Orientador: Marilda Mazzali / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T09:11:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nicolielo_RenatoLuizCursino_M.pdf: 2896438 bytes, checksum: 3df4ea3bde6ce115708b78e7b010be98 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Hiperuricemia é associada ao desenvolvimento de remodelamento vascular e hipertensão arterial em modelos experimentais. Por outro lado, o uso de agentes redutores dos níveis de ácido úrico (hipouricemiantes) proporciona a normalização pressórica e proteção contra o desenvolvimento de doença renal. Objetivo: Determinar o efeito de agentes hipouricemiantes sobre a pressão arterial de animais SHR. Métodos: ratos machos SHR e WKY, com 4 semanas de idade, acompanhados durante 9 semanas. Os animais SHR foram tratados com alopurinol (SHRALP) ou benzbromarona (SHRBENZ). Pressão arterial de cauda, função renal e histologia renal foram comparados aos animais SHR não tratados (SHRCT) e aos controles normotensos WKY (WKYCT). Pressão arterial de cauda foi medida no período inicial e semanalmente até o sacrifício. Resultados: Tratamento com agentes hipouricemiantes reduziu a PA em animais SHR, com melhor controle no grupo SHRALP (SHRCT 214±7,7; SHRALP 164±3,5; SHRBENZ 179±2,3 mmHg, p<0,05). O tratamento foi associado com redução significativa dos níveis de ácido úrico comparado aos controles SHR (SHRCT 1,6±0,6; SHRALP 0,9±0,2*; SHRBENZ 1,0±0,4* mg/dl, *p<0.05). A função renal permaneceu inalterada em todos os grupos durante o acompanhamento. Análise histológica dos fragmentos renais mostrou redução significativa do percentual de arteríolas pré-glomerulares remodeladas nos animais tratados, em comparação aos controles SHR (84,3±8,5%SHRCT; 66,4±20,1%SHRALP*; 71,6±15,3% SHRBENZ* p<0,05). Espessamento de arteríolas pré-glomerulares, quantificada por método de captura de imagem computadorizada mostrou redução significativa da área de parede arteriolar nos animais tratados em comparação aos SHR não tratados (SHRCT). A espessura arteriolar do grupo SHRALP foi compatível a dos animais controles WKY. Conclusão: O uso de agentes hipouricemiantes foi associado com redução de PA e de remodelamento vascular de arteríolas préglomerulares em animais SHR. Como esses animais já apresentam nível sérico de ácido úrico mais elevado que os WKY com 4 semanas de vida, apesar de níveis pressóricos normais, intervenção em idades mais precoces talvez possa prevenir o desenvolvimento de hipertensão arterial e remodelamento vascular nestes animais. / Abstract: Hyperuricemia is associated with vascular remodeling and hypertension in experimental models, and use of uric acid (UA) lowering agents is associated with BP normalization and protection of renal disease. Aim: To determine the effect of UA lowering agents on BP in SHR animals. Methods: Male SHR and WKY rats, 4 weeks old, were followed for 9 weeks. SHR animals received allopurinol (SHRALP) or benzbromarone (SHRBENZ) and BP, renal function, and renal histology were compared to untreated SHR (SHRCT) and WKY controls (WKYCT). Blood pressure was measured at baseline and every week until sacrifice. Results: Treatment with UA lowering agents reduced BP in SHR, with better control in SHRALP group (SHRCT 214±7.7, SHRALP 164±3.5, SHRBENZ 179±2.3 mmHg, p<0.05). Treatment was associated with a significant reduction in serum UA levels compared to SHRCT (SHRCT 1.6±0.6, SHRALP 0.9±0.2*, SHRBENZ 1.0±0.4* mg/dl, *p<0.05). Renal function remained unchanged in all groups. Histological analysis showed a significant reduction in vascular remodeling in SHR treated with UA-lowering agents compared to SHRCT (84.3±8.5%SHRCT, 66.4±20.1%SHRALP*, 71.6±15.3% SHRBENZ* p<0.05). Pre-glomerular arterial thickness, measured by computer assisted analysis, showed a reduction in arteriolar wall area in SHR treated compared to SHRCT. Arteriolar thickness in SHRALP group was comparable to WKYCT. Conclusion: The use of UA lowering agents was associated with a reduction in BP and pre glomerular arteriolopathy in SHR. As SHR rats already had higher UA than WKY controls at 4 weeks of life, despite normal BP, an earlier intervention might prevent the development of hypertension and vascular remodeling in these animals. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Marilda Mazzali / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T15:27:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mazali_FernandaCristina_M.pdf: 3384913 bytes, checksum: 0d3a47a884265f3d5949b9aff82161a6 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Objetivo: Hiperuricemia é uma complicação freqüente da terapêutica com ciclosporina (CsA). Estudos anteriores demonstraram que a hiperuricemia exacerba a lesão intersticial e vascular no modelo experimental de nefrotoxicidade por CsA (CsA ntx). O presente estudo tem como hipótese que a normalização da uricemia preveniria o desenvolvimento da nefropatia crônica por CsA. Metodologia: A nefropatia crônica por CsA foi induzida em ratos machos, Sprague Dawley, através da injeção subcutânea diária de CsA (15mg/kg/dia), por um período de 7 semanas, em associação com dieta hipossódica (CSA). O efeito do controle da hiperuricemia foi determinado através do tratamento concomitante com um inibidor de xantina oxidase (alopurinol, 15mg/Kg/dia ? CSA/ALP) ou com um agente uricosúrico (benzbromarona, 15mg/Kg/dia, CSA/BENZ), em bebedouro. O grupo-controle incluiu ratos tratados com veículo (VEH, injeções SC diárias de óleo de oliva). Ao sacrifício foram realizadas análises funcionais e histológicas. Resultados: Os animais do grupo CSA desenvolveram hiperuricemia leve (ácido úrico 4.36 vs 2.49 mg/dl, CSA vs VEH, p<0.05), com hialinose arteriolar, atrofia tubular, fibrose intersticial em faixa, aumento de proliferação celular e redução da expressão de VEGF. O tratamento com alopurinol ou benzbromarona reduziu a lesão renal, assim como os níveis de ácido úrico e creatinina sérica (ácido úrico 2.03 CSA/ALP e 2.93 mg/dl, CSA/BENZ, p<0.05 vs VEH e CSA). Ambos os tratamentos reduziram a fibrose intersticial, a proliferação celular, infiltrado de macrófagos, expressão de osteopontina e hialinose arteriolar, em associação com restauro da expressão de VEGF, com proteção comparável entre as duas drogas. Conclusão: A hiperuricemia exacerba a nefropatia pela CsA em ratos. Tratamento concomitante com alopurinol ou benzbromarone reduz a severidade da lesão. Como ambas as drogas promovem proteção semelhante, concluímos que o efeito protetor é associado ao controle da hiperuricemia, mais importante que o efeito antioxidante do alopurinol / Abstract: Aim: Hyperuricemia frequently complicates cyclosporine (CSA) therapy. Previous studies have shown that hyperuricemia increases the interstitial and vascular lesions in the cyclosporine model. We therefore tested the hypothesis that normalization of uric acid could prevent the development of cyclosporine toxicity. Material and Methods: CSA nephropathy was induced by the administration of CSA (15 mg/kg/day) for 7 weeks to rats on a low salt diet (CSA group). The effect of preventing hyperuricemia on CSA nephropathy was determined by concomitant treatment with the xanthine oxidase inhibitor, allopurinol (CSA-ALP), or with the uricosuric, benzbromarone (CSA-BENZ), in the drinking water. Control groups included rats treated with vehicle (VEH). Histological and functional studies were determined at sacrifice. Results:. CSA treated rats developed mild hyperuricemia with arteriolar hyalinosis, tubular atrophy, striped interstitial fibrosis, increased cell proliferation and decreased VEGF expression. Treatment with either allopurinol (CSA-ALP) or benzbromarone (CSA-BENZ) reduced renal injury. Both treatments reduced interstitial fibrosis, cell proliferation, macrophage infiltration, osteopontin expression and arteriolar hyalinosis in association with restoration of VEGF expression. Both drugs provided comparable protection. Conclusions: An increase in uric acid exacerbates CSA nephropathy in the rat. Concomitant treatment with allopurinol or benzbromarone reduced the severity of renal disease. As both drugs promoted similar protection, we can conclude that the protective effect is associated with lowering uric acid levels, more than the antioxidant effect of allopurinol / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

A mecanização de procedimentos analíticos em análises clínicas traz vantagens tais como minimização de erros sistemáticos e do tempo das análises. Sistemas de análises em fluxo com multicomutação apresentam grandes potencialidades nesse sentido, atendendo às necessidades da mecanização de procedimentos analíticos de maneira versátil e robusta. Estes sistemas permitem minimizar o consumo de reagentes e a geração de resíduos, devido ao gerenciamento preciso de pequenos volumes de soluções por dispositivos controlados eletronicamente, tais como microbombas solenoide. O fluxo pulsado proporcionado pelas microbombas e a estratégia da amostragem binária melhoram a mistura entre amostra e reagentes. O ácido úrico é o principal produto final do metabolismo de purinas. A determinação deste analito em amostras de urina apresenta importância clínica, uma vez que sua concentração pode auxiliar no diagnóstico de disfunções no organismo humano, como a gota e o mau funcionamento dos rins. Um procedimento analítico empregando sistema de análises em fluxo com microbombas solenoide foi desenvolvido para a determinação de ácido úrico em amostras de urina. Os íons Cu(II) são reduzidos pelo ácido úrico a íons Cu(I), que podem ser quantificados por espectrofotometria na presença do ácido 4,4\'-dicarboxi-2,2\'- biquinolínico (BQA). Resposta linear foi observada entre 10 e 100 &#181;mol L-1 de ácido úrico, sendo a curva analítica representada pela equação A=(0,0063±0,0002)CAU + (0,0285±0,0040), r = 0,999, em que CAU é a concentração de ácido úrico em &#181;mol L-1. O limite de detecção foi estimado em 3,0 &#181;mol L-1 (99,7% de nível de confiança; n = 20). O coeficiente de variação foi estimado em 1,2% com 20 medidas de uma solução de ácido úrico 75 &#181;mol L-1 e a frequência de amostragem foi de 150 h-1. As principais espécies concomitantes presentes na urina não interferem na determinação de ácido úrico em concentrações até 5 vezes maiores que as usualmente encontradas. Recuperações entre 91 e 112% foram estimadas e os resultados das análises de 4 amostras de urina concordaram com os obtidos pelo procedimento enzimático para a determinação de ácido úrico (95% de nível de confiança). O alto grau de diluição da amostra necessário (100 vezes) minimiza o volume de amostra utilizado e os efeitos de matriz. Uma simples reconfiguração do sistema e a reotimização das frações volumétricas permitiram que a amostra fosse diluída em linha por reamostragem na zona dispersa. Resposta linear foi observada até 5,0 mmol L-1 de ácido úrico, sendo a curva analítica obtida representada pela equação A=(0,105±0,001) CAU + (0,023±0,003), r=0,999, em que CAU é a concentração de ácido úrico em mmol L-1. O coeficiente de variação, o limite de detecção e a frequência de amostragem foram estimados em 1,0%, 0,2 mmol L-1 e 95 h-1, respectivamente. Os resultados da análise de 3 amostras de urina concordaram com os obtidos pelo procedimento enzimático, com nível de confiança de 95% / Mechanization of analytical procedures in clinical analysis brings advantages such as minimization of systematic errors and analysis time. Multicommuted flow systems attain the requirements to mechanization of analytical procedures in a versatile and robust way, minimizing reagent consumption and waste generation, due to the low solution volumes handled by electronically controlled devices, such as solenoid micro-pumps. The pulsed flow characteristic of the micro-pumps and the binary sampling approach improve sample and reagent mixing. Uric acid is the main end product of purine metabolism and its determination in urine shows clinical importance, because its concentration can be related to human organism dysfunctions, such as gout and renal disorders. An analytical procedure employing a flow system with solenoid micro-pumps was developed, aiming the determination of uric acid in urine samples. Cu(II) ions are reduced by uric acid to Cu(I) ions that can be quantified by spectrophotometry in the presence of 2,2´-biquinoline 4,4´-dicarboxylic acid (BCA). Linear analytical response was observed between 10 and 100 &#181;mol L-1 uric acid and the analytical curve corresponds to the equation A=(0.0063±0.0002) CUA + (0.0285±0.0040), r = 0.999, in which CUA is the uric acid concentration in &#181;mol L-1. The detection limit was estimated as 3.0 &#181;mol L-1 (99.7% confidence level; n = 20). The coefficient of variation was estimated in 1.2% with 20 replicates of a 75 &#181;mol L-1 uric acid solution and sampling rate of 150 h-1 was achieved. The main concomitant species does not interfere in uric acid determination in concentrations up to 5-fold higher than that usually found in urine samples. Recoveries from 91 to 112% were estimated and the results for 4 urine samples agreed with those obtained by the commercially available enzymatic kit for determination of uric acid (95% confidence level). The 100-fold sample dilution minimizes sample consumption and matrix effects. A simple system reconfiguration and a re-optimization of volumetric fractions attained on-line sample dilution by zone sampling. Linear response was observed up to 5.0 mmol L-1 uric acid and the analytical curve corresponds to the equation A=(0.105±0.001) CUA\' + (0.023±0.003), r = 0.999, in which CUA\' is the uric acid concentration in mmol L-1. The coefficient of variation, detection limit and sampling frequency were estimated as 1.0%, 0.2 mmol L-1 and 95 h-1, respectively. The results of the analysis of 3 urine samples also agreed with those obtained with the enzymatic procedure at the 95% confidence level

O trabalho apresentado nesta Dissertação de Mestrado descreve o desenvolvimento e aplicação de eletrodos de pasta de carbono modificados eletroquimicamente em soluções de guanina e de eletrodos de grafite pirolítico modificados em soluções de dopamina. Estes eletrodos foram empregados na detecção e, a quantificação, por voltametria de pulso diferencial (VPD), de alguns compostos de importância biológicas tais como NADH, NADPH, 8-oxo-guanina, ácido úrico (AU), ácido ascórbico (AA), dopamina (DA) e xantina (XA). No primeiro caso, os eletrodos de pasta de carbono foram modificados em solução de guanina por aplicação de um potencial de 1,1 V (vs Ag/AgCl, KClsat) ao eletrodo de trabalho por 12 minutos sob sat agitação constante. Com estes eletrodos detectaram-se NADH, NADPH, 8-oxo-guanina e AU, com limites de detecção de 3,3, 3,7, 2,0 e 6,6 x 10-6 mol L-1 respectivamente, na faixa de concentração de 7,5 x 10-6 a 8,1 x 10-4 mol L-1 . No segundo caso, eletrodos de grafite pirolítico, previamente tratados em solução de NaOH, foram modificados eletroquimicamente em solução de DA por aplicação de um potencial 1,5 V (vs Ag/AgCl, KClsat ) ao eletrodo de trabalho durante 2 minutos. Com estes eletrodos foi possível a determinação simultânea de AA, AU e DA. Para obtenção das curvas analíticas variou- se a concentração do analito de interesse, mantendo-se constante a concentração dos possíveis interferentes nos valores de 1,0 x 10-4 mol L-1 (DA), 5,0 x 10-5 mol L-1 (AU) e 1,0 x 10-3 mol L-1 (AA). Os limites de detecção calculados para AU, AA e DA foram respectivamente de 1,4 x 10-6 mol l-1 , 2,5 x 10-5 mol l-1 e 1,1 x 10-7 mol l-1 . Ácido úrico foi determinado em amostras de urina, sangue e soro humano com 92 a 103 % de recuperação, sem a necessidade de tratamento prévio das amostras. / Chemically Modified Carbon Paste and Pyrolitic Graphite Electrodes were prepared via electrochemical deposition from guanine and dopamine solutions. Carbon paste electrodes were modified in guanine solutions under an applied potential of 1.1 V (vs Ag/AgCl, KClsat ) during 12 minutes under constant stirring. They were used for sat electrochemical detection of NADH, NADPH, uric acid and 8-oxoguanine. Detection limits were 3.3, 3.7, 6.6 and 2.0 10-6 mol L-1 respectively, with sensitivity of 0.13, 0.10, 0.26 and 0.40 A mol-1 L cm-2 , respectively. The electrodes showed high reproducibility and absence of surface poisoning effects. Good analytical performance was attributed to the formation of superficial dimer or trimers species of guanine during the modification process. Pyrolitic graphite electrodes, previously submitted an electrochemical treatment in NaOH solution, were modified in dopamine solution (phosphate buffer, pH 10) under an applied potential of 1.5 V (vs Ag/AgCl, KClsat ) during 2 minutes under constant sat stirring and, further used for the simultaneous determination of ascorbic acid (AA), uric acid (AU) and dopamine (DA). The analytical curves were obtained changing the concentration of the wished analyte, at constant concentration levels of the interferences: 1.0 x 10-4 mol L-1 (DA), 5.0 x 10-5 mol L-1 (UA) and 1.0 x 10-3 mol L-1 (AA). Detection limits were 1.4 x 10-6 mol L-1 , 2.5 x 10-5 mol L-1 and 1.1 x 10-7 mol L-1 for UA, AA and DA, respectively. Uric acid was determined in human urine, blood and serum samples without any previous treatment. Recovering percentages of 92 to 103 % were obtained.

En la actualidad, la enfermedad cerebro vascular (ECV) o accidente cerebro vascular (ACV) es considerada una epidemia que afecta a las personas de la tercera edad. Algunos estudios afirman que la elevación del ácido úrico es un factor protector en la evolución, así como, en la recuperación neurológica del ECV agudo. Sin embargo, existen otros donde no se establece una clara relación entre su concentración y la mejoría clínica en el ECV. Objetivo: determinar si existe correlación entre el nivel de ácido úrico sérico y la recuperación neurológica con el resultado de la escala de National Institute of Health Stroke Scale (NIHSS) en pacientes con enfermedad cerebro vascular isquémico en un hospital de Lambayeque, Enero - Mayo, 2016. Pacientes y Métodos: la población estuvo conformada por todos los pacientes del servicio de neurología ingresados por emergencia entre los meses de Enero a Mayo del 2016. Se empleó un muestreo no probabilístico consecutivo; la muestra fue de 85 pacientes con enfermedad cerebrovascular isquémico. Se aplicó la escala NIHSS y la toma de ácido úrico sérico al ingreso del paciente y al alta (día 10 de hospitalización). Resultados: a menor nivel de ácido úrico al ingreso, se presenta menor déficit neurológico al egreso, y a mayor nivel de ácido úrico al ingreso, la condición neurológica es más desfavorable al egreso. En los pacientes con disminución del nivel de ácido úrico, la posibilidad de mejoría se incrementó 2.87 veces en relación a los que presentaron un aumento del ácido úrico. / Tesis

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-13T17:34:42Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 379696 bytes, checksum: 46f9fb8516076224a79ac2f1a3dcf06e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-13T17:34:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 379696 bytes, checksum: 46f9fb8516076224a79ac2f1a3dcf06e (MD5) Previous issue date: 2004-02-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho foi desenvolvido a partir de quatro experimentos. No primeiro foram utilizados quatro animais de grau de sangue predominantemente Holandês, fistulados no rúmen, com peso médio de 259 kg, objetivando-se avaliar o efeito dos níveis de casca de algodão na dieta de bovinos sobre os consumos e digestibilidades totais e parciais da matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), extrato etéreo (EE), proteína bruta (PB), fibra em detergente neutro corrigida para cinzas e proteína (FDNcp), carboidratos não-fibrosos (CNF), o consumo de nutrientes digestíveis totais (NDT), a produção de proteína microbiana, a concentração de nitrogênio uréico no soro (NUS) e de amônia no rúmen e a excreção de compostos nitrogenados na urina. O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino 4X4, sendo quatro animais, quatro períodos experimentais e quatro tratamentos (níveis crescentes de casca de algodão peletizada: 0, 10, 20 e 30%, em substituição na base da matéria seca à silagem de capim-elefante como volumoso), sendo a dieta total constituída de 60% de volumoso. Verificou-se que os níveis de casca de algodão aumentaram linearmente o consumo diário de todos os nutrientes, tanto em kg quanto em % do peso vivo. As análises de variância não evidenciaram influência dos diferentes tratamentos sobre o pH e concentrações de amônia ruminais, as digestibilidades totais e parciais dos nutrientes e conseqüentemente, não houve efeito sobre o teor NDT das dietas que foi em média 59,53%. O NDT calculado da casca de algodão foi de 55,52%. A concentração de NUS e a excreção de uréia (em mg/kgPV) na urina diminuíram enquanto a excreção urinária de derivados de purinas (DP) na urina aumentou linearmente com a inclusão de casca de algodão nas dietas. A casca de algodão mostrou-se um bom volumoso alternativo, podendo ser fornecida até o nível de 30% na MS total na dieta de novilhos de origem leiteira. No segundo Experimento, objetivou-se avaliar o efeito do nível de produção de leite sobre os consumos e as digestibilidades da MS, MO, EE, PB, FDNcp e CNF, o consumo de NDT e de proteína degradável no rúmen (PDR), a produção de proteína microbiana, a concentração de amônia no rúmen e a excreção de compostos nitrogenados na urina. Avaliaram-se as concentrações de N uréico no soro (NUS) e no leite (NUL), de animais de diferentes produções de leite. Foram comparadas as metodologias de coleta de urina spot e total para a quantificação do fluxo de N microbiano. Foram utilizadas 15 vacas da raça Holandesa, puras e mestiças, alocadas em delineamento inteiramente casualizado, com três tratamentos em função do nível de produção de leite (produção de leite média de 5,88, 18,54 e 32,6 kg/dia para os tratamentos ALTA, MÉDIA e BAIXA). A dieta foi constituída de silagem de milho à vontade e um kg de concentrado para cada três kg da média de leite produzido. Os consumos de todos os nutrientes, exceto de FDNcp, foram influenciados pela produção de leite. As digestibilidades da MS e da MO e o teor de NDT não diferiram entre os tratamentos, enquanto as digestibilidades da PB e da FDNcp, foram influenciadas pelo nível de produção sendo maior e menor, respectivamente, no tratamento ALTA. A presença de cinzas e proteína na FDN subestimou a digestibilidade da FDN e superestimou a dos CNF. Os teores de NUS e NUL e a excreção de compostos nitrogenados na urina foram altamente correlacionados e superiores nos animais mais produtivos, indicando que a concentração ótima varia com o nível de produção de leite. A produção microbiana não diferiu entre as metodologias de coleta de urina spot e total, sendo inferior nos animais menos produtivos. No terceiro, 22 novilhas com diferentes pesos, foram distribuídas em delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos (peso médio de 523, 453, 315, 235 e 118 kg para os tratamentos I, II, III, IV e V, respectivamente). A alimentação foi constituída de silagem de milho a vontade e 1,5 kg de concentrado por dia para as novilhas dos tratamentos I, II, III e IV, e dois kg de concentrado para as novilhas do tratamento V. Os objetivos foram similares aos do segundo Experimento. Quando expresso em relação ao peso das novilhas, o consumo de MS foi negativamente correlacionado com o peso dos animais. As digestibilidades da MS e da MO e o teor de NDT não diferiram entre os tratamentos, enquanto as digestibilidades da PB e da FDNcp, foram distintas entre os tratamentos, sendo maior e menor, respectivamente, no tratamento V. A presença de cinzas e proteína na FDN subestimou a digestibilidade da FDN e superestimou a dos CNF. Os teores de NUS e a excreção de N e de uréia na urina (em mg/kgPV) foram altamente correlacionados e superiores nas novilhas menores, e variaram com o peso vivo e com o teor de PB e PDR na dieta. A produção microbiana não diferiu entre as metodologias de coleta de urina spot e total, sendo inferior nas novilhas menores. No quarto Experimento, foram utilizadas 15 vacas lactantes com produção de leite média de 24 kg/dia, em blocos ao acaso, objetivando-se avaliar quatro tempos de duração da coleta total de urina (seis, 12, 18 e 24 horas) sobre a estimativa da excreção diária de creatinina. Não foram encontradas diferenças entre a estimativa da excreção de creatinina, obtida pelos tempos de coleta de seis, 12 e 18 horas e a observada em 24 horas, logo a excreção nos períodos diurno e noturno foi similar. A excreção de creatinina pelas vacas do Experimento IV foi, em média, de 24,07 mg/kgPV. Também foram avaliadas as excreções de creatinina nos demais experimentos. Os níveis de casca de algodão não influenciaram a excreção de creatinina nos novilhos do primeiro Experimento, que foi em média de 27,99 mg/kgPV. A excreção de creatinina pelas vacas do segundo Experimento não foi influenciada pela produção de leite, apresentando valor médio de 24,04 mg/kgPV. No terceiro Experimento a excreção de creatinina (EC, em mg/KgPV) aumentou linearmente com a diminuição no peso das novilhas, de acordo com a seguinte equação: EC(mg/kgPV) =32,27 - 0,01093*PV(kg). / This work was developed based on four experiments. In the first it was utilized four predominantly Holstein steers, fitted with rumen cannulae, with average weight of 259 kg, aiming to evaluate the effect of cottonseed hulls levels in the diet on intakes and total and partial digestibilities of the dry matter (DM), organic matter (OM), ether extract (EE), crude protein (CP), neutral detergent fiber corrected to ashes and protein (NDFap) and non-fiber carbohydrates (NFC), on the intake of total digestible nutrients (TDN), on the microbial protein synthesis, on the serum urea nitrogen (SUN) and ruminal ammonia concentration and on the urinary nitrogenous compounds excretion. The design was in 4x4 square lattice, with four animals, four periods and four treatments (increasing levels of peletized cottonseed hulls: 0, 10, 20 and 30% in dry matter basis in substitution of elephantgrass silage as roughage), being the total diet constituted of 60% roughage. It was verified that the cottonseed hulls levels increased linearly the daily intake of all nutrients, in kg and in % of the live weight. The variance analyses didn't evidence influence of the treatments on ruminal pH and ruminal ammonia xiiiconcentrations, on total and partials nutrients digestibilities and consequently there wasn’t effect on TDN of the diets, which was, in average, 59.53%. The calculated TDN of cottonseed hulls was 55.52%. The SUN concentration and urinary urea excretion (in mg/kgLW) decreased while the urinary purine derivatives (PD) excretion increased linearly with the cottonseed hulls inclusion on the diets. The cottonseed hulls was a good alternative roughage, could be supplied until 30% (DM) of the dairy steer’s diet. In the second experiment, it was aimed to evaluate the effect of the milk production level on intakes and digestibilities of the DM, OM, EE, CP, NDFap, NFC, on the TDN and ruminally degraded protein (RDP) intakes, on the microbial protein synthesis, on the ruminal ammonia concentration and on the urinary nitrogenous compounds excretion. It was evaluated the SUN concentration and milk urea nitrogen (MUN) concentrations in cows with different milk production. The spot urine sampling and urine total collection methodologies were compared to quantify de microbial N flow. 15 Holstein cows, pure and crossbred, were allocated in a completely randomized design, with three treatments in function of the milk production level (average milk production of 5.88, 18.54 and 32.6 kg/day to treatments HIGH, MEDIUM and LOW). The diet was constituted of corn silage ad libitum and one kg of concentrate to each three kg of average milk produced. The intakes of all nutrients, except NDFap, were influenced by milk production. The DM and OM digestibilities and TDN content didn’t differ among the treatments, while the CP and NDFap digestibilities were influenced by the production level being larger and smaller in the treatment HIGH, respectively. The presence of ashes and protein in NDF underestimated the digestibilities of NDF and overestimated the digestibilities of NFC. The MUN and SUN concentrations and the urinary N excretion were highly correlated and superiors in the most productive animals, indicating that the optimum concentration varies with the milk production level. The microbial synthesis didn’t differ among the urinary sampling spot and total collection methodologies, and was smaller in the less productive cows. In the third, 22 heifers with different live weight, were allocated in a completely randomized design with five treatments (average 523, 453, 315, 235 and 118 kg to treatments I, II, III, IV and V, respectively). The diet was constituted of corn silage ad libitum and 1.5 kg/day of xivconcentrate to heifers of the treatments I, II, III and IV, and two kg/day of concentrate to heifers of the treatment V. The objectives were similar to those of the second Experiment. When expressed in relation to live weight, the DM intake was negatively correlated with the heifer’s live weight. The DM and OM digestibilities and the TDN content didn’t differ among the treatments, while the CP and NDFap digestibilities were different among the treatments, being higher and smaller in treatment V, respectively. The presence of ashes and protein in NDF underestimated the digestibilities of NDF and overestimated the digestibilities of NFC. The SUN concentration and urinary N excretion (in mg/kgLW) were highly correlated and superiors in the smaller heifers, and varied with the live weigh and with the CP and RDP content of the diet. The microbial synthesis didn’t differ among the urinary spot sampling and total collection methodologies, and was smaller in the smaller heifers. In the forth Experiment, 15 lactating cows with average milk production of 15 kg/day were distributed in randomized blocks design, aiming to evaluate four different total urine collection times (6, 12, 18 and 24 hours) on the daily creatinine excretion. There were not detected differences among the estimation of creatinine excretion, obtained by the times of collection of six, 12 and 18 hours and the observed in 24 hours, soon the excretion in the periods of the day and night was similar. The creatinine excretion by the cows of the Experiment IV was, on average, of 24.07 mg/kgLW. They were also evaluated the creatinine excretion in the others experiments. The cottonseed hulls levels didn't influence the creatinine excretion in the steers of the first Experiment, which was, on average, of 27.99 mg/kgLW. The creatinine excretion by the cows of the second Experiment was not influenced by the milk production, and was, in average, of 24.04 mg/kgLW. In the third Experiment the creatinine excretion (CE, in mg/KgLW) increased linearly with the decrease in the live weight of the heifers, in agreement with the following equation: CE(mg/kgLW) =32.27 – 0.01093*LW (kg).

La presente Tesis Doctoral tiene como objetivo principal el desarrollo y funcionalización de diversos materiales carbonosos para su posterior aplicación como elemento transductor en sensores y biosensores electroquímicos. En este trabajo se ha evaluado el efecto de emplear diferentes materiales carbonosos como elementos transductores en sensores voltamétricos y cronoamperométricos para la cuantificación de ácido ascórbico y ácido úrico en fluidos fisiológicos humanos (e.g., orina, sudor, suero y sangre). Se han empleado materiales carbonosos basados en grafito, grafeno, óxido de grafeno y nanotubos de carbono con estructura de espina de pescado (herringbone), siendo los tres primeros funcionalizados con nanopartículas metálicas (platino y oro), mientras que los nanotubos de carbono herringbone han sido sometidos a una funcionalización electroquímica covalente con ácido 4-aminobenzoico. Dispersiones acuosas de los materiales carbonos han sido empleadas para modificar, mediante la técnica drop-casting, unas redes de microelectrodos interdigitados de oro. Los electrodos preparados basados en grafeno y en nanotubos de carbono han sido empleados en el desarrollo de sensores voltamétricos para la detección de ácido ascórbico y ácido úrico, mostrando resultados prometedores. Por otra parte, los electrodos basados en óxido de grafeno y nanotubos de carbono herringbone, estando ambos materiales funcionalizados, han sido evaluados para cuantificar simultáneamente ácido ascórbico y ácido úrico mediante cronoamperometría. El electrodo basado en nanotubos de carbono proporciona mejores sensibilidades, lo que es indicativo de las excepcionales propiedades que presentan estos materiales. Ambos sensores han sido empleados para el análisis de muestras reales, resaltando nuevamente las extraordinarias propiedades que presenta el sensor basado en nanotubos de carbono ya que permite el análisis de matrices complejas como sangre, suero u orina, mediante la simple dilución de la muestra y haciendo uso de una calibración externa. Finalmente, se ha desarrollado un biosensor basado en grafito decorado con nanopartículas de platino y sobre el cual se ha inmovilizado la enzima glucosa oxidasa para la cuantificación de glucosa en muestras de sudor humano. Este biosensor ha sido preparado mediante la impresión manual de tintas flexibles sobre un sustrato que también presenta una elevada flexibilidad, de modo que puede ser fijado en la piel humana. La sensibilidad y límite de detección alcanzados con el dispositivo desarrollado ha permitido la cuantificación de glucosa en muestras reales de sudor humano.

Orientador: Luis Cuadrado Martin / Resumo: Fundamentação: É crescente o número de trabalhos revelando a associação de hiperuricemia assintomática com hipertensão, síndrome metabólica, doenças cardiovasculares e doença renal crônica. Alguns estudos revelam que o tratamento da hiperuricemia assintomática reduz o número de desfechos renais e cardiovasculares. Tal premissa, no entanto, ainda não foi avaliada em uma subpopulação brasileira. Objetivos: Avaliar a associação entre tratamento com alopurinol e ocorrência de desfechos definitivos em portadores de doença renal crônica com hiperuricemia assintomática. Materiais e métodos: Foram avaliados, de forma retrospectiva, pacientes hiperuricêmicos e portadores de doença renal crônica não dialítica, em tratamento no HC-FMB – UNESP, os quais iniciaram acompanhamento no ambulatório de Insuficiência Renal Crônica ou de Nefrologia Geral do HC-UNESP desde janeiro 2002 a dezembro 2017. Com o intuito de avaliar a associação do uso do alopurinol sobre desfechos definitivos (entrada em terapia renal substitutiva, duplicação da creatinina ou morte). Resultados: Foram avaliados 109 pacientes sendo 53 do sexo feminino, cuja média de idade foi de 68 ± 11 anos. Destes, 95 eram brancos, 13 afrodescendentes e um asiático. Vinte e seis pacientes apresentaram o desfecho estudado no período; entre todos os 36 pacientes que iniciaram o uso de alopurinol no primeiro ano seguimento, ocorreram oito desfechos (22%). A proteinúria em 24 h associou-se aos desfechos avaliados Hazzard Ratio de 1,301 (I... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Rationale: There is increasing number of studies revealing an association of hyperuricemia with hypertension, metabolic syndrome, cardiovascular diseases and chronic kidney disease. Some studies have shown that treatment of asymptomatic hyperuricemia reduces the number of renal and cardiovascular outcomes. This premise, however, has not yet been evaluated in a Brazilian subpopulation. Objectives: To evaluate the association between treatment with allopurinol and the occurrence of definitive outcomes in patients with chronic kidney disease with asymptomatic hyperuricemia. Materials and methods: Hyperuricemic patients with chronic non-dialytic kidney disease under treatment at HC-FMB - UNESP who began follow-up at the Chronic Kidney Insufficiency or General Nephrology outpatient clinic at HC-UNESP, were retrospectively evaluated, from January 2002 to December 2017. In order to evaluate the association of the use of allopurinol on definitive outcomes (renal replacement therapy, creatinine doubling or death). Results: A total of 109 patients were evaluated, of which 53 were females, whose mean age was 68 ± 11 years. Of these, 95 were white, 13 Afro-descendants and one Asian. Twenty-six patients presented the outcome studied in the period; among all 36 patients who started using allopurinol in the first year of follow-up, eight outcomes (22%) occurred. Proteinuria at 24 h was associated with the Hazzard Ratio of 1.301 (95% CI: 1.122 -1.508), p: 0.011. In univariate analysis, phosp... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A doença renal crônica é uma doença mediada pelo sistema imune e caracterizada por fibrose. Camundongos deficientes em TLR2, TLR4, MyD88 e NLRP3 se mostraram protegidos frente ao dano renal e à deposição de colágeno após serem submetidos à obstrução unilateral do ureter (UUO). Além disso, os camundongos protegidos exibiram menor produção de citocinas relacionadas com um perfil imune Th2 e apresentaram menor acúmulo de macrófagos do subtipo M2. Inicialmente, creditamos aos macrófagos M2 o papel de macrófagos formadores de fibrose uma vez que tal subpopulação é encontrada em maior número aos sete dias após a UUO em animais WT, porém, vimos que os personagens centrais no desenvolvimento da fibrose são macrófagos M1, encontrados no início da lesão renal. Também vimos que o ácido úrico é a molécula capaz de induzir a troca de fenótipo de M1 para M2 ao longo da UUO, além de ser capaz de ativar a via do inflamassoma. O ácido úrico solúvel é liberado em um contexto de hipóxia e ativa o complexo do inflamassoma NLRP3 por mecanismos diferentes, mas complementares. / Chronic kidney disease is an immune mediated disease characterized by fibrosis development. The damaged tissue releases molecules such as soluble uric acid resulting from the degradation of extracellular matrix or dead cells, which activate TLR and NLR, leading to the translocation of MyD88 in many cell types. This modulation of the immune system interferes with the activation of different subtypes of macrophages and activity of CD4+ T cells, with the Th1/Th2 paradigm as a possible effector mechanism of fibrosis. TLR2, TLR4, MyD88, and NLRP3 deficient mice are protected against renal damage and collagen deposition after being submitted to unilateral ureteral obstruction (UUO), when compared to wild type animals. Moreover, protected mice exhibited less production of Th2 related cytokines and reduced accumulation of M2 macrophages. Initially, we hypothesized M2 macrophages are responsible for fibrosis formation since this subset is found in greater numbers seven days after UUO in WT mice, however, we observed the central characters on the development of fibrosis are M1 macrophages found in the onset of renal injury. These data were confirmed by the injection of Stat6 KO M1 macrophages into Rag deficient mice previously depleted of macrophages and subjected to UUO, in which we observed higher proteinuria and increased collagen deposition. We also observed that uric acid is able to induce the exchange of phenotype from M1 to M2 along the UUO, besides being able to activate the inflammasome pathway. The soluble uric acid is released in the context of hypoxia and activates the NLRP3 inflammasome complex by different, but complementary mechanisms. Therefore, the renal damage releases soluble uric acid, which signals via innate immune receptors, and the damage brings as a consequence the deposition of proteins in the renal interstitium, culminating in fibrosis.

Made available in DSpace on 2016-08-19T18:16:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao THALITA DE ALBUQUERQUE VERAS.pdf: 1228117 bytes, checksum: ef9a2fea64bd1f59d9de3091281a24f4 (MD5) Previous issue date: 2014-11-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Introduction: The association between hyperuricemia and cardiovascular risk factors, especially the metabolic syndrome and his components, has been widely documented. Despite of don t be a treatment directed to hyperuricemia, has been verified that, the bariatric surgery allowed to reach improvements on the acid uric metabolism. Methodology: It was accomplished an retrospective, observational, coorte and analytic study, through secondary data , women s with diagnosed metabolic syndrome according to the criterions of the National Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel III (NCEP-ATP III), 2001, underwent to Roux-en-Y gastric bypass mixed technique, in the period of january of 2012 to january of 2014. Of 391 medical records only 84 attempted to the selected sample criterions. It was collected the plasmatic acid uric values, the syndrome metabolic components and otters cardiovascular risk factors. Results: It was noticed a high prevalence of young adult woman s (27 to 34 years), 38,1% (32) , mean age to 33,5±10,1 years, with the mean Body Mass Index (BMI) levels to 39,3±4,3 Kg/m², degree II of obesity occurred with more often in 47,6% (40). The mean of triglycerides (TG) (202,1±92,8 mg/dL), diabetes glucose plasma (135,3±42,6 mg/dL), diastolic e systolic blood pressure, low density lipoprotein (LDL-c) (126,3± 30,5 mg/dL), very low density lipoprotein (VLDL-c) (41,2±19,2 mg/dL) all this data demonstrated an increase when the uric acid levels was &#8805; 6 mg/dL, however there was a significant difference only to the variables triglycerides (p=0,0435) , of the hypertensives patients diastolic blood pressure (p=0,0413), and VLDL-c (p=0,0357). The only variable that was positively and significantly correlated (p =0,0026) with the uric acid was the systolic blood pressure, however demonstrated a weak correlation (r=0,3249). And those who presented uric acid level < 6mg/dL and 3, 4 e 5 aggregation of the metabolic syndrome components, the frequency was 100% (43), 77, 8% (21) and 35, 7% (5), respectively, demonstrating reduction of the frequency according with the inclusion of one more syndrome metabolic criteria. And on the cutoff &#8805; 6mg/dL, that define hyperuricemia, occurred the opposite, and on the aggregation 4 and 5 the frequency was 22, 2% (6) and 66, 3% (9), and none of the participant with hyperuricemia on the aggregation 3. Conclusion: Surgery for Gastric Bypass Roux-Y was able to reduce the levels of uric acid and cardiometabolic control, including the metabolic syndrome. / Introdução: A associação entre os níveis de ácido úrico e fatores de risco cardiovascular, especialmente, na síndrome metabólica e com seus componentes tem sido amplamente documentada. Apesar de não ser um tratamento dirigido à hiperuricemia, tem sido verificado que a cirurgia bariátrica permite alcançar uma melhoria no metabolismo do ácido úrico. Objetivo: Verificar o impacto da cirurgia bariátrica na uricemia e nos indicadores de risco cardiovascular, e associação, em mulheres com síndrome metabólica. Metodologia: Foi realizado um estudo retrospectivo, observacional do tipo coorte e analítico com coleta de dados secundários de mulheres com Síndrome Metabólica, diagnosticadas de acordo com os critérios do Programa Nacional de Educação sobre Colesterol, ligado ao III Painel de Tratamento do Adulto (NCEP-ATP III), 2001, submetidas à cirurgia bariátrica pela técnica mista do bypass gástrico em Y de Roux, no período de janeiro de 2012 a janeiro de 2014. De 391 prontuários, apenas 84 atenderam aos critérios de seleção da amostra. Foram coletados valores de ácido úrico plasmático, componentes da síndrome metabólica e outros fatores de risco cardiovascular. Resultados: Notou-se elevada prevalência de mulheres adultas jovens (faixa de 27 a 34 anos), 38,1% (32), média de idade de 33,5±10,1 anos, Índice de Massa Corporal (IMC) com média de 39,3±4,3kg/m² e grau II de obesidade foi o mais frequente, 47,6% (40). Demonstrou-se que as médias de triglicerídeos (202,1±92,8 mg/dL), glicemia das diabéticas (135,3±42,6 mg/dL), pressão arterial sistólica e diastólica, lipoproteína de baixa densidade (LDL-c) (126,3±30,5 mg/dL), e lipoproteínas de muito baixa densidade (VLDL-c) (41,2±19,2 mg/dL) foram mais elevadas quando os níveis de ácido úrico estavam &#8805; 6mg/dL, no entanto, houve diferença significativa apenas para as variáveis triglicerídeos (p=0,0435), pressão arterial diastólica das hipertensas (p=0,0413) e VLDL-c (p=0,0357). E, aquelas que apresentaram níveis de ácido úrico < 6mg/dL e aglomerado 3, 4 e 5 de componentes da SM, a frequência foi de 100% (43), 77,8% (21) e 35,7% (5), respectivamente, mostrando redução da frequência de acordo com a inclusão de mais um critério da síndrome metabólica. No ponto de corte &#8805; 6 mg/dl, que determina a hiperuricemia, ocorreu o inverso, no aglomerado 4 e 5 a frequência foi de 22,2% (6) e 64,3% (9), e nenhuma participante com hiperuricemia no aglomerado 3. Conclusão: A cirurgia do bypass gástrico em Y de Roux foi capaz de reduzir os níveis de ácido úrico e controle cardiometabolico, incluindo a Síndrome Metabólica.