Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Coorientador: Márcia Rita Fernandes Machado / Banca: Leandro Zuccolotto Crivellenti / Banca: Eliandra Antônia Pires Buttler / Banca: Maricy Apparício Ferreira / Resumo: Nos últimos anos, com a escassez de alimentos, o ser humano vem buscando alternativas de possíveis fontes de proteínas para a sua nutrição. A criação de pacas em cativeiro pode ser uma opção viável desde que explorada adequadamente. Fatos como esse favorecem o desenvolvimento de pesquisas científicas relacionadas à biotecnologia da reprodução, onde essas deixam de ser realizadas unicamente devido a uma preocupação com a conservação da espécie, mas também como uma forma de melhorar a sua produção zootécnica. Com a escassez de dados na literatura surgem dúvidas se seria possível obter oócitos viáveis de pacas para maturação in vitro (MIV). Dessa forma, objetivou-se com esse estudo estabelecer técnica viável de aspiração folicular em pacas, testando efeitos de protocolos hormonais sobre taxa de recuperação de oócitos e MIV, além de avaliar os procedimentos cirúrgicos e os aspectos reprodutivos. Para isso oito fêmeas adultas foram submetidas a quatro tratamentos cada, para a coleta de oócitos por meio de aspirações foliculares auxiliada por videolaparoscopia, onde em três desses tratamentos, houve estímulos hormonais utilizando eCG e FSH. Oócitos recuperados em cada tratamento foram classificados qualitativamente e em seguida submetidos à MIV. Posteriormente, os mesmos foram avaliados quanto ao estado de maturação nuclear. Após todas as análises, conclui-se que a administrações de gonadotrofinas não foram eficientes para superestimular os grupos tratados ou aumentar a eficiência ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In recent years, with food shortages, the being human has been seeking possible alternative sources of protein for nutrition. Breeding of spotted pacas in captivity would be one of those alternatives, if exploited properly. Facts as that favor the development of scientific research related to biotechnology of reproduction, where these are no longer held solely because of a concern for conservation of this species, but also as a way to improve their zootechnical production. Due to lack of data in the literature doubts arise whether it would be possible to obtain viable oocytes from spotted pacas for in vitro maturation. Thus, the aim of this study was to establish viable technique of ovum pick-up in spotted pacas, testing effects of hormonal protocols on recovery rate of oocyte and IVM, and to evaluate the surgical and reproductive aspects. For this eight adult females were subjected to four treatments each, to collect oocytes by laparocoic ovum pick-up, which in three of these treatments were used hormonal stimulation with eCG and FSH. Retrieved oocytes in each treatment were classified qualitatively and then submitted to IVM. Subsequently, they were evaluated for nuclear maturation. After all analyzes, we conclude that the gonadotropin treatments were not efficient to hyperstimulate the treated groups or increased the oocyte recovery efficiency. Thus, further studies are needed, especially for new protocols, such as higher doses or frequency of administration as well as accu... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:12:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000400369-Texto+Completo-0.pdf: 971329 bytes, checksum: 1483a37f92af0668689b279951d26ae3 (MD5) Previous issue date: 2008 / The main breeding ground of the humpback whales in the Southwestern Atlantic Ocean is the Abrolhos Bank, off the Brazilian coast. The genetic diversity and demographic history of the Brazilian humpback whale population, from two geographic locations (Abrolhos Bank, n = 235; Praia do forte, n = 39) was assayed with ten microsatellite loci. Microsatellites were also used to evaluate the existence of genetic differentiation between this population and two whales off South Georgia Islands. This population showed a high level of allelic diversity (A = 12. 1) and a high mean observed heterozygosity (HO = 0. 735), in agreement with other breeding areas studied in the Southern Hemisphere. Although the Brazilian population of humpback whales was reduced during the commercial whaling no genetic bottleneck was detected with the different procedures that we used. Our findings showed no evidence to the temporal differentiation along the years and no genetic differentiation was found between whales from the two geographic locations of the Brazilian breeding ground and between these humpback whales and those two from South Georgia Islands. In addition, a female sampled off South Georgia Islands showed a putative parent-offspring relationship with a female off Abrolhos Bank. These results support the hypothesis that South Georgia/ South Sandwich Islands area as the main feeding area for the Brazilian breeding stock and that it constitute a single population. The data obtained through this study provided no evidence of association within social groups based in kinship. / A principal área de reprodução das baleias jubarte no Oceano Atlântico Sul Ocidental está no Banco dos Abrolhos, na costa brasileira. A diversidade genética e a história demográfica da população de jubartes brasileiras de duas localidades geográficas (Banco dos Abrolhos, n = 235; Praia do forte, n = 39) foi investigada usando dez locos de microssatélites. Microssatélites foram também usados para avaliar a existência de diferenciação genética entre essa população e duas baleias da ilha Geórgia do Sul. A população brasileira apresentou um alto nível de diversidade alélica (A = 12. 1) e uma elevada heterozigosidade média observada (HO = 0. 735), de acordo com outras áreas de reprodução estudadas no Hemisfério Sul. Apesar da população brasileira de baleias jubarte ter sido reduzida durante a caça comercial bottleneck genético não foi detectado com os diferentes procedimentos usados. Nossos dados não evidenciaram uma diferenciação temporal ao longo dos anos e diferenciação genética entre as baleias das duas localidades da área de reprodução brasileira e entre essas jubartes e aquelas duas da ilha Geórgia do Sul não foi encontrada. Em adição, uma fêmea amostrada nas proximidades da ilha Geórgia do Sul apresentou uma possível relação mãe-filha com uma fêmea do banco dos Abrolhos. Os dados obtidos através desse estudo não forneceram evidência para associação baseada em parentesco dentro dos grupos sociais. Nossos resultados suportam a homogeneidade genética da população brasileira de baleias jubarte e corrobora os dados de DNA mitocondrial, que sugerem a região das ilhas Geórgia do Sul/Sanduíche do Sul como principal área de alimentação para essa população.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:12:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000383594-Texto+Completo-0.pdf: 3946584 bytes, checksum: 15724c4a5b54ca271c2494abb1021562 (MD5) Previous issue date: 2005 / The Hippocampus reidi seahorse is a bony fish from the Syngnathidae family, which lives in the coastal and estuarine waters, from the north to the south of Brazil. The field studies were developed in the estuary of the Maracaípe river, 8º32’14,9’’S and 35º00’17,8’’W, in the city of Ipojuca, state of Pernambuco, in the Northeast region of Brazil. The data were collected through weekly dives and observation, from June 2001 to July 2003. When visualized, the animals were captured with the hands and packed into plastic vessels containing the local water, to be transported to the laboratory where it was performed weighing procedures, height measurement (from the top of head to the edge of the stretched tail) and installation of individual identification marks which consisted in numbered plastic tags. After the identification, the specimens were taken back to the mangrove area, in the same points from where they were collected. The laboratorial studies were developed in the Laboratório de Aqüicultura Marinha-LABAQUAC/Project Hippocampus, as an aid to the studies on populational dynamics carried out in the mangrove area. The maintenance of the sea horses was performed in photoperiod of 09L:15E and the feeding consisted in adult specimens of Artemia salina, Poecilia vivipara alevins (guaru) and postlarva sea-shrimp, Penaeus vanamei, twice a day. The reproductive period and the reproduction peak were established through the relative frequency of pregnant males during the collection months. The size of the first maturation of H. reidi was determined through relative frequencies of pregnant males in each length class interval. The fecundity was estimated through the counting of spawned ovocytes without the presence of the male, while the fertility was estimated through the counting of all the newly born fishes from the male’s brood pouch. The height growth curve for the H. reidi was determined based on the marking and recapture data. The estimation of the populational size was developed through the visual sense; the animals were counted by the points, taking into consideration the width, length and depth of each point. The Hippocampus reidi, living in the estuary of the Maracaípe river, is an euryhaline specie, distributing itself along a salinity range between 5-40 ppm, concentrating in points with an average salinity of 26 ppm. It has a reproductive activity during all the year, with reproductive peak established between June and October (winter and part of spring). At birth, it is 0. 6 cm height and develops the secondary sexual characteristics around the 4,3 months (2,4 and 5,25 months), when it reaches heights between 6. 7 and 11. 1 cm. It reaches sexual maturity (L50) at 7,0 months, with average height of de 12. 3 cm. The smaller receptive male presented 9,7 cm height, while the biggest pregnant presented 17. 7 cm height. The male and female gonads are situated parallel to kidneys and ventral to the gaseous vesicle, the female has the ovipositor, a structure contiguity to the ovary, for transference of eggs the male’s brood pouch. The average fecundity per lot was 839. 66 post-vitellogenic eggs, with average fecundity for the reproductive peak of 8,396. 60 eggs, characterizing a fractionated spawning. The average fertility per pregnancy was of 691. 4 individuals, estimating 6. 914 newly-born fishes per reproductive peak. The courtship for the H. reidi was always the male’s initiative, developing a sophisticated nuptial behavior with special motions and colors. The pregnancy period has varied with the water temperature, where the shorter and usual period registered was 12 days, with couple remating formed on the second day after the newly born release. In laboratory, the H. reidi showed itself monogamous, but not strictly, because among 61 observations of courtship and mating, three of them were polygamous, where a male got to mate with two females within an interval of 24 hours. It was registered intrasexual interactions both in males and females; it could be noted an epithelial proliferation similar to the formation of brood pouch in females, whose meaning suggests that sea horses had a hermaphrodite past. Three age ranges were identified: fishes up to one year old: smaller than 15. 0 cm height; fishes up to two years old, between 15. 1 and 17. 0 cm and fishes older than two years, from 17. 1 cm height. It was equally identified within such ranges, averages for three age categories: juvenile, up to 10. 0 cm height (without definition of the secondary sexual characters); specimens at the pre-maturational age, between 10. 1 and 12. 0 cm height; specimens in reproductive age, from 12. 3 cm. The growth weight showed a best development for males: at the same age, the males showed themselves heavier due to the development of the brood pouch. The longevity was not determined in the natural environment; however, the ours laboratorial datas indicate a lifecycle longer than four years. The longest and the shortest displacement registered inside the estuary of the Maracaípe river was 552 m and 8 m respectively, performed by females, while the males presented an average displacement of 200 m, where the average displacement for the specie was 228. 8 m. The pregnant males remained always in the same point, presenting minimum displacement equal or lower than one meter. The populational density was low (0. 060 ind/m2), reaching the highest values in the winter months (0. 137 ind/m2). Among the substrates used by the specie, the Rhizophora mangle roots were the main use. The stream velocity, taken always in the ebb tide, ranged between 0. 6m/s and 0. 06m/s. It was registered a pronounced human interference in the points where the sea horses were collected, through the fishing of crabs or fishes using fishing nets, rods or pumps, where the presence of “ecological tourism” is also frequent. / O cavalo-marinho Hippocampus reidi é um peixe ósseo, pertencente à família Syngnathidae, que habita águas litorâneas e estuarinas, de norte a sul do Brasil. Os estudos de campo foram desenvolvidos no estuário do rio Maracaípe, 8º32’14,9’’S e 35º00’17,8’’W, município de Ipojuca, estado de Pernambuco, região nordeste do Brasil. Os dados foram coletados através de mergulhos e observações semanais, de junho de 2001 a julho de 2003. Ao serem visualizados, os animais foram capturados com a mão e acondicionados em recipientes plásticos, com água do local, para transporte ao laboratório, onde foram realizados procedimentos de pesagem, medição da altura (medida do topo da cabeça à ponta da cauda esticada) e colocação de marcas de identificação individual que consistiram em etiquetas plásticas numeradas. Após a marcação, os espécimes foram devolvidos ao manguezal, nos mesmos pontos onde foram coletados. Os estudos de laboratório foram desenvolvidos no LABAQUAC (Laboratório de Aqüicultura Marinha), em auxílio aos estudos de dinâmica populacional realizados no manguezal. A manutenção dos cavalos-marinhos foi feita em fotoperíodo de 09L:15E e, a alimentação constou de espécimes adultos de Artemia salina, alevinos de Poecilia vivipara (guaru) e pós-larva do camarão-marinho, Penaeus vanamei, na freqüência de duas vezes ao dia. O período reprodutivo e o pico de reprodução foi estabelecido através da freqüência relativa de machos grávidos no decorrer dos meses de coleta. O tamanho da primeira maturação de H. reidi foi determinado através das freqüências absolutas e relativas de machos grávidos por intervalo de classe de comprimento. A fecundidade foi estimada através da contagem dos ovócitos desovados sem a presença do macho, enquanto que a fertilidade foi estimada pela contagem de todos os recém-nascidos da bolsa incubadora do macho.A curva de crescimento em altura para H. reidi foi feita com base nos dados de marcação e recaptura, utilizando uma “Planilha de Ajuste da Função de Crescimento de von Bertalanffy”. A estimativa do tamanho populacional foi elaborada através do senso visual, os animais foram contados através dos pontos, levando em consideração a largura, comprimento e profundidade de cada ponto. Hippocampus reidi, residente no estuário do rio Maracaípe, é uma espécie eurialina, distribuindo-se ao longo de uma faixa de salinidade entre 5-40 ppm, concentrando-se em pontos com salinidade média de 26 ppm. Possui atividade reprodutiva durante todo o ano, com pico reprodutivo estabelecido ente junho e outubro (inverno e parte da primavera). Ao nascer, possui 0,6 cm de altura e, desenvolve as características sexuais secundária por volta de 4,3 mese (2,4 e 5,25 meses), quando atinge alturas entre 6,7 e 11,1 cm. Alcança maturidade sexual (L50) aos 7,0 meses, com médias de 12,3 cm de altura. O menor macho receptivo apresentou 9,7 cm de altura, enquanto que o maior pregnante, 17,7 cm. As gônadas masculinas e femininas situam-se paralelas aos rins e ventral à vesícula gasosa, a fêmea possui o ovopositor, estrutura contígua com o ovário, para transferência dos ovócitos para a bolsa incubadora do macho. A fecundidade média por lote foi de 839,66 ovócitos pós-vitelogênicos, com fecundidade média para o pico reprodutivo de 8. 396,60 ovócitos, caracterizando uma desova parcelada. A fertilidade média por pregnância foi de 691,4 indivíduos, estimando-se 6. 914 recém-nascidos por pico reprodutivo. A corte em H. reidi foi sempre iniciativa do macho, desenvolvendo elaborado comportamento nupcial com movimentos e coloração especiais. O período de pregnância variou com a temperatura da água, o menor e usual período registrado foi de 12 dias, com reacasalamento do par formado no segundo dia após liberação da prole. Em laboratório, H. reidi apresentou-se monogâmico, mas não estritamente, pois de 61 observações de corte e acasalamento, três foram poligâmicas, chegando um macho a copular com duas fêmeas num intervalo de 24 horas. Foram registradas interações intra-sexuais, tanto em machos, quanto em fêmeas; observou-se proliferação epitelial semelhante a formação de bolsa incubadora em fêmeas, cujo significado sugere um passado hermafrodita para os cavalos-marinhos. Identificou-se três faixas etárias: peixes até um ano de vida: menores de 15,0 cm de altura; peixes até dois anos de vida, entre 15,1 e 17,0 cm e, peixes com mais de dois anos de vida, a partir de 17, 1 cm de altura. Igualmente identificou-se dentro dessas faixas, médias para três categorias etárias: juvenil, até 10, 0 cm de altura (sem definição dos caracteres sexuais secundários); espécimes em idade pré-maturacional, de 10,1 a 12,0 cm de altura; espécimes em idade reprodutiva, a parir de 12,3 cm. O crescimento em peso revelou maior desenvolvimento para machos: em uma mesma idade, os machos apresentaram– se mais pesados pelo desenvolvimento da bolsa incubadora. A longevidade não foi determinada em ambiente natural, porém, os dados de laboratório apontam para um ciclo de vida superior a quatro anos. O maior e menor deslocamento registrado dentro do estuário do rio Maracaípe foi 552 m e 8 m respectivamente, realizado por fêmeas, enquanto que os machos apresentaram deslocamento médio de 202,5 m, sendo que o deslocamento médio para a espécie foi de 228,8 m. Os machos pregnantes permaneceram sempre no mesmo ponto, apresentando deslocamento mínimo igual ou menor que 1 m2. A densidade populacional apresentou-se baixa (0,060 ind/m2), alcançando os maiores valores nos meses de inverno (0,137 ind/m2). Dos substratos utilizados pela espécie, as raízes de Rhizophora mangle, constituíram-se no principal uso.A velocidade da corrente, tomada sempre na vazante, variou de 0,6m/s à 0,06m/s. Foi registrada acentuada interferência humana nos pontos onde foram coletados os cavalos-marinhos, através da pesca de siri ou peixes, com rede, com vara ou com bomba, sendo freqüente também a presença do “turismo ecológico”.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:13:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000414094-Texto+Completo-0.pdf: 1166572 bytes, checksum: 6a704fcc99e53ed0b6c1ac75b94dbea2 (MD5) Previous issue date: 2009 / The temporal distribution, habitat partition, reproduction and vocal activity in an anuran assemblage were studied from April 2005 to November 2006, at Fazenda Serra da Esperança, municipality of Lebon Régis, State of Santa Catarina. Objectives of the work were to verify the importance of pluviosity and temperature on temporal distribution of the species at the assemblage, analyze the habitat ocupation, offer an acoustic analysis of vocal repertoire of the species and to test the influence of air temperature, size and mass of vocalizing males on acoustic parameters. Thirty-two species were found at the study site, the largest amphibian richness found in the State. The taxonomic status of at least seven species is uncertain, which could represent undescribed taxa. Temperature had a strong influence on species temporal distribution. Number of vocalizing and reproducing males was related to variation in monthly mean, minimum and maximum temperature, what means that in the hottest months there are more species in vocal and reproductive activity. Fourteen species presented reproductive activity and nine reproductive modes were found in the assemblage. The comparison of vocalizations of 23 species of the assemblage with descriptions of vocalizations from other assemblages indicated differences on the calls which suggest the existence of undescribed species at the study site. Intraspecific variations in calls were related to size and mass of calling males and to air temperature. Variation in dominant frequency was related to mass and size of calling males and variation in note duration related to air temperature.The assemblage species richness presented strong biogeographic similarity with areas of Araucaria Forest from the States of Santa Catarina, Paraná and Rio Grande do Sul. The presence of possible new species and of Pleurodema bibroni, which is classified as “near threatened”, reinforces the importance of conservation of this strongly degraded biome and points out our lack of knowledge about anurans from Santa Catarina State. / No período de abril de 2005 a novembro de 2006 foram estudadas a distribuição temporal, a partilha do habitat, a reprodução e a atividade vocal em uma assembleia de anfíbios anuros na Fazenda Serra da Esperança, município de Lebon Régis, Estado de Santa Catarina. Os objetivos do trabalho foram verificar a importância da pluviosidade e da temperatura na distribuição temporal das espécies na assembleia, analisar a ocupação do habitat, realizar a análise acústica do repertório vocal das espécies e testar a influência da temperatura do ar e do tamanho e massa dos machos vocalizantes sobre os parâmetros acústicos. Foram encontradas 32 espécies na área de estudo, a maior riqueza de anfíbios registrada para o Estado. A taxonomia de pelo menos sete dessas espécies é incerta, podendo tratar-se de táxons ainda não descritos na literatura. A temperatura apresentou uma forte influência na distribuição temporal das espécies. O número de espécies em atividade de vocalização e reprodução foi relacionado às variações da temperatura mensal média, mínima e máxima, significando que nos meses mais quentes foram encontradas mais espécies em atividade de vocalização e reprodução. Foi documentada atividade reprodutiva em 14 espécies e um total de nove modos reprodutivos na assembleia. A comparação das vocalizações de 23 espécies da assembleia com descrições de vocalizações de outras assembleias indicou diferenças que sugerem a existência de espécies ainda não descritas na área de estudo. Também foram documentadas variações intraespecíficas nos cantos em decorrência do tamanho e massa dos machos cantores e em função da temperatura do ar. Encontraram-se influências da massa e tamanho do macho cantor na frequência dominante do canto de anúncio, e também da temperatura do ar na duração das notas.A riqueza de espécies da assembleia apresentou forte semelhança biogeográfica com áreas de Floresta Ombrófila Mista dos Estados de Santa Catarina, Paraná e Rio Grande do Sul. A presença de possíveis novas espécies e da espécie Pleurodema bibroni, classificada na categoria ”quase ameaçada”, salienta a importância da conservação deste bioma altamente degradado e demonstra a nossa carência de conhecimento acerca da anurofauna catarinense.

Made available in DSpace on 2014-10-24T01:01:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000462157-Texto+Completo-0.pdf: 2932621 bytes, checksum: df35aa42aa9e48a0e2ee46ce77f834dc (MD5) Previous issue date: 2014 / We studied the breeding biology of the Lesser Grass-finch (Emberizoides ypiranganus), a bird little known regarding your life history, in upland grassland of Mata Atlântica Biome in southern Brazil. We collected data over two breeding seasons (from October to March of 2012-2013 and 2013-2014) in the Parque Estadual do Tainhas (29º 5’ 58” S, 50° 21’ 50” W), in northeastern of Rio Grande do Sul State, Brazil. We monitored 93 nests and assessed several aspects related to reproduction of the species such as territoriality, breeding chronology, characteristics of nests, eggs and nestlings, clutch size, incubation, hatching rate, parental care, reproductive success and habitat features (structure and floristic composition) important in the nest site selection. Breeding begins at the first week of October, peaks in late November, and lasts until early March. The average size of reproductive territories was 1. 1 ± 0. 5 ha. Burned areas had smaller territories and a smaller density of reproductive pairs in comparison with unburned areas. Nests were built in transition zones between dry and wet habitats (49. 5%) or in dry grasslands (48. 4%). Only 2. 1% of nests were built in dense marshes. The structure and floristic composition of nest sites analysis showed that the species selects sites to build nests with higher abundance of grass clumps such as Andropogon lateralis, Schizachyrium tenerum e Sorghastrum setosum. Nests are cup-shape and are built only by female in 3-7 days, at 36. 2 ± 11. 6 cm above the ground. The clutch size is three (67. 3%) or two eggs. The incubation, which is performed by the female, lasts 13 to 14 days and is synchronic. The hatching rate was 93. 5%. Nestlings remain in the nest between nine and 12 days. In most nests the nestlings are feed by both male and female (biparental care).The frequency visits to the nest to feed young did not differ with the nestling ages, but the length of visits was longer when nestlings were one to five days old. The apparent nest success was 41. 9%, while the Mayfield success was 39. 3% and MARK 35%. Predation was the main cause of loss clutches, affecting 76% of the unsuccessful nests. The best model to nest survival includes time-specific factors (nest age and year) and nest site features (nest height and habitat). The daily survival rates decrease through the nest cycle, falling sharply after hatch, on nestling stage. In successful nests the nestling survival was 0. 83 ± 0. 24 and the average productivity 2 ± 0. 76 fledglings/nests. Considering successful and unsuccessful nests, the productivity was 0. 84 ± 1. 11 fledgling/nests. Up to four nest attempts, performed by the same female, were observed in a breeding season. The renesting interval after nest failure was 2. 7 ± 1. 3 days and the average distance among consecutive attempts was 104. 2 ± 60. 2 m. Although there is few available information in literature about the reproduction of Lesser Grass-finch, some basic parameters found are similar to those described. However, many results of this study are unpublished for the species such as territoriality, reproductive success and nest site selection. / Estudamos a reprodução do canário-do-brejo (Emberizoides ypiranganus), uma ave com uma história de vida pouco conhecida, nos campos de altitude do Bioma Mata Atlântica, no sul do Brasil. Coletamos dados durante duas temporadas reprodutivas (de outubro a março de 2012-2013 e 2013-2014) no Parque Estadual do Tainhas (29º 5’ 58” S, 50° 21’ 50” O), no nordeste do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Monitoramos 93 ninhos e avaliamos diversos aspectos ligados à reprodução da espécie, tais como territorialidade, cronologia da nidificação, características dos ninhos, ovos e ninhegos, tamanho das ninhadas, incubação, taxa de eclosão, cuidado parental, sucesso reprodutivo e características dos habitats (estrutura e composição florística) importantes na seleção dos sítios de nidificação. A reprodução começa na primeira semana de outubro, tem um pico de ninhos ativos na segunda quinzena de novembro, e dura até o início de março. Os territórios reprodutivos têm um tamanho médio de 1,1 ± 0,5 ha. Área onde ocorrem queimadas possuem territórios menores e uma menor densidade de pares reprodutivos em comparação a áreas sem fogo. Ninhos foram construídos em áreas de transição entre ambientes secos e úmidos (49,5%) ou em áreas de campo seco (48,4%). Apenas 2,1% dos ninhos foram construídos em áreas de banhado denso. A análise da estrutura e composição florística dos sítios de nidificação mostrou que a espécie seleciona locais para construção dos ninhos onde há grande abundância de touceiras de gramíneas como Andropogon lateralis, Schizachyrium tenerum e Sorghastrum setosum. Os ninhos têm formato de taça e são construídos apenas pela fêmea em 3-7 dias, a uma altura média 36,2 ± 11,6 cm do solo. A ninhada é de três (67,3%) ou dois ovos. A incubação, que é realizada apenas pela fêmea, dura de 13 a 14 dias e é sincrônica. A taxa de eclosão dos ovos foi 93,5%. Os ninhegos permanecem no ninho entre nove e 12 dias. Na maioria dos ninhos os ninhegos são alimentados pelo macho e pela fêmea (cuidado biparental). A frequência de visitas ao ninho para alimentar os ninhegos não diferiu com suas idades, mas a duração das visitas foi maior no início (ninhegos de 1-5 dias de vida). O sucesso aparente dos ninhos foi 41,9%, enquanto o sucesso calculado pela estimativa de Mayfield foi 39,3% e pelo programa MARK foi 35%. A predação foi a principal causa de perda das ninhadas, afetando 76% dos ninhos insucesso. O melhor modelo para a sobrevivência dos ninhos inclui fatores tempo-específicos (idade do ninho e temporada reprodutiva) e características do local do ninho (altura e habitat). As taxas de sobrevivência diária diminuem ao longo do ciclo de nidificação, caindo bruscamente após a eclosão, na fase de ninhego. Em ninhos sucesso a sobrevivência de ninhegos foi 0,83 ± 0,24 e a produtividade média 2 ± 0,76 filhotes/ninho. Considerarmos ninhos sucesso e insucesso, a produção anual de filhotes foi 0,84 ± 1,11 filhote/ninho. Até quatro tentativas de nidificação foram realizadas por uma fêmea na mesma temporada reprodutiva.O intervalo médio entre a perda de um ninho e uma nova tentativa foi 2,7 ± 1,3 dias e a distância média entre ninhos subsequentes em um território foi 104,2 ± 60,2 m. Embora haja pouca informação disponível na literatura sobre a reprodução de E. ypiranganus, alguns parâmetros básicos encontrados são semelhantes aos já descritos. No entanto, muitos resultados deste estudo são inéditos para a espécie, a exemplo da territorialidade, sucesso reprodutivo e seleção dos sítios de nidificação.

Tese (Doutorado)—Universidade Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2012. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-08-21T11:52:14Z No. of bitstreams: 1 2012_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 4964531 bytes, checksum: 9d463cc52f0602d4161f0a4808dbf390 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-08-21T11:52:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 4964531 bytes, checksum: 9d463cc52f0602d4161f0a4808dbf390 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-21T11:52:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 4964531 bytes, checksum: 9d463cc52f0602d4161f0a4808dbf390 (MD5) / A avaliação de embriões produzidos in vitro (PIV) no estágio pós-eclosão é uma importante ferramenta para verificar a qualidade de embriões PIV. É justamente nessa fase, em que ocorre a maior perda embrionária. Para avaliar os embriões nesse estágio, esse trabalho propõe a utilização do sistema de cultivo pós-eclosão (PHD). Esse sistema é um método alternativo que pode auxiliar na avaliação do potencial de desenvolvimento dos embriões sem a necessidade de transferi-los para receptoras. Mas, para utilizar esse sistema na rotina é necessário verificar sua eficiência. Portanto, esse trabalho teve por objetivo avaliar a viabilidade do sistema PHD através de avaliações morfológicas e moleculares de embriões produzidos nesse sistema. Esse trabalho foi composto de três estudos. O primeiro visou validar o sistema PHD no laboratório e verificar o melhor protocolo para realizar esse sistema. Para isso, túneis de agarose foram construídos com água Milli-Q ou com solução fosfato salina (PBS) foram utilizados para o desenvolvimento dos embriões PIV. O segundo trabalho, após a escolha do melhor protocolo, objetivou avaliar o comportamento de embriões produzidos in vivo e in vitro de D7 cultivados no sistema PHD até D14. E finalmente, o último trabalho, verificou a eficiência do sistema PHD para o cultivo de embriões PIV até D14 comparado à transferência múltipla para o útero de receptoras. Durante o período de cultivo, os embriões foram mensurados e avaliados quanto à qualidade morfológica do trofoblasto e botão embrionário. Além disso, o perfil molecular foi avaliado pela quantificação da expressão de genes relacionado com qualidade do embrião, SLC2A1, SLC2A3, G6PD, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSOD , HSP70, IFNT, nos embriões de D7 e D14. Quanto ao primeiro trabalho observou-se que o melhor protocolo para o sistema PHD foi quando se utilizou a água Milli-Q para a construção dos túneis, pois nesse os embriões tiveram um maior crescimento durante o cultivo. No segundo, trabalho verificouse que apesar da baixa taxa de crescimento os embriões in vivo tiveram desenvolvimento semelhante no sistema PHD do que os in vitro. E quando se comparou os embriões totalmente in vitro com os totalmente in vivo, verificou-se que os in vitro eram menores, mas a maioria da expressão dos genes foi semelhante entre os grupos (SLC2A3, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSO , IFNT). E, no último trabalho, o principal resultado foi que os embriões in vitro cultivados até D14 no útero de receptoras foram semelhantes ao grupo controle (totalmente in vivo), mas esses dois tipos de embriões foram diferentes dos cultivados no sistema PHD, principalmente, em relação à porcentagem de embriões crescidos/recuperados, ao tamanho e a expressão gênica. Porém, verificou-se a possibilidade de embriões PIV se desenvolverem nos túneis de agarose. Concluiu-se que o sistema PHD ainda não está apto para se utilizado na rotina, principalmente, devido à baixa porcentagem de embriões que se desenvolvem. Portanto, investimentos em métodos para que ele se torne menos seletivo e dê condições para o desenvolvimento de embriões de boa qualidade que se desenvolveria normalmente em ambiente uterino seriam de grande valia. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The evaluation of in vitro-produced embryos (IVP) in the post hatching stage is an important tool to verify the quality of IVP embryos, as is in this phase that most embryonic loss occurs. In the order to evaluate the embryos at this developemental stage, the present study proposes the use of the post-hatching development (PHD) system. This system is an alternative method which may help to evaluate the developmental potential of embryos without transfering them to a recipient’s uterus. However, to use this system routinely in the laboratory, it is necessary to verify its efficiency. Therefore, this study aimed to evaluate the viability of the PHD system using morphological and molecular evaluations of embryos produced in this system. This study was conducted in three different studies. The first was designed to validate the PHD system in the laboratory and to determine the best testing protocol. Agarose tunnels were subsequently constructed either with Milli-Q water or with phosphate buffer saline (PBS) and IVP embryo development was evaluated. Sencondly, after selecting the best protocol, we aimed to evaluate the behavior of in vivo and in vitro embryos in the PHD system from Day (D)7 through D14. Finally, in the third study, we verified the efficiency of the PHD system and multiple transfer protocol for culture IVP embryos until D14. During the culture period, embryos were measured and evaluated for morphological quality of the embryonic trophoblast and embryonic disc. The molecular profile was determined by quantification of the expression of genes related to embryo quality, such as SLC2A1, SLC2A3, G6PD, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSOD, HSP70, IFNT, in D7 and D14 embryos, using qPCR. In the first study, we concluded that the best protocol was when agarose tunnels were constructed with Milli-Q water, as embryos demonstrade a greater increase in size. In the second study, we found in vivo embryos presented a lower development rate in the PHD system, when compared morphologically to the in vitro embryos. On comparison of the completely in vitro embryos with completely in vivo embryos, it was found that in vitro embryos were smaller than the in vivo embryos, but most of the genes had similar expression between the groups (SLC2A3, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSOD, IFNT). In the last study, we concluded that IVP embryos cultured until D14 in a recipients uterus were similar to control group (completely in vivo), and both were different from embryos cultured in the PHD system. Although the PHD system is inefficient we demonstrated that it can be used to develop IVP embryos. It was concluded that the PHD system is not yet able to be routinely used, especially due to the low percentage of embryos that develop in it. Therefore, an investment into this method, it can become less selective and provide conditions for the develop of good quality embryos that would normally development in uterine conditions, would be of great value.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-04-24T13:10:15Z No. of bitstreams: 1 2012_NeanderMarcelHeming.pdf: 4497537 bytes, checksum: c62a0d779607594874ab500cd1c761df (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-04-25T12:54:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_NeanderMarcelHeming.pdf: 4497537 bytes, checksum: c62a0d779607594874ab500cd1c761df (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-25T12:54:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_NeanderMarcelHeming.pdf: 4497537 bytes, checksum: c62a0d779607594874ab500cd1c761df (MD5) / A biologia reprodutiva das aves tem um papel fundamental no desenvolvimento da teoria de história de vida. As estratégias de história de vida das aves da região Neotropical diferem notavelmente de seus correspondentes da região Neártica. A América Austral e Neotropical (AAN) possui mais de 30% de toda a diversidade de aves mas a falta de estudos detalhados sobre a biologia das espécies dificulta o teste de hipóteses. Por meio de uma extensa revisão de literatura buscamos registros de tamanho de ninhada, medidas de ovos, massa de ovos e períodos de incubação e de ninhego de todas as espécies de Fluvicolinae. Esta é a segunda maior subfamília dentre os tiranídeos, com 132 espécies. A subfamília Fluvicolinae possui a distribuição mais ampla dentre todos os tiranídeos, ocorrendo desde o extremo sul da América do Sul até o extremo norte da América do Norte além de outras características que fazem desta subfamília um grupo ideal para comparações geográficas e ecológicas. No primeiro capítulo testamos se a quantidade de informação existente é explicada por características dos países e das espécies. Procuramos dados reprodutivos de Fluvicolinae em cerca de 2500 publicações, sendo que 302 publicações, desde 1838 até 2012, continham dados desta subfamília. A quantidade de publicações por país foi positivamente relacionada com o número de universidades, riqueza de espécies de Fluvicolinae e área de cada país e negativamente relacionada com a riqueza total de espécies de cada país. As publicações continham registros de 4751 tamanhos de ninhada, 3952 medidas de ovos, 1152 massas de ovos, 349 períodos de incubação e 285 períodos de ninhego em todo o Novo Mundo. A quantidade de registros de tamanho de ninhada das espécies foi positivamente relacionada com o potencial de amostragem das espécies (porcentagem da área total de distribuição da espécie em cada país multiplicada pelo número de instituições de ensino superior existente no país) e o tamanho da área reprodutiva. Soluções para que se consiga reverter este quadro estão no aumento do número de 2 instituições acadêmicas ao longo da AAN, estabelecimento e melhora de redes de cooperação e pesquisa internacionais e da distribuição de recursos para a educação de forma mais uniforme em todas as regiões. Nos dois capítulos seguintes testamos hipóteses relacionadas com os padrões geográficos de número e volume de ovos. A observação de que as ninhadas aumentam com a latitude levou à formulação de hipóteses relacionando o padrão com a disponibilidade de alimento e a predação de ninhos. Entretanto, a variação latitudinal no tamanho de ninhada ainda é uma questão não resolvida por três razões principais. Primeiro, após o surgimento da hipótese de sazonalidade a hipótese da duração do dia raramente foi testada e a limitação de alimento por meio da densidade populacional foi amplamente aceita como o mecanismo para a variação no tamanho de ninhada. Segundo, embora a limitação de alimento seja amplamente aceita como o maior determinante de tamanho de ninhada, a evidência é basicamente baseada em populações locais. Terceiro, muitos dos padrões de história de vida são baseados no conhecimento biológico do hemisfério norte, que possui menos de 25% de toda a biodiversidade de aves do planeta. Desse modo, analisamos o tamanho de ninhada de Fluvicolinae em ampla escala geográfica com os objetivos de: (1) testar as hipóteses de Lack (1947) e Ashmole (1963) lado a lado, e (2) comparar os hemisférios sul e norte das Américas para testar quais fatores influenciam o tamanho de ninhada ao longo de cada um dos hemisférios. A hipótese de duração do dia e sazonalidade (DDS) explicou 28% da variação total no tamanho de ninhada e ambas as variáveis foram significativas (p < 0,05). De acordo com a regressão parcial a variação explicada compartilhada pelas duas variáveis foi de 17%. A duração do dia explicou 25% no total e 8% sozinha de toda a variação no tamanho de ninhada. A sazonalidade explicou 20% no total e 3% sozinha de toda a variação no tamanho de ninhada. O modelo com as variáveis ecológicas e ambientais explicou 44% da variação total no hemisfério norte e apenas 17% no hemisfério sul. Além disso o tamanho de ninhada teve um aumento menos pronunciado no hemisfério sul do que no hemisfério norte. É notável que o mecanismo de duração do dia proposto por Lack (1947) 3 não tenha sido investigado pela maior parte dos pesquisadores. Além disso, a grande quantidade de variação não explicada no hemisfério sul da América reforça a visão de que os mecanismos precisam ser revisitados para melhorar nossa compreensão sobre como as estratégias de histórias de vida são moldadas. O fato de as aves dos dois hemisférios estarem sujeitas a condições ambientais antagônicas, com a relação latitude e tamanhos de ninhada ser menor no hemisfério sul em relação ao hemisfério norte, é uma grande oportunidade para compreender melhor as estratégias de história de vida. No terceiro capítulo analisamos a variação no volume de ovos, pois o tamanho de postura da maioria das espécies de aves varia muito pouco ao longo de toda a América Austral e Neotropical (AAN). Sabendo-se que vários fatores podem estar relacionado com o volume dos ovos das aves, a investigação deste parâmetro reprodutivo é uma alternativa interessante para se entender as estratégias de história de vida destes organismos. Neste capítulo avaliamos a variação geográfica no volume de ovos de Fluvicolinae e testamos as hipóteses de relacionadas com variáveis ecológicas. Obtivemos 762 registros dos quais 437 foram geo-referenciados, pertencentes a 86 espécies e 31 gêneros das 132 espécies e 38 gêneros de Fluvicolinae. O volume dos ovos tendeu a aumentar em direção ao sul da América do Sul e o padrão foi mantido após controlar pela massa corporal. O modelo explicou 87,4% de toda a variação no volume dos ovos, sendo que o tamanho corporal explicou 83,9% da variação no volume dos ovos. Dos 16,1% da variação residual no volume de ovos (não explicados pela massa corporal), 21,7% (3,5% do total) foram explicados pelos preditores ecológicos utilizados na análise e 78,3% (12,6% do total) não foram explicados. A tendência de aumento no volume de ovos em direção ao sul da América do Sul é um padrão bastante interessante. O número de ovos por ninhada tende a aumentar em direção ao norte do hemisfério norte e este padrão tem sido amplamente discutido. No entanto, este padrão não se repete no hemisfério sul, o que tem chamado a atenção dos pesquisadores. Portanto, considerando-se o tamanho de ninhada menos variável nos passeriformes da América Austral e 4 Neotropical em relação aos da região Boreal, o tamanho dos ovos pode explicar outra fração das estratégias de história de vida no hemisfério sul. Levando em conta a baixa quantidade de variação explicada pelos preditores utilizados neste estudo, a coleta de informações sobre períodos de desenvolvimento poderá ajudar a responder algumas das questões sobre as estratégias de história de vida das aves da América Austral e Neotropical. Portanto, para promover o desenvolvimento da ornitologia da América Austral e Neotropical, os pesquisadores desta região tem um grande número de parâmetros de história de vida de várias espécies para documentar. Além disso, se os parâmetros forem colocados dentro do contexto teórico, além de contribuir para o desenvolvimento da ornitologia Neotropical, os pesquisadores na AAN tem uma oportunidade única de promover o avanço da teoria de história de vida.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2013. / Submitted by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-05-06T12:50:14Z No. of bitstreams: 1 2013_Nelma Martelli Toledo de Souza.pdf: 636292 bytes, checksum: 0a8f5c84ad69bd2ad76b49f7c93091b3 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-05-06T12:50:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_Nelma Martelli Toledo de Souza.pdf: 636292 bytes, checksum: 0a8f5c84ad69bd2ad76b49f7c93091b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-06T12:50:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_Nelma Martelli Toledo de Souza.pdf: 636292 bytes, checksum: 0a8f5c84ad69bd2ad76b49f7c93091b3 (MD5) / O parasitismo interespecífico de ninhada é uma estratégia reprodutiva em que a ave parasita coloca seus ovos no ninho de outras espécies e estas realizam todo o cuidado parental. As interações dos parasitas e seus caracterizam uma relação de coevolução, em que cada parte envolvida responde à pressão seletiva imposta pela outra. Molothrus ater (Chupim-de-cabeça-castanha) e Molothrus bonariensis (Vira-bosta) são parasitas obrigatórios de ninhos de aves e estão distribuídos, sendo a ocorrência de M. ater na América do Norte e M. bonariensis na América do Sul, América Central insular e região sul da Flórida nos Estados Unidos. Ambas são generalistas e parasitam mais de 250 espécies cada. Baseando-se em dados existentes na literatura, o objetivo deste trabalho foi testar a hipótese de que a seleção de hospedeiros da subfamília Fluvicolinae (Tyrannidae) por ambos os parasitas se dá de acordo com as características dos ninhos e dos ovos dos hospedeiros. Nossos resultados mostraram que existe diferença na seleção de hospedeiros pelos parasitas, com M. bonariensis considerando as tribos de Fluvicolinae, as características dos ninhos e dos ovos e com M. ater considerando apenas as características dos ovos. Explicações para estas diferenças podem estar relacionadas à frequência de determinados tipos de ninho no ambiente, aos processos coevolutivos resultantes das interações entre as espécies parasitas e hospedeiras e a quanto um ovo torna um ninho mais conspícuo. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Interspecific brood parasitism is a breeding strategy in which the avian parasite lays its eggs in the nests of other species which thereafter provide all parental care. The interactions between parasites and hosts characterize coevolutionary associations, with each involved part responding to selective pressures imposed by the other. Molothrus ater (Brown-headed Cowbird) and Molothrus bonariensis (Shiny Cowbird) are obligate brood parasites. M. ater are distributed in North America and M. bonarineis in South America, Islands of Central America, South Florida in United States. Both species are generalists parasiting more than 250 species each. Based on literature data, the goal of this work is to test the hypothesis that each parasite selects its Fluvicolinae (Tyrannidae) host based on nest and egg traits. Our results show that there is a difference in host selection between brood parasites, since M. bonariensis selects its hosts considering Fluvicolinae tribe, nest and egg traits, and M. ater only egg traits. Explanations for these differences could be related to frequency of some kinds of nest in the environment, coevolutionary processes that result from interactions between brood parasites and hosts and how much an egg highlights a nest.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2007. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-10-16T13:56:17Z No. of bitstreams: 1 Dissert_ReginaldoVieiradeSouxa.pdf: 671043 bytes, checksum: 847820a52781eb05975638a844332018 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-06-23T22:07:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissert_ReginaldoVieiradeSouxa.pdf: 671043 bytes, checksum: 847820a52781eb05975638a844332018 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-06-23T22:07:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert_ReginaldoVieiradeSouxa.pdf: 671043 bytes, checksum: 847820a52781eb05975638a844332018 (MD5) Previous issue date: 2007-06 / Com o aprimoramento das técnicas de reprodução assistida, a produção de embriões in vivo (TE) e in vitro (PIV), tem crescido consideravelmente e por conseqüência, a demanda por metodologia eficaz de identificação do sexo desses embriões. Este trabalho teve por objetivo avaliar um sistema de identificação do sexo (Diagnóstico pré-implantacional do sexo) de embriões bovinos produzidos em programas comerciais de TE e PIV. Os embriões produzidos in vivo (n=609) foram coletados de animais das raças Holandesa e Jersey, sete dias (D7) após a Inseminação Artificial (IA) nos estágios de mórula compacta (Mc), blastocisto inicial (Bi), blastocisto (Bl) e blastocisto expandido (Bx). Os embriões foram divididos em dois grupos: Grupo TE-B, constituído por embriões biopsiados e Grupo TE-C, constituído por embriões intactos (controle). Para o experimento de produção in vitro, foram utilizados embriões de bovinos da raça Gir (n=318), nos estágios de blastocisto inicial Bi, Bl e Bx, em D-6,5. Os embriões foram divididos em dois grupos: Grupo PIV-B, constituído por embriões biopsiados e Grupo PIV-C, constituído por embriões intactos (controle). Os embriões dos Grupos TE-B (n=380) e PIV-B (n=91) foram submetidos à micromanipulação por microssecção para retirada da biopsia. Os embriões biopsiados foram cultivados até o final do processo de identificação do sexo e então transferidos para receptoras síncronas. Os embriões do Grupo TE-C (n=229) e PIV-C (n=227) foram transferidos íntegros para receptoras síncronas no mesmo momento dos biopsiados. As receptoras foram submetidas à ultra-sonografia aos 30 (TE) e 60 (TE e PIV) dias após as inovulações para diagnóstico de gestação e confirmação do sexo, respectivamente. Para a identificação do sexo dos embriões biopsiados, as respectivas biopsias foram submetidas às técnicas de PCR e eletroforese em gel de agarose. Na reação, foram utilizados 2 pares de oligonucleotídeos iniciadores (primers), sendo um específico para o cromossomo Y e o outro para um gene autossômico (controle da reação que amplifica uma seqüência de DNA específica em ambos os sexos). Para a comparação das taxas de gestação aos 60 dias, entre os grupos e respectivos controles, foi utilizado o teste do quiquadrado (χ2) e não houve diferenças entre os grupos, com TE-B =206/380 (54,21%), TE-C = 128/229 (55,89%); PIV-B =24/91 (26,37%) e PIV-C=45/227 (19,82%). Das gestações confirmadas que tiveram suas respectivas biopsias submetidas à sexagem, 133 do Grupo TE-B, e 20 do Grupo PIV-B, foram avaliadas por ultra-sonografia aos 60 dias após as inovulações sendo que 124 (93,23%) e 19 (95%), respectivamente, tiveram sexo coincidente com aquele atestado pela PCR. O resultado deste trabalho indicou que o procedimento de retirada de biopsia de embriões produzidos in vivo e in vitro não interfere na viabilidade dos mesmos, e que a metodologia utilizada é viável para identificação do sexo dos embriões em programas comerciais de transferência de embriões. __________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / With the advance of the assisted reproductive techniques, the use of in vivo (ET) and in vitro embryo production (IVP) has increased considerable, which has lead to a demand for an efficient method for embryo sexing. The present study aimed to evaluate the effect of the micromanipulation of ET and IVP embryos on their viability and to test, in field conditions, a methodology embryo sexing. In vivo produced embryos (n=609) were collected from Holstein and Jersey females. Embryo at compact morula (Mc), initial blastocyst (Bi), blastocyst (Bl) and expanded blastocyst (Bx) stage on Day 7 post insemination (D-7) were allocated into two groups: Group ET-B, biopsied embryos and Group ET-C, intact embryos (control). For the in vitro production experiment embryos of Gir breed females were used (n=318) at the initial blastocyst (Bi), blastocyst (Bl) and expanded blastocyst (Bx) stage at Day 6,5 post insemination. Embryos were distributed into two groups: Group IVP-B, biopsied embryos and Group IVP-C, intact embryos (control). Embryos from both groups ET-B (n=380) and IVP-B (n=91) were submitted to micromanipulation by section, for biopsy removal. Biopsied embryos were cultured until the end of the process of sex identification and then were transferred for synchronized recipients. Embryos from the groups ET-C (n=229) and IVP-C (n=227) were transferred intact to the synchronized recipients. All the recipients were evaluated by ultrasonography 30 (ET) and 60 (ET, IVP) days after inovulation, for pregnancy and sex identification. For embryo sex identification the biopsies were submitted to PCR and agarose gel electrophoresis. In the PCR reaction 2 primers were used, one specific for Y chromosome and the other for a bovine autossomic gene. To compare pregnancy rates at 60 days between the groups and their respective controls a Chi-square(χ2) analysis was used. No differences were observed for pregnancy rates between groups, being ET-B = 206/380 (54.21%), ET-C = 128/229 (55.89%); IVP-B = 24/91 (26.37%) and IVP-C = 45/227 (19.82%). Of the confirmed pregnancies that had their biopsies (ET-B = 133 and IVP-B = 20) submitted to sex identification, 124 (93.23%) and 19 (95%) had the same sex in the PCR reaction and in the ultrasonography evaluation at 60 days. The results of the present study indicated that biopsy removal did not affect the viability of the in vivo and in vitro embryos. In addition, the methodology used for embryo sex identification is suitable to be used in embryo transfer commercial programs.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2010-03-30T14:20:06Z No. of bitstreams: 1 2009_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 533514 bytes, checksum: 9cda08d9e438cdb3a1719ae60d8ca5bb (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-18T04:34:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 533514 bytes, checksum: 9cda08d9e438cdb3a1719ae60d8ca5bb (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-18T04:34:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 533514 bytes, checksum: 9cda08d9e438cdb3a1719ae60d8ca5bb (MD5) Previous issue date: 2009 / Técnicas de preparação de sêmen são usualmente utilizadas na produção in vitro de embriões (PIV) bovinos visando melhorar a qualidade espermática após o descongelamento. Dentre estas técnicas, a centrifugação em gradiente de Percoll tem sido a mais utilizada. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de diferentes velocidades, tempo de centrifugação e volume de Percoll nas características espermáticas, na produção e sexo de embriões bovinos. Foram descongeladas amostras de sêmen de quatro touros, que foram submetidas a três diferentes procedimentos no gradiente de Percoll : T1 – 4 mL (volume final) de Percoll 45%:90%, centrifugados por 20 minutos a 700 g; T2 – 800 μL (volume final) de Percoll 45%:90% centrifugados por 20 minutos a 700 g e T3 – 800 μL (volume final) de Percoll 45%:90% centrifugados por por 5 minutos a 5000 g. A avaliação espermática da motilidade, morfologia, integridade de acrossoma, membrana e cromatina, foi realizada antes e após a passagem pelo Percoll. Para a PIV foram utilizados 1194 ovócitos maturados in vitro, sendo a taxa de clivagem avaliada em D2 (48h) e a taxa de blastocisto avaliada no dia 7 após fecundação (D7). Os blastocistos em D7 (n=360) foram congelados para determinação do sexo. Os dados do desenvolvimento embrionário e avaliação espermática foram analisados pela ANOVA considerando o efeito de touro, tratamento e interação touro x tratamento (P<0,05). Para analisar o sexo dos embriões utilizou-se o teste 2 com freqüência esperada de 50:50 (P<0,05). A comparação entre os tratamentos e touro também verificada pelo teste 2. Todos os tratamentos com o Percoll melhoraram significativamente a proporção de espermatozóides móveis. Não houve efeito do tratamento em nenhuma característica espermática avaliada (P>0,05), entretanto, observou-se efeito de touro. A taxa de clivagem e blastocito também não foi afetada pelos tratamentos com o Percoll. Entretanto, foi observado diferenças entre touros (P<0,05). A taxa de clivagem e blastocisto foi melhor para o touro 1 (86 ± 1,6a% e 47 ± 2,6c%) seguido do touro 2 (86 ± 2,1a% e 39 ± 6,6c%) e touro 3 (65 ± 5,9b% e 17 ± 4,1d%). O touro 4 apresentou baixa produção total de blastocisto (n=5), sendo eliminado da análise. A proporção macho:fêmea foi semelhante em todos os tratamentos para os touros 2 e 3. Apenas o touro 1 no T1 apresentou uma maior porcentagem de embriões machos (61%) em relação aos embriões do sexo feminino (39%). Quando apenas os tratamentos foram considerados, independentes dos touros, não foi verificado diferença na proporção macho:fêmea entre T1 (55:45 %), T2 (45:55 %) e T3 (44:56 %). Os resultados mostraram que a utilização de diferentes velocidades, tempo de centrifugação e volume de Percoll não influenciou a taxa de blastocisto e a relação macho:fêmea. Entretanto, para o touro 1 foi observado um desvio para produção de embriões machos quando se utilizou o T1. Esses resultados sugerem a possibilidade de utilizar um menor volume de Percoll por um período de tempo mais curto, diminuindo assim o custo e o tempo para a realização da fecundação in vitro. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Techniques for sperm selection are usually used for bovine in vitro embryo production (IVP) to improve semen quality after thawing. Among these techniques Percoll gradient has been the most used. The aim of this study was to evaluate the effect of different volumes of Percoll, time and force of centrifugation on sperm quality, embryo development and sex of IVP bovine embryos. Frozen-thawed semen from four bulls were submitted to three different Percoll procedures: T1 - 4 mL (final volume) of Percoll 45%:90%, centrifuged for 20 minutes at 700 g, T2 - 800 μL (final volume) of Percoll 45%:90% centrifuged for 20 minutes at 700 g and T3 - 800 μL (final volume) of Percoll 45%:90% centrifuged for 5 minutes at 5000 g. Semen was evaluated before and after Percoll treatment for sperm total motility, morphology, integrity of acrosome, membrane and chromatin. A total of 1194 oocytes were matured, fetilized and cultured in vitro, cleavage rate was valued on D2 and blastocyst rate on D7 after in vitro insemination. The blastocysts in D7 (n=360) were frozen for posterior sex determination. Data from embryo development and sperm characteristic were analyzed by ANOVA considering the effect of bull, treatment and interaction bull x treatment (P <0.05). The ratios were compared with the expected ratio 1:1 by  2 test (P<0.05). All Percoll methods significantly improved the proportion of motile spermatozoa. No effect of treatment was detected in any of the sperm characteristic (P>0.05), however bull-related differences were observed in all parameters tested. Similarly, cleavage and blastocyst rate were not affected by Percoll procedure (P>0.05). However, there was a difference among bulls (P<0.05). Sire 4 had very low embryos production (n=5), and was eliminated from the analysis. Higher rates of cleavage and blastocyst were observed for bull 1 (86 ± 1.6 a % and 47 ± 2.6 c%) and bull 2 (86 ± 2.1a % and 39 ± 6.6c %) showed than for bull 3 (65 ± 5.9b % and 17 ± 4.1d %). The proportion of male:female embryos was similar in all treatments for bulls 2 and 3. Only bull 1 in the T1 presented a greater percentage of male (61%) than female embryos (39%). When only treatments were considered, independent of bulls, no difference was found in proportion male:female (%) among T1 (55:45), T2 (45:55) and T3 (44:56). The results showed that the use of different speed, time of centrifuge and volume of Percoll gradient did not influence the rate of blastocyst and the male:female ratio. However, for bull 1 it was observed a higher production of male embryos when T1 was used. These results suggest the possibility of using a lower volume of Percoll for a shorter period of time, thus reducing the cost and time to perform the in vitro fertilization.