Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SheylaVL_DISSERT.pdf: 1154692 bytes, checksum: c69fe71ef1d6a77b98930d0442bc2f7e (MD5) Previous issue date: 2010-02-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / A chymotrypsin inhibitor was purified from Erythrina velutina seeds by ammonium sulphate fractionation, affinities chromatographies on Trypsin-Sepharose, Quimotrypsin-Sepharose and reversed phase C-18 FPLC/AKTA system. The inhibitor, named EvCI, shown molecular mass of 17 kDa, as determined by SDSPAGE. 2D-PAGE showed four isoinhibitors with pI values of 4,42, 4,63, 4,83 and 5,06, with molecular mass of 17 kDa each. The aminoacid sequence of EvCI was determined by MALDI-TOF-MS and showed a high similarity with other Kunitz-type inhibitor of Erythrina variegata. EvCI competitively inhibited chymotrypsin, with Ki of 4 x10-8 M, but did not inhibited trypsin, pancreatic elastase, bromelain and papain. The inhibitory activity of EvCI was stable over wide pH and temperature ranges. In the presence of DTT 100 mM for 120 min, EvCI lost 50 % of activity. Cytotoxicity was studied in HeLa, MDA, HepG2, K562 and PC3 cells after 72-h incubation period. EvCl inhibited HeLa cells growth with an IC50 value of 50 μg/ml. Subsequent studies in HeLa cells analysis of cell death by annexin V/PI double-staining and cell cycle, using flow cytometry. The results provide evidence for a cytostatic activity of EvCl and support further studies on potential application of this inhibitors as an antiproliferative agent in combined therapy against cervical cancer / Um inibidor de quimotripsina do tipo Kunitz foi purificado de sementes de Erythrina velutina por fracionamento com sulfato de am?nio, cromatografias de afinidade Tripsina-Sepharose, Quimotripsina-Sepharose e cromatografia de Fase Reversa C- 18 no sistema FPLC/AKTA. O inibidor, denominado de EvCI, apresentou uma massa molecular de 17 kDa, determinada por SDS-PAGE. A an?lise por eletroforese bidimensional (2D) revelou quatro isoinibidores (valores de pI: 4,42, 4,63, 4,83 e 5,06). Todos os isoinibidores apresentaram massa molecular de 17 kDa. A sequ?ncia aminoac?dica dos pept?deos oriundos da digest?o enzim?tica de EvCI analisada por MALDI-TOF-MS apresentou 100% de identidade com o inibidor de quimotripsina ECl de Erythrina variegata. EvCI inibiu competitivamente a atividade de quimotripsina com Ki de 4 x10-8 M, mas n?o inibiu tripsina, elastase pancre?tica, bromela?na ou papa?na. Contudo, inibiu elastase de neutr?filos em 35,91 %. A atividade inibit?ria de EvCI sobre quimotripsina foi est?vel em uma ampla faixa de pH e temperatura. Na presen?a de 100 mM de DTT por 120 min, o inibidor perdeu 50% de sua atividade. A citotoxicidade do inibidor foi avaliada nas linhagens de c?lulas HeLa, MDA, HepG2, K562 e PC3 ap?s exposi??o a concentra??es variando de 0,0005 a 200 μg/mL, por 72 horas. O EvCl inibiu o crescimento celular de c?lulas HeLa com um IC 50 de 50 μg/mL. Os resultados obtidos na avalia??o de indu??o de morte celular e efeitos sobre o ciclo celular em c?lulas HeLa, indicam que o principal efeito do inibidor ? a indu??o de parada do ciclo celular, sendo, portanto, citost?tico. Os dados sugerem que o EvCl pode ser um composto promissor para ser estudado no futuro como agente citost?tico na terapia antitumoral combinada

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FranciscoEPD_DISSERT.pdf: 606620 bytes, checksum: 2fdc0311c7bc334a6f2661d688b06bee (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Vigna unguiculata (L.) Walp., known as cowpea beans, is a perishable goods exposed to damages in relatively short time conservation periods, especially in traditional storage system or silo. This work had as its objective to verify physical, physiological and sanitary quality of cowpea beans seeds stored, during 150 days, with juazeiro leaf powder (Ziziphus joazeiro Mart.), jucá (Caesalpinia ferrea Mart.) and mulungu (Erythrina velutina Willd.). Experiments were accomplished Laboratório de Análise Sementes da Universidade Federal do Semi-Árido (UFERSA), Mossoró, RN, from April to September 2013. Cultivars BRS Marataoã e BRS Potiguar, whose seeds were stored in polyethylene bottles, during 150 days, containing leaves powder originated from forest species of Caatinga on the ratio of 10 g kg-1 seed. Statistical design was completely randomized in factorial scheme 4 x 5, consisting of four treatments (control, juazeiro leaf powder, jucá and mulungu) and five storage times (30, 60, 90, 120 and 150 days). The seeds were submitted to the following tests: humidity level, hectoliters weight, one thousand seeds weight, assessment of seeds infested by insects, germination test, emergence speed index, accelerated ageing, electrical conductivity and sanity test. The averages were compared by Scott-Knot test, at 5% probability, analyzed through statistical program SISVAR and fit to regression lines. The powders with leaves of juazeiro, jucá and mulungu did not affect germination and seeds vigor stored during 150 days. Powders of juazeiro and mulungu leaves tended to reduce the infestation of seeds by insects during storage. The use of mulungu leaves powder in ratio10 g kg-1 made it possible low Rhizopus sp. fungal rate in cowpea beans, cultivaras cultivares BRS Marataoã and BRS Potiguar, during 150 days of seeds storage / O Vigna unguiculata (L.) Walp., conhecido popularmente como feijão-caupi, é um produto perecível e sujeito a grandes perdas em períodos relativamente curtos de conservação, principalmente no sistema tradicional de armazenamento em sacas ou silo. Este trabalho teve como objetivo verificar a qualidade física, fisiológica e sanitária de sementes de feijão-caupi armazenadas, por 150 dias, com pós de folhas de juazeiro (Ziziphus joazeiro Mart.), jucá (Caesalpinia ferrea Mart.) e mulungu (Erythrina velutina Willd.). Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Análise Sementes da Universidade Federal do Semi-Árido (UFERSA), Mossoró, RN, no período de abril a setembro de 2013. Para isso, utilizaram-se as cultivares BRS Marataoã e BRS Potiguar, cujas sementes foram armazenadas em garrafas de polietileno, durante 150 dias contendo pós de folhas das espécies florestais da Caatinga na proporção de 10 g kg-1 de semente. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 5, constituídos de quatro tratamentos (controle, pós de folhas de juazeiro, jucá e mulungu) e cinco tempos de armazenamento (30, 60, 90, 120 e 150 dias). As sementes passaram pelas seguintes avaliações: grau de umidade, peso hectolítrico, peso de mil sementes, exame de sementes infestadas por insetos, teste de germinação, índice de velocidade de emergência, envelhecimento acelerado, condutividade elétrica e teste de sanidade. As médias foram comparadas pelo teste de Scott-knott, ao nível de 5% de probabilidade, analisadas por meio do programa estatístico SISVAR e ajustadas às curvas de regressão. Os pós com folhas de juazeiro, jucá e mulungu não afetaram a germinação e vigor das sementes armazenadas por 150 dias. Pós de folhas de juazeiro e mulungu tenderam a reduzir a infestação das sementes por insetos durante o armazenamento. O uso de pó de folhas de mulungu na dosagem de 10 g kg-1 proporcionou baixa incidência de fungos Rhizopus sp. em sementes de feijão-caupi, cultivares BRS Marataoã e BRS Potiguar, durante o armazenamento das sementes por 150 dias

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FranciscoEPD_DISSERT.pdf: 606620 bytes, checksum: 2fdc0311c7bc334a6f2661d688b06bee (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Vigna unguiculata (L.) Walp., known as cowpea beans, is a perishable goods exposed to damages in relatively short time conservation periods, especially in traditional storage system or silo. This work had as its objective to verify physical, physiological and sanitary quality of cowpea beans seeds stored, during 150 days, with juazeiro leaf powder (Ziziphus joazeiro Mart.), jucá (Caesalpinia ferrea Mart.) and mulungu (Erythrina velutina Willd.). Experiments were accomplished Laboratório de Análise Sementes da Universidade Federal do Semi-Árido (UFERSA), Mossoró, RN, from April to September 2013. Cultivars BRS Marataoã e BRS Potiguar, whose seeds were stored in polyethylene bottles, during 150 days, containing leaves powder originated from forest species of Caatinga on the ratio of 10 g kg-1 seed. Statistical design was completely randomized in factorial scheme 4 x 5, consisting of four treatments (control, juazeiro leaf powder, jucá and mulungu) and five storage times (30, 60, 90, 120 and 150 days). The seeds were submitted to the following tests: humidity level, hectoliters weight, one thousand seeds weight, assessment of seeds infested by insects, germination test, emergence speed index, accelerated ageing, electrical conductivity and sanity test. The averages were compared by Scott-Knot test, at 5% probability, analyzed through statistical program SISVAR and fit to regression lines. The powders with leaves of juazeiro, jucá and mulungu did not affect germination and seeds vigor stored during 150 days. Powders of juazeiro and mulungu leaves tended to reduce the infestation of seeds by insects during storage. The use of mulungu leaves powder in ratio10 g kg-1 made it possible low Rhizopus sp. fungal rate in cowpea beans, cultivaras cultivares BRS Marataoã and BRS Potiguar, during 150 days of seeds storage / O Vigna unguiculata (L.) Walp., conhecido popularmente como feijão-caupi, é um produto perecível e sujeito a grandes perdas em períodos relativamente curtos de conservação, principalmente no sistema tradicional de armazenamento em sacas ou silo. Este trabalho teve como objetivo verificar a qualidade física, fisiológica e sanitária de sementes de feijão-caupi armazenadas, por 150 dias, com pós de folhas de juazeiro (Ziziphus joazeiro Mart.), jucá (Caesalpinia ferrea Mart.) e mulungu (Erythrina velutina Willd.). Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Análise Sementes da Universidade Federal do Semi-Árido (UFERSA), Mossoró, RN, no período de abril a setembro de 2013. Para isso, utilizaram-se as cultivares BRS Marataoã e BRS Potiguar, cujas sementes foram armazenadas em garrafas de polietileno, durante 150 dias contendo pós de folhas das espécies florestais da Caatinga na proporção de 10 g kg-1 de semente. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 5, constituídos de quatro tratamentos (controle, pós de folhas de juazeiro, jucá e mulungu) e cinco tempos de armazenamento (30, 60, 90, 120 e 150 dias). As sementes passaram pelas seguintes avaliações: grau de umidade, peso hectolítrico, peso de mil sementes, exame de sementes infestadas por insetos, teste de germinação, índice de velocidade de emergência, envelhecimento acelerado, condutividade elétrica e teste de sanidade. As médias foram comparadas pelo teste de Scott-knott, ao nível de 5% de probabilidade, analisadas por meio do programa estatístico SISVAR e ajustadas às curvas de regressão. Os pós com folhas de juazeiro, jucá e mulungu não afetaram a germinação e vigor das sementes armazenadas por 150 dias. Pós de folhas de juazeiro e mulungu tenderam a reduzir a infestação das sementes por insetos durante o armazenamento. O uso de pó de folhas de mulungu na dosagem de 10 g kg-1 proporcionou baixa incidência de fungos Rhizopus sp. em sementes de feijão-caupi, cultivares BRS Marataoã e BRS Potiguar, durante o armazenamento das sementes por 150 dias

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-09-11T14:23:26Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4539317 bytes, checksum: 8b0c70f7cf6924075fe039736b510527 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-11T14:23:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4539317 bytes, checksum: 8b0c70f7cf6924075fe039736b510527 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Natural products have been used by humankind since immemorial times to relieve and cure severals diseases, and the ethnic-pharmacology knowledge of plant species has aroused interest in research aimed at the discovery of bioactive molecules. The emergence of new diseases transmitted by Aedes aegypti L., linked to resistance to larvicides and insecticides in the market, makes it necessary to search for alternatives to vector combat. In this context the Brazil stands out because it has a great potential of natural resources that lead to the development of native flora bioproducts.Within this diversity was sought through a pioneering study from view point chemical and biological of the ethanolic extract gross obtained from the aerial parts of the species Helicteres velutina K. Schum (Sterculiaceae), commonly know in Brazil as “pitó” is popularly used by the tribe indigenous Pankararé in Bahia, as insect repellent, isolate and identify their chemical constituents, as well evaluate their larvicidal potential.For the phytochemical study, the ethanolic extract gross was solubilized in EtOH:H2O (7:3) and partitioned with Hex.; CH2Cl2; AcOEt; n-BuOH, obtaining their respective phases, in addition to the hydroalcoholic phase. 8g of the dichloromethane phase was subjected to column chromatography using silica flash and/or Sephadex-LH 20 as stationary phases.This chromatographic process led to the apartness of five chemical constituents, whose chemical structures were defined by the interpretation of infrared, RMN 1H e 13C spectra and 2D, as well as comparisons with literature models. The isolated substances were three flavonoids: Hv-1 - 3,5,7,4'-tetrahydroxyflavone (Kaempferol); Hv-2 - Kaempferol-3-O-β-D-(6´´-E-p-coumaroyl) glucopyranoside (Tiliroside); Hv-3 - 7,4’-di-O-methyl-8-O-sulphateflavone (Isoscutellarein sulphate); one triterpene from the series oleanane - Hv-4 – Acid 3β-hydroxy-olean-12-en-28-oic (Oleanolic acid); and a steroid - Hv-5 - Sitosterol-3-O-D- glucopyranoside (β-sitosterol glycosylated). A preliminary study to evaluate the larvicidal activity of the ethanolic extract gross of the aerial parts of Helicteres velutina demonstrated excellent activity against larvae in the L4 stage of Aedes aegypti, with the 10.000 ppm dose dose of killing 100% of the larvae after 24 h of exposure and the CL50 was estimated to be 2.983 ppm according to Tukey's test, thus characterizing itself as a promising alternative to be used in an integrated control system of this vector, which demands the continuity of its studies. / Os produtos naturais são utilizados pela humanidade desde tempos imemoriais com intuito de alivio e cura de diversos males, tendo o conhecimento etnofarmacológico das espécies vegetais despertado interesse em pesquisas voltadas para descoberta de moléculas bioativas. O surgimento de novas doenças transmitidas pelo Aedes aegypti L., atrelado a resistência a larvicidas e inseticidas existentes no mercado, tornam necessário a busca por alternativas de combate ao vetor. Neste contexto o Brasil se destaca por possuir um grande potencial de recursos naturais que levam ao desenvolvimento de bioprodutos a partir da flora nativa. Dentro desta diversidade buscou-se através de um estudo pioneiro do ponto de vista químico e biológico do extrato etanólico bruto obtido das partes aéreas da espécie Helicteres velutina K. Schum (Sterculiaceae), conhecida popularmente no Brasil como “pitó” e usada tradicionalmente pela tribo indígena Pankararé na Bahia, como repelente de insetos, isolar e identificar seus constituintes químicos, bem como avaliar o seu potencial larvicida. Para o estudo fitoquímico, o extrato etanólico bruto foi solubilizado em EtOH:H2O (7:3) e particionado com Hex.; CH2Cl2; AcOEt; n-BuOH, obtendo-se suas respectivas fases, além da fase hidroalcoólica. 8,0 g da fase diclorometano foi submetida a cromatografia em coluna utilizando como fases estacionárias sílica flash e/ou Sephadex-LH 20. Este processo cromatográfico levou ao isolamento de cinco constituintes químicos, cujas estruturas químicas foram definidas por interpretação dos espectros de Infravermelho, RMN 1H e 13C e bidimensionais, além de comparações com modelos da literatura. As substâncias isoladas foram três flavonoides: Hv-1 - 3,5,7,4'-tetrahidroxiflavona (Canferol); Hv-2 - Canferol-3-O-β-D-(6”-E-p-cumaroil) glicopiranosídeo (Tilirosídeo); Hv-3 - 7,4’-di-O-metil-8-O-sulfatoflavona (Isoscutelareina sulfatada); um triterpeno da série oleanano - Hv-4 - Ácido 3β-hidroxi-olean-12-en-28-óico (Ácido oleanólico); e um esteroide - Hv-5 - Sitosterol-3-O-D-glicopiranosídeo (β-Sitosterol glicosilado). Um ensaio preliminar para avaliar a atividade larvicida do extrato etanólico bruto das partes aéreas de Helicteres velutina demonstrou excelente atividade frente a larvas no estágio L4 de Aedes aegypti, sendo a dose de 10.000 ppm capaz de matar 100% das larvas após 24 h de exposição e a CL50 estimada em 2.983 ppm segundo teste de Tukey, caracterizando-se, portanto, em uma alternativa promissora para ser utilizada em um sistema de controle integrado desse vetor, o que demanda a continuidade dos seus estudos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CleysyvanSM_DISSERT.pdf: 1173359 bytes, checksum: 82a094c436e4d9b81948c390ed5d9ed1 (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Chitin-binding vicilins from legume seeds (Erythrina velutina. Canavalia ensiformes and Phaseolus vulgares) were isolated by ammonium sulfate followed by affinity chromatography on a chitin column. Effect of these vicilins on female adults of Ceratitis capitata was examined by bioassay and in a semi-field assay model. Mechanism of action of the vicilins was determined by in vivo digestibility and chitin affinity. Among the tested vicilins, E. velutina when added to diet caused strong effect on mortality at 10% dose. This insecticidal property was tested in a semi-field assay which showed the same effect observed in laboratory conditions, where doses of 10% and 15% were lethal to female adults of C. capitata. These deleterious effects were not only associated to the binding to chitin structures present in peritrophic membrane, but principally to its low digestibility in the C. capitata digestive tract. This fact was confirmed because chiting binding proteins as WGA and the other tested vicilins were not toxic to female adults of C. capitata due susceptibility of these proteins to digestive enzymes of the insects. By other side EvV was more resistant to digestive enzymes, causing deleterious effects on female adults of C. capitata. These results showed that EvV may be part of the pest management programs or an alternative in plant improvement program in the population control of this fruticulture pest / Vicilinas ligantes a quitina de sementes de Erythrina velutina, Canavalia ensiformis e Phaseoulus vulgaris foram isoladas atrav?s de procedimento que consistiu de precipita??o com sulfato de am?nio seguida de cromatografia de afinidade em coluna de quitina. O efeito dessas vicilinas sobre f?meas adultas de Ceratitis capitata foi examinada por bioensaios em condi??es de laborat?rio e por bioensaios em condi??es de semi-campo. O mecanismo de a??o dessas vicilinas foi determinado por um ensaio de digestibilidade in vivo e pela propriedade de liga??o a uma matriz de quitina. Entre as vicilinas testadas, a vicilina de E. velutina foi a ?nica letal, causando mortalidade de 100% quando adicionada ? dieta das moscas das frutas adultas na concentra??o de 10% (p/p). Este efeito inseticida da vicilina de E. velutina foi tamb?m testado em condi??es de semi-campo, onde concentra??es de 10 % e 15% (p/p) de vicilina adicionada ? dieta foram letais para f?meas adultas de C. capitata. Esse efeito delet?rio das prote?nas ligantes ? quitina n?o foi associado somente ? propriedade de liga??o ? quitina, visto que as outras vicilinas, al?m da lectina de g?rmen de trigo (WGA) foram t?xicas quando adicionadas ? dieta das moscas das frutas. Entretanto, a resist?ncia/susceptibilidade dessas prote?nas aos processos digest?rios desses insetos poderia explicar os diferentes efeitos observados. Das prote?nas ligantes ? quitina, apenas aquelas refrat?rias ? a??o das enzimas digestivas nos processos digest?rios teve a??o inseticida. Esses resultados mostraram que vicilina de E. velutina ? um bioinseticida com potencial de uso nos programas de controle de pragas diminuindo a popula??o de moscas das frutas no campo

Erythrina plant species, botanical family Fabaceae, are the main source for the tetracyclic erythrina-type alkaloids, and other chemical classes such as flavonoids. The Erythrina velutina Willd specie is popularly known as "Mulungu" and used by the population of the northeastern region of Brazil for its sudorific, soothing, emollient, pectoral, and local anesthetic properties. The objective of this study was to isolate and identify the constituents present in the leaves methanol extract of Erythrina velutina, and to investigate the antimicrobial activity of the crude extract and organic phases as well as contribute to the chemotaxonomy of the genus Erythrina. The leaves were collected in the city of Simão Dias, Sergipe, Brazil. The phytochemical screening performed with the crude methanol extract showed the presence of the following secondary metabolites: alkaloids, tannins, and flavonoids. The crude methanol extract was obtained by maceration and fractionated into hexane, ethyl acetate and n-butanol phase. From the crude methanol extract was extracted alkaloids that resulted on basic chloroform and nbutanol phase. Nicotinic acid was isolated from basic n-butanol phase. The structure identification involved analysis of spectral data of NMR of 1H and 13C and comparison with literature data. The behavior pharmacological screening showed that administration of the organic phases and crude extract promoted discrete behavioral changes at the level of central nervous system, suggesting that the extract of Erythrina velutina contains psychoactive compounds. In addition, antimicrobial screening showed that the crude methanol extract and hexane fraction present a weak inhibition or in part without inhibition zone defined for the fungus Trichophyton rubrum T544. / O gênero Erythrina, família Fabaceae, é muito conhecido pela presença de alcalóides tetracíclicos tipo eritrina e outras classes químicas como flavonóides. A espécie Erythrina velutina Willd, conhecida popularmente como Mulungu , é utilizada pela população do nordeste brasileiro por suas propriedades sudoríficas, calmante, emoliente, peitoral e anestésica local. O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar os constituintes químicos presentes no extrato metanólico das folhas de Erythrina velutina, bem como investigar a atividade farmacológica e antimicrobiana do extrato bruto e das fases orgânicas, além de contribuir com a quimiotaxonomia do gênero Erythrina. As folhas foram coletadas no município de Simão Dias, Sergipe, Brasil. O extrato metanólico bruto, obtido por maceração, foi submetido a prospecção fitoquímica que indicou a presença dos seguintes metabólitos secundários: alcalóides, taninos e flavonóides. O particionamento deste extrato foi realizado com hexano, acetato de etila e n-butanol. A partir do extrato metanólico bruto foi feita uma marcha para alcalóide obtendo as fases clorofórmica e n-butanólica básica. Da fase n-butanólica básica isolou-se o ácido nicotínico. A identificação estrutural do composto foi realizada a partir dos dados espectrais de RMN de 1H e 13C e em comparação com dados da literatura. Na realização da triagem farmacológica comportamental, foi observado que administrações das fases orgânicas e do extrato bruto promoveram discretas alterações comportamentais ao nível de sistema nervoso central, sugerindo que o extrato de Erythrina velutina contém substâncias psicoativas. O extrato metanólico bruto e a fração hexânica promoveram uma inibição de crescimento fraco ou parcial, sem halo de inibição definido, para o fungo Trichophyton rubrum T544.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:22:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gloria.pdf: 5761894 bytes, checksum: 384a6f1a4d71ac47faf205c55b6234db (MD5) Previous issue date: 2011-07-28 / Parkia species are representative of the Amazonian floristic landscape and occupy an important role among leguminous trees. Despite the importance of species for reforestation projects, there are few reports on morpho anatomical technological in the gender, which require more detailed studies. This study aimed to characterize the morphology of fruit, morpho anatomy and histochemistry of the seeds and seedlings, as well as the technological characteristics of the seeds, in order to obtain standards for the proper management of species reproduction of Parkia multijuga, P. panurensis and P. velutina. The fruits were collected along the Urucu river at the Pedro de Moura Geologist Operations Base, Coari / AM, located at 623 km from Manaus. The physical tests indicated that seeds of P. multijuga had a weight of 1000 mature seeds equivalent of 3,432.6 g, whereas P. panurensis 712.10 g and P. velutina 521.31 g. The number of seeds per kilogram was 291 seeds for P. multijuga, 1404 for P. panurensis and 1918 for P. velutina. To determine the water content of seeds of P. multijuga three cut seeds by subsample can be used five for P. velutina. and 25 for P. panurensis. The three species have type of fruit nucóides vegetables, dry, estenocárpicos, uniseriate.The seed is oblong in P. multijuga, elliptical in P. panurensis and oboval in P. velutina. The integument presents palisade layer with clear line and printed on both sides pleurogram apical-basal, regular, 100 and 90% in P. multijuga and 90% in P. panurensis and P. velutina. Cotyledons, cloven with hidden rootlet in P. multijuga and P. panurensis and carved in radicle exposed to P. velutina. Radicle hypocotyl axle with well differentiated plumule in the three species, but only P. velutina presents axle with rachis of leaf prime with multicellular trichomes got from the tricellular base. In the mature seeds of three species, there is the presence of phenolics and alkaloids, which may be related to the mechanism of dormancy, while, carbohydrates, proteins and lipids, are the major reservations.The treatments of mechanical scarification with emery electric on the side of the seed were effective in overcoming physical dormancy of seeds of P. panurensis and P. multijuga, while the chemical scarification with sulfuric acid in a longer period of immersion was more effective for seeds of P. panurensis and P. velutina. The full seedling formation from 18 to 21 days in P. multijuga and 12 to 15 days in P. velutina and P. panurensis. The root of P. multijuga is polyarc and presents primary growth, since the P. panurensis and P. velutina present beginning of secondary growth with fascicular and interfascicular exchange both installed. Phenolic compounds were detected in the epidermis and pericycle of the root, the peripheral cortical parenchyma and epidermis of the hypocotyl, cotyledons of P. panurensis and in the pinnae of the three species. / As espécies de Parkia são representativas da paisagem florística amazônica e ocupam papel importante entre as leguminosas arbóreas. Apesar da importância das espécies para projetos de reflorestamento, são poucos os trabalhos morfoanatômicos e tecnológicos no gênero, que carecem de estudos mais detalhados. Este trabalho teve por objetivo caracterizar a morfologia dos frutos, morfoanatomia e histoquímica das sementes e plântulas, bem como as características tecnológicas das sementes, visando obter padrões para o manejo adequado de reprodução das espécies de Parkia multijuga, P. panurensis e P. velutina. Os frutos foram coletados de dez indivíduos por espécie, ao longo do rio Urucu na Base de Operações Geólogo Pedro de Moura, Coari/AM, localizada a 623 km de Manaus. Os testes físicos indicaram que as sementes de P. multijuga apresentaram peso de 1000 sementes maduras equivalente a 3.432,6 g, enquanto P. panurensis 712,10 g e P. velutina 521,31 g. O número de sementes por quilograma foi de 291 sementes para P. multijuga, 1.404 para P. panurensis e 1.918 para P. velutina. Para determinar o teor de água das sementes de P. multijuga pode-se utilizar três sementes cortadas por subamostra, cinco para P. velutina e 25 para P. panurensis. As três espécies apresentam frutos do tipo legumes nucóides, secos, estenocárpicos, unisseriados. A semente é oblonga em P. multijuga, elíptica em P. panurensis e oboval em P. velutina. O tegumento apresenta camada paliçádica com linha lúcida e impresso nas duas faces pleurograma apical-basal, regular, a 100 e 90% em P. multijuga e 90% em P. panurensis e P. velutina. Cotilédones, fendido com radícula escondida em P. multijuga e P. panurensis e entalhado com radícula exposta em P. velutina. Eixo hipocótilo-radícula com plúmula bem diferenciada nas três espécies, mas apenas P. velutina apresenta eixo com ráquis dos primórdios foliares com tricomas pluricelulares capitados de base tricelular. Na semente madura das três espécies, destaca-se a presença de compostos fenólicos e alcalóides, o que pode estar relacionado com a defesa primária da semente a possíveis predadores e ao mecanismo de dormência, enquanto, carboidratos, proteínas e lipídios, constituem as principais reservas. Os tratamentos de escarificação mecânica com esmeril elétrico na lateral da semente foram eficientes na superação da dormência física de sementes de P. panurensis e P. multijuga, enquanto a escarificação química com ácido sulfúrico em maior tempo de imersão foi mais eficiente para as sementes de P. panurensis e P. velutina. A plântula completa a formação de 18 a 21 dias em P. multijuga e de 12 a 15 dias em P. velutina e P. panurensis. A raiz de P. multijuga é poliarca e apresenta crescimento primário, já a de P. panurensis e P. velutina apresentam início de crescimento secundário com câmbio tanto fascicular quanto interfascicular instalados. Compostos fenólicos foram evidenciados na epiderme e periciclo da raiz, no parênquima cortical periférico e epiderme do hipocótilo, nos cotilédones de P. panurensis e nos foliólulos das três espécies.

Velvet mesquite (Prosopis velutina Woot.) is a common tree in semi-arid, southwestern U.S. savanna ecosystems. While there are studies that examine some of the physiological and ecological aspects of this tree (response to fire, net ecosystem exchange, encroachment into grasslands, yearly growth through dendrometer bands, among others), the wood anatomical features of a growth ring, suitability for dendrochronological research, life history, and above-ground biomass through time are knowledge gaps that can be filled. The purpose of this study was to examine these gaps in order to better understand the role of velvet mesquite in these ecosystems. Wood anatomical analysis showed that velvet mesquite has a semi-ring porous structure and termination of the growth ring is indicated by a small band of parenchyma. Visual crossdating of velvet mesquite was successful but a complex growth habit, with both eccentric and lobate growth, combined with ecological pressures hampered statistical validation of the chronology. Seasonal climate-growth analysis of dated rings showed a strong positive correlation to previous year September and October precipitation and a strong positive partial correlation to previous year September and August mean temperature. Life history through growth curve analysis showed no age related growth trend (either s-shaped or log normal) indicating the maximum age of velvet mesquite stems sampled (130 years old) can become much older with many releases and few suppressions. Above-ground biomass of these trees are low compared to higher elevation forest biomass, but similar to other savanna ecosystems of the southwest. The use of velvet mesquite in dendrochronological research would greatly benefit from a complete analysis of wood anatomy, and addition of more samples from various locations to verify dates and begin building more reliable chronologies for this species across its range. These additions would allow for a greater understanding of stand and tree level responses through suppressions and releases, and understand the biomass accumulated above-ground through time.

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-06-15T21:33:24Z No. of bitstreams: 1 PriscilaTavaresMacedo_TESE.pdf: 4733124 bytes, checksum: a3932b7f344673deeaced636669ed868 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-06-19T22:34:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PriscilaTavaresMacedo_TESE.pdf: 4733124 bytes, checksum: a3932b7f344673deeaced636669ed868 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-19T22:34:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PriscilaTavaresMacedo_TESE.pdf: 4733124 bytes, checksum: a3932b7f344673deeaced636669ed868 (MD5) Previous issue date: 2018-01-30 / A doença de Alzheimer (DA) afeta cerca de 46,8 milhões de pessoas no mundo, e é caracterizada pelo declínio progressivo da função cognitiva, em especial da memória episódica. É multifatorial, e o acúmulo de peptídeos β-amiloides (Aβ) é considerado o principal mecanismo da neurodegeneração subjacente à doença. Os Aβ são os principais componentes das placas amilóides, um dos marcos fisiopatológicos no encéfalo dos pacientes. A infusão intracerebral de Aβ em ratos é um modelo animal de DA muito utilizado, produzindo seu acúmulo em regiões cerebrais afetadas, como o hipocampo e o neocórtex e, produzindo déficits cognitivos compatíveis com os sintomas, como déficits na memória espacial. Porém, a maioria dos estudos evidencia déficits equivalentes aos estágios moderado e avançado da DA após a infusão prolongada de Aβ, sem avaliar déficits sutis de estágios iniciais. Isso seria relevante para compreensão dos mecanismos fisiopatológicos e para o teste de possíveis tratamentos neuroprotetores. Uma tarefa utilizada para avaliar déficits relacionados à disfunção hipocampal em ratos é o labirinto de Barnes. Os animais são expostos a uma plataforma circular, com buracos ao redor, sendo apenas um deles conectado a um esconderijo. Nessa tarefa, os animais guiam-se por pistas distais para encontrar o local seguro. O desempenho é avaliado por parâmetros, como latência e distância até o alvo, número de visitas a buracos errados, dentre outros, e por uma análise específica de estratégias de busca usadas para atingir o alvo. O animal pode se localizar pelas pistas distais (dispostas ao redor do labirinto), utilizando informação espacial (estratégia direta) ou outros tipos de busca, visitando de maneira aleatória ou seriada buracos do aparato (estratégias não diretas). Essa avaliação permite a detecção de alterações no modo de solução da tarefa. No presente trabalho, objetivamos investigar sinais cognitivos iniciais da DA em ratos Wistar submetidos à infusão intracerebral de Aβ, e os efeitos de um potencial tratamento neuroprotetor, por meio da avaliação da memória espacial no labirinto de Barnes. Utilizamos o extrato alcalóide de Erythrina velutina (“mulungu”), cujos componentes mostram ações ansiolíticas, antiinflamatórias, antioxidantes e pró-colinérgicas. Na 1ª etapa, padronizamos a tarefa de Barnes para as nossas condições experimentais, e verificamos se há influência da repetição de exposições ao labirinto (importante para verificação de progressão de sinais cognitivos) ou da implantação das cânulas intracerebrais no desempenho dos animais. Animais que passaram ou não pela cirurgia para implantação de cânulas (bilateralmente na sub-região hipocampal CA1 e no ventrículo lateral) passaram por 5 sequências de exposição ao labirinto de Barnes (4 treinos com 4 trials cada, um teste após 24h e um teste após 10 dias). Os resultados mostraram que houve aprendizado e evocação da tarefa. Concluímos que a tarefa pode ser realizada repetidamente, e em animais com implantes cerebrais de cânulas, sem prejuízo de desempenho. Na segunda etapa, investigamos o uso de diferentes estratégias no labirinto de Barnes na presença ou ausência de pistas distais. Ratos foram expostos aos treinos no labirinto de Barnes, e no teste (24h após) parte dos animais foi exposta ao labirinto na presença de pistas distais (condição ‘espacial’) e a outra parte passou pelo teste com uma cortina preta em volta do labirinto (condição ‘nãoespacial’). Ambos os grupos aprenderam e evocaram a tarefa, entretanto os animais expostos às pistas distais preferiram o uso de estratégia direta, enquanto o grupo nãoespacial preferiu outras estratégias. Concluímos que a retirada de pistas distais não impede que os animais encontrem o alvo, e para isso utilizam estratégias de busca alternativas ao uso de informação espacial. Na terceira etapa (2 experimentos) verificamos os efeitos da infusão intracerebral de peptídeos Aβ sobre o aprendizado e a memória no labirinto de Barnes. No experimento 1, ratos receberam 15 infusões diárias de salina ou Aβ (30, 100 ou 300 pmol) i.c.v., sendo que no 1º dia de tratamento houve infusões em CA1. Foram submetidos a 3 sequências de exposição ao Barnes (treinos, teste 24h e reteste 10 dias). A sequência I foi realizada antes da cirurgia (na qual ocorreu o aprendizado para todos os animais), a II a partir da 11ª infusão, e a III 10 dias depois. Nas sequências II e III, houve grande variação do comportamento dos animais Aβ, de modo que não foram observadas diferenças entre os grupos, além de uma alta mortalidade dos animais. Ao fim dos experimentos comportamentais, os animais foram eutanasiados e submetidos à imunohistoquímica para Aβ, cuja análise por densitometria ótica relativa mostrou aumento de sua marcação no hipocampo e neocórtex. No 2º experimento verificamos os efeitos da infusão de Aβ sobre o desempenho geral e estratégias de busca no labirinto de Barnes, com algumas alterações no protocolo de infusão e execução da tarefa. Os animais (salina ou Aβ 30 pmol) foram submetidos a uma sequência de exposição ao Barnes com 4 treinos de 2 trials cada e um teste realizado 3 dias depois, visando dificultar a tarefa. Não houve diferenças entre os grupos no aprendizado. No teste, embora os animais Aβ mostrassem alguma evocação, estes utilizaram preferencialmente estratégias aleatória e seriada, enquanto o grupo salina preferiu a estratégia direta. Concluímos que a infusão de Aβ promoveu alterações sutis na memória espacial compatíveis com a manifestação inicial da DA, indicando relevância para investigações mecanicísticas e terapêuticas em estágios precoces da doença. Na última etapa, animais submetidos ao mesmo tratamento de infusão com Aβ (30 pmol) foram tratados concomitantemente com 200 mg/kg do extrato de mulungu por via oral. Os grupos (salina, Amulungu e Amulungu) foram submetidos a 2 sequências de Barnes (a partir da 11ª infusão e dez dias depois). De forma geral, não foram observadas diferenças entre os grupos nos parâmetros referentes ao aprendizado ou à evocação da tarefa. Sendo assim, concluímos que o protocolo utilizado não foi capaz de detectar um efeito benéfico do extrato de mulungu no modelo de DA por infusão de peptídeos Aβ. / Alzheimer’s disease (AD) is present in 46.8 million people in the world, and is characterized by the progressive decline of cognition, mainly episodic memory. AD is multifactorial, and the accumulation of amyloid peptides (Aβ) is the main proposed mechanism underlying neurodegeneration. Aβ are the main components of the amyloid plaques in the brain, that are physiopathological hallmarks of the disease. Intracerebral infusion of Aβ in rats is usually used as an animal model of DA and generates the accumulation of these peptides in the brain together with spatial memory impairment. However, most studies show moderate to severe deficits after chronic Aβ infusion, without evaluation of possible subtle initial deficits. The study of the initial stages of AD is relevant for mechanicistic and therapeutic investigations. The Barnes maze has been used for investigating deficits in the hippocampal function in rats. The animals are exposed to a circular apparatus with holes in its periphery. One of the holes is connected to a safe place. In this task, rats navigate guided by distal cues to find this safe compartment. The evaluation is conduct by parameters of general performance (latency and distance to reach target, number of errors, among others) and by a specific analysis of search strategies. In this way, the animal use spatial information and move directly towards the target (direct strategy), visit sequential holes until reach the target (serial strategy) or visit holes in a non-systematic fashion until reach the target (aleatory search). The analysis of strategies allows the detection of alterations in the mode of solution of the task. In the present study, we aimed to investigate initial cognitive signs of AD in Wistar rats submitted to intracerebral infusions of Aβ, as well as the effects of a potentially neuroprotective treatment, by the evaluation of spatial memory in the Barnes maze. We used the alkaloid extract of Erythrina velutina (“mulungu”), which was previously studied for anxiolytic, anti-inflammatory, antioxidant and cholinergic actions. First, we standardized the task to our experimental conditions, and verified a possible influence of repeated expositions to the apparatus (for future long-term protocols) or of the implantation of the cannulas in the brain. Rats went through (or not) to implantation of cannulas (bilaterally in the hippocampal CA1 and in the lateral ventricle) and were exposed to 5 sequences of exposition to the Barnes maze (4 trainning sessions with 4 trials each, a 24h test and a 10-day retest sessions). Both groups showed task retrieval, and there was a slightly improved performance in the implanted group. We concluded that the task can be held repeatedly, and in implanted animals, without altering the performance. In the second phase, we investigated the use of different strategies in the Barnes maze by rats submitted to the presence of absence of distal cues. Rats were exposed to the training phase, and in the probe session (24 h later) half the animals were exposed to the maze in the presence of the same distal cues used in training (spatial group), while the other rats went through the probe test without those cues (a black curtain was placed around the maze – non-spatial group). Both groups learned the task, but the spatial group preferred the used of direct strategies, while the non-spatial group preferred other strategies. We concluded that the removal of distal cues does not hinder the execution of the task, and the animals use alternative search modes under this condition. In the third phase (two experiments) we verified the effects of the intracerebral infusion of Aβ on the acquisition and retrieval of Barnes task. In experiment 1, rats received 15 daily i.c.v. infusions of saline or Aβ (30, 100 or 300 pmol) plus bilateral CA1 infusions in the first day, and were exposed to 3 sequences of Barnes task (training, 24h test and 10-day retest in each sequence). Sequence I was held before surgery (all the animals learned the task), II started at 11th infusion and III started 10 days after II. The behavior of the Aβ-treated animals varied greatly at sequences II and III, and hence no differences were observed. There was high mortality due to treatment. At the end of the behavioral sessions, saline and Aβ 30pmol groups were euthanized for Aβ immunohistochemistry. The analysis by relative optical density showed increased Aβ staining in the hippocampus and neocortex. In experiment 2 we investigated the effects of Aβ (30 pmol) infusion on the search strategies in the Barnes maze. Animals went through one sequence of Barnes task (4 trainings with 2 trials each and a 3-day test, in order to increase difficulty). In the probe test, although Aβ animals showed some retrieval, they showed preference for nonspatial strategies, opposed to saline-treated rats. We concluded that Aβ infusion induced subtle alterations in spatial memory, compatible with the initial stages of AD, which is relevant for investigations of potential neuroprotective approaches. In the last stage, animals submitted to the same infusion protocol described above were concomitantly treated orally with 200 mg/kg of E. velutina (mulungu) extract and went through 2 Barnes task sequences. In general, no differences were observed among the groups in acquisition or retrieval. Thus, we concluded that the protocol used here was not able to detect a beneficial effect of mulungu extract in the Aβ infusion AD model.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-08-15Bitstream added on 2014-06-13T19:03:07Z : No. of bitstreams: 1 souza_av_dr_botfca.pdf: 1549773 bytes, checksum: 84b4a67f035a5e2a2ded161bbf59589c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Outra / O bioma Cerrado e uma das regioes mais ricas do Brasil no tocante a diversidade de plantas medicinais, sendo atualmente, considerado uma area ghotspots h devido o alto grau de endemismo das especies e a velocidade de degradacao que vem sofrendo. Anemopaegma arvense, Mandevilla illustris e Mandevilla velutina, sao plantas medicinais endemicas do cerrado, muito utilizadas na medicina popular devido suas propriedades terapeuticas. A coleta indiscriminada realizada pela populacao, como tambem por laboratorios farmaceuticos para a fabricacao de medicamentos, tem colocado essas especies em risco de extincao. Ferramentas biotecnologicas como a tecnica da micropropagacao e biologia molecular para analise do DNA, tem sido amplamente usadas para a producao, conservacao e analise da diversidade genetica de especies nativas. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos estudar a variabilidade genetica em diferentes populacoes de M. velutina por meio do marcador molecular RAPD e estabelecer a conservacao em bancos de germoplasma in vitro; desenvolver protocolos eficientes de enraizamento in vitro para A. arvense, M. illustris e M. velutina; verificar a ocorrencia e identificar especies de micorrizas, avaliando a colonizacao em raizes de plantas de diferentes populacoes e variedades de A. arvense. Para os estudos de enraizamento in vitro, as brotacoes foram submetidas a acao de diferentes substancias que apresentam efeito sobre a formacao de raizes adventicias, sob variadas condicoes. Para a analise da diversidade genetica, utilizou-se a tecnica de Polimosfirmo de DNA Amplificado ao Acaso (RAPD) e para os estudos micorrizicos, realizou-se a avaliacao da infeccao micorrizica nas raizes e a identificacao de especies de fungos micorrizicos extraidos do solo. As especies comportaram-se de maneira diferente quanto a inducao de raizes adventicias in vitro, mostrando a influencia direta do genotipo no processo de enraizamento. Para as especies M. illustris / The Bioma Cerrado is one of the richest regions in Brazil due to the variety of native medicinal plants, and nowadays it is considered a hotspot area because of the high degree of endemism of the species and the speed of degradation that it has been submitted. Anemopaegma arvense, Mandevilla illustris and Mandevilla velutina, are medicinal plants endemic of Cerrado very used in the popular medicine due to their therapeutic properties. The indiscriminate collection accomplished by the population, as well by pharmaceutical laboratories for the formulation of medicines, has put those species in risk of extinction. Biotechnological tools as the technique of micropropagation and molecular biology for the analysis of the DNA, have been widely used for the production, conservation and analysis of the genetic diversity of native species. In this context, the current work was investigate the genetic variability in different populations of M. velutina by means of molecular marker RAPD and to establish a protocol for in vitro conservation in germplasm bank; to develop efficient protocol of in vitro rooting for A. arvense, M. illustris and M. velutina; to verify the occurrence and to identify species of mycorrhiza, colonizing plant roots of different populations and varieties of A. arvense. For the studies of in vitro rooting, the plantlets were exposed to the action of different exogenous substances that a effect the formation of adventious roots, under several conditions. For the analysis of genetic diversity, it was used the technique of Random Amplified Polymorphic DNA at (RAPD) and for the studies on influence of mycorrhizal infection on root development and identification of species of fungi present in the soil. The species behaved in a different ways of induction of adventious roots in vitro. For the species M. illustris and A. arvense, 73,3% e 50% of plantlets rooted after fifteen days in treatment with 1 and 2 mg.L-1 of NAA, respectively. For M.