Made available in DSpace on 2015-03-03T14:00:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IsabelleRB.pdf: 1412800 bytes, checksum: bac7edd4cac638b6a9cf1189b964a174 (MD5) Previous issue date: 2008-08-12 / Congenital Toxoplasmosis results in severe systemic disease. If mother is infected for the first time during gestation, she can infect the fetus causing substantial damage. However, relatively little is known about the seroprevalence and epidemiological and economic factors of Toxoplasmosis infection in pregnancy in the most state in northeastern Brazil and knowledge about this can be essential in determining effective and acceptable prevention strategies. Our aim was to determine the prevalence of Toxoplasmosis in pregnant woman consulted by reference Maternity Escola Janu?rio Cicco in Natal, a city in Northeastern Brazil, which belongs to the public health system, correlating to the risk factors involved in the infection and to accomplish active Search in the Hospital of Pediatrics Prof? Heriberto Bezerra of the damages caused by the Toxoplasmic infection in children up to 12 years of age. The study was conducted from March to December 2007 and sera obtained from 190 pregnant women were tested for IgM and IgG antibodies avidity to Toxoplasma by Microparticle enzyme immunoassay (Abbott AxSYM system - Abbott Laboratories, Chicago, IL, USA). Data were examined with univariate analysis. Chi-squared (x2) and Odds ratio was calculated (IC 95% p 0,05). Of these women, 126 (66,3%) had only IgG antibodies high-avidity against T. gondii; 01 (0,52%) had a IgM and IgG high-avidity antibodies against T. gondii and 63 (33,1%) have neither IgM nor IgG against T. gondii. Our studies shown that the direct contact with cats or dogs was highly associated with the Toxoplasma gondii infection (OR, 2.72, p<0.001, 95% CI 1.46 5.02). The years school (p<0,001), socioeconomic status and knowledge about the disease (both p value 0.05) also were associated with Toxoplasmosis. The pattern of risk factors for infection presents regional variations, however our data corroborate others studies in Brazil. In children up to 12 years, one case of Congenital Toxoplasmosis was just registered in seven years (2000 - 2006). There were several suggestive cases, with signs and characteristic symptoms, but that the infection was not confirmed due to lack in the researches through laboratorial and images exams that addressed that it zoonosis / A Toxoplasmose cong?nita resulta em uma doen?a sist?mica severa. Devido ? m?e se infectar no primeiro trimestre da gesta??o, ela pode infectar o feto causando s?rios danos. Entretanto, h? pouca informa??o a respeito de soropreval?ncias e fatores econ?micos e epidemiol?gicos envolvidos na infec??o da gestante na maioria dos estados do Nordeste do Brasil e o conhecimento sobre isto pode ser essencial na determina??o e implementa??o de estrat?gias de preven??o. O objetivo desse trabalho foi determinar a preval?ncia da Toxoplasmose em gestantes atendidas na Maternidade Escola Janu?rio Cicco, em Natal, uma cidade do Nordeste do Brasil, correlacionando aos fatores de risco envolvidos na infec??o e realizar Busca ativa no Hospital de Pediatria Prof? Heriberto Bezerra dos agravos causados pela infec??o cong?nita e/ou p?s-natal por Toxoplasma gondii em crian?as at? 12 anos de idade. Esse estudo foi realizado de Mar?o a Dezembro de 2007 e o soro obtido das 190 gestantes foram testados para IgM e IgG antitoxoplasma pela t?cnica de Ensaio Imunoenzim?tico de Micropart?culas (Abbott AxSYM system - Abbott Laboratories, Chicago, IL, USA). Foi aplicada uma an?lise univariada no qual Qui-quadrado e Odds Ratio foram calculados (IC 95%, p 0,05). Das 190 mulheres, 126 (66,3%) tem somente IgG anti-Toxoplasma de alta avidez; 01(0,52%) tem IgM e IgG anti-Toxoplasma e 63 (33,1%) n?o tem nem IgM nem IgG de alta avidez anti-Toxoplasma. Esse estudo mostra que o contato direto com gatos ou c?es foi fortemente associado com a infec??o por Toxoplasma gondii (OR, 2.72, p<0.001, 95% CI 1.46 ? 5.02). Os anos de escolaridade (p<0,001), o status socioecon?mico e o conhecimento sobre a doen?a (ambos com p 0.05) tamb?m foram associados com a infec??o Toxopl?smica. O padr?o de fatores de risco para infec??o apresenta varia??es regionais, entretanto nossos dados corroboram outros estudos no Brasil. Em crian?as at? 12 anos, apenas um caso de Toxoplasmose cong?nita foi registrado em sete anos (2000 ? 2006). Houve diversos casos sugestivos, com sinais e sintomas caracter?sticos, mas que n?o foi confirmada a infec??o Toxopl?smica devido a car?ncia de aprofundamento nas pesquisas atrav?s de exames laboratoriais ou de imagem que direcionasse a essa zoonose

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-13T20:11:14Z No. of bitstreams: 1 ThatianyAraujoDeMedeiros_DISSERT.pdf: 1620239 bytes, checksum: e75f59b47b08a1483c79c95ce336be37 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-02-16T00:30:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ThatianyAraujoDeMedeiros_DISSERT.pdf: 1620239 bytes, checksum: e75f59b47b08a1483c79c95ce336be37 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-16T00:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThatianyAraujoDeMedeiros_DISSERT.pdf: 1620239 bytes, checksum: e75f59b47b08a1483c79c95ce336be37 (MD5) Previous issue date: 2016-04-08 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A toxoplasmose tem como agente etiol?gico o protozo?rio Toxoplasma gondii e geralmente causa infec??o assintom?tica em indiv?duos imunocompetentes. Entretanto, na transmiss?o cong?nita pode gerar quadros graves e morte, representando um s?rio problema de sa?de p?blica. Em pacientes gr?vidas reativas para IgM anti-T. gondii recomenda-se diagn?stico molecular do l?quido amni?tico utilizando a metodologia de PCR qualitativa com o iniciador B1. Por?m, seu diagn?stico utilizando esta metodologia pode ser ineficiente principalmente na detec??o de cepas h?bridas encontradas na Am?rica Latina. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a efici?ncia dos m?todos sorol?gicos e da t?cnica de Nested-PCR utilizando o iniciador GRA7 na detec??o do Toxoplasma gondii na transmiss?o cong?nita. O estudo foi realizado em 71 gestantes, atendidas no Centro de Sa?de Anita Garibaldi (CSAG), Maca?ba-RN no per?odo de 2011 a 2015, com idades gestacionais vari?veis e faixa et?ria entre 15-49 anos, submetidas a procedimentos de rotina durante o exame pr?-natal tratando-se, portanto, de um estudo de delineamento observacional transversal de acur?cia. Foram coletadas amostras de sangue perif?rico e l?quido amni?tico. Inicialmente foi realizado o diagn?stico sorol?gico para toxoplasmose com o aux?lio das t?cnicas de ELISA e Imunofluoresc?ncia indireta (IFI) para a detec??o de IgG e IgM anti-T. gondii. Posteriormente, as gestantes que apresentaram testes sorol?gicos reativos para IgM foram selecionadas para a realiza??o da t?cnica de Nested-PCR utilizando os iniciadores RE e GRA7. A sororeatividade detectada pela presen?a de IgG e IgM anti-.T gondii pelas t?cnicas de ELISA e IFI foram, respectivamente, 91,55% e 14,08%, 76,06% e 5,63%. A positividade total para IgM quando associado as t?cnicas de ELISA e IFI foi de 15,49% (11/71). Entretanto, a an?lise da positividade com a utiliza??o da Nested-PCR foi de 0% (0/11), 9,09% (1/11) e 54,5% (6/11) utilizando os iniciadores RE, B1 e GRA7 respectivamente. Os resultados indicam que o iniciador GRA7 proposto ? mais eficiente na detec??o do T. gondii no l?quido amni?tico que o iniciador B1 e RE, quando utilizada a t?cnica de Nested-PCR. / Toxoplasmosis is the etiologic agent protozoan Toxoplasma gondii and usually cause asymptomatic infection in immunocompetent individuals. However, congenital transmission can lead to serious and death, representing a serious public health problem. In pregnant patients reactive to IgM anti-T. gondii is recommended molecular diagnosis using amniotic fluid qualitative PCR method with the primer B1. However, the diagnosis using this approach can be inefficient mainly for detection of hybrid strains found in Latin America. In this context, the objective of this study was to evaluate the effectiveness of serological methods and nested PCR technique using the primer GRA7 the detection of Toxoplasma gondii congenital transmission. The study was performed in 71 pregnant women seen at the Anita Garibaldi Health Center (CSAG), Maca?ba-RN in the period 2011 to 2015, aged gestational variables and age group 15-49 years, subjected to routine procedures during the examination prenatal the case, therefore, a study of cross-sectional observational design accuracy. Samples of peripheral blood and amniotic fluid was collected. Initially it performed the serological diagnosis of toxoplasmosis with the help of ELISA and indirect immunofluorescence (IIF) for the detection of IgG and IgM anti-T. gondii. Subsequently, patients showed reactive serologic tests for IgM were selected to perform the nested PCR technique using the RE and GRA7 initiators. The seroreactivity detected by the presence of anti-IgG and IgM. T. gondii by the ELISA and IFA techniques were respectively 91.55% and 14.08%, 76.06% and 5.63%. Total positivity for IgM when combined the techniques of ELISA and IFA was 15.49% (11/71). However, analysis of positive using the nested PCR was 0% (0/11), 9,09% (1/11) and 54.5% (6/11) using the primers RE, B1 and GRA7 respectively. The results indicate that the proposed GRA7 initiator is more efficient in the detection of T. gondii in amniotic fluid B1 and RE primer, when using the nested PCR technique.

Toxoplasmosis is a zoonosis caused by the intracellular parasite Toxoplasma gondii, which infects different hosts including up to a third of the world s human population and may cause severe damage to the fetus in congenital infection. Maternal breastfeeding is the most natural and safe way to feed a newborn, with the ability to provide good development of the infant s immune system. All immunoglobulin isotypes are present in human breast milk, mainly in the colostrum, with systemic or local source. There are several pieces of evidence showing that breastfeeding protects the infant against a wide range of diseases, but few efforts have been directed to identifying the protecting action of human milk against parasitic infections, including T. gondii. Due to the importance of breastfeeding and to the high prevalence of toxoplasmosis, this study was conducted in order to detect and evaluate the presence of specific T. gondii IgG, IgM and IgA antibodies in paired serum and colostrum samples. The study was carried out on 289 puerperal women from Clinical Hospital of Universidade Federal de Uberlândia (mean age 24.8 years, range 14 43 years). Their serum and colostrum samples were analyzed by ELISA and immunoblotting assays against soluble antigens from T. gondii. ELISA tests showed reactivity for anti-T. gondii IgG, IgM and IgA, respectively, in 136 (47.0%), 20 (6.9%), 8 (2.8%) serum samples and in 133 (46.0%), 23 (7.9%), 8 (2.8%) colostrum samples. Also, it was observed significant correlation rates between anti-T. gondii antibodies levels in serum and colostrum samples. Immunoblotting assays showed that it was possible to detect IgG, IgM and IgA antibodies specific to different antigens of T. gondii in serum as well as colostrum. IgG present in serum and colostrum recognized more antigenic fractions compared to the IgM and IgA, and seric IgG always detected more antigenic fractions than IgG in colostrum from the same patient. In contrast, specific IgA antibodies present in colostrum recognized a higher number of antigens than IgA present in serum from the same patient. Furthermore we have shown that 60 kDa antigenic fraction may be a good marker to diagnose acute toxoplasmosis infection, because it was recognizes frequently by low avidity IgG antibodies in both samples; and 39 kDa antigenic fraction may be a marker to diagnose congenital toxoplasmosis. Our results showed a significant association between T. gondii-specific antibodies present in serum and in milk samples from the patients, demonstrating that it is possible to diagnose toxoplasmosis using human milk, a noninvasive way to obtain biological samples. / Toxoplasmose é uma zoonose causada pelo parasita intracelular obrigatório Toxoplasma gondii, que infecta diversas espécies, incluindo mais de um terço da população humana mundial e pode causar danos severos ao feto na infecção congênita. A amamentação é a forma natural e segura de alimentar o recém-nascido, com capacidade de proporcionar o desenvolvimento adequado do sistema imunológico do neonato. Todas as classes de imunoglobulinas estão presentes no leite humano, principalmente no colostro, as quais podem ser de fonte sistêmica e local. Diversos estudos documentaram que a amamentação protege a criança contra várias doenças, mas poucos esforços tem sido direcionados para identificar a ação protetora do leite humano contra doenças parasitárias, inclusive T. gondii. Devido à importância da amamentação e à alta prevalência de toxoplasmose, o objetivo desse estudo foi detectar e avaliar a presença de anticorpos IgG, IgM e IgA anti-T. gondii presentes em amostras pareadas de soro e colostro humano. Foram inclusas neste estudo 289 puérperas do Hospital de Clínicas da UFU (média de idade: 24,8 anos, intervalo: 14-43 anos). As amostras foram analisadas pelos imunoensaios ELISA e Immunoblotting contra antígenos solúveis de T. gondii. O ELISA teve reatividade para IgG, IgM e IgA específicos, respectivamente, em 136 (47,9%), 20 (6,9%), 8 (2,8%) das amostras de soro e em 133 (46,0%), 23 (7,9%), 8 (2,8%) das amostras de colostro. Também foi observada correlação significativa entre os níveis de anticorpos anti-T. gondii das amostras de soro e colostro. O Immunoblotting mostrou que foi possível detectar os três isótipos de anticorpos específicos a diferentes antígenos de T. gondii em ambas amostras. Anticorpos IgG presentes em amostras de soro e colostro reconheceram mais frações antigênicas comparado com IgM e IgA. IgG sérica detectou mais frações antigênicas do que anticorpos IgG presentes no colostro da mesma paciente. Em contraste, IgA específica presente no colostro reconheceu maior número de antígenos do que IgA presente em amostras de soro da mesma paciente. Adicionalmente, mostramos que a fração de 60 kDa pode ser um bom marcador de diagnóstico para infecção aguda, pois ela foi reconhecida frequentemente por anticorpos IgG de baixa avidez de ambas amostras; e a fração de 39 kDa pode ser um marcador de diagnóstico de toxoplasmose congênita. Nossos resultados demonstraram uma associação significativa entre anticorpos específicos a T. gondii presentes em amostras de soro e leite, evidenciando que é possível diagnosticar toxoplasmose usando leite humano, uma forma não invasiva de obter amostra biológica. / Mestre em Imunologia de Parasitologia Aplicada

Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan that belongs to the Apicomplexa phylum and causes toxoplasmosis which is especially severe in immunocompromised individuals and who acquired the infection by congenital transmission. Dense granules are organelles involved in this parasite invasion and replication of the parasite inside the cell. Among the proteins secreted by dense granules, jointly called GRAs, the GRA 2 is particularly immunogenic. In the present work, we aim to study the role of this protein in inducing adaptive immune response by produced and characterized a monoclonal antibody against GRA2. The parasite treated with this antibody showed the lowest rate of replication in intracellular proliferation assay compared to treatment with irrelevant antibody. The epitopes of this protein that binds to the monoclonal antibody have been mapped by phage display. Through bioinformatics analysis, epitopes for B cells and T GRA2 were predicted and based on that and on the results of phage display amino acid sequences were chosen to synthesize two peptides that were tested as potential vaccine. Immunization tests were carried out in C57BL/6 mice with synthetic peptides and these animals were subsequently infected with T. gondii. There was a significant reduction in mortality in the group immunized with the mixture of both peptides. The negative control group, immunized only with BSA, showed the highest mortality and analysis of cytokine present in the sera of these animals there was a predominance of proinflammatory cytokines while antiinflammatory cytokines were shown to be almost nonexistent in the serum of these animals. Given these results, it was found that the group with higher survival showed better Th1/Th2 balance. This demonstrates that immunization with epitopes recognized by both B cells and T cells appear to be more effective. Thus, peptide mimetics GRA2 regions of the protein may be likely candidates for the development of vaccines against toxoplasmosis. / Toxoplasma gondii é um protozoário do filo Apicomplexa intracelular obrigatório causador da toxoplasmose, que é especialmente grave em indivíduos imunocomprometidos e em indivíduos que adquiriram a infecção por transmissão congênita. Grânulos densos são organelas deste parasito envolvidas no processo de invasão e replicação do parasito no interior da célula. Dentre as proteínas secretadas pelos grânulos densos, chamadas conjuntamente de GRAs, a GRA 2 é particularmente imunogênica. No presente trabalho, no sentido de estudar a participação dessa proteína na indução da resposta imune adaptativa, foi produzido e caracterizado um anticorpo monoclonal contra GRA2. O parasito tratado com esse anticorpo apresentou menor taxa de replicação em ensaio de proliferação intracelular comparado ao tratamento com anticorpo irrelevante. Os epítopos de ligação da proteína GRA2 ao anticorpo monoclonal foram mapeados por phage display. Por meio de análises de bioinformática, epítopos para células B e T da GRA2 foram preditos e com base nisso e nos resultados do phage display foram escolhidas seqüências de aminoácidos para sintetizar dois peptídeos que foram testados quanto ao potencial vacinal. Foram feitos ensaios de imunização em camundongos C57BL/6 com estes peptídeos sintéticos e os animais foram posteriormente infectados com T. gondii. Foi observada redução significativa na mortalidade no grupo imunizado com a mistura de ambos os peptídeos. O grupo controle negativo, imunizado somente com BSA, apresentou a maior mortalidade e nas análises de produção de citocinas presentes nos soros destes animais observou-se uma predominância de citocinas pró-inflamatórias enquanto as citocinas anti-inflamatórias mostraram-se quase inexistentes no soro destes animais. Tendo em vista esses resultados, percebeu-se que o grupo com maior sobrevivência apresentou melhor balanço Th1/Th2. Isso demonstra que a imunização com epítopos reconhecidos tanto por células B quanto por células T parece ser mais efetiva. Assim, peptídeos miméticos de regiões da proteína GRA2 podem ser prováveis candidatos no desenvolvimento de vacinas anti Toxoplasmose. / Doutor em Imunologia e Parasitologia Aplicadas

O objetivo do presente estudo foi avaliar a viabilidade de cistos de Toxoplasma gondii em carnes suínas processadas por maturação úmida por 14, 21 e 28 dias a 0º (&#177;1), assim como avaliar a distribuição dos cistos em órgãos e cortes comerciais de suínos experimentalmente infectados. Para tanto, dois experimentos foram conduzidos e em ambos, os suínos foram infectados com 3.000 oocistos do isolado TgCkBr57 (BrII). O lombo foi o corte muscular escolhido para sofrer o processo de maturação por ser o corte convencionalmente utilizado para o processo. O lombo direito de cada suíno foi submetido ao processo de maturação e o esquerdo foi mantido como controle, sem processamento. No Experimento 1 três suínos foram infectados. Dos lombos processados por maturação (n=3) e controle (n=3) realizou-se bioensaio em gatos e em camundongos e o período de maturação foi de 14 dias. Nesse ensaio também avaliou-se a distribuição de cistos teciduais pelo bioensaio em camundongos do cérebro, retina, língua, diafragma e coração e de cortes musculares: lombo (m. longissimus), copa (m. longissimus, spinalis dorsi, rhomboideus), filé mignon (m. psoas major), coxão-duro (m. biceps femoris), coxão mole (m. semimembranosus) e alcatra (m. gluteos medius). No Experimento 2 seis suínos foram infectados e foi realizado o bioensaio em camundongos dos lombos que ficaram sob maturação por 14 (n=2), 21 (n=2) e 28 (n=2) dias. Em ambos os experimentos, cistos de T. gondii presentes nos lombos permaneceram viáveis após 14 dias de maturação úmida, com confirmação pelo bioensaio em gatos e em camundongos. Nos períodos de 21 e 28 dias, pelo bioensaio observou-se que os camundongos não se infectaram, indicando que o processo inviabilizou os cistos. Quanto à distribuição dos cistos, estes foram isolados da copa, coração, diafragma e língua dos três suínos; do filé mignon, coxão duro e cérebro de dois suínos e da alcatra e lombo de um suíno. Nenhum camundongo infectou-se no bioensaio com o coxão mole e com a retina. Os resultados demonstram que a maturação em embalagem a vácuo por 14 dias em temperatura controlada (0ºC) não foi eficaz para inativação dos cistos de T. gondii, porém, o processo se mostrou eficiente quando a maturação foi feita por período igual ou superior a 21 dias. Cistos de T. gondii foram encontrados em praticamente todos os órgãos e cortes avaliados, demonstrando a ampla distribuição do parasita em suínos e a importância dessa espécie como fonte de infecção para o homem. / The objective of the present study was to evaluate the viability of Toxoplasma gondii cysts in pork processed by dry-aged for 14, 21 and 28 days at 0º (&#177; 1), as well as to evaluate the distribution of T. gondii cysts in organs and commercial cuts of experimentally infected pigs. For that, two experiments were conducted ans in both the pigs were infected with 3.000 oocysts of the isolate TgCkBr57 (BrII). The loin was the muscle chosen to undergo the dry-aged because it is the cut conventionally used for the process. The right loin of each pig was submitted to the dry-aged and the left was kept as control, without processing. In Experiment 1, three pigs were infected. From the loins processed by dry-aged (n=3) e controle (n=3), the bioassay was performed on cats and mice and the aged period of the loins was 14 days. This study, also avaluated the distribution of T. gondii tissue cysts by bioassay in mice of brain, retina, tongue, diaphragm and hear and of the muscles: loin (m. longissimus), coppa (m. longissimus, spinalis dorsi, rhomboideus), tender loin (m. psoas major), outside flat (m. biceps femoris), topside (m. semimembranosus) and top sirloin (m. gluteos medius) was evaluated. In Experiment 2, six pigs were infected and the bioassay was performed in mice of the loins aged for 14 (n=2), 21 (n=2) and 28 (n=2) days. In both experiments, T. gondii cysts of the loins remained viable after 14 days of dry-aged, confirmed by bioassay in cats and mice. At 21 and 28 days, the bioassay showed that the mice did not become infected, indicating that the process made the cysts unfeasible. As to the distribution of the cysts, T. gondii was isolated from the coppa, heart, diaphragm and tongue of the three pigs, to the tender loin, outside flat and brain of two pigs and to the top sirloin and loin of one pig. No mice were infected in the bioassay with the topside and with the retina. The results demonstrate that the dry-aged for 14 days at controlled temperature (0ºC) was not effective for inactivation of T. gondii cysts, however, the process was efficient when the dry-aged was done for a period egual or righter than 21 days. Toxoplasma gondii cysts were found in practically all organs and cuts evaluated, demonstrating the wide distribution of the parasite in pigs and the importance of this species as a source of infection for man.

A ovinocultura é um sistema de criação muito antigo em nosso país e ainda continua apresentando uma série de problemas que dificultam a produção econômica desses animais e necessitam de urgentes soluções. Visando minorar estes prejuízos esta pesquisa foi idealizada com o intuito de realizar um estudo minuncioso das principais enfermidades reprodutivas parasitárias e bacterianas. Todos os animais foram submetidos ao exame clínico geral e específico do sistema reprodutor e colheram-se amostras de soro, sêmen, abortamentos, lóquios, secreções, fezes e zaragatoa prepucial e vaginal dependendo da enfermidade a ser estudada. Não foi possível o isolamento nos fetos de nenhum agente etiológico. Conclui-se que a toxoplasmose é a enfermidade de maior importância nos rebanhos de estado de São Paulo e a de maior fator de risco em casos de abortamentos, a neosporose estaria relacionada principalmente com animais que apresentam repetição de cio, leptospirose foi observado em baixa titulação e a mais prevalente foi a Leptospira australis sorovar australis proveniente de animais silvestres, a campilobacteriose e a brucelose são as duas enfermidades da reprodução com menor ocorrência no estado. Foi isolado o primeiro caso de endometrite no Brasil por Histophilus somni. Foi isolado o primeiro caso de orquite por Actinobacillus seminis no estado de São Paulo. / Sheep industry is a traditional system in Brazil and presents a series of issues that complicate economical exploitation and urgently need solution. In order to reduce losses this research was idealized to carefully study the major bacterial and parasitary reproductive diseases. All animals were submitted to a general and specific reproductive system clinical examination. Blood, semen, abortions, lochia, vaginal discharges, feces, and preputial/vaginal swabs were collected according to the studied disease. It was not possible to isolate any etiological agent from aborted fetuses. The conclusion was that toxoplasmosis was the major disease on São Paulo herds and has the biggest risk factor in abortions, neosporosis would be related to animals that present heat repetition, leptospirosis was observed with low antibodies titles and the most prevalent was Leptospira australis sorovar australis arising from wild animals, campilobacteriosis and brucellosis are both the reproductive diseases with the lowest occurrence in the state. The first endometritis case caused by Histophilus somni. In Brazil was isolated. The first orchitis case caused by Actinobacillus seminis in São Paulo state was isolated.

As formas sintomáticas de toxoplasmose são um grave problema de saúde pública e ocorrem em cerca de 10 a 20% das pessoas infectadas. Com o objetivo de melhorar o diagnóstico molecular de toxoplasmose sintomática em pacientes brasileiros, este estudo avaliou o desempenho da PCR em tempo real (qPCR) na detecção do DNA de T. gondii testando dois conjuntos de iniciadores moleculares (B1 e REP-529) para diagnóstico molecular. A metodologia foi testada em 807 amostras clínicas com diagnóstico clínico conhecido, ELISA e PCR convencional (cPCR) em um período de 9 anos. Todas as amostras foram de pacientes com suspeita clínica de diferentes formas da toxoplasmose. De acordo com a curva mínima de limite de detecção (no CT), o REP-529 apresentou maior sensibilidade para detectar DNA de T. gondii do que B1. Ambos os conjuntos de iniciadores moleculares foram avaliados retrospectivamente usando o DNA de 515 amostras clínicas diferentes. Os 122 pacientes com resultado negativo na PCR em tempo real, provavelmente por terem infecção crônica, demonstraram alta especificidade (REP-529, 99,2% e B1, 100%). Das 393 amostras com ELISA positivo (IgG), 146 apresentaram diagnóstico clínico de toxoplasmose e cPCR positivo. As sensibilidades de REP-529 e B1 foram de 95,9% e 83,6%, respectivamente. A comparação dos desempenhos do REP-529 e B1 foi analisada prospectivamente em 292 amostras. Assim, a partir de um total de 807 amostras de DNA analisadas, 217 (26,89%) apresentaram PCR positivo, pelo menos em um conjunto de iniciadores e com toxoplasmose sintomática confirmada pelo diagnóstico clínico. O REP-529 foi positivo em 97,23%, enquanto o B1 amplificou apenas 78,80%. Depois de comparar várias amostras em um laboratório brasileiro de referência, este estudo concluiu que o conjunto de iniciadores REP-529 apresentou melhor desempenho do que B1. Essas observações foram baseadas após o uso de casos com diagnóstico clínico definido, ELISA e cPCR. / Symptomatic forms of toxoplasmosis are a serious public health problem and occur in around 10-20% of the infected people. Aiming to improve the molecular diagnosis of symptomatic toxoplasmosis in Brazilian patients, this study evaluated the performance of real time PCR (qPCR) in detecting T. gondii DNA testing two primer sets (B1 and REP-529) for molecular diagnosis. The methodology was assayed in 807 clinical samples with known clinical diagnosis, ELISA, and conventional PCR (cPCR) results in a 9-year period. All samples were from patients with clinical suspicion of several features of toxoplasmosis. According to the minimum detection limit curve (in CT), REP-529 had greater sensitivity to detect T. gondii DNA than B1. Both primer sets were retrospectively evaluated using 515 DNA from different clinical samples. The 122 patients without toxoplasmosis (with negative real-time PCR) provided high specificity (REP-529, 99.2% and B1, 100%). From the 393 samples with positive ELISA (IgG), 146 had clinical diagnosis for toxoplasmosis and positive cPCR. REP-529 and B1 sensitivities were 95.9% and 83.6%, respectively. Comparison of REP-529 and B1 performances was further analyzed prospectively in 292 samples. Thus, from a total of 807 DNA analyzed, 217 (26.89%) had positive PCR with, at least one primer set and with symptomatic toxoplasmosis confirmed by clinical diagnosis. REP-529 was positive in 97.23%, whereas B1 amplified only 78.80%. After comparing several samples in a Brazilian referral laboratory, this study concluded that REP-529 primer set had better perform than B1 one. These observations were based after using cases with defined clinical diagnosis, ELISA, and cPCR.

Introdução: A infecção aguda pelo Toxoplasma gondii em gestantes pode determinar infecção fetal através de passagem transplacentária. As crianças afetadas podem desenvolver coriorretinite e déficit neurológico, na ausência de tratamento adequado. Objetivos: Estimar a prevalência de toxoplasmose aguda em gestantes atendidas na maternidade do Hospital Nossa Senhora da Conceição, avaliando possíveis diferenças nas freqüências ao longo do período estudado; medir a incidência de toxoplasmose congênita (TC) e estimar a taxa de transmissão vertical em crianças nascidas neste hospital; avaliar a acurácia de testes diagnósticos em TC, aplicados no momento do nascimento, na população de crianças estudadas. Métodos: Inicialmente um estudo transversal foi desenvolvido para identificar as pacientes que apresentaram critérios de infecção aguda na gestação, atendidas na maternidade no momento do parto, entre outubro de 1998 e dezembro de 2005. Novas tecnologias foram introduzidas para detecção diagnóstica ao longo deste período. Entre outubro de 1998 e dezembro de 2001 (período 1), utilizou-se o método microparticle enzyme immunoassay – MEIA e entre janeiro de 2002 e dezembro de 2005 (período 2) foi utilizada a técnica de captura de IgM e o teste de avidez de IgG com o método enzyme linked fluorescent assay – ELFA (VIDAS). Os recém-nascidos identificados a partir deste estudo inicial foram incluídos em um estudo de coorte histórico, com tempo de acompanhamento aproximado de doze meses, para estabelecer o diagnóstico definitivo de toxoplasmose congênita, obtido em dois momentos: (1) logo após o nascimento; (2) aos 12 meses, aproximadamente. Para a definição de caso da infecção aguda na gestação e de toxoplasmose congênita foi utilizado o sistema de classificação elaborado por Lebech et al., com adaptações (quadro 1). Aqueles casos classificados como improváveis foram excluídos do cálculo da prevalência de toxoplasmose aguda em gestantes e de incidência de TC. Para avaliar a acurácia de testes diagnósticos em TC realizados no momento do nascimento utilizou-se, como padrão ouro para o diagnóstico definitivo, a concentração de anticorpos IgG em torno de 12 meses de vida. Um bebê infectado deve ter concentrações iguais ou mais elevadas de IgG nesta idade quando comparadas às encontradas no nascimento. Houve comparação independente e cega dos métodos diagnósticos avaliados em relação ao padrão ouro. A dosagem de anticorpos IgG e IgM em recém-nascidos foi processada com o método microparticle enzyme immunoassay (MEIA). Análise: Para comparar proporções foi utilizado o teste qui-quadrado com correção de Yates, teste exato de Fisher, quando necessário, e Teste t de Student para comparação entre médias de duas amostras independentes com distribuição simétrica. Na avaliação do desempenho de testes diagnósticos foram obtidos resultados de sensibilidade, especificidade, razões de verossimilhança (RV) positiva e negativa dos testes diagnósticos – hemograma, exame do líquor, ecografia transfontanelar, exame de fundo de olho (EFO) e a detecção de anticorpos IgM para toxoplasmose (MEIA) e do DNA do toxoplasma com reação em cadeia da polimerase – método Nested (RCP-Nested) séricos. Resultados: Em uma população de 41.112 gestantes, a prevalência de toxoplasmose aguda foi de 4,8 para cada 1.000 gestantes (IC95%: 4,2 a 5,6). Houve redução significativa na prevalência de toxoplasmose aguda nas gestantes deste hospital a partir do ano 2002 (P=0,008). O diagnóstico de toxoplasmose congênita foi definitivo em 37 crianças entre 40.727 nascidos vivos no período estudado, atingindo uma incidência de 0,9 para cada 1.000 nascimentos (IC95%: 0,6 a 1,3). Logo após o nascimento, entre os 200 recém-nascidos expostos ao T. gondii, resultado de 199 gestantes infectadas, 25 bebês apresentaram critérios diagnósticos de toxoplasmose congênita, atingindo taxa de transmissão vertical de 12,5% (IC 95%: 8,2% - 17,9%). Após o seguimento foram detectados mais 12 casos, aumentando esta taxa para 18,5% (IC 95%: 13,4% – 24,6%). Para avaliar a acurácia de testes diagnósticos aplicados no momento do nascimento, foram identificadas 31 crianças com TC, de acordo com o padrão ouro, entre 136 expostas ao protozoário intra-útero e que completaram seguimento até os 12 meses de vida. Os testes que apresentaram melhor desempenho isoladamente na predição do diagnóstico, foram detecção de anticorpos IgM específicos, EFO e RCPNested atingindo razões de verossimilhança positivas de 119,3 (IC95%: 7,40 – 1923,92), 49,9 (IC95%: 3,0 – 838,2) e 24,8 (IC95%: 3,22 – 190,35), respectivamente. A RV negativa para IgM foi 0,4 (IC95%: 0,3 – 0,6), mas para o EFO e RCP-Nested foi apenas 0,7 (IC95%: 0,6 – 0,9). Conclusão: A prevalência de toxoplasmose aguda em gestantes incluídas neste estudo foi inferior à encontrada na França e na Bélgica, mas foi mais elevada quando comparada às descritas na Suécia, Noruega, Dinamarca e Nova Iorque. A prevalência estimada neste estudo foi similar a de outros locais do Brasil, como Mato Grosso do Sul, mas inferior à obtida no Distrito Federal. Esta variabilidade nas estimativas pode estar relacionada com os diferentes métodos diagnósticos utilizados no rastreamento, ou ainda, com os diferentes fatores de risco envolvidos na transmissão da doença. Em nosso estudo, esta freqüência diminuiu a partir do ano de 2002, o que não pode ser atribuível à introdução do teste de avidez de IgG, uma vez que a média de idade gestacional na realização deste exame foi tardia. Entretanto, existe a possibilidade de que o teste de captura de IgM com o método ELFA tenha contribuído para diminuir os casos falso-positivos de IgM, o que poderá ser confirmado com futuros estudos. Estes resultados apontam que a introdução de novas tecnologias no laboratório deve ser acompanhada de esforços para melhorar as condições de acesso precoce das gestantes ao pré-natal de referência, com o objetivo de não perder a oportunidade para melhor discriminar as gestantes sem doença e evitar procedimentos invasivos, desnecessários e onerosos. A incidência de toxoplasmose congênita e a taxa de transmissão vertical foram elevadas. Estas freqüências podem estar subestimadas devido às perdas no seguimento. Para avaliar o efeito das perdas na validade do estudo, foram comparadas as características da população de gestantes e de recém-nascidos do grupo de bebês com seguimento completo em relação ao grupo que não retornou para o seguimento. Estas características foram semelhantes nos dois grupos, portanto, consideramos que o percentual de perdas, embora elevado, não prejudicou a validade do estudo. A identificação de 12 casos adicionais de TC com o seguimento dos bebês reforça a necessidade de monitoramento sorológico durante o primeiro ano de vida, mesmo sem evidência de infecção congênita ao nascimento. Na avaliação dos testes diagnósticos aplicados ao nascimento, a detecção de anticorpos IgM específicos no sangue do neonato, o EFO e o RCP-Nested sérico demonstraram melhor desempenho para identificar os bebês com TC. Entretanto, para afastar este diagnóstico, apenas o resultado não reagente de anticorpos IgM específicos apresentou maior utilidade, mas com efeito de pequena magnitude. / Introduction: The acute infection by Toxoplasma gondii in pregnant women may cause fetal infection by means of the transplacental transfer. Affected children may develop chorioretinitis and neurological deficit in the absence of a proper treatment. Objectives: To estimate the prevalence of acute toxoplasmosis in pregnant women cared for at the maternity ward of Hospital Nossa Senhora da Conceição, evaluating possible differences in frequencies along the period of study; to measure the incidence of congenital toxoplasmosis (CT), and estimate the rate of vertical transmission in children who were born in this hospital; to evaluate the accuracy of diagnostic tests in CT, applied at the moment of the birth, in the population of studied children. Methods: Initially a cross-sectional study was developed to identify the patients who presented criteria of acute infection in the pregnancy, cared for at the maternity ward at the moment of the labor, between October 1998 and December 2005. New technologies have been introduced for diagnostic detection along this period. Between October 1998 and December 2001 (period 1) the microparticle enzyme immunoassay – MEIA was used, while between January 2002 and December 2005 (period 2) the IgM capture technique and the IgG avidity test with the enzyme linked fluorescent assay – ELFA (VIDAS) method were used. Those newborns (NB) identified at this initial study were included in a historical cohort study, with an approximate follow-up time of twelve months, to establish the definitive diagnosis of congenital toxoplasmosis, obtained in two moments: (1) soon after birth; (2) at 12 months, approximately. For the definition of cases of acute infection in pregnancy and congenital toxoplasmosis, the classification system elaborated by Lebech et al. was used with adaptations (Picture 1). Those cases that were classified as unlikely were excluded from the prevalence calculation of acute toxoplasmosis in pregnant women and from the incidence of CT. In order to evaluate the accuracy of diagnostic tests in CT accomplished at the moment of birth, the concentration of IgG antibodies around 12 months of age was used as a gold standard for the ultimate diagnosis. An infected baby must have equal or higher concentrations of IgG at this age when compared to the ones found at birth. An independent and blind comparison of the diagnostic methods evaluated in relation to the gold standard was performed. The dosage of IgG and IgM antibodies in newborns was processed with the microparticle enzyme immunoassay (MEIA) method. Analysis: In order to compare proportions, a chi square test with Yates correction, an exact Fisher test when necessary, and a Student's t-test for comparison between means of two independent samples with symmetrical distribution were used. In the performance evaluation of diagnostic tests, results of sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratio (LR) of the diagnostic tests – hemogram, liquor test, transfontanellar ultrasonography brain scan, ophthalmoscopy, and detection of IgM antibodies for toxoplasmosis (MEIA) and the DNA of the toxoplasm with polymerase chain reaction – method Nested (PCR-Nested) serum were obtained. Results: In a population of 41,112 pregnant women, the prevalence of acute toxoplasmosis was 4.8 per 1,000 pregnant women (CI95%: 4.2 to 5.6). There was a significant decrease in the prevalence of acute toxoplasmosis in pregnant women of this hospital from 2002 on (P=0.008). The diagnosis of congenital toxoplasmosis was definitive in 37 children among 40,727 live births in the studied period, reaching an incidence of 0.9 per 1,000 births (CI95%: 0.6 to 1.3). Soon after the birth, among the 200 newborns exposed to the T. gondii, resulting from 199 pregnant women, 25 babies showed diagnostic criteria of congenital toxoplasmosis, reaching a vertical transmission rate of 12.5% (CI 95%: 8.2% - 17.9%). After the follow-up, another 12 cases were detected, increasing this rate to 18.5% (CI 95%: 13.4% – 24.6%). In order to evaluate the accuracy of diagnostic tests applied at the moment of birth, 31 children with CT were identified according to the gold standard, among 164 ones who were exposed to protozoan intra-uterus and who completed their follow-up until 12 months of age. The tests that showed better performance when isolate in the prediction of the diagnosis were the detection of specific IgM antibodies, ophthalmoscopy, and PCR-Nested reaching positive RV of 119.3 (CI95%: 7.40 – 1923.92), 49.9 (CI95%: 3.0 – 838.2), and 24.8 (CI95%: 3.22 – 190.35), respectively. The negative RV for IgM was 0.4 (CI95%: 0.3 – 0.6), but for ophthalmoscopy and PCR-Nested it was 0.7 (CI95%: 0.6 – 0.9) only. Conclusion: The prevalence of acute toxoplasmosis in pregnent women included in this study was lower than the one found in France and Belgium, but was higher when compared to the ones described in Sweden, Norway, Denmark, and New York. The estimated prevalence in this study was similar to the one from other locations in Brazil, such as Mato Grosso do Sul, but lower to the one obtained in Brasília. This variability in the estimates may be related to the different methods for diagnosis used in the screening or even to the different risk factors involved in the transmission of the disease. In our study, this frequency decreased from 2002 on, and this cannot be attributed to the introduction of the IgG avidity test, since the means of gestational age at the accomplishment of this test was late. However, there is a possibility that the IgM capture test with the ELFA method has contributed to decrease the frequency of false-positive cases of IgM, what can be confirmed with future studies. These results signal that the introduction of new technologies in the laboratory must be accompanied by efforts to improve conditions for an early access of pregnant women to the reference prenatal care, aiming to prevent the loss of opportunities of better discriminating pregnant women that are not sick and avoiding unnecessary and expensive invasive procedures. The incidence of congenital toxoplasmosis and the rate of vertical transmission were elevated. These frequencies may be underestimated due to the losses in the follow-up. In order to evaluate the effect of losses in the study validity, characteristics of the population of pregnant women and newborns belonging to the group of babies with full follow-up in relation to the group that did not return for the follow-up were compared. These characteristics were similar in the two groups, therefore we consider that the percentual of losses, even though high, did not endanger the validity of the study. The identification of twelve additional cases of congenital toxoplasmosis with the follow-up of the babies reinforces the need of a serological monitoring during the first year of life, even without any evidence of congenital infection at birth. In the evaluation of diagnostic tests applied at birth the detection of specific IgM antibodies in the blood of the newborn, the ophthalmoscopy, and the serum PCR-Nested showed a better performance to identify babies with CT. However, in order to discard this diagnosis, only the non-reagent IgM specific antibodies result showed higher utility, with a small magnitude effect though.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-05-20T13:52:26Z No. of bitstreams: 1 Adrianne Mota de Alcantara.pdf: 880772 bytes, checksum: d42422bf43cfe9ec3a3e1d6be2030d4e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-20T13:52:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adrianne Mota de Alcantara.pdf: 880772 bytes, checksum: d42422bf43cfe9ec3a3e1d6be2030d4e (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Toxoplasmosis is a zoonosis, caused by the protozoan parasite Toxoplasma gondii, which represents an important public health burden worldwide. It has been estimated that 30% of the human population is seropositive for T. gondii. Severe complications may occur in immunocompromised patients or after congenital infection. Free-range chickens are considered an important host in the epidemiology of Toxoplasmosis, since they are a source of infection for cats and humans. The purpose of this study was to investigate the frequence and viability of T. gondii in free-range chickens destined for human consumption in Recife, Pernambuco state, Brazil. Serum samples from 56 free-range chickens were submitted to Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) for detection of anti-T. gondii IgG antibodies. Tissue samples from seropositive chickens were submitted to PCR and mouse bioassay. From the tissue and serum of the mice submitted were performed PCR and IFAT, respectively. Anti-T. gondii IgG antibodies were found in 46.43% (26/56) of chickens and in 25% (13/52) of inoculated mice submitted to bioassay. Suggestive clinical manifestation of toxoplasmosis was observed in five inoculated mice, with one death. The data obtained in the present study confirm that free-range chicken meat is a potential source of T. gondii infection for humans and it has an important role in the toxoplasmosis chain transmission, revealing the need for implementation of prevention and control of toxoplasmosis. / A toxoplasmose é uma importante zoonose que ocorre em todo o mundo, com uma estimativa de infecção de 30% da população humana, podendo ocorrer complicações em indivíduos imunocomprometidos e alterações neonatais em humanos. As aves domésticas são importantes hospedeiros intermediários de T. gondii por servirem de fonte de infecção do parasita para os felinos e seres humanos. O presente estudo teve como objetivo investigar a frequência e viabilidade de T. gondii em galinhas caipiras vendidas em feiras-livre de Recife – Pernambuco. Foram analisadas 56 amostras de soro de galinhas para a pesquisa de anticorpos IgG anti-T. gondii por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Amostras de tecidos das galinhas soropositivas foram submetidas à Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e ao bioensaio em camundongos. Foi realizada PCR e RIFI de tecido e soro dos camundongos submetidos ao bioensaio, respectivamente. Anticorpos IgG anti-T. gondii foram encontrados em 46,43% (26/56) das galinhas e em 25% (13/52) dos camundongos submetidos ao bioensaio. Sinais clínicos sugestivos de toxoplasmose foram observados em cinco dos camundongos inoculados e um óbito. Os resultados obtidos neste estudo demonstram que a carne e vísceras de galinhas caipiras podem atuar como uma fonte de infecção por T. gondii para humanos nesta região, reforçando a importância dessas aves na cadeia epidemiológica da toxoplasmose e a necessidade de implementação de medidas de prevenção e controle da enfermidade.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-09T13:54:47Z No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 913952 bytes, checksum: 42901e597e56c04af84eda7eabac98a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T13:54:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 913952 bytes, checksum: 42901e597e56c04af84eda7eabac98a3 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Toxoplasma gondii is an obligate intracellular coccidian protozoan that causes the toxoplasmosis, an important zoonosis. The study of the prevalence of this parasite in pigs have great importance since pork is one of the main sources of infection for humans when consumed raw or undercooked. This study aimed to determine the prevalence of antibodies, isolate and genetically characterize the Toxoplasma gondii in subsistence creations of pigs in the State of Pernambuco, Brazil. In the first study it was evaluated 224 blood samples and tissues from pigs slaughtered in municipal slaughterhouses for the presence of anti-Toxoplasma gondii antibodies by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA). There was a significant relationship regarding the age of the animals and seropositivity (p <0.001). The positive animals had their tissues analyzed by bioassay techniques in mice, Histopathology, Immunohistochemistry (IHC) and Polymerase Chain Reaction (PCR). Of animals sampled, 38.0% (85/224) were positive in the IFA with titles ranging from 64 to 1024. In the histopathology, it was not observed injuries associated to toxoplasmosis in the evaluated tissues and in the IHC it was not obtained positive immunostaining. The PCR of pig tissues showed 14.1% (12/85) positive samples and in the mouse bioassay, 28.0% (5/18) of the samples were positive. The second study was realized with the purpose of discovering the genotypes of T. gondii in the region. It was realized a screening of positive animals in the serological tests, then, the tissues of positive animals were used for bioassay. Fifteen pools of tissues were used, of which, was obtained one isolate. The isolate obtained was characterized by RFLP -PCR, using 11 genetic markers (SAG1, SAG2, altSAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c228, c292, L358, PK1 e APICO). It was used the RH, ME49 and VEG strains of T. gondii, that belong to types I, II and III respectively as standard in genetic characterization of isolated swines. After this genetic analysis, it was identified genotype #65 (ToxoDB), considered an atypical strain and also the first record of this genotype in pigs worldwide. The results of this study allow to conclude that Toxoplasma gondii is installed in pig herds in the state of Pernambuco and strategic and integrated measures should be taken around the prophylaxis of this disease, to prevent and control the infections in pigs and humans in the studied region. / Toxoplasma gondii é um protozoário coccídio intracelular obrigatório causador da toxoplasmose, uma importante zoonose. O estudo da prevalência deste parasito em suínos é de grande importância uma vez que a carne suína é uma das principais via de transmissão para os humanos, quando consumida crua ou mal cozida. Objetivou-se neste estudo determinar a soroprevalência de anticorpos, isolar e caracterizar geneticamente Toxoplasma gondii em suínos de criações de subsistência no Estado de Pernambuco, Brasil. No primeiro grupo de estudo avaliaram-se 224 amostras de sangue e tecidos de suínos abatidos em matadouros municipais para a presença de anticorpos anti- T. gondii na técnica da reação de Imunofluorescência indireta (RIFI) utilizando o ponto de corte ≥ 64. Os animais soropositivos tiveram seus tecidos analisados pelas técnicas de bioensaio em camundongos, histopatologia, imunohistoquímica (IHQ) e reação em cadeia da polimerase (PCR). Dos animais amostrados, 38,0% (85/224) foram positivos na RIFI com títulos variando de 64 a 1024. Ocorreu associação significativa em relação à idade dos animais e a soropositividade (p<0,001). Na histopatologia, não foram observadas lesões associadas à infecção por T. gondii nos tecidos avaliados e na IHQ também não foram obtidas imunomarcações positivas. A PCR dos tecidos dos suínos positivos na sorologia revelou 14,1% (12/85) amostras positivas e no bioensaio em camundongos, 28,0% (5/18) das amostras foram positivas. O segundo grupo de estudo foi realizado com o objetivo de se conhecer os genótipos circulantes do T. gondii no estado de Pernambuco. Inicialmente foi feita uma triagem dos animais positivos na prova sorológica (RIFI) em 54,3% (50/92) e os tecidos dos animais positivos seguiram para a bioprova. Foram utilizados 15 pools de tecidos onde se obteve um isolado. Este isolado obtido foi caracterizado na PCR-RFLP utilizando 11 marcadores genéticos (SAG1, SAG2, altSAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c228, c292, L358, PK1 e APICO). Foram utilizadas as cepas de T. gondii RH, ME49 e VEG que pertencem aos tipos I, II e III respectivamente, como padrão na caracterização genotípica do isolado suíno. Após a análise genética identificou-se o genótipo #65(ToxoDB) considerado uma cepa atípica, sendo este o primeiro registro desse genótipo em suínos no mundo. Os resultados obtidos nesse estudo permitiram concluir que a infecção por Toxoplasma gondii ocorre nos suínos no estado de Pernambuco e que medidas estratégicas e integradas devem ser adotadas para prevenir e controlar as infecções em suínos e humanos na região estudada.