um conflito de sinais em potencial quando duas ou mais espécies simpátricas compartilham seu padrão. Neste trabalho, as cores das asas de três espécies de Heliconius e de alguns co-mímicos do Sul do Brasil são investigadas através de duas abordagens: uma físico-sensorial, a fim de se caracterizar as diferenças entre cores co-miméticas em termos de discriminabilidade por diferentes tipos de visão, incluindo borboletas e aves; e uma etológica experimental, avaliando a eficácia da coloração das asas como sinal de reconhecimento específico. Uma terceira abordagem procurou caracterizar e comparar a corte das três espécies de Heliconius a fim de se explorar mecanismos adicionais de reconhecimento específico e possíveis relações com a convergência mimética. As análises físico-sensoriais deram suporte à hipótese recente de diferenças crípticas nas cores como um possível sinal privado de comunicação para as Heliconius, mas os testes comportamentais contrariaram esta expectativa, revelando um alto grau de interferência reprodutiva entre co-mímicos, além de um grau moderado entre não mímicos. A análise comparada da corte sugeriu uma influência maior do mimetismo do que da filogenia sobre a semelhança entre padrões comportamentais. Propomos que esta relação se dê indiretamente através da convergência morfológica na forma das asas e no comportamento de voo entre co-mímicos. / The study of adaptation should take into account that the form of characteristics in organisms affects the performance of more than one function, and therefore are modified by more than one selective pressure. These various demands can be conflicting, as in the case of convergent selection for mimicry against divergent selection for reproductive isolation. The Heliconius butterflies use the advertising wing color pattern also for mate recognition, which ultimately generates a potential signal conflict when two or more sympatric species share its pattern. In this work, the wing colors of three species of Heliconius and some co-mimics from Southern Brazil are investigated through two approaches: a physical-sensory, in order to characterize the differences between co-mimetic colors in terms of discriminability by different types of view, including butterflies and birds; and an experimental ethological, evaluating the effectiveness of wing coloration as a specific recognition signal. A third approach aimed to characterize the courtship of the three species of Heliconius in order to explore additional mechanisms of specific recognition and possible relations with mimetic convergence. The physical-sensory analyzes supported the recent hypothesis of cryptic differences in color as a possible private communication signal for Heliconius, but behavioral tests contradicted this expectation, revealing a high degree of reproductive interference between co-mimics, and in addition a moderate degree between non-mimics. The comparative analysis of the courtship suggested a greater influence of mimicry than phylogeny on the similarities between behavioral patterns. We propose that this relationship happens indirectly through morphological convergence in the wings shape and flight behavior between co-mimics.

Orientador: Euice Oba / Banca: Fabiana Ferreira Souza / Banca: Thales Ricardo Rigo Barreiros / Resumo: Após o parto, alguns eventos fisiológicos ocorrem no útero de vacas para reparar as modificações ocorridas durante a prenhez e o parto. O uso do cloprostenol sódico no período puerperal visa reduzir o período de involução uterina, atuando na contração uterina, auxiliando na redução do tamanho do útero, na limpeza do útero e no retorno da atividade ovariana. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de cloprostenol sódio no pós-parto sobre a involução uterina, dosagem hormonal de progesterona (P4) e 13,14 -di-hidro-15-ceto prostaglandina F2a (PGMF), sobre as variáveis histológicas, de expressão do mRNA do receptor de PGF2 (FP), caspase - 3 (CASP - 3) e ciclo-oxigenase 2 (COX - 2), e também sobre a expressão proteica de FP e da COX - 2. Para isso, vacas Nelore multíparas (n=24) foram tratadas ou não com cloprostenol sódio nos dias 1 e 4 pós-parto (D0 = parto) e foram feitos exames ultrassonográficos, de palpação transretal, vaginoscopia e coleta de sangue em D1, D7, D14, D21, D28, D35 e D42 pós-parto (D0 = parto). Adicionalmente, biópsias endometriais foram colhidas com uma pinça de biópsia Yomann em D1, D7 , D14 , D28 e D42 para análise histológica, de expressão do mRNA por RT-PCR em tempo real e imunolocalização por imunohistoquímica. De acordo com os resultados, o cloprostenol sódio exerceu influência (P< 0,05) sobre a descarga cervical e expressão de mRNA da CASP-3. Para as variáveis relacionadas à dosagem hormonal, involução uterina, variáveis histológicas (glândulas endometriais e grau de inflamação), foi observado efeito apenas nos momento e para as demais, nenhum tipo de influência foi notada. Com base nos resultados, conclui-se que o uso deste protocolo em vacas Nelore multíparas selecionadas geneticamente, com manejo adequado e saúde pode ser desnecessário para reduzir período pós-parto e pode promover despesa ... / Abstract: After calving, some physiological events occur in the uterus of cows to repair the modifications occurred during pregnancy and delivery. The use of cloprostenol sodium at postpartum period aims to reduce the period of uterine involution by acting at uterine contraction, helping in reducing uterine size, at uterine cleaning, and at the resumption of ovary activity. For this, the aim of this work was to evaluate the effect of the application of cloprostenol sodium on postpartum on uterine involution, hormonal dosage of progesterone (P4) and 13,14-dihydro-15-keto prostaglandin F2 (PGMF), histological variables, mRNA expression of PGF2 receptor (FP), caspase- 3 (CASP-3) and cyclooxygenase 2 (COX-2), and also protein expression of FP and COX-2. For this, multiparous Nelore cows (n=24) were treated or not with cloprostenol sodium on days 1 and 4 postpartum (D0 = birth) and it was done ultrasound, transretal palpation, vaginoscopy exams and blood collection on D1, D7, D14, D21, D28, D35 and 42 postpartum (D0 = birth). Also, endometrial biopsies were collected with a Yomann biopsy instrument at D1, D7, D14, D28 and D42 for histological analysis, mRNA expression by qRT-PCR and immunolocalization by imunohistochemistry. According to the results, cloprostenol sodium had influence (P< 0,05) on cervical discharge and integrity and mRNA expression of CASP-3. For the variables related to hormonal dosage, uterine involution, histological variables (endometrial glands and degree of inflammation) there was observed effect only on moment and for the others, any kind of influence was noted. Based on the results, it can be conclude that the use of this protocol in multiparous Nelore cows with good genetic selection, adequate management and health can be unnecessary to reduce postpartum period and can promote additional spending. However, further studies should be conducted using cloprostenol or other analogs of PGF2 at different doses and moments of ... / Mestre

Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: Naiara Zoccal Saraiva / Banca: Maria Emilia Franco Oliveira / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Clara Slade Oliveira / Banca: Fabio Morato Monteiro / Resumo: Embriões produzidos in vitro (PIV) apresentam baixa sobrevivência aos métodos convencionais de criopreservação. Na tentativa de melhorar a produção e taxa de sobrevivência embrionária após a vitrificação foram utilizados reguladores metabólicos L-carnitina (CA), Forskolina (FO) e Ácido linoleico conjugado trans-10; cis-12 (CLA), separadamente ou em associação em diferentes doses, à partir do quarto (D4) ou sexto (D6) dia do cultivo de desenvolvimento embrionário. No experimento 1 o uso de 2,5 mM de CA influenciou positivamente na produção (62,0±12,5%, P=0,02), expansão (60,7%, P=0,009) e eclosão (41,1%, P=0,04). No experimento 2, a produção de embriões não foi influenciada pela suplementação com FO (P=0,2), entretanto, a dose de 15,0μM afetou positivamente a expansão (53,2%, P=0,001) e eclosão (46,8%, P0,001). No experimento 3, a produção de embriões não foi influenciada pela suplementação do meio de cultivo com CLA (P=0,4), no entanto a dose de 150,0 μM afetou positivamente a expansão (85,5%, P=0,001) e eclosão (70,9%, P=0,001) dos embriões reaquecidos e cultivados por 48 horas. No experimento 4, a associação dos reguladores de metabolismo lipídico utilizados não influenciou a produção de embriões (P=0,16), entretanto o melhor resultado de produção observado foi no tratamento com 15,0 μM de FO individualmente. As taxas de expansão e eclosão foram influenciadas pela suplementação com reguladores de metabolismo adicionados individualmente ou em associação (P=0,001). A melhor taxa de expansão foi observada na suplementação associando CA+FO+CLA, com 90,05%, que não diferiu (P>0,05) da suplementação com CLA (86,4) e da associação CA+CLA (87,9%). Entretanto, a melhor taxa de eclosão foi obtida com CLA (71,8%, P=0,01), superior aos demais tratamentos. Foi concluído que o uso dos... / Abstract: Embryos produced in vitro (IVP) have low survival to conventional cryopreservation methods. In attempt to improve the production and the rate of embryo survival to the cryopreservation process, was used the metabolic regulators, L-carnitine (CA), forskolina (FO) and the conjugated linoleic acid isomers trans-10, cis-12 (CLA), separately or in combination in different doses, starting the fourth (D4) or sixth (D6) days of the embryo culture development in vitro. In experiment 1, the best results of production (62,0 ± 12,5%, P = 0,02), expansion (60,7%, P = 0,009), and hatching (41,1 % P = 0,04) was obtained using 2,5 mM of CA. In experiment 2, the production of embryos was not influenced by supplementation with FO (P=0,2), however, the dose of 15,0μM was the best result of expansion (53,2%) and hatching (46,8%) (P=0,001). In experiment 3, the production of embryos was not influenced by supplementation with CLA (P=0,4), however, the dose of 150,0 μM resulted in higher rates of expansion (85,5%, P=0,001) and hatching (70,9%, P=0,001). In the experiment 4, the embryo production was not influenced by the supplementations (P=0,16), however the best result of the production was using 15,0μM of FO individually. The expansion and hatching rates was influenced by supplementation with the metabolism regulators added individually or in a combination (P=0,001). The best expansion rate was observed with the association CA+FO+CLA (90,05%), that was not different (P>0,05) of the CLA (86,4%) or CA+CLA (87,9%) groups. However, the best hatching rate was obtained with CLA (71,8%), which was higher to the other treatments (P=0.01). In conclusion, the use of the metabolic regulators CA, FO and CLA from the fourth day of the embryo culture in vitro increase ... / Doutor

Orientador: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Banca: Lindsay Unno Gimenes / Banca: Beatriz da Costa Aguiar Alves Reis / Resumo: Os procedimentos durante a sexagem pelo citômetro de fluxo garantem a acuidade de 85%, mas causam danos na viabilidade espermática que levam a baixa taxa de prenhez após os 90 dias. Os objetivos dessa Dissertação foram: 1) caracterizar a expressão gênica diferencial em transcriptoma de espermatozoides congelados pelo método convencional, sexados por centrifugação em gradiente de densidade ou sexados por citometria de fluxo; 2) comparar as taxas de clivagem e de blastocistos produzidos in vitro de bovinos utilizando sêmen convencional, sexado por citometria de fluxo ou por centrifugação em gradiente de densidade. Os grupos experimentais para sêmen e embriões foram: 1) grupo controle: sêmen convencional submetido ao gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 2) grupo gradiente: centrifugação em gradiente de densidade e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 3) grupo citometria: sêmen sexado pelo citometro de fluxo, submetido ao mini gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen. O RNA total foi extraído dos espermatozoides (20 x 10 6 células) obtendo-se 400 ng RNA/ 20 x 10 6 células/ animal, ou seja, 20 fg RNA por espermatozoide. Entretanto, não foi posível a construção da biblioteca de cDNA, provavelmente, devido ao alto grau de degradação do RNA. Os Complexos cumulus oócito (COCs) classificados como graus 1, foram aspirados de folículos antrais de 3 a 8 mm de diâmetro a partir de ovários de abatedouros e maturados durante 18 horas em estufa a 38,5°C, 100% de umidade e atmosfera de 5% de CO2 em ar. Os oócitos maturados serão colocados em contato com os espermatozoides previamente preparados para fecundação e incubados por 20 horas em 5% de CO2, na temperatura de 38,5°C. Os prováveis zigotos serão lavados por três vezes em meio SOF (meio sintético de fluido de oviduto) sem SFB e sem glicose e cultivados e transferidos... / Abstract: The procedures for sexing by flow cytometry guarantee the accuracy of 85%, but cause damage in sperm viability leading to lower pregnancy rate after 90 days of pregnancy. The objectives of this study were: 1) to characterize differential gene expression in transcriptome of spermatozoa frozen by conventional method, sexed by density gradient centrifugation, by flow cytometry. 2) Compare blastocyst and cleavageratesproduced in vitro by conventional semen sexed by flow cytometry and by density gradient centrifugation. The experimental groups for semen and embryos were: 1) control group: conventional semen subjected to PercollTM gradient of 45/90% and their embryos produced with this semen, 2) gradientgroup: centrifugation in density gradient and their embryos produced with this semen, 3) cytometry group: semen sexed by flow cytometer, subjected to PercollTMmini gradient 45/90% and their embryos produced with this semen. Total RNA was extracted from sperm (20 x 10 6 cells) and it was possible to extract 400 ngRNA/ 20x10 6 cells/animal or it means, 20 fg of RNA per spermatozoa. However cDNA libraries were not built, probably due a high RNA degradation. The cumulus oocyte complexes (COCs) were classified as grade 1, aspirated from antral follicles with 3-8 mm in diameter, ovariesfromslaughterhouse were used and matured for 18 hours in an incubator at 38.5°C, 100% humidity and atmosphere of 5% of CO2 in air. The matured oocytes are going to be placed in contact with the prepared spermatozoa for fertilization and incubated for 20 hours in 5% CO2 at a temperature of 38.5 °C. Presumptive zygotes are going to be washed three times in SOF (half synthetic oviduct fluid) without FBS and without glucose, cultivated and transferred to plates with four wells containing 500 ul of the same medium used for washing zygotes after fertilization. Embryonic development was evaluated 7-8 days after fertilization. The cleavage and blastocysts rates were ... / Mestre

Orientador: Marco Aurélio Pizo Ferreira / Banca: Pedro Ferreira Develey / Banca: Mercival Roberto Francisco / Banca: Edilberto Giannotti / Banca: Alejandro Edward Jahn / Resumo: A maria-da-restinga (Phylloscartes kronei) é um tiranídeo globalmente ameaçada de extinção, cuja história natural é pouco conhecida. Este trabalho teve como objetivo descrever sua área de vida, território e biologia reprodutiva. Foram capturados e marcados com anilhas coloridas 32 indivíduos no município de Guaratuba, PR. De janeiro de 2012 a dezembro de 2013 foram realizados 211 dias de observações. A área de vida dos indivíduos foi de 1,76 ± 0,93 ha e a dos casais 2,52 ± 1,91 ha, havendo extensa sobreposição nestas áreas. Não houve diferença nas áreas de vida de machos e fêmeas e entre a área de vida dos indivíduos e casais em 2012 e 2013. Houve diferença nas áreas de vida dos indivíduos dentro e fora do período reprodutivo apenas em 2012. O tamanho da área de vida dos casais não variou dentro e fora do período reprodutivo. O tamanho de território foi determinado para dois casais: 0,68 e 0,46 ha. A densidade populacional em 21 ha foi de 1,04 casais/ha. Os primeiros sinais de reprodução ocorreram em setembro e os últimos em janeiro. Os ninhos foram construídos entre 0,72 e 3 m acima do solo, sendo fechados e ovalados. Foram construídos internamente de folhas secas de gramíneas e forrados externamente por musgos verdes, sendo os materiais colados com teia-de-aranha e a câmara oológica forrada com sementes plumosas. A taxa de predação dos ninhos foi de 60% e o Sucesso de Mayfield para o período de incubação foi de 42,42%. Um dos casais que teve o ninho predado construiu outro a 52 m de distância do anterior, que foi igualmente predado, sendo o terceiro construído a 93 m de distância do último. Outro casal, que teve seu ninho predado, construiu outro a 51 m de distância. A construção durou aproximadamente 19 dias e foi tarefa exclusiva das fêmeas. O tamanho da postura foi de dois a três ovos brancos (15,9-16,8 mm x 12,7-13,1 mm). A incubação foi tarefa exclusiva das fêmeas e durou... / Abstract: Little is known about natural history of the globally threatened Restinga Tyrannulet (Phylloscartes kronei). This work aimed to describe its home range and territory, and collect new information about its breeding biology. We captured and banded with coloured bands 28 individuals at Reserva Bicudinho-do-brejo (Guaratuba, PR) and four at Parque Natural Municipal da Lagoa do Parado. Field work was conducted monthly from January 2012 to December 2013, comprising 211 days of field observations. The individuals home range size was 1.76 ± 0.93 ha and the home range size of pairs was 2.52 ± 1.91 ha. There weren't differences between the home range size of males and females and the home range size of individuals and pairs throughout the study. In 2012 we found different home range size of the individuals inside and outside the breeding season, whereas this was not observed in 2013. The home range size of pairs did not vary inside and outside the breeding season. We found extensive overlapping on home range. The territory size was recorded for two adjacent pairs: 0.68 and 0.46 ha. We surveyed individuals in a 21 ha area and obtained a density of 1.04 pairs/ha. The breeding season started in September and the last signs of reproduction were recorded in January. Nests were built between 0.72 and 3 m above the ground. All nests were closed ovoids internally built with dry leaves and externally lined with green mosses. The materials were glued with spider web and the oological chamber lined with soft seeds. The predation rate was 60% and the Mayfield success for the incubation period was 42.42%. One pair whose nest was predated built another nest 52 meters away. The second nest was predated and the pair built another one 93 meters away. Other pair whose nest was predated built a new nest 51 meters away. It took about 19 days to build the nests and they were all made by females. The clutch size varies from 2 to 3 white eggs (15.9 - 16.8 mm x... / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-26Bitstream added on 2014-06-13T19:01:02Z : No. of bitstreams: 1 moresco_rm_dr_sjrp_parcial.pdf: 106475 bytes, checksum: d09b090350ada960f17c7c2d58ad3eb2 (MD5) / A reprodução pode ser descrita como o conjunto de atributos fisiológ icos, morfológicos e comportamentais que permitem o sucesso de uma espécie através da máxima descendência sob condições ambientais específicas. Em anfíbios, além de sujeito a um controle hormonal, e considerando o aporte genético, o ciclo reprodutivo é também influenciado por fatores ambientais que determinam o ciclo ga metogênico ao longo de um ano. O presente trabalho teve como objetivo estimar a di versidade genética em duas populações de P. cuvieri pertencentes aos biomas de Mata Atlânti ca e do Cerrado com o marcador molecular ISSR ( Inter Simple Sequence Repeats ). Além disso, foi caracte rizado o ciclo reprodutivo destas populações, relacionando as variações morfológicas gonadais com os fatores climáticos precipitação, temperatura, umidade relativa do ar e velocidade do vento, através de uma Análise de Correspondência Canônica, bem como relacionar a quantidade de pigmentos presente nos testículos com os períodos pré-reprodutivo, reprodutivo e regenerativo através de ANOVA. Ta mbém se analisou em indivíduos de Eupemphix nattereri a relação entre a espermiogênese e a qua ntidade de pigmentação testicular. As populações de P. cuvieri pertencentes aos dois biomas re velaram índice de diferenciação genética (FST ) > 0.288, o que mostra que es tas duas populações são altamente diferenciadas geneticamente. Foram caracter izados 7 tipos celu lares representando o epitélio germinativo. A variância total ao longo do ciclo reprodutivo foi de 23 %, com os dois primeiros eixos responsáveis, respectivamente, por 68,7% e 10,2% da variância total acumulada na média ponderada dos tipos celula res com relação às 4 variáveis ambientais analisadas. O teste de permutação de Monte Carlo indicou que os tipos celulares e a... / Reproduction can be described as the set of physiological, mo rphological, and behavioural attributes that allow for the success of a species through maximum offspring under specific environmental conditions. In amphibians, as well as being under hormonal control, and in view of their genetic constitution, the reproductive cycle is also influenced by environmental factors that determine the ga metogenetic cycle throughout the year. The aim of this study was to characterize the reproductive cycle of Physalaemus cuvieri in populations from the Mata Atlântica region and the Ce rrado region, comparing the morphological gonad variations to the climatic factors of precipita tion, temperature, relative humidity and wind speed, through a Ca nonical Correspondence Analysis, as well as comparing the quantity of pigments presen t in the testis with the pre-reproductive, reproductive and regenerative periods usi ng the ANOVA, and estimating the genetic diversity between the populations of the two biomes with genetic markers ISSR ( Inter Simple Sequence Repeats). The relationship between spermatogenesis and the quantity of testicular pigmentation in individuals of Eupemphix nattereri has also been analyzed... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Maria Denise Lopes / Banca: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Banca: Nereu Carlos Prestes / Banca: Claudia Barbosa Fernandes / Banca: Nei Moreira / Resumo: O estudo da proteína fosfolipase C zeta (PLCζ), considerada o fator espermático ativador do oócito em mamíferos, pode beneficiar algumas técnicas de reprodução assistida, como a injeção espermática intracitoplasmática e transferência nuclear, por propiciar conhecimento a respeito do processo de fertilização e a possibilidade de utilização da PLCζ presente nos extratos espermáticos. Portanto, o objetivo deste estudo foi localizar a PLCζ em extratos provenientes do citosol e matriz perinuclear de espermatozóides de gatos domésticos normospérmicos e teratospérmicos. Amostras de sêmen foram colhidas de seis gatos adultos: normospérmicos (n=3), teratospérmicos (n=2) e de qualidade seminal intermediária (n=1). As proteínas do citosol foram extraídas utilizando os procedimentos de sonicação, ultracentrifugação, ultrafiltração e precipitação em sulfato de amônio. Por sua vez, as proteínas da matriz perinuclear foram extraídas após incubação em Na2CO3, sonicação, ultracentrifugação, ultrafiltração e precipitação em sulfato de amônio. Com base na avaliação ultraestrutural dos espermatozóides e dosagem de proteína total, foi confirmada a eficiência de ambos os protocolos de extração. As amostras da matriz perinuclear apresentaram 3,3 vezes menos proteína total e diferente perfil protéico na eletroforese unidimensional e bidimensional quando comparadas as amostras obtidas do citosol. Após análise das proteínas encontradas, foi concluído que nos extratos espermáticos do citosol e matriz perinuclear de gatos domésticos normospérmicos e teratospérmicos estão presentes proteínas de peso molecular semelhante ao previamente descrito para a proteína PLCζ em outras espécies de mamíferos / Abstract: The study of phospholipase C zeta protein (PLCζ), considered as the oocyte activating sperm factor in mammals, could benefit some assisted reproductive techniques, such as intracytoplasmic sperm injection and nuclear transfer, by providing knowledge about the process of fertilization and the possibility of using the PLCζ contained in the sperm extracts. Thus, the aim of this study was to localize the phospholipase C zeta (PLCζ) protein in extracts from the spermatozoa cytosol and perinuclear matrix of normospermic and teratospermic domestic cat. Sperm samples were collected from six adult male cats: normospermic (n=3), teratospermic (n=2) and with intermediate sperm quality (n=1). Proteins from the cytosol were extracted using the procedures of sonication, ultracentrifugation, ultrafiltration and precipitation in ammonium sulfate. On the other hand, proteins from perinuclear matrix were extracted after incubation in Na2CO3, sonication, ultracentrifugation, ultrafiltration and precipitation in ammonium sulfate. Based on the ultrastructural analysis of the spermatozoa and total protein determination, the efficiency of both extraction protocols was confirmed. Samples from perinuclear matrix showed 3.3 times less total recovered protein and different protein profile in the uni- and bidimensional electrophoresis when compared to the samples obtained from the cytosol. After protein profile analysis, it can be concluded that several proteins showing similar molecular weight to that previously described for PLCζ protein in other mammalian species are presented in both sperm extracts from cytosol and perinuclear matrix of normospermic and teratospermic domestic cats / Doutor

O objetivo deste experimento foi avaliar a eficiência reprodutiva de vacas de corte com cria ao pé em programas de inseminação artificial (IA), utilizando práticas de desmame definitivo antecipado (DA) ou temporário e terapia de sincronização de estros para IATF. Foram utilizadas 205 vacas Angus x Nelore, com escore de condição corporal de 2,6±0,4 (escala de 1 a 5) e período pósparto variando de 54 e122 dias. No início do estudo, determinou-se, em uma amostragem de 20% das vacas, a taxa de aciclia de 55%, através da avaliação da função ovariana por ultra-sonografia e formaram-se quatro grupos experimentais. As vacas do grupo DA-IA (n= 53) foram inseminadas a partir do 10º dia após o desmame definitivo antecipado, de acordo com a observação de estros por 30 dias. No grupo DA-IATF (n= 50), as vacas foram tratadas (Dia 0) com um dispositivo intravaginal contendo 1,9g de Progesterona, por 8 dias, 2mg de Benzoato de estradiol, im, no desmame definitivo antecipado, 75mcg de Cloprostenol, im, na retirada do implante (Dia 8) e 1mg de Benzoato de estradiol, im, 24 horas após (Dia 9). A IATF foi realizada entre 52 a 56 horas após a retirada do dispositivo (Dia 10). Nas vacas do grupo DA-IATF10, (n= 50), aplicou-se o mesmo tratamento do grupo DA-IATF, iniciando-se 10 dias após o desmame definitivo, seguindo o mesmo protocolo para a IATF. No grupo DT-IATF, (n= 52), utilizou-se o tratamento usado para DA-IATF e DAIATF 10, realizando-se desmame temporário dos terneiros por 48 horas, entre a retirada do implante e a IATF. O período de monta natural foi de 60 dias para DA-IATF e DT-IATF, de 50 dias para DA-IATF10 e de 30 dias para o DAIA. Uma amostragem das vacas submetidas à sincronização de estros para IATF (DA-IATF, n= 10; DA-IATF 10, n= 10 e DT-IATF, n= 10) foi, examinada por ultra-sonografia para a determinação dos diâmetros dos folículos dominantes no início do tratamento hormonal (Dia 0) e no momento da IATF (Dia 10). As médias dos diâmetros foliculares não apresentaram diferença significativa (P>0,05) no Dia 0 (7,0±3,1mm; 8,1±1,9mm e 6,5±1,7mm) e no Dia 10 (9,8±1,4mm; 12,5±1,2mm e 11,8±2,8mm) para DA-IATF, DA-IATF 10 e DTIATF, respectivamente. As taxas de prenhez na IA foram 57, 48, 48 e 46% e ao final do período reprodutivo foram de 77, 88, 68 e 78% para DA-IA, DA-IATF, DA-IAF 10 e DT-IATF, respectivamente, não apresentando diferença significativa (P>0,05). / The objective of this experiment was to determine the reproductive performance of suckled beef cows in programs of artificial insemination (AI) submitted to definitive early or temporary weaning and estrous synchronization protocol to fixed-time AI (FTAI). Two-hundred and five Angus x Nelore cows, body condition scored 2,6±0,4 and post-partum period between 54 and 122 days. In the beginning of the experiment, forty cows were sampled to determine the ciclicity rate of the herd using ultrasound evaluation of ovaries. It was determined that 55% of the cows had ovarian cyclic activity. Cows of EW-AI (n= 53) were artificial inseminated according estrous detection after 10 days of definitive weaning in period of 30 days. In the group EW-FTAI (n= 50), cows were treated (Day 0) with a intravaginal implant containing 1,9g of Progesterone, for 8 days , and 2mg of Estradiol benzoate (EB), im, at the moment of definitive early weaning. When the dispositives were removed (Day 8), 75mcg of Cloprostenol were injected, im, and, after 24 hours (Day 9), 1mg of EB, im. Cows were fixed-time artificial inseminated 52 to 56 hours after implants removal (Day 10). In EW-FTAI10 group (n= 50), cows were treated with the same protocol of EW-FTAI, beginning 10 days after the definitive weaning to FTAI. In group EW-FTAI (n=52), cows were also treated with same hormonal therapy, but a temporary weaning was done after the implant removal to the FTAI moment. The breeding season was 60 days in EW-FTAI and TWFTAI groups, 50 days in EW-FTAI10 group an for 30 days in AW-AI group. A sampling of cows submitted to hormonal treatment (EW-FTAI= 10, EW-FTAI10= 10 and TW-FTAI= 10) had their ovaries scanned to determine the dominant follicle diameter at beginning of hormonal treatment (Day 0) and at FTAI moment (Day 10). The means of follicular diameters were not different (P>0,05) between groups at Day 0 (7,0±3,1mm; 8,1±1,9mm e 6,5±1,7mm) and at Day 10 (9,8±1,4mm; 12,5±1,2mm e 11,8±2,8mm). The pregnancy rates at AI were 57, 48, 48 and 46% and at the end of reproductive period were 77, 88, 68 and 78%, EW-AI, EW-FTAI, EW-FTAI10 and TW-FTAI respectively, without significance (P>0,05).