Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:58:12Z : No. of bitstreams: 1 moraes_jv_me_jabo.pdf: 648460 bytes, checksum: fcc419c6bd4f63b96ca5131974a54f17 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Poecilanthe parviflora é uma planta arbórea com potencial para uso em áreas degradadas e no paisagismo. Este trabalho teve por objetivo caracterizar biometricamente as sementes, descrever e ilustrar os aspectos morfológicos de sementes e plântulas, avaliar condições de temperatura para condução do teste de germinação e adaptar metodologia para condução dos testes de tetrazólio, condutividade elétrica e envelhecimento acelerado. O teste de germinação foi conduzido sob temperaturas constantes (10, 15, 20, 25, 30, 35 e 40ºC) e sob temperaturas alternadas (20-30, 25-35 e 20-35ºC), utilizando quatro repetições de 25 sementes por tratamento. Para o teste de de tetrazólio, as sementes foram condicionadas durante 42 horas a 25ºC e, após a retirada do tegumento, imersas em soluções de diferentes concentrações de tetrazólio (0,05, 0,075 e 0,1%) a 35ºC, por uma, duas e três horas, em duas repetições de 10 sementes. A condutividade elétrica foi avaliada em diferentes períodos de embebição (24, 48, 72, 96 e 120 horas) a 25ºC, utilizando quatro repetições de 10 sementes. As sementes foram envelhecidas durante 72 horas a 42ºC, utilizando-se quatro repetições de 20 sementes. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado e as médias foram comparadas pelo teste de Scott-Knott a 5% de probabilidade. A semente é exalbuminosa e a emergencia de plântula, hipógea. Concluiu-se que o teste de germinação pode ser conduzido a 25 e a 25-35ºC; a solução de tetrazólio foi eficiente a 0,1%, por duas horas; o teste da condutividade elétrica foi eficiente na diferenciação dos lotes nos períodos de 96 e 120 horas de embebição das sementes a 25ºC; o envelhecimento acelerado foi mais eficiente que o teste de germinação, na diferenciação dos lotes. / Poecilanthe parviflora is a tree with a good potential for revegetation and ornamental purposes. The objectives of this research were: evaluate biometrical characteristics of the seed and seedling, determine the best temperatures for the germination test, and determine the best conditions for the tetrazolium, electrical conductivity and accelerated aging tests. Four replicates of 25 seeds each and constant temperatures of 10, 15, 20, 25, 30, 35, and 40ºC and alternate temperatures of 20-30, 25-35, and 20-35ºC were used for germination test. For the tetrazolium test, the seeds were submitted to a pre-imbibition during 42 hours at 25ºC and then had their tegument removed before immersing two replicates of 10 seeds each in the tetrazolium solution. The tetrazolium solution concentrations were of 0.05, 0.075, and 0.1%. At a temperature of 35ºC, the seeds remained in the tetrazolium solution for 1, 2, and 3 hours. Electrical conductivity was carried out after the seeds (four replicates of 10 seeds each) had remained imbibiting water for 24, 48, 72, 96, and 120 hours at a temperature of 25ºC. The accelerated aging test was conducted submitting four replicates of 20 seeds each to conditions of 42ºC for a period of 72 hours. The seed is an exalbuminous and its germination of the hypogeal type. Either a constant temperature of 25ºC or alternate temperatures of 25-35ºC were found to be the ideal ones for the germination test. The best tetrazolium results were found when the seeds were immersed in a 0.1% tetrazolium solution for 2 hours. The best electrical conductivity results were obtained when the seeds remained imbibing water for either 96 or 120 hours. The accelerated aging test showed a efficiency in separating seed lots higher than that of the germination test.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:43:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:09:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 06646.pdf: 4877971 bytes, checksum: e62f747f9cf9d486a0b537873504da8e (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Orientador: Cibele Chalita Martins / Banca: João Nakagawa / Banca: Ana Dionisia da Luz Coelho Novembre / Banca: Nelson Moreira de Carvalho / Banca: José de Barros França Neto / Resumo: O teste de tetrazólio é um método rápido e eficaz para avaliar a viabilidade e o vigor de sementes. O presente trabalho teve por objetivo padronizar a metodologia do teste de tetrazólio para a avaliação da qualidade fisiológica de sementes de mamoneira (Ricinus communis L.). A pesquisa foi realizada em quatro etapas. Na primeira, testou-se o método de preparo das sementes (corte longitudinal mediano através do tegumento, endosperma e embrião; corte longitudinal diagonal na região distal da carúncula sem atingir o eixo embrionário; remoção do tegumento; remoção do tegumento com corte longitudinal mediano através do endosperma e embrião; e remoção do tegumento com corte longitudinal mediano, paralelo aos cotilédones, através do endosperma e embrião), avaliando-se a coloração. Na segunda, a concentração da solução de tetrazólio (1,0%, 0,5%, 0,2%, 0,1% e 0,075%) e o período de coloração (30 a 240 minutos) foram estudados e os resultados comparados com os obtidos nos testes de germinação. Na terceira, testaram-se os métodos de pré-condicionamento das sementes (entre papel umedecido, sementes com tegumento, por 6, 8, 10, 12, 14, 16 e 18 horas, a 30ºC, 35ºC e 40ºC; entre papel umedecido, sementes sem tegumento, e imersão em água das sementes com tegumento, ambos por 1, 2, 3, 4, 5 e 6 horas, a 25ºC, 30ºC, 35ºC e 40ºC), sendo os resultados avaliados pela uniformidade na coloração e comparados aos obtidos no teste de germinação. Na quarta, avaliou-se a classificação dos lotes de sementes quanto à viabilidade e ao vigor pelo teste de tetrazólio, sendo os resultados comparados aos obtidos nos testes de germinação em areia, em papel, primeira contagem da germinação em papel, emergência de plântulas em campo, índice de velocidade de emergência, classificação do vigor de plântulas, ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The tetrazolium test is a quick and accurate method for estimating seed viability and vigor. This research had the objective of standardizing the tetrazolium test methodology for the evaluation of physiological quality of castor bean seeds (Ricinus communis L.). The research was carried out in four parts. In the first one, seed preparation methods (longitudinal cut through the middle of the seed coat, endosperm and embryo; longitudinal and diagonal cut without reaching the embryo; coat removal; coat removal with longitudinal cut through the middle of the endosperm and embryo; and coat removal with longitudinal cut parallel to cotyledons through the middle of the endosperm and embryo) were evaluated by staining evaluations. In the second part tetrazolium solution concentrations (1.0%, 0.5%, 0.2%, 0.1% and 0.075%) and staining periods (30 to 240 minutes) were tested. The results were compared to the ones from the germination test. In the third part, seed preconditioning methods (between moist paper towel, seeds with coat, for 6, 8, 10, 12, 14, 16 and 18 hours, at 30ºC, 35ºC and 40ºC; between moist paper towel, seeds without coat, and seeds with coat immersed in water, both for 1, 2, 3, 4, 5 and 6 hours, at 25ºC, 30ºC, 35ºC and 40ºC) were evaluated and the results were evaluated by staining uniformity and compared with germination test values. In the fourth part, seed lot classification for viability and vigor were evaluated by the tetrazolium test and the results were compared to ones from the germination test in sand, in paper, first count of the germination test in paper, seedling emergence in the field, emergence speed index, seedling vigor classification, seedling length and dry matter and accelerated aging tests. All tests were conducted at the same time. The statistical design was completely randomized, and the means comparisons were accomplished...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:43:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:09:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 06646.pdf: 4877971 bytes, checksum: e62f747f9cf9d486a0b537873504da8e (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-12-01T13:12:32Z No. of bitstreams: 2 Tese - Aurélio Rubio Neto - 2013.pdf: 1496555 bytes, checksum: 804d41c40ee21eadbcf0427c50c1c358 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-12-04T14:20:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Aurélio Rubio Neto - 2013.pdf: 1496555 bytes, checksum: 804d41c40ee21eadbcf0427c50c1c358 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-04T14:20:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Aurélio Rubio Neto - 2013.pdf: 1496555 bytes, checksum: 804d41c40ee21eadbcf0427c50c1c358 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-06-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this study was to evaluate the physiological quality of embryos of babassu (Orbignya phalerata Mart.) and macaw palm [Acrocomia aculeata (Jacq.) Lood. Ex Mart.] according to the drying speed in order to optimize the already existing drying process as well as to propose a more efficient method for the in vitro establishment of macaw palm and babassu. It was observed that for both species under study, the temperature of 37±2°C promoted loss of water less than 57±2°C. However, it was more efficient because it did not inhibit the embryo during this process, ensuring high germination rates, even in seeds with 9% of water content for babassu and 19% for macaw palm. The adoption of the tetrazolium test, initially proposed for macaw palm, which uses salt at 0.5% and imbibition for 4 hours, allowed to distinguish different classes of vigor also in the babassu. Drying at 37°C favored the extraction of intact seeds and consequently the removal of embryo for in vitro culture of macaw palm. There was no difference in the in vitro germination of embryos extracted from fruit with different colors of the epicarp, which was approached as different maturity classes of macaw palm. The in vitro germination of embryos was enhanced with the addition of 30-40 g L-1sucrose in the culture medium. Thus, it is found that drying the fruit of babassu and macaw palm at 37°C ensures effectiveness in the process, since it allows better extraction of seeds or embryos which enable to achieve high in vitro germination rate within 60 days, making the time for production of seedlings much shorter. / Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade fisiológica de embriões de macaúba [Acrocomia aculeata (Jacq.) Lood. Ex Mart.] e babaçu (Orbignya phalerata Mart.) em função da velocidade de secagem, a fim de otimizar o processo de secagem já existente, bem como, propor uma metodologia mais eficiente para o estabelecimento in vitro de macaúba e babaçu. Verificou-se que para as duas espécies em estudo, a temperatura de 37±2°C promoveu perda de água inferior a de 57±2°C. Entretanto, foi mais eficiente pelo fato de não inviabilizar os embriões durante esse processo, garantindo elevadas taxas de germinação, mesmo em sementes com teor de água de 9% para o babaçu e de 19% para a macaúba. A adoção do teste de tetrazólio proposto inicialmente para macaúba, que utiliza o sal a 0,5% e embebição por 4 horas, permitiu a distinção de diferentes classes de vigor também no babaçu. A secagem a 37°C favoreceu a extração de sementes intactas e, consequentemente, remoção do embrião, para cultura in vitro de macaúba. Não se verificou diferença na germinação in vitro de embriões extraídos de frutos com diferentes cores do epicarpo, que foi abordado como diferentes classes de maturação de macaúba. A germinação in vitro dos embriões foi favorecida com o acréscimo de sacarose no meio de cultivo de 30 a 40 g L-1. Dessa forma, verifica-se que a secagem dos frutos de macaúba e babaçu a 37°C garante efetividade no processo, visto que, permite melhor extração das sementes e embriões, com isso, são alcançadas elevadas taxas de germinação in vitro em até 60 dias, encurtando muito o tempo de produção da muda.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:22:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcia Green.pdf: 861491 bytes, checksum: 9c12861837fc8cbcf94e44e41fe0ac3f (MD5) Previous issue date: 2012-07-16 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / This trial addresses two chapters: 1) heat-treatment (HT) and germination of oil palm seeds and 2) tetrazolium test (TZ) in embryos of oil palm seeds. The first chapter aimed to evaluate the best HT period for the seeds germination of six oil palm varieties produced by Embrapa. The water content of all seeds was adjusted to 18 ± 0.5%, dry basis, and these remained in the heat-treatment at a temperature of 39 ± 1 °C and relative humidity around 80% for 40, 50, 60 and 80 days. The statistical design was complete randomized block in a 6 x 4 factorial design, with four replications of 500 seeds. The results were submitted to analysis of variance, mean separation test and regression. It was observed significant effect of cultivar, HT period and the interaction between genotype x HT period. The minimum HT period for maximum germination ranged from 45 days for BRS C2328 (69.95%) to 80 days for BRS C2528 (84.28%). For BRS C7201 was not observed significant effect of HT period for seed germination, estimated as 82.15%. It is possible to reduce the HT period to reach the maximum germination for seeds of the cultivars evaluated. In the second chapter four experiments were established in order to standardize the TZ for oil palm seeds: 1 - identify vigor and viability in embryos of seeds, to evaluating temperatures of imbibitions on water (30 and 40° C), tetrazolium (30, 35 and 40° C) and concentrations of salt (0.075, 0.1 and 0.5%); 2 - to evaluate methods of preparation of the seed (kernels and embryos) and substrates for imbibitions (germitest paper and plastic cups); 3 - evaluate different temperatures combinations of embryos imbibitions in water and tetrazolium (30, 35 and 40° C) and different concentrations of salt (0.075, 0.1 and 0.5%) and 4 - to correlate viability by TZ with germination. In all trials the time of embryos imbibition in water was 16 hours and 4 hours for tetrazolium. The results showed that the TZ can be used to evaluate the vigor and viability of oil palm seeds, provided that the embryos are removed, packed in moistened germitest paper, at 30 to 35° C as temperatures of imbibition in water, and 40° C for tetrazolium at a concentration of 0.075% / Este trabalho abordou dois capítulos: 1) tratamento térmico (TT) e germinação de sementes de dendezeiro e 2) teste de tetrazólio (TZ) em embriões de sementes de dendezeiro. O primeiro capítulo teve como objetivo avaliar o efeito do tempo de TT na germinação de sementes de cultivares de dendezeiro produzidas pela Embrapa. O teor de água das sementes foi ajustado para 18% ± 0,5, base seca, e estas permaneceram no termogerminador à temperatura de 39 °C ± 1 e umidade relativa do ar em torno de 80%, pelos tempos de 40, 50, 60 e 80 dias. O delineamento foi em BC, fatorial 6 x 4, com quatro repetições e parcelas de 500 sementes. Os resultados foram submetidos a análises de variância, teste de médias e regressão. Verificou-se efeito significativo de cultivares, tempo de TT e da interação entre cultivares x tempo de TT. O tempo mínimo de TT térmico para germinação máxima variou de 45 dias para cultivar BRS C2328 (69,95%) a 80 dias para cultivar BRS C2528 (84,28%). Para BRS C7201 não foi verificado efeito significativo do tempo de TT na germinação das sementes, estimada em 82,15%. É possível reduzir o tempo de TT e obter germinação máxima das sementes das cultivares avaliadas. No segundo capítulo foram instalados quatro experimentos visando padronizar o TZ para sementes de dendezeiro: 1- identificar classes de vigor e viabilidade em embriões de sementes, avaliando-se temperaturas de embebição em água (30 e 40 ºC) e em tetrazólio (30, 35 e 40 ºC) e concentrações do sal (0,075, 0,1 e 0,5%); 2- avaliar formas de preparo das sementes (amêndoas e embriões) e substratos para embebição (papel germitest e copos plásticos); 3- avaliar diferentes combinações de temperaturas de embebição dos embriões em água e em tetrazólio (30, 35 e 40 ºC) e diferentes concentrações do sal (0,075, 0,1 e 0,5%) e 4- correlacionar viabilidade pelo TZ com germinação. Em todos os experimentos o tempo de embebição dos embriões em água foi de 16 horas e em tetrazólio de 4 horas. Os resultados mostraram que o TZ pode ser utilizado para avaliar o vigor e a viabilidade em sementes de dendezeiro, desde que os embriões sejam extraídos, acondicionados em papel germitest umedecido, às temperaturas de embebição de 30 ou 35 ºC em água, e à 40 ºC em tetrazólio e à concentração de 0,075%

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:56:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao Silverio Takao Hosomi.pdf: 1561743 bytes, checksum: 41c9ea40586f5eab2fe22d41fbcefe45 (MD5) Previous issue date: 2009-06-23 / Seeds with extremely reduced size, obligatory association with micorrhyzal fungi for natural germination and specialized pollination procedures are similar characteristics among orchids, a morphologic heterogeneous group that constitutes the biggest family of plants. The natural environment destruction by men action has pushed a great number of species near to extinction, which makes the stablishment of seed banks an interesting preservation strategy. Therefore, studies for understanding seed behavior and viability loss during storage and the use of quick tests for the evaluation of seed viability had become important tools. The popularization of info equipment and software would permit the use of image analysis through digitalization of germination and tetrazolium tests, an interesting alternative that will allows small producers to contribute to orchid species conservation. In the first part of this work, an analysis of sucrose pre conditioned Cattleya seeds submitted to different tetrazolium concentration were done, in distinct periods of exposure. In the second part, ten batches of seed were stored at low temperatures, and their viability were evaluated by germination and tetrazolium tests. / Sementes extremamente pequenas, associação obrigatória com micorrizas para germinação natural e processos de polinização especializados são algumas características comuns entre as orquídeas, grupo morfologicamente heterogêneo que constitui a maior família de plantas entre as Angiospermas. A degradação de ambientes naturais pela ação humana tem levado um grande número de espécies deste grupo à extinção; o que torna a formação de um banco de sementes uma estratégia de preservação interessante. Desta forma, estudos para entender o comportamento das sementes quanto à perda da viabilidade durante o armazenamento e o uso de testes rápidos para a avaliação da viabilidade das mesmas acabam tornando-se ferramentas importantes. A popularização dos equipamentos de informática e softwares possibilita o uso de análises de imagens através da digitalização dos testes de germinação e tetrazólio, uma alternativa interessante que permite que pequenos produtores auxiliem no processo de conservação das espécies de orquídeas. Na primeira parte deste trabalho realizou-se a análise das sementes de Cattleya pré-condicionadas em solução de sacarose e posteriormente submetidas a concentrações distintas de sais tetrazólio, em diferentes tempos de exposição, para avaliar a qualidade fisiológica das sementes. Na segunda parte, dez lotes de sementes foram armazenados em baixa temperatura e suas viabilidades foram avaliadas pelos testes de germinação e tetrazólio. A análise da viabilidade das sementes submetidas ao testes de tetrazólio e germinação através da digitalização de imagens mostrou-se eficiente tanto pela praticidade como pela possibilidade de controle das contagens. O pré-condicionamento em solução de sacarose 10% apresentou melhores resultados, facilitando a identificação das sementes viáveis e soluções de tetrazólio com concentrações acima de 0,25% e períodos de exposição ao tetrazólio superiores à 6 horas seriam as mais recomendadas. Os resultados demonstraram não haver perda na viabilidade das sementes armazenadas e em cinco lotes houve diminuição do IVG e foi alta a correlação entre os testes de tetrazólio com pré-condicionamento em solução de sacarose e a germinação.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:51:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao Silverio Takao Hosomi.pdf: 1561743 bytes, checksum: 41c9ea40586f5eab2fe22d41fbcefe45 (MD5) Previous issue date: 2009-06-23 / Seeds with extremely reduced size, obligatory association with micorrhyzal fungi for natural germination and specialized pollination procedures are similar characteristics among orchids, a morphologic heterogeneous group that constitutes the biggest family of plants. The natural environment destruction by men action has pushed a great number of species near to extinction, which makes the stablishment of seed banks an interesting preservation strategy. Therefore, studies for understanding seed behavior and viability loss during storage and the use of quick tests for the evaluation of seed viability had become important tools. The popularization of info equipment and software would permit the use of image analysis through digitalization of germination and tetrazolium tests, an interesting alternative that will allows small producers to contribute to orchid species conservation. In the first part of this work, an analysis of sucrose pre conditioned Cattleya seeds submitted to different tetrazolium concentration were done, in distinct periods of exposure. In the second part, ten batches of seed were stored at low temperatures, and their viability were evaluated by germination and tetrazolium tests. / Sementes extremamente pequenas, associação obrigatória com micorrizas para germinação natural e processos de polinização especializados são algumas características comuns entre as orquídeas, grupo morfologicamente heterogêneo que constitui a maior família de plantas entre as Angiospermas. A degradação de ambientes naturais pela ação humana tem levado um grande número de espécies deste grupo à extinção; o que torna a formação de um banco de sementes uma estratégia de preservação interessante. Desta forma, estudos para entender o comportamento das sementes quanto à perda da viabilidade durante o armazenamento e o uso de testes rápidos para a avaliação da viabilidade das mesmas acabam tornando-se ferramentas importantes. A popularização dos equipamentos de informática e softwares possibilita o uso de análises de imagens através da digitalização dos testes de germinação e tetrazólio, uma alternativa interessante que permite que pequenos produtores auxiliem no processo de conservação das espécies de orquídeas. Na primeira parte deste trabalho realizou-se a análise das sementes de Cattleya pré-condicionadas em solução de sacarose e posteriormente submetidas a concentrações distintas de sais tetrazólio, em diferentes tempos de exposição, para avaliar a qualidade fisiológica das sementes. Na segunda parte, dez lotes de sementes foram armazenados em baixa temperatura e suas viabilidades foram avaliadas pelos testes de germinação e tetrazólio. A análise da viabilidade das sementes submetidas ao testes de tetrazólio e germinação através da digitalização de imagens mostrou-se eficiente tanto pela praticidade como pela possibilidade de controle das contagens. O pré-condicionamento em solução de sacarose 10% apresentou melhores resultados, facilitando a identificação das sementes viáveis e soluções de tetrazólio com concentrações acima de 0,25% e períodos de exposição ao tetrazólio superiores à 6 horas seriam as mais recomendadas. Os resultados demonstraram não haver perda na viabilidade das sementes armazenadas e em cinco lotes houve diminuição do IVG e foi alta a correlação entre os testes de tetrazólio com pré-condicionamento em solução de sacarose e a germinação.

Os ensaios microbiológicos são utilizados para avaliar a atividade antimicrobiana desde a descoberta do uso dos antibióticos. Apesar dos ensaios microbiológicos serem amplamente empregados para determinação da potência de antibióticos em formas farmacêuticas, uma vez que fornecem a medida da atividade biológica, apresentam limitações quanto a baixa reprodutibilidade e tempo de análise. O objetivo deste trabalho foi desenvolver, otimizar e validar ensaio colorimétrico rápido em microplaca para determinar a potência da neomicina e bacitracina em produtos farmacêuticos. Metodologias de análise fatorial e análise de superfície de resposta foram utilizadas no desenvolvimento e otimização da escolha do microrganismo, da composição do meio de cultura, da proporção de inóculo, e das concentrações de cloreto de trifeniltetrazólio e dos antibióticos. Os métodos otimizados foram validados pela avaliação da linearidade, precisão, exatidão e robustez. Análise estatística mostrou equivalência entre o método de difusão em ágar e o método colorimétrico rápido em microplaca para ambos antibióticos. Além disso, o ensaio em microplaca apresentou vantagens em relação à reprodutibilidade, sensibilidade, tempo de incubação e quantidades necessárias de meio de cultura e soluções para ambos os antibióticos. / Microbiological assays have been used to evaluate antimicrobial activity since the discovery of the first antibiotics. Despite of microbiological assays have been widely employed to determine antibiotic potency of pharmaceutical dosage forms, once they provide a measure of biological activity, they have limitations regarding the low reproducibility and increased time of analysis. The aim of this work is to develop, optimize and validate a rapid colorimetric microplate bioassay for the potency of neomycin and bacitracin in pharmaceutical drug products. Factorial and response surface methodologies were used in the development and optimization of the choice of microorganism, culture medium composition, amount of inoculum, triphenyltetrazolium chloride (TTC) concentration and antibiotic concentration. The optimized bioassays methods were validated by the assessment of linearity, precision, accuracy, and robustness. Statistical analysis showed equivalency between agar diffusion microbiological assays and rapid colorimetric microplate bioassays. In addition, microplate bioassay had advantages concerning the reproducibility, sensitivity of response, time of incubation, and amount of culture medium and solutions required.

A palmeira real australiana (Archontophoenix cunninghamiana H. Wendl. & Drude) é uma espécie nativa das florestas tropicais da Austrália que se adaptou ao cultivo no Brasil e é utilizada para o paisagismo e também para a extração do palmito. A determinação da maturidade fisiológica das sementes e da época ideal para a colheita é essencial para preservar a qualidade das sementes e para a formação das mudas. No entanto, existe restrição de métodos disponíveis para avaliar a qualidade das sementes da palmeira real australiana e, além disso, para o teste de germinação são necessários, pelo menos, 70 dias para obter os resultados. Dessa forma, o teste de tetrazólio é uma alternativa para estimar a viabilidade das sementes, em função da rapidez de obtenção dos resultados. Assim, um dos objetivos dessa pesquisa foi estudar o preparo das sementes da palmeira real australiana para o teste de tetrazólio; para tanto, foram avaliadas sementes de diferentes plantas matrizes quanto à hidratação das sementes e à coloração dos tecidos, utilizando as soluções 0,075%, 0,1% e 0,2% de tetrazólio, durante 60, 120, 240 e 360 minutos no escuro, a 40°C. O estudo relacionado à formação das sementes incluiu avaliações dos frutos e das sementes. Assim, os frutos foram avaliados quanto à cor, utilizando a colorimetria digital e a carta de Munsell para tecidos vegetais, e às características morfométricas, tais como o diâmetro, o comprimento e a massa. Para a determinação do parâmetro fisiológico das sementes foram avaliados a germinação (total, o índice de velocidade de germinação e o tempo médio de germinação), a viabilidade (teste de tetrazólio) e o teor de água das sementes. Além disso, foi determinada também a composição química das sementes nos diferentes estádios de maturação em função da peroxidação de lipídeos e do peróxido de hidrogênio. Para complementar o estudo da formação das sementes foi avaliada também a desidratação das mesmas, no ponto de maturidade fisiológica, para determinar se são recalcitrantes, ou seja, avaliar qual é o limite da redução de água dos tecidos que interfere negativamente na viabilidade. Essas sementes, com diferentes teores de água, foram também radiografadas para verificação dos tecidos internos das sementes. A avaliação da formação das sementes foi complementada com o estudo do armazenamento; para isso, as sementes em dois estádios de maturação (76 e 85 dias após a antese) foram colocadas em sacos de polietileno, com 0,20mm de espessura, e, em seguida, mantidas em ambiente não controlado e em ambiente controlado, com temperatura de 10°C e umidade relativa do ar de 80%, por 5 meses; a cada 30 dias foram retiradas amostras para as seguintes análises: teor de água, teste de germinação (total, índice de velocidade de germinação e tempo médio de germinação), teste de tetrazólio e imagens por meio dos raios X. Há a possibilidade de utilizar o teste de tetrazólio para estimar a viabilidade das sementes de palmeira real australiana. É recomendado o seccionamento longitudinal a partir do opérculo e a coloração do embrião em soluções 0,1% por 360 minutos, no escuro e a 40°C e 0,2% por 120 minutos ou por 240 minutos. A maturidade fisiológica das sementes é atingida quando têm 41% de água, aos 76 dias após a antese, 2,49g de massa seca e germinação máxima; nesse momento os frutos têm coloração caracterizada como 10.R 6/8 vermelha amarela-avermelhada. Com relação à quantidade de água para o armazenamento, a secagem até 25% de água não tem efeitos negativos imediatos na qualidade das sementes da palmeira real australiana; contudo a partir de 20% de água há redução da qualidade das sementes e com 10% de água não há germinação. As condições adequadas para o armazenamento das sementes da palmeira real australiana, que têm inicialmente 48% de água, são a embalagem de polietileno (0,20mm de espessura) e o ambiente com temperatura de 10°C e 80% de umidade relativa do ar; essas condições são favoráveis para manter a qualidade das sementes por até 150 dias. / The Archontophoenix cunninghamiana H. Wendl. & Drude is a native specie from tropical forests in Australia, is used in brazilian environment to landscaping and the heart palm extraction. The knowledge about physiological maturity and harvest time are essential to preserve the quality of seeds and seedling production. However, there are few methods availably to evaluate these seeds quality, once the germination test needs, at least 70 days, for results. Thus, the tetrazolium test is one option to estimate the seeds viability, as it allows faster results. Then, the aim of this research was adapt the tetrazolium test to evaluate the quality of royal palm seeds, for this it were evaluated seeds from different plants, and the moisture content of the embryo and the color of tissues, using the tetrazolium solutions 0.075%, 0.1% and 0.2%, during 1, 2, 4 e 6h in the dark at 40 °C. Additionally, in this research were determinate the physical and physiological characteristics of the fruits and the seeds to characterize the seed maturity, then were evaluated the color, using digital colorimetry, and the morphometric characteristics, diameter, length and weight. To determine the physiological parameters were evaluated the germination, germination speed and average germination time, the viability (tetrazolium test) and the seed moisture content. The evaluation of seeds formation was completed with storage study once that seeds are classified as recalcitrant. For this, the seeds from two stages of maturation (color of pericarp red and dark red) were packed in polyethylene bags, with 0.20mm thickness and, then, were kept in uncontrolled environment and in controlled temperature (10 °C and 80% RH), per 5 months; each 30 days the samples were removed for analyses: moisture content, germination test, germination speed, average germination time, tetrazolium test and X-ray images. In the storage study also was evaluated dehydration of those seeds to determine the better moisture content for storage those seeds, without seed viability interference. There is the possibility of using tetrazolium test to assess the viability of Australian royal palm seeds. It is recommended to longitudinal sectioning from the operculum and staining of the embryo in 0.1% solutions for 360 minutes in the dark and at 40 ° C and 0.2% for 120 minutes or for 240 minutes in the dark and at 40 ° C . The physiological maturity of seeds is achieved when they have 41% water, 76 days after anthesis, 2,49g of dry mass and maximum germination; at that time the fruits were characterized as coloring 10.R 6/8 yellow-red red. With respect to the amount of water for storage, drying to 25% of water has no immediate negative effects on the quality of the seeds of Australian royal palm; however from 20% of water is reduced seed quality and 10% water no germination. Suitable conditions for the storage of seeds of the Australian royal palm, which initially have 48% water, are the polyethylene bags (0.20mm thick) and the ambient temperature of 10° C and 80% relative humidity; these are favorable conditions to maintain seed quality for up to 150 days.