Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2015-05-28T16:38:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Bruno Henrique Andrade Galvão.pdf: 2504824 bytes, checksum: 6daeadcfa43e3c8d892b11b71b3c2ada (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-28T16:38:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Bruno Henrique Andrade Galvão.pdf: 2504824 bytes, checksum: 6daeadcfa43e3c8d892b11b71b3c2ada (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / CNPQ / Introdução: Desnutrição e esquistossomose são problemas de saúde pública que ocorrem simultaneamente em regiões endêmicas do mundo. Nessas zonas o Schistosoma mansoni, observa-se, frequentemente, uma sobreposição de desnutrição e infecção parasitária. As lesões intestinais causadas pela infecção parasitária e o efeito de uma nutrição deficiente na resposta imunológica intestinal, como ocorre na desnutrição, podem predispor ao desenvolvimento do processo de translocação bacteriana. Objetivo: Observar se em camundongos adultos na fase crônica da esquistossomose, submetidos à desnutrição no período do aleitamento, há diferença na ocorrência de translocação bacteriana em relação ao sexo. Métodos: Camundongos fêmeas Swiss webster (n=60) foram divididos, no período de aleitamento, em 2 grupos: Nutrido (N) e Desnutrido (D) – amamentados por mães alimentadas com dieta contendo 17% e 8% de proteína à base de caseína, respectivamente. Aos 35-45 dias de vida, 15 animais de cada grupo foram infectados com, em média, 30 cercárias de S. mansoni, constituindo os grupos: Nutrido Infectado (NI), Nutrido Não Infectado (NNI), Desnutrido Infectado (DI) e Desnutrido Não Infectado (DNI). O peso corporal (PC) dos animais foi mensurado diariamente no período de aleitamento e semanalmente a partir do 22º dia. 45 dias após a exposição cercariana, foi realizada a confirmação da infecção pelo método de Kato-katz. Aos 161 dias de vida, os animais foram eutanasiados para coleta de amostras biológicas para estudo da translocação bacteriana (TB), análises da microbiota e morfometria intestinal. Para estudo da TB, foram coletados sangue periférico e da veia porta, fragmentos de órgãos e linfonodos mesentéricos. Para a microbiota, as fezes foram coletadas da região média do intestino delgado. Segmentos desta região foram seccionados transversalmente e longitudinalmente para análise morfométrica. Resultados: Os animais do grupo D apresentaram um menor ganho de PC em relação ao grupo N a partir do 3º dia, diferença observada durante todo o período experimental. Verificou-se um maior índice de TB nos animais infectados, comparando-os aos não infectados. Entre os infectados, houve uma maior incidência de TB no grupo D comparado ao N, entretanto, a diferença não foi significativa quanto ao sexo. Observou-se um maior número de ovos e vermes recuperados no grupo N, entretanto não houve diferença na maturação de ovos na mucosa intestinal. Quanto a morfometria intestinal, houve diferença entre NI e NNI para altura e área da vilosidade, e apenas na altura para NI e DNI. Observamos uma maior diversidade de colônias nos grupos de animais desnutridos, controle e esquistossomóticos. Conclusões: A desnutrição modifica a resposta imune e pode favorecer translocação bacteriana em camundongos, em ambos os sexos e é mais intensa nos animais infectados por S. mansoni.

COSTA, Marcelo Leite Vieira. Desenvolvimento de um modelo experimental de esteatohepatite induzida pelo antineoplástico irinotecano. 2012. 112 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-08-12T11:23:59Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_mlvcosta.pdf: 4662463 bytes, checksum: 8cd9d7d42f78457af3a4dbb1a57e721c (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2013-08-12T12:32:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_mlvcosta.pdf: 4662463 bytes, checksum: 8cd9d7d42f78457af3a4dbb1a57e721c (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-12T12:32:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_mlvcosta.pdf: 4662463 bytes, checksum: 8cd9d7d42f78457af3a4dbb1a57e721c (MD5) Previous issue date: 2012 / The nonalcoholic steatohepatitis (NASH) is a relevant adverse effect of the chemotherapy with irinotecan, since it has been associated with increased surgical mortality after hepatic resections. So far there are no reports in the literature of a well established experimental irinotecan-induced NASH model. Aim: Develop an experimental model of irinotecan-induced NASH in mice that simulate the full histological alterations found in the clinical practice. Study the possible mechanisms and mediators involved into its pathophysiology including inflammatory cytokines, oxidative stress and the participation of intestinal bacterial translocation. Methods: Male swiss mice weighting between 35 and 30g were divided into experimental groups (n=8-10) and were injected with saline (5 mL/kg, i.p.) or irinotecan in the following dosages: 25, 50, 75 or 100 mg/kg, i.p, three times a week every other day. Mice were weighted and killed at the end of the weeks 1, 3, 5, 7 and 9. Measurements of ALT and AST, leukocytes, total proteins were performed in blood samples as well as cultures of portal vein and ocular plexus blood. In the hepatic tissue samples, total lipids, myeloperoxidase, malonaldehyde and nonproteic sulfidryl groups (NPSH) levels were analyzed, followed by histological evaluation, after slide preparation through HE and Masson methods. Duodenal samples were examined histologically for mucositis grading. Immunohistochemistry analysis for IL-1, IL-18, NOSi, TNFα e TLR-4 were performed in both hepatic and duodenal tissue samples. Statistical analysis was carried out through Student’s t test or Mann-Whitney test, as indicated. Results: The dose of 50mg/kg of irinotecan three times a week i.p. (IRI 50) associated to weight loss, low white cell count, hepatomegaly, decreased total plasma proteins and elevated hepatic enzymes (AST and ALT). IRI 50 altered oxidative stress parameters, elevating elevating malonaldehyde and decreasing NSPG levels at hepatic tissue starting at week 1. IRI 50 also was associated to the full histological changes found in NASH (steatosis, neutrophilic infiltration and hepatocyte balloning) when analyzed at the seventh week and compared to saline group. The duodenal samples showed severe mucositis changes starting at week three. It was also demonstrated elevated immunostaining for IL-1, iNOS and TLR-4 in both liver and duodenal samples at week seven. The cultures were positive for gram negative intestinal bacteria in portal and orbital blood since the first experimental week. Conclusion: The administration of the irinotecan 50mg/kg i.p. three times a week for seven consecutive weeks is an experimental model that reproduces all the histological changes found in the irinotecan-associated NASH found in clinical practice. Concomitant participation of inflammatory cytokines and oxidative stress were found to play a role in NASH pathogenesis in this model. Intestinal gram-negative bacterial translocation leading to portal bacteremia may represent the very first hepatic insult and the connection between the pathogenic factors. / A esteatohepatite não alcoólica (NASH) é um evento adverso do quimioterápico irinotecano extremamente relevante, pois associa-se a uma maior mortalidade após ressecções hepáticas. Até o momento não há na literatura um modelo experimental bem estabelecido de NASH induzido por irinotecano. Objetivo: Estabelecer um modelo experimental de NASH induzida pelo irinotecano em camundongos que simule os aspectos histopatológicos encontrados na clínica. Estudar os mecanismos e mediadores envolvidos na sua fisiopatologia incluindo citocinas inflamatórias, estresse oxidativo e participação da translocação bacteriana intestinal. Métodos: Camundongos machos do tipo Swiss, pesando entre 25 a 30g,foram divididos em grupos experimentais (n=8-10) e foram injetados com solução salina (5 mL/kg, i.p.) ou Irinotecano nas doses 25, 50, 75 or 100 mg/kg, i.p, três vezes por semana em dias alternados. Os animais foram então pesados e sacrificados ao fim das semanas 1, 3, 5, 7 e 9. No sangue foram dosados os níveis de ALT e AST, leucograma, proteínas totais e realizada hemocultura da veia porta e do plexo ocular. Nas amostras do tecido hepático, avaliaram-se os níveis de lipídeos totais, mieloperoxidase, malonaldeído e glutationa (GSNP) seguida da análise histopatológica realizada após preparação da lâmina pelos métodos HE e Masson para avaliar e graduar os critérios histológicos da NASH. As amostras de duodeno foram examinadas histologicamente (HE) para graduar a mucosite. Imunohistoquímica para IL-1, IL-18, NOSi, TNFα e TLR-4 foi realizada tanto nas amostras hepáticas como duodenais. A análise estatística foi realizada empregando o teste t de Student para variáveis não pareadas ou o teste Mann-Whitney quando indicado. Resultados: A dose de 50mg/kg de irinotecano três vezes por semana i.p. (IRI 50) se associou com perda de peso, leucopenia, hepatomegalia, diminuição das proteínas plasmáticas e aumento das enzimas hepáticas (ALT e AST). IRI 50 alterou os parâmetros de estresse oxidativo, elevando a expressão de malonaldeído e diminuindo GSNP com início na primeira semana do experimento. IRI 50 também se associou a todas as alterações histológicas da NASH (esteatose, infiltração neutrofílica e tumefação celular e fibrose) analisadas na sétima semana quando comparado com controle salina. Nas amostras duodenais, observamos alterações histológicas de mucosite severa a partir da terceira semana. Houve também em IRI 50 aumento da imunoexpressão de IL-1, NOSi e TLR-4 tanto nas amostras do fígado como nas do duodeno na semana 7. Nas hemoculturas de sangue portal e orbitário identificou-se o crescimento de enterobactérias gram-negativas desda a primeira semana do experimento. Conclusão: A administração de irinotecano 50mg/kg i.p. três vezes por semana por sete semanas consecutivas é um modelo experimental que reproduz todas as alterações histopatológicas da NASH induzida por irinotecano observadas na clínica. Existem evidências da participação concomitante das citocinas inflamatórias e do estresse oxidativo na patogênese da NASH em nosso modelo. A translocação bacteriana intestinal com bacteremia portal por gram-negativos pode ser o insulto primeiro e o elo de conexão comum entre os diversos fatores fisiopatológicos.

Orientador: Ciro Antonio Rosolem / Resumo: Existe controvérsia sobre o modo de aplicação de B em cafeeiro, teor foliar e produtividade, que pode estar relacionada tanto com a absorção quanto com a translocação do nutriente em função do modo de aplicação e do cultivar utilizados. Com o intuito de avaliar a absorção, a translocação e alguns efeitos morfológicos e anatômicos do B sobre o cafeeiro, foram realizados 2 experimentos em campo e 2 em casa-de-vegetação, utilizando-se o isótopo estável 10B, medições e microscopia eletrônica de varredura. No primeiro experimento em campo, que teve a duração de 2 anos, o ácido bórico foi aplicado em diferentes doses, em pré e/ou pós-florada. Para as avaliações, os ramos foram coletados e divididos em 3 partes, sendo analisados quanto ao teor de B nas folhas, haste e estruturas reprodutivas, o número de nós, o número de folhas, o comprimento ramo e a matéria seca das folhas e dos frutos. Não houve diferenças significativas entre tratamentos para o conteúdo de B nas diferentes partes analisadas, e não foram observados alterações morfológicas ou efeito na produtividade do cafeeiro nos 2 anos. O pincelamento de ácido bórico enriquecido (H3 10BO3) nas folhas, constou do segundo experimento em campo, onde se observou a dependência das chuvas, para que ocorresse a translocação do B aplicado nas folhas para a haste, folhas do ponteiro e frutos. Do B contido nas folhas do ponteiro 30 dias após a aplicação e no fruto durante todo o período avaliado, 5% foi translocado do fertilizante pincelado. Os experimentos quanto ao modo de aplicação, foliar ou radicular, a translocação e as alterações anatômicas em suficiência ou deficiência de B foram realizados em casa-devegetação. As plantas cresceram em vasos com areia lavada recebendo solução nutritiva completa, menos B, o qual foi aplicado separadamente ou via... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: There is a controversy about B application way, foliar content and yields that can be related to the nutrient absorption and translocation as affected by application way and the cultivars. To evaluate B translocation and some morphological and anatomical effects on coffee plants, two experiments were conducted in field conditions and two in green house, using 10B, some morphological measurements and scanning electronic microscopy. In the first field experiment, conduced for 2 years, boric acid was applied in several concentrations pre and/or post-flowering. Branches were collected and split in 3 parts, and B content in leaves, stem and reproductive structures were analyzed, nodes number, leaves number, branch length and dry matter weight of leaves and fruits. No significant difference was found between treatments as regarding B content in the several plant parts, and there was no morphological changes or B effect on coffee yields in the 2 years. Brushing of the enriched boric acid on the leaves was the second field experiment, where it was observed a raindependency on leaf applied B translocation to stem, new leaves and fruits. Of the B found in the new leaves 30 days after application and in fruits during all the evaluations 5% was translocated from that applied to leaves. In green house the foliar and root absorption and translocation were studied, as well as the anatomical abnormalities. Plants were grown in pots with washed sand, receiving a complete nutrient solution less B, that was sprayed to leaves or supplied to the substrate. The morphological effects were similar to those in field experiments, and B content in the leaves showed positive correlation with coffee yields. Transpiratory stream was the main driving force 10B use in B translocation. The 10B was found in roots of plants receiving B foliar only. The leaves of plants grown... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-04Bitstream added on 2014-06-13T19:00:34Z : No. of bitstreams: 1 leite_vm_dr_botfca.pdf: 7199575 bytes, checksum: ffd423c6aaf00b47c3bce128c50a0001 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Existe controvérsia sobre o modo de aplicação de B em cafeeiro, teor foliar e produtividade, que pode estar relacionada tanto com a absorção quanto com a translocação do nutriente em função do modo de aplicação e do cultivar utilizados. Com o intuito de avaliar a absorção, a translocação e alguns efeitos morfológicos e anatômicos do B sobre o cafeeiro, foram realizados 2 experimentos em campo e 2 em casa-de-vegetação, utilizando-se o isótopo estável 10B, medições e microscopia eletrônica de varredura. No primeiro experimento em campo, que teve a duração de 2 anos, o ácido bórico foi aplicado em diferentes doses, em pré e/ou pós-florada. Para as avaliações, os ramos foram coletados e divididos em 3 partes, sendo analisados quanto ao teor de B nas folhas, haste e estruturas reprodutivas, o número de nós, o número de folhas, o comprimento ramo e a matéria seca das folhas e dos frutos. Não houve diferenças significativas entre tratamentos para o conteúdo de B nas diferentes partes analisadas, e não foram observados alterações morfológicas ou efeito na produtividade do cafeeiro nos 2 anos. O pincelamento de ácido bórico enriquecido (H3 10BO3) nas folhas, constou do segundo experimento em campo, onde se observou a dependência das chuvas, para que ocorresse a translocação do B aplicado nas folhas para a haste, folhas do ponteiro e frutos. Do B contido nas folhas do ponteiro 30 dias após a aplicação e no fruto durante todo o período avaliado, 5% foi translocado do fertilizante pincelado. Os experimentos quanto ao modo de aplicação, foliar ou radicular, a translocação e as alterações anatômicas em suficiência ou deficiência de B foram realizados em casa-devegetação. As plantas cresceram em vasos com areia lavada recebendo solução nutritiva completa, menos B, o qual foi aplicado separadamente ou via... . / There is a controversy about B application way, foliar content and yields that can be related to the nutrient absorption and translocation as affected by application way and the cultivars. To evaluate B translocation and some morphological and anatomical effects on coffee plants, two experiments were conducted in field conditions and two in green house, using 10B, some morphological measurements and scanning electronic microscopy. In the first field experiment, conduced for 2 years, boric acid was applied in several concentrations pre and/or post-flowering. Branches were collected and split in 3 parts, and B content in leaves, stem and reproductive structures were analyzed, nodes number, leaves number, branch length and dry matter weight of leaves and fruits. No significant difference was found between treatments as regarding B content in the several plant parts, and there was no morphological changes or B effect on coffee yields in the 2 years. Brushing of the enriched boric acid on the leaves was the second field experiment, where it was observed a raindependency on leaf applied B translocation to stem, new leaves and fruits. Of the B found in the new leaves 30 days after application and in fruits during all the evaluations 5% was translocated from that applied to leaves. In green house the foliar and root absorption and translocation were studied, as well as the anatomical abnormalities. Plants were grown in pots with washed sand, receiving a complete nutrient solution less B, that was sprayed to leaves or supplied to the substrate. The morphological effects were similar to those in field experiments, and B content in the leaves showed positive correlation with coffee yields. Transpiratory stream was the main driving force 10B use in B translocation. The 10B was found in roots of plants receiving B foliar only. The leaves of plants grown... (Complete abstract, click electronic address below).

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T13:57:56Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO DANIELLY CANTARELLI.pdf: 2222925 bytes, checksum: 6d35973456253a2c27e15b93187e36d7 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T13:57:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO DANIELLY CANTARELLI.pdf: 2222925 bytes, checksum: 6d35973456253a2c27e15b93187e36d7 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-03-05 / PROPESQ - UFPE CNPq / Introdução: É comum a associação de esquistossomose mansônica com desnutrição, uma vez que populações com baixo padrão socioeconômico habitam regiões endêmicas. Estudos sugerem que deficiências nutricionais podem estar relacionadas com a supressão da resposta imunológica em animais infectados por S. mansoni. Quando imposta no período crítico da lactação, a desnutrição é um agente estressor indutor de alterações tardias na resposta imunológica, implicada em diversas modificações fisiológicas e metabólicas, relacionadas à depressão do sistema imune. A desnutrição também tem sido considerada na patogênese da translocação bacteriana (TB), por promover aumento da permeabilidade e diminuição das enzimas intestinais. Estudos têm relatado uma maior ocorrência de TB em animais infectados por S. mansoni, quando comparados a animais sem infecção, contudo conhecimentos imunológicos acerca da relação são escassos. Objetivo: Investigou-se a associação entre os níveis de IFN- γ e IL-10 e a ocorrência de translocação bacteriana, em camundongos submetidos à desnutrição neonatal. Métodos: Camundongos fêmeas Swiss webster (n=32) foram divididos, no período de aleitamento, em 2 grupos: Nutrido (N) e Desnutrido (D) – amamentados por mães alimentadas com dieta contendo 17% e 8% de proteína à base de caseína, respectivamente. Aos 35-45 dias de vida, 8 animais de cada grupo foram infectados com, em média, 30 cercárias de S. mansoni, constituindo os grupos: Nutrido Infectado (NI), Nutrido Não Infectado (NNI), Desnutrido Infectado (DI) e Desnutrido Não Infectado (DNI). O peso corporal (PC) dos animais foi mensurado diariamente no período de aleitamento e semanalmente a partir do 22º dia. 45 dias após a exposição cercariana, foi realizada a confirmação da infecção pelo método de Kato-katz. Aos 161 dias de vida, os animais foram eutanasiados para coleta de amostras biológicas. Coletou-se sangue cardíaco para contagem total (CT) e diferencial de leucócitos. Para estudo da translocação bacteriana (TB), foram coletados sangue periférico, sangue portal, baço, fígado, linfonodos mesentéricos e fezes da região média do intestino delgado. Realizou-se cultura de células esplênicas para dosagem de IFN-γ e IL-10 no sobrenadante, através de ensaio imunoenzimático – ELISA. Resultados: Os animais do grupo D apresentaram um menor ganho de PC em relação ao grupo N a partir do 4º dia, diferença observada durante todo o período experimental. Verificou-se um maior índice de TB nos animais infectados, comparando-os aos não infectados. Entre os infectados, houve tendência a uma maior incidência de TB no grupo D comparado ao N, entretanto, a diferença não foi significativa. Os isolados bacterianos responsáveis pela TB em animais nutridos foram Bacillus sp., Citrobacter freundii, Enterococcus faecalis, Proteus rettgeri e Staphylococcus saprophyticus. Nos animais desnutridos, foram encontrados Bacillus sp., Corynebacterium sp., Enterococcus faecalis, Serratia liquefaciens, Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa e Staphylococcus saprophyticus. Foi observada uma menor produção de IFN-γ no grupo DI, comparado ao NI. Os níveis de IL-10 foram mais elevados no grupo NI, em relação ao grupo DI. A CT de leucócitos mostrou-se elevada nos grupos infectados, quando comparados aos controles. Os números de neutrófilos e monócitos foram maiores nos grupos NI e DI, quando comparados aos grupos NNI e DNI, respectivamente. Os valores de linfócitos mostraram-se aumentados no grupo DI, comparado ao DNI. Conclusões: A desnutrição modifica a resposta imune e pode favorecer translocação bacteriana em camundongos infectados por S. mansoni.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-19T18:11:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Edilson Pinto UFPE 08 03 2016.pdf: 842976 bytes, checksum: b2d115f7e6b7425b1d7e4630bcf253fb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T18:11:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Edilson Pinto UFPE 08 03 2016.pdf: 842976 bytes, checksum: b2d115f7e6b7425b1d7e4630bcf253fb (MD5) Previous issue date: 2005-06-30 / O objetivo do presente estudo foi investigar se as alterações do cólon desfuncionalizado, evidenciadas na colite de derivação fecal (CD), seriam capazes de permitir Translocação Bacteriana (TB). Foram utilizados 62 ratos Wistar, machos, pesando entre 220 e 320 gramas, divididos em dois grupos: A (Colostomia) e B (Controle), contendo cada um 31 animais. No grupo A, todos os animais foram submetidos à colostomia, terminal boca única, em cólon ascendente. A partir do 70º dia de observação os seguintes procedimentos foram adotados: em cinco ratos foi injetado por via retal – no segmento desfuncionalizado - 2ml de uma solução salina 0,9% nos animais (subgrupo A1); em oito animais inoculou-se, por via retal, uma solução de 2ml contendo Escherichia coli ATCC 25922 (American Type Culture Collection), na concentração de 108 Unidades Formadoras de Colônias por mililitros (UFC/ml) - Subgrupo A2; em dez animais inoculava-se a mesma solução de Escherichia coli, na concentração de 1011UFC/ml (Subgrupo A3); e em oito animais colhia-se o muco encontrado no segmento colônico distal desfuncionalizado, para dosagens de açúcares neutros e proteínas totais (subgrupo A4). Nos animais do grupo B (controle) não foi confeccionada a colostomia nos ratos, no entanto, todos os outros eventos realizados no grupo A foram repetidos. Nos animais dos subgrupos A1, A2, A3, B1, B2, e B3, após serem mortos, realizou-se punção cardíaca para coleta de 2ml de sangue e retiraram-se fragmentos de tecidos de linfonodo do mesocólon, fígado, baço, pulmão e rim, para análise microbiológica. Essa análise consistia em evidenciar, em placas de Petri, contendo meio de cultura ágar-Mac Conkey, a presença de UFC de Escherichia coli ATCC 25922. Os testes de Mann-Whitney e Anova foram aplicados como técnicas investigativas para associação das variáveis. A ocorrência de TB, só foi evidenciada nos animais em que a concentração inoculada de Escherichia coli ATCC 25922, atingia níveis de 1011UFC/ml, ou seja nos Subgrupos A3 e B3, no entanto, sendo significantemente superior (80%) nos animais sem colostomia (subgrupo B3) quando comparados com os ratos com colostomia (20%) do subgrupo A3 (P<0,05). Pulmão, fígado e linfonodo foram os tecidos com maior percentual de recuperação bacteriana, tanto no subgrupo A3, quanto no B3. A hemocultura foi considerada positiva em 60 % dos animais do subgrupo B3 e em 10% do subgrupo A3 (p<0,05). Houve maior concentração de açúcares neutros, no subgrupo A4 - média 27,3mg/ml -, do que no subgrupo B4 - média 8,4mg/ml – (P<0,05). Conclui-se que as modificações na arquitetura da mucosa intestinal na CD podem promover alterações na barreira intestinal, mas não necessariamente conduz a maior freqüência de TB. / The objective of this study was to investigate if the alterations of the diverted colon segment mucosa, evidenced in fecal colitis, would be able to alter Bacterial Translocation (BT). Sixty-two Wistar male rats ranging from 220 to 320 grams of weight, divided in two groups: A (Colostomy) and B (Controls), with 31 animals each one. In group A, all animals underwent end colostomy, one stoma, in ascending colon; and in the 70th POD was injected in five rats, by rectal route – diverted segment - 2ml of a 0.9% saline solution in animals (A1 subgroup); in eight animals was inoculated, by rectal route, 2ml of a solution containing Escherichia coli ATCC 25922 (American Type Culture Collection), in a concentration of 108 Colony Forming Unit for milliliters (CFU/ml) - A2 Subgroup; in ten animals the same solution of E. coli was inoculated, in a concentration of 1011 CFU/ml (A3 Subgroup); and in eight animals was collected part of the mucus found in the diverted distal colonic segment for neutral sugars and total proteins dosage (A4 subgroup). The animals from the group B underwent the same procedures of group A, but with differences in the colostomy confection. Animals from subgroups A1, A2, A3, B1, B2, and B3, had had 2ml of blood aspirated from the heart and had taken fragments from mesocolon lymphnodes, liver, spleen, lung and kidney, for microbiological analysis, after their death. That analysis consisted of evidencing, in Petri dishes, containing agar-Mac Conkey as culture medium, the presence of Escherichia coli ATCC 25922 CFU. Mann-Whitney and Anova Tests were applied as analytic techniques for association of variables. The occurrence of BT was evidenced only in those animals in which inoculated concentration of Escherichia coli ATCC 25922, reached levels of 1011CFU/ml, i.e. in Subgroups A3 and B3, although, being significantly greater (80%) in those animals without colostomy (subgroup B3) when compared to the ones with colostomy (20%) from the subgroup A3 (P <0.05). Lung, liver and limphnode were the tissues with larger percentile of bacterial recovery, so much in subgroup A3, as in B3. Blood culture was considered positive in 60% of the animals from subgroup B3 and in 10% of those from subgroup A3 (p <0.05). There was greater concentration of neutral sugars, in subgroup A4 - mean 27.3mg/ml -, than in subgroup B4 - mean 8.4mg/ml - (P <0.05). It can be concluded that modifications in the architecture of intestinal mucosa in the DC, can cause alterations in the intestinal barrier, but it does not necessarily lead to an increased frequency of BT.

Orientador: Ladaslav Sodek / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T04:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_JoaoPauloFeijao_M.pdf: 8242174 bytes, checksum: 7dbbd82e78d8ea8081d23389cfd463bc (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: A dinâmica de acúmulo de substâncias de reserva nos grãos e os compostos responsáveis pelo transporte de nitrogênio para os frutos de soja Glycine Max (L.) Merrill ¿santa Rosa¿ em desenvolvimento forma avaliados em plantas cultivadas em campo de aumento no Centro Experimental de Campinas, Instituto Agronômico, nos anos agrícolas de 1978/79 e 1979/80. Coletaram-se semanalmente pedúnculos e frutos a partir de 15 dias após a floração (DAF) até a maturação dos grãos, determinando-se nesse material os teores de matéria seca, óleo, ácidos graxos, proteínas, carboidratos, ureídeos ¿ alantoína e ácidos alantóico ¿ e aminoácidos livres. Os resultados mostraram maior acúmulo de matéria seca, proteína e polissacarídeos no período de 44 a 65 DAF e de óleo entre 44 ¿ 81 DAF para 1978/79 e de matéria seca, óleo açucares solúveis e polissacarídeos de 30 a 43 DAF e de proteína de 30 a 49 DAF em 1979/80. Houve influência positiva de temperatura e negativa da precipitação pluvial na taxa de acúmulo de óleo nos grãos. Os ácidos graxos saturados, ao contrário nos insaturados, decresceram durante o desenvolvimento dos grãos. Os principais o compostos responsáveis pela translocação de nitrogênio das plantas de soja para os frutos foram ureídeos. Estimou-se que esses compostos contribuem com 53% do nitrogênio translocado, 26% através de alantoína e 27% de ácido alantóico ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The accumulation of seed storage reserves and the forms of nitrogen transport from the plants to the developing fruits were studie4d in soybeans Glycine Max (L.) Merrill. The experiment was conducted with the cultivar Santa Rosa growing in multipication plots at a the experimental Station of Campinas during the 1978/79 and 1979/80 cropping seasons. The first peduncle and fruits samples were taken 15 days after flowering (DAF) and then at 7 days intervals up to maturity. The samples were alalysed for dry matter, oil, fatty acids, proteins, carbohydrates, ureides (allantoin and allantoic acid) and free aminoacids. The highest dry matter, protein and polysaccharides accumulation occurred between 44 and 65 DAF and oil between 44 and 81 DAF in 1978/79. In 1979/80, the highest dry matter, oil, total sugars and polysaccharides accumulation occurred from 30 up to 43 DAF, and protein from 30 up to 49 DAF. The rate of seed oil accumulation was very influenced by climate. It decrease in rainy periods and increased at high temperatures. A decreased in saturated as opposed to unsaturated fatty acid contents was observed during seed development. Userid-N was the predominant form of N translocation from soybean plants to the fruits. It accounted form about 53% of the total nitrogen translocated, half of which as allantoin and half as allantoic acid ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2015-12-06T22:54:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) constitui um importante patotipo de E. coli envolvido com doença diarréica. EPEC é dividida em dois sub-grupos, EPEC típica (tEPEC), portadora do plasmídio EAF (EPEC adherence factor), e EPEC atípica (aEPEC), desprovida desse plasmídio. EPEC produz lesão attaching-effacing (A/E) em células intestinais, determinada por genes contidos no locus of enterocyte effacement (LEE). LEE codifica um sistema de secreção tipo 3 (SST3), a adesina de membrana externa Intimina e várias proteínas efetoras que incluem Tir (receptor translocado de intimina). Entre as amostras de aEPEC isoladas em nosso meio, aquelas pertencentes ao sorotipo O51:H40 têm sido as mais frequentes. Em estudo anterior, analisamos 11 amostras de E. coli do sorotipo O51:H40 que apresentavam a região LEE aparentemente completa, 70 por cento das quais foram capazes de produzir a lesão A/E, conforme indicado pela positividade em um teste in vitro, que avalia o acúmulo de actina decorrente da lesão A/E. Para ampliar o conhecimento do potencial enteropatogênico dessas amostras, neste estudo, foram investigadas diversas propriedades genotípicas e fenotípicas, bem como o comportamento in vivo de amostras selecionadas em coelho e em rato. Foram pesquisados genes recém descritos em E. coli (lpfA1, cifA, ldaG, espJ, toxB, espM e espT) e a ocorrência de fosforilação de resíduos de tirosina na molécula Tir, em cultivos de células HeLa e células intestinais diferenciadas T84. Os resultados obtidos confirmam que o sorotipo O51:H40 contém amostras com potencial enteropatogênico, uma vez que 75 por cento das amostras testadas produziram lesão A/E em alça ileal de coelhos in vivo. Além disto, a aEPEC 1711-4, como a tEPEC E2348/69, apresentou capacidade significativa de translocar a mucosa intestinal em ensaios de translocação bacteriana (TB) em ratos, sendo que a aEPEC 1711-4 provocou também danos à perfusão tecidual. A ausência de translocação observada com mutante defectivo na montagem do SST3 (1711-4:escN- ) sugeriu que proteínas efetoras secretadas são importantes para a ocorrência do fenômeno. Em conclusão, o sorotipo O51:H40 de E. coli compreende amostras potencialmente enteropatogênicas, a maioria das quais deve ser classificada como aEPEC; o sobrecrescimento de pelo menos uma amostra de aEPEC, em intestino de rato, pode levar à translocação e a danos à microcirculação sistêmica.. / Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) is an important pathotype of E. coli involved in diarrheal disease. EPEC is divided into two groups, typical EPEC (tEPEC), carrier of plasmid EAF (EPEC adherence factor), and atypical EPEC (aEPEC), devoid of the plasmid. EPEC produces injury attachingeffacing (A/E) in intestinal cells, determined by genes in the locus of enterocyte effacement (LEE). LEE encodes a type 3 secretion system (SST3), the outer membrane adhesin of Intimin and several effector proteins including Tir (translocated receptor for intimin). Among aEPEC strains of isolated in our midst, those belonging to serotype O51: H40 have been the most frequent. In a previous study, we analyzed 11 strains of E. coli of serotype O51: H40 that had an apparently LEE region complete, 70% of which were of them was able to produce the lesion A/E, as indicated by a positive in vitro assay, which assesses the accumulation of actin due to the injury A/E. To increase the knowledge of the enteropathogenic potential of these strains in this study, we investigated several genotypic and phenotypic properties and the behavior of strains selected in vivo in rabbit and rat. We studied genes recently described in E. coli (lpfA1, cifA, ldaG, espJ, toxB, espM and espT) and the occurrence of residues of tyrosine phosphorylation in Tir molecule in cultures of HeLa cells and T84 intestinal cells differentiated. The results confirm that serotype O51: H40 includes strains with enteropathogenic potential, since 75% of the strains tested produced lesion A/E in the rabbit ileal loop in vivo. Moreover, the aEPEC 1711-4/89, as tEPEC E2348/69, showed significant ability translocation of the intestinal mucosa in bacterial translocation (BT) assays in rats, and the aEPEC 1711-4/89 also caused damage to tissue perfusion. The lack of translocation observed with mutant defect in the assembly of SST3 (1711-4: escN- ) suggested that secreted effector proteins are important for the occurrence of the phenomenon. In conclusion, serotype O51:H40 of E. coli includes potentially enteropathogenic strain, most of which should be classified as aEPEC; the overgrowth of at least one strain of aEPEC in intestine of rats, can lead to damage to the translocation and systemic microcirculation. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O arroz é o alimento base para metade da população mundial. Entretanto, é uma fonte pobre em micronutrientes essenciais como Fe e Zn, que são removidos durante o processamento do grão para produção de alimento. Por essa razão, populações cujas dietas baseiam-se principalmente em arroz estão sujeitas à deficiência de Fe e Zn, que são as deficiências nutricionais mais comuns no mundo, afetando mais de dois bilhões de pessoas. Uma vez que as folhas-bandeira são uma das fontes de remobilização de metais para os grãos em desenvolvimento, a identificação dos mecanismos moleculares que contribuem no processo de transporte de metais das folhas-bandeira para os grãos pode ser útil em programas de biofortificação. Dessa forma, utilizamos duas abordagens diferentes para estudar esta questão. Primeiro, realizamos uma análise por hibridização subtrativa supressora (SSH) em folhas-bandeira de duas cultivares de arroz e isolamos 78 sequências induzidas no estágio de enchimento do grão (R5) em relação ao estágio de emergência da panícula (R3). A expressão diferencial de alguns genes selecionados (entre eles do fator de transcrição OsNAC5) foi confirmada por PCR quantitativo. Mostramos que a expressão de OsNAC5 é ativada em processos de senescência natural (envelhecimento) e induzida (escuro, aplicação de ABA, alta salinidade, frio e deficiência de Fe) e sua expressão não é afetada na presença de 6- benzilaminopurina (um inibidor de senescência) em condição de senescência induzida por escuro. A indução da expressão de OsNAC5 sob alta salinidade é abolida por nicotinamida, um inibidor dos efeitos do ABA. Este resultado e a presença de elementos cis-atuantes na região promotora do gene OsNAC5 sugere uma regulação dependente de ABA. Utilizando quatro diferentes cultivares de arroz, mostramos que a indução de OsNAC5 é maior e antecipada em folhas-bandeira e panículas de plantas da cultivar IR75862, que possui as maiores concentrações de Fe, Zn e proteínas nas sementes. Dessa forma, sugerimos que OsNAC5 é um fator de transcrição do tipo NAC dependente de ABA e associado à senescência, e sua função pode estar relacionada à remobilização de Fe, Zn e aminoácidos dos tecidos verdes para os grãos. Posteriormente, analisamos a expressão de 25 genes de arroz relacionados à homeostase de metais em folhas-bandeira de oito cultivares de arroz (com níveis contrastantes de Fe e Zn nos grãos) durante os estágios de emergência da panícula (R3) e enchimento do grão (R5). Nove destes genes (OsYSL6, OsYSL8, OsYSL14, OsNRAMP1, OsNRAMP7, OsNRAMP8, OsNAS1, OsFRO1 e OsNAC5) apresentaram correlação significativa entre os níveis de expressão em folhas-bandeira e as concentrações de Fe e Zn nas sementes. Assim, nosso estudo forneceu uma pequena lista de possíveis genes-alvo para manipulação da concentração de Fe e Zn em grãos de arroz. / Rice is the staple food for half of the world population. However, it is a poor source of essential micronutrients such as Fe and Zn, most of which are lost during grain processing for food production. For this reason, populations with monotonous diets consisting mainly of rice are especially prone to Fe and Zn deficiency, which are the most common and widespread nutritional disorders in the world, affecting more than 2 billion people. Since flag leaves are one of the sources of remobilized metals for developing seeds, the identification of the molecular players that might contribute to the process of metal transport from flag leaves to the seeds may be useful for biofortification purposes. In this way, we used two different appraches to address this issue. First, we conducted suppression subtractive hybridization (SSH) analysis in flag leaves of two rice cultivars and isolated 78 sequences up-regulated in flag leaves at the grain filling stage (R5) relative to the panicle exertion stage (R3). Differential expression of selected genes (including the OsNAC5 transcription factor) was confirmed by quantitative RT-PCR. We showed that OsNAC5 expression is up-regulated by natural (aging) and induced senescence processes (dark, ABA application, high salinity, cold and Fedeficiency) and its expression is not affected in the presence of 6-benzylaminopurine (a senescence inhibitor) under dark-induced senescence. Salt induction of OsNAC5 expression is abolished by nicotinamide, an inhibitor of ABA effects. This result and the presence of cis-acting elements in the promoter region of the OsNAC5 gene suggest an ABA-dependent regulation. Using four different rice cultivars, we showed that OsNAC5 up-regulation is higher and earlier in flag leaves and panicles of IR75862 plants, which have higher seed concentrations of Fe, Zn and protein. We suggest that OsNAC5 is a novel senescenceassociated ABA-dependent NAC transcription factor and its function could be related to Fe, Zn and amino acids remobilization from green tissues to seeds. We also analyzed the expression of 25 metal-related genes from rice in flag leaves of eight rice cultivars (showing contrasting levels of seed Fe and Zn) during panicle emergence (R3) and grain filling stage (R5). The expression level of nine of these genes (OsYSL6, OsYSL8, OsYSL14, OsNRAMP1, OsNRAMP7, OsNRAMP8, OsNAS1, OsFRO1 and OsNAC5) in flag leaves exhibited significant correlations with Fe and/or Zn concentrations in the seeds. In this way, our study has provided a short list of putative target genes to manipulate Fe and Zn concentrations in rice grains.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-01-07T08:08:29Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 385459 bytes, checksum: f1b68d6dade6f1f37952de2eeedf571a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-07T08:08:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 385459 bytes, checksum: f1b68d6dade6f1f37952de2eeedf571a (MD5) Previous issue date: 2015-07-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O selênio (Se) é elemento traço essencial às funções do corpo humano, como controle do metabolismo de hormônios e de doenças cardiovasculares, prevenção da doença de Kashin-Beck, além de ter ação anticarcinogênica. Os teores de selênio (Se) nas plantas estão relacionados com a disponibilidade deste elemento no solo e a capacidade de absorção e acúmulo pelas plantas. Com intuito de produzir alimentos nutricionalmente mais completos e saudáveis para consumo humano e animal, uma estratégia utilizada é a biofortificação. Assim, objetivou-se avaliar doses e formas de aplicação de Se para fortificar tubérculos de batata. Os experimentos foram conduzidos em casa de vegetação, em vasos de 8 dm-3 de solo e selenato de sódio como fonte de Se. O delineamento foi o inteiramente aleatorizado com cinco repetições e os tratamentos consistiram de cinco doses via solo (0; 0,12; 0,25; 0,50 e 1,0 mg dm -3de Se) e cinco concentrações via foliar (0; 0,10; 0,21; 0,31 e 0,42 % de Se). Foram avaliados sintomas de fitotoxicidade, alterações fisiológicas ou morfológicas nas plantas, produtividade, variáveis fotossintéticas, atividade antioxidante total nos tubérculos e teores de Se no solo, parte aérea e nos tubérculos de batata. A aplicação de Se via solo não influenciou as variáveis fotossintéticas, o crescimento das plantas e a produção de tubérculos. Por outro lado, a aplicação foliar causou fitotoxidade nas folhas e redução na produção e na matéria seca de tubérculos. A atividade antioxidante total nos tubérculos não apresentou diferença entre os tratamentos. A aplicação de Se, independente da forma de aplicação e dose testada, não apresentou efeito significativo quanto aos teores de P, Mg, Zn, Cu, Fe e Ca nos tubérculos. Entretanto, observaram-se diferenças significativas quanto ao teor de Se nos tubérculos, em ambas as formas de aplicação e nas menores doses testadas. Os tubérculos de batata são capazes de acumular Se de maneira eficiente e a parte aérea das plantas transloca este elemento para os tubérculos, mesmo sob níveis severos de fitotoxidade. Palavras chave: Solanum tuberosum, translocação, nutrição humana. / Selenium (Se) is an essential trace element the human body functions such as hormone metabolism and control of cardiovascular diseases, prevention of Kashin-Beck disease, and have anticarcinogenic action.The levels of Se in the plant are related to the availability of this element in the soil and the ability to uptake and accumulation, of plants. Aiming to produce more nutritionally complete and healthy foods for human consumption and animal, a strategy used is biofortification. This experiment aimed to evaluate doses and Se application forms able to fortify potato tubers. The experiments were conducted in greenhouse, in pots of 8 dm-3 of soil and sodium selenate as a source of Se. The design was completely randomized with five replications and the treatments consisted of five doses in the soil (0; 0.12; 0.25; 0.50 and 1.0 mg dm-3 Se) and five foliar concentrations (0; 0.10; 0.21; 0.31 and 0.42 % of Se). Were evaluated phytotoxicity symptoms, physiological or morphological changes in plants, productivity, photosynthetic variables, total antioxidant activity in the tubers and Se levels in the soil, shoot and potato tubers. The use of Se in the soil did not affect the photosynthetic variables, the growth of plants and tuber yield. Moreover, foliar application caused phytotoxicity on leaves and reduction in dry matter production and tubers. The total antioxidant activity in the tubers showed no difference between treatments. Applying Se, regardless of the form of application and dose tested, no significant effect as the P, Mg, Zn, Cu, Fe and Ca contents in tubers was observed. However, there were significant differences in the Se content of tubers in both application forms and in smaller doses tested. The potato tubers are able to accumulate Se efficiently and the shoot translocates this element to the tubers, even with severe levels of phytotoxicity. Keywords: Solanum tuberosum, translocation, human nutrition.