A hemoterapia veterinária tem evoluído muito nos últimos anos, sempre seguindo os padrões de hemoterapia humana. Ao mesmo tempo em que a transfusão de concentrado de plaquetas tem sido cada vez mais requisitada em medicina veterinária ainda são escassas as pesquisas com alvo no concentrado de plaquetas canino. Este trabalho apresenta uma revisão da literatura sobre os aspectos estruturais e funcionais das plaquetas, indicações do uso de concentrado de plaquetas em cães, métodos de preparo e características desejadas em um concentrado de plaquetas; além de uma revisão sobre metabolismo, lesões plaquetárias de armazenamento e o uso da citometria de fluxo para avaliação de plaquetas. O presente estudo teve como objetivo padronizar técnicas de avaliação do concentrado de plaquetas canino relatando as mudanças observadas durante 5 dias de armazenamento. Para tal, foram avaliados aspectos de morfologia, ativação, função, metabolismo e indicadores de lesão mitocondrial e morte celular em CP canino através de técnicas de agregação plaquetária, bioquímica celular e citometria de fluxo durante o armazenamento. Foram utilizadas 22 bolsas de CP canino, avaliadas nos dias 1, 3 e 5 após a coleta. Todas as bolsas apresentaram-se negativas quanto ao isolamento de micro-organismos. Houve diminuição significativa da concentração de glicose, pCO2, bicarbonato, ATP, pH e swirling; aumento da concentração de lactato e da pO2; poucos sinais de ativação plaquetária; e diminuição do potencial de membrana mitocondrial no final do período estudado. Não foram observadas mudanças nos testes de exposição de fosfatidilserina e caspase durante o período avaliado. As sondas MitoTracker Green e MitoTracker Red podem ser utilizadas na avalição de lesão mitocondrial de plaquetas com resultados fidedignos. Foram padronizadas técnicas que não foram descritas na avaliação de plaquetas caninas, e que poderão ser utilizadas em outros estudos sobre o tema. Com este trabalho, é possível ter dados concretos a respeito das alterações metabólicas ocorridas ao longo do período de armazenamento. Estes dados servem como base para outros estudos in vitro e in vivo relacionados ao uso de concentrado de plaquetas. Espera-se gerar conhecimento e motivar mais pesquisas nas áreas de hematologia e hemoterapia veterinária. / Veterinary hemotherapy has evolved in the last years, following standards of human blood therapy. While the transfusion of platelet concentrate has been increasingly requested in veterinary medicine are insufficient studies on concentrate of canine platelets. This paper presents a review about structural and functional aspects of platelets, indications for the use of platelet concentrates in dogs, preparation methods and characteristics desired in a platelet concentrate; metabolism, platelet storage lesion and the use of flow cytometry to evaluate platelets. This study aimed to standardize canine platelet concentrate techniques reporting observed changes in 5 days of storage. For this purpose, were evaluated morphology, activation, function, metabolism, indicators of mitochondrial damage and cell death through the use of platelet aggregation techniques, biochemistry and cell flow cytometry. We evaluate standard techniques no earlier used in the evaluation of canine platelets, which can be used in other studies on the subject. For this, 22 canine platelet concentrates were evaluated on days 1, 3 and 5 after collection. All samples were negative for contamination. There was observed a significant decrease in glucose concentration, pCO2, bicarbonate, ATP, pH and swirling; enchance lactate and pO2 concentrations; few platelet activation signals; and decreased mitochondrial membrane potential in the end of the study period. There were no changes in phosphatidylserine and caspase exposure tests during the study period. The results reveal the the MitoTracker Green and MitoTracker Red dyes can be used in evaluation of platelets mitochondrial injury with reliable results. With this work, it was possible to have concrete information about the metabolic changes in canine platelet concentrate during the storage period. These data serve as a basis for other in vitro and in vivo studies regarding the use of canine platelet concentrate. The expectation of this research was to generate knowledge and encourage more research in hematology and veterinary hemotherapy.

O maior consumo de concentrados de hemácias está relacionado a pacientes que enfrentam procedimentos cirúrgicos. A solicitação de reserva de concentrados de hemácias para cirurgia em quantidades muito além do necessário sobrecarrega a Agência Transfusional, configura desperdício de recursos humanos, danos ao erário e prejuízo ao paciente, haja vista que muitos hemocomponentes são reservados para cirurgias, mas poucos são utilizados. A dificuldade no transporte e armazenamento dos hemocomponentes em condições adequadas fora da Agência Transfusional é fato que agrava essa situação e aumenta o desperdício, pois muitos hemocomponentes são solicitados, não são utilizados e retornam ao Serviço de Hemoterapia sem condições de serem reintegrados ao estoque. Tendo em vista que o Hospital de Base do Distrito Federal é a unidade hospitalar com o maior quantitativo em solicitação de reservas de concentrados de hemácias, e por ser recomendável que cada Serviço de Hemoterapia desenvolva seu protocolo específico e personalizado, o objetivo desse estudo é criar um manual de reserva de concentrados de hemácias para procedimentos invasivos, com o quantitativo de hemocomponentes a serem reservados para cada tipo de cirurgia, visando promover o uso racional do sangue no referido hospital. Para isso foi realizado um levantamento dos dados de cirurgias realizadas no Hospital de Base do Distrito Federal nos meses de fevereiro a julho de 2015. Em cada cirurgia foi analisado se houve solicitação e utilização de reserva de hemocomponentes. Com os dados obtidos foi calculado o índice de pacientes transfundidos para cada tipo de cirurgia, sendo confeccionado o manual, que consiste em um quadro com a conduta hemoterápica a ser adotada em cada tipo de cirurgia, se nenhuma, ou realização de tipagem e pesquisa de anticorpos irregulares, ou realização de prova de compatibilidade e reserva de concentrado de hemácias. Foi calculada a quantia aproximada de recursos com insumos que seria economizada caso fosse adotada a conduta sugerida no ano estudado. Para que o manual seja efetivamente aplicado tanto no momento de realizar a solicitação da reserva quanto no momento de preparar a reserva, deve haver uma sistemática de implantação do manual no ambiente hospitalar, com orientações quanto ao correto preenchimento do tipo de cirurgia no mapa cirúrgico e na requisição de reserva ao Banco de sangue. É importante a reavaliação periódica e comparação das solicitações de reservas de concentrados de hemácias para cirurgias eletivas com o cenário do ano anterior. O sucesso na implementação deste manual depende da compreensão e colaboração de uma equipe multidisciplinar de cirurgiões, anestesistas e colaboradores da Agência Transfusional. / Optimizing blood ordering and transfusion has been largely discussed because of patient\'s safety and money constraints. The highest use of red blood cells in a hospital is related to surgical procedures. The preoperative blood order in quantities much higher than necessary, overloads the Blood bank, which configures wasted human resources, wasted public resources and can cause injury to the patient. In most hospitals many blood components are reserved for surgeries, but few are used. The difficulty in transporting and storing the blood components in suitable conditions outside the Blood bank aggravates this situation and increases the costs. Many blood components are requested but not used and return to the blood transfusion service without conditions to be reintegrated into the stock. Considering that Hospital de Base of the Federal District Brazil is the one with the highest quantity of preoperative crossmatching orders in our state, the purpose of this study was to create a maximum blood ordering schedule (MBOS) for elective surgeries. MBOS has been established since 1977 and should be based on recommendation that each hospital may develop for its specific needs. This MBOS should recommend the maximum packed red blood cell quantity to be reserved for each type of surgery, aiming to promote the rational use of blood in the hospitals. For that, a survey of the data of surgeries performed at the Hospital de Base was carried out from February to July 2015. For each surgery, we analyzed if there was a request and use of a packed red blood cell. With the data obtained, the index of patients transfused for each type of surgery was calculated, and the manual was elaborated, consisting of a chart with hemotherapy decision to be adopted in each type of surgery. The manual included 3 types of recommendations for blood bank staff: none, type and screen only, or crossmatch units of packed red blood cells. The approximate amount of resources that would be saved if the suggested strategy were adopted in 2015 were also calculated. The idea is to have a systematic implementation of the manual in the hospital considering the moment of ordering blood products and the moment of adopting the strategy proposed at the blood bank. Some improvements are needed such as guidelines with suggestions including the complete and accurate filling of the surgical map (exact type of surgery) and implementation of a better blood ordering system with more information about patients and surgeries. This kind of manual most be reviewed periodically since surgical procedures can change over time with new techniques been included in the therapeutic strategies. The success in implementing this manual depends on the consent and collaboration of a multidisciplinary team including surgeons, anesthesiologists, and blood bank staff.

Introdução: O risco de transmissão de agentes infeciosos por transfusão sangüínea é maior nos países em desenvolvimento. A hemoterapia na América Latina, embora tenha conquistado grandes avanços tecnológicos e políticos nos últimos anos, ainda apresenta diversos problemas que comprometem a qualidade dos resultados dos testes de triagem sorológica de doadores. A confiabilidade dos resultados emitidos pelos laboratórios que realizam testes de triagem sorológica de bancos de sangue pode ser determinada através de programas de avaliação externa, utilizando multipainéis específicos. Objetivos: Objetivou-se produzir multipainéis específicos para programas de avaliação externa em testes de triagem sorológica de bancos de sangue e determinar a qualidade dos resultados obtidos em 21 centros de referência da América Latina. Resultados: A seleção criteriosa da matéria-prima e a caracterização das amostras foram etapas importantes na determinação das características dos soros que constituíram os Multipainéis. Foram analisados os resultados de 5 programas, realizados no período de 1997 a 2000. A média da taxa de resultados falso-negativos (RFN) foi de 0,7% para anti-HIV, 2,89% para HBsAg, 4% para anti-H Bc, 10,7% para anti-HTLVI/II, 1,07% para anti-HCV, 3,22% para doença de Chagas e 6,25% para Sífilis. A média da taxa de resultados falsopositivos (RFP) variou de 0,73% para doença de Chagas a 5,28 % para antiHCV. Os resultados foram analisados sob diversos prismas, o desempenho de cada centro de referência, a concordância nos resultados das amostras, os \"kits\" utilizados e os parâmetros. Conclusão: Um programa sistemático como o aqui apresentado mostrou pontos importantes dentro do processo de triagem sorológica e auxiliou a elucidar algumas causas de erros. Houve uma melhora gradativa na qualidade dos resultados obtidos nos programas, do ano de 1997 para 1999. Quanto maior a proporção de amostras positivas, maior é a chance de laboratórios cometerem erros, como foi observado no multipainel do quinto programa, que teve aumento da taxa de RFN e RFP, evidenciando a existência de falhas no processo. A participação contínua nesses programas pareceu ser importante para o monitoramento das atividades realizadas no processo de triagem sorológica de doadores. / Background: In developing countries, the risk of acquiring infectious disease through blood transfusion is higher than developed countries. Although in the last 10 years, blood safety has improved in Latin America in terms of technology and politics, several problems remained unsolved that compromise the quality of the results obtained by the laboratories that perform infectious diseases screening tests. Externai evaluation program, using specific multipanel, may be an important tool to evaluate a laboratory that perform serological screening tests. Externai quality control program for blood bank serological test had not been previously performed in Latin America. Objectives: To develop the technology to produce panel of sera reactive to blood born infectious diseases and to determine the quality of the results of 21 reference centers of Latin America. Results: The criteria to select the raw material and to characterize the sample were important to determine the overall quality of the pane!. Using the Multipanel, tive Externai Quality Control programs were organized during 1997 to 2000 with 21 reference laboratories in 16 countries in Latin America. The mean rate of the false negative results was 0,7% for ant-HIV test, 2.89% for HBsAg, 4% for ant-HBc, 10.7% for ant-HTLVI/II, 1.07% for ant-HCV, 3.22% for Chagas diseases, and 6.25% for Syphilis. The mean rate of false positive results varied from 0.73% for Chagas diseases to 5.28% to ant-HCV. The results were also analyzed in terms of performance of each reference center and by the manufacture of the kits used. Conclusion: The program could provide clues about sources of common errors and was an important tool to validate the laboratory screening processo The quality of the results improved from the 1 st to the 4th programo The chance of doing errors was higher, when the proportion of positive samples were higher, as observed in the 5th program that registered elevated index of false positive and false negative results. The continuing participation in this kind of program seemed to be important to monitor the activities performed by the blood bank screening laboratory.

A malária transmitida por transfusão sanguínea permanece como uma das infecções mais relevantes para os serviços de hemoterapia. Dados sobre a frequência de malária transfusional mostram valores que variam de menos que 0,2 casos por milhão de unidades de sangue em países não endêmicos a 50 casos ou mais em áreas com transmissão ativa. Embora no Brasil a incidência de malária por transfusão sanguínea não seja conhecida, este evento pode contribuir para a disseminação da doença em casos de falha na triagem clínico-epidemiológica ou na ocorrência de doadores assintomáticos nos bancos de sangue. Doadores que ocasionaram malária transfusional geralmente apresentavam parasitemias muito baixas com estimativa de um a 10 parasitos presentes por unidade de sangue, o que requer metodologias mais sensíveis para o diagnóstico e prevenção. O presente estudo de corte transversal e de abrangência nacional, visou a estimar a prevalência de marcadores específicos para malária em grande número de amostras de doadores de sangue agrupadas em pools, através de diferentes metodologias moleculares e um teste sorológico. Participaram 147 serviços hemoterápicos brasileiros, públicos e/ou privados localizados em áreas endêmicas e não endêmicas para malária e 13.338 doadores de sangue aprovados pelos métodos de triagem locais. As amostras foram agrupadas em pools de 10 totalizando 1299 pools. Esses pools foram processados por quatro técnicas diferentes de PCR em tempo real e uma técnica de nested PCR. Também foi empregado um teste rápido para detecção de anticorpos. Os pools positivos pelas PCRs foram ensaiados individualmente para detectar o(s) doador(es) positivo(s). Foram identificados 43 pools com amplificação para Plasmodium pela PCR em tempo real, sendo 4,72% de pools positivos da Região Amazônica e 3,19 da Extra-Amazônica. A nested PCR conseguiu identificar quatro pools com P. vivax, dois pools contendo P. falciparum e um pool com P. malariae, todos de doadores de Região Extra-Amazônica. Amostras dos pools positivos foram processadas individualmente e a PCR em tempo real mostrou amplificação em 25 doadores, uma positividade de 6,94% em 360 amostras individuais analisadas, sendo apenas uma de doador de Região Amazônica. A nested PCR identificou P. malariae em um doador e P. vivax em outro. O teste rápido revelou presença de anticorpos contra P. vivax em 13 pools de área não endêmica e 3 pools de área endêmica, sendo somente em um pool positivo pela PCR em tempo real. Limitações do estudo foram a descontinuação do teste rápido no Brasil que impediu a análise individual dos pools positivos e a problemas relativos à conservação das amostras de sangue individuais, o que dificultou a identificação de algumas amostras. A técnica de PCR em tempo real apresentou o melhor desempenho e foi capaz de identificar Plasmodium mesmo em amostras agrupadas em pool de 10, diminuindo desta forma o tempo e o custo do processamento. Os resultados deste estudo, que analisou amostras de sangue de doadores de áreas endêmicas e não endêmicas brasileiras, constituindo um painel nacional, revelaram o risco de malária transfusional em nosso país e a necessidade de validação de protocolos sensíveis para detecção de baixas parasitemias. Estes resultados poderão subsidiar as tomadas de decisões das agências reguladoras hemoterápicas, minimizando desta forma a transmissão de malária em bancos de sangue brasileiros / Malaria transmitted by blood transfusion remains one of the most important infections for hemotherapy services. Data on the frequency of transfusion malaria show values ranging from less than 0.2 cases per million units of blood in nonendemic countries to 50 or more cases in areas with active transmission. While in Brazil the incidence of malaria by blood transfusion is unknown, this event may contribute to the spread of the disease in cases of failure in the clinical and epidemiological screening or due to the occurrence of asymptomatic donors in blood banks. Donors that caused transfusion malaria mostly showed very low parasitemia with an estimated rate of 1 to 10 parasites per unit of blood, which requires sensitive methods for the diagnosis and prevention. This cross-sectional study with samples from whole country, aimed to estimate the prevalence of specific markers for malaria in large number of samples from blood donors grouped into pools, using different molecular methods and one serologic test. It was included 147 Brazilian public or private blood banks located in endemic and nonendemic areas for malaria with 13,338 blood donors that have been accepted by the local methods of screening. The samples were grouped into pools of 10 totalizing 1,299 pools that were processed by four different techniques of real time PCR and one nested PCR. It was also used a rapid test for antibody detection. Samples from the positive pools were tested individually by PCR to detect positive donors. Real-time PCR revealed amplification for Plasmodium in 43 pools with samples from Amazon Region (4.72%) and Extra-Amazon Region (3.19%). Nested PCR was able to identify four pools with P. vivax, two pools with P. falciparum and one pool with P. malariae, all related to samples from Extra-Amazon Region. Samples from positive pools were processed individually and real-time PCR revealed amplification in 25 donors, showing a positivity rate of 6.94% in 360 individual samples, with only one donor from Amazon Region. Nested PCR showed amplification in samples from two donors, one harboring P. malariae and one P. vivax. The rapid diagnostic test revealed the presence of antibodies against P. vivax in 13 pools from non-endemic area and in three pools from endemic area. Only one of the PCR positive pools resulted positive in the rapid diagnostic test. Limitations of this study were related to the unavailability of the rapid test in Brazil for processing the individual samples from the positive pools and problems concerning the storage of individual blood samples. Real-time PCR showed the best performance and was able to identify Plasmodium in pools of 10 samples, reducing time and cost of processing. The results of this study, which analyzed blood samples from donors from endemic and non-endemic Brazilian areas revealed the risk of transfusion malaria in our country and the need for sensitive validated protocols for detection of low parasitaemia. These results may support the decision making of blood donor screening criteria by regulatory agencies, in order to reduce malaria transmission in Brazilian blood banks

O maior consumo de concentrados de hemácias está relacionado a pacientes que enfrentam procedimentos cirúrgicos. A solicitação de reserva de concentrados de hemácias para cirurgia em quantidades muito além do necessário sobrecarrega a Agência Transfusional, configura desperdício de recursos humanos, danos ao erário e prejuízo ao paciente, haja vista que muitos hemocomponentes são reservados para cirurgias, mas poucos são utilizados. A dificuldade no transporte e armazenamento dos hemocomponentes em condições adequadas fora da Agência Transfusional é fato que agrava essa situação e aumenta o desperdício, pois muitos hemocomponentes são solicitados, não são utilizados e retornam ao Serviço de Hemoterapia sem condições de serem reintegrados ao estoque. Tendo em vista que o Hospital de Base do Distrito Federal é a unidade hospitalar com o maior quantitativo em solicitação de reservas de concentrados de hemácias, e por ser recomendável que cada Serviço de Hemoterapia desenvolva seu protocolo específico e personalizado, o objetivo desse estudo é criar um manual de reserva de concentrados de hemácias para procedimentos invasivos, com o quantitativo de hemocomponentes a serem reservados para cada tipo de cirurgia, visando promover o uso racional do sangue no referido hospital. Para isso foi realizado um levantamento dos dados de cirurgias realizadas no Hospital de Base do Distrito Federal nos meses de fevereiro a julho de 2015. Em cada cirurgia foi analisado se houve solicitação e utilização de reserva de hemocomponentes. Com os dados obtidos foi calculado o índice de pacientes transfundidos para cada tipo de cirurgia, sendo confeccionado o manual, que consiste em um quadro com a conduta hemoterápica a ser adotada em cada tipo de cirurgia, se nenhuma, ou realização de tipagem e pesquisa de anticorpos irregulares, ou realização de prova de compatibilidade e reserva de concentrado de hemácias. Foi calculada a quantia aproximada de recursos com insumos que seria economizada caso fosse adotada a conduta sugerida no ano estudado. Para que o manual seja efetivamente aplicado tanto no momento de realizar a solicitação da reserva quanto no momento de preparar a reserva, deve haver uma sistemática de implantação do manual no ambiente hospitalar, com orientações quanto ao correto preenchimento do tipo de cirurgia no mapa cirúrgico e na requisição de reserva ao Banco de sangue. É importante a reavaliação periódica e comparação das solicitações de reservas de concentrados de hemácias para cirurgias eletivas com o cenário do ano anterior. O sucesso na implementação deste manual depende da compreensão e colaboração de uma equipe multidisciplinar de cirurgiões, anestesistas e colaboradores da Agência Transfusional. / Optimizing blood ordering and transfusion has been largely discussed because of patient\'s safety and money constraints. The highest use of red blood cells in a hospital is related to surgical procedures. The preoperative blood order in quantities much higher than necessary, overloads the Blood bank, which configures wasted human resources, wasted public resources and can cause injury to the patient. In most hospitals many blood components are reserved for surgeries, but few are used. The difficulty in transporting and storing the blood components in suitable conditions outside the Blood bank aggravates this situation and increases the costs. Many blood components are requested but not used and return to the blood transfusion service without conditions to be reintegrated into the stock. Considering that Hospital de Base of the Federal District Brazil is the one with the highest quantity of preoperative crossmatching orders in our state, the purpose of this study was to create a maximum blood ordering schedule (MBOS) for elective surgeries. MBOS has been established since 1977 and should be based on recommendation that each hospital may develop for its specific needs. This MBOS should recommend the maximum packed red blood cell quantity to be reserved for each type of surgery, aiming to promote the rational use of blood in the hospitals. For that, a survey of the data of surgeries performed at the Hospital de Base was carried out from February to July 2015. For each surgery, we analyzed if there was a request and use of a packed red blood cell. With the data obtained, the index of patients transfused for each type of surgery was calculated, and the manual was elaborated, consisting of a chart with hemotherapy decision to be adopted in each type of surgery. The manual included 3 types of recommendations for blood bank staff: none, type and screen only, or crossmatch units of packed red blood cells. The approximate amount of resources that would be saved if the suggested strategy were adopted in 2015 were also calculated. The idea is to have a systematic implementation of the manual in the hospital considering the moment of ordering blood products and the moment of adopting the strategy proposed at the blood bank. Some improvements are needed such as guidelines with suggestions including the complete and accurate filling of the surgical map (exact type of surgery) and implementation of a better blood ordering system with more information about patients and surgeries. This kind of manual most be reviewed periodically since surgical procedures can change over time with new techniques been included in the therapeutic strategies. The success in implementing this manual depends on the consent and collaboration of a multidisciplinary team including surgeons, anesthesiologists, and blood bank staff.

A malária transmitida por transfusão sanguínea permanece como uma das infecções mais relevantes para os serviços de hemoterapia. Dados sobre a frequência de malária transfusional mostram valores que variam de menos que 0,2 casos por milhão de unidades de sangue em países não endêmicos a 50 casos ou mais em áreas com transmissão ativa. Embora no Brasil a incidência de malária por transfusão sanguínea não seja conhecida, este evento pode contribuir para a disseminação da doença em casos de falha na triagem clínico-epidemiológica ou na ocorrência de doadores assintomáticos nos bancos de sangue. Doadores que ocasionaram malária transfusional geralmente apresentavam parasitemias muito baixas com estimativa de um a 10 parasitos presentes por unidade de sangue, o que requer metodologias mais sensíveis para o diagnóstico e prevenção. O presente estudo de corte transversal e de abrangência nacional, visou a estimar a prevalência de marcadores específicos para malária em grande número de amostras de doadores de sangue agrupadas em pools, através de diferentes metodologias moleculares e um teste sorológico. Participaram 147 serviços hemoterápicos brasileiros, públicos e/ou privados localizados em áreas endêmicas e não endêmicas para malária e 13.338 doadores de sangue aprovados pelos métodos de triagem locais. As amostras foram agrupadas em pools de 10 totalizando 1299 pools. Esses pools foram processados por quatro técnicas diferentes de PCR em tempo real e uma técnica de nested PCR. Também foi empregado um teste rápido para detecção de anticorpos. Os pools positivos pelas PCRs foram ensaiados individualmente para detectar o(s) doador(es) positivo(s). Foram identificados 43 pools com amplificação para Plasmodium pela PCR em tempo real, sendo 4,72% de pools positivos da Região Amazônica e 3,19 da Extra-Amazônica. A nested PCR conseguiu identificar quatro pools com P. vivax, dois pools contendo P. falciparum e um pool com P. malariae, todos de doadores de Região Extra-Amazônica. Amostras dos pools positivos foram processadas individualmente e a PCR em tempo real mostrou amplificação em 25 doadores, uma positividade de 6,94% em 360 amostras individuais analisadas, sendo apenas uma de doador de Região Amazônica. A nested PCR identificou P. malariae em um doador e P. vivax em outro. O teste rápido revelou presença de anticorpos contra P. vivax em 13 pools de área não endêmica e 3 pools de área endêmica, sendo somente em um pool positivo pela PCR em tempo real. Limitações do estudo foram a descontinuação do teste rápido no Brasil que impediu a análise individual dos pools positivos e a problemas relativos à conservação das amostras de sangue individuais, o que dificultou a identificação de algumas amostras. A técnica de PCR em tempo real apresentou o melhor desempenho e foi capaz de identificar Plasmodium mesmo em amostras agrupadas em pool de 10, diminuindo desta forma o tempo e o custo do processamento. Os resultados deste estudo, que analisou amostras de sangue de doadores de áreas endêmicas e não endêmicas brasileiras, constituindo um painel nacional, revelaram o risco de malária transfusional em nosso país e a necessidade de validação de protocolos sensíveis para detecção de baixas parasitemias. Estes resultados poderão subsidiar as tomadas de decisões das agências reguladoras hemoterápicas, minimizando desta forma a transmissão de malária em bancos de sangue brasileiros / Malaria transmitted by blood transfusion remains one of the most important infections for hemotherapy services. Data on the frequency of transfusion malaria show values ranging from less than 0.2 cases per million units of blood in nonendemic countries to 50 or more cases in areas with active transmission. While in Brazil the incidence of malaria by blood transfusion is unknown, this event may contribute to the spread of the disease in cases of failure in the clinical and epidemiological screening or due to the occurrence of asymptomatic donors in blood banks. Donors that caused transfusion malaria mostly showed very low parasitemia with an estimated rate of 1 to 10 parasites per unit of blood, which requires sensitive methods for the diagnosis and prevention. This cross-sectional study with samples from whole country, aimed to estimate the prevalence of specific markers for malaria in large number of samples from blood donors grouped into pools, using different molecular methods and one serologic test. It was included 147 Brazilian public or private blood banks located in endemic and nonendemic areas for malaria with 13,338 blood donors that have been accepted by the local methods of screening. The samples were grouped into pools of 10 totalizing 1,299 pools that were processed by four different techniques of real time PCR and one nested PCR. It was also used a rapid test for antibody detection. Samples from the positive pools were tested individually by PCR to detect positive donors. Real-time PCR revealed amplification for Plasmodium in 43 pools with samples from Amazon Region (4.72%) and Extra-Amazon Region (3.19%). Nested PCR was able to identify four pools with P. vivax, two pools with P. falciparum and one pool with P. malariae, all related to samples from Extra-Amazon Region. Samples from positive pools were processed individually and real-time PCR revealed amplification in 25 donors, showing a positivity rate of 6.94% in 360 individual samples, with only one donor from Amazon Region. Nested PCR showed amplification in samples from two donors, one harboring P. malariae and one P. vivax. The rapid diagnostic test revealed the presence of antibodies against P. vivax in 13 pools from non-endemic area and in three pools from endemic area. Only one of the PCR positive pools resulted positive in the rapid diagnostic test. Limitations of this study were related to the unavailability of the rapid test in Brazil for processing the individual samples from the positive pools and problems concerning the storage of individual blood samples. Real-time PCR showed the best performance and was able to identify Plasmodium in pools of 10 samples, reducing time and cost of processing. The results of this study, which analyzed blood samples from donors from endemic and non-endemic Brazilian areas revealed the risk of transfusion malaria in our country and the need for sensitive validated protocols for detection of low parasitaemia. These results may support the decision making of blood donor screening criteria by regulatory agencies, in order to reduce malaria transmission in Brazilian blood banks

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-12T12:44:48Z No. of bitstreams: 1 dulce-lemos-lopes.pdf: 771261 bytes, checksum: c267c2bc34c9977f6022766515a8dd61 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-12T12:44:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dulce-lemos-lopes.pdf: 771261 bytes, checksum: c267c2bc34c9977f6022766515a8dd61 (MD5) Previous issue date: 2005-03 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Como rege a constituição brasileira, “a saúde é direito de todos e dever do Estado”. No âmbito da política de sangue atualmente vigente no Brasil, é dever do Estado prover acesso universal e de boa qualidade aos serviços de hemoterapia em funcionamento no país. Instaurar, sustentar e expandir a qualidade dos serviços de hemoterapia implica em garantir a segurança das transfusões sanguíneas, o que somente pode ser alcançado através da prevenção da disseminação dos agentes causadores dedoenças infecto-contagiosas. Visando o fornecimento de “sangue com garantia de qualidade em todo o seu processo” – meta mobilizadora nacional para o setor saúde até 2003 – o Ministério da Saúde lançou, através da GerênciaGeral de Sangue e Outros Tecidos e Órgãos da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (GGSTO/ANVISA) a implantação de um sistema de controle e avaliação externa da qualidade. Tal projeto – objeto desta dissertação – teve como objetivo garantir a exatidão dos resultados dos testes sorológicos assegurando a confiabilidade dos resultados obtidos por 130 Serviços de Hemoterapia do Brasil denominados laboratórios participantes do programa de avaliação externa da qualidade. A confiabilidade dos testes realizados por estes laboratórios participantes - testes anti-HIV-1/2; testes anti-HTLV-I/II; testes anti-HBV; testes anti-HCV; testes para detecção do HBsAg; e testes de triagem para Doença de Chagas e Sífilis - foram aferidas através do índice estatístico Kappa (K). Os resultados dos testes obtidos pelos laboratórios participantes foram analisados através índice do Kappa, aos resultados dos testes já conhecidos pelo Laboratório Organizador (LAPPS/Bio-Manguinhos/FIOCRUZ). Os testes de triagem realizados pelos laboratórios participantes foram, então, classificados segundo o grau de concordância, como sofríveis, ruins, regulares, moderados, bons ou excelentes. Além de fornecer informações a respeito da confiabilidade dos Serviços de Hemoterapia no país,é descrita a implantação e operacionalização do programa de controle externo da qualidade do sangue no Brasil, os quais poderão contribuir para a auto-avaliação e, se necessário, re-estruturação destes serviços para melhor servir e proteger a saúde do cidadão brasileiro. / As stated in the Brazilian Constitution “health is the right of all citizens and a State duty”. According to the current blood policy established in Brazil, it is the State´s duty to provide universal access to good quality blood banking services operating in the country. To install, maintain and expand the quality of blood banking services, one must assure the safety of blood transfusions. This, in turn, can only be accomplished through the prevention of the dissemination of pathologens responsible for causing infectious diseases. Seeking the provision of “blood with quality assurance throughout its process” – a national mobilization goal for the health sector until 2003 – the Ministriy of Health has launched, through the General Management for blood and Other Tissues and Organs of the National Agengy of Health Surveillance (GGSTO/ANVISA) the implantation of an external quality control and assurance system. This project had as its goal to assure the reability of the serological test results obtained in 130 blood banking services, participating in the external quality evaluation program in Brazil. The reliability of the tests carried out by these blood banking services – tests anti-HIV-1/2; tests anti-HTLV-I/II; tests anti-HBV; tests anti-HCV; tests for the detection of HBsAg; and screening tests for Chagas disease and Syphilis – were measured by means of a statistical index Kappa (K). The test results obtained by the participating laboratories were compared to the already known test results of the Organizing Laboratory (LAPPS/Bio-Manguinhos/FIOCRUZ) by using Kappa values. The serological tests carried out by the participating laboratories were thus classified according to their degree of proximity to the true test results, as bad, regular, moderate, good or excellent. Besides describing information as to thereliability and quality level of the blood banking services in the country, this dissertation also offers the implementation and operationalization of the external quality evaluation program/system for blood in Brazil. This dissertation also constitutes an essential tool for self-evaluation and, if necessary, re-structuring on the part of such services so that they may better serve and protect the health status of the Brazilian citizen.

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-27T12:04:45Z No. of bitstreams: 1 marcelle-bral-de-mello.pdf: 1087389 bytes, checksum: 74eb4d07ffe50812d0cea3fd71cdf47a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-27T12:04:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marcelle-bral-de-mello.pdf: 1087389 bytes, checksum: 74eb4d07ffe50812d0cea3fd71cdf47a (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Bio-Manguinhos produz, desde a década de 80, Kits para diagnóstico, inclusive para o diagnóstico da doença de Chagas. O kit EIE-Recombinante-Chagas, que utiliza na sua composição as proteínas recombinantes CRA e FRAdo T. cruzi, foi registrado como produto junto à ANVISA no ano de 1999. No período de renovação do registro, o Kit passou por uma avaliação prévia no INCQS, onde não foi possível alcançar condição satisfatória quanto aos níveis de sensibilidade. O presente trabalho teve por objetivo retomar a padronização deste Kitno âmbito do desenvolvimento tecnológico. Para tanto foi estabelecido a padronização de três modelos de protótipos, utilizando variações das construções disponíveis das proteínas recombinantes CRA e FRA, na forma de apresentação como antígeno e como conjugado. Posteriormente, foi avaliado o desempenho de cada protótipo, em três diferentes fases. Na primeira fase, o melhor desempenho foi apresentado pelo protótipo 3, cujos níveis de sensibilidade e especificidade foram respectivamente de 99% e 99,5% (IC 95%). Na segunda fase o nível de sensibilidade do protótipo 3 foi de 95.8% e o de especificidade 100%, mantendo a melhor condição de desempenho em relação aos demais. Na última fase, somente o protótipo 3 foi avaliado em função da indisponibilidade de volume das amostras selecionadas e os níveis de sensibilidade e especificidade encontrados de 100%.O desempenho do protótipo 2 foi insatisfatório nas duas primeiras fases de avaliação.Tendo em vista o bom desempenho alcançado pelo protótipo 3, propomos a continuação deste modelo na elaboração futura de lotes-piloto, de estudos multicêntricos e de validação, em ações conjuntas com o controle e a garantia da qualidade para a elaboração de documentação visando pedido de registro desse produto junto aos órgãos regulatórios. / Bio-Manguinhos produces, since the 80’s, a variety of kits for diagnosis, including the kit for Chagas’ disease diagnostic. The EIE-Recombinant-Chagas’ kit, which has in its constitution the recombinant proteins CRA and FRA from T. cruzi, was registered at ANVISA as a product in 1999. During the renewal of the registration period, the kit was submitted to a previous registration analysis by The National Institute for Quality Control in Health (INCQS), when it did not show satisfactory sensitivity levels. The present work aimed to remake the kit standardization process under the scope of the technological development. In order to do it, we established the standardization of three prototype models, each one using variations of available constructions from CRA and FRA recombinant proteins in the form of presentation as antigen and as conjugate. Afterwards, we evaluated the performanceof each prototype, in three different stages. In the first one, prototype 3 showed the best performance with 99% sensitivity and 99.5% specificity levels (CI 95%). In the second stage, prototype 3 levels sensitivity and specificity were 95.8% and 100% respectively, keeping the best performance condition as compared to the other two prototypes. In the last stage, only prototype 3 was assessed due to the lack of sample volumes. The reported sensitivity and specificity levels forsuch prototype were equal to 100%. The performance of prototype 2 was unsatisfactory in the first two assessment stages. Taking into account the performance achieved by prototype 3, we propose the continuation of this model for future development of pilot lots, multicenter and validation studies, in joint actions with quality assurance and quality control for the arrangement of the documents requested by the National Regulatory Agency for the registration of the product.

Introdução: O risco de transmissão de agentes infeciosos por transfusão sangüínea é maior nos países em desenvolvimento. A hemoterapia na América Latina, embora tenha conquistado grandes avanços tecnológicos e políticos nos últimos anos, ainda apresenta diversos problemas que comprometem a qualidade dos resultados dos testes de triagem sorológica de doadores. A confiabilidade dos resultados emitidos pelos laboratórios que realizam testes de triagem sorológica de bancos de sangue pode ser determinada através de programas de avaliação externa, utilizando multipainéis específicos. Objetivos: Objetivou-se produzir multipainéis específicos para programas de avaliação externa em testes de triagem sorológica de bancos de sangue e determinar a qualidade dos resultados obtidos em 21 centros de referência da América Latina. Resultados: A seleção criteriosa da matéria-prima e a caracterização das amostras foram etapas importantes na determinação das características dos soros que constituíram os Multipainéis. Foram analisados os resultados de 5 programas, realizados no período de 1997 a 2000. A média da taxa de resultados falso-negativos (RFN) foi de 0,7% para anti-HIV, 2,89% para HBsAg, 4% para anti-H Bc, 10,7% para anti-HTLVI/II, 1,07% para anti-HCV, 3,22% para doença de Chagas e 6,25% para Sífilis. A média da taxa de resultados falsopositivos (RFP) variou de 0,73% para doença de Chagas a 5,28 % para antiHCV. Os resultados foram analisados sob diversos prismas, o desempenho de cada centro de referência, a concordância nos resultados das amostras, os \"kits\" utilizados e os parâmetros. Conclusão: Um programa sistemático como o aqui apresentado mostrou pontos importantes dentro do processo de triagem sorológica e auxiliou a elucidar algumas causas de erros. Houve uma melhora gradativa na qualidade dos resultados obtidos nos programas, do ano de 1997 para 1999. Quanto maior a proporção de amostras positivas, maior é a chance de laboratórios cometerem erros, como foi observado no multipainel do quinto programa, que teve aumento da taxa de RFN e RFP, evidenciando a existência de falhas no processo. A participação contínua nesses programas pareceu ser importante para o monitoramento das atividades realizadas no processo de triagem sorológica de doadores. / Background: In developing countries, the risk of acquiring infectious disease through blood transfusion is higher than developed countries. Although in the last 10 years, blood safety has improved in Latin America in terms of technology and politics, several problems remained unsolved that compromise the quality of the results obtained by the laboratories that perform infectious diseases screening tests. Externai evaluation program, using specific multipanel, may be an important tool to evaluate a laboratory that perform serological screening tests. Externai quality control program for blood bank serological test had not been previously performed in Latin America. Objectives: To develop the technology to produce panel of sera reactive to blood born infectious diseases and to determine the quality of the results of 21 reference centers of Latin America. Results: The criteria to select the raw material and to characterize the sample were important to determine the overall quality of the pane!. Using the Multipanel, tive Externai Quality Control programs were organized during 1997 to 2000 with 21 reference laboratories in 16 countries in Latin America. The mean rate of the false negative results was 0,7% for ant-HIV test, 2.89% for HBsAg, 4% for ant-HBc, 10.7% for ant-HTLVI/II, 1.07% for ant-HCV, 3.22% for Chagas diseases, and 6.25% for Syphilis. The mean rate of false positive results varied from 0.73% for Chagas diseases to 5.28% to ant-HCV. The results were also analyzed in terms of performance of each reference center and by the manufacture of the kits used. Conclusion: The program could provide clues about sources of common errors and was an important tool to validate the laboratory screening processo The quality of the results improved from the 1 st to the 4th programo The chance of doing errors was higher, when the proportion of positive samples were higher, as observed in the 5th program that registered elevated index of false positive and false negative results. The continuing participation in this kind of program seemed to be important to monitor the activities performed by the blood bank screening laboratory.

Submitted by Fabiana Gonçalves Pinto (benf@ndc.uff.br) on 2016-10-19T15:39:24Z No. of bitstreams: 1 Sueli Mendes de Oliveira.pdf: 1546259 bytes, checksum: c53d735f2051a40cf1250acd02b6662e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-19T15:39:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sueli Mendes de Oliveira.pdf: 1546259 bytes, checksum: c53d735f2051a40cf1250acd02b6662e (MD5) Previous issue date: 2016 / Mestrado Profissional em Enfermagem Assistencial / Objeto de estudo: as concepções do cliente submetido à hemotransfusão sobre o seu estado de saúde voltado para o autocuidado. Objetivo geral: desenvolver um protocolo assistencial de orientações aos clientes submetidos à hemotransfusão ambulatorial. Objetivos específicos: identificar o perfil dos clientes transfundidos no setor de Transfusão Ambulatorial; conhecer as concepções de saúde do cliente ambulatorial submetido à terapia transfusional; discutir acerca das necessidades de saúde do cliente no processo de autonomia do cuidado. Os referenciais conceituais pautam-se na pedagogia da autonomia de Paulo Freire e na Teoria Geral de Enfermagem do Autocuidado de Dorothea Orem. Método: pesquisa descritiva e exploratória com abordagem qualitativa, desenvolvida de julho a novembro de 2014, no setor de Transfusão Ambulatorial do Hemocentro do Hospital Universitário Antônio Pedro da Universidade Federal Fluminense. Os participantes da pesquisa foram 12 clientes submetidos à hemotransfusão ambulatorial. Os dados foram coletados por entrevista semiestruturada e tratados por análise de conteúdo temática. Resultados e discussão: os dados foram agrupados em três categorias: O contexto de uma vida saudável e as necessidades para se ter saúde; A concepção sobre a doença; e A prática educativa voltada para o autocuidado. O conceito de saúde foi associado a uma vida saudável sem prejuízo das necessidades humanas básicas para manutenção da vida, tais como locomoção, disposição, independência, alimentação, sono, repouso, saneamento básico. Essas necessidades foram afetadas pela anemia, causando cansaço e a necessidade de transfusão de sangue. Determinados entrevistados demonstraram conhecimento da sua doença, gravidade e dificuldades que acarretam em suas vidas, como o sofrimento pela dor e o enfrentamento da possibilidade de morte. A prática educativa voltada para o autocuidado no domicílio foi pouco evidenciada. Informaram satisfação com o setor e bom atendido pela equipe de trabalho. Considerações finais: a prática educativa requer dos profissionais um conhecimento amplo sobre a visão dos clientes, suas condições socioeconômicas e culturais, o que facilitará o relacionamento entre eles e, particularmente, contribuirá para o autocuidado. Desta forma, entende-se que as mudanças são importantes na prática de educação, e os saberes não podem ser depositários de conteúdos; devem estimular os educandos para serem sujeitos na construção e reconstrução dos conhecimentos. Produto: Construção de um protocolo de orientações aos clientes hemotransfundidos no setor de Transfusão Ambulatorial: compartilhar saberes visando o autocuidado / Object of study: the conceptions of patients undergoing blood transfusion about his health related to self-care. General objective: to develop a clinical protocol of guidance to clients undergoing outpatient blood transfusion. Specific objectives: identify the profile of patients in transfused at Ambulatory; know the health conceptions of outpatient patients submitted to transfusion therapy; discuss about the client's health care needs in the autonomy of care process. The conceptual frameworks were based in the pedagogy of autonomy of Paulo Freire and the General Theory of Self-Care Nursing of Dorothea Orem. Methods: descriptive and exploratory research with a qualitative approach, developed from July to November 2014, in the Outpatient Transfusion sector of the Antônio Pedro University Hospital of the Universidade Federal Fluminense. The participants were 12 clients undergoing outpatient blood transfusion. Data were collected by semistructured interviews and processed by content analysis. Results and discussion: Data were grouped into three categories: The context of a healthy life and the needs to be healthy; The conception about the disease; and Educational practice focused on self-care. The concept of health was associated with a healthy life without prejudice to the basic human needs for sustaining life, such as locomotion, disposition, independence, sleep, rest, sanitation. These needs were affected by anemia, causing fatigue and the need for blood transfusion. Some respondents were aware of their disease, severity and difficulties that carry on their lives as suffer by pain and face the possibility of death. The educational practice toward self-care at home was little evident. Reported satisfaction with the Ambulatory and good service by the work team. Final considerations: the educational practice requires of the professionals a broad knowledge about the customer view, their socioeconomic and cultural conditions, which will facilitate the relationship between them and, particularly, contribute to self-care. Thus, it is understood that the changes are important in the practice of education, and the knowledges can not be depositories of contents; They should encourage the students to be subjects in the construction and reconstruction of knowledge. Product: Construction of a protocol guidelines to transfused patients in the Transfusion Ambulatory: sharing knowledge aimed at self-care