Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Michel Reis Messora / Resumo: Este estudo avaliou, histomorfometricamente, o reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC) criados cirurgicamente em calvárias de ratos e tratados com Plasma Rico em Plaquetas (PRP) derivado do sangue periférico (SP) ou do aspirado de medula óssea (AMO) associado ou não ao enxerto de osso autógeno (OA). 60 ratos foram divididos em 6 Grupos: Grupo C (controle), Grupo OA, Grupo PRP-sp, Grupo PRP-amo, Grupo OA/PRP-sp e Grupo OA/PRP-amo. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido somente com coágulo sangüíneo. No Grupo OA, o defeito foi preenchido com enxerto de OA particulado. Nos grupos PRP-sp e PRP-amo, os defeitos cirúrgicos foram preenchidos com PRP-sp e PRP-amo, respectivamente. Nos grupos OA/PRP-sp e OA/PRP-amo, os defeitos foram preenchidos com enxerto de OA particulado associado ao PRP-sp e ao PRP-amo, respectivamente. Todos os animais foram submetidos à eutanásia aos 30 dias pós-operatórios. A quantidade de osso neoformado foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Esses valores foram transformados em arcoseno para a análise estatística (ANOVA, Tukey, p<0,05). O Grupo C apresentou formação óssea significativamente menor (12,34 ± 2,51%) que os grupos OA (48,94 ± 3,91%), PRP-sp (31,48 ± 14,05%), PRP-amo (35,38 ± 17,19%), OA/PRP-sp (60,27 ± 9,12%) e OA/PRP-amo (44,19 ± 16,49%). A quantidade de formação óssea do Grupo OA/PRP-sp foi significativamente maior que a do Grupo PRP-sp. Dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que todos os tratamentos realizados potencializaram o reparo ósseo em DTC em calvárias de ratos. A associação enxerto de OA/PRP-sp demonstrou uma tendência de apresentar a maior AO / Abstract: This study histomorphometrically evaluated the bone healing of critical-size defects (CSD) surgically created in rat calvaria and treated with Platelet-Rich Plasma (PRP) derived from either the peripheral blood (PB) or bone marrow aspirate (BMA) combined or not with autogenous bone (AB) grafts. 60 rats were divided into 6 groups: Group C (control), Group AB, Group PRP-pb, Group PRP-bma, Group AB/PRP-pb and Group AB/PRP-bma. A 5-mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled with blood clot only. In Group AB, the defect was filled with AB graft. In groups PRP-pb and PRP-bma, the defects were filled with PRP derived from PB and BMA, respectively. In groups AB/PRP-pb and AB/PRP-bma, the defects were filled with AB grafts combined with PRP-pb and PRP-bma, respectively. All animals were euthanized at 30 days post-operatively. Bone Area (BA) was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Percentage data were transformed into arccosine for statistical analysis (ANOVA, Tukey, p<0.05). Group C presented significantly less bone formation (12.34 ± 2.51%) than groups AB (48.94 ± 3.91%), PRP-pb (31.48 ± 14.05%), PRP-bma (35.38 ± 17.19%), AB/PRP-pb (60.27 ± 9.12%) and AB/PRP-bma (44.19 ± 16.49%). Bone formation in Group AB/PRP-pb was significantly greater than in Group PRP-pb. Within the limits of this study, it can be concluded that all treatments promoted bone formation in CSD in rat calvaria. The combination AB/PRP-pb demonstrated a trend to present the largest BA / Mestre

Enxerto ósseo homólogo é utilizado independentemente da compatibilidade HLA entre doador e receptor ou uso de drogas imunossupressoras. Considerando o volume de transplantes ósseos realizados no Brasil e o possível efeito deletério da sensibilização HLA para o transplante de órgãos sólidos, este estudo tem como objetivo avaliar a alorreatividade do enxerto ósseo homólogo fresco-congelado utilizado na reconstrução alveolar com finalidade de reabilitação oral com prótese sobre implantes. Anticorpos anti-HLA e anti-MICA foram monitorados através do teste Labscreen Mixed, nos intervalos 0, 7, 30, 90 e 180 pós transplante ósseo em 15 pacientes (6 homens e 9 mulheres, idade média 58,1, DP=10,1) que estavam em tratamento no Instituto de Odontologia da Pontifícia Universidade Católica do Rio de Janeiro. Caso resultado do teste Mixed fosse positivo (Razão de fundo normatizado, NBG>4,5) o teste Labscreen Single (tecnologia antígeno único por pérola, SABA) era realizado para verificar se os anticorpos anti-HLA eram específicos ao doador. Nenhum paciente relatou transplante prévio, 4 relataram transfusão prévia e todas as mulheres relataram gravidez. Dez pacientes não apresentaram reação positiva no dia 0 sendo considerados não sensibilizados previamente (NSP); destes, 6 pacientes permaneceram sem nenhuma evidência de sensibilização, 2 pacientes apresentaram reação positiva para Classe I e II; 2 para Classe I apenas; e 2 para MICA, sendo considerados sensibilizados pelo enxerto ósseo oral. Dois pacientes apresentaram aumento de Intensidade Média de Fluorescência (&#916;MFI>1000) de anticorpos específicos ao doador para Classe I e Classe II, e 2 somente para Classe II, demonstrando uma reação específica ao doador. Os resultados sugerem uma alorreatividade HLA oscilatória ao enxerto ósseo homólogo em reconstruções alveolares, confirmada pela formação de anticorpos anti-HLA específicos ao doador em 4 pacientes (27%) da amostra. / Bone allografts are used without HLA donor-receptor compatibility or imunosupressor therapy. Taking in consideration the amount of bone graft procedures performed in Brazil and the possible deleterious effect of HLA sensitization in solid organ transplantation, the aim of this study was to evaluate fresh-freeze bone graft alorreactivity used in ridge augmentation surgery before oral rehabilitation with implants supported bridges. Anti-HLA and anti-MICA antibodies were evaluated by Labscreen Mixed test, at 0, 7, 30, 90 e 180 days after bone transplantation in 15 patients (6 men e 9 women, mean age 58,1, SD=10,1) treated at the Dental Institute of the Rio de Janeiro Catholic University. If the mixed test (Normalized Background Ratio, NBG>4,5) was positive, donor specificity was evaluated by Labscreen Single test (Single Antigen Bead Assay technology, SABA). None of patients had previous transplant history, 4 had transfusion history, and all women had pregnancy history. Ten patients did not have positive results at baseline and were considered not sensitized previously; 6 patients of them did not have any sensitization evidence during 6 month follow up, 2 patients had positive reaction for anti-HLA Class I and II; 2 were positive for anti-HLA Class I only; e 2 patients were positive for anti-MICA, and were considered sensitized by oral bone graft. Two patients had increased values of Median Fluorescence Intensity (&#916;MFI>1000) of anti-HLA donor specific antibodies Class I and II, 2 for Class II only, showing a donor specific alorreactivity. The results sugest an oscilatory HLA reactivity, confirmed by the donor specific antibodies formation on 4 patients (27%) of this study.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000428173-0.pdf: 3267525 bytes, checksum: 111e79e4715696d409dab4a83d48e6c0 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / OBJECTIVE: The aim of the present study was to assess histological alterations following the placement of miniplates and screws with different metal compositions. MATERIALS AND METHODS: Eighteen Wistar rats were divided into three groups of six animals. A miniplate and two screws were inserted on the external surface of the right femur of each animal. Six received a titanium plate and screws; six received a titanium plate and stainless steel screws; and six received a plate and screws coated with diamond-like carbon. The screws were five mm in length and inserted until the tips projected through the endosteal side. After 30 days, the miniplates and screws were removed and histological analysis was performed on the 0. 5-cm2 interface between the plate, screw and bone defect. RESULTS: A greater inflammatory process occurred in the group with different metal compositions (titanium and steel). In this same group, there was a greater presence of Howship lacunae, indicating possible osteolysis stemming from the onset of galvanic corrosion between the titanium and stainless steel. CONCLUSIONS: When using materials with different metal compositions in blood, the combination of stainless steel and titanium implants leads to a greater possibility of galvanic corrosion than when using components made from the same materials for fixation purposes. / OBJETIVO: Avaliar as alterações histológicas ósseas superficiais após a inserção de miniplacas e parafusos com diferentes composições metálicas. MATERIAL E METODOS: Dezoito ratos, da linhagem Wistar, foram utilizados. Uma miniplaca e dois parafusos foram inseridos na superfície externa do fêmur direito de cada animal. Todos os parafusos foram de 5,0 mm de comprimento e foram inseridos até as pontas serem projetadas pelo lado endosteal. Os animais foram divididos em três grupos com seis animais cada. Nos primeiros seis animais foram colocados uma placa e dois parafusos de titânio, em outros seis animais foram colocados uma placa de titânio e dois parafusos de aço inoxidável, e nos animais restantes foram colocados placa e parafuso revestido com Diamond-Like Carbon (DLC). Após 30 dias da realização do procedimento cirúrgico, as miniplacas e os parafusos foram retirados e foram feitas avaliações histológicas na interface placa parafuso no defeito ósseo, em uma extensão de 0,5 cm2.RESULTADOS: Na avaliação histológica observou-se um maior processo inflamatório no grupo com diferentes composições metálicas (Grupo titânio-aço)(p=0,204), como também uma maior presença de lacunas de Howship que indicam uma possível osteólise em decorrência de um ínicio de corrosão galvânica entre o titânio e o aço inoxidável (p=0. 002).CONCLUSÕES: Os resultados deste estudo indicam que, quando usamos diferentes materiais com diferentes composições metálicas, os componentes de implantes de aço inoxidável quando em associação com o titânio têm uma maior suscetibilidade à provocar osteólise do que quando se utilizam os mesmos componentes como materiais de fixação.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000422268-0.pdf: 14833302 bytes, checksum: 1b71642b280aa5b7984729b688fbd92e (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This study examines histologically the effect of cement Calcium Phosphate (CFC) reinforced with nylon fibers, polypropylene and carbon used as implant supra-cortical femur of rats. We used 20 male Wistar rats, approximately 300g each. Being prepared plates CFC with fibers, on the size of 2mm thick and 6 mm in diameter, which were tightened in the femur of animals. These were euthanized at 30, 60, 90 and 120 days after the implant. These pieces were removed and subjected to a routine process for preparing slides slides, stained with Hematoxilyn and Eosin. The biocompatibility, the degree material’s resorption anda its ability to osteoconduction were evaluated at the different times. At all diferents times studied, the histological sections showed formation of dense tissue, few cellularized, showing slightly vascularized and discrete mononuclear infiltration. In the area around the implant, there are discrete reabsorption areas, and hyalinization induction of collagen fibers peripheral. The tissue includes the material of the implant. After 120 days, may be observed a formation of osteoid material. The degree of bone reabsorption in the periphery of the implant was less, and without statistical significance. Can be concluded that: The CFC with fiber is biocompatible promotes bone conduction and bone neoformation rounding the cement. CFC with fibers in the form of prefabricated plates is suitable for use as implants and bone substitute, within the parameters of this experiment. / Este estudo analisa histologicamente o efeito do Cimento de Fosfato de Cálcio (CFC) reforçado com fibras de náilon, carbono e polipropileno utilizado como implante supra-cortical em fêmur de ratos. Foram utilizados 20 ratos Wistar, machos, com cerca de 300g cada. Sendo confeccionadas placas de CFC com fibras, no tamanho de 2 mm de espessura por 6 mm de diâmetro, os quais foram aparafusados no fêmur dos animais. E estes foram eutanasiados em 30, 60, 90 e 120 dias após o implante sendo as peças removidas e submetidas ao processo de rotina para confecção de lâminas, coradas com Hematoxilina e Eosina. Foram avaliados nos diferentes tempos a biocompatibilidade, o grau de reabsorção do material e a sua capacidade de osteocondução. Em todos os tempos estudados os cortes histológicos revelam formação de tecido conjuntivo denso, pouco celularizado, apresentando discretamente vascularizado e discreto infiltrado inflamatório mononuclear. No entorno do implante, observam-se discretas áreas de reabsorção, e indução de hialinização das fibras colágenas periféricas. O tecido apresenta inclusão do material do implante. Aos 120 dias chama a atenção a formação de material osteóide, O grau de reabsorção óssea na periferia do implante foi menor não apresentando significância estatística. Podendo-se concluir que: O CFC com fibras é biocompatível, promove a osteocondução e neoformação óssea contornando o cimento. O CFC com fibras, na forma de placas pré-fabricadas é adequado para ser utilizado como implante e substituto ósseo, dentro dos parâmetros deste experimento.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000417616-0.pdf: 2517822 bytes, checksum: d191e13dad2e957e454b49b6e2293ddf (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / O presente estudo teve por objetivo avaliar, por meio da análise histomorfometria, a biomodulação do processo de osteogênese em defeitos confeccionados em calotas craninas de ratos, submetidos a radiação com laser infravermelho (GaAlAs). Foram utilizados 30 ratos machos da linhagem Wistar, com peso entre 250 a 300 gramas, distribuídos aleatoriamente em 2 grupos, grupo teste (GT) e grupo controle (GC). Nos dois grupos temos 3 tempos de observação, 7, 14 e 21 dias, de forma que foram formados 6 subgrupos. Foram confeccionados defeitos de 4mm de diâmetro nos ossos parietais e em cavidades separadas, enxertados os biomateriais, α-TCP e β-TCP/HA. Os grupos testes receberam a terapia laser de baixa potência (LLLT), no espectro infrevermelho (S= 830 nm, 2 J/cm2, 90mW, 27 s), no defeito ósseo de 4mm confeccionado nos ossos parietais do animal. Nos grupos controles, todo o protocolo cirúrgico foi realizado, porém sem a aplicação do laser. O protocolo de radiação foi estabelecido com intervalos de 48horas, iniciando-se imediatamente apos a sutura do procedimento cirúrgico e seguindo-se até o sexto dia de pós-operatório. Os animais foram eutanasiados aos 7, 14 e 21 dias após o procedimento cirúrgico. As lâminas foram estudadas segundo análise histomorfométrica. Para a análise morfométrica determinaram-se as médias das áreas de trabeculado ósseo neoformado em relação a área total do defeito. Os resultados obtidos demonstraram que, segundo a análise morfométrica, há biomodulação óssea positiva evidenciada nos grupos testes, com resulatado significativo para o grupo teste 21 dias β-TCP/HA, apresentando maior área de trabeculado ósseo quando comparado aos grupos controles.Os resultados permitiram sugerir que a terapia laser no protocolo estabelecido atua como biomoduladora óssea, estimulando a osteogênese em áreas enxertadas, podendo ser utilizada como coadjuvante no processo de reparo ósseo.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000419164-0.pdf: 3317808 bytes, checksum: 3055ad6dec4d94e51a963ca86fb7d7e0 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Isotretinoin is a vitamin A derivative that is indicated for dermatologic treatment in patients with severe acne, which shows various side effects on bone metabolism. The aim of the present study was to evaluate the bone repair process in cavities made in the calvarial bone of rats, submitted to oral administration of 7. 5 mg/kg/day isotretinoin, and to determine the serum calcium level in blood samples of the retro-orbital plexus before drug administration and on day of euthanasia. Thirty-three male albino rats (Rattus novergicus albinus, Wistar) were used, which were approximately 60 days old and weighed 250 to 500 g; they were distributed randomly into two groups, control (n=15) and experimental (n=18). A cavity of 2 mm in diameter was made in the calvarial bone of each animal. The animals were killed at 21, 28 and 90 days postoperative. The parietal bone, containing the cavity previously made, was removed and the surgical pieces were submitted to histological processing, followed by H&E staining. Computerized histomorphometric analysis was performed to determine the area of neoformed bone relative to the total defect area at different times of observation. The results expressed as mean percent of neoformed bone in the experimental group were: 25. 37% (± 9. 14) at 21 days, 41. 78% (±7. 00) at 28 days, and 57. 51% (±11. 62) at 90 days. In the control group the results were 17. 10% (±9. 23) at 21 days, 34. 42% (±7. 70) at 28 days, and 48. 49% (±16. 40) at 90 days. Therefore, bone neoformation was greater in the experimental group, but the difference versus control was not statistically significant (p≤0. 05). The serum calcium level showed a statistically significant decrease between the first and second blood sampling in all groups. Based on the results of this study, it was concluded that, despite not being statistically significant, isotretinoin promoted acceleration in the process of bone neoformation in the calvarial bone of rats, along with a reduction in serum calcium levels. / A isotretinoína é um derivado da vitamina A, indicada para o tratamento dermatológico em pacientes com acne severa, que apresenta diversos efeitos colaterais sobre o metabolismo ósseo. O presente estudo teve por objetivo avaliar o processo de reparo ósseo em cavidades confeccionadas em calota craniana de ratos, submetidos à ingestão oral de 7,5 mg/Kg/dia de isotretinoína e avaliar o nível sérico de cálcio através da coleta de sangue do plexo venoso orbital antes de iniciarem o uso da medicação e no dia da eutanásia. Foram utilizados 33 ratos albinos machos (Rattus novergicus albinus, Wistar) com aproximadamente 60 dias e peso corporal médio de 250 a 500 gramas, distribuídos aleatoriamente em dois grupos controle (n=15) e experimental (n=18). Na calota craniana de cada animal foi confeccionada uma cavidade de 2mm de diâmetro. Os animais foram eutanasiados aos 21, 28 e 90 dias de pós-operatório. O osso parietal, contendo a cavidade previamente confeccionada, foi removido e as peças operatórias submetidas a processamento histológico, seguida de coloração pela técnica de HE. Foi realizada análise histomorfométrica computadorizada que permitiu mensurar a proporção entre área do osso neoformado e a área total dos defeitos nos diferentes períodos de observação. Os resultados expressos em porcentagem média de osso neoformado no grupo experimental foram: 25,37% (± 9,14) aos 21 dias, 41,78% (±7,00) aos 28 dias e 57,51% (±11,62) aos 90 dias. No grupo controle os resultados foram de 17,10% (±9,23) aos 21 dias, 34,42% (±7,70) aos 28 dias e 48,49% (±16,40) aos 90 dias. Após análise histológica descritiva observou-se um aumento da neoformação óssea no grupo experimental, mas sem diferença estatisticamente significativa (p≤0,05). O nível sérico de cálcio teve uma diminuição estatisticamente significativa entre a 1° e a 2° coleta de sangue em todos os grupos. Com base nos resultados, foi possível concluir que, mesmo não sendo estatisticamente significativa, a isotretinoína promoveu uma aceleração no processo de neoformação óssea em calota craniana de ratos, bem como redução dos níveis séricos de cálcio.

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2012-07-06T20:55:50Z No. of bitstreams: 1 439672.pdf: 3140896 bytes, checksum: adaf0986dd0bf8d5dad87d65250f73f6 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-06T20:55:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 439672.pdf: 3140896 bytes, checksum: adaf0986dd0bf8d5dad87d65250f73f6 (MD5) / Objetivo: devido ao aumento da utilização de aloenxertos ósseos nas reabilitações orais avaliou-se o efeito do laser não ablativo no processo de incorporação óssea de aloenxertos triturados. As pesquisas publicadas demonstram que aplicação da laserterapia não ablativa (LLLT) apresenta vantagens no reparo tecidual e no processo de neoformação óssea. Materiais e Métodos: foram utilizados quatro coelhos como doadores do tecido ósseo e realizados aloenxertos e autoenxertos triturados na calvária de 20 coelhos divididos em quatro grupos: dois grupos com LLLT (aloenxerto, autoenxerto e coágulo sanguíneo) e outros dois grupos controle (aloenxerto, autoenxerto e coágulo sanguíneo) sem irradiação. Os animais foram mortos com 35 dias (n=10) e 70 dias (n=10). Os parâmetros de energia empregados foram: aplicação de laser de diodo (AsGaAl), comprimento de onda de 830 nm de 4 J/cm2 em quatro pontos da calota craniana perfazendo um total de 16 J/cm2 por aplicação. A dose total do tratamento após as oito aplicações foi de 128 J/cm2. Resultados: houve um aumento da deposição de fibras colágenas, da remodelação óssea, vascularização e um menor infiltrado inflamatório nos grupos irradiados nos aloenxertos aos 35 dias quando comparado ao grupo controle alógeno. Aos 70 dias houve uma maior deposição de fibras colágenas e maior preenchimento das lacunas osteocíticas e foi observado diferença estatística significante na remodelação óssea e na vascularização quando comparado ao grupo controle alógeno. Os grupos de autoenxerto com LLLT apresentaram maior preenchimento das lacunas osteocíticas, maior deposição de fibras colágenas e maior remodelação óssea aos 35 e 70 dias. Conclusão: Observou-se através da Microscopia Óptica e de MEV um efeito positivo qualitativo e quantitativo da LLLT, acelerando o processo de osteogênese, incorporação e remodelação de aloenxertos e autoenxertos ósseos triturados. / Objective: As the use of bone allografts in oral rehabilitation has increased, this study evaluated the effect of non-ablative laser on bone apposition when ground bone allografts are used. Studies in the literature show that the application of low-level laser therapy (LLLT) promotes tissue repair and new bone formation. Material and Methods: Four rabbits were used as bone donors, and ground bone allografts and autografts were implanted in the skull of 20 rabbits divided into four groups: two LLLT groups (allograft, autograft and blood clot), and two control groups (allograft, autograft and blood clot) that did not receive LLLT. The animals were killed at 35 (n=10) and 70 (n=10) days. Laser parameters were: laser diode application (GaAlAs), wavelength of 830 nm of 4 J/cm2 at four points in the skullcap at a total of 16 J/cm2 per application. Total treatment dose after eight applications was 128 J/cm2. Results: There was an increase in the apposition of collagen fibers, bone remodeling and vascularization, and there was less inflammatory infiltrate in the LLLT groups that received allografts at 35 days than in the allograft control group. At 70 days there was greater collagen fiber apposition, greater density of osteocytes lacunae, and a statistically significant difference in bone remodeling and vascularization when compared with the allograft control group. In the LLT autograft groups, there was also greater density of osteocytes lacunae, greater apposition of collagen fibers and greater bone remodeling at 35 and 70 days. Conclusion: Evaluation under light microscopy and SEM revealed a positive qualitative and quantitative effect of LLLT, which accelerated osteogenesis and the incorporation and remodeling of ground bone allografts and autografts.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000417612-0.pdf: 13276136 bytes, checksum: fcf6be3ae9697b26aac5dc7599e9eca0 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The purposes of this thesis were: verifying if the quantity of platelets found in PRP influences the healing proccess of bone tissue when added to autogenous bone as graft material; evaluating if the simplified protocols to obtain PRP concentrate a number of platelets enough to accelerate the healing of bone tissue, when PRP is added to autogenous bone tissue as graft material. Throughout the experiment twenty four male white new zealand rabbits (Oryctolagus cuniculus) were used as test subjects, being aquired when sixteen weeks old and weighing approximately six pounds. The surgical wounds were placed in the skull where four bone perforations were made (1- blood cloth (negative control), 2- particuled autogenous bone tissue (positive control), 3- PRP obtained at 160G + particuled autogenous bone tissue, 4- PRP obtained at 560G + particuled autogenous bone tissue); A trephine drill 0. 5 mm wide and 0. 2 mm deep was used to come up with standard bone tissue deffects; the animals were sacrifice after 15, 30 and 45 days after undergoing surgery, establishing three groups with 08 test subjects each and four subgroups in each group.The material collected from each rabbit was submitted to routine lab processing; The microscopical evaluation consisted in histomorfometric analysis (Software Image Pro-Plus 4. 5. 1) from slices (obtained from the most central area of the bone tissue deffect in transversal cuts coloured by hematoxylin), by measuring the proportion of the neoformed bone tissue inside the four surgical cavities and at the three different observation times as well as the histological decription of the slice for each subgroup. The results obtained were submitted to variance analysis by one factor (ANOVA) and afterwards the groups were compared to each other through the multiple comparation test Bonferroni and allow us to conclude that: 1) the use of PRP in association with particuled autogenous bone tissue participated positively in bone healing when compared to control groups particuled autogenous bone tissue and blood cloth only in groups 01; 2) Among the concentration patterns obtained both in the 160G and the 560G protocols, the platelet count had no influence on bone tissue healing in the surgical cavities. / Os objetivos desta tese foram: verificar se a quantidade de plaquetas presente no PRP influencia no processo de reparo do tecido ósseo quando utilizado em adição a osso autógeno como material de enxerto; avaliar se os protocolos simplificados, para obtenção de PRP, concentram plaquetas em número suficiente para acelerar o reparo do tecido ósseo, quando o PRP é utilizado em adição a osso autógeno como material de enxerto. Para a realização do experimento foram utilizados 24 coelhos machos da raça Oryctolagus cuniculus (Brancos da Nova Zelândia). As cobaias foram adquiridas com 16 semanas de vida (aproximadamente 3 kg). As feridas cirúrgicas foram confeccionadas na calvária e correspondem a 04 lojas cirúrgicas (1- coágulo sanguíneo (controle negativo), 2- osso autógeno particulado (controle positivo), 3 - PRP obtido a 160G + osso autógeno particulado, 4 - PRP obtido a 560G + osso autógeno particulado), foi utilizado uma broca trefina de diâmetro 05mm e marcação de 02mm de profundidade, criando defeitos em medidas padronizadas; o sacrifício dos animais ocorreu após 15, 30 e 45 dias da cirurgia, formando-se assim 3 grupos com 08 cobaias cada e 4 subgrupos em cada grupo. O material coletado de cada coelho seguiu para processamento laboratorial de rotina; A avaliação microscópica consistiu em análise histomorfométrica (Software Image Pro-Plus 4. 5. 1) das lâminas (obtidas da área mais central do defeito em cortes transversais e coradas com HE) através da mensuração da proporção de osso neo formado no interior das 04 cavidades nos 03 tempos de observação bem como a descrição histológica de uma lâmina de cada subgrupo.Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância a um fator (ANOVA) e posteriormente os grupos foram comparados pelo teste de comparações múltiplas Bonferrroni e permitem concluir que: 1) o uso de PRP associado a osso autógeno particulado atuou positivamente na cicatrização óssea quando comparado aos grupos controle osso autógeno particulado e coágulo sangüíneo, somente no grupo 01; 2) Dentro das faixas de concentração plaquetária obtidas no protocolo de 160G e 560G, a contagem plaquetária não influenciou no reparo do tecido ósseo das lojas cirúrgicas tratadas com PRP.

INTRODUÇÃO: As reconstruções ósseas craniofaciais utilizam enxertos ósseos rotineiramente. Entretanto, pode haver problemas na disponibilidade ou na cicatrização óssea. A engenharia tecidual visa a solucionar problemas como este, através da produção de órgãos e tecidos pela combinação entre matrizes, células e fatores de crescimento. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi avaliar cranioplastias experimentais, através da combinação entre proteína morfogenética óssea tipo 2 (BMP-2) e diferentes matrizes e carreadores. MÉTODO: Realizamos um estudo experimental prospectivo, comparativo e aberto, dividido em sete grupos: 1 – BT: BMP-2 e fosfato de cálcio (TCP); 2 – BM: BMP-2 e matriz dérmica acelular Matriderm ® (MDM); 3 – BA: BMP-2 e alginato de cálcio (ALG); 4 – TCP; 5 – MDM; 6 – ALG; 7 – Enxerto autógeno ou autoenxerto (AEN). Uma falha de 3 x 5 mm foi criada no osso parietal esquerdo de camundongos machos adultos, com mais de 3 meses. No mesmo tempo cirúrgico, uma das sete reconstruções foi realizada. Após cinco semanas, os animais for submetidos a eutanásia e um bloco ósseo, envolvendo a cranioplastia e uma margem de osso nativo circunjacente, foi retirado e preparado para análise histológica. Utilizamos o teste de Kruskal-Wallis para a análise estatística, com nível de significância de P<0,05. Os critérios histológicos utilizados foram: fusão de corticais; neoformação óssea; neovascularização e formação de medula óssea. RESULTADOS: Foram estudados 38 animais. Em todos os animais, houve permanência do material utilizado para reconstrução. Não houve retração cicatricial nem deiscência em nenhum dos casos. Uma incidência elevada de infecção ocorreu no grupo MDM (57%, P=0,037). Houve diferença estatística na maioria dos critérios avaliados. No critério fusão de corticais, os grupos AEN, TCP e BT obtiveram as melhores pontuações em relação aos demais (P=0,00846). No critério neoformação óssea, os grupos BT, AEN e TCP obtiveram as melhores pontuações (P=0,00835). Já no quesito neovascularização, os grupos melhor pontuados foram BM, BA, TCP e MDM em relação aos demais (P=0,001695). Por fim, no critério formação de medula óssea, o AEN liderou a pontuação, seguido dos grupos BT e TCP (P=0,008317). CONCLUSÕES: O uso de BMP-2 melhorou a regeneração óssea de cranioplastias experimentais, principalmente com a associação de TCP, que foi comparável ao AEN, o padrão-ouro, em alguns critérios histológicos. Ademais, a associação BM aumentou significativamente a neovascularização na área receptora e diminuiu a incidência de infecção em relação à MDM isolada. / INTRODUCTION: Bone craniofacial reconstructions employ bone grafts routinely. Nevertheless, there may be troubles either in availability or healing. Tissue engineering aims to solve such problems, building either organs or tissues through combination among matrices, cells and growth factors. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate experimental cranial vault reconstructions, by combining bone morphogenetic protein type 2 (BMP-2) and different matrices or cell carriers. METHOD: We performed an experimental, open, prospective and comparative study, divided in seven groups: 1 – BT: BMP-2 and calcium phosphate (TCP); 2 – BM: BMP-2 and acellular dermal matrix Matriderm® (MDM); 3 – BA: BMP-2 and calcium alginate (ALG); 4 – TCP; 5 – MDM; 6 – ALG; 7 – Bone autograft (BAG). A bone failure, measuring approximately 3 x 5 mm was created in left parietal bone of adult male mice, aging more than 3 months old. At the same procedure, one of the seven reconstructions was performed. After five weeks, animals were sacrificed and a bone block, including cranial vault reconstruction area and nearby native bone was removed and processed to histological analysis. Statistics was made with Kruskal-Wallis test, and significance was considered when P<0.05. Histological criteria were: cortical fusion; new bone formation; neovascularization; and bone marrow formation. RESULTS: Thirty-eight animals were evaluated. In all of them, materials used to reconstruction remained at the receptor site. There has been neither dehiscence nor wound retraction in any case. A higher incidence of infection has occurred in MDM group (57%, P=0.037). There has been significant difference in most of the studied histological criteria. In cortical fusion, groups BAG, TCP, and BT have got the best scores, comparing to the others (P=0.00846). In new bone formation, groups BT, BAG, and TCP have presented the best scores (P=0.00835). When neovascularization was considered, best groups were BM, BA, TCP, and MDM (P=0.001695). At last, BAG group has been the best in bone marrow formation, followed by groups BT and TCP (P=0.008317). CONCLUSIONS: BMP-2 has increased bone regeneration in experimental skull reconstruction, especially when combined to TCP. Such association was even comparable to BAG, the gold-standard treatment, in some histological criteria. Besides, BM group has increased significantly neovascularization in receptor area and decreased the incidence of infection, when compared to MDM alone.

Dados recentes mostram que o remodelamento ósseo está sujeito ao controle do SNC, com o SNS. Para tanto, avaliamos o (CLO) e a morfologia da (LE) do fêmur de camundongos de 21 dias de idade selvagens (WT) e Knockout (KO) para a2CAR, tratados, para mimetizar o hipertiroidismo (Hiper) ou tratados para indução do hipotiroidismo (Hipo). Os animais KO eutiroideos (Eut) apresentaram uma desorganização da ZP e aumento do número de CHM da LE. Nos animais WT, o Hipo promoveu redução do CLO, desorganização da ZP e diminuição do número de CHM. O Hipo promoveu efeitos contrários na LE dos animais KO em relação aos animais WT, sendo capaz de reverter, parcialmente, a desorganização da ZP dos camundongos KO Eut, além de resultar em maior número de CHM, em relação aos animais WT Hipo. Já o Hiper levou a aumento do número de CH nos animais WT e redução nos animais KO. Os animais KO Hiper apresentaram diminuição de CHM, quando comparados aos animais WT Hiper. Esses achados reforçam as hipóteses de que o SNS regula o CLO via a2CAR e que o HT e SNS interagem para regular o CLO. / Recent data show that bone remodeling is under control of the CNS, with the SNS. Thus, we evaluated the bone growth and the morphology of the femoral EGP of 21- day old female wild-type (WT) and a2CAR-/- mice (KO), treated to mimic hyperthyroidism (Hyper), or treated for hypothyroidism (Hypo). The euthyroid KO mice had a disorganization of PZ and increase in the number of MHC of the EGP. In WT animals, Hypo promoted a significant reduction in the BLG, PZ disorganization and a decreased number of MHC. Hypo promoted opposite effects in EGP of KO compared to WT mice. Hypo was able to partially revert the PZ disorganization observed in euthyroid KO, and resulted in a greater number of MHC compared to WT Hypo. On the other hand, Hyper caused an increase in the number of HC in WT mice and a reduction in KO mice. Furthermore, Hyper KO animals showed a reduction in the number of MHC, when compared to the Hyper WT mice. These findings support the hypothesis that the SNS regulates the BLG via a2CAR and that the interaction between SNS and TH can regulate the BLG.