Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T19:43:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pollice_ErikaLourenco_D.pdf: 2177498 bytes, checksum: 0cac25634d3fc74eb0d114647ac766a7 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A fenilcetonúria (PKU) é uma doença autossômica recessiva que na sua forma clássica é causada pela deficiência da enzima hidroxilase da fenilalanina (PAH), cuja função é catalisar a reação de hidroxilação da fenilalanina em tirosina. Uma alteração no gene da PAH leva a deficiência de hidroxilase da fenilalanina. O diagnóstico precoce é de suma importância, uma vez, que se não tratada, pode ocasionar retardo mental. A dieta pobre em fenilalanina previne esse retardo, tornando o diagnóstico precoce fundamental. Mais de 500 mutações que causam algum grau de hiperfenilalaninemia foram descritas no gene PAH. O conjunto e freqüências das mutações variam conforme a população. A população brasileira apresenta mistura étnica complexa, a freqüência das mutações varia muito conforme a região estudada. No Brasil, foram estudadas amostras de São Paulo (SP) e Rio Grande do Sul (RS) e Minas Gerais (MG). A grande variação observada nos níveis de fenilalanina nos primeiros meses de vida e sua correlação diminuída com o diagnóstico aponta para o seu valor prognóstico baixo, reforçando a necessidade da triagem de mutações. Este estudo teve como objetivo investigar as mutações mais freqüentes e estabelecer o perfil gênico de pacientes com PKU diagnosticados em serviços de triagem neonatal e que estejam em acompanhamento no Serviço Regional de Triagem Neonatal da UNICAMP. Foram analisadas as mutações V388M, IVS10nt11, IVS12nt1, R408W, através da técnica de PCR e digestão com enzima de restrição específica. Nos casos onde não foi detectada nenhuma dessas mutações, foi realizada a técnica de DHPLC com posterior sequenciamento dos pacientes com padrão de eluição alterado. As mutações R408W, IVS10-11G?A, IVS12+1G?A e V388M, não foram encontradas com grande freqüência em nossa amostra de fenilcetonúricos da região de Campinas. As demais mutações identificadas foram bem variadas. Os pacientes analisados neste trabalho possuem um perfil gênico distinto de indivíduos pertencentes a outras regiões do Brasil e relatados na literatura, refletindo na grande miscigenação existente na população brasileira / Abstract: Phenylketonuria (PKU) is an autosomal recessive genetic disorder caused by deficiency of the hepatic phenylalanine-4-hydroxylase (PAH), which catalyzes hydroxylation of phenylalanine to tyrosine. Deficiency of PAH is caused by mutations in the PAH gene, resulting in high serum levels of phenylalanine and mental retardation. Restriction of phenylalanine intake prevents neurological impairments of PKU. Mutation screening of PAH gene is a very useful strategy for accurate diagnosis, newborn phenotype prediction and to implement a dietary without phenylalanine. To date, almost 500 mutations have been identified in the PAH gene. The PAH mutation frequency could change with the studied population. The Brazilian population is compound by a great ethnic variation and the PAH mutation frequency could be very different depending on witch Brazilian region was studied. Previous studies in Brazilian patients were performed at São Paulo (SP), Rio Grande do Sul (RS) and Minas Gerais (MG) and the mutation frequency can be changed according to the population studied. The aim of this work was to analyze the most frequent PAH mutations previously described in other populations and determine the PKU molecular characterization in patients identified in the neonatal service of the Regional Newborn Screening Service/Campinas. The V388M, IVS10nt11, IVS12nt1 and R408W mutations were analyzed by PCR and RFLP. In addition, DHPLC and automatic sequencing were performed for patients whose initial screening was negative. Any of the R408W, IVS10-11G?A, IVS12+1G?A and V388M mutations was found in great frequency in our sample from Campinas region. The other mutations that could be detected in this sample were diversified. The genetic characteristics in these patients were different than others Brazilian populations / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Submitted by Kamila Costa (kamilavasconceloscosta@gmail.com) on 2015-06-26T21:27:43Z No. of bitstreams: 1 Dissertação-Chanderlei de C Tavares.pdf: 3598034 bytes, checksum: ec1ae92c404be1c0901e86af54432f90 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-10T14:09:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação-Chanderlei de C Tavares.pdf: 3598034 bytes, checksum: ec1ae92c404be1c0901e86af54432f90 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-10T14:12:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação-Chanderlei de C Tavares.pdf: 3598034 bytes, checksum: ec1ae92c404be1c0901e86af54432f90 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-10T14:12:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação-Chanderlei de C Tavares.pdf: 3598034 bytes, checksum: ec1ae92c404be1c0901e86af54432f90 (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Eschweilera ovalifolia (DC.) Nied. is a plant native to Brazil but, not endemic. Can be found in the stat of Amazonas and in countries that are parts of the international Amazon. Popularly known as castanharana (Brazil) and machimango (Peru), it is a unique tree periodically flooded region, reaching approximately 20-30 m in height. The aim of this work was the chemical study of the hexane extract of the leaves branches and fruits Eschweilera ovalifolia (DC) Nied. (Lecythidaceae), collected in Maués-AM. For both, samples were dried in an oven circulating air and milled in order to obtain the hexane extracts. Phytochemical screening was performed on hydroalcoholic and 20% aqueous extracts of the organs studied. The hexane extract of the leaves was fractionated by column chromatography (CC) and the crude extract and its fractions were analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS), while the hexane extracts of branches and fruits were analyzed directly GC-MS. Phytochemical screening suggested that there are differences in chemical composition between the organs of the plant under study, moreover, suggested the absence of coumarins and anthraquinones for all organs studied. After analysis by GC-MS were identified hydrocarbons, fatty acids, sesquiterpenes, diterpenes, triterpenes and tocopherols in nonpolar extracts of leaves, branches and fruit. Therefore, chemically parts studied showed no dramatic diferences. / Eschweilera ovalifolia (DC) Nied. (Lecythidaceae) é uma planta nativa do Brasil, porém não endêmica. Pode ser encontrada no estado do Amazonas e em países que fazem parte da Amazônia internacional. Popularmente conhecida como castanharana (Brasil) e machimango (Peru), é uma árvore exclusiva de região periodicamente alagada, podendo atingir aproximadamente de 20-30 m de altura. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar o estudo químico do extrato hexânico das folhas, galhos e frutos de E. ovalifolia, coletada em Maués-AM. Para tanto, as amostras foram secadas em estufa de ar circulante e trituradas, a fim de se obter os extratos hexânicos. Triagem fitoquímica foi realizada sobre extratos hidroalcoólico e aquoso a 20% dos órgãos estudados. O extrato hexânico das folhas foi fracionado por cromatografia em coluna aberta (CC) e o extrato bruto e suas frações analisaram-se por cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas (CG-EM), enquanto que os extratos hexânicos dos galhos e frutos foram analisados diretamente por CG-EM. A triagem fitoquímica sugeriu haver diferenças na constituição química entre os órgãos do vegetal em estudo, além disso, sugeriu ausência de cumarinas e antraquinonas para todos os órgãos estudados. Após análise por CG-EM foram identificados hidrocarbonetos, ácidos graxos, sesquiterpenos, diterpenos, triterpenos e tocoferóis nos extratos apolares das folhas, galhos e frutos. Portanto, quimicamente as partes estudadas não apresentaram diferenças drásticas.

INTRODUÇÃO: O diagnóstico do estado nutricional por rastreamento e avaliação nutricional permite detectar desnutrição e se associa com desfechos clínicos negativos em pacientes adultos hospitalizados. OBJETIVO: Identificar o teste mais adequado para avaliação de risco e estado nutricional em relação a desfechos clínicos negativos em pacientes adultos hospitalizados; e investigar a complementaridade existente entre os testes de rastreamento (NRS 2002) e avaliação nutricional (SGA). MÉTODOS: Estudo prospectivo, sequencial, não intervencionista, realizado em 705 pacientes adultos de ambos os sexos, de distintas enfermarias, no Instituto Central do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Em até 48 horas da admissão aplicou-se em todos os pacientes quatro testes de rastreamento e avaliação nutricional (NRS 2002: Triagem de Risco Nutricional 2002, MUST: Triagem Universal de Risco Nutricional, MNA-SF: Mini Avaliação Nutricional Reduzida, e SGA: Avaliação Subjetiva Global). Os pacientes foram seguidos até o desfecho final, obtendo-se as intercorrências clínicas de complicações, tempo de internação prolongado e mortalidade. Analisou-se o desempenho de todos os testes por curvas ROC (Receiver Operating Characteristic Curve) e razão de verossimilhança (LR). Verificou-se a complementaridade entre NRS 2002 e SGA por regressão logística e o número necessário de pacientes a avaliar para encontrar um desfecho negativo (NNS). RESULTADOS: NRS 2002 detectou 27,9% (n=197) de risco nutricional, MUST 39,6% (n=279), MNA-SF 73,2% (n=516) e SGA indicou 38,9% de desnutrição moderada e grave (n=274). Os testes NRS 2002 e SGA mostraram melhor desempenho em predizer desfechos clínicos negativos que MUST e MNA-SF pela curva ROC. NRS 2002 apresentou LR positiva maior que os demais testes para todos os desfechos clínicos. Segundo a regressão logística, 13% (IC 10,0- 17,0%) dos doentes podem ter tempo de internação prolongado, 9% (IC 7,0- 12,0%) complicação moderada ou grave e 1% (IC 0,3 - 2,1%) mortalidade. Para tempo de internação prolongado, os pacientes desnutridos por SGA, classe B (SGA B) aumentam esta probabilidade em 1,9 vezes (IC 1,2-3,2 vezes, p=0,008) e SGA classe C (SGA C) em 3,8 vezes (IC 2,0-7,2 vezes, p<0,0001). Para pacientes em risco nutricional por NRS 2002 (NRS+), a probabilidade de complicação moderada e grave aumenta em 1,9 vezes (IC 1,1-3,5 vezes, p=0,03), em 1,9 vezes (IC 1,1-3,4 vezes, p=0,02) para doentes SGA B e em 17,8 vezes (IC 1,4-5,8 vezes, p=0,003) para doentes SGA C. A probabilidade para mortalidade aumenta em 3,9 vezes (IC 1,2- 13,1 vezes, p=0,03) para pacientes NRS+. O NNS calculado para todos os desfechos clínicos negativos em pacientes NRS+ & SGA C (em risco nutricional por NRS 2002 e desnutridos graves pela SGA) foi menor que para os testes isolados. CONCLUSÕES: NRS 2002 é o melhor teste de rastreamento nutricional. A aplicação de SGA em doentes sob risco nutricional por NRS 2002 aumenta a capacidade de predição de desnutrição em relação a desfechos clínicos negativos. / INTRODUCTION: The diagnosis of nutritional status by nutritional screening and assessment tools detects malnutrition and is associated with negative clinical outcomes in adult hospitalized patients. OBJECTIVE: To identify the most appropriate tool for analysis of nutritional risk and malnutrition in relation to adverse clinical outcomes in adult hospitalized patients, and to investigate the complementarity of the nutritional screening (NRS 2002) and nutritional assessment (SGA) tests. METHODS: A prospective, sequential, non-interventional study, conducted in 705 adult patients of both sexes, from different wards in the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Within 48 hours of admission, all the patients were submitted to four nutritional screening and assessment tests (NRS 2002: Nutritional Risk Screening 2002, MUST: Malnutrition Universal Screening Tool, MNA-SF: Mini Nutritional Assessment Short Form and SGA: Subjective Global Assessment). Patients were followed until the final outcome, obtaining clinical outcomes of complications, length of hospital stay and death. The performance of the tests was analyzed by the ROC (Receiver Operating Characteristic) curve and likelihood ratio (LR). The complementarity of screening and assessment tools was analyzed by logistic regression, and the number of patients required to screen was obtained by calculating the number needed to screen (NNS). RESULTS: NRS 2002 detected 27.9% (n = 197) of nutritional risk, MUST 39.6% (n = 279), MNA-SF 73.2% (n = 516), and SGA detected moderate or severe malnutrition in 38.9% of the patients (n = 274). NRS 2002 and SGA had a better performance in predicting adverse clinical outcomes than MUST and MNA-SF confirmed by ROC curve. NRS 2002 had higher positive LR compared to the other tests for all the clinical outcomes. According to the logistic regression analysis, 13% (CI 10.0-17.0%) of the patients may have length of hospital stay, 9% (CI 7.0-12.0%) moderate or severe complications and 1% (CI 0.3 - 2.1%) mortality. For length of hospital stay, malnourished patients by SGA, class B (SGA B) increase this probability in 1.9 times (CI 1.2-3.2 times, p = 0.008) and SGA class C (SGA C) in 3.8 times (CI 2.0-7.2 times, p <0.0001). For patients nutritionally at risk by NRS 2002 (NRS +), the probability of moderate and severe complication increase in 1.9 times (CI 1.1-3.5 times, p = 0.03), in 1.9 times (CI 1.1-3.4 times, p = 0.02) for SGA B patients and 17.8 times (CI 1.4-5.8 times, p = 0.003) for SGA C patients. The probability of mortality increase in 3.9 times (CI 1.2-13.1 times, p = 0.03) for NRS+ patients. The NNS calculated for all adverse clinical outcomes in patients NRS+ & SGA C (at nutritional risk by NRS 2002 and severe malnourished by SGA), was lower than for the test separately. CONCLUSIONS: NRS 2002 is the best test for nutritional risk screening. The application of SGA in nutritionally at risk patients by NRS 2002 increases the predictive capacity of malnutrition in relation to adverse clinical outcomes.

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2017-12-20T18:15:26Z No. of bitstreams: 1 fabianasantossilvabittencourt.pdf: 2189252 bytes, checksum: 4b5feb8512efd1ad20a4d234e11cad83 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-12-21T10:40:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fabianasantossilvabittencourt.pdf: 2189252 bytes, checksum: 4b5feb8512efd1ad20a4d234e11cad83 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-21T10:40:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fabianasantossilvabittencourt.pdf: 2189252 bytes, checksum: 4b5feb8512efd1ad20a4d234e11cad83 (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / O presente projeto objetivou validar e avaliar o desempenho de produtos comerciais para triagem de resíduos de antibióticos em amostras de leite bovino cru, conforme a Decisão 2002/657/CE da União Européia, que constitui parte dos requerimentos de avaliação de desempenho e validação de ensaios analíticos estabelecidos pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. O escopo e as referências para limites máximos de resíduos (LMR) dos analitos ensaiados observaram a integridade do Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes aplicável à matriz leite (PNCR-Leite), que abrange cinco grupos de analitos (beta-lactâmicos, tetraciclinas, sulfonamidas, anfenicóis e quinolonas), totalizando 30 analitos examinados. Avaliaram-se produtos específicos da linha Charm® ROSA® (Rapid One Step Assay, ou ensaio rápido em uma etapa), baseados em reação com imunoreceptores para cada um dos cinco grupos relevantes de analitos, bem como o produto baseado em inibição de microrganismo indicador, o Charm® CowSideII®. Os resultados indicam que os produtos da linha Charm® ROSA® foram capazes de detectar satisfatoriamente 26 dentre os 30 analitos constantes do escopo do PNCR-Leite, ao passo que o produto Charm® CowSideII® foi capaz de detectar satisfatoriamente 17 analitos. De fato, os valores para capacidade de detecção (CCβ, com β=5%) dos produtos Charm® ROSA® para os 26 analitos foram, em sua maioria (20 em 26), iguais ou menores que metade do respectivo LMR. Resultados similares foram obtidos para os 17 analitos satisfatoriamente determinados pelo Charm® CowSideII®. Os produtos Charm® ROSA® também apresentaram características de seletividade/especificidade consistentemente satisfatórias, podendo inclusive (com exceção do Charm® Chloroamphenicol Test®), ser empregados em amostras de leite cru adicionadas dos conservantes Azidiol® ou Bronopol®, conforme rotineiramente recebidas nos laboratórios da RBQL, tutelada pelo MAPA. Entretanto, tais conservantes adicionados ao leite branco qualificado podem gerar resultados falsos não conformes quando do uso do produto Charm® CowSideII®, o que inviabiliza seu emprego em amostras adicionadas de qualquer um dos referidos conservantes. Os resultados para os ensaios de robustez dos produtos frente a pequenas alterações de sete variáveis de teste mostraram-se majoritariamente satisfatórios para todos os produtos testados. Entretanto, os dados experimentais sugerem, em especial, que deve ser evitado o emprego dos produtos de teste em amostras de leite apresentando acidez titulável elevada a 18°D, ou contendo teor de gordura elevado, próximo a 6%. Essas recomendações reforçam a necessidade de observância elementar de adequada uniformização do leite antes da amostragem, bem como emprego de leite de razoável qualidade para triagem de resíduos de antibióticos. Coletivamente, as evidências obtidas no presente estudo permitem indicar a inserção educada e inteligente dos ensaios comerciais de triagem, examinados, visando suplementar e potencializar a agenda nacional oficial já existente para controle de resíduos de antibióticos no leite brasileiro, contribuindo com as políticas nacionais de segurança de alimentos e de saúde pública. / The present study sought to validate and to assess the performance of commercial screening tests for antibiotic residues in raw, commingled bovine milk according to The Decision 2002/657/EC of the European Community, which is part of the requirements for performance evaluation and validation of established analytical tests by the Brazilian Ministry of Agriculture, Animal Production and Food Supply (MAPA). In particular, its National Residue Control Plan (PNCR-Milk) was fully observed to define the scope of this study and the references for Maximum Residue Limits (MRL) for each analyte. Thus, five analyte groups were covered (beta-lactams, tetracyclines, sulfonamides, amphenicols and quinolones), yielding 30 PNCR-Milk analytes being examined. Five products belonging to the Charm®ROSA® product line (Rapid One Step Assay, based on immunoreceptors) were assessed, each covering one of the five analyte groups. Also evaluated was the Charm® CowSideII®, a product based on a sensitive indicator microorganism. Results indicate that the products under the Charm® ROSA® line could satisfactorily screen for 26 out of 30 PNCR-Milk analytes, whereas Charm® CowSideII® could satisfactorily screen for 16 PNCR-Milk analytes. In fact, detection capability (CCβ, with β=5%) values for Charm® ROSA® products based on the 26 analytes were for the majority of the cases (20 out 26) equal to, or less than, 0.50 of the respective MRL. Similar performance was obtained for the 17 analytes that were satisfactorily detected by Charm® CowSideII®. Charm® ROSA® products also showed consistent, adequate specificity/selectivity characteristics; furthermore, all products - but the Charm® Chloroamphenicol Test® - can reliably screen milk samples containing the preservatives Azidiol® or Bronopol®, which are generally adopted by the RBQL laboratories’ overseen by MAPA. However, qualified milk samples containing such preservatives yielded false non-compliant results when tested with Charm® CowSideII®. This evidence should preclude the use of Charm® CowSideII® to screen for antibiotic residues in samples containing one of these preservatives. Results for test robustness under small changes of seven test variables were mostly adequate for all products tested. Nonetheless, experimental data support our recommendation to avoid the testing of milk samples showing increased titratable acidity (18°D), or increased fat content (ca. 6%), and, notably, this finding further reinforces the fundamental need to ensure adequate milk agitation prior to sampling, in addition to using milk of fair quality when screening for antibiotic residues. Collectively, the body of evidence hereby generated support an indication for the intelligent, educated insertion of the assessed commercial screening test products to supplement the existing national residue and chemical contaminants control framework for Brazilian milk, as a contribution to national policies in food safety and public health.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Por ser de interesse à saÃde pÃblica, o teste do reflexo vermelho, tambÃm conhecido como teste do olhinho, vem se firmando como estratÃgia de prevenÃÃo da cegueira infantil com participaÃÃo multiprofissional, particularmente do enfermeiro. Tecnologias aplicadas a esse contexto devem ser estimuladas com vistas a ser utilizadas como ferramentas integrantes de atuaÃÃo profissional com a finalidade de facilitar e melhorar a qualidade da assistÃncia. Objetivou-se avaliar um gradiente de cores direcionado para a avaliaÃÃo do teste do reflexo vermelho em recÃm-nascidos quanto à validade de conteÃdo e de aparÃncia, verificar a confiabilidade interobservadores na aplicaÃÃo da tecnologia desenvolvida e investigar a opiniÃo dos enfermeiros quanto à aplicabilidade do instrumento apÃs a experiÃncia da sua utilizaÃÃo. Trata-se de uma pesquisa metodolÃgica, quantitativa, cuja coleta de dados ocorreu de maio a agosto de 2010 em duas etapas metodolÃgicas. Na primeira, a tecnologia proposta foi analisada por trÃs juÃzes especialistas, os quais, por meio de um questionÃrio de avaliaÃÃo na forma de escala Likert, opinaram sobre aspectos relacionados aos objetivos, estrutura e apresentaÃÃo, aparÃncia e relevÃncia. Para emitir suas opiniÃes, os especialistas responderam aos itens avaliativos entre cinco nÃveis de respostas: Totalmente adequado; Adequado com pequenas ressalvas; Parcialmente adequado, Inadequado; NÃo se aplica. ApÃs a anÃlise dos especialistas e inclusÃo das sugestÃes à tecnologia avaliada, na segunda etapa buscou-se averiguar a confiabilidade entre os examinadores na aplicaÃÃo do gradiente de cores para avaliaÃÃo do teste do reflexo por enfermeiros. Para isso, uma amostra constituÃda por sessenta recÃm-nascidos internados na unidade neonatal de baixo risco de uma maternidade pÃblica de referÃncia, em Fortaleza, foi avaliada por dois examinadores (a pesquisadora e um enfermeiro) de modo simultÃneo e independente. Os dados receberam tratamento descritivo e com o auxÃlio do PASW versÃo 18.0 calculou-se a confiabilidade do gradiente de cores por meio do coeficiente de correlaÃÃo intraclasse. A tecnologia recebeu ajustes atà sua aprovaÃÃo, em duas etapas de avaliaÃÃo. Sobre as avaliaÃÃes de conteÃdo e aparÃncia, foi consenso entre os especialistas o julgamento quanto ao excesso de quantidade de gradientes, a sugestÃo de retirar as nuances de cores muito prÃximas, como tambÃm de rever aquelas com o centro esbranquiÃado, pois poderiam ser confundidas com reflexo alterado. Sugeriu-se o acrÃscimo de uma nova nuance de cor e a complementaÃÃo no tÃtulo da tecnologia da expressÃo gradiente de cores do teste do olhinho. A maioria das respostas dos juÃzes ficou entre totalmente adequado e adequado com pequenas ressalvas. Os juÃzes especialistas consideraram a tecnologia desenvolvida um recurso didÃtico complementar à prÃtica do teste do reflexo vermelho e Ãtil no treinamento de profissionais para a realizaÃÃo do teste. Observaram-se bons Ãndices de confiabilidade (0,928 e 0,894) estimados pelo coeficiente de correlaÃÃo intraclasse. Diante das consideraÃÃes, o gradiente de cores mostrou-se uma tecnologia vÃlida para ser adotada como um recurso facilitador para a aprendizagem sobre o teste e aplicÃvel à prÃtica do cuidado em saÃde ocular como ferramenta complementar. Espera-se que a aplicaÃÃo do conhecimento adquirido nesse estudo proporcione impacto positivo na divulgaÃÃo e realizaÃÃo do teste do reflexo vermelho. / Due to its relevance for public health, the red reflex test, also known as little eye test, has become an established strategy to prevent infant blindness within a multi professional team work, involving the nurse in particular. Applied technologies in this context constitute a useful tool for the professional and their use has to be stimulated aiming the assistance improvement. The main goal of this work is to assess a color gradient projected to measure the red reflex test in newborns regarding contents and appearance validation, accordance among different observers and nurseâs opinion on the tool applicability after its use. This is a methodological research, quantitative, whose data acquisition happened between May and August 2010 in two methodological steps. Firstly, the proposed instrument was analyzed by three judges. These specialists gave their opinions by means of an evaluation questionnaire in the Likert scale format. The survey covered subjects like goals, structure and presentation, appearance and relevance. In order to quantify their opinions, the answers were restricted to five levels: Absolutely adequate; Adequate with little observations; Partially adequate; Inadequate; It does not apply. In the second step, after collecting the answers and taking into account suggestions from the specialists, we checked the test accordance among different nurses in the color gradient application top the red reflex test. This was made by using a sixty newborns sample. These neonates were in the low risk neonatal sector of a reference public maternity hospital in Fortaleza. Each newborn was examined by two examiners (the researcher and a nurse) simultaneously and independently. The data were treated within PASW 18.0 software. The gradient reliability was calculated by means of the intraclass correlation coefficient. Adjustments were applied to the instrument until its approval. Regarding the contents and appearance evaluation, the judges agreed about the excessive number of gradient colors and they suggested the elimination of several similar patterns. They also recommended to reconsider those patterns with a white center since they could be confused with an altered reflex. Additional suggestions from the specialists pointed to the inclusion of a new color in the instrument as well as a new title to the gradient: color gradient for the little eye test. Most of the answers from the judges were between Absolutely adequate and Adequate with little observations. The specialists considered the developed technology as a complimentary to the practice of the red reflex test, as well as a useful tool for training of professionals to do this test. Good reliability indices were observed (0,928 e 0,894). Such numbers were estimated by the intraclass correlation coefficient. After these considerations, the color gradient was shown to be a valid technology suitable to be considered as a pedagogical tool and as a useful additional instrument on the visual health care. It is expected that the knowledge constructed in this work results in a positive impact on the red reflex test propagation and application.

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2016-11-10T10:37:56Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Uessiley Ribeiro Barbosa - 2016.pdf: 3901383 bytes, checksum: f52c92a81d289db26f933d75a30e8788 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-11-10T17:48:40Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Uessiley Ribeiro Barbosa - 2016.pdf: 3901383 bytes, checksum: f52c92a81d289db26f933d75a30e8788 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-10T17:48:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Uessiley Ribeiro Barbosa - 2016.pdf: 3901383 bytes, checksum: f52c92a81d289db26f933d75a30e8788 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-10-04 / The Paracoccidioides brasiliensis (Pb) is a thermo-dimorphic fungus described as the etiological agent of paracoccidioidomycosis (PCM), an important systemic mycosis in Latin America. The isocitrate lyase (ICL) is an enzyme involved in glyoxylate cycle, an alternative pathway to Krebs cycle, which has been described in fungi, bacteria and plants. The absence of this enzyme in mammals makes it an interesting target for design of specific antifungal compounds for PCM. In this work, we use in silico methods like homology modeling, molecular dynamics and virtual screening, aiming the development of inhibitors compounds for PbICL enzyme in the absence and presence of cofactor and positive control. From a molecular docking protocol, it was possible to select promising compounds by criteria of affinity and efficiency based on screening of natural products. Two regions were selected for molecular docking, one involving a region already known by the binding of argentilactona inhibitor and another region involving the cofactor Mg 2+, a possible catalytic site of ICL. All compounds selected by affinity criteria had more than 80% of success rate in achieving lower energy and allowed to describe common residues within the protein interaction for the target sites. The structural quality parameters are significantly improved after 100 ns of simulation. The structure of PbICL and PbICL with magnesium show all quality parameters as acceptable to define them as highresolution structures. All selected compounds show aromatic chains with the possibility of being a pharmacophore, which is essential for biological activity. Another interesting aspect is that, through the selected compounds, it was possible to describe structural patterns related to the ligand specificity, that might be promising for a basic chemical sketch for rational drug design. / O Paracoccidioides brasiliensis (Pb) é um fungo termo-dimórfico descrito como agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM), uma micose sistêmica importante na América Latina. A Isocitrato liase (ICL) é uma enzima envolvida no ciclo do glioxilato, uma via do ciclo Krebs já descritos em fungos, bactérias e plantas. Sua ausência em mamíferos faz dessa enzima, um alvo interessante para o desenho de compostos antifúngicos específicos para a PCM. Neste trabalho, utilizamos métodos in silico como modelagem por homologia, dinâmica molecular e triagem virtual na busca de compostos inibidores para enzima isocitrato liase de P brasilienses (PbICL) na ausência e presença do cofator e com a seleção de controle positivo. A partir de um protocolo de ancoragem molecular, foi possível selecionar compostos promissores por critérios de afinidade e eficiência a partir de triagens virtuais com produtos naturais. Duas regiões foram selecionadas para a ancoragem molecular, uma envolvendo uma região já conhecida pela ligação do inibidor argentilactona e outra envolvendo a região de ligação do cofator Mg2+ , posicionada no possível sítio catalítico da enzima. Todos os compostos selecionados pelo critério de afinidade tiveram mais do que 80% de sucesso em alcançar a mais baixa energia e permitiram descrever resíduos frequentes na interação proteína-inibidor para sítios alvo da enzima. Os parâmetros de qualidade da estrutura são sensivelmente melhorados após 100 ns de simulação. As estruturas de PbICL e PbICL com Mg2+ apresentam todos os parâmetros dentro do aceitável para defini-la como estrutura de alta resolução. Todos os compostos selecionados apresentaram cadeias aromáticas com possibilidade de ser um grupo farmacofórico, o qual é essencial para a atividade biológica. Outro aspecto interessante é que através dos compostos selecionados foi possível descrever padrões estruturais relacionados à especificidade do composto, os quais podem vir a ser promissores para um esqueleto básico no desenho racional de fármacos.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-01-02T16:51:48Z No. of bitstreams: 2 Tese - Bruno Junior Neves - 2016.pdf: 19331549 bytes, checksum: a7cd8b65a0a68a6cc99718604d4a6aa4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-03T09:47:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Bruno Junior Neves - 2016.pdf: 19331549 bytes, checksum: a7cd8b65a0a68a6cc99718604d4a6aa4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-03T09:47:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Bruno Junior Neves - 2016.pdf: 19331549 bytes, checksum: a7cd8b65a0a68a6cc99718604d4a6aa4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-11-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Schistosomiasis is a serious endemic disease caused by trematodes of the genus Schistosoma. Currently the control of this disease is based solely on the administration of praziquantel. However, its extensive use has raised concerns about the emergence of resistant worms and the need of discovering new anti-schistosomal drugs. Given the above, the main goal of this study was to design new S. mansoni thioredoxin glutathione reductase (SmTGR) inhibitors showing antischistosomal activity through cheminformatics tools and to repurpose new drugs for schistosomiasis employing bioinformatics tools. At the stage of drug design, binary QSAR models were constructed and validated to predict inhibitory activity of SmTGR, a validated target in schistosomes. From the individual models, consensus and consensus rigor models and were generated (CCRs = 0.87 and 0.91, respectively) and used for the virtual screening of 150,000 compounds. At the end of this process, 29 compounds were prioritized and purchased for biological evaluation. As a result, two new hits representing new molecular scaffolds showed EC 50 ≤ 3.5 µM to schistosomula and ≤ 6.0 µM for adult female worms, low cytotoxicity against WSS-1 mammalian cells (IC50 > 16 µM) and low reactivity with cysteine proteases (IC50 > 100 µM). In the second part of this work, that is drug repositioning, 2,114 proteins of S. mansoni were used in a search for orthologs in therapeutic drug target databases (DrugBank, TTD and STITCH). As a result, 215 drugs were predicted to interact with 49 schistosome proteins, of which 47 had already anti-schistosomal activity reported in the literature. Then, principal component analysis (PCA) and k-means showed that 115 drugs were in the chemical space of known anti-schistosomal agents, increasing the overall confidence of predictions. Among them, paroxetine (PAR), an antidepressant drug predicted to inhibit serotonin transporter proteins of S. mansoni (SmSERTs) presented antischistosomal activity against schistosomula (EC50 = 2.5 µM) and adult worms (EC50 = 5.1 µM and 9.9 µM for males and females respectively) of S. mansoni. Lastly, molecular docking studies with SmSERT-A and its ortholog in humans (hSERT) explored the molecular basis for antischistosomal activity of PAR and provided information for the design of more potent and selective analogs. / A esquistossomose é uma doença endêmica grave causada por trematódeos do gênero Schistosoma. Atualmente o controle desta doença é baseado exclusivamente no uso do fármaco praziquantel. Todavia, seu uso extensivo tem levantado a preocupação quanto ao surgimento de vermes resistentes e a necessidade de descobrir novos fármacos esquistossomicidas. Face ao exposto, o objetivo deste trabalho foi planejar novos inibidores da enzima tiorredoxina glutationa redutase de S. mansoni (SmTGR) com atividade esquistossomicida utilizando ferramentas de quimioinformática e reposicionar novos fármacos para esquistossomose utilizando ferramentas de bioinformática. No estudo de planejamento de fármacos, modelos de QSAR binários foram construídos e validados para predição da atividade inibitória da SmTGR, um alvo validado em esquistossomos. A partir dos modelos individuais, modelos de consenso e consenso rigoroso foram construídos (CCRs = 0,87 e 0,91, respectivamente) e utilizados na triagem virtual de 150 mil compostos. Ao final deste processo, 29 compostos foram priorizados e adquiridos para avaliação biológica. Como resultado, dois novos hits representando novos scaffolds moleculares apresentaram EC50 ≤ 3,5 µM para esquistossômulos e ≤ 6,0 µM para fêmeas de vermes adultos, baixa citotoxicidade em células WSS-1 de mamíferos (IC50 > 16 µM) e baixa reatividade com cisteíno proteases (IC50 > 100 µM). No estudo de reposicionamento de fármacos, 2.114 proteínas de S. mansoni foram utilizadas em uma busca por ortólogos em bases de dados de alvos terapêuticos de fármacos (DrugBank, TTD e STITCH). Como resultado, 215 fármacos foram preditos para interagir com 49 proteínas do esquistossomo, dos quais 47 já tinham atividade esquistossomicida reportada na literatura. Em seguida, a análise de componentes principais (PCA) e k-means demonstrou que 115 fármacos estavam dentro do espaço químico de agentes esquistossomicidas conhecidos, atribuindo maior confiabilidade as predições. Dentre eles, a paroxetina (PAR), um fármaco antidepressivo predito para inibir proteínas transportadoras de serotonina do S. mansoni (SmSERTs), apresentou atividade esquistossomicida em esquistossômulos (EC50 = 2,5 µM) e vermes adultos (EC50 = 5,1 μM e 9,9 μM para machos e fêmeas) de S. mansoni. No final, estudos de docagem molecular com a SmSERT-A e seu ortólogo em humanos (hSERT) exploraram as bases moleculares para a atividade esquistossomicida da PAR e forneceram informações para o planejamento de novos análogos mais potentes e seletivos.

A cana-de-açúcar é uma das principais fontes de energia renovável, constituindo a matéria-prima mais importante na busca por energia limpa e sustentável. Os benefícios ambientais provenientes da produção e do uso dos derivados de cana-de-açúcar fomentam o desenvolvimento de métodos e produtos que aumentem, de modo sustentável, a geração de bioenergia. Dentre os diversos fatores limitantes para o aumento da produção de cana-de-açúcar, destaca-se a ocorrência e a severidade de fitopatologias como a escaldadura das folhas. Essa doença, causada pela bactéria Xanthomonas albilineans, causa diminuição da produtividade, necessidade de reforma precoce dos canaviais e queda de qualidade do caldo extraído que determinam prejuízos econômicos significativos para os agricultores. Atualmente, não há alternativas disponíveis para o controle químico ou biológico dessa fitopatologia. Portanto, existe uma necessidade urgente de desenvolvimento de novas moléculas como defensivos agrícolas que sejam eficazes, seletivas, de baixo custo e impacto ao meio ambiente. A X. albilineans produz uma família de antibióticos e fitotoxinas conhecida como albicidinas. As enzimas envolvidas na biossíntese de albicidinas são alvos moleculares extremamente atrativos para o planejamento de novos agroquímicos. Entre as enzimas dessa via, destaca-se a fosfopanteteinil transferase (XaPPT, E.C. 2.7.8.7), uma enzima essencial para o desenvolvimento da X. albilineans. Essa dissertação está dividida em duas partes: i. estudos computacionais e ii. estudos experimentais. Na parte computacional foi desenvolvida uma nova ferramenta, denominada ViTaMIn para auxiliar o desenvolvimento de modelos tridimensionais (3D) de proteínas. A enzima XaPPT foi utilizada como estudo de caso para validar o programa. Os resultados obtidos indicaram que ViTaMIn foi capaz de auxiliar a construção de um modelo 3D robusto da XaPPT. Além disso, foi verificado que ViTaMIn é uma alternativa útil para usuários iniciante e experientes na modelagem molecular. O modelo de XaPPT construído foi utilizado na triagem virtual para a identificação de novos candidatos a inibidores. A estratégia incluiu a aplicação de filtros moleculares e estudos de docagem molecular que resultaram na seleção de 10 candidatos a inibidores da enzima-alvo. Na parte experimental, o cultivo de culturas de X. albilineans foi padronizado e estudos de biologia molecular com a XaPPT conduzidos a partir da extração de DNA genômico da bactéria. Estratégias clássicas e modernas foram empregadas para a clonagem da XaPPT. Os resultados obtidos indicaram a obtenção de proteína expressa na forma solúvel. Os trabalhos integrando estudos computacionais e experimentais apresentados nessa dissertação de mestrado significam importantes contribuições no desenvolvimento de bases científicas sólidas para o desenvolvimento de novos candidatos a agroquímicos para a cultura de cana de açúcar. / Sugarcane is a major source of renewable energy, representing the most important source for clean and sustainable energy. The environmental benefits collected from the production and use of sugarcane derivatives boost the development of new methods and products to improve, in a sustainable way, bioenergy generation. However, the occurrence and severity of plant diseases, such as leaf scald, hinder the productivity of sugarcane crops. Sugarcane leaf scald is a widespread and devastating disease caused by the bacteria Xanthomonas albilineans. The disease has a dramatic impact on crop productivity, including reduced yields and drop in quality of the juice. Currently, there is no chemical or biological treatment for disease control. Therefore, there is an urgent need for new effective and selective pesticides with low cost and environmental impact. The X. albilineans produces a family of antibiotics and phytotoxins known as albicidin. The enzymes involved in the biosynthesis of albicidin are attractive targets for the design of new agrochemicals. Among them, the phosphopantetheinyl transferase (XaPPT, EC 2.7.8.7) enzyme plays an essential role to the development of X. albilineans. This dissertation is divided into two parts: i. computational studies and ii. experimental studies. In the computational part, we developed a new tool, named ViTaMIn to assist the development of three-dimensional models (3D) of proteins. The XaPPT enzyme was employed as a case study to validate the program. The results indicated that ViTaMIn was capable of assisting the construction of a robust 3D model of XaPPT. Moreover, Vitamin is a useful alternative for beginners and advanced modelers. The XaPPT model was used in virtual screening approach to identify new candidate inhibitors. The strategy included the application of molecular filters and molecular docking studies which afforded 10 inhibitor candidates for the target enzyme. In the experimental part, X. albilineans was cultured and standardized. On the basis of that, molecular biology studies were conducted on XaPPT. Classical and modern strategies were employed to cloning XaPPT. The results indicated that protein is expressed soluble. The integration of computational and experimental studies presented in this dissertation are important contributions in the development of strong scientific basis for the design of new agrochemicals for sugarcane cultures.

As concepções de moduladores da dinâmica dos microtúbulos, que levam ao bloqueio do ciclo celular, e de bloqueadores de canais de cálcio tipo L (Cav), tais como o 1,4-di-hidropiridinas e análogos, que diminuem a resistência do organismo humano aos tratamentos quimioterápicos através da inibição da proteína de transmembrana P-gp, são estratégias importantes tanto para terapias antitumorais quanto para leishmanicida. Esta abordagem tem mostrado resultados interessantes na diminuição da resistência à quimioterapia em câncer chamada de MDR (do inglês Multi Drug Resistence), além de também serem uma estratégia importante para controlar a fase inicial da leishmaniose. Diante desse contexto, e baseado no estudo de Ueki 2013 e colaboradores que, a partir de estudos anteriores, os quais relatam a superexpressão das enzimas estona deacetilase (HDAC) e catepsina L (CTSL) em células tumorais, propuseram um pró-fármaco seletivo, planejado a partir de um espaçador de lisina acetilada, que garante a liberação do fármaco seletivamente nas células tumorais, trabalhamos no desenvolvimento de uma nova proposta de pró-fármaco trifuncional. Nossa proposta foi desenvolvida a partir de estudos de triagem virtual, baseados em ligantes e em estrutura, predição das propriedades farmacocinéticas e toxicológicas (ADME/Tox) e também técnicas de bioinformática para a construção de um modelo de canal de cálcio, devido à inexistência de estruturas, do mesmo, que estivessem depositadas no banco de dados de proteínas PDB (Protein Data Bank). Paralelamente, nosso grupo de síntese colaborador sintetizou, através de técnicas de \"Click Chemistry\" e reações de Mitsunobu multicomponentes, uma biblioteca de novos híbridos trifuncionais, os quais, após estudos de atividade biológica, foram avaliados (in silico) frente à estrutura da tubulina, e os compostos mais promissores desta biblioteca serviram de base para novos estudos de triagem virtual. Para a obtenção dos nossos hits, executamos 4 estratégias de triagem virtual, separadas em 2 tarefas. Ao final, selecionarmos um total 59 hits, dos quais, 9 hits apresentam promissoras atividades bloqueadoras do canal de cálcio e 65 hits apresentam promissoras atividades moduladoras da tubulina. Estes hits seguem em estágio de compra e ensaios in vitro e após comprovada a eficácia dos mesmos, estes futuramente farão parte de uma nova proposta de pró-farmaco trifuncional. / The concepts of modulating microtubule dynamics, and calcium channel L-types (CAV) blockers are important strategies for anticancer and antileishmanial therapies. Microtubule modulators that blocks the cell cycle and the calcium channel blockers, such as, 1,4-dihydropyridines and analogues, reduce the resistance of the human body to chemotherapeutic treatments by inhibiting transmembrane P-gp protein. This approach has shown interesting results in reduced resistance to chemotherapy in cancer called MDR (Multi Drug Resistance), and an important strategy for controlling the early stage of leishmaniasis. In this context, we work to develop a new proposal for trifunctional prodrug. We have based on the study of Ueki 2013 and collaborators, which, from earlier studies with reported overexpression of both deacetylase estona enzymes (HDACs) and cathepsin L (CTSL) in tumor cells, proposed a selective prodrug. We considering an acetylated lysine link/spacer, which ensures the release of the drug selectively in tumor cells, have now designed this selective prodrug. Our proposal was developed from virtual screening studies, based on ligands and structure, prediction of pharmacokinetic and toxicological properties (ADME / Tox) and also bioinformatics techniques for the construction of a calcium channel model, due to the inexistence of Structures of the same that were deposited in the database of proteins PDB (Protein Data Bank). At the same time, our collaborating synthesis group synthesized, through Click Chemistry techniques and Mitsunobu multicomponent reactions, a library of new trifunctional hybrids, which, after studies of biological activity, were evaluated (in silico) against the structure of tubulin , And the most promising compounds from this library served as the basis for further virtual screening studies. To obtain our hits, we performed 4 virtual screening strategies, separated into 2 tasks. In the end, we selected 59 hits, of which 9 hits show promising calcium channel blocking activities and 65 hits show promising tubulin modulating activities. These hits follow in vitro purchase and testing, and after proven effectiveness, they will be part of a new tri prodrug proposal.

O objetivo do presente estudo foi estimar a especificidade e taxa de falso-positivo de protocolos de triagem auditiva neonatal (TAN), realizados com os procedimentos emissões otoacústicas evocadas transientes-módulo triagem (EOAet) e potenciais evocados auditivos de tronco encefálico automático (PEATEa), de forma isolada ou combinada, aplicados em uma ou duas etapas. Participaram deste estudo 200 recém-nascidos, selecionados aleatoriamente, submetidos à triagem auditiva, no período entre Março/2006 e Julho/2006. A estimativa da taxa de falso-positivo e da especificidade foi realizada com a TAN em uma etapa e com três protocolos: protocolo 1, TAN realizada em duas etapas com EOAet; protocolo 2, TAN realizada em duas etapas com PEATEa; e protocolo 3, TAN realizada em uma etapa com dois procedimentos - teste com EOAet seguido de reteste com PEATEa para os recém-nascidos que não passaram no primeiro procedimento. Os resultados mostraram alta taxa de falso-positivo na triagem auditiva realizada em uma etapa para ambos os procedimentos. Apesar de não ter havido diferença estatisticamente significante quando comparadas as taxas de encaminhamento para diagnóstico audiológico obtidos nos protocolos com EOAet e com PEATEa, o protocolo com EOAet encaminhou 4 vezes mais recém-nascidos. O protocolo com EOAet e PEATEa apresentou a maior taxa de encaminhamento (6%), com diferença estatisticamente significante ao ser comparado com os protocolos 1 (EOAet) e 2 (PEATEa). Concluiu-se que a triagem auditiva neonatal deve ser realizada em duas etapas (teste-reteste), a fim de reduzir a taxa de falso-positivo e de encaminhamento, aumentando a especificidade; a taxa de falso-positivo e conseqüentemente a especificidade foram melhores no protocolo com PEATEa, seguido dos protocolos com EOAet e com EOAet e PEATEa. / O objetivo do presente estudo foi estimar a especificidade e taxa de falso-positivo de protocolos de triagem auditiva neonatal (TAN), realizados com os procedimentos emissões otoacústicas evocadas transientes-módulo triagem (EOAet) e potenciais evocados auditivos de tronco encefálico automático (PEATEa), de forma isolada ou combinada, aplicados em uma ou duas etapas. Participaram deste estudo 200 recém-nascidos, selecionados aleatoriamente, submetidos à triagem auditiva, no período entre Março/2006 e Julho/2006. A estimativa da taxa de falso-positivo e da especificidade foi realizada com a TAN em uma etapa e com três protocolos: protocolo 1, TAN realizada em duas etapas com EOAet; protocolo 2, TAN realizada em duas etapas com PEATEa; e protocolo 3, TAN realizada em uma etapa com dois procedimentos - teste com EOAet seguido de reteste com PEATEa para os recém-nascidos que não passaram no primeiro procedimento. Os resultados mostraram alta taxa de falso-positivo na triagem auditiva realizada em uma etapa para ambos os procedimentos. Apesar de não ter havido diferença estatisticamente significante quando comparadas as taxas de encaminhamento para diagnóstico audiológico obtidos nos protocolos com EOAet e com PEATEa, o protocolo com EOAet encaminhou 4 vezes mais recém-nascidos. O protocolo com EOAet e PEATEa apresentou a maior taxa de encaminhamento (6%), com diferença estatisticamente significante ao ser comparado com os protocolos 1 (EOAet) e 2 (PEATEa). Concluiu-se que a triagem auditiva neonatal deve ser realizada em duas etapas (teste-reteste), a fim de reduzir a taxa de falso-positivo e de encaminhamento, aumentando a especificidade; a taxa de falso-positivo e conseqüentemente a especificidade foram melhores no protocolo com PEATEa, seguido dos protocolos com EOAet e com EOAet e PEATEa.