Made available in DSpace on 2016-06-02T19:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1771.pdf: 1457129 bytes, checksum: 013319207cf51a783696430206a0ceed (MD5) Previous issue date: 2008-03-26 / Universidade Federal de Sao Carlos / The clavulanic acid (CA) is a powerful inhibitor of β-lactamases, enzymes that clives the β- lactam ring of penicillins and cephalosporins, inactivating these compounds. CA is traditionally produced by Streptomyces clavuligerus in batch and fed-batch cultivations. Considering that the products of the catabolism of easily assimilable carbon source repress the biosynthesis of secondary metabolites, including CA, its production in fed-batch mode is preferable because the control of nutrient level can be performed. In the present work the influence of glycerol and ornithine feeding on the clavulanic acid (CA) production by S. clavuligerus in batch and fed-batch cultivations was studied. Batch and fed-batch cultivations were performed at 800 rpm, 0.5 vvm and pH at 6.8. In batch experiments under different concentrations of ornithine, the maximum concentration of CA was within of a closed range between 0.46 and 0.56 g.L-1. Nevertheless, the maximum value of volumetric productivity in CA (Ppmax=13.7 mg.L-1.h-1) was obtained in the experiment with ornithine at concentration of 0.66 g.L-1, a value that is 40% higher than the Ppmax obtained in run control without ornithine. In fed-batch experiments in 5 L bioreactor, with different ornithine feeding conditions, the maximum concentration of CA varied within the limited range of 1.254 and 1.405 g.L-1. Therefore, under these experimental conditions, it can be concluded that the presence of ornithine increases the Ppmax in CA but not its maximum concentration, contradicting literature. The kinetic model considering non-associated production with CA degradation was fitted to the experimental results of the batch and fed-batch cultivations. The experimental results showed that the rate of production of CA and glycerol consumption, were directly related, condition not predicted by model, besides, its negative effect on the AC production after the feeding indicate a possible inhibition/repression effect of glycerol. With the model, it was possible to simulate conditions that the cultivations should be performed with the intention of obtaining larger production of AC. With respect to the influence of glycerol in fed-batch experiments, in the presence of ornithine at the concentration of 3.7 g.L−1 in feeding medium, the maximum CA concentration of 1.506 g.L-1 was obtained in the run BA7 showing a positive effect of the combination ornithine/glycerol in the biosynthesis of CA. In fed-batch experiments in 10-L bioreactor, with different ornithine feeding conditions, the maximum concentrations of CA were near of 1.6 g.L-1, validating the results obtained in 5-L bioreactor. / O ácido clavulânico (AC) é um potente inibidor de enzimas β-lactamases que clivam o anel β- lactâmico de antibióticos como penicilinas e cefalosporinas, tornando esses compostos inativos. O AC é tradicionalmente produzido por Streptomyces clavuligerus em cultivos operados em batelada (B) e em batelada alimentada (BA). Pelo fato dos produtos do catabolismo de fontes de carbono facilmente assimiláveis acabarem por reprimir as enzimas responsáveis pela biossíntese de metabólitos secundários, entre os quais se inclui o AC, a produção em BA é preferível, uma vez que torna possível controlar os níveis de nutrientes no caldo. No presente trabalho foi estudado a influência da alimentação de glicerol e ornitina na produção de ácido clavulânico (AC) por S. clavuligerus em cultivos em batelada e batelada alimentada operados a 800 rpm, 0,5 vvm e pH 6,8. Nos experimentos em batelada com diferentes concentrações de ornitina, as concentrações máximas de AC obtidas variaram na estreita faixa entre 0,46 e 0,56 g.L-1. Contudo, o valor máximo da produtividade volumétrica em AC (Ppmax=13,7 mg.L-1.h-1) obtida no experimento com concentração de ornitina de 0,66 g.L-1, foi 40% superior que o valor de Ppmax obtido no cultivo padrão sem adição de ornitina. Nos experimentos em batelada alimentada operados em biorreator de 5L, com diferentes concentrações de ornitina na alimentação, a concentração de AC variou entre 1,254 e 1,405 g.L-1. Portanto, sob as condições experimentais utilizadas, pode-se concluir que a presença de ornitina proporciona aumentos na Ppmax em CA, mas não sua produção máxima, contrariando trabalhos publicados recentemente na literatura. Um modelo cinético para produto não associado ao crescimento considerando degradação do AC foi ajustado aos resultados experimentais dos cultivos em batelada e batelada alimentada, a partir do qual foi possível simular condições que se deveria conduzir os cultivos em batelada alimentada com o intuito de se obter maior produção de AC. Com respeito à influência do glicerol na presença de ornitina no meio de alimentação numa concentração de 3,7 g.L−1, a concentração máxima de AC de 1,506 g.L-1 foi obtida no cultivo BA7 mostrando o efeito positivo da combinação ornitina/glicerol na biossíntese de AC. Nos experimentos em BA em biorreator de 10 L, com diferentes alimentações de ornitina, as produções máximas de AC foram próximas, em torno de 1,6 g.L-1, validando os resultados obtidos em escala de 5 L. Como principal conclusão, a presença de ornitina aumentou a produtividade volumétrica máxima em AC (Ppmax), mas não sua produção máxima, contrariando resultados anteriores publicados em literatura.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:56:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1094.pdf: 1192329 bytes, checksum: 6de19a879e61a0e431805f61ab3dfb21 (MD5) Previous issue date: 2005-09-19 / Universidade Federal de Sao Carlos / In the last 10 years the insect cell Drosophila melanogaster Schneider S2 has been increasingly used for studies of proteins recombinants. However, there is a lack of studies that involved parameters related to the use of the insect cell Drosophila melanogaster in bioprocess. The aim of this work was to study the factors physiologies important in the cultures of the insect cells Drosophila melanogaster S2 (S2) and recombinant S2 (rS2), through cultures in Schott flask, serum free medium at 28°C. There were performed experiments with the purpose of monitoring the viability cellular of insect cells by the methods of exclusion of Trypan blue and of fluorescent dyes. Both methods used in the experiments to monitor the viability of the cultures of the cells S2 and rS2 were shown reliable for the identification of the percentage of viable cells. The studies revealed that growth of S2 and rS2 cells was not limited by the total consumption of amino acids and glucose. In the experiments utilizing the rS2 cells to verify the influence of the age of the inoculum and concentration of the inoculum, it was verified that both parameters did not have influence in the growth specific rate. Experiments done in Schott flask of 250 mL with a working of 50 mL, in which were monitored the concentration of dissolved oxygen (DO) in the broths of cultivation of the cells S2 and rS2. The results demonstrated that the cultivation reaches the stationary phase with very low level of dissolved oxygen, whit DO being a limiting factor of the growth of the cells. The specific oxygen consumption rate (QO2) demonstrates an accentuated decrease in the exponential phase of growth, except for stationary phase. The excess of oxygen in the initial phase of the cultivation was harmful to the growth of the cells. However, in the experiments done in Schott flask 100 mL with a working volume of 20 mL, QO2 of the cells rS2, revealed 10 to 15 times smaller than these performed in the Schott flask of 250 mL. The experiments done in Schott flask of 100 mL with different agitations demonstrated that for low agitation the transfer of oxygen should be a limiting factor in the cellular growth. The cellular viability for all of the experiments performed in different agitations stayed between 95 and 99% of viable cells indicating that the cells were in good physiologic state. / Nos últimos 10 anos a célula de inseto Drosophila melanogaster Schneider S2 tem se destacado nos estudos de proteínas recombinantes. Entretanto, encontra-se na literatura pouco estudo dos parâmetros relacionado ao uso da célula de inseto Drosophila melanogaster em bioprocessos. O presente trabalho foram avaliados fatores fisiológicos importantes no do cultivo das células de inseto Drosophila melanogaster S2 (S2) e recombinante S2 (rS2) através de cultivos em frasco Schott e meio livre de soro a 28°C. Realizaram-se experimentos nos quais foi acompanhada a viabilidade celular das células de insetos pelos métodos de exclusão de corante azul de Tripan e de corantes fluorescentes. Ambos os métodos utilizados nos experimentos para acompanhar a viabilidade do cultivo das células S2 e rS2 se mostraram confiáveis para identificação da porcentagem de células viáveis. Os estudos demonstraram que o crescimento das células S2 e rS2 não foram limitados pelo consumo total de aminoácidos e glicose. Nos experimentos utilizando as células rS2 para verificar a influência da idade e concentração do inóculo, verificou-se que ambos os parâmetros não tem influência na velocidade específica de crescimento máxima. Foram realizados experimentos em frasco Schott de 250 mL com volume de trabalho de 50 mL, nos quais foram monitoradas as concentrações de oxigênio dissolvido (OD) nos caldos de cultivo das células S2 e rS2. Os resultados demonstraram que o cultivo atingiu a fase estacionária com nível muito baixo de oxigênio dissolvido. Sendo este um fator limitante do crescimento das células. A velocidade específica de respiração celular (QO2) demonstrou um decréscimo acentuado na fase exponencial de crescimento exceto para fase estacionária. O excesso de oxigênio na fase inicial do cultivo foi prejudicial para o crescimento das células. Entretanto, nos experimentos realizados em frasco Schott de 100 mL com volume de trabalho de 20 mL, QO2 das células rS2 apresentou-se 10 a 15 vezes menor que realizados no frasco Schott de 250 mL. Os experimentos realizados em frasco Schott de 100mL com diferentes agitações demonstraram que para baixa agitação, a transferência de oxigênio deve ser um fator limitante no crescimento celular. A viabilidade celular para todos os experimentos realizados em diferentes agitações se manteve entre 95 e 99% de células viáveis, indicando que as células estavam em bom estado fisiológico.

Submitted by KARLA NATHALY MEZA MARTINEZ null (kmezamartinez@gmail.com) on 2018-03-16T14:39:57Z No. of bitstreams: 1 Tese_Karla_Meza_Martinez.pdf: 857938 bytes, checksum: 9369eaba3dacc8a6a908ecb0c5bf811a (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-03-16T19:09:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mezamartinez_kn_me_jabo.pdf: 857938 bytes, checksum: 9369eaba3dacc8a6a908ecb0c5bf811a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-16T19:09:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mezamartinez_kn_me_jabo.pdf: 857938 bytes, checksum: 9369eaba3dacc8a6a908ecb0c5bf811a (MD5) Previous issue date: 2018-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivou-se com esta pesquisa determinar as respostas de codornas japonesas e a elaboração de modelos matemáticos para determinar o nível ótimo dessas aves à ingestão de valina, isoleucina e leucina com base no modelo fatorial. Foram realizados três ensaios experimentais, utilizando 280 codornas japonesas em fase postura para cada ensaio. Os ensaios foram delineados inteiramente ao acaso, com oito tratamentos e sete repetições compostas por cinco aves. Os tratamentos consistiram de níveis crescentes de cada aminoácido teste. Os níveis propostos de valina variaram de 0,196 a 0,941%, isoleucina de 0,170 a 0,815% e leucina de 0,392 a 1,881% dos aminoácidos teste. Esses níveis foram estabelecidos para compreender todas as exigências (mantença, resposta e estabilidade ou platô de resposta). Para cada aminoácido foi estudado um nível controle com objetivo de confirmar a limitação do respectivo aminoácido teste. O período experimental foi de sete semanas, sendo três de adaptação e as outras quatro para coleta de dados. As variáveis estudadas foram, consumo de ração (g), consumo do aminoácido teste (g/ave/dia), peso médio do ovo (g), massa de ovos (g) e peso das aves (g). As respostas de produção foram ajustadas pelo modelo broken line e a função monomolecular para elaborar o modelo fatorial que fraciona as exigências em mantença e produção de ovos, bem como calcular o nível para otimizar a massa de ovos da população. Além disso foi estimado a exigência ótima econômica de valina pelo Reading Model. O modelo broken line estimou a máxima resposta para massa de ovos de 9,49; 9,34 and 9,54 g/d para Val, Ile e Leu, respectivamente. A eficiência de utilização estimado foram 75, 65 e 55% e os valores de a determinados foram 11, 10 e 221 mg/g de para Val, Ile e Leu, respectivamente. Os valores de b determinados pela função monomolecular foram de 86, 70 e 147 mg/BWkg0,67 por dia para Val, Ile e Leu, respectivamente. A ingestão ótima econômica de valina estimada pelo Reading model foi 167 mg/ave/dia, que atenderá ao 92% da população, gerando uma margem bruta de produção de 0.0153 ave/dia. / The objective of this research was to determine the responses of Japanese quails and the elaboration of mathematical models based a factorial approach to predict the optimum intake using different levels of valine, isoleucine and leucine. Three experimental trials were carried out using 280 Japanese quails during the laying phase. The experimental design was completely randomized, with eight treatments and seven replicates composed of five birds. Treatments consisted of increasing levels of each amino acid test. Valine levels ranged from 0.196 to 0.941%, isoleucine from 0.170 to 0.815% and leucine from 0.392 to 1.881%. these levels were determined in order to analyze the utilization of these amino acids to meet the Japanese quails requirements (maintenance, response and stability or response plateau). For each amino acid trial, a control level was included in order to confirm the limitation of the respective amino acid test. The experimental period was seven weeks, being 3-week adaptation period and the other four data collection to elaborate the factorial model. The variables studied were feed intake (g), test amino acid intake (g/bird/day), egg weight (g), egg mass (g) and bird weight (g). The performance data were adjusted in the broken line and monomolecular models to determine the necessary parameters for the elaboration of the factorial model, as well as to calculate the amino acid level to optimize the egg mass of the population. The broken line model estimated the maximum response for egg output of 9.49; 9.34 and 9.54 g/day for Val, Ile and Leu, respectively. The efficiencies of utilization estimated were 75, 65 and 55% and the values of a determined were 11, 10 and 221 mg/g for Val, Ile and Leu, respectively. The values of b determined by the monomolecular function were 86, 70 and 147 mg/BWkg0.67 per day for Val, Ile and Leu, respectively. The optimal economic intake of valine estimated by Reading model was 167 mg/bird/day, which will meet 92% of the population, resulting in a gross production margin of 0.0153 bird/day. / FAPESP: 2013/25761-4

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1185835 bytes, checksum: 21880aeb84aec3c866dba25f1a9fffe2 (MD5) Previous issue date: 2006-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of this study was to evaluate the effect of two sources of methionine, DL-Methionine (DLM - 99%) and Methionine Hydroxy Analogue Free Acid (MHA-FA - 88%), at three different levels of supplementation in commercial diets on the performance of broiler chickens. Commercial Ross broilers were used, 1.232, from 01 to 47 days of age, with a completely randomized design in a factorial 2 x 3 (two sources methionine x three supplementation levels) arrangement. A negative control treatment without supplementation was also included. All the treatments had eight repetitions of 22 birds per experimental unit. The methionine levels were obtained by the substitution of starch from the experimental diets. The dietary nutritional levels followed the conventional patterns of a Brazilian Integration. The treatments with the respective methionine sources were: T1 - Control Basal diet (without supplementation), T2 - Level 1 (MHA-FA) with 50% of the level added to the commercial diet; T4 - Level 2 (MHA-FA) with 100% and the T6 - Level 3 (MHA-FA) with 150% of the commercial diet supplementation. The three treatments supplemented with DLM, T3, T5 and T7 contained 65% of the amount of MHA-FA used for the treatments 2, 4 and 6, respectively. In the pre- starter phase the total Met + Cis levels were, 0,748; 0,910; 0,868; 1,072; 0,987; 1,234; 1,107 % for treatments 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7, respectively. In the starter phase the total Met + Cis levels were, 0,675; 0,807; 0,773; 0,938; 0,869; 1,070; 0,967% for treatments 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7, respectively. In the growing/finishing phase the levels were of 0,641; 0,733; 0,709; 0,822; 0,775; 0,914; 0,843% for treatments 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7, respectively. Weight gain, feed intake, feed conversion and production factor were determined. Comparing MHA-FA (T2, T4 and T6) and DLM (T3, T5 and T7) within each supplementation level there was not significant differences (P>0,01) among the treatments, except for the period of 01 -10 days where there was significant difference between DLM and MHA for the weight gain at the lowest level of supplementation (T2 vs T3). Birds fed diet without methionine supplementation (T1) had worse weight gain, feed consumption and feed conversion in all phases studied (P<0,01), when compared to the birds fed the other treatments (T2 to T7). There was a trend of (P>0,01) for improvement in the birds performance when comparing the intermediate level (Level 2 - T4 and T5) and the high level of supplementation (Level 3 T6 and T7). Taking into consideration all the variable studied it is concluded that 65 parts of DLM is equivalent 100 parts of MHA-FA. / Objetivou-se neste trabalho avaliar o efeito de duas fontes de metionina, a DL-Metionina (DLM - 99%) e a Metionina Hidroxi Análoga em Ácido Livre (MHA-AL - 88%) e três diferentes níveis de suplementação deste aminoácido em dietas comerciais sobre o desempenho de frangos de corte. Foram utilizados 1.232 pintos de corte machos da linhagem Ross, de 01 a 47 dias de idade, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 x 3 (duas fontes de metionina x três níveis de suplementação) e um tratamento adicional sem suplementação, com oito repetições de 22 aves por unidade experimental. Os tratamentos foram obtidos pela suplementação de metionina em substituição ao amido da dieta. Os níveis nutricionais das dietas testadas seguiram os padrões convencionais de uma empresa integradora. Os tratamentos com as respectivas fontes de metionina foram identificados como: T1 - Dieta Basal (sem suplementação), T2 - Nível 1 (MHA-AL) contendo 50% de suplementação de MHA presentes nas fórmulas comerciais; T4 - Nível 2 (MHA-AL) contendo 100% e o T6 - Nível 3 (MHA-AL) contendo 150% da suplementação. Os três tratamentos suplementados com DLM, T3, T5 e T7, continham uma quantidade equivalente a 65% da quantidade de MHA-AL utilizada para os tratamentos 2, 4 e 6, respectivamente. Os níveis de Met + Cis total para os tratamentos 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7, respectivamente, foram de 0,748; 0,910; 0,868; 1,072; 0,987; 1,234; 1,107% para a fase pré-inicial; 0,675; 0,807; 0,773; 0,938; 0,869; 1,070; 0,967% para a fase inicial e de 0,641; 0,733; 0,709; 0,822; 0,775; 0,914; 0,843% para a fase crescimento/final. Avaliou-se o consumo de ração, o ganho de peso, a conversão alimentar e o fator de produção. Dentro de cada nível de suplementação não houve diferenças significativas (P>0,01) entre os tratamentos contendo 100 partes de MHA-AL (T2, T4 e T6) e 65 partes de DLM (T3, T5 e T7), exceto para o período de 01 a 10 dias de idade, onde houve diferença significativa entre a DLM e MHA-AL para o ganho de peso no menor nível de suplementação (T2 vs T3). As aves alimentadas com dieta sem suplementação de metionina (T1) tiveram menor consumo de ração, ganho de peso e conversão alimentar em todas as fases estudadas (P<0,01), quando comparado às aves alimentadas com os outros tratamentos (T2 a T7). Mesmo não havendo diferenças significativas (P>0,01), houve melhora no desempenho entre o nível intermediário (Nível 2 - T4 e T5) e o superior (Nível 3 -T6 e T7) de suplementação. Assim, com base nos parâmetros desempenho avaliados, conclui-se que 65 partes de DLM são equivalentes a 100 partes de MHA-AL.

Submitted by MIRYELLE FREIRE SARCINELLI null (miryelle@hotmail.com) on 2017-01-18T12:44:47Z No. of bitstreams: 1 tese definitivo.pdf: 1832400 bytes, checksum: 8e634d36cdb0e978879068b2474db610 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-20T17:24:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sarcinelli_mf_dr_jabo.pdf: 1832400 bytes, checksum: 8e634d36cdb0e978879068b2474db610 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T17:24:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sarcinelli_mf_dr_jabo.pdf: 1832400 bytes, checksum: 8e634d36cdb0e978879068b2474db610 (MD5) Previous issue date: 2016-11-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Objetivou-se com esta pesquisa determinar as respostas de codornas japonesas e a elaboração de modelos matemáticos para determinar o nível ótimo dessas aves à ingestão de lisina, metionina+cistina, treonina e triptofano com base no modelo fatorial. Foram realizados quatro ensaios experimentais, utilizando 392 codornas japonesas no pico de postura em cada ensaio. Os ensaios foram delineados inteiramente ao acaso, com sete tratamentos e sete repetições compostas por sete aves. Os tratamentos consistiram de níveis crescentes de cada aminoácido teste. Os níveis propostos de lisina variaram de 0,402 a 1,409%, met+cis de 0,347a 1,155%, treonina de 0,254 a 0,845% e triptofano de 0,089 a 0,296% dos aminoácidos teste. Esses níveis foram estabelecidos para compreender todas as exigências (mantença, resposta e estabilidade ou platô de resposta). Para cada aminoácido foi estudado um nível controle com objetivo de confirmar a limitação do respectivo aminoácido teste. O período experimental foi de sete semanas, sendo três de adaptação e as outras quatro para elaboração do modelo fatorial. Nesse período foram acompanhados o consumo de ração, a produção de ovos, o peso de ovos e o peso corporal. As variáveis estudadas foram, consumo de ração (g), consumo do aminoácido teste (g/ave/dia), peso médio do ovo (g), massa de ovos (g) e peso das aves (g). As respostas de produção foram ajustadas pelo modelo broken line e modelo fatorial para fracionar as exigências em mantença e produção de ovos, bem como calcular o nível para otimizar a massa de ovos da população. Além disso foi estimado as exigências dos aminoácidos pelo Reading Model. O modelo broken line estimou a máxima resposta para massa de ovos de 9,67; 9,31; 9,49 e 10,37 g / d para Lis, Thr, Met + Cys e Trp, respectivamente. Os valores de m determinados pela função monomolecular foram de 156, 64, 176 e 47 mg / BWkg0,75 por dia e os valores de a determinados pela linha tracejada com duas inclinações foram de 21, 17, 15 e 4 mg / g para Lis, Thr, Met + Cys e Trp. A ingestão de aminoácidos, a produção de massa de ovos (EO) e peso corporal (PC) foram utilizadas para ajustar os parâmetros do Reading Model. Com base nos parâmetros foi aplicado o método da equação exata e de simulação considerando, 10.000 aves. A recomendação de ótimo econômico baseada na equação exata foi 308, 231, 189 e 65 mg de Lys, MetCys, Thr e Trp por ave.dia, respectivamente. Aplicando a simulação a recomendação para Lys, MetCys, Thr e Trp foi de 287, 219, 181 e 63 mg por ave.dia, respectivamente. / The objective of this research was to determine the responses to Japanese quails and the elaboration of mathematical models for the determination of the levels of lysine, threonine, tryptophan and methionine + cystine water intake. Four experimental trials were carried out using 392 Japanese quails Posture peak in each test. The trials were designed entirely at random, with seven treatments and seven replicates composed of seven birds. Treatments consisted of increasing levels of each amino acid test. Proposed lysine levels ranged from 0.402 to 1.409%, met + cis from 0.347 to 1.155%, threonine from 0.254 to 0.845% and tryptophan from 0.089 to 0.296% of the test amino acids. These levels were established to understand all requirements (maintenance, response and stability or response plateau). For each amino acid a control level was studied in order to confirm the limitation of the respective amino acid test. The experimental period was seven weeks, three of them being adapted and the other four for elaboration of the factorial model. In this period, the consumption of feed, egg production, egg weight and body weight were monitored. The variables studied were feed intake (g), test amino acid consumption (g / bird / day), mean egg weight (g), egg mass (g) and bird weight (g). The production responses were adjusted by the broken line model and factorial model to fractionate the maintenance and egg production requirements, as well as to calculate the level to optimize the egg mass of the population. In addition, the amino acid requirements of the Reading Model were estimated. The broken line model estimated the maximum response for egg mass of 9.67; 9.31; 9.49 and 10.37 g / d for Lys, Thr, Met + Cys and Trp, respectively. The values of m determined by the monomolecular function were 156, 64, 176 and 47 mg / Bwkg0.75 per day and the values of a determined by the dashed line with two slopes were 21, 17, 15 and 4 mg / g for Lys , Thr, Met + Cys and Trp. Amino acid intake, egg mass (EO) and body weight (BW) were used to adjust the Reading Model parameters. Based on the parameters, the exact and simulation equation method was applied considering 10,000 birds. The optimum economic recommendation based on the exact equation was 308, 231, 189 and 65 mg Lys, MetCys, Thr and Trp per day, respectively. Applying the simulation the recommendation for Lys, MetCys, Thr and Trp was 287, 219, 181 and 63 mg per day, respectively. / CNPq: 141920/2013-0 / CNPq: 141748/2016-8

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Inibidores de corrosão são substâncias que quando adicionadas a um meio agressivo, diminuem ou previnem a reação de oxidação de um metal com este meio e/ou as reações de redução de espécies presentes no meio. Para a inibição da corrosão de cobre e suas ligas em meios ácidos ou neutros, o inibidor mais empregado é o benzotriazol (BTAH), o qual forma complexos com os íons Cu (I) e Cu (II) na superfície do metal, diminuindo o processo corrosivo. A preocupação com a preservação ambiental e a toxicidade de inibidores de corrosão vem sendo discutida na literatura. Vários estudos têm-se intensificado usando aminoácidos, como proposta para substituição ao BTAH, considerado tóxico. Entre os aminoácidos estudados, dois apresentavam enxofre em suas moléculas (cisteína e metionina) e um outro sem heteroátomo na cadeira lateral (glicina). As concentrações variaram entre 10-2 a 10-4 mol/L e pH da solução entre 7,2 e 8,4. Foram realizadas medidas gravimétricas (ensaios de imersão total) e técnicas eletroquímicas, tais como polarização potenciodinâmica e espectroscopia de impedância eletroquímica. A caracterização morfológica da superfície do substrato após os ensaios de imersão total (743 horas) foi feita por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia de raios X por dispersão de energia (EDS ou EDX) e difração de raios X (DRX). Embora os resultados com aminoácidos tenham sido sempre muito inferiores àqueles obtidos na presença de BTAH, comportamentos semelhantes em função da concentração dos aminoácidos puderam ser observados pelos diagramas de Nyquist. Contudo, com exceção dos resultados verificados para o meio contendo cisteína 10-2 mol/L, todas as eficiências de inibição para os meios contendo aminoácidos, obtidas pelos ensaios de imersão total, foram negativas, mostrando que o tempo de exposição também pode ser relevante para o desempenho destes inibidores. Entre todos os aminoácidos testados, os meios contendo glicina apresentaram os piores desempenhos anticorrosivos, inclusive acelerando o processo de dissolução anódica do cobre. Esse resultado pode estar relacionado à faixa de pH das soluções testadas e à solubilidade dos complexos de cobre formados com os aminoácidos, mostrando que uma faixa ótima de pH também deve ser assegurada para aprimorar a ação destes aminoácidos como inibidores de corrosão / Corrosion inhibitors are substances that, when added to an aggressive medium reduce or prevent the oxidation reaction of a metal with such medium and / or the reduction reactions of specimens present in the medium. For inhibiting the corrosion of copper and copper alloys in acidic or neutral media, the most widely used inhibitor is benzotriazole (BTAH), which forms complexes with the Cu (I) and Cu (II) ions on the metal surface, decreasing the corrosive process. The concern for environmental preservation and the toxicity of corrosion inhibitors have been discussed in the literature. Several studies havebeen intensified using amino acids as a proposal to replace the BTAH, which is considered toxic. Among the amino acids studied, two presented sulfur in their molecules (cysteine and methionine) and another without heteroatom in the side chair (glycine). The concentrations ranged from 10-2 to 10-4mol/L and the pH of the solution variedbetween 7,2 and 8,4. Gravimetric measurements (total immersion tests) and electrochemical techniques, such as potentiodynamic polarization and electrochemical impedance spectroscopy, were performed. The morphological characterization of the substrate surface after the immersion tests (743 hours) was made by means of scanning electron microscopy (SEM), X-rays spectroscopy energy dispersive (EDS or EDX) and X-rays diffraction (XRD ).This effect was probably due to the increased concentration of molecules adsorbed on the metal surface. Although the results with amino acids were always lower than those obtained in the presence of BTAH, similar behaviorsas a function of the amino acid concentration could be observed for the Nyquist diagrams. However, except for the results observed for the cysteine medium containing 10-2mol/L, all the inhibition efficiencies of the media containing amino acids, obtained by total immersion tests, were negative, showing that exposure time may also be relevant to the performance of these inhibitors. Among all amino acids tested, the medium containing glycine showed the worst corrosion performance, accelerating the process of anodic dissolution of copper. This result may be related to the pH range of tested solutions and to the solubility of the copper complexes formed with amino acids, showing that an optimal range of pH must also be provided to enhance the action of these amino acids as corrosion inhibitors

As Stanniocalcinas (STC1 e STC2) são hormônios glicoproteicos originalmente encontrados em peixes teleósteos. Em mamíferos, esses hormônios são expressos em uma variedade de tecidos e estão envolvidos em processos como o transporte de cálcio e fosfato pelos rins e intestino, a carcinogênese, a reprodução e o crescimento. Recentemente, foram encontrados efeitos da STC1 e da STC2 no metabolismo intermediário. Sítios de ligação para a STC1 já foram identificados na membrana mitocondrial e resultados preliminares do nosso laboratório demonstraram que a STC1 possui um efeito inibitório sobre a gliconeogênese renal e tanto a STC1 quanto a STC2 diminuem a incorporação de 14C-glicose em 14CO2 no fígado e no músculo gastrocnêmio, respectivamente, de ratos. No entanto, o papel desses hormônios no metabolismo de aminoácidos permanece desconhecido. No presente trabalho, as ações da STC1 e da STC2 foram avaliadas no fígado e no músculo gastrocnêmio excisados de ratos machos (Rattus norvegicus, n=48 animais) de 300±50g, alimentados ad libitum. Os resultados obtidos mostram que a STC1, no fígado, diminuiu a captação do ácido 2-(metilamino)isobutírico, aumentou a atividade da bomba Na+/K+-ATPase, diminuiu a atividade da enzima malato desidrogenase mitocondrial e estimulou a síntese de glicogênio a partir da alanina. A STC2, no fígado, diminuiu a atividade da enzima malato desidrogenase mitocondrial, estimulou a síntese de proteínas a partir de leucina, e estimulou a síntese de glicogênio a partir de alanina. Já, no músculo, a STC2 estimulou a oxidação de leucina e a incorporação desse aminoácido em proteínas. Esses resultados confirmam a existência de ações das STC1 e STC2 no metabolismo de aminoácidos e sugerem, com exceção da ação da STC2 sobre a enzima malato desidrogenase, um papel anabólico para a STC2 em ambos os tecidos. A mesma afirmação não pode ser feita para a STC1, que apresentou efeitos antagônicos no tecido hepático. Por fim, o trabalho mostrou que as ações da STC1 e da STC2 sobre as vias metabólicas dos aminoácidos ocorrem com a utilização de doses muito baixas desses hormônios. / Stanniocalcins (STC) are glycoprotein hormones that were first discovered in teleostean fishes. In mammals, these hormones are expressed in a variety of tissues. Besides its role on the calcium and phosphate transport by the kidneys and intestine, they are involved in processes such as carcinogenesis, reproduction and growth. Recently it has been shown that STC1 and STC2 affect the control of intermediary metabolism. Binding sites for STC1 have been already identified in the mitochondrial membrane. Preliminary results of our laboratory showed that STC1 has an inhibitory effect on renal gluconeogenesis in rats and both STC1 and STC2 decrease the 14C-glicose incorporation into 14CO2 in the liver and the gastrocnemius muscle, respectively. Despite these evidences that STC1 and STC2 have a role in the control of glucose and lipids metabolism, the function of these hormones in amino acids metabolism remains unknown. In the present study, the STC1 and STC2 actions were evaluated in livers and gastrocnemius muscles excised from male rats (Rattus norvegicus, n=48 animals). The rats weighted 300±50g and were fed ad libitum. The results show that STC1 decreased 2-(metilamine)isobutyric acid uptake, increased Na+/K+-ATPase activity, decreased mitochondrial malate dehydrogenase activity and stimulated glycogen synthesis from alanine. All actions of STC1 were shown in the hepatic tissue and this hormone did not affect any parameter in muscular tissue. In the liver, STC2, decreased the mitochondrial malate dehydrogenase activity, stimulated protein synthesis from leucine and stimulated glycogen synthesis from alanine. In muscle, STC2 stimulated leucine incorporation into CO2 and proteins. These results confirm the regulatory role of STC1 and STC2 on amino acid metabolism in muscle and liver of rats. They suggest, with exception to the STC2 action into the hepatic malate dehydrogenase, an anabolic role for STC2 in both tissues. However this cannot be stated for STC1, which show antagonistic effects in the hepatic tissue. Lastly, another important finding of this study is that STC1 and STC2 actions on amino acid metabolism occur with low hormone concentrations.

Nos seres humanos o triptofano é metabolizado por várias vias, produzindo compostos biologicamente importantes chamados quinureninas, serotonina, ácidos indólicos, compostos ácidos nicotínicos (niacina) e ácido quinolínico. Em condições normais, pouquíssimo triptofano aparece convertido em ácido nicotínico. Sabe-se que o acúmulo de triptofano e seus metabólitos está relacionado ao dano cerebral encontrado tanto na hipertriptofanemia quanto em doenças neurodegenerativas. Nesse trabalho, nós investigamos o efeito da administração de triptofano sobre vários parâmetros comportamentais no teste de campo aberto e de estresse oxidativo e o efeito de creatina e piruvato, sobre os efeitos do triptofano. Quarenta ratos Wistar, machos, de 60 dias, foram aleatoriamente divididos em 4 grupos: salina; triptofano; piruvato + creatina; triptofano + piruvato + creatina. Os animais receberam 3 injeções subcutâneas de triptofano (2 μmol/g peso corporal cada um em intervalos de 3 horas) e/ou piruvato (200 μg/g peso corporal 1 hora antes do triptofano) e/ou creatina (400 μg/g peso corporal 2 vezes por dia durante 5 dias antes do treino); os controles receberam solução salina (NaCl 0.85g%) nos mesmos volumes (30 μL/g peso corporal) das outras substâncias Uma vez que, a redução progressiva da atividade exploratória no campo aberto pode ser interpretada como um indicador de que os animais reconheceram e lembraram do ambiente nossos resultados mostram que o triptofano aumentou a atividade dos animais, sugerindo a redução da habilidade de habituação ao ambiente e um déficit de aprendizagem/memória causada por este aminoácido. O triptofano também induziu aumento de TBA-RS e a redução de sulfidrilas totais no hipocampo, indicando indução de estresse oxidativo. Os efeitos do triptofano no campo aberto e no estresse oxidativo, foram totalmente prevenidos pelo pré-tratamento com creatina mais piruvato, dois potentes antioxidantes, reforçando a hipótese de estresse oxidativo. Nossos achados, estão de acordo ao que pode ser observado em pacientes afetados pela hipertriptofanemia e doenças neurodegenerativas, ou em outras doenças em que ocorra o acúmulo de triptofano. É possível que o estresse oxidativo possa estar enolvido nos mecanismos que levar à lesão cerebral, sugerindo que a suplementação de creatina e piruvato poderia beneficiar os pacientes afetados por esses transtornos. Estudos adicionais serão necessários para compreensão de como o triptofano é causador de dano, se é pelo seu acúmulo ou pelo acúmulo de seus metabólitos. Além disso, também será necessária uma maior investigação para avaliar se a suplementação com creatina e piruvato é possível de ser recomendada à pacientes com hipertriptofanemia ou doenças degenerativas. / In human, tryptophan is metabolised by multiple pathways, producing several compounds, namely kynurenines, serotonin, indolic acids, nicotinic acid (niacin) compounds and quinolinic acid. Under normal conditions, very little tryptophan appears converted to nicotinic acid. It is known that the accumulation of tryptophan and its metabolites is related to brain damage associated with both hypertryptophanemia and neurodegenerative diseases. In this work, we investigated the effect of tryptophan administration on various parameters of behavior in the open field task and oxidative stress, and the effects of creatine and pyruvate, on the effect of tryptophan. Forty, sixty-day-old male Wistar rats, were randomly divided into 4 groups: saline; tryptophan; pyruvate + creatine; pyruvate + creatine. Animals received 3 subcutaneous injections of tryptophan (2 μmol/g body weight each one at 3 h of intervals) and/ or pyruvate (200 μg/g body weight 1 h before tryptophan) and/or 400 μg/g body weight twice a day for 5 days before tryptophan twice a day for 5 days before training; controls received saline solution (NaCl 0.85 g%) at the same volumes (30 μL/g body weight) than the other substances Since the progressive reduction of exploratory activity in open field ca be interpreted as an indicator that animals recognize and remember the environment ours results showed that tryptophan increased the activity of the animals, suggesting a reduction in the ability of habituation to the environment and a deficit in learning/memory caused by this amino acid. Tryptophan induced increase of TBA-RS and total sulfhydryls in the hippocampus, indicating induction of oxidative stress. The effects of tryptophan in the open field, and in oxidative stress were fully prevented by the combination of creatine plus pyruvate, two powerful antioxidants, reinforcing the idea of oxidative stress. In case these findings also occur in humans affected by hypertryptophanemia or other neurodegenerative disease in which tryptophan accumulates, it is feasible that oxidative stress may be involved in the mechanisms leading to the brain injury, suggesting that creatine and pyruvate supplementation could benefit patients affected by these disorders. Additional studies are needed to understand how tryptophan is causing damage if it is by is accumulation or accumulation of metabolites. In addition, further research is needed to assess whether supplementation with creatine and pyruvate can be recommended to patients with degenerative diseases or hipertriptophanemia.

Os líquidos iônicos, por geralmente apresentar, em sua estrutura, uma cadeia alquílica apolar e uma parte polar, como o cátion imidazólio, podem ser considerados estruturas anfifílicas, e apresentam semelhanças com os tensoativos. Tais estruturas, devido a este caráter anfifílico, podem interagir com estruturas do tipo Lipossomas ou até mesmo com biomoléculas, como a BSA. Neste trabalho, foram sintetizados três líquidos iônicos inéditos, com rendimentos de 52 a 66%, acoplados a sistemas quirais derivados de aminoácidos naturais e de fácil obtenção, como a L-Cisteína, a L-Serina e a L-Treonina. Estes foram caracterizados tanto do ponto de vista estrutural, quanto por suas propriedades fotofísicas. Como procedimento metodológico utilizou-se de ciclocondensação de aminoácidos, esterificação de Steglich e alquilação para inserção de cadeia carbônica ao anel metil-imidazol. Para investigação e confirmação dessas estruturas utilizou-se de estudos de Ressonância Magnética de 1H e de 13C, Infravermelho, além das espectroscopias de absorção na região do UV-Vis e de emissão de fluorescência. Por fim, estes novos líquidos iônicos foram testados com lipossomas e BSA, cujos resultados mostraram boa interação com essas biomoléculas. / Ionic liquids can be considered as amphiphilic structures and have similarities with the surfactants, once they generally have an apolar alkyl chain and a polar moiety, such as the imidazolium cation. Such structures, due to this amphiphilic character, may interact with liposome structures or even with biomolecules, such as BSA. In this work, three new ionic liquids containing chiral systems derived from naturally occurring amino acids, such as L-Cysteine, L-Serine and L-Threonine were synthesized, with yields ranging from 52 to 66%. They were fully characterized both from the structural point of view, and by its photophysical properties. As methodological procedures, amino acid cyclocondensation, Steglich esterification and alkylation were used. In order to investigate and confirm these structures, magnetic resonance studies of 1H and 13C, infrared, as well as absorption spectroscopies in the UV-Vis region and fluorescence emission were used. At last, these new ionic liquids were tested with liposomes and BSA, and the results showed good interaction with these biomolecules.