Orientador: Odair Correa Bueno / Banca: Maria Santina de Castro Morini / Banca: Neusa de Lima Nogueira / Banca: Roberta Cornélio Ferreira Nocelli / Banca: Priscila Cintra Socolowski / Resumo: Uma característica típica das formigas e algumas vespas é a presença das glândulas pós-faríngeas, estrutura que se encontra somente nesses grupos de organismos, fato que deve ter contribuído para o seu sucesso evolutivo. Apesar dos primeiros estudos com as glândulas pós-faríngeas existirem há mais de 100 anos, somente nos últimos 20 elas tem recebido maior atenção dos pesquisadores. Assim, a presente pesquisa teve por objetivo realizar uma análise comparativa da morfologia das glândulas pós-faríngeas e verificar sua participação na utilização de lipídeos ingeridos por três espécies de formigas com padrões alimentares distintos. Para tal, foi realizado análise ultramorfologica e ultraestrutural das glândulas pós-faríngeas; quantificação da ingestão de lipídeos e carboidratos, e verificação do trajeto destes compostos pelo sistema digestório das operárias; análise autorradiográfica do processo de incorporação do ácido oléico marcado radioativamente pelas glândulas pósfaríngeas das operárias. Os resultados encontrados sugerem que cada uma das espécies apresenta uma particularidade: as glândulas pós-faríngeas de Camponotus vittatus podem ser um sítio de reserva energética para o indivíduo; as operárias de Atta laevigata deslocam parte dos lipídeos ingeridos para o intestino médio, evitando o seu acúmulo nas glândulas pós-faríngeas, ao passo que foram encontradas pela primeira vez dois tipos de células nas glândulas pósfaríngeas de Pachycondyla villosa. Além disso, o trajeto percorrido pelos alimentos hidrossolúveis no interior do sistema digestório das operárias compreende a cavidade infrabucal, papo e ventrículo. Enquanto que os lipídeos passam pela cavidade infrabucal, glândulas pós-faríngeas e papo, mas não atingem o ventrículo; com exceção de A. laevigata em que foram encontrados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaix / Abstract: A typical gland found only in ants and some wasps species is the postpharyngeal gland, which could have contributed to the evolutionary success of these social insects. The first studies regarding the morphology and function of the postpharyngeal glands were conducted about 100 years ago, and only in the last 20 years researches gave more attention to its importance. Thus, this study aimed at comparing the morphology of postpharyngeal glands and to verify their participation in the use of lipids ingested by three ant species. For this purpose, we performed: 1- Ultrastructural and Ultramorphology analysis of the postpharyngeal glands; 2 - the flow of lipids and carbohydrates inside the digestory systeam; 3 - the incorporation of radiolabeled oleic acid by the postpharyngeal using autoradiografic methods. Our results suggest that each species has a particularity: the postpharyngeal glands of Camponotus vittatus may be act as a site of food reserve, the workers of Atta laevigata prevent the accumulation of oleic acid in the postpharyngeal glands by sending lipids ingested to midgut. On the other hand, Pachycondyla villosa has specialized cells to eliminate of lipids from the postpharyngeal glands. Moreover, water-soluble diets were found in infrabucal pockets, crop and ventriculi, while lipid-soluble diets were found in infrabucal pockets, postpharingeal glands and crop; except for A. laevigata, which also had lipids in their midgut. Autorradiografic analysis showed that oleic acid is absorbed by the epithelium of... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Carminda da Cruz Landim / Banca: José Eduardo Serrão / Banca: Glaucia Maria Cavasin Oliveira / Banca: Lucio Antonio de Oliveira Campos / Banca: Fabio Camargo Abdalla / Resumo: Entre as abelhas altamente eussociais, o estudo de aspectos da morfologia e da ultra-estrutura tem ajudado a esclarecer uma série de questões sobre a sua biologia. A divisão de trabalho distingue as fêmeas em duas castas, sendo uma com função reprodutiva (rainha) e outra que desempenha as mais diversas tarefas dentro da colônia (operária). Espécies do gênero Frieseomelitta mostram esta divisão de forma mais clara, uma vez que suas operárias nunca põem ovos; começando um processo degenerativo nos ovários ainda no final de sua diferenciação. Porém, nas diferentes espécies e em diferentes condições, as operárias podem desenvolver seus ovários e realizar postura de ovos tróficos que são comidos pelas rainhas, ou dar origem a machos. O primeiro caso mostra que além da contribuição dada pelas operárias na produção de alimento para a cria com suas secreções glandulares, elas contribuem também com seus ovos para produzir alimento. Já o segundo caso pode ser um indicativo de que a divisão do trabalho reprodutivo ainda não está totalmente definida. A fertilidade das rainhas também parece se manifestar de diferentes formas. Em Apis mellifera, é evidenciada pela enorme diferença no número de ovaríolos, bem maior nas rainhas do que nas operárias. Esta diferença é devido a uma redução sofrida pelas operárias durante o desenvolvimento pós-embrionário. Já nos 9 meliponíneos o número de ovaríolos de rainhas e operárias é, para a maioria das espécies, igual e em número de quatro por ovário. Em Trigona spinipes, o número de ovaríolos dos ovários das operárias é sempre igual a quatro, enquanto que nas rainhas pode variar entre oito e quinze, entre as rainhas e entre os ovários da mesma rainha... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The survey of morphological and ultrastructural aspects of highly eusocial bees, have cleared and supported many questions about their biology. The division of labour discern the females in to two castes, being one with reproductive function (queen) and other that perform differents tasks within the colony (worker). Frieseomelitta shows this division clearly. The workers never lay eggs; starting a degenerative process in the ovaries yet in the ending your differentiation. However, in different species and in different conditions, the workers can develop their ovaries and lay eggs that can be trophic and be eaten by the queens, or give rise males. The first condition show that further of the contribution given by the workers in the food production for the brood with yours glandular secretions, they contribute also with yours eggs for to produce food. The second condition can be an evidence that division of reproductive labour is not entirely solved yet. Queen's fertility also seems to be expressed in different ways. In honey bees Apis mellifera, there is a large difference in ovarioles number, which are bigger in queens than workers. This difference is due to the decrease in workers ovarioles number during the post-embryonic development. In Meliponini the ovarioles number of queens and workers is, for most of the species, the same; four per ovary. 11 In Trigona spinipes, the ovarioles number in workers is always four, while in queens can vary from eight to fifteen among queens and among the ovaries of the same queen. Anyway, the ovariole number present in the ovary of queens in Meliponini is very small if compared to Apis mellifera; that suggest that their efficience in egg production can be higher and attached to the ovarioles lengh... (Complete abstract, click electronic address below) / Doutor

Orientador: Carminda da Cruz-Landim / Banca: Karina Patrício / Banca: José Lino Neto / Banca: José Chaud Netto / Banca: Daniela Carvalho dos Santos / Resumo: Os ovários das rainhas diferem dos de operárias de Apis mellifera quanto ao número e comprimento dos ovaríolos. Tanto o número, como o comprimento destes, é muito maior na rainha que nas operárias. No entanto, em ambos os casos os ovários são funcionais, isto é, capazes de produzir óvulos maduros. Apesar disso, operárias e rainhas diferem muito quanto à fertilidade e aos mecanismos controladores/estimuladores da vitelogênese, ou seja, da maturação dos óvulos. Em condições normais da colônia, nas rainhas a vitelogênese é desencadeada pelo acasalamento e nas operárias, pela ausência da rainha ou do recebimento de informações sobre sua presença na colônia. Passada a ocasião própria para o acasalamento no caso da rainha, e em idade avançada das operárias, os ovários entram em degeneração. O objetivo do presente trabalho foi o de avaliar como se comporta o desenvolvimento do ovário em rainhas e operárias mantidas fora dos condicionamentos da colônia e o efeito do tratamento destas com CO2, prática corrente na apicultura. Para tanto, operárias e rainhas foram mantidas aprisionadas em caixas com candy e água durante 15 dias e seguida a seqüência de desenvolvimento de seus ovários. O efeito do não acasalamento na época própria e do tratamento com CO2 foi feito estudando a morfologia do desenvolvimento da ovogênese, usando TUNEL e reação de fosfatase acida para caracterizar possíveis alterações celulares. As células do filamento terminal apresentaram-se empilhadas em fila única. Na transição para o germário as células tornam-se piramidais com a base apoiada sobre a lâmina própria e o ápice voltado para o centro do ovaríolo. São encontradas células esféricas, provavelmente ovogônias. No germário estão presentes células somáticas e germinativas, sendo da linhagem germinativa, os cistoblastos, os cistócitos, os ovócitos e as futuras... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The ovaries of queens and workers of Apis mellifera differs in number and length of the ovarioles. Length and number of ovarioles are larger in queen than in workers. However, in both cases, the ovaries are functional, i.e., it is able of produce mature eggs. Despite of that, workers and queens differ very in fertility and mechanisms of controlling/inducing vitellogenesis. In colony conditions, queen's vitellogenesis is triggered by the matting and in workers by the absence of the queen or of the receipt of information about its presence in the colony. After the age proper to mate or in workers advanced age, the ovaries enter in degeneration. The objective of the present work was the evaluating of the ovary development in queens and workers maintained caged outside of the colony conditionings and the effect of the narcosis with CO2, practice current in the beekeeping. Newly emerged queens and workers were caged with candy and water during 15 days. For the queens the effect of the mate delay and CO2 narcosis were studied using TUNEL and acid fosfatase reaction to evaluate cell damages. The cells of the terminal filament appear as rows of one single cell, with a rectangular shape, poor in organelles and with a big central nucleus. In the transition for the germarium the cells present a pyramidal form with their base widened resting on tunica propria and the apex directed to center of the ovariole. Below the region of transition to the germarium are spherical cells, probably the oogonia. In the germarium are found somatic (pre-follicular cells) and germinative (cystoblasts, the cystocists, the oocytes and the future nurse cells) cells. The queen's ovaries develop normally until the mating age, 5 days old queens. About the 10 days, the virgin queen beginning to presents an ovariolar disorganization with big incidence of injured cells with characteristics of apoptosis and autofagic death... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Silvia Rodrigues Machado / Resumo: Neste estudo buscamos avaliar diferentes aspectos da diferenciação de laticíferos. O crescimento intrusivo (capacidade de crescer penetrando a lamela média de células adjacentes) e a ação indutora dos laticíferos (capacidade de induzir uma célula vizinha a adquirir características de laticíferos) são mecanismos de crescimento interessantes que podem ocorrer nos laticíferos, mas que são mal compreendidos. O etileno e o ácido jasmônico são hormônios vegetais liberados durante a herbivoria e podem afetar a diferenciação de estruturas secretoras relacionadas à defesa, como laticíferos e ductos resiníferos. Utilizando métodos convencionais em microscopia eletrônica de transmissão, para caracterização da ultraestrutura celular, e imunocitoquímicos, para a detecção de componentes de parede celular, exploramos o desenvolvimento de laticíferos articulados anastomosados com crescimento intrusivo e a ação indutora dos laticíferos no embrião maduro e na planta de Tabernaemontana catharinensis A.DC. (Apocynaceae). Além disso, pulverizamos soluções de etileno 2%, ácido jasmônico 0,1% ou água deionizada em plantas (n = 33) de T. catharinensis cultivadas em condições controladas e avaliamos a influência destes reguladores vegetais sobre a diferenciação dos laticíferos nos tecidos primários e floema secundário. Ultraestruturalmente, verificamos que o processo de incorporação de células ao sistema laticífero é distinto no embrião e na planta. Entretanto, em ambos os casos, o protoplasto da cél... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this study, we evaluated different aspects of the laticifer differentiation. The intrusive growth (the capacity of grow penetrating the middle lamella that cements adjacent cells) and the inducing action of laticifers (the capacity of induced an adjacent cell to acquirer laticifer features) are exciting growth mechanisms that may occur in laticifers, but they are poorly understood. Ethylene and jasmonic acid are plant hormones released during the herbivory and may affect the differentiation of secretory structures related with plant defense, as laticifers and resin ducts. Using transmission electron microcopy conventional methods (for characterization of the cell ultrastructure), and immunocytochemistry (for detection of the cell wall compounds), we explored the development of the articulated anastomosing laticifers with intrusive growth and the induction action of laticifer in the mature embryo and plant of Tabernaemontana catharinensis A.DC. (Apocynaceae). Additionally, we sprayed solutions of the 2% ethephon, 0.1% jasmonic acid and deonized water in plants of T. catharinensis (n = 33) growing under controlled conditions and evaluated the influence of these plant regulators on laticifer differentiation in the primary tissues and secondary phloem. In the ultrastructure, we verified that the process of cell incorporation within the laticifer system is distinct in the embryo and plant. However, in both the cases the protoplast of the incorporated cells acquires similar feat... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Os isópodos terrestres possuem uma cutícula protetora que mantém a forma corporal, permite locomoção e comunicação com o ambiente e protege contra dessecação, infecção e predação. Assim como nos demais crustáceos, a cutícula é composta por uma matriz orgânica que é mineralizada com cálcio. A cutícula é uma estrutura versátil que reflete adaptações ambientais e a ampla distribuição geográfica do grupo. Dessa forma, a ultraestrutura e a composição da cutícula variam entre espécies. Isópodos terrestres fazem mudas frequentes ao longo da vida para crescer e/ou renovar receptores de superfície, o que resulta em reabsorção e deposição cuticular constante. Esse grupo apresenta muda bifásica e deposição de placas de cálcio nos esternitos anteriores antes da ecdise como estratégia para reciclar o cálcio corporal. Estudos relacionados à cutícula nesse grupo contemplam a ultraestrutura, a composição e a deposição bem como o efeito de alguns fatores ambientais na muda. No entanto, poucos estudos exploram as ligações entre ecomorfologia e história de vida. Essa tese visa explorar diversos aspectos relacionados à cutícula e a muda de duas espécies neotropicais de isópodos terrestres. Atlantoscia floridana e Balloniscus glaber foram usados como modelo uma vez que são frequentemente encontrados nas mesmas localidades e diferem em tipo ecomorfológico e estratégias ambientais. No Capítulo I, foram exploradas as estruturas de superfície e a ultraestrutura da cutícula das duas espécies a fim de ver como as diferenças encontradas podem ser relacionadas à história de vida de cada espécie, utilizando técnicas de microscopia. As espécies diferiram em tipo e disposição das estruturas de superfície bem como em espessura e proporção de camadas da cutícula. De maneira geral, as diferenças das estruturas de superfície estão relacionadas à seleção de microhabitat e nicho ecológico. Características cuticulares ajudam a explicar o hábito endógeno de B. glaber e epígeo de A. floridana enquanto que as diferenças em ultraestrutura são relacionadas a estratégias comportamentais e tolerância ambiental. No Capítulo II, o efeito do cálcio alimentar no ciclo de muda das espécies foi testado. Para isso, dieta experimental e análise estrutural da cutícula foram realizadas a fim de entender como diferentes concentrações de cálcio alimentar interferem na duração do ciclo de muda. Peculiaridades na ecdise em A. floridana refletem morfologia específica do animal. A duração da intramuda foi maior em B. glaber assim como a sobrevivência média nos tratamentos. A duração do ciclo de muda foi influenciada pela concentração de cálcio; uma tendência a menor duração do ciclo com o aumento da concentração de cálcio foi observada em B. glaber, enquanto em A. floridana a diferença encontrada foi apenas entre o controle sem cálcio e os demais tratamentos. Não houve efeito da dieta no grau de mineralização ou na ultraestrutura em B. glaber. Independentemente do tratamento, a maior taxa de mortalidade em laboratório parece estar relacionada com o próprio processo de ecdise, com mortalidade acumulada de 20% do início da ecdise até o início da pós-muda para ambas as espécies. No Capítulo III, a secreção da cutícula durante a pré- e pós-muda muda foi observada utilizando microscopia de transmissão. A deposição seguiu o padrão observado para outros isópodos. Entretanto, grânulos eletrondensos presentes no espaço ecdisial durante a pré-muda são provavelmente constituídos de cálcio, sugerindo a reciclagem de cálcio diretamente da cutícula velha para a nova no mesmo segmento. Esses grânulos são depositados nas escamas na nova epicutícula antes da ecdise, sugerindo a presença de cálcio na superfície cuticular das espécies. Além disso, regiões sem a ultraestrutura típica encontrada na pós-muda indicam que há modificação na exocutícula após a ecdise uma vez que a expansão e endurecimento da nova cutícula apenas após a ecdise. De maneira geral, esse trabalho não apenas trouxe novas informações sobre a estrutura cuticular de duas espécies neotropicias, mas também contribuiu para esclarecer conexões entre ecomorfologia e requerimentos biológicos de isópodos terrestres. / Terrestrial isopods have a protective cuticle that maintains body shape, allows locomotion, enables communication with the environment and protects them against desiccation, infection and predation. As in all crustaceans, their cuticle is composed of an organic matrix that is mineralized with calcium. The cuticle is highly versatile reflecting adaptations to environmental conditions and large geographical distribution of this group. Therefore, cuticle ultrastructure and composition vary among species. Terrestrial isopods molt frequently throughout their lives in order to grow and/or renew surface receptors, resulting in constant cuticular resorption and deposition. In this group, this dynamics of cuticle formation is affected by the biphasic molt and by the calcium deposition on sternal deposits prior ecdysis, strategies to recycle body calcium. Studies related to cuticle on this group include ultrastructure, composition and deposition as well as effect of some environmental factors on molting. However, few studies explore connections of ecomorphology and life history of animals. This thesis aimed to explore various aspects of cuticle structure and molting using two Neotropical species of terrestrial isopods. Atlantoscia floridana and Balloniscus glaber were used as models since they are found in the same locations while differing in ecomorphology and behavioral strategies. In Chapter I, I explored the cuticle surface structures and ultrastructure of both species to see how their differences can be related to each species life history traits, using microscopy techniques. Species differed in surface structures type and disposition, as well as cuticle thickness and layer proportion. Overall, differences in surface structure are related to microhabitat selection and ecological niche. Cuticular features further explain the endogeic habit of B. glaber and epigeic habit of A. floridana, while differences in cuticle ultrastructure relate to behavioral strategies and environmental tolerance. Next, differences on molting cycle and environmental requirements were analyzed. In Chapter II, I tested the effects of dietary calcium on the molting cycle of both species. For that, artificial diet and structural analysis of the cuticle were used to understand how different concentrations of dietary calcium interfere with molt cycle duration. Peculiarities were observed during ecdysis in A. floridana and reflect to specific morphology of the species. Intramolt duration was longer for B. glaber as well as overall survivorship in treatments. Cycle duration was influenced by calcium concentration; a trend of shorter molt cycle length with increasing calcium concentration was observed for B. glaber, while in A. floridana, only difference between control without calcium and other treatments was observed. Degree of mineralization and cuticle ultrastructure of B. glaber showed no difference between treatments. Regardless of treatment or species, higher mortality rate under lab conditions seems to be related to the process of ecdysis itself, with cumulative mortality of 20% from the beginning of ecdysis until the beginning of postmolt. In Chapter III, I used transmission electron microscopy to analyze cuticle secretion in both species during pre- and postmolt stages. Cuticle deposition during premolt followed the same pattern as other terrestrial isopods. Nonetheless, electron dense granules present on the ecdysial space during premolt are likely calcium granules, suggesting the recycling of calcium within the same segment. These granules are deposited on the scales of the new epicuticle prior ecdysis, suggesting the presence of calcium on the cuticular surface of both species. Moreover, regions without typical lamellate ultrastructure during postmolt indicate modification of the exocuticle after ecdysis since expansion and hardening must occur after ecdysis. Overall, this work not only added information on cuticular structure of two Neotropical species but also clarified connections between ecomorphology and biological requirements of terrestrial isopods.

O gênero Aulacoseira Thwaites é exclusivo de águas continentais e possui ampla distribuição mundial. As espécies do gênero vêm sendo estudadas, principalmente para regiões temperadas da América do Norte e Europa. Atualmente, Aulacoseira conta com aproximadamente 60 espécies, dentre fósseis e atuais. No Brasil, apenas 17 espécies foram registradas e poucos trabalhos apresentaram informações sobre a ultra-estrutura da frústula. Desta forma, o presente estudo teve por objetivos analisar as características morfológicas e estruturais das espécies de Aulacoseira do Brasil e a distribuição geográfica das espécies em ambientes aquáticos brasileiros. O estudo baseou-se em 286 amostras de plâncton e perifíton, procedentes de diversos tipos de ambientes, como rios, lagos, lagoas e reservatórios, abrangendo 24 estados brasileiros. Exemplares de Aulacoseira foram analisados sob microscopia óptica e eletrônica de varredura e transmissão. Os táxons encontrados foram descritos, mensurados, ilustrados e comentados. Uma chave dicotômica foi providenciada para auxiliar na determinação das espécies e glossário para compreensão das estruturas. A análise do material permitiu a identificação de 23 táxons infragenéricos de Aulacoseira, sendo 18 espécies, três variedades não típicas e duas formas taxonômicas. Dentre estas, seis constituíram novas espécies para ciência (A. brasiliensis, A. calypsi, A. minuscula, A. pantanalensis, A. samariana e A. simoniae) e duas não foram determinadas em nível específico. Aulacoseira pseudoamericana e A. herzogii var. minor constituíram citação pioneira para o Brasil e A. gessneri teve sua ultra-estrutura documentada pela primeira vez. Dos 29 táxons infragenéricos de Aulacoseira já registrados para o Brasil, apenas 13 foram encontrados durante o estudo, alguns táxons foram reidentificados e outros puderam ser revistos devido há ausência de informações complementares nas publicações. Aulacoseira calypsi, A. gessneri, A. pantanalensis, A. pseudoamericana, A. samariana e A. herzogii var. minor apresentaram distribuição restrita à áreas de clima tropical enquanto que Aulacoseira cf. alpigena, A. granulata var. angustissima f. spiralis e Aulacoseira sp.2 ocorreram exclusivamente em regiões subtropicais. O elevado número de novas espécies encontradas ressalta a importância de estudos taxonômicos mais aprofundados para melhor conhecimento das características diacríticas das espécies que ocorrem em ambientes continentais brasileiros. Palavras-chave: ambientes continentais, diatomáceas cêntricas, taxonomia, ultra-estrutura. / The genus Aulacoseira Thwaites is exclusive of continental waters and has worldwide distribution. The species of this genus have been widely studied, mainly to temperate regions of North America and Europe, and the taxa that occur in South America are poorly known. Currently, Aulacoseira has approximately 60 species, among fossil and recent. In Brazil, only 17 species were recorded and few studies presents data on the ultrastructure of the frustule. Thus, this study aimed to analyze the structural and morphological features of the Aulacoseira genus and geographical distribution of species in aquatic environments in Brazil. The study was based on 286 samples of plankton and periphyton, collected in different types of environments such as rivers, lakes, ponds and reservoirs distributed in 24 states. Specimens of Aulacoseira were examined under light and electron microscopy. The taxa were described, measured, illustrated and discussed. Dichotomous key was provided to assist in determining the species and glossary for understanding the structures described. The analysis allowed the identification of 23 infrageneric taxa of Aulacoseira, with 18 species, three varieties and two non typical taxonomic forms. Among these, six new species for science were found (A. brasiliensis, A. calypsi, A. minuscula, A. pantanalensis, A. samariana e A. simoniae) and two were not determined at specific level. Aulacoseira pseudoamericana and A. herzogii var. minor were first recorded in Brazil and A. gessneri its ultrastructure was first revealed. Of the 29 taxa of Aulacoseira already recorded in Brazil, only 13 were found during the study, some taxa were reidentified and others could not be revised because there is no additional information in publications. Aulacoseira calypsi, A. gessneri, A. pantanalensis, A. pseudoamericana, A. samariana and A. herzogii var. minor present distribution restricted to tropical areas while Aulacoseira cf. alpigena, A. granulata var. angustissima f. spiralis and Aulacoseira sp.2 occurred exclusively in the subtropics.The high number of new species found highlights the importance of more detailed taxonomic studies to improve knowledge of diacritical features of the species occurring in Brazilian environments.

Os padrões de estocagem de esperma e as variações morfológicas cíclicas do trato reprodutivo feminino constituem táticas reprodutivas muito pouco estudadas em serpentes neotropicais, se comparadas às serpentes de regiões temperadas. Assim, o presente estudo teve por objetivo caracterizar e compreender as estratégias reprodutivas empregadas por fêmeas de quatro espécies de serpentes brasileiras da subfamília Xenodontinae. Amostras de gônadas e vias genitais foram coletadas em diferentes estações do ano e relacionadas aos estágios reprodutivos da fêmea. Os resultados indicaram que as serpentes estudadas possuem dois locais de estocagem de esperma distribuídos no infundíbulo posterior e na junção útero-vaginal. Liophis miliaris, Oxyrhopus guibei e Philodryas patagoniensis apresentaram estocagem por meio de glândulas túbulo-alveolares ramificadas e glândulas tubulares ciliadas no infundíbulo posterior. Das quatro espécies estudadas, apenas Tomodon dorsatus e P. patagoniensis apresentaram grupos de espermatozóides armazenados nos sulcos da junção útero-vaginal. No entanto, unicamente P. patagoniensis parece ter a capacidade de produzir várias ninhadas com esperma estocado proveniente dessa região. Em ambos os locais de estocagem as células secretoras aumentaram a produção de carboidratos neutros na presença de esperma, o que sugere um processo de nutrição. Em fêmeas vitelogênicas o aumento da atividade secretora do epitélio ovidutal com produção de vacúolos eletrodensos parece estar sobre controle hormonal. Durante o ciclo reprodutivo as glândulas uterinas de espécies ovíparas e vivíparas também mostraram um aumento da secreção em fêmeas vitelogênicas. No entanto, as glândulas uterinas das espécies ovíparas apresentaram uma maior atividade do retículo endoplasmático rugoso, o que indicou produção de proteínas para formação da membrana da casca. O ciclo reprodutivo e a época de acasalamento variaram entre as populações das diferentes espécies. Em L. miliaris, O. guibei e P. patagoniensis essas variações estiveram ligadas a mudanças na temperatura e pluviosidade, já T. dorsatus não apresentou variações no ciclo reprodutivo, provavelmente influenciada pela inércia filogenética. / Sperm storage patterns and cyclic morphological variations in the female reproductive tract are poorly studied reproductive tactics in Neotropical snakes if a comparison to snakes from temperate regions is established. Therefore, the aim of this study is to characterize and understand the female reproductive strategies of four species of Xenodontinae snakes from Brazil. Samples of the gonads and genital ducts were collected during the different seasons of the year and a correlation with female reproductive stages was established. Results show that these snakes have two sperm storage sites in the posterior infundibulum and uterovaginal junction. Liophis miliaris, Oxyrhopus guibei and Philodryas patagoniensis store sperm by means of branched tubuloalveolar glands and tubular ciliated glands in the posterior infundibulum. Only Tomodon dorsatus and P. patagoniensis showed sperm stored in the furrows of the uterovaginal junction. Anyway, only P. patagoniensis seems to be capable of producing multiple clutches using sperm stored in this portion. Secretory cells increased the production of neutral carbohydrates in the presence of sperm in both sperm storage sites, which suggests the existence of a nutrition process. In vitellogenic females, the increase of the secretory activity in the oviductal epithelium with production of eletrodense vacuoles seems to be under hormonal control. During the reproductive cycle, uterine glands of oviparous and viviparous species also showed an increase in secretion in vitellogenic females. However, uterine glands of oviparous species showed more intense activity of the rough endoplasmic reticulum, which indicates the production of proteins for the formation of the egg shell. Reproductive cycles and timing of mating varied between different populations. In L. miliaris, O. guibei and P. patagoniensis, these variations were linked to the changes in temperature and rainfall patterns, but T. dorsatus did not show any variation in the reproductive cycles between populations, probably influenced by phylogenetic inertia.

Verificou-se o metabolismo e as repercussões morfológicas no timo de forma qualitativa e quantitativa através de morfometria e estereologia.Utilizaram-se 30 ratos wistar () nos grupos Nutrido (N=10), Desnutrido (D=10) e Renutrido (R=10). O peso corporal e a ingestão foi maior no N, menor no D, e os R apresentaram valores médios em relação a estes grupos. Todos os outros parâmetros (ingestão de água, excreção de fezes e urina, %ingestão/peso corporal, %fezes/ingestão, água/peso corporal, %urina/água consumida e peso tímico) não obtiveram diferença estatística entre o N e R. O grupo D mostrou exuberante alteração nos componentes elásticos e fibrosos, menor calibre dos seus vasos, atrofia dos lóbulos tímicos (com limite córtex-medular muitas vezes indefinido), e grande quantidade de timócitos em apoptose no córtex e na medula. Poucos corpúsculos tímicos foram verificados no grupo D, diferindo dos animais N e R. Deste modo, afirma-se que os animais R conseguiram restituir a morfologia da glândula após intervenção nutricional. / The Metabolism and morphologic repercussions on thymus were verified in a qualitative and quantitative way by morfometric and stereologycal assessment. 30 wistar rats were used () in the Nourishment (N=10), Undernourishment (UN=10) and Re-nourishment (RN=10) groups. The body weight and ingestion were higher in N, lower in UN, and RN presented medium values in relation to the others groups. All the addicional parameters as water ingestion, faeces and urine excrecion, %ingestion/corporal weigh, %faeces/ingestion, water/corporal weight, %urine/water consumed and thymic weight, had no statistics difference between N and RN. The UN group showed exuberant modification on elastic and fibrous components, smaller caliber of their vessels, thymic lobule atrophy (with many times indefinite cortex-medular limit), and apoptose of timocytes in the cortex and medulla. Few thymic corpuscles were verified in UN group differing of the N and RN. Therefore, after nutricional intervencional, the gland morphology was reestablished.

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:43:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_JulianaCastro_M.pdf: 5278625 bytes, checksum: 63e213bed61e034d07b8ef348696a065 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: TA ciclosporina A (CsA) possui potentes propriedades imunossupressivas e tem sido amplamente usada na terapia de transplantes de órgãos, aumentando as taxas de sobrevivência dos enxertos, e no tratamento de algumas doenças auto-imunes. Apesar de ser um importante medicamento, diversas reações colaterais são verificadas, entre elas a toxicidade testicular, levando à infertilidade masculina. Heteropterys aphrodisiaca é uma planta com indicações de estimulante e potente afrodisíaco, que aumenta o peso corporal e testicular e o volume das células de Leydig nos testículos de ratos adultos. Assim o efeito da associação dessas drogas foi estudado em ratos Wistar em idade reprodutiva, com avaliação da morfometria, estrutura e ultra-estrutura testicular. Foram utilizados 30 ratos divididos em 5 grupos: I- controle; II- tratamento com CsA; III- concomitante uso de CsA e H. aphrodisiaca; IV- pré-tratamento com H. aphrodisiaca por 30 dias, seguido de CsA por 26 dias; V- tratamento com H. aphrodisiaca. CsA foi administrada na dose de 15 mg/kg/dia e H. aphrodisiaca na dose de 0.5 ml de infusão preparada com 25g de raízes secas/100 ml água fervente. Os tratamentos foram administrados diariamente por gavagem, durante 56 dias. Aumento do peso corporal foi observado em todos os grupos, mas os grupos II e III tiveram menor ganho de peso. O peso dos testículos e dos órgãos sexuais acessórios, assim como a proporção e o volume dos compartimentos tubular e intersticial não alteraram nos grupos tratados. Com a administração de CsA houve aumento na proporção de tecido conjuntivo e redução na proporção de células de Leydig que, além disso, eram menores e com citoplasma mais denso que as células dos animais de outros grupos tratados. Por outro lado, a infusão de H. aphrodisiaca resultou em aumento do volume nuclear das células de Leydig. Os níveis de testosterona plasmáticos, o número de células de Leydig por testículo e por grama de testículo aumentou significativamente nos animais do grupo III. CsA causou degeneração das células germinativas, vacuolização nas células de Sertoli, espermátides arredondadas anormais e atrofia das organelas envolvidas na síntese de esteróides nas células de Leydig. H. aphrodisiaca causou vacuolização nas células de Sertoli, perda do contato e espaçamento entre as células germinativas e aumento de retículo endoplasmático liso e mitocôndrias nas células de Leydig. O tratamento concomitante e sequencial com CsA e H. aphrodisiaca foi efetivo em manter a ultra-estrutura das células de Leydig. Nesses tratamentos, as alterações observadas no epitélio seminífero foram a combinação das modificações observadas em cada tratamento separadamente. Entretanto, H. aphrodisiaca exerceu um efeito protetor no epitélio germinativo, uma vez que as modificações encontradas nesses grupos foram menos severas em relação ao grupo tratado somente com CsA / Abstract: Cyclosporine A (CsA) has potent immunosuppressive properties and it has markedly improved the ability of transplant patients to survive grafts and is also used in some autoimmune diseases. However, the drug has several side effects, including testicular toxicity, leading to male infertility (and temporary impotence?). Stimulant and aphrodisiac properties has been attributed to the plant, Heteropterys aphrodisiaca. Data from other experiments suggests that the root extract can increase body and testicular weight and the volume of Leydig cells in rat testis. Thus, the present work was undertaken to study the association of the drug and the medicinal herb in Wistar rats, evaluating testicular morphometry, structure and ultrastructure. Thirty adult rats were used, divided into five groups: I- control; II¿ CsA; III¿ simultaneous use of CsA and H. aphrodisiaca; IV- H. aphrodisiaca for 30 days and CsA sequentially for another 26 days; V- H. aphrodisiaca. CsA was administered at a dose of 15 mg/kg/day and/or H. aphrodisiaca at a dose of 0.5 ml of the infusion prepared with 25g of roots/100ml boiling water, daily by gavage, during 56 days. Increased body weight was observed for all groups, but the animals that received CsA for 56 days showed the smallest body weight gain. The testis and accessory sex organs weights were unchanged. The volume and volumetric proportion of seminiferous tubules and interstitial compartments did not alter in all treated groups. Morphometry showed increased connective tissue volumetric proportion and decreased Leydig cell volumetric proportion in CsA-treated rats. The Leydig cells of CsA-treated animals were smaller and more dense than other groups. On the other hand, the H. aphrodisiaca infusion resulted in an increase in Leydig cell nuclear volume. The plasma testosterone levels and number of Leydig cells per testis increased significantly in group III. Using transmission electron microscopy, it was possible to ascertain that CsA caused germ cell degeneration, Sertoli cell vacuolization, abnormal round spermatids and atrophy of the organelles involved in steroid synthesis in Leydig cells. H. aphrodisiaca caused Sertoli cell vacuolization, loss of germ cell attachment and expanded intercellular spaces between germ cells and Leydig cells with more mitochondria and smooth endoplasmic reticulum. The simultaneous and sequential treatment with H. aphrodisiaca and CsA was effective in maintaining the Leydig cell ultrastructure. In these treatments, the seminiferous epithelium alterations were a combination of the modifications observed for each isolated treatment. However it can be stated that H. aphrodisiaca had a protective effect on the testicular tissue, since less severe modifications were found for this group in relation to the rats that received only CsA / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Predes_FabriciadeSouza_M.pdf: 1559316 bytes, checksum: e206924da33f15ad0daf61b7e2a85726 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: o cádmio (Cd) é um dos poluentes ambientais importantes que causam danos a vários órgãos e tecidos, incluindo os testículos. O objetivo deste trabalho é investigar o efeito protetor e curativo do extrato de G biloba (GbE) nos testículos de ratos adultos Wistar tratados com dose única de Cd. Trinta animais foram divididos aleatoriamente em 5 grupos que receberam: Grupo 1: água por 56 dias ( controle); Grupo 2: GbE por 56 dias; Grupo 3: CdClz (dose única) e água por 56 dias; Grupo 4: CdCh (dose única) e GbE por 56 dias (Cd + GbE); Grupo 5: pré-tratamento com GbE por 30 dias e CdCh no 31° dia (GbE-Cd). O GbE foi administrado diariamente na dose de 100 mg/Kg de peso corporal por gavagem. O cloreto de cádmio (CdCh) foi injetado intraperitonealmente em dose única de 3 umol/Kg de corporal. Após a coleta de sangue, os ratos foram fixados por perfusão com Kamovsky modificado. Fragmentos de testículo incluídos em metacrilato foram secionados na espessura de 3um e corados com azul de toluidina/borato de sódio 1% para estudo morfométrico em miCroscopia óptica. Para observação em microscópio eletrônico de transmissão fragmentos de testículo foram refixados com tetróxido de ósmio 1 % no mesmo tampão a 4°C, desidratados em acetona e incluídos em Epoxy. Cortes ultrafinos foram feitos com navalha de diamante e contrastados com acetato do uranila 2% e citrato de chumbo 2%. Os níveis de testosterona plasmática obtida por RIA não foram alterados neste estudo. Não houve alteração do peso corporal e testicular, do epidídimo e das glândulas acessórias, vesícula seminal e próstata além do índice gonadossomático. A proporção volumétrica e o volume absoluto dos componentes testiculares não alteraram após os tratamentos. O grupo 3 que recebeu somente Cd teve redução significativa no volume individual das células de Leydig. Entretanto, animais que receberam GbE como pré tratamento ou GbE após a dose de Cd não apresentaram esta redução. Isto sugere que GbE é eficaz em manter o volume das células de Leydig em ratos tratados com Cd. O número de células de Leydig não variou nos grupos estudados. Em microscopia eletrônica foram visíveis os efeitos do Cd nos testículos. Nas células de Sertoli foram observados vacuolização citoplasmática, alterações nas junções celulares e acúmulo de gotículas de lipídio e corpos residuais. Espaços intercelulares expandidos foram observados no epitélio germinativo. Cromatina irregularmente condensada e acrossoma anormal foram encontradas em espermátides alongadas. Algumas células endoteliais sofreram alterações morfológicas no núcleo e perderam algumas junções. As células de Leydig mostraram o citoplasma denso com organelas, como retículo endoplasmático liso e mitocôndrias, mal definidas. A administração de GbE após a dose de Cd mostrou-se eficaz em manter a ultraestrutura normal dos testículos do rato. Diferentemente, o pré-tratamento com GbE não foi eficaz em proteger o epitélio seminífero da toxicidade do Cd. Entretanto, as células de Leydig apresentaram morfologia normal com o retículo endoplasmático liso bem definido e numerosas mitocôndrias. Conclui-se que a administração de GbE por 56 dias após dose única de 3 umol de CdCh é capaz de proteger todo o parênquima testicular dos efeitos tóxicos do Cd. Entretanto, o pré-tratamento com GbE não protegeu o epitélio seminífero, mas foi eficaz em proteger as células de Leydig dos efeitos tóxicos do cádmio / Abstract: Cadmium is one of the important environmental pollutants that affect various organs and tissues, including the testis. The aim of this study was to investigate the protective and curative effect of G. biloba extract (GbE) on cadmium-induced testis damage of adult Wistar rats. Thirty rats were randomly divided in five groups that consisted in :Group 1: water for 56 days (control); Group 2: GbE for 56 days; Group 3: CdClz (single dose) and water for 56 days; Group 4: CdCh (single dose) and GbE for 56 days (Cd + GbE); Group 5: pre-treatment with GbE for 30 days and CdCh on the thirty-first day (GbE-+Cd).The GbE was administered daily in a dose of 100 mg/Kg BW by gavage. The cadmium chloride (CdCh) was injected i.p. in a single dosage of 3 umol/Kg BW. After blood collection, rats were fixed by whole-body perfusion in Karnovsky fixative. Methacrylate-embedded testis fi-agments were sectioned at 3um thickness and stained with toluidine blue/sodium borate 1 % for morphometric study in the light microscope. For electron microscopy transmission examination, testis fragments were post-fixed with 1 % osmium tetroxide in the same buffer at 4°C, dehydrated in acetone and embedded in epoxy resin. Ultrathin sections were cut with a diamond knife and stained with 2% uranyl acetate and 2% lead citrate prior to observation. Plasma testosterone values obtained by the RIA method were not modified in this study. No change occurred in the average of corporal and testicular weight, gonadosomatic index, epididymis and accessory glands weight. The volumetric proportion and absolute volume oftesticular componenfs did not change after the treatments. Group 3 had a significant reduction in Leydig cell individual volume. However, animals that received GbE as pre-treatment or GbE after a cadmium dose did not present this reduction of Leydig cell volume. This suggests that GbE is effective in maintaining Leydig cell volume in cadmium-damaged testis. The number ofLeydig cells did not vary in any group studied. In electron microscopy observations, this Cd dose caused visible alterations in the testis. Cytoplasmic vacuolation, disruption oftight junctions, accumulation oflipid droplets and residual bodies were observed in Sertoli cells. Expanded intracellular spaces were observed between the tubule cells. Irregularly condensed chromatin and abnormal acrosomes were found in late spermatids. Endothelium was affected, showing some disruption of tight junetions and morphologieally altered nuclei. Leydig eells showed a dense eytoplasm with poorly defined organelles sueh as SER and mitoehondria. The administration of GbE after the Cd dose is effeetive in maintaining almost normal rat testis ultrastructure. However, GbE pretreatment was not able to protect testis from Cd toxicity, since toxicity signals were observed in the seminiferous epithelium. However, Leydig cells showed the normal morphology with well-defined and abundant smooth endoplasmic reticulum and mitochondria. It can be concluded that, GbE administration for 56 days after a single dose of 3 umol of CdCh could protect the testicular parenchyma from Cd toxic effects. However, GbE pretreatment did not protect the seminiferous epithelium, although it was effective in protecting Leydig cells from Cd toxic effeets / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural