A prática de 18 procedimentos de rastreamento foi avaliada em profissionais de saúde de um hospital terciário, com idade entre 40 e 69 anos. Dos 364 profissionais elegíveis sorteados, foram entrevistados 333 (91%): 170 auxiliares de enfermagem, 137 médicos e 26 enfermeiras. A realização de procedimentos de rastreamento não recomendados, ou com evidência insuficiente para recomendação, foi relatada por expressiva proporção dos profissionais: eletrocardiograma - 48%, RX de tórax - 57%, dosagem de PSA - 66%, hemograma - 74%. Por outro lado, quase um terço (29%) não havia medido a Pressão Arterial como rastreamento, e apenas quatro (1%) haviam realizado pesquisa de sangue oculto nas fezes. Esses resultados mostram a necessidade de melhor divulgação entre profissionais de saúde das diretrizes sobre rastreamento / The use of 18 screeming procedure was evaluated in health professionals of a terciary hospital, aged 40-69 years. Of the 364 drafted eligible professionals, 333 (91%) had been interviewed: 170 nurses assistant, 137 physician and 26 nurses. The realization of not recommended screening procedure, or with insufficient evidence to recomendation, was related by expressive proportion of the professionals: electrocardiogram - 48%, chest x-ray - 57%, PSA - 66%, hemogram - 74%. On the other hand, almost one third (29%) hadn't measured the blood pressure as screening, and only four (1%) had realized fecal occult blood tests. These results shows the necessity of a better divulgation among health professionals about the screening guidelines

A inativação do cromossomo X (ICX) em fêmeas é um exemplo de regulação epigenética. O silenciamento de um dos cromossomos X leva à formação estável da heterocromatina facultativa através da aquisição de múltiplas modificações na cromatina que são mantidas nas subsequentes divisões celulares. Atualmente, algumas características epigenéticas associadas à manutenção da ICX têm sido descritas, contudo os mecanismos de ação e a identidade dos diferentes fatores envolvidos na manutenção da ICX ainda são desconhecidos ou pouco compreendidos. Nosso laboratório realizou uma triagem funcional genômica por bibliotecas de shRNAs (short harpin RNAs) para encontrar genes envolvidos na manutenção da ICX em humanos. A partir deste estudo foram identificados 20 novos genes candidatos a estarem envolvidos na manutenção da ICX. Assim, o objetivo deste trabalho foi validar o grau de envolvimento de dois destes genes candidatos (H3F3B e ASF1A) no processo de controle epigenético do cromossomo X. Para isto, foi realizado o silenciamento dos genes candidatos através da utilização de partículas lentivirais portando shRNAs específicos em fibroblastos primários femininos heterozigotos para uma mutação no gene HPRT e com desvio total de ICX, onde o único alelo normal do gene HPRT está no Xi. A reativação do Xi nestas células foi avaliada por cultivo das mesmas em meio HAT, que seleciona células HPRT+. Só sobreviveram os fibroblastos que foram silenciados para o gene H3F3B. Nestes, as células transduzidas com o shH3F3B.2 expressam o alelo selvagem do gene, presente no Xi, além do gene mutante. Ensaios de RNA-FISH e trimetilação de histonas foram feitos nessas células para avaliar a perda das marcas de cromatina inativa. Foi observada uma perda da nuvem de XIST nas células transduzidas com o shH3F3B.2 e selecionadas em HAT em passagens altas. Por último, análises de expressão alelo-específica de genes ligados ao X comprovaram que dois genes que são submetidos à ICX apresentaram expressão do alelo inativado (FLNA e FHL1). Porém, também foi observada uma mudança no padrão de expressão alelo-específica em genes autossômicos. Finalmente, as análises de expressão geral do cromossomo X mostraram que as células transduzidas com o shH3F3B.2 e selecionada em HAT tinham uma expressão gênica aumentada em relação ao controle. Em conclusão, nossos resultados sugerem uma descondensação da cromatina no cromossomo Xi e portanto um provável envolvimento do gene H3F3B na manutenção da ICX. / The X chromosome Inactivation (XCI) in females is an example of epigenetic regulation. Silencing of one of the X chromosomes leads to the stable formation of the facultative heterochromatin through the acquisition of multiple modifications in the chromatin that are maintained in the subsequent cell divisions. Currently, some epigenetic features associated with the maintenance of XCI have been described. Nonetheless, the mechanisms of action and the identity of the different factors involved in the maintenance of XCI are still unknown or poorly understood. Our laboratory performed a genomic functional screening by shRNA (short harpin RNAs) libraries to find genes involved in the maintenance of XCI in humans. From this study, we identified 20 new candidate genes to be involved in the maintenance of XCI. Thus, the objective of this work was to validate the degree of involvement of two of these candidate genes (H3F3B and ASF1A) in the epigenetic process control of the X chromosome. For this, the silencing of the candidate genes was performed in female heterozygous primary fibroblasts for a mutation of the HPRT gene and with a total XCI shift through the use of lentiviral particles carrying specific shRNAs, where the only normal allele of the HPRT gene is in the Xi (inactivated X). Xi reactivation was evaluated in these cells by culturing them in HAT medium, which selects HPRT + cells. Only the fibroblasts that were silenced for the H3F3B gene survived. Furthermore, the cells transduced with shH3F3B.2 express the HPRT wild gene allele, present in Xi, in addition to the mutant gene. RNA-FISH and histone trimethylation assays were performed on these cells to evaluate the loss of inactive chromatin marks. A loss of the XIST cloud was observed in cells transduced with shH3F3B.2 and selected in HAT at high passages. Finally, allele-specific expression analyzes of X-linked genes showed that two genes that undergo XCI showed expression of the inactivated allele (FLNA and FHL1). However, a change in allele-specific expression pattern was also observed in autosomal genes. Finally, the X chromosome general expression analyses showed that cells transduced with shH3F3B.2 and selected on HAT had increased gene expression relative to the control. In conclusion, our results suggest a decondensation of the chromatin in the Xi chromosome and therefore a probable involvement of the H3F3B gene in the maintenance of ICX.

INTRODUÇÃO: O abuso no consumo de drogas constitui um problema social e de saúde pública na maioria dos países, pelas consequências negativas que esse consumo provoca sobre o desenvolvimento emocional e físico das pessoas. O início do uso de substâncias tem-se apresentado na população de adolescentes cada vez mais cedo e, como consequência, uma avaliação para identificar comportamentos de risco é imprescindível para triagem e encaminhamentos adequados. Assim, o objetivo deste estudo foi revisar estudos e descrever três importantes instrumentos validados para o Brasil e utilizados para avaliação do abuso de álcool e outras drogas em adolescentes. MÉTODO: Estudo de revisão de literatura, realizado no período de janeiro de 1998 a agosto de 2010, em publicações nas bases de dados: Adolec, MedLine, Lilacs, PubMed e SciELO. Na seleção dos estudos, foram avaliados: artigos com aplicação dos instrumentos DUSI-R, Teen ASI e CBCL; o detalhamento do instrumento utilizado para diagnóstico; utilização de algum indicador de desempenho do instrumento; qualidade do estudo que permita avaliação do desempenho do instrumento, assim como a sua coerência com a literatura. RESULTADOS: Foram encontrados 767 artigos e, de acordo com os critérios de inclusão, foram avaliados 54, após as exclusões daqueles que não atenderam aos critérios. Os artigos com aplicação do instrumento DUSI-R foram 30, sendo 25 referentes a intervenções, prevalência e outros. Os estudos sobre validação do instrumento foram 5, com taxas de sensibilidade variando de 80 a 85% e especificidade variando de 70 a 90%. Outra medida foi a consistência interna com Alfa de Cronbach de 0,91 a 0,9451, apresentada em dois estudos. Já os artigos com aplicação do Teen ASI foram 12, sendo 8 estudos sobre intervenção, prevalência e outros. Para a validação do instrumento, foram encontrados 4 estudos, com taxa de confiabilidade em 2 estudos com r variando entre 0,69 e 0,90, um estudo com consistência interna com Alfa de Cronbach de 0,54 a 0,88 e outro estudo que avaliou a área sobre a curva de ROC = 0,88. Finalmente, os artigos com aplicação do CBCL foram 12, dos quais 8 foram sobre prevalência e fatores de risco. As medidas de desempenho do instrumento foram apresentadas em 4 estudos, sendo que dois mediram a taxa de sensibilidade do instrumento, variando de 80,4 a 87%. Ainda, um estudo apresentou consistência interna com Alfa de Cronbach entre 0,85 e 0,94 e outro estudou as propriedades psicométricas conforme dados da versão alemã do CBCL. CONCLUSÃO: Os resultados dos estudos apontam que os instrumentos pesquisados avaliam o abuso de álcool e outras drogas em adolescentes, possuindo boas propriedades psicométricas, porém de formas diferentes. O Teen ASI e o DUSI-R identificam e avaliam o uso de substâncias e outras áreas da vida. Por sua vez, o CBCL é voltado para avaliar a saúde mental do adolescente, não sendo específico para avaliar o abuso de álcool e outras drogas. Portanto, na escolha de instrumentos de avaliação, é importante considerar: organização do tempo, investimento na formação de profissionais e consolidação dos resultados que contribua efetivamente na melhora do tratamento / INTRODUCTION: The substance abuse is a major social problem in public health in most countries, due to the negative consequences of this behavior on the physical and emotional development of the people involved. The initiation phase of the substance abuse is beginning at earlier ages, and, as a consequence of that, an assessment to identify risk behaviors is very important for an acurate triage and subsequent steps. The objective of this study was to review studies and to describe 3 important instruments validated for Brazil and applied for the assessment of substance abuse in adolescents. METHOD: A literature review study, in the period from January of 1998 to August of 2010, in the databases of: Adolec, MedLine, Lilacs, PubMed and SciELO. In the selection of the studies the following criteria were evaluated: articles with application of the instruments DUSI-R, Teen ASI, and CBCL; the detailing of the instrument utilized for diagnostics; utilization of a performance indicator; quality of the study that enables the performance assessment of the instrument, and its coherence with the literature. RESULTS: 767 articles were found according to the inclusion criteria, and 54 of them were analysed, after the exclusions of the ones that did not meet the detailed criteria. 30 articles for the DUSI-R instrument were found, 25 of them related to interventions, prevalence and others. 5 studies were related to the validation of the instrument, with sensitivity rates varying from 80 to 85% and specificity variying from 70 to 90%. Another measure was the internal consistency with Cronbachs Alpha varying from 0.91 to 0.9451, presented in two studies. For the Teen ASI, 12 articles were found, and 8 of them were related to intervention, prevalence and others. For the validation of the instrument, 4 studies were found, with the reliability in 2 studies varying from r = 0.69 to 0.90, one study with internal consistency with Cronbachs Alpha varying from 0.54 to 0.88 and another study with the area under the ROC curve = 0.88. For the CBCL, 12 studies were found, and 8 of them were related to the prevalence and risk factors. The performance measures were presented in 4 studies, where 2 instruments measured the sensitivity rate varying from 80.4 to 87%. One study report the Cronbachs Alpha between 0.85 and 0.94, and another study studied the psicometric properties for the German version. CONCLUSION: The results of the studies suggest that the instruments included on the research evaluate the substance abuse in adolescents, with good psychometric properties, although in different ways. The Teen ASI and DUSI-R evaluate the substance abuse and other areas of life. The CBCL is useful to evaluate the mental health, and its not specific to conduct an assessment for substance abuse. So, when choosing assessment instruments, its important to consider: time management, investment in the education of the professionals; and consolidation of the results that contribute effectively to the improvement of the treatment

A cruzaína, principal cisteíno protease do Trypanosoma cruzi, é um alvo terapêutico validado para o tratamento da doença de Chagas. Grande parte dos inibidores desta enzima é constituída de peptídeo-miméticos do tipo covalente irreversível cujo desenvolvimento, entretanto, tem sido evitado devido ao potencial efeito off target e ao perfil farmacocinético indesejável. O grupo de química medicinal NEQUIMED/ IQSC/USP vêm utilizando métodos avançados em quimioinformática para a identificação de inibidores reversíveis da cruzaína e de outras cisteíno proteases. Contudo, para que estes inibidores se desenvolvam a compostos matrizes mais eficientes, informações computacionais e estruturais de seus Modos de Interação (MOB) com a proteína alvo tornam-se fundamentais. Neste trabalho, a cristalografia de raios X foi utilizada para descrever em detalhes o MOB de três importantes inibidores reversíveis da cruzaína identificados pelo NEQUIMED: a dipeptidil-nitrila Neq0409 e os dois fragmentos moleculares Neq0147 e Neq0176. De modo a evitar a auto-proteólise experimentada pela cruzaína nativa que torna desafiadora a cristalização com inibidores de baixa afinidade como os fragmentos reversíveis, duas novas construções mutantes e inativas da cruzaína (a C25A e a C25S) foram desenvolvidas. A C25S foi validada como modelo cristalográfico representativo dado a coerência do MOB elucidado nesta enzima mutante e na cruzaína nativa para o inibidor mais estudado da cruzaína, o K777. A descrição da presença, orientação, conformação e modo de ação no sítio, além do completo padrão de interações fornecidos por estas estruturas cristalinas, validaram ortogonalmente os MOB preditos e os métodos de planejamento in silico usados no NEQUIMED, permitindo a identificação de inibidores muito mais potentes análogos ao Neq0147 e ao Neq0409. O grupo 2-acetamidotiofeno-3-carboxamida do Neq0176 e o anel heterocíclico de cinco membros baseado no 1,3,4-oxadiazol do Neq0147 foram identificados como alternativos aos tradicionais esqueletos peptídeo-miméticos. O impacto do efeito proteolítico na qualidade e na resolução de estruturas cristalográficas na cruzaína foi melhor compreendido a partir de duas estruturas de alta resolução obtidas para a cruzaína nativa em complexo com o metanotiossulfonato de metila (MMTS) e a iodoacetamida. Estes resultados permitiram compreender as bases experimentais para a cristalização de inibidores reversíveis de baixa afinidade. Todos os resultados estruturais obtidos via cristalografia de raios X neste trabalho são úteis para mapear as bases estruturais essenciais para o planejamento de futuros inibidores mais potentes e seletivos da cruzaína. / Cruzain, the major Trypanosoma cruzi cysteine protease, is a validated therapeutic target for the search of new medicines for the treatment of Chagas disease. A myriad of inhibitors of this enzyme consists of covalent irreversible peptidomimetics whose development has been impaired due to potential off target effect and undesirable pharmacokinetic profile. Modern cheminformatic methods employed by The Medicinal Chemistry Group (NEQUIMED/IQSC/USP) were used to identify cruzain reversible inhibitors. Their optimization for more efficient compounds can be accomplished by the use of data and information gathered from computational and structural modes of interaction (MOB). In this doctoral thesis, the X-ray crystallography was used to describe in detail the MOB of three important new cruzain reversible inhibitors: the dipeptidil-nitrile Neq0409 and the two molecular fragmentos Neq0147 and Neq0176. In order to avoid cruzain self-proteolysis during crystallization with low affinity reversible inhibitors such as the identified fragments, two new mutant and inactive constructs of cruzain (the C25S and C25A) were designed to upholding the same properties of the wild type catalytic site. The C25S was validated as representative crystallographic model given the coherence of the MOB elucidated for the best-known and studied cruzain inhibitor, the K777. The description of the presence, orientation, conformation and mode of action at the site, besides the complete pattern of bimolecular interactions, provided by these crystalline structures, orthogonally validated the predicted in silico MOB and allowed the identification of other potent inhibitors analogous to the Neq0147 and the Neq0409. The 2-acetamidothiophene-3-carboxamide moiety (Neq0176) and heterocyclic five-membered ring based on the 1,3,4-oxadiazole (Neq0147) were thereby identified as attractive alternatives to traditional peptidomimetics. The impact of proteolytic effect on the quality and resolution of crystallographic structures in cruzain was best understood from two high-resolution structures obtained for the native cruzain in complex with methyl methanethiolsulfonate (MMTS) and iodoacetamide. These results allow the understanding of experimental basis for the crystallization with reversible inhibitors of low affinity such as fragments. All structural results obtained by X-ray crystallography together with the catalytic site depiction using GRID and SuperStar methods are useful for mapping the essential structural basis for the design of future more potent and selective cruzain inhibitors.

O desenvolvimento de uma abordagem de estratificação de risco para a doença arterial coronária é certamente uma ferramenta de grande utilidade para o cardiologista clínico ou clínico geral, assim como para o planejamento de saúde pública e organização de ações de saúde pública mais eficazes. No entanto, esse conhecimento deve ser discutido dentro de um cenário de custo-efetividade e de acordo com seu potencial como objeto de valor econômico. O presente estudo tem como objetivo a identificação de fatores de risco genético de eventos cardiovasculares na população brasileira e o desenvolvimento de um algoritmo preditor que utilize essas informações para o diagnóstico. Esse trabalho encontra-se expositivamente dividido em dois módulos. No primeiro, procuramos exemplificar através de um estudo de associação genética nossa capacidade atual de encontrar e caracterizar variantes genéticas com poder de estratificação populacional com relação ao risco cardiovascular. Utilizamos dados obtidos a partir de pacientes com doença coronária multiarterial, analisando a relevância do polimorfismo C242T do gene da p22phox, subunidade protéica da NADPH oxidase, na predição de mortalidade desta população. Nossos dados permitem não apenas associar esse marcador genético a um risco aumentado de mortalidade nessa população, mas também fornecem informações a respeito do provável mecanismo molecular através do qual esse marcador genético age. No segundo módulo, procuramos detalhar as limitações da abordagem previamente exemplificada, avaliando a informação gerada para o paciente individual. Aqui propomos uma nova abordagem de estratificação de risco desta população, capaz de fornecer de maneira individualizada uma estimativa de risco com maior sensibilidade, especificidade e, conseqüentemente, acurácia. Através de uma abordagem analítica de redução de dimensionalidade obtivemos um algoritmo preditor com acurácia maior do que aquela encontrada utilizando-se apenas os fatores de risco clássicos ou fatores de risco genéticos analisados individualmente. O entendimento das bases genéticas do desenvolvimento de doenças cardiovasculares facilitará não apenas o diagnóstico precoce, possibilitando o surgimento de abordagens terapêuticas mais específicas e desenhadas a atender suscetibilidades individuais, mas também poderá levar à identificação de novas vias eficazes de intervenção. / The development of risk stratification approaches in coronary artery disease is certainly an important tool for the clinical cardiologist or internist. It also helps in the planning of public health policies and in the development of effective disease management algorithms. Nevertheless, these tools necessarily have to be developed in a cost-effective scenario and in close relationship with its intrinsic economic value. The present research project aims at the identification of genetic risk factors for cardiovascular events in the Brazilian population and the development of an algorithm with high predictive value for the diagnosis of these events. This thesis is, didactically, divided into 2 modules. Firstly, we have exemplified the used paradigm through the development of a genetic association study conducted in the Brazilian population. Here, we were able to describe and characterize genetic variants with the capacity of risk stratify populations into high and low risk groups. This section was possible with the use of data derived from patients with multi-vessel coronary artery disease and the analysis of the C242T gene variant of the p22phox gene, a subunit of the NADPH oxidase protein complex. Our data show not only a major signal of association between this genetic variant and overall mortality in this population, but also shed light on the potential molecular mechanism of this finding. Secondly, we have described the potential limitations of this approach analyzing information derived for the individual patient. Here, we propose a new risk stratification algorithm for this population with the capacity to provide individual risk with increased sensitivity and specificity. Through the use of a dimensionality reduction analytical approach we were able to find a predictive algorithm with higher accuracy than the one derived with the use of only classical cardiovascular risk factors and no genetic information. The understanding of the genetic basis for cardiovascular disease will improve not only the early diagnosis of these disorders, facilitating the rise of therapeutic approaches more specific and tailored to ones particular genetic susceptibility, but also lead to the identification of new pathways for effective intervention

INTRODUÇÃO: Uma possibilidade de pesquisa em audição é a supressão das emissões otoacústicas, que verifica a diminuição de sua magnitude a partir de estimulação acústica simultânea. Acredita-se que esta diminuição ocorra devido ao papel da via eferente auditiva. OBJETIVO: verificar a atividade do sistema auditivo eferente, por meio da supressão contralateral das emissões otoacústicas, em neonatos com e sem indicadores de risco para perda auditiva. MÉTODO: foram avaliados 21 neonatos com indicadores de risco para perda auditiva (grupo estudo) e 30 neonatos sem indicadores (grupo controle) por meio das emissões otoacústicas evocadas por estímulo de freqüência específica \"tone burst\" em 2000 e em 4000 hertz, na ausência e na presença de ruído branco contralateral. RESULTADOS: a orelha direita e o grupo controle apresentaram vantagem na amplitude das EOA TB. Os valores médios de \"Response\" para 2000 hertz foram 17,73 dB no grupo controle e 16,55 dB no grupo estudo, para o gênero feminino e 16,63 dB no grupo controle e 16,12 dB no grupo estudo, para o gênero masculino. Para 4000 hertz, os valores médios de \"Response\" foram 14,63 dB no grupo controle e 15,09 dB no grupo estudo, para o gênero feminino e 18,57 dB no grupo controle e 15,06 dB no grupo estudo, para o gênero masculino. Na supressão, houve vantagem da orelha direita, do grupo controle para o gênero feminino e do grupo estudo para o gênero masculino, embora sem plena significância estatística. Os valores médios de supressão para a variável \"Response\" em 2000 hertz foram 1,66 dB no grupo controle e 0,84 dB no grupo estudo, para o gênero feminino e 1,41 dB no grupo controle e 2,07 dB no grupo estudo, para o gênero masculino. Para 4000 hertz, os valores médios da supressão em \"Response\" foram 1,29 dB no grupo controle e 0,98 dB no grupo estudo, para o gênero feminino e 1,75 dB no grupo controle e 2,14 dB no grupo estudo, para o gênero masculino. CONCLUSÃO: A partir de estímulos de freqüência específica, em 2000 e em 4000 hertz, foi possível verificar o efeito inibitório da via eferente auditiva sobre a amplitude das EOA, em neonatos. A utilização de estímulos de freqüência específica pode contribuir para a avaliação da função auditiva periférica e central nesta população. / INTRODUCTION: A possible hearing research is the suppression of otoacoustic emissions which verifies a decrease of its magnitude from a simultaneous acoustic stimulation. It is assumed that this decrease occurs because of the role of the auditory efferent pathway. AIM: to verify the activity of the auditory efferent pathway by the contralateral suppression of OAE in neonates with and without risk factors for hearing loss. MEHOD: 21 neonates at risk for hearing loss (study group), and 30 neonates without risk factors for hearing loss (control group) were assessed through otoacoustic emissions evoked by a frequency specific stimulus, \"tone burst\", at 2000 and at 4000 hertz, with and without contralateral white noise. RESULTS: the right ear and the control group presented advantage in the amplitude of OAE TB. The mean values of \"Response\" at 2000 hertz were 17,73 dB in the control group and 16,55 dB in the study group, for female subjects, and 16,63 dB in the control group and 16,12 dB in the study group, for male subjects. At 4000 hertz, the mean values of \"Response\" were 14,63 dB in the control group and 15,09 dB in the study group, for female subjects and 18,57 dB in the control group and 15,06 dB in the study group, for male subjects. In the suppression, there was an advantage of the right ear, of the control group for female subjects, and of the study group for male subjects, although without statistical significance. The mean values of suppression for the variable \"Response\" at 2000 hertz were 1,66 dB in the control group and 0,84 dB in the study group, for female subjects, and 1,41 dB in the control group and 2,07 dB in the study group, for male subjects. At 4000 hertz, the mean values of suppression for \"Response\" were 1,29 dB in the control group and 0,98 dB in the study group, for female subjects, and 1,75 dB in the control group and 2,14 dB in the study group, for male subjects. CONCLUSION: From frequency-specific stimuli at 2000 and at 4000 hertz, it was possible to verify the inhibitory effect of the auditory efferent pathway upon the amplitude of otoacoustic emissions in neonates. The use of frequencyspecific stimuli may contribute for the assessment of the central auditory function in this population.

A Doença de Alzheimer (DA) é um transtorno progressivo que acomete o Sistema Nervoso Central, causando demência em idosos. A doença leva a uma diminuição da memória, dificuldade no raciocínio e pensamento e alterações comportamentais. A fisiopatologia da doença corresponde ao aumento na concentração do peptídeo -amilóide com consequente deposição e formação da placa amiloide; e também ao aparecimento dos emaranhados neurofibrilares, que são agregados de proteína tau hiperfosforilada. A enzima glicogênio sintase cinase 3 beta (GSK-3) está diretamente envolvida nos dois processos e, por isso, a busca por novos inibidores dessa enzima é uma importante estratégia terapêutica para o tratamento da doença. Neste trabalho utilizou-se a triagem virtual em 7 bancos de dados de moléculas aplicando cinco diferentes estratégias in silico, através de planejamento de fármacos baseado em ligantes e baseado em estrutura, combinada com estudos in silico de farmacocinética, toxicidade e atividade biológica, seguido de posteriores ensaios de inibição enzimática in vitro. Obteve-se três compostos pela metodologia de farmacóforo, (Estratégia 3) dos quais dois deles demonstraram atividade inibitória interessante para GSK-3, na faixa de micromolar. A partir das outras quatro estratégias foram selecionados 16 compostos que futuramente serão também testados utilizando o mesmo protocolo de ensaio in vitro aqui utilizado. / Alzheimer\'s disease (AD) is a progressive disorder that affects the Central Nervous System, causing dementia in the elderly. The disease leads to decreased memory, difficulty in reasoning and thinking, and behavioral changes. The pathophysiology of the disease corresponds to the increase in -amyloid peptide concentration with consequent deposition and formation of the amyloid plaque and to the appearance of neurofibrillary tangles, which are aggregates of hyperphosphorylated tau protein. The enzyme glycogen synthase kinase-3 beta (GSK-3) is directly involved in both processes and, therefore, the search for new inhibitors of this enzyme is an important therapeutic strategy for the treatment of the disease. In this work, we used virtual screening in 7 molecule databases applying five different in silico strategies, using the ligand-based and structure-based drug design methodologies, combined with in silico studies of pharmacokinetics, toxicity and biological activity, followed by subsequent assays enzymatic inhibition in vitro. We obtained three compounds by the pharmacophore methodology (Strategy 3) of which two of them demonstrated interesting inhibitory activity for GSK-3 in the micromolar range. From the other four strategies, 16 compounds were selected which in future will also be tested using the same in vitro assay protocol used here.

Introdução: Dados epidemiológicos sobre prevalência de perdas auditivas em países em desenvolvimento são insuficientes para o planejamento e execução de programas efetivos, visando à intervenção, prevenção e promoção em saúde. Além disso, ações de saúde na atenção básica, bem como nos serviços de média e alta complexidade não dão conta de atender ou mesmo conhecer a demanda, também pelo fato de existir um número limitado de profissionais da saúde que cuidam da audição. Dentro deste contexto, faz-se necessária a adoção de técnicas ou procedimentos acessíveis às áreas carentes do país, que não contam com recursos financeiros para a aquisição de tecnologia ou recursos humanos que possibilitem a identificação, o mais precoce possível, de grupos de risco para alterações auditivas. Com o avanço da tecnologia, métodos de triagem auditiva à distância são possíveis, inclusive como facilitadores em áreas onde não há especialistas. Sendo assim, a criação e validação de protocolos de teleaudiologia são fundamentais para que possam ser utilizados dentro de programas de saúde rotineiros. Objetivo: avaliar a acurácia e a viabilidade de execução da teleaudiometria, comparando-a à audiometria por varredura, tendo como padrão ouro a audiometria tonal, em escolares do ciclo I do ensino fundamental. Método: Participaram do estudo 243 escolares, sendo 118 meninos e 125 meninas, com idade média de 8,3 anos. Foram realizados os seguintes procedimentos: triagem por teleaudiometria com fones TDH39, com software que avalia a audição automaticamente nas frequências de 1000, 2000 e 4000 Hz a 25 dBNA, triagem por varredura audiométrica em cabina acústica (nas frequências de 1000, 2000 e 4000 Hz a 20 dBNA) e pesquisa dos limiares auditivos por meio de audiometria tonal em cabina acústica (nas frequências de 500, 1000, 2000 e 4000Hz). Resultados: Verificou-se que não existe associação entre os resultados normais e alterados nos testes auditivos e a variável sexo. Das 243 crianças que realizaram a audiometria tonal, 195 apresentaram limiares auditivos normais. Para a audiometria por varredura, 209 passaram e para a teleaudiometria, 188 passaram. Sendo assim, a habilidade diagnóstica dos métodos de triagem foi avaliada, encontrando-se os seguintes valores para teleaudiometria / audiometria por varredura: sensibilidade - 58% / 65%, especificidade - 86% / 99%, valor preditivo positivo - 51% / 91%, valor preditivo negativo - 89% / 92%, acurácia - 81% / 92%. A teleaudiometria e a varredura apresentaram concordância moderada pelo coeficiente Kappa. Além disso, foi avaliada a possibilidade diagnóstica de execução da teleaudiometria realizada em série ou em paralelo com a imitanciometria, indicando que a aplicação destes métodos em série melhora a especificidade e a aplicação dos testes em paralelo melhora a sensibilidade. Conclusão: Embora a audiometria por varredura apresente valores de sensibilidade e especificidade maiores, a teleaudiometria mostrou confiabilidade e viabilidade como método de triagem auditiva em escolares. Além disso, a teleaudiometria apresenta vantagens de aplicação em áreas remotas, onde não existe a disponibilidade de profissionais especializados e equipamentos específicos, o que pode reduzir custos em programas de triagem auditiva / Introduction: Epidemiological data on the prevalence of hearing loss in developing countries are insufficient for the planning and execution of effective programs, aimed at intervention, prevention and health promotion. In addition, health actions in primary care, as well as secondary and tertiary services are not enough to meet or even know the demand; this also occurs because there is a limited number of health professionals who care for the hearing. Within this context, it is necessary to adopt accessible techniques or procedures for the underserved areas of the country, that do not have financial resources for the purchase of technology or human resources to enable the identification, as early as possible, of risk groups for hearing disorders. With the advance of technology, distance hearing screening methods are possible, working as facilitators in areas where there are no experts. Thus, the creation and validation of teleaudiology protocols are essential so that they can be used in routine health programs. Objective: To evaluate the efficacy and feasibility of the teleaudiometry, comparing it to the sweep audiometry, considering pure tone audiometry as the gold standard, in school children of the first cycle in elementary school. Method: 243 students participated in this study, 118 boys and 125 girls, mean age 8.3 years. The following procedures were performed: teleaudiometry screening with TDH39 headphones and software that automatically evaluates hearing at the frequencies of 1000, 2000 and 4000 Hz at 25 dBHL, sweep audiometry screening in acoustic booth (at the frequencies of 1000, 2000 and 4000 Hz at 20 dBHL) and hearing thresholds search using pure tone audiometry in acoustic booth (at the frequencies of 500, 1000, 2000 and 4000 Hz). Results: It was found that there is no association between normal and abnormal results in hearing tests and the gender variable. Of the 243 children who underwent pure tone audiometry, 195 had normal hearing thresholds. For the sweep audiometry, 209 children passed the screening, and 188 passed the teleaudiometry. Therefore, the diagnostic capacity of the screening methods was evaluated, verifying the following values: for teleaudiometry / sweep audiometry: sensitivity - 58% / 65%, specificity - 86% / 99%, positive predictive value - 51% / 91%, negative predictive value - 89% / 92%, accuracy - 81% / 92%. The teleaudiometry and the sweep audiometry showed moderate agreement using the Kappa coefficient. Furthermore, the diagnostic possibility of performing teleaudiometry in series or in parallel with imitanciometry was evaluated, indicating that the application of these methods in series improves specificity and the application of parallel testing improves sensitivity. Conclusion: Although the sweep audiometry presented higher sensitivity and specificity values, teleaudiometry showed reliability and feasibility as a hearing screening method in school children. Moreover, teleaudiometry has application advantages in remote areas, where specialized professionals and specific equipment are not available, which can reduce costs in hearing screening programs

Nos últimos anos, importantes riscos ocupacionais em centrais de triagem de materiais recicláveis têm sido apontados na literatura nacional e internacional. Grande parte desses riscos é creditada à baixa qualidade da segregação realizada pela população, resultando no encaminhamento de resíduos sujos para a coleta seletiva de recicláveis. Danos à saúde e segurança dos trabalhadores que manipulam esses materiais podem surgir se as condições estruturais, tecnologias empregadas, organização do trabalho e medidas de prevenção necessárias não forem adequadamente gerenciadas. Objetivos: identificar os fatores de risco ocupacional em duas centrais de triagem do município de São Paulo; quantificar lesões e doenças ocorridas antes e durante o período do estudo; correlacionar os fatores de risco com as lesões e doenças identificadas e recomendar ações para minimizar os danos à saúde desses trabalhadores. Metodologia: trata-se de estudo de caso múltiplo, exploratório, com abordagem quanti-qualitativa. Iniciado com revisão sistematizada da literatura, focou a saúde dos catadores de recicláveis, contemplando duas bases de dados bibliográficas em ciências da saúde: PubMed e LILACS. Duas centrais de triagem foram selecionadas para o estudo após levantamento preliminar da situação em cinco cooperativas participantes do Programa de Coleta Seletiva do Município de São Paulo. O estudo qualitativo incorporou dados obtidos por meio de observações e medições in loco, revisão de documentos e grupos focais com catadores. Os dados quantitativos foram levantados mediante aplicação de questionário e avaliação clínica individualizada dos 83 participantes de ambas cooperativas. As informações obtidas foram integradas, analisadas e comparadas com outros estudos sobre centrais de triagem de recicláveis brasileiras e estrangeiras. Resultados: poucas melhorias nas condições de trabalho foram conquistadas pelos catadores cooperativados que atuam em centrais de triagem de recicláveis, se comparados aos catadores de lixões e das ruas. Os níveis de produtividade são baixos, assim como a consequente remuneração. Não possuem capacidade técnica para sustentar o empreendimento tanto no âmbito gerencial, organizacional ou operacional. Medidas para a promoção da saúde, prevenção de acidentes e doenças são pontuais e mínimas. Diversos fatores de risco (físico, químico, biológico, mecânico, de acidentes, ergonômico e psicossocial) foram identificados e correlacionados com doenças e acidentes revelados pelos participantes. As manifestações clínicas mais frequentes foram: dores musculoesqueléticas (77 por cento ), lesões no corpo (48 por cento ) e problemas respiratórios (43 por cento ). Cortes ou perfurações foram relatados por 69 por cento dos participantes. Conclusão: algumas atitudes inéditas e práticas operacionais arriscadas foram reveladas e, seguramente, demandam intervenções indispensáveis e imediatas. Os desfechos deste estudo são importantes para suscitar reflexões, ampliar discussões e poderão contribuir para a tomada de decisão em diversas esferas de gestão (saúde, previdência, trabalho e ambiente), assim como servir aos interesses e necessidades dos trabalhadores e da sociedade. / In recent years, the presence of noticeable occupational hazards in recycling sorting facilities has been pointed out in national and international literature. Most of these risks are credited to the poor quality of the separation carried out by the population, resulting in the sending of dirty and hazardous waste for the selective collection of recyclables. Damage to the health and safety of workers who handle such materials may arise if the structural conditions, technologies, work\'s organizations and preventive measures adopted are not properly managed. Objectives: identify the occupational risk factors in two sorting facilities in the city of São Paulo; quantify injuries and diseases which had occurred before and during the study period; correlate risk factors with the injuries and diseases identified and recommend actions to minimize the damages to these workers\' health. Methodology: it is a multiple case study, exploratory, with quantitative-qualitative approach. It was initiated with a systematized review of the literature, focused on the health of recyclable waste pickers, covering two bibliographic databases in health science: PubMed and LILACS. Two sorting facilities were selected for this study after a preliminary survey of the situation in five cooperatives associated with the Selective Collection Program of the Municipality of São Paulo. The qualitative study incorporated data obtained through in situ observations and measurements, review of documents and focus groups with waste pickers. The quantitative data was collected through the application of a questionnaire and individualized clinical evaluation of the 83 participants of both cooperatives. Data obtained was integrated, analyzed and compared with other studies in Brazilian and foreign sorting facilities. Results: few improvements in working conditions were achieved by cooperative waste pickers working in recyclable sorting facilities compared to those acting in open dumps or streets. The level of productivity is low, as well as the consequent wages. They do not have the necessary background to give support in management, organization, or operations. Measures to promote health, prevention of accidents or diseases are punctual and minimal. Several risk factors (physical, chemical, biological, mechanical, accidental, ergonomic and psychosocial) were identified and correlated with diseases and accidents revealed by participants. The most frequent clinical manifestations were: musculoskeletal pain (77 per cent ), body injuries (48 per cent ) and respiratory problems (43 per cent ). Cuts or perforations were reported by 69 per cent of the participants. Conclusion: some previously unknown and unexpected attitudes and risky operational practices have been revealed and certainly require immediate and indispensable interventions. The outcomes of this study are important in order to stimulate reflection, broaden discussions and contribute to decision-making in various spheres of management (health, welfare, work and environment), as well as serving to the interests and needs of workers and society.

Introdução: O Sistema Manchester de Classificação de Risco tem como objetivo definir a prioridade clínica para atendimento médico de pacientes nos serviços de emergência. A avaliação de pacientes com suspeita de infarto agudo do miocárdio com sintomas típicos como a dor torácica realizada por meio do Sistema Manchester exige adequada sensibilidade e especificidade do sistema ao determinar a prioridade para atendimento médico. Objetivos: Os objetivos deste estudo foram integrar as melhores evidências disponíveis quanto a sensibilidade e especificidade do Sistema Manchester na classificação de pacientes com relação ao diagnóstico de síndrome coronariana aguda; estimar a sensibilidade e especificidade do Sistema Manchester na classificação de pacientes com dor torácica para a adequada priorização no que se refere ao diagnóstico de infarto agudo do miocárdio num hospital geral de ensino na cidade de São Paulo; e verificar associação entre o desempenho do Sistema Manchester na avaliação desses pacientes e variáveis selecionadas. Método: Este estudo foi desenvolvido em duas etapas, sendo a primeira uma revisão sistemática da literatura realizada segundo metodologia de revisões de acurácia de testes diagnósticos do Joanna Briggs Institute. Na segunda etapa do estudo foram estimadas a sensibilidade e a especificidade do Sistema Manchester na avaliação de pacientes com infarto agudo do miocárdio por meio de um estudo metodológico, transversal e retrospectivo. A sensibilidade e a especificidade do Sistema Manchester foram estimadas por meio da verificação da classificação estabelecida para pacientes com dor torácica que receberam ou não o diagnóstico médico de infarto agudo do miocárdio após a classificação. Resultados: Foram incluídos na revisão sistemática seis estudos com total de 54.176 participantes, todos de qualidade metodológica moderada, que apontaram valores de sensibilidade entre 70% e 80%. Dois estudos que apresentaram os dados necessários para o cálculo de especificidade, tiveram valores calculados de 59% e 97%. A amostra do estudo primário incluiu 10.087 episódios de classificação, sendo 52,3% de pacientes do sexo feminino com média de idade de 43,6 anos (DP=17,6). Do total de episódios, 139 tinham diagnóstico de infarto. A sensibilidade do Sistema Manchester foi de 44,6% e a especificidade foi de 91,3%. Houve associação estatisticamente significativa entre o desempenho do Sistema Manchester e a idade dos pacientes (p<0,001), com maior frequência de classificação incorreta nas faixas etárias mais altas. Não houve associação entre o sexo dos pacientes e o desempenho do Sistema Manchester. Conclusão: a recomendação para uso do Sistema Manchester na avaliação de pacientes no serviço de urgência em relação ao diagnóstico de síndrome coronariana aguda foi de grau B segundo graus de recomendação estabelecidos pelo Joanna Briggs Institute, o que remete a uma recomendação \"fraca\" para uma determinada estratégia de gestão da saúde. Essa conclusão decorre sobretudo da heterogeneidade dos critérios de inclusão e portanto das amostras dos estudos incluídos. Os resultados do estudo evidenciam a necessidade de se discutir formas de melhorar a sensibilidade desse sistema para a adequada priorização de pacientes com dor torácica. / Introduction: The Manchester Triage System aims to define the clinical priority of patients for medical care in the emergency department. The evaluation of patients with suspected acute myocardial infarction presenting typical symptoms such as chest pain using the Manchester Triage System requires proper sensitivity and specificity of the system in order to determine medical care priority. Objectives: The objectives of this study were: to integrate the best available evidence regarding the sensitivity and specificity of the Manchester Triage System in the evaluation of patients with the diagnose of acute coronary syndrome; to estimate the sensitivity and specificity of the Manchester Triage System in the classification of patients with chest pain to adequate prioritization in relation to the diagnose of acute myocardial infarction in a general teaching hospital in the city of São Paulo; to verify the association between the performance of the Manchester Triage System in the evaluation of these patients and selected variables. Methods: This study was developed in two stages, the first one consisted in a systematic review performed according to the methodology of diagnostic test accuracy systematic reviews from Joanna Briggs Institute. In the second stage of the study the sensitivity and specificity of the Manchester Triage System in the evaluation of patients with acute myocardial infarction were estimated though a methodological retrospective cross-sectional study. The sensitivity and specificity of the Manchester Triage System were estimated by verifying the classification of patients with chest pain who received or not the medical diagnosis of acute myocardial infarction. Results: The systematic review included six studies with a total of 54,176 participants, all of the studies with moderate methodological quality. The studies pointed sensitivity values from 70% to 80%. The specificity values calculated from two studies containing the necessary data were 59% and 97%. The sample of the performed primary study included 10,087 episodes of classification, 52.3% of the patients were females with average age of 43.58 years (SD=17.6). Of the total episodes, 139 had the diagnosis of infarction. The sensitivity of the Manchester Triage System was 44.6% and the specificity was 91.3%. There was statistically significant association between the performance of the Manchester Triage System and the age of the patients (p<0.001), with a higher frequency of incorrect classification in the older age groups. There was no observed association between the sex of the patients and the performance of the Manchester Triage System. Conclusion: Recommendation for the utilization of the Manchester Triage System in the evaluation of patients in emergency services to correct prioritization related to the diagnose of acute coronary syndrome was graded B according to the Joanna Briggs Institute grades of recommendation, which refers to a weak recommendation to a certain strategy for healthcare management. This finding is due to the heterogeneity of the inclusion criteria and therefore the samples of the included studies. The results of this study highlight the necessity of discussion about ways to improve the sensitivity of this system, for the adequate prioritization of patients with chest pain.