The fungus Sclerotinia sclerotiorum causes major losses in the production of beans. Because it is a soil fungus, it is difficult to control and the biological control with Trichoderma sp. is a viable alternative. There are many factors that can interfere with the performance of the antagonist in biological control, such as pH, amount of water in the soil, soil type and nutrients. The latter are present in abundance in the soil by fertilization performed to meet the needs of the crop, but little is known about their interference in the performance of biological control of S. sclerotiorum by the antagonist Trichoderma sp. Thus, the objectives of this study were to evaluate the influence of NPK (nitrogen, phosphorus and potassium) on the growth of different isolates of Trichoderma sp. and S. sclerotiorum in vitro, as well as the performance of Trichoderma sp. on the in vitro and in vivo control of Sclerotinia sp. and to verify the effect of Trichoderma sp. in the NPK uptake by bean plants. The study was conducted in laboratory and greenhouse in Santa Maria, RS, Brazil. The parameters measured were mycelial growth, sporulation of Trichoderma sp. and percentage of control of the pathogen in vitro. In vivo the incidence of white mold, plant height, root length, leaf number, fresh and dry weight of shoot and root and stem diameter of bean plants were evaluated. The population of Trichoderma sp. in soil and NPK content in plant tissue of the shoot bean were also evaluated. The highest micelial growth was achieved by Trichoderma sp. UFSMT16 for all doses of NPK in vitro, differing from the isolate UFSMT17 only at rates of 75 to 125% of NPK. In the quantification of spores of Trichoderma sp., the isolate UFSMT17 had the highest sporulation in the majority of the different doses of NPK. The isolate UFSMT16 obtained better results in the test of paired cultures, with the highest performance at doses of 50, 75 and 100% NPK (notes 1.00, 1.25 and 1.00, respectively). In the final population, Trichoderma sp. UFSMT15.1 obtained higher CFU g-1 soil (1.3 x 104), differing significantly from the isolate UFSMT16 and the control treatment. For the variable content of phosphorus in plant tissue of the shoot, the interaction between Trichoderma sp. in the absence and presence of S. sclerotiorum associated with doses of NPK, there was statistical difference between the isolates of Trichoderma spp. UFSMT15.1, UFSMT16 and the control treatment at the doses of 25 and 125% of NPK, in the presence and at the dose of 25% in the absence of S. sclerotiorum. It was concluded that the levels of nitrogen, phosphorus and potassium (NPK) in the Elad medium influence growth and reproduction of the genus Trichoderma in vitro; isolates of Trichoderma sp. (UFSMT15.1, UFSMT16, and UFSMT17) have higher growth of colonies in vitro than isolates of S. sclerotiorum, regardless of the dose of NPK; the levels of 25, 50, 75,100 NPK and 125% of the growth medium Elad interfere with effective control of S. sclerotiorum by isolates UFSMT15.1, UFSMT16, and UFSMT17 of Trichoderma sp.; the population of Trichoderma sp. is not affected by varying the application of different doses of NPK in soil and the presence of S. sclerotiorum reduced the height of the aerial parts of beans, even without visible symptoms of the disease, while Trichoderma sp. UFSMT15.1 UFSMT16 and increased in soil with low application of NPK; and UFSMT16 and UFSMT15.1 isolates in the presence and absence of S. sclerotiorum in different levels of NPK interfere with the amount of phosphorus in the shoots of beans, but have no significant effect on the content of nitrogen and potassium. / O fungo Sclerotinia sclerotiorum causa grandes perdas na produção de grãos de feijão. Por ser um fungo de solo, é de difícil manejo sendo o controle biológico com Trichoderma sp. uma alternativa viável. Existem muitos fatores que podem interferir no desempenho do antagonista no controle biológico, como pH, quantidade de água no solo, tipo de solo e nutrientes. Estes estão presentes em abundância no solo pela adubação realizada para suprir as necessidades da cultura, porém pouco se sabe sobre a interferência no desempenho do controle biológico de S. sclerotiorum pelo antagonista Trichoderma sp. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram avaliar a influência de doses de NPK (nitrogênio, fósforo e potássio) no crescimento de diferentes isolados de Trichoderma sp. e S. sclerotiorum in vitro, assim como o desempenho de Trichoderma sp. no controle in vitro e in vivo de Sclerotinia sp. e verificar a ação de Trichoderma sp. na absorção de NPK pelo feijoeiro. O trabalho foi realizado em laboratório e casa de vegetação em Santa Maria, RS, Brasil. Os parâmetros avaliados foram crescimento micelial, esporulação de Trichoderma sp. e porcentagem de controle do patógeno in vitro. In vivo foram avaliadas a incidência de mofo branco, altura de planta, comprimento de raízes, número de folhas, massa fresca e seca de parte aérea e raiz e diâmetro de colo de plantas de feijoeiro. Também se avaliou a população de Trichoderma sp. no solo e o teor de NPK em tecido vegetal da parte aérea do feijoeiro. O maior crescimento micelial foi obtido pelo isolado de Trichoderma sp. UFSMT16 para todas as doses de NPK in vitro, diferindo do isolado UFSMT17 somente nas doses de 75 a 125% de NPK. Na quantificação de esporos de Trichoderma sp., o isolado UFSMT17 apresentou a maior esporulação na maioria das diferentes doses de NPK. O isolado UFSMT16 obteve melhor resultado no teste de pareamento de culturas, apresentando o maior desempenho nas doses de 50, 75 e 100% de NPK (notas de 1,00, 1,25 e 1,00, respectivamente). Na população final o isolado de Trichoderma spp. UFSMT15.1 obteve maior média de UFCs g-1 de solo (1,3 x 104), diferindo estatisticamente do isolado UFSMT16 e da testemunha. Para a variável teor de fósforo na parte aérea, na interação entre isolados de Trichoderma sp. na ausência e presença de S. sclerotiorum associados a doses de NPK, observou-se diferença estatística entre os isolados de Trichoderma spp. UFSMT15.1, UFSMT16 e tratamento testemunha nas doses de 25 e 125% de NPK, na presença e na dose de 25% na ausência de S. sclerotiorum. Concluiu-se que as doses de nitrogênio, fósforo e potássio (NPK) no meio de cultura Elad interferem no crescimento e reprodução do gênero Trichoderma in vitro; os isolados de Trichoderma sp. (UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17) têm maior crescimento de colônias in vitro, do que os isolados de S. sclerotiorum, independente da dose de NPK; as doses de 25, 50, 75,100 e 125% NPK da estabelecida para o meio de cultura Elad interferem na eficácia de controle de S. sclerotiorum pelos isolados UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17 de Trichoderma sp.; a população de Trichoderma sp. não é afetada pela variação da aplicação de diferentes doses de NPK em solo; a presença de S. sclerotiorum diminuiu a altura de parte aérea do feijoeiro, mesmo na ausência de sintomas visíveis da doença, enquanto que os isolados de Trichoderma sp. UFSMT15.1 e UFSMT16 aumentaram em solo com baixa aplicação de NPK; os isolados UFSMT15.1 e UFSMT16 na presença e ausência de S. sclerotiorum em diferentes doses de NPK interferem na quantidade de fósforo na parte aérea do feijoeiro, porém não apresentam efeito significativo no teor de nitrogênio e potássio.

<p>  </p> <p><em>Sclerotinia sclerotiorum </em>is a soilborne pathogen of soybean that causes Sclerotinia stem rot, alternatively called white mold. Sclerotinia stem rot can cause significant yield losses under cool and wet environmental conditions. Two biofungicides, <em>Coniothyrium minitans </em>and <em>Bacillus amyloliquefaciens, </em>are currently available and labeled to limit or suppress <em>S. sclerotiorum</em> in soybean. These biofungicides can be applied in place of synthetic foliar fungicides to provide an alternative mode of action for the control of Sclerotinia stem rot. However, limited information is available regarding the efficacy of <em>C. minitans </em>and <em>B. amyloliquefaciens </em>as biocontrol agents of <em>S. sclerotiorum </em>in soybean and the sensitivity of the biofungicides biological activity on <em>S. sclerotiorum </em>to pesticides commonly used in soybean production systems. This research aims to provide management recommendations for <em>S. sclerotiorum </em>in soybean using <em>C. minitans </em>and <em>B. amyloliquefaciens </em>and to develop guidelines for how to incorporate the biofungicides into an established soybean pest management program. To assess the effectiveness of <em>C. minitans </em>and <em>B. amyloliquefaciens </em>as biocontrol agents of <em>S. sclerotiorum </em>dual culture, amended media, and soil plate assays were conducted along with experiments in the growth chamber and field. The presence of a distinct inhibition zone surrounding the <em>B. amyloliquefaciens </em>colony in the dual culture assay and the absence of mycelial growth on the media plates amended with <em>B. amyloliquefaciens </em>confirmed that the bacteria can control the mycelial growth of <em>S. sclerotiorum </em>through antibiosis. The absence of an inhibition zone surrounding the <em>C. minitans </em>isolate in the dual culture assay along with the degradation of sclerotia following treatment with <em>C. minitans </em>in the soil plate assay indicates an inability to limit the mycelial growth of <em>S. sclerotiorum </em>and confirms that the primary mode of action is mycoparasitism. In the growth chamber, <em>B. amyloliquefaciens</em> at 14.03 L/ha applied using the dip method significantly reduced Sclerotinia stem rot lesion length when compared to the non-treated control and resulted in the lowest lesion area under the disease progress curve (lAUDPC). When <em>B. amyloliquefaciens </em>and <em>C. minitans </em>were applied in the field, no differences were observed between treatments for soybean moisture, test weight, or yield. To evaluate the sensitivity of <em>B. amyloliquefaciens </em>and <em>C. minitans</em> biological activity on <em>S. sclerotiorum </em>to pesticides commonly used in soybean production systems a poison plate assay as well as soil plate, growth chamber, and field experiments were conducted. In the poison plate assay <em>C. minitans </em>was most sensitive to the preemergence herbicide flumioxazin and the synthetic fungicides boscalid and fluazinam, while <em>B. amyloliquefaciens </em>was sensitive only to the synthetic fungicide fluazinam. In the soil plate assay the mycoparasitic activity of <em>C. minitans </em>on sclerotia of <em>S. sclerotiorum </em>was sensitive to flumioxazin, metribuzin, glyphosate, picoxystrobin, and boscalid. In the controlled environment experiments, none of the pesticides tested decreased the efficacy of <em>B. amyloliquefaciens</em>. There were no significant interactions between <em>C. minitans </em>and <em>B. amyloliquefaciens </em>with preemergence herbicides, postemergence herbicides, and synthetic fungicides for soybean moisture, test weight, and yield. This research demonstrates that <em>B. amyloliquefaciens </em>and <em>C. minitans </em>are effective biocontrol agents of <em>S. sclerotiorum </em>in soybean. However, antagonistic relationships exist between the biofungicides and certain preemergence, postemergence, and synthetic fungicides used in soybean production systems.</p>

Made available in DSpace on 2017-07-21T18:53:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonio Carlos Prestes Pereira.pdf: 1053454 bytes, checksum: 52e924eda49d19a3259e2ed89de1ae71 (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / The Brazilian annual production of white mold cheese is around 2,170 tons, the Brie type totals 75% of the production whereas the Camembert type totals 25%; most of the production comes from the states of Minas Gerais and Paraná. Nonetheless, Brazilian legislation does not have a specific Technical Regulation for the Identity and Quality (RTIQ in the Portuguese acronym) for these types of fine cheese, which makes it difficult to have a national standard product “Type”. The aim of this study is to describe the physico-chemical and microbiological properties of these kinds of cheese based on the current official legislation and on an analytical methodology. In addition, the study proposes a specific RTIQ (Technical Regulation for Identity and Quality) for humidity, fat, protein, defatted dry extract, ash, calcium and sodium. The study used a descriptive and experimental methodological approach, which included the collection of Brie and Camembert cheese samples from the summer and winter productions, and a French sample of the same types of cheese to learn about the composition of through the year. The average weight of Brie cheese was 119.87 g, with an average height of 30.31 mm and an average diameter of 131,28 mm. The average whiteness index (WI) of the surface was 70.63 and 89.37 for the center. The texture profile in average values was as follows: -590.12 g for adhesion, 0.88 g, 0.73 for hardness, 0.73 for cohesiveness, 151,86 for chewiness and 0.26 for resilience. The physico-chemical composition of Brie heese in a 95% reliable interval was the following: moisture between 41.80 and 53.10 g.100g-1, fat between 49,65 and 62,59 g.100g-1, defatted dry extract 19.43 and 23.23 g.100g-1, protein between 14.20 and 20.00 g.100g-1, carbohydrate between 1.80 and 7.60 g.100g-1, ashes between 2.80 and 3.40 g.100g-1, the amount of sodium ranged between 112.80 and 661.20 mg.100g-1 and an amount of calcium between 323.90 and 848.10 g.100g-1. The average weight of Camembert cheese was 195.74 g, with an average height of 33.44 mm and an average diameter of 88.05 mm. The average whiteness index (WI) for the surface was 91.82 and 72.29 for the center. The texture profile in average values was as follows: -380.15 g for adhesion, 0.60 g for hardness, 0.50 for cohesiveness, 158,87 for chewiness and 0.19 for resilience. The physico-chemical composition of Camembert cheese presented in a 95% reliable interval moisture between 31.10 and 57.50 g.100g-1, fat between 52,43 and 63,3 g.100g-1, defatted dry extract from 20.13 to 23.20 g.100g-1, protein from 14.27 to 19.73 g.100g-1, carbohydrate from 0.80 to 5.44 g.100g-1, ashes from 3.09 to 4.05 g.100g-1, the amount of sodium ranged between 72.50 and 577.50 mg.100g-1 and, an amount of calcium between 282.80 and 788.80 mg.100g-1. L. monocytogenes was found in a sample of Camembert cheese. The other samples of both types of cheese presented a microbiological profile within the parameters set by the national legislation. / O Brasil possui produção anual de aproximadamente 2.170 ton dos queijos Tipo Brie (75%) e Tipo Camembert (25%), localizada principalmente nos estados de Minas Gerais e do Paraná. Entretanto, a legislação brasileira não contempla o Regulamento Técnico de Identidade e Qualidade (RTIQ) específico para esses queijos finos, o que dificulta a padronização de um produto “Tipo” nacional. Este trabalho visa a caracterização físico-química e microbiológica desses queijos, com base na legislação e metodologia analítica oficial vigente, bem como propor um RTIQ específico, umidade, gordura, proteína, extrato seco desengordurado, cinzas, cálcio e sódio. Foi utilizado o método descritivo e experimental, por meio do qual foram coletadas amostras de queijos referentes às estações verão e inverno e amostra francesa para que, dessa forma, se conheça a composição ao longo do ano desses produtos. A média de peso do queijo Tipo Brie foi de 119,87 g, com altura média de 30,31 mm e diâmetro médio de 131,28 mm. A média do Índice de Brancura (WI) para superfície foi 70,63 e 89,37 para o centro. O perfil de textura em valores médios foi de -590,12 g.s para adesividade, 0,88 g para dureza, 0,73 para coesividade, 151,86 para mastigabilidade e 0,26 para resilência. A composição físico-química do queijo Tipo Brie apresentou, através do intervalo de confiança a 95%, umidade entre 41,80 e 53,10 g.100g-1, gordura entre 49,65 a 62,59 g.100g-1, extrato seco desengordurado (ESD) 19,43 a 23,23 g.100g-1, proteínas entre 14,20 a 20,00 g.100g-1, carboidratos entre 1,80 a 7,60 g.100g-1, cinzas entre 2,80 a 3,40 g.100g-1, teor de sódio entre 112,80 a 661,20 mg.100g-1, teor de cálcio entre 323,90 a 848,10 mg.100g-1. A média de peso do queijo Tipo Camembert foi de 195,74 g, com altura média de 33,44 mm e diâmetro médio de 88,05 mm. A média do Índice de Brancura (WI) para superfície foi 91,82 e 72,29 para o centro. O perfil de textura em valores médios foi de -380,15 g.s para adesividade, 0,60 g para dureza, 0,50 para coesividade, 158,87 para mastigabilidade e 0,19 para resilência. A composição físico-química do queijo Tipo Camembert apresentou, através do intervalo de confiança a 95%, umidade entre 31,10 a 57,50 g.100g-1, gordura entre 52,43 a 63,37 g.100g-1, extrato seco sengordurado (ESD) 20,13 a 23,20 g.100g-1, proteínas entre 14,27 a 19,73 g.100g-1, carboidratos entre 0,80 a 5,44 g.100g-1, cinzas entre 3,09 a 4,05 g.100g-1, teor de sódio entre 72,50 a 577,50 mg.100g-1, teor de cálcio entre 282,80 a 788,80 mg.100g-1. Foi detectada uma amostra de queijo Tipo Camembert com L. monocytogenes. As demais amostras de ambos os queijos apresentaram perfil microbiológico dentro do preconizado pela legislação nacional.

Made available in DSpace on 2017-07-25T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdilaineGrabicoski.pdf: 3057508 bytes, checksum: 91f718973e4409c8611259602683583d (MD5) Previous issue date: 2012-02-09 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / The white mold disease, caused by the fungus Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary, responsible for large losses in soybean (Glycine max (L.) Merrill). The pathogen has more than 400 hosts and presents the formation of a resistance structure (sclerotia), difficulting the disease control, thus increasing the importance of the pathogen in Brazilian agriculture. The seeds are the main spreading disease means, a quickly and correct presence detection of the pathogen is important to control the white mold, especially for non-infested areas by the pathogen. In this study, 57 S. sclerotiorum isolates were morphological and pathologically characterized to assess variations within the specie. Also was developed a method to detect the pathogen directly from seed-soak liquor of infected soybean seeds, through PCR. The proposed method was compared to the traditional recommended methods. The pathogen isolates showed some morphological variations among themselves, as the number and weight of the formed sclerotia. Pathologically, were observed two and seven pathogenic levels second, respectively, the soybean inoculation on the stem and on the detached trifoliate leaves. By the detection method, it was possible to detect one seed artificially contaminated in the sample with 400 total seeds. In naturally contaminated seeds, was possible to detected the pathogen presence in a sample that, according to the method of incubation on paper roll and on Neon-S medium, respectively, presented 1 and 3 seeds contaminated in four hundred seeds. The proposed methodology is promising for the detection of S. sclerotiorum, however, requires optimization because many false negative results were obtained, mainly due to substances released by the seeds that inhibited the PCR reaction. The use of filter in the samples has presented as a possible tool to overcome the PCR inhibitors. For the optimization of the method, increase the size of seed samples, use of filters, others techniques such as nested PCR, Real-Time PCR and DNA probes can help overcome these difficulties. / O Mofo branco, doença causada pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary, vem causando grandes prejuízos na cultura da soja (Glycine max (L.) Merrill) e, por apresentar mais de 400 hospedeiros e a formação de uma estrutura de resistência (escleródios), o seu controle torna-se difícil, aumentando a importância do patógeno para a agricultura brasileira. As sementes são o principal meio de disseminação da doença, detectar rápido e corretamente a presença do patógeno nas mesmas é importante no controle do Mofo branco, principalmente, para não infestar áreas isentas do patógeno. No presente trabalho, 57 isolados de S. sclerotiorum foram caracterizados morfológica e patologicamente para avaliar variações dentro da espécie. Também se desenvolveu uma metodologia de detecção do patógeno em sementes de soja embebidas, através de PCR diretamente do líquido de embebição das mesmas. Comparou-se a metodologia proposta com as tradicionais recomendadas para o patógeno. Os isolados do patógeno apresentaram algumas variações morfológicas entre si, como quantidade e peso dos escleródios formados. Patologicamente, foram verificados dois e sete níveis de patogenicidade segundo, respectivamente, a inoculação dos isolados na haste e em trifólios destacados de plantas de soja. Diretamente a partir do líquido de embebição das sementes, foi possível detectar uma semente artificialmente contaminada em 400 sementes totais. Em sementes naturalmente contaminadas, detectou-se a presença do patógeno em amostra que, segundo o método de incubação em rolo de papel e em Neon-S apresentava, respectivamente, 1 e 3 sementes contaminadas em quatrocentas totais. A metodologia proposta é promissora para a detecção de S. sclerotiorum, no entanto, necessita de otimização, pois muitos resultados falsos-negativos foram obtidos, principalmente devido a substâncias liberadas pelas próprias sementes que inibiram a reação de PCR. A utilização de um filtro nas amostras apresentou-se como uma possível ferramenta para driblar os inibidores de PCR. Para a otimização do método, técnicas como Nested-PCR, Real-Time PCR, utilização de sondas de DNA, aumento no tamanho de amostras de sementes e a utilização dos filtros podem ajudar a superar essas dificuldades.

Made available in DSpace on 2017-07-25T19:30:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carlos Rafael Wutzki.pdf: 1863942 bytes, checksum: 92b287f4925fa1855b1c0d218fc2bb5e (MD5) Previous issue date: 2014-02-07 / The white mold of soybean, caused by Sclerotinia sclerotiorum, is causing great damage to the soybean crop in Brazil. It is a polyphagous fungus hard to control because it produces resistance structures called sclerotia, which can remain viable in the soil for several years. Aiming its control, various management strategies should be used as the control with alternative substances, biological control agents and fungicides. Thus, nine experiments were conducted in naturally infested areas by white mold in 2011/12 season in the counties of Arapoti/PR, Mauá-da-Serra/PR and Pinhão/PR, with an experiment of alternated control, a biological control and one of chemical control conducted at each site. The variables analyzed were incidence, severity, yield and numbers of sclerotia produced. The objective of the experiments of alternative control was to assess different alternative substances, foliar sprayed, isolated or combined with the fungicide fluazinam, for control of white mold in soybean. The alternative substances applied were sodium dichloroisocyanurate, benzalkonium chloride, pyrolysis extract, sodium hypochlorite, cobalt + molybdenum, sucrose, sodium bicarbonate and acibenzolar-S-methyl. As conclusions, it was observed that alternative substances applied in combination with the fungicide fluazinam provided lower severity of white mold in soybeans on the experiment conducted in Pinhão – PR, and fungicide fluazinam applied alone or in combination with alternative substances was effective in control of white mold in soybeans in locations with high incidence of the disease. The objective of the experiments of biological control was to evaluate different biological control agents sprayed foliar compared to the untreated control and the fungicide Fluazinam for control of white mold in soybean. The biological control agents used were: Thichoderma harzianum SC; Thichoderma asperellum EC; Thichoderma asperellum WG; Coniothyrium minitans and Bacillus subtilis. As conclusion, the biological control agents were not effective in controlling white mold of soybean in the conditions that were tested, and the fungicide fluazinam demonstrated lower incidence and severity of disease and higher yield of soybean when applied in areas with high potential inoculum. Finally, the objective of the experiments of chemical control was to verify the efficiency of the control of white mold in soybeans with the use of fungicides applied alone, in rotation, at different growth stages and in a mixture of two active ingredients. The fungicides used were carbendazim, thiophanate methyl, procymidone and fluazinam. As conclusion, the use of fungicides were effective in controlling the incidence and production of sclerotia of S. sclerotiorum in soybean, especially the combinations that had two or more applications of the active ingredient Fluazinam. / O mofo branco da soja, causada pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum, vem causando grandes danos na cultura da soja no Brasil. Trata-se de um fungo polífago de difícil controle, pois produz estruturas de resistência denominadas escleródios, que podem permanecer viáveis no solo por vários anos. Visando seu controle, várias estratégias de manejo devem ser utilizadas, como o controle com substâncias alternativas, agentes de controle biológico e fungicidas. Diante disso, foram conduzidos nove experimentos em áreas naturalmente infestadas pelo mofo branco na safra 2011/12 nos municípios de Arapoti/PR, Mauá-da-Serra/PR e Pinhão/PR, sendo um experimento de controle alternativo, um de controle biológico e um de controle químico conduzidos em cada local. As variáveis analisadas foram incidência, severidade, rendimento e o número de escleródios produzidos. O objetivo dos experimentos de controle alternativo foi avaliar diferentes substâncias alternativas pulverizadas via foliar, isoladamente ou em combinação com o fungicida fluazinam para o controle do mofo branco em soja. Nos experimentos de controle alternativo as substâncias utilizadas foram: dicloroisocianurato de sódio, cloreto de benzalcônio, extrato pirolenhoso, hipoclorito de sódio, cobalto + molibdênio, sacarose, bicarbonato de sódio e acibenzolar-S-metil. Concluiu-se que as substâncias alternativas aplicadas em associação com o fungicida fluazinam proporcionaram menor severidade do mofo branco na cultura da soja no experimento conduzido em Pinhão – PR e a aplicação do fungicida fluazinam isolado ou em associação com as substâncias alternativas foi eficiente no controle do mofo branco na cultura da soja nos locais com alta incidência da doença. O objetivo dos experimentos de controle biológico foi avaliar diferentes agentes de controle biológico pulverizados via foliar em comparação ao tratamento controle e ao fungicida fluazinam para o controle do mofo branco em soja. Os agentes de controle biológico utilizados foram: Thichoderma harzianum SC; Thichoderma asperellum EC; Thichoderma asperellum WG; Bacillus subtilis e Coniothyrium minitans. Conclui-se que os agentes de controle biológico não foram eficazes no controle do mofo branco da soja nas condições em que foram testados e que o fungicida fluazinam proporcionou menor incidência e severidade do doença quando aplicado em áreas com elevado potencial de inóculo. E finalmente, o objetivo dos experimentos de controle químico foi verificar a eficiência de controle do mofo branco na soja com o uso de diferentes fungicidas aplicados isoladamente, em rotação, em diferentes estádios fenológicos e em mistura de dois princípios ativos. Os fungicidas utilizados foram carbendazim, tiofanato metílico, fluazinam e procimidona. Concluiu-se que os fungicidas testados proporcionaram menores níveis de incidência e menor produção de escleródios, principalmente as combinações que possuíam duas ou mais aplicações do princípio ativo fluazinam.

Made available in DSpace on 2017-07-25T19:30:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2016-02-22 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / Sclerotinia sclerotiorum infect many plants, including crops of great economic importance as soybeans (Glycine max) and oilseed rape (Brassica sp.), responsible for great losses. The plant disease control is the most important practical objective of plant pathology, but the correct and rapid diagnosis are essential to define strategies for the diseases management. Molecular techniques are able to amplify specific fragments from small amounts of genetic material and powerful tools widely used in various areas, including the phytopathological diagnosis. Several techniques have been studied and designed for the amplification of nucleic acids, including the LAMP (Loop-mediated isothermal amplification), which has high specificity, sensitivity and is fast. The aim of this study was to develop and optimize a specific molecular test for S. sclerotiorum by LAMP, as well as its validation to oilseed pare and soybean seeds samples. A set of six primers was designed and evaluated for S. sclerotiorum sensitivity and specificity detection. The composition of the LAMP reaction was enhanced for real-time (SS-qLAMP) and direct analysis (SS-cLAMP). The DNA from 57 isolates of S. sclerotiorum, DNA from several other plant pathogens and DNA from different cultures was tested. The DNA of all isolates of S. sclerotiorum were detected but no the other DNA samples. When testing the limit of detection of reactions, a single copy detections was suggested. By SS-qLAMP two curves were generated which can be used to estimate the amount of mycelium and DNA of S. sclerotiorum present in the samples analyzed. Bothe developed tests (SS-qLAMP and SS-cLAMP) can be applied to several purposes, such as detection of the pathogen in plant, spore traps, soil and seeds samples. Using seed samples with different contamination level, the test was optimized for canola and soybean seeds, SS-qLAMP(Canola) and SS-qLAMP(Soybean), respectively, detecting the presence of the pathogen in samples up to 0.13% and 0.03% naturally contaminated for canola and soybean, respectively, and was able to detect contamination in samples not contaminated according incubation-based methods. The time require for the test was 4h and 30 minutes and 2 hours and 50 minutes for canola and soybeans, respectively, with no needs of large space for samples incubation, specialized analysts and able to analyzed many samples simultaneously. The proposed method SS-qLAMP was well-validated according the ISTA (International Seed Testing Association) rules to oilseed-rape and soybean seed samples. x / Sclerotinia sclerotiorum é um fungo que pode atacar diversas espécies vegetais, incluído culturas de grande importância econômica como soja (Glycine max) e canola (Brassica sp.), causando grandes prejuízos para as mesmas. O controle de doenças de plantas é o mais importante objetivo prático da Fitopatologia, mas, a correta e rápida diagnose da doença são pré-requisitos indispensáveis para definir as medidas para o manejo das mesmas. Técnicas moleculares capazes de amplificar fragmentos específicos a partir de pequenas quantidades de material genético são poderosas ferramentas amplamente utilizadas em diversas áreas, incluindo o diagnóstico fitopatológico. Diversas técnicas têm sido estudadas e criadas para a amplificação de ácidos nucleicos, entre elas a LAMP (Amplificação isotérmica mediada por “loops”), que apresenta alta especificidade, sensibilidade e é rápida. O objetivo do presente estudo foi desenvolver e otimizar um teste molecular específico para S. sclerotiorum a base de LAMP, com obtenção de resultados em tempo real e quantitativos (qLAMP) e análise visual direta de resultados (cLAMP), assim como a validação do mesmo para ser utilizado na análise de amostras de sementes de canola e soja. Um conjunto de seis primers foi desenhado e avaliado quanto a sensibilidade e especificidade de detecção de S. sclerotiorum. A composição da reação de LAMP foi otimizada quanto a concentração de diversos componentes tanto para a análise em tempo real como direta, compondo, respectivamente as reações de SS-qLAMP e SS-cLAMP, conforme necessário. Testou-se o DNA de 57 isolados de S. sclerotiorum, o DNA de diversos outros fitopatógenos e o DNA de diversas culturas. O DNA de todos os isolados de S. sclerotiorum foram detectados mas não o de outros fitopatógenos e de plantas. Ao testar o limite de detecção das reações, não houve um limite de detecção, sugerindo que a presença de qualquer molécula de DNA alvo seria detectada. Pelo método quantitativo foi possível gerar duas curvas pelas quais pode-se estimar a quantidade de micélio e de DNA de S. sclerotiorum presente na amostra analisada. Desenvolveu-se um teste específico para S. sclerotiorum a base de LAMP, denominada SS-LAMP que pode ser aplicado em diversos casos, como a detecção do patógeno em amostras de plantas, armadilhas de esporos, de solo e sementes. Otimizou-se o teste SS-LAMP para sementes de canola e soja, SS-qLAMP(Canola) e SS-qLAMP(Soja), respectivamente, detectando-se a presença do patógeno em amostras com até 0,13% e 0,03% de contaminação natural, para canola e soja, respectivamente, além da detecção em amostras que os métodos tradicionais não detectaram. O tempo total do método foi de 4h e 30 minutos para canola e 2h e 50 minutos para soja, sem a necessidade de amplo espaço para incubação das amostras, pessoal especializado para análise e com a possibilidade de diversas amostras serem analisadas concomitantemente. Assim validou-se o método proposto SS-qLAMP(Soja) segundo as regras da ISTA (International Seed Testing Association – Associação Internacional de Análise de Sementes).

O mofo-branco causado pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum se encontra amplamente disperso pelas áreas de produção em todo pais e afeta mais de 400 espécies de planta, causando perdas na produção e redução na qualidade. O controle da doença é considerado difícil, pois o patógeno forma escleródios (estruturas de sobrevivência), que podem permanecer viáveis por vários anos. Normalmente exige-se um manejo integrado, que envolve o controle químico, biológico e diversas práticas culturais, uma vez que cultivares resistentes não estão disponíveis. As adoções de estratégias sustentáveis de manejo do mofo branco dependem da compreensão do patógeno, sua etiologia, morfologia, agressividade e dinâmica populacional. Foram avaliados 150 isolados, coletados em cultivos de cenoura, couve, girassol, nabo, soja e feijão. O índice de velocidade de crescimento micelial (IVCM), a coloração da colônia e densidade do micélio, o tempo necessário para a formação do primeiro escleródio, o número de escleródios por placa, o peso em mg e a forma dos escleródios foram utilizados na caracterização dos isolados. O critério adotado nas avaliações da agressividade dos isolados foi o diâmetro das lesões após diversos intervalos de tempo, usando o método da folha destacada, em feijão e soja. Os valores foram usados para calcular a área abaixo da curva de progresso de doença. A população avaliada mostrou ampla variabilidade para as características morfológicas, fisiológicas e na agressividade. O controle químico é a estratégia mais utilizada no controle do mofo branco. No Brasil, onze ingredientes ativos estão registrados, no entanto, três são mais utilizados: fluazinam, procimidona e tiofanato metílico. O uso intensivo de fungicidas, especialmente os que agem em um unico sitio de ação, podem selecionar isolados resistentes e, consequentemente, levar a falhas de controle. A avaliação da sensibilidade de S. sclerotiorum para os fungicidas mais utilizados é fundamental para monitorar o comportamento da população. Foram avaliadas a sensibilidade de isolados brasileiros de Sclerotinia sclerotiorum a fluazinam, procimidona e tiofanato metílico, atraves de concentrações discriminatórias e valores de CI50 (concentração do fungicida que inibe em 50% o crescimento micelial). Um total de 150 isolados foi testado e nenhum se mostrou resistente a fluazinam ou procimidona. O valor da CI50 para fluazinam variou de 0,00173 ppm a 0,01284 ppm, com média de 0,007 ppm. Para procimidona, a CI50 desses isolados variou de 0,12223 ppm a 0,35916 ppm, com média de 0,21834 ppm. Foram encontrados sete isolados resistentes ao tiofanato metílico, com CI50 variando de 990-2667 ppm. Na população sensível o valor variou de 0,49 - 3,73 ppm. Foi verificada a adaptabilidade dos isolados resistentes, e esta se mostrou comparável a dos isolados sensíveis, sugerindo que os isolados possuem aptidão parasitária suficiente para competir com os isolados sensíveis em condições de campo. / The white mold caused by the fungus Sclerotinia sclerotiorum is widely dispersed in production areas in the whole country and affects more than 400 species, causing production losses and reduced quality. Disease control is considered difficult because the pathogen form sclerotia (survival structure) which can remain viable for several years. Typically this requires a integrated pest management, which involves chemical, biological control and various cultural practices, since resistant cultivars are not available. The adoption of sustainable management strategies for white mold depends on understanding the pathogen, its etiology, morphology, aggressiveness and population dynamics. We evaluated 150 isolates collected from carrots, cabbage, sunflower, turnip, soybeans and beans. Mycelial growth rate index (MIG), colony color and mycelium density, time required to form the first sclerotia, the number of sclerotia per plate, the weight in mg and sclerotia shape were used for the isolates characterization. The criteria used in the isolates aggressiveness evaluations were lesions diameter after various time intervals, using the detached leaf method in bean and soybean. The values were used to calculate the area under the disease progress curve (AUDPC). The population evaluates showed wide variability for morphological, physiological and aggressive characteristics. Chemical control is the most commonly strategy used in the control of white mold. In Brazil, eleven ingredients active are registered, however, three are most commonly used, and they are: fluazinam, procymidone and thiophanate-methyl. The intensive use of fungicides, especially those which act on at a single site of action, can select resistant isolates, and consequently lead to failure control. The evaluation of the sensitivity of S. sclerotiorum to the most commonly used fungicides is critical to monitor the behavior of the population. We assessed the sensitivity of Brazilian Sclerotinia sclerotiorum isolated to fluazinam, procymidone and thiophanate-methyl, through discriminatory concentrations and IC50 values (the fungicide concentration which inhibits 50% of the mycelial growth). A total of 150 strains have been tested, and none were resistant to fluazinam or procymidone. The IC50 value for fluazinam ranged from 0.00173 to 0.01284 ppm ppm, with an average of 0.007 ppm. For procymidone, the IC50 of these isolates ranged from 0.12223 to 0.35916 ppm ppm, averaging 0.21834 ppm. Seven isolates were found resistant to thiophanate-methyl with IC50 ranging from 990-2667 ppm. In sensitive people the value ranged from 0.49 to 3.73 ppm. Adaptability of resistant isolates was observed, and this proved to be comparable to the susceptible isolates, suggesting that the isolates have parasitic fitness enough to compete with susceptible isolates in field conditions.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fungus Sclerotinia sclerotiorum is responsible for significant production losses in lettuce. Because it is a soil fungus, its management is difficult and an alternative, is the use of biological control using species of the genus Trichoderma. Among the many factors that can interfere with the performance of this antagonist, the origin of the isolates and storage are still poorly studied. Little is also known about how Trichoderma spp. isolates obtained from areas with and without a history of white mold disease and stored isolates can affect disease control and growth in lettuce. Thus, the objectives of this study were to quantify populations of species of the genus Trichoderma in soil adjacent to the roots of lettuce in commercial areas with and without a history of white mold, evaluate the growth rate and in vitro antagonism of Trichoderma spp. and S. sclerotiorum, examine the in vivo antagonism of S. sclerotiorum using natives Trichoderma spp. isolates obtained from commercial areas with and without a history of white mold and stored isolates on seedlings and plants of lettuce, and to identify at the level species the isolates of Trichoderma spp. used. Assays were performed in the laboratory of phytopathology at UFSM and in a greenhouse at the town of Santa Maria, RS, Brazil. The parameters evaluated were mycelial growth of the isolates, sporulation of Trichoderma spp., and direct confrontation with the pathogen in vitro. In vivo were evaluated germination, % of surviving plants, disease severity, number of leaves, shoot and root growth dry matter of shoot and root, and total dry matter of lettuce. The results indicate that the population of Trichoderma spp. is different between sampling sites with and without a history of white mold and that Trichoderma spp. isolates from areas with a history of the disease had higher mycelial growth rates when compared to isolates from areas with no history and to isolates stored. In vitro results indicate that highest sporulation, as esporos.mL-1, was presented by UFSMT15.1, UFSMT17 and CP22, and that the isolates stored showed better responses in direct confrontation against S. sclerotiorum. For large scale production, the isolates CP12, CP21, SP13 and SP24 were found to be good alternatives. Trichoderma spp. promoted lettuce seedlings of good quality and a good control of the pathogen, being the isolates SP24 and CP21 able to reduce the severity of damage caused by S. sclerotiorum in lettuce. The isolates UFSMT15.1, TC1.15, ETSR20 and SP13 influencing positively the growth of lettuce in the absence, while UFSMT15.1, SP13 and CP22 showed good results in the presence of the pathogen. However, native isolates of Trichoderma spp. had higher populations on the substrate cultivated with lettuce than the stored isolates. Key words: biological control; white mold; Lactuca sativa L; growth promotion / O fungo Sclerotinia sclerotiorum é responsável por perdas significativas na produção de alface. Por se tratar de um fungo de solo, seu manejo é dificultado, sendo uma alternativa, o uso do controle biológico utilizando espécies do gênero Trichoderma. Dentre os muitos fatores que podem interferir no desempenho desse antagonista, a origem dos isolados e o armazenamento são ainda pouco estudados. Pouco se sabe também a respeito de como isolados de Trichoderma spp. obtidos de áreas com e sem histórico da doença mofo-branco e isolados armazenados podem afetar o controle de doenças e o crescimento em alface. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram quantificar populações de espécies do gênero Trichoderma em solo adjacente às raízes de alface, em áreas comerciais com e sem histórico de mofo-branco, avaliar a velocidade de crescimento e antagonismo in vitro dos isolados de Trichoderma spp. e S. sclerotiorum, examinar o antagonismo in vivo de S. sclerotiorum utilizando isolados de Trichoderma spp. nativos obtidos em áreas comerciais com e sem histórico de mofo-branco e isolados armazenados, em plântulas e plantas de alface, além de identificar em nível de espécie os isolados de Trichoderma spp. utilizados. Os ensaios foram realizados no laboratório de fitopatologia da UFSM e em casa de vegetação na cidade de Santa Maria, RS, Brasil. Os parâmetros avaliados foram crescimento micelial dos isolados, esporulação de Trichoderma spp. e confrontação direta com o patógeno in vitro. Já in vivo foram avaliados germinação, % de plantas sobreviventes, severidade da doença, número de folhas, crescimento de parte aérea e do sistema radicular, matéria seca da parte aérea e do sistema radicular e matéria seca total no cultivo de alface. Os resultados indicam que a população de Trichoderma spp. é diferente entre as áreas amostradas com e sem histórico de mofo-branco e que os isolados de Trichoderma spp. oriundos de áreas com histórico da doença, tiveram maior velocidade de crescimento micelial quando comparado aos isolados obtidos de áreas sem histórico e aos armazenados. Resultados in vitro apontam que a maior esporulação, medida em esporos.mL-1, foi apresentada por UFSMT15.1, UFSMT17 e CP22, e, que os isolados armazenados apresentaram melhores respostas na confrontação direta contra S. sclerotiorum. Para a produção em larga escala, os isolados CP12, CP21, SP13 e SP24 apresentaram-se como boas alternativas. O fornecimento de Trichoderma spp. promoveu plântulas de alface de boa qualidade e controle eficiente do patógeno, sendo os isolados CP21 e SP24 capazes de reduzir a severidade dos danos causados por S. sclerotiorum em plantas de alface. Atuaram influenciando positivamente o crescimento em plantas de alface os isolados UFSMT15.1, TC1.15, ETSR20 e SP13 na ausência, enquanto UFSMT15.1, CP22 e SP13 apresentaram bons resultados na presença do patógeno. No entanto, os isolados de Trichoderma spp. nativos obtiveram maiores populações no substrato cultivado com plantas de alface, do que os isolados armazenados.

Made available in DSpace on 2014-07-29T14:52:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Sclerotinia_Riccely - pre textual.pdf: 83822 bytes, checksum: 7f0c226c4852681fb38e300f649a6c93 (MD5) Previous issue date: 2012-06-29 / The soybean (Glycine max L. Merril) is the main cultivated species on the country, having an average productivity of 3,106 kg.ha-1 in an area of 24.2 million hectares, giving to Brazil the second place in world production. Among the factors that limit the yield, the profitability and the successful production of this legume, diseases are a highlight. Among them, the white mold, caused by Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) of Bary, is gaining importance in the soybean fields on the Brazilian Cerrado . The control of this disease is being considered difficult due to the absence of resistant cultivars, fungus survival in soil during long periods, range of hosts, large number of ascospores produced by apothecium and their fast dissemination on relatively long distances from the source and survival in seeds on mycelial dormant form or sclerotia, contaminating the batches. This work had the aim to study the genetic variability of S. sclerotiorum populations; evaluate the aggressiveness of isolates in soybean culture; evaluate the sensitivity of isolates to fungicides, temperatures and light regime; select an inoculation method of S. sclerotiorum in soybean plants, efficient and practical and; characterize soybean cultivars for reaction to S. sclerotiorum. The experiments were conducted on the Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos da Universidade Federal de Goiás . The collection of isolates was obtained by collecting sclerotia in soybean plants in eight municipalities of the Brazilian Central Region, Silvânia GO, Anápolis GO, São Miguel do Passa Quatro GO, Água Fria GO, Montividiu GO, Chapadão do Sul MS, Uberlândia MG and Patrocínio MG. The tests of mycelial compatibility were performed in MPM (Modified Patterson s Medium) and in PDA (Potato Dextrose Agar) medium, having the mycelial reactions of compatibility and incompatibility evaluated seven days after incubation. Analyzes of mycelial compatibility were performed in each sampled municipality, with a number of 25 isolates, as well as among groups of mycelial compatibility of each municipality, totaling 31 isolates. To evaluation of aggressiveness, 21 isolates representing each group of mycelial compatibility, found in each studied locality, were inoculated by the tip method on the petiole in the cultivars M-SOY 7908 RR and BRSGO 7760 RR. The evaluations of lesion length on stem were made three and seven days after inoculation. The same 21 isolates used on aggressiveness experiments were evaluated for sensibility to fungicides fluopyram, boscalid, thiophanate methyl, carbedanzim, dimoxystrobin + boscalid, procymidone and fluazinam. Those isolates were also evaluated for sensibility on temperatures 10oC, 15oC, 20oC, 25oC and 30oC, in light regime conditions of 12 hours and continuous darkness. For selection of a inoculation method both efficient and practical, four inoculation methods were used in soybean cultivars M-SOY 7908 RR and BRS 7760 RR using only one isolate. The characterization of soybean cultivars regarding reaction to S. sclerotiorum was made by means of an aggressive isolate, selected on aggressiveness experiments, and by the tip method. In this experiment forty cultivars were evaluated in totally randomized design with 3 repetitions. In intrapopulation analysis, was verified that the genetic variability in S. sclerotiorum was low, while in interpopulation analysis, eight compatibility groups were found, one of the groups more aggressive than the other ones. There was significant difference among isolates for the aggressiveness in the two cultivars, being the M-SOY 7908 RR cultivar the most susceptible. The isolates were highly sensible to fungicides boscalid, carbendazim, dimoxystrobin + boscalid, procymidone, fluopyram and fluazinam, only the isolate SSUB 18 was moderately sensible to the fungicide fluopyram. Most of isolates had insensibility to the fungicide thiophanate methyl. The best temperature for mycelial growth of isolates was 25oC, regardless the light regime. The tip method of inoculation in petiole was efficient and practical for characterization of soybean cultivars for their reaction to S. sclerotiorum. There is varietal difference among soybean cultivars for resistance to white mold, being cultivars BRSGO 8460RR, BRSGO Ipameri and P98Y11 the most resistant ones, on the present study conditions. / A soja (Glycine max L. Merril) é a principal espécie cultivada no país, tendo produtividade média de 3.106 kg.ha-1 em uma área de 24,2 milhões de hectares, conferindo ao Brasil o segundo lugar na produção mundial. Dentre os fatores que limitam o rendimento, a lucratividade e o sucesso de produção desta leguminosa destacam-se as doenças. Dentre elas, o mofo branco, causado por Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary, tem assumido importância nos campos de cultivo de soja no Cerrado brasileiro. O controle dessa doença tem sido considerado difícil em função da ausência de cultivares resistentes, sobrevivência do fungo no solo por longos períodos, ampla gama de hospedeiros, grande número de ascósporos produzidos por apotécio e sua rápida disseminação a distâncias relativamente longas a partir da fonte produtora e sobrevivência em sementes na forma de micélio dormente ou escleródios contaminando os lotes. Este trabalho teve como objetivo estudar a variabilidade genética de populações de S. sclerotiorum; avaliar a agressividade de isolados em plantas de soja; avaliar a sensibilidade de isolados à fungicidas, temperaturas e regime de luz; selecionar um método de inoculação de S. sclerotiorum em plantas de soja, eficiente e prático e; caracterizar cultivares de soja quanto à reação à S. sclerotiorum. Os experimentos foram conduzidos na Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos da Universidade Federal de Goiás. A coleção de isolados foi obtida por meio de coleta de escleródios em plantas de soja de oito municípios da região Central do Brasil, Silvânia GO, Anápolis GO, São Miguel do Passa Quatro GO, Água Fria GO, Montividiu GO, Chapadão do Sul MS, Uberlândia MG e Patrocínio MG. Os testes de compatibilidade micelial foram realizados em meio de cultura MPM (meio modificado de Patterson s) e meio de cultura BDA (Batata Dextrose Ágar), sendo as reações miceliais de compatibilidade e incompatibilidade avaliadas aos sete dias após a incubação. As análises de compatibilidade micelial foram realizadas dentro de cada município amostrado, com um número de 25 isolados, bem como entre os grupos de compatibilidade micelial de cada município, totalizando 31 isolados. Para avaliação de agressividade, 21 isolados representando cada grupo de compatibilidade micelial, encontrado em cada localidade estudada, foram inoculados pelo método da ponteira no pecíolo nas cultivares M-SOY 7908 RR e BRSGO 7760 RR. As avaliações do comprimento de lesão na haste foram realizadas aos três e sete dias após a inoculação. Os mesmos 21 isolados utilizados nos experimentos de agressividade foram avaliados quanto à sensibilidade aos fungicidas fluopyram, boscalid, tiofanato metílico, carbedazim, dimoxystrobina+boscalid, procimidone e fluazinam. Estes isolados também foram avaliados quanto à sensibilidade as temperaturas de 10oC, 15oC, 20oC, 25oC e 30oC, em condições de fotoperíodo por 12 horas e escuro contínuo. Para seleção de um método de inoculação eficiente e prático, quatro métodos de inoculação foram utilizados nas cultivares de soja M-SOY 7908 RR e BRS 7760 RR, utilizando-se apenas um isolado. A caracterização de cultivares de soja quanto à reação a S. sclerotiorum foi realizada por meio de um isolado agressivo, selecionado nos experimentos de agressividade, e pelo método de inoculação da ponteira. Neste experimento foram avaliadas quarenta cultivares em delineamento inteiramente casualizado com 3 repetições. Em análise intrapopulacional, verificou-se que a variabilidade genética em S. sclerotiorum foi baixa, enquanto que em análise interpopulacional, oito grupos de compatibilidade foram encontrados, sendo um grupo mais predominante do que os demais. Houve diferença significativa entre os isolados quanto à agressividade nas duas cultivares, sendo a cultivar M-SOY 7908 RR a mais suscetível. Os isolados foram altamente sensíveis aos fungicidas boscalid, carbendazim, dimoxystrobina+boscalid, procimidone, fluopyram e fluazinam, somente o isolado SSUB 18 que foi moderamente sensível ao fungicida fluopyram. A maioria dos isolados apresentou insensibilidade ao fungicida tiofanato metílico. A melhor temperatura para o crescimento micelial dos isolados foi 25oC, independentemente do regime de luz. O método de inoculação da ponteira no pecíolo foi eficiente e prático para caracterização de cultivares de soja quanto à reação a S. sclerotiorum. Existe diferença varietal entre as cultivares de soja quanto à resistência ao mofo branco, sendo que as cultivares BRSGO 8460RR, BRSGO Ipameri e P98Y11 foram as mais resistentes, nas condições do presente estudo.

O mofo-branco causado pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum se encontra amplamente disperso pelas áreas de produção em todo pais e afeta mais de 400 espécies de planta, causando perdas na produção e redução na qualidade. O controle da doença é considerado difícil, pois o patógeno forma escleródios (estruturas de sobrevivência), que podem permanecer viáveis por vários anos. Normalmente exige-se um manejo integrado, que envolve o controle químico, biológico e diversas práticas culturais, uma vez que cultivares resistentes não estão disponíveis. As adoções de estratégias sustentáveis de manejo do mofo branco dependem da compreensão do patógeno, sua etiologia, morfologia, agressividade e dinâmica populacional. Foram avaliados 150 isolados, coletados em cultivos de cenoura, couve, girassol, nabo, soja e feijão. O índice de velocidade de crescimento micelial (IVCM), a coloração da colônia e densidade do micélio, o tempo necessário para a formação do primeiro escleródio, o número de escleródios por placa, o peso em mg e a forma dos escleródios foram utilizados na caracterização dos isolados. O critério adotado nas avaliações da agressividade dos isolados foi o diâmetro das lesões após diversos intervalos de tempo, usando o método da folha destacada, em feijão e soja. Os valores foram usados para calcular a área abaixo da curva de progresso de doença. A população avaliada mostrou ampla variabilidade para as características morfológicas, fisiológicas e na agressividade. O controle químico é a estratégia mais utilizada no controle do mofo branco. No Brasil, onze ingredientes ativos estão registrados, no entanto, três são mais utilizados: fluazinam, procimidona e tiofanato metílico. O uso intensivo de fungicidas, especialmente os que agem em um unico sitio de ação, podem selecionar isolados resistentes e, consequentemente, levar a falhas de controle. A avaliação da sensibilidade de S. sclerotiorum para os fungicidas mais utilizados é fundamental para monitorar o comportamento da população. Foram avaliadas a sensibilidade de isolados brasileiros de Sclerotinia sclerotiorum a fluazinam, procimidona e tiofanato metílico, atraves de concentrações discriminatórias e valores de CI50 (concentração do fungicida que inibe em 50% o crescimento micelial). Um total de 150 isolados foi testado e nenhum se mostrou resistente a fluazinam ou procimidona. O valor da CI50 para fluazinam variou de 0,00173 ppm a 0,01284 ppm, com média de 0,007 ppm. Para procimidona, a CI50 desses isolados variou de 0,12223 ppm a 0,35916 ppm, com média de 0,21834 ppm. Foram encontrados sete isolados resistentes ao tiofanato metílico, com CI50 variando de 990-2667 ppm. Na população sensível o valor variou de 0,49 - 3,73 ppm. Foi verificada a adaptabilidade dos isolados resistentes, e esta se mostrou comparável a dos isolados sensíveis, sugerindo que os isolados possuem aptidão parasitária suficiente para competir com os isolados sensíveis em condições de campo. / The white mold caused by the fungus Sclerotinia sclerotiorum is widely dispersed in production areas in the whole country and affects more than 400 species, causing production losses and reduced quality. Disease control is considered difficult because the pathogen form sclerotia (survival structure) which can remain viable for several years. Typically this requires a integrated pest management, which involves chemical, biological control and various cultural practices, since resistant cultivars are not available. The adoption of sustainable management strategies for white mold depends on understanding the pathogen, its etiology, morphology, aggressiveness and population dynamics. We evaluated 150 isolates collected from carrots, cabbage, sunflower, turnip, soybeans and beans. Mycelial growth rate index (MIG), colony color and mycelium density, time required to form the first sclerotia, the number of sclerotia per plate, the weight in mg and sclerotia shape were used for the isolates characterization. The criteria used in the isolates aggressiveness evaluations were lesions diameter after various time intervals, using the detached leaf method in bean and soybean. The values were used to calculate the area under the disease progress curve (AUDPC). The population evaluates showed wide variability for morphological, physiological and aggressive characteristics. Chemical control is the most commonly strategy used in the control of white mold. In Brazil, eleven ingredients active are registered, however, three are most commonly used, and they are: fluazinam, procymidone and thiophanate-methyl. The intensive use of fungicides, especially those which act on at a single site of action, can select resistant isolates, and consequently lead to failure control. The evaluation of the sensitivity of S. sclerotiorum to the most commonly used fungicides is critical to monitor the behavior of the population. We assessed the sensitivity of Brazilian Sclerotinia sclerotiorum isolated to fluazinam, procymidone and thiophanate-methyl, through discriminatory concentrations and IC50 values (the fungicide concentration which inhibits 50% of the mycelial growth). A total of 150 strains have been tested, and none were resistant to fluazinam or procymidone. The IC50 value for fluazinam ranged from 0.00173 to 0.01284 ppm ppm, with an average of 0.007 ppm. For procymidone, the IC50 of these isolates ranged from 0.12223 to 0.35916 ppm ppm, averaging 0.21834 ppm. Seven isolates were found resistant to thiophanate-methyl with IC50 ranging from 990-2667 ppm. In sensitive people the value ranged from 0.49 to 3.73 ppm. Adaptability of resistant isolates was observed, and this proved to be comparable to the susceptible isolates, suggesting that the isolates have parasitic fitness enough to compete with susceptible isolates in field conditions.