ROCHA, E. E. M. A influência da mata nativa na diversidade e abundância de abelhas polinizadoras de cajueiros (Anacardium occidentale L.) em plantios comerciais. 2013. 70 f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2014-12-10T19:25:43Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_eemrocha.pdf: 2078409 bytes, checksum: 2aae657c70f0df487a8413ea8c1d810e (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-03-18T23:22:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_eemrocha.pdf: 2078409 bytes, checksum: 2aae657c70f0df487a8413ea8c1d810e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-18T23:22:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_eemrocha.pdf: 2078409 bytes, checksum: 2aae657c70f0df487a8413ea8c1d810e (MD5) Previous issue date: 2013 / This study aimed to understand the abundance, diversity and frequency of bees visiting flowers in cashew tree growing areas near and far from commercial native forest. The research was conducted during the blooming season in 2012, from August to November in commercial orchards in the city of Horizonte, Ceará. The methodology consisted in marking five different gradients of distance (40m, 80m, 120m, 160m and 200m) in all 10 areas to perform and record count of floral visitors in 500 panicles during transect conducted at six different times (7h, 9h, 11h, 13h, 15h and 17h), and captured with an insect net in six selected trees, five minutes at each cashew tree in an area of 25m x 50m. We collected 368 flower visitors among social bees (331), solitary bees (21) and other species (16) floral visitors in panicles of cashew. The relationship between insect abundance and time of collection reveals that for all bees collected, the hours of 7h and 9h of the morning were those with the greatest abundance of insects visiting the flowers of cashew mainly of stingless bees. The frequency of flower visitors in 500 cashew flowering panicles in the months, both in areas with native vegetation as no native forest, did not vary according to the period of flowering (p>0.05), just as there was no significant difference (p>0.05) in the mean number of bees compared the different distances during the counts in areas with native forest fragment and native forest without. Social bees were the most abundant group and among them 176 were Apis mellifera and 159 stingless bees. Solitary bees were poorly represented and Centris spp. and Xylocopa (Neoxylocopa) cearensis were seen only in a few areas showing no significant effect (p>0.05) on the site (with or without native forest), area, time and day of collection. We conclude from this study that the presence of native forest fragment near the edge of culture, did not influence the abundance of floral visitors on selected distances, however the existence of remnant native forest near the cashew trees, allowed to remain in social bees growing areas during the flowering period, mainly at times when the flowers of cashew are more receptive to pollination. / Este trabalho teve como objetivo conhecer a abundância, diversidade e frequência das abelhas visitantes florais em áreas de cultivo de cajueiro comercial próximo e longe de mata nativa. A pesquisa foi realizada de agosto a novembro de 2012, em pomares comerciais no município de Horizonte, Ceará. A metodologia constou na marcação de cinco diferentes gradientes de distância (40m, 80m, 120m, 160m e 200m) da mata nativa em 10 áreas de cultivo de cajueiro anão precoce para a contagem e registro dos visitantes florais observados em 500 panículas durante o percurso de transectos realizado em seis horários distintos (7h, 9h, 11h, 13h, 15h e 17h) a cada 15 dias . Além disso, eram realizadas coletas com rede entomológica em seis árvores selecionadas, cinco minutos em cada árvore, em área de 25m x 50m. Foram coletadas 368 visitantes florais entre abelhas sociais (331), abelhas solitárias (21) e outras espécies (16) visitantes florais nas panículas do cajueiro. A relação entre a abundância de insetos e horário da coleta revela que para todas as abelhas coletadas, os horários de 7h e 9h foram os que apresentaram a maior abundância de insetos visitando as flores do cajueiro, principalmente de meliponíneos. A frequência de visitantes florais do cajueiro em 500 panículas nos meses de floração, tanto em áreas com mata nativa quanto sem mata nativa, não variou em função do período de florada (p>0,05), da mesma forma que não houve diferença significativa (p>0,05) no número médio de abelhas quando comparado as diferentes distâncias durante as contagens nas áreas com mata nativa e sem mata nativa. As abelhas sociais foram as mais abundantes e destas, 176 foram Apis mellifera e 159 meliponíneos. Já as abelhas solitárias foram pouco representadas por coleta, tendo Centris spp. e Xylocopa (Neoxylocopa) cearensis sido vistas somente em algumas áreas de estudo, não apresentando efeito significativo (p>0,05) quanto ao local (com ou sem mata nativa), área, horário e dia de coleta. Conclui-se com esse estudo que a presença do fragmento de mata nativa próxima à borda de cultura, não influenciou na abundância de visitantes florais nas distâncias selecionadas, contudo a existência de remanescentes de mata nativa próximo aos cajueirais, possibilitou a permanência das abelhas sociais nas áreas de cultivo durante todo o período de florada, principalmente nos horários em que as flores do cajueiro estão mais receptivas à polinização.

REIS, Ígor Torres. Flora de manutenção para apis mellifera no município de Paramoti-Ceará-Brasil. 2009. 79 f. Dissertação (Mestrado em zootecnia)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2009. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-05-17T17:40:14Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_itreis.pdf: 1562559 bytes, checksum: 66c81fd5862e73e2278b033325e1a579 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-27T19:59:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_itreis.pdf: 1562559 bytes, checksum: 66c81fd5862e73e2278b033325e1a579 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-27T19:59:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_itreis.pdf: 1562559 bytes, checksum: 66c81fd5862e73e2278b033325e1a579 (MD5) Previous issue date: 2009 / The experiment was conducted at the Rosa dos Ventos farm, on the county of Paramoti - Ceará - Brazil. from july to december 2008, with the aim of indenitfying botanic species of the caatinga wich are important as feeding sources for the maintenance of Apis mellifera colonies in the county of Paramoti - CE. Have been choosen, randomly, fifteen colonies of africanized bees (Apis mellifera) from a pool of tirty colonies, keeping among them uniformity relating to the population. Among these fifteen colonies, five were randomly choosen to acquire polen samples, five to acquire honey samples, keeping the remaining five in backup condition. The polen samples, which were weekly collected, were submitted to palinoligic analisys. A botanic survey was conducted in the area, taking into account all of the strata: arboreum, arbustive and aerbaceum. The results showed that 71 botanic species flourishing during the experiment, but only 28 species participated in the polen and nectar diet of the bees. Main vegetal species which contributed to the polen supply during the estiagem season were: jurema-preta (Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir), angico (Anadenanthera Colubrina (Vell.)), mutamba (Guazuma ulmifolia), vassourinha de botão (Spermacoce verticillata), malva branca (Waltheria indica), erva de touro (Tridax procumbens L), algaroba (Prosopis juliflora (Sw.) Dc) e melosa (Angilonia biflora Benth). During the months of july, august and september the species wich had the most participation on the diet of the bees was jurema-preta with 44.42%; 59.94%; 30.38% respectively, during october it was angico 29.97%, jurema-preta with 20.36% and melosa with 20.36%, during november there was predominance of jurema-preta with 38.08% and angico with 29.81%, in december the species wich predominated was mutamba with 34.86%. The other remaining species had their participation, but under excess 12.72% of contribution on the diet of the bees. The jurema-preta had a significant participation from july to december. So been very important as proteic source in the feeding of the bees during the estiagem season. The melissopalinologic analisys showed the following polinic types: jurema preta (Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir.), algaroba (Prosopis juliflora (Sw)), jitirana roxa (Ipomoea fimbriosepala Choisy), vassourinha de botão (Spermacoce verticillata), quebra-panela (Alternamthera brasiliana), melosa (Angilonia biflora Benth) e cajueiro (Anacardium occidentale). It is concluded that the caatinga has species which provide polen and/or nectar been arboreum the main provider strata with the following species: jurema-preta (Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir), angico (Anadenathera colubrina), mutamba (Guazuma ulmifolia) e algaroba (Prosopis juliflora), cajueiro (Anacardium occidentale). The jurema-preta was the species which most contributed with polen for the colony, been recommendable its conservation and expansion of the number of plants in the area of bee development. / O experimento foi realizado na fazenda Rosa dos ventos, no município de Paramoti - Ceará - Brasil, no período de julho a dezembro de 2008, com o objetivo de identificar as espécies botânicas da caatinga que são importantes fontes alimentares para a manutenção das colônias de Apis mellifera no município de Paramoti - CE. Foram escolhidas, ao acaso, quinze colônias de abelhas africanizadas (Apis mellifera) de um apiário composto de trinta colônias, mantendo entre elas uniformidade em relação à população. Das quinze colônias, cinco foram sorteadas para a obtenção de amostras de pólen, cinco para fornecer amostras de mel, ficando as cinco restantes na condição de reserva. As amostras de pólen que foram coletadas semanalmente foram submetidas às análises palinológicas. Foi realizado o levantamento botânico da área, levando-se em conta os estratos: arbóreo, arbustivo e herbáceo. Os resultados mostraram 71 espécies botânicas em florescimento durante o experimento, mas apenas 28 espécies tiveram participação na dieta de pólen e néctar das abelhas. As principais espécies vegetais que contribuíram no fornecimento de pólen, no período de estiagem foram: jurema-preta (Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir), angico (Anadenanthera colubrina (Vell.)), mutamba (Guazuma ulmifolia), vassourinha de botão (Spermacoce verticillata), malva branca (Waltheria indica), erva de touro (Tridax procumbens L.), algaroba (Prosopis juliflora (Sw.)Dc) e melosa (Angilonia biflora Benth). No mês de julho, agosto e setembro a espécie que teve maior participação na dieta das abelhas foi à jurema-preta com 44,42%; 59,94%; 30,38% respectivamente, já em outubro foram o angico com 29,97%,a jurema-preta com 20,36% e a melosa com 20,36%, em novembro teve a predominância de jurema-preta com 38,08% e angico com 29,81%, em dezembro a espécie que predominou foi a mutamba com 34,86%. As demais espécies tiveram suas participações, mas não ultrapassaram 12,72% de contribuição na dieta das abelhas. A jurema-preta teve uma participação significativa de julho a dezembro. Sendo assim uma espécie muito importante como fonte protéica na alimentação das abelhas no período de estiagem. A análise melissopalinológica apresentou os seguintes tipos polínicos: jurema preta (Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir.), algaroba (Prosopis juliflora (Sw)), jitirana roxa(Ipomoea fimbriosepala Choisy), vassourinha de botão (Spermacoce verticillata), quebra-panela (Alternamthera brasiliana), melosa (Angilonia biflora Benth) e cajueiro (Anacardium occidentale).Conclui-se que a caatinga possui espécies que fornecem pólen e/ou néctar sendo o principal estrato fornecedor o arbóreo com as espécies: jurema-preta (Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir), angico (Anadenathera colubrina), mutamba (Guazuma ulmifolia) e algaroba (Prosopis juliflora), cajueiro (Anacardium occidentale).A jurema-preta foi à espécie que mais contribuiu em pólen para as colônias, sendo recomendável a sua conservação e ampliação do número de plantas na área de exploração das abelhas.

Acidentes envolvendo abelhas africanizadas são freqüentemente relatados, particularmente na América do Sul. As picadas de abelhas causam reações localizadas e sistêmicas e os sintomas do envenenamento incluem náuseas, vômitos, hemólise, falência renal e coagulação intravascular disseminada. Durante muito tempo todas as reações tóxicas eram atribuídas à presença de uma fosfolipase A2, mesmo sendo o veneno uma mistura complexa de substâncias. A melitina, o componente mais abundante e tóxico do veneno de abelha, é um peptídeo de 26 aminoácidos com a habilidade de interagir e danificar membranas celulares. A melitina é também capaz de modular muitas proteínas, aumentando a diversidade de atividades biológicas do peptídeo. Até recentemente, acreditava-se que a estrutura tri-dimensional biologicamente ativa do peptídeo, que possui conformação em hélice, era um tetrâmero. Neste trabalho avaliamos a conformação da melitina e seus estados oligoméricos em solução por dinâmica molecular e a interferência da melitina na função plaquetária. Aqui está demonstrado que a melitina possui uma conformação randômica em condições fisiológicas e que sua estrutura tri-dimensional sofre alterações de acordo com as condições ambientais. Ainda, foi demonstrada uma nova atividade biológica do peptídeo melitina. O peptídeo é capaz de induzir a 8 agregação plaquetária de forma dose-dependente e de interagir diretamente com a superfície de plaquetas. A correlação entre a conformação da melitina e suas atividades biológicas é discutida. Os resultados aqui apresentados podem ser valiosos no entendimento do papel da melitina nas coagulopatias induzidas por veneno de abelha. O estudo estrutural mostrado aqui pode ser aplicado para explicar as diferentes atividades do peptídeo. / Accidents involving africanized bees are frequently reported, particularly in South America. Bee stings cause localized and systemic reactions and the symptoms of envenomation include nausea, vomiting, hemolysis, kidney failure and disseminated intravascular coagulation. For a long time, all toxic reactions were ascribe to the presence of a phospholipase A2, despite of being the venom a complex mixture of substances. Melittin, the most abundant and the major toxic component of bee venom, is a 26 amino acid peptide with the ability to interact and disrupt cell membranes. Melittin is also able to modulate many proteins, enhancing the wide range of the peptide biological activities. The biologically active tridimensional structure of the peptide, which has a helical conformation, has been described until now as a tetramer. In this work we evaluated the conformation of melittin and its oligomeric states in solution by molecular dynamics simulations and performed studies of melittin effect on platelet function. Here we demonstrate that melittin has a random conformation under physiological conditions and its tridimensional structure changes under different environmental conditions. Moreover, here we describe a new biological activity of melittin. The peptide is able to induce platelet aggregation in a dose10 dependent manner and can interact directly with the platelet surface. The correlation between melittin conformation and biological activity is discussed. Our results might contribute to elucidate the role of melittin in bee venom induced coagulopathies. The structural data gathered in this work may explain the different activities of the peptide.

Orientador: Osmar Malaspina / Coorientador: Elaine Cristina Mathias da Silva Zacarin / Banca: Maria Aparecia Marin-Morales / Banca: Thaisa Cristina Roat / Banca: Roberta Cornelio Ferreira Nocelli / Banca: Denise de Araújo Alves / Resumo: As abelhas Apis mellifera possuem importância econômica e ecológica, pois são polinizadoras de culturas agrícolas e áreas naturais, além do fato de que os produtos e subprodutos da colônia serem comercializados. Nas últimas décadas, houve um aumento na produção agrícola mundial e consequentemente, uma intensificação da utilização dos inseticidas, usados para combater insetos-praga. Dentre os inseticidas, destacam-se os neonicotinoides, amplamente utilizados, pela sua eficiente, ação sistêmica nas plantas. O tiametoxam que pertence a esta classe de inseticida, atua como agonista nos receptores nicotínicos de acetilcolina no sistema nervoso central dos insetos. No entanto, o tiametoxam pode afetar também insetos não alvos, como as abelhas. Uma vez que as abelhas forrageiras podem coletar pólen e néctar contaminados, e estocar no interior da colônia, tanto as abelhas adultas como larvas, que dependem dos recursos alimentares fornecidos pelas operárias, podem também ser contaminadas. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a toxicidade do tiametoxam durante o desenvolvimento pós-embrionário de A. mellifera, em decorrência da exposição larval a este inseticida, e analisar os efeitos subletais deste inseticida em estágios pós-embrionários, na sobrevivência, na atividade enzimática da acetilcolinesterase (AChE), glutationa-S-transferase (GST), carboxilesterase (CaEs) e fosfatase alcalina (PAL), como também, avaliar os níveis da proteína sinapsina no cérebro. Foram feitos bioensaios de exposição larval aguda ao tiametoxam, por contato, ou ingestão. Após 48h da exposição tópica ao tiametoxam, verificou-se um aumento na mortalidade a partir da dose de 15 ng/μL, além de efeitos sobre a pupação e emergência das abelhas, especialmente na dose de 500 ng/μL. Foram observadas, alterações na sobrevivência de larvas, expostas oralmente a dose subletal de 1,44 ng/μL, e nas pupas previamente expostas a... / Abstract: The honeybee Apis mellifera have the economic and ecological importance, because they are pollinators of agricultural crops and natural areas, apart from the fact that the products and by-products of the colony are marketed. In recent decades, there has been an increase in global agricultural production and consequently a greater use of insecticide used to combat insect pests. Among the insecticides, the neonicotinoids stand out, widely used by its efficient, systemic action in plants. The thiamethoxam insecticides that belongs to this class acts as an agonist at nicotinic acetylcholine receptors in the central nervous system of insects. However, thiamethoxam can also affect non-target insects such as bees. Once the forage bees can collect contaminated pollen and nectar, and store inside the colony, both adult bees and larvae, which depend on food resources provided by workers, may also be contaminated. The objectives of this study were to evaluate the toxicity of thiamethoxam in the post-embryonic development of A. mellifera, as a result of larval exposure to this pesticide, and analyze the sublethal effects of this insecticide in post-embryonic stages, the survival, the enzymatic activity acetylcholinesterase (AChE), glutathione-S-transferase (GST), carboxylesterase (CaEs) and alkaline phosphatase (PAL), as well as to evaluate the levels of the protein synapsin in the brain. Bioassays were made acute larval exposure thiamethoxam, by contact or ingestion. After 48 hours of exposure topical to thiamethoxam, there was an increase in mortality in a dose of 15 ng/μL and also effects on pupation and emergence of bees, especially at a dose of 500 ng/μL. Were observed changes in the survival of larvae exposed orally to sublethal dose of 1.44 ng/μL, and pupae in the pre-exposed to 1.44 and 0.001 ng/uL, with consequent reduction in the percentage emerging honeybees. Sublethal effects were observed by increasing the enzyme activity of AChE in ... / Doutor

Orientador: Carminda da Cruz Landim / Banca: Márcia Maria Gentile Bitondi / Banca: Flávio Henrique Caetano / Banca: Hélio Conte / Banca: Maria Izabel Souza Camargo / Resumo: Nas abelhas eussociais há duas castas femininas, as rainhas que são responsáveis pela produção dos indivíduos que mantêm a população da colônia e fazem sua multiplicação e as operárias que compartilham entre si todas as tarefas de manutenção da colônia e das próprias atividades da rainha. Na espécie estudada, Melipona quadrifasciata anthidioides, uma abelha sem ferrão, as operárias normalmente produzem ovos em seus ovários na fase em que se ocupam do aprovisionamento das células de cria (operárias nutridoras), diferentemente de Apis mellifera em que feromônios da rainha são capazes de inibir a vitelogênese nos ovários das operárias. As diferenças funcionais entre rainhas e operárias em ambas espécies são controladas hormonalmente. O corpo gorduroso (CG) é um tecido constituído basicamente por um único tipo de célula designado trofócito, cuja função se assemelha em vários aspectos à dos hepatócitos. Os trofócitos ao mesmo tempo em que retiram substâncias da hemolinfa e as armazenam ou metabolizam, sintetizam outras que nela descarregam. Entre estas últimas está a vitelogenina, uma proteína precursora do vitelo acumulado pelos ovócitos durante a vitelogênese, como reserva para o futuro desenvolvimento do embrião. Neste trabalho a citoquímica dos trofócitos de rainhas virgens, fisogástricas e de operárias nutridoras foi estudada com microscopia eletrônica de transmissão (MET) e comparadas com a morfologia do desenvolvimento dos ovócitos no ovário com a finalidade de comparar a atividade dos trofócitos com a absorção de substâncias da hemolinfa pelo ovário. Em outra vertente a presença da vitelogenina foi pesquisada no CG e no ovário de ambas as castas, na tentativa de verificar se havia concordância quanto à produção da proteína nos trofócitos e sua presença nos ovários... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Eussocial bees have two female castes, the queens that are responsible for producing individuals that will keep the colony population and workers that share among them the tasks of colony maintenance and of the queen care. In the studied species Melipona quadrifasciata anthidioides, a stingless bee, workers normally produce eggs in their ovaries when they are provisioning the brood cells (nurse workers), differently from Apis mellifera, where pheromones from the queen are able of prevent the vitellogenesis in the workers ovaries. The functional differences between queens and workers are, in both castes controlled by hormones. The fat body (FB) tissue is constituted basically by a single kind of cell designated throphocyte whose function is similar in several aspects to the hepatocytes. The throphocytes at the same time that take substances from the hemolymph and storage or metabolize them also synthesize others that are discharged in the body fluid. Among these is the vitellogenin, a precursor protein of the yolk accumulated by oocytes during the vitellogenesis as a reserve for further development of the embryo. In this work the cytochemistry of trophocytes of virgin and physogastric queens and nurse workers was studied with transmission electron microscopy (TEM) and compared to the morphology of oocytes development in the ovary with the purpose of correlate morphologically the activity of trophocytes to the absorption of substances from hemolymph by the ovaries. The presence of vitellogenin was searched in the FB and ovaries extracts of both castes by electrophoresis, as an attempt to see if there was an agreement between production of the protein in the trophocytes and their presence in the ovaries. Finally, taking into account the action of the morphogenetics hormones over the trophocytes, these cells of both castes were incubated into medium containing juvenile hormones III... (Complete abstract, click electronic address below) / Doutor

Orientador: José Chaud Netto / Banca: Valter Vieira Alves Júnior / Banca: Júlio Valentim Betioli / Resumo: No presente estudo avaliou-se o efeito do macerado floral e de extratos folhares de L. camara em operárias de Apis mellifera. Abelhas africanizadas recém-emergidas foram coletadas e marcadas, sendo posteriormente introduzidas em um núcleo contendo 3 favos cobertos por abelhas adultas e apresentando boa quantidade de mel e pólen. Dois desses favos possuíam um grande número de operárias em diferentes fases de desenvolvimento. Sete dias após a marcação as abelhas foram transferidas para caixas de laboratório mantidas em estufa bacteriológica a 34° C l 1° C e umidade relativa de 60 l 5%. Nas primeiras séries de bioensaios, em que foi testado o macerado floral, os grupos experimentais receberam pasta-cândi acrescida do macerado em concentrações variadas (30%, 10%, 7,5%, 5% e 2,5%), enquanto as abelhas dos grupos-controle receberam somente cândi. Os resultados das análises de sobrevivência indicaram que as abelhas alimentadas com cândi acrescido do macerado floral a 30%, 10% e 7.5% apresentaram uma menor longevidade (P < 0,0001), em relação às operárias dos grupos-controle. Estes resultados sugerem a existência de alguma substância tóxica no macerado floral de L. camara capaz de diminuir a longevidade das operárias. Na segunda série de bioensaios, as operárias receberam, por meio de aplicação tópica na região do pronoto, 2æL do extrato metanólico das folhas de L. camara nas concentrações de 0,0888 mg/abelha, 0,0444 mg/abelha e 0,0222 mg/abelha, enquanto que as abelhas do grupo controle receberam somente metanol. As análises de sobrevivência revelaram que os extratos de L. camara não interferiram na longevidade das operárias / Abstract: In this study the effect of the floral crushed and foliage extracts of L. camara in Apis mellifera workers was evaluated. Newly-emerged Africanized honeybee workers were collected and marked, being later introduced in a beehive containing three frames covered with bees and presenting good amount of honey, pollen and a great number of workers in different phases of development. Seven days after, the bees were transferred to laboratory boxes maintained in a bacteriological stove at 34° C l 1° C and relative humidity of 60 l 5%. In the first series of bioassays the honeybee workers of the experimental groups received candy plus floral crushed of L. camara in variable concentrations (30%, 10%, 7.5%, 5% and 2.5%), while the bees of the control groups were fed only with candy. The survival analyses indicated that bees fed with candy plus the floral crushed at 30%, 10% and 7.5% have a shorter life time (P <0,0001), in relation to the workers of the control groups. These results suggest the presence of some toxic substance in the floral crushed of L. camara, able to diminish the life time of adult workers. In the second series of bioassays the honeybee workers received, by topical application on the pronotum, 2æL of methanolic extracts of L. camara leaves in the concentrations of 0,0888 mg/bee, 0,0444 mg/bee and 0,0222 mg/bee, while the workers of the control groups received only methanol. The survival analyses revealed that the extracts of L. camara did not affect the worker's longevity / Mestre

Resumo: As abelhas contribuem para a manutenção das espécies vegetais no nicho ecológico onde vivem. Alguns compostos químicos encontrados em inseticidas utilizados na agricultura (fipronil), ou lançados no meio com resíduos industriais (ácido bórico) são tóxicos para as abelhas. Assim, objetivou-se avaliar a atividade tóxica desses compostos em doses subletais, bem como, analisar as alterações morfológicas (citoplasmáticas e nucleares) do corpo gorduroso e túbulos de Malpighi. As análises estatísticas para o experimento realizado com ácido bórico (0,75% m/m) e fipronil (0,1 ng/abelha/dia) mostraram que os perfis de sobrevivência das abelhas que ingeriram a dieta contaminada foram significativamente diferentes ao perfil de sobrevivência apresentado pelo grupo controle (p<0,0001). As análises morfologicas confirmam que os inseticidas fipronil e ácido bórico, apresentam citotoxicidade em doses subletais, dentre essas alterações, destaca-se: nos túbulos de Malpighi aparente liberação de material celular para o lúmen, alguns núcleos picnóticos e bordo em escova que em alguns casos bloquearam o lúmen do órgão, em algumas células notou-se características morfológicas de degeneração. No corpo gorduroso de abelhas destacam-se intensa atividade de coalescência vacuolar, núcleos picnóticos e alguns núcleos dos trofócitos com aparente ramificação. Ultraestruturalmente destaca-se o aumento da porção apical das microvilosidades, dilatações das cisternas dos retículos endoplasmáticos rugoso, presença de vesículas e acúmulo de polirribossomos no citoplasma para os túbulos de Malpighi dos grupos experimentais tratados com fipronil e ácido bórico. As análises do corpo gorduroso mostram o aumento da quantidade, coalescência, depósitos lipídicos e protéicos nos vacúolos nos trofócitos do corpo gorduroso. Os resultados apresentados mostram que as doses... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Bees help to maintain the plant species in the ecological niche where they live. Some chemicals found in pesticides used in agriculture (fipronil), or thrown in the ambient with industrial waste (boric acid) are toxic to bees. The objective was to evaluate the toxic activity of these compounds at sublethal doses, as well as analyze the morphological (cytoplasmic and nuclear) of the fat body and Malpighian tubules. In the experimental groups, the compounds were added to the diet (Candi). The concentration of fipronil used in the experiment was 0.1 g/kg of candi and the concentration of boric acid was 0.75% (m/m). Statistical analysis for the experiment conducted with fipronil and boric acid profiles showed that the survival of bees that ingested the contaminated diet were significantly different to the profile of survival made by the control group (p <0.0001). Morphologically, in control group, changes found in Malpighian tubules of bees treated with boric acid and fipronil were subtle, showing apparent release of cellular material into the lumen, some pyknotic nuclei and, in some cases, brush border blocking the lumen organ, in some cells we observed morphological features of degeneration. Morphological changes are evident in the fat body of bees treated with fipronil and boric acid compared to control group. Among these changes, stand out intense activity of vacuolar coalescence, pyknotic nuclei and some nuclei of trophocytes with apparent branching. Histochemically, the cells of the Malpighian tubules showed, by the reaction of Bromophenol Blue, proteic activity more apparent in the treated groups compared to controls. The reaction of the PAS-Alcian Blue revealed the presence of glycoproteins in the apical portion of the cells of the Malpighian tubules of the treated groups. For the Feulgen reaction, we observed a high degree of chromatin compaction... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Osmar Malaspina / Coorientador: Elaine C.M. da Silva Zacarin / Banca: Hélio Conte / Banca: Carmem Silvia Fontaneti Christofoletti / Mestre

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-05-24T13:20:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3999297 bytes, checksum: 3df888fff3753cef075cf9629a59a85d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-24T13:20:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3999297 bytes, checksum: 3df888fff3753cef075cf9629a59a85d (MD5) Previous issue date: 2017-07-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A abelha Apis mellifera tem importância ecológica e econômica, no entanto, sofre um declínio populacional, talvez devido à exposição a compostos tóxicos, que são excretados pelos túbulos de Malpigui. Durante a metamorfose de A. mellifera, os túbulos de Malpigui degeneram e são formados de novo. O objetivo deste trabalho foi verificar os eventos celulares na renovação dos túbulos Malpighi, acompanhando na metamorfose, quais as etapas da remodelação celular, determinando os tipos celulares e seus papéis na atividade excretora e inicio do controle homeostático em A. mellifera. As análises ultraestruturais e de imunofluorescência mostraram que as células dos túbulos de Malpighi de larvas degeneraram por apoptose e autofagia (larva L5S e pré-pupa) e novos túbulos de Malpigui são formados por proliferação celular. (larva L5S e pupa de olhos castanhos). A ultraestrutura das células dos túbulos de Malpigui sugere que uma remodelação celular ocorra a partir de pupa de olhos marrons, indicando o inicio de uma atividade de excreção nos túbulos de Malpigui pupais. Em abelhas adultas (recém-emergida e forrageira), dois tipos celulares ocorrem nos túbulos de Malpigui, um com características ultraestruturais de produção da urina primária e outro tipo de célula com características que sugerem um papel na reabsorção da urina primária. Este estudo sugere que, durante a metamorfose, os túbulos de Malpigui não são funcionais até pupa de olhos castanhos, indicando que A. mellifera pode ser vulnerável a compostos tóxicos nas primeiras nas fases pupais. Além disso, a ultraestrutura celular sugere que os túbulos Malpigui podem ser funcionais a partir de pupa de olhos marrons e adquirem maior complexidade na abelha operária forrageira. Nos insetos, o intestino posterior é um órgão homeostático, sendo este dividido em piloro, íleo e reto, que reabsorvem água, íons e pequenas moléculas produzidas na filtragem da hemolinfa e nas fezes. Esse estudo reporta as mudanças morfológicas e os eventos celulares que ocorrem no intestino posterior durante a metamorfose da abelha A. mellifera. No intestino posterior, a imunolocalização de autofagossomos e a ultraestrutura as células epiteliais e do revestimento cuticular sugerem que em pré-pupa tem início a degradação cuticular, que em pupas de olhos brancos e rosas é reabsorvida e reciclada por autofagossomos, sendo a deposição da nova cutícula em pupa de olhos castanhos. Em larva L5S e pré-pupa, o intestino posterior apresenta proliferação celular em suas extremidades anterior e posterior. Na pupa, as regiões do piloro, íleo e reto estão evidentes e com proliferações celulares que cessam a partir de pupa de olhos marrons. Apoptose ocorre de larva L5S até pupa de olhos rosas. Em pupas de olhos castanhos e marrons, o epitélio do íleo muda de pseudoestratificado para simples somente após a produção da lâmina basal e o epitélio retal é achatado. Nas células do íleo de pupa de olhos pretos ocorrem grandes vacúolos e espaços subcuticulares, enquanto que na operária adulta forrageira, ocorrem invaginações apicais longas e muitas mitocôndrias, sugerindo uma atividade no transporte de compostos. Os resultados mostram que a morfogênese do intestino posterior é dinâmica, com remodelações teciduais e eventos celulares para a formação de diferentes regiões do órgão, reconstrução de uma nova cutícula e remodelação dos músculos viscerais. / The honeybee Apis mellifera has ecological and economic importance, however, experience a population decline, perhaps due to exposure to toxic compounds, which are excreted by Malpighian tubules. During metamorphosis of A. mellifera, the Malpighian tubules degenerate and are formed de novo. The objective of this work was to verify the cellular events of the Malpighian tubules renewal and accompany in the metamorphosis, which are the gradual steps of cell remodeling, determining different cell types and their roles in the excretory activity and onset of homeostatic control in A. mellifera. Immunofluorescence and ultrastructural analyses showed that the cells of the larval Malpighian tubules degenerate by apoptosis and autophagy (larvae instar L5S and prepupae) and the new Malpighian tubules are formed by cell proliferation (L5S larvae until light-brown eyed pupae). The ultrastructure of the cells in the Malpighian tubules suggest that cellular remodeling only occurs from dark-brown eyed pupae, indicating the onset of excretion activity in pupal Malpighian tubules. In adult bees (newly emerged and forager), two cell types occur in the Malpighian tubules, one with ultrastructural features of primary urine production and another cell type with characteristics that suggest a role in primary urine reabsorpotion. This study suggest that during the metamorphosis, Malpighian tubules are non-functional until the light-brown eyed pupae, indicating that A. mellifera may be more vulnerable to toxic compounds at early pupal stages. In addition, cell ultrastructure suggests that the Malpighian tubules may be functional from dark-brown eyed pupae and acquire greater complexity in the forager worker bee. In insects, the hindgut is a homeostatic region of the digestive tract, divided into pylorus, ileum, and rectum, that reabsorbs water, ions, and small molecules produced during hemolymph filtration. The hindgut anatomy in bee larvae is different from that of adult workers. This study reports the morphological changes and cellular events that occur in the hindgut during the metamorphosis of the honeybee Apis mellifera. We describe the occurrence of autophagosomes and the ultrastructure of the epithelial cells and cuticle, suggesting that cuticular degradation begins in prepupae, with the cuticle being reabsorbed and recycled by autophagosomes in white- and pink- eyed pupae, followed by the deposition of new cuticle in light-brown-eyed pupae. In L5S larvae and prepupae, the hindgut undergoes cell proliferation in the anterior and posterior ends. In the pupae, the pylorus, ileum, and rectum regions are differentiated, and cell proliferation ceases in dark-brown-eyed pupae. Apoptosis occurs in the hindgut from the L5S larval to the pink-eyed pupal stage. In light-brown- and dark-brown-eyed pupae, the ileum epithelium changes from pseudostratified to simple only after the production of the basal lamina, whereas the rectal epithelium is always flattened. In black-eyed pupae, ileum epithelial cells have large vacuoles and subcuticular spaces, while in adult forager workers these cells have long invaginations in the cell apex and many mitochondria, indicating a role in the transport of compounds. Our findings show that hindgut morphogenesis is a dynamic process, with tissue remodeling and cellular events taking place for the formation of different regions of the organ, the reconstruction of a new cuticle, and the remodeling of visceral muscles.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-08-07T12:47:59Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1005646 bytes, checksum: 4d359018a6d3500032d11c14616f3e03 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-07T12:47:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1005646 bytes, checksum: 4d359018a6d3500032d11c14616f3e03 (MD5) Previous issue date: 2018-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Na abelha Apis mellifera são identificados 24 vírus, que persistem de forma natural nas colônias, em baixos títulos e sem sintomas aparentes. Porém, esta infecção silenciosa, associada a outros tipos de perturbações individuais, pode ser prejudicial e levar à morte de toda a colônia, como relatada no CCD. Vários vírus de abelhas foram descritos em A. mellifera, mas somente alguns são considerados como capazes de causar doenças, assim sendo, estes vírus estudados com mais frequência: Vírus da Paralisia Crônica (CBPV), Vírus da Paralisia Aguda (ABPV), Vírus Deformador da Asa (DWV), Vírus da Realeira Negra (BQCV), Vírus da Cria Ensacada (SBV), Vírus Caxemira (KBV), SBPV (Slow Bee Paralysis Virus), VDV1 (Vírus V. destructor -1) e, mais recentemente, o Vírus Israelense da Paralisia Aguda (IAPV). Baseando-se na importância da apicultura no Brasil, além do valor ecológico das abelhas como polinizadoras, o presente trabalho buscou verificar a ocorrência de vírus que afetam A. mellifera no estado de Minas Gerais, em treze cidades de sete Mesorregiões. As amostras foram coletadas em colônias distintas, em apiários cujo número variou entre 1 e 3 por mesorregião. O RNA total presente em seis abdômens (pool) de operárias por apiário foi extraído e feita a síntese de DNA complementar. O cDNA obtido foi utilizado para a amplificação por reação de polimerização em cadeia (PCR) com primers já previamente publicados. Posteriormente, cada fragmento gerado foi purificado e inserido no vetor pGEM-T Easy para sequenciamento. Neste trabalho pode-se detectar a presença de três tipos virais: ABPV, BQCV e CBPV. Dois na cidade de Passa Quatro no Sul (ABPV e BQCV) e um (CBPV) nas cidades de Viçosa, Caratinga, Divinópolis e Diamantina. Para os vírus DWV, IAPV, KBV, SBV, SBPV e VDV1 não foram obtidos amplicons. A presença do CBPV se dá em maior frequência (30,76%), sendo registrada em quatro cidades mineiras; ABPV e BQCV a 7,69% em uma localidade; das cidades analisadas 61,55% não apresentaram amplicons para os vírus analisados. / Honey bee Apis mellifera can be identified by 24 viruses, which persist naturally in the colonies, low titers and no apparent symptoms. However, this infection, associated with other types of individual disorders, can be harmful and lead to the death of the entire colony, as reported in CCD. Several bee viruses have been described in A. mellifera, but only some are considered to be capable of causing diseases, so these, viruses are most frequently studied: Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV), Acute Bee Paralysis Virus (ABPV), Deformed Wing Virus (DWV), Black Queen Cell Virus (BQCV), Sacbrood Virus (SBV), Kashmir Virus (KBV), SBPV (Slow Bee Paralysis Virus), VDV1 (Vírus V. destructor -1) and more recently, the Israeli Acute Paralysis Virus (IAPV). Based on the importance of beekeeping in Brazil, in addition to the ecological value of bees as pollinators, the present work sought to verify the occurrence of viruses that affect A. mellifera in the state of Minas Gerais, in thirteen cities of seven Meso-regions. The samples were collected in distinct colonies, in apiaries whose number varied between 1 and 3 per mesoregion. The total RNA present in six abdomens (pool) of workers per apiary was extracted and the synthesis of complementary DNA was made. The obtained cDNA was used for amplification by polymerization chain reaction (PCR) with previously published primers. Subsequently, each generated fragment was purified and inserted into the pGEM-T Easy vector for sequencing. In this work we can detect the presence of three viral types: ABPV, BQCV and CBPV. Two in the city of Passa Quatro in the South (ABPV and BQCV) and one (CBPV) in the cities of Viçosa, Caratinga, Divinópolis and Diamantina. For the viruses DWV, IAPV, KBV, SBV, SBPV and VDV1 no amplicons were obtained. The presence of CBPV occurs more frequently (30.76%), being registered in four cities in Minas Gerais; ABPV and BQCV at 7.69% in one locality; of the analyzed cities 61.55% did not present amplicons for the virus analyzed.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-09-03T18:45:27Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 521431 bytes, checksum: f1d795099ef7fc1ce72a69d0855ecd37 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-03T18:45:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 521431 bytes, checksum: f1d795099ef7fc1ce72a69d0855ecd37 (MD5) Previous issue date: 2018-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O primeiro trabalho de citometria de fluxo utilizando abelhas da tribo Meliponini, quantificou o genoma de três espécies, as quais apresentaram conteúdo de DNA de 0,43 pg em Scaptotrigona xantotricha, 0,93 pg em Melipona rufiventris e 0,95 pg em Melipona mondury. Posteriormente à determinação do seu conteúdo genômico, S. xantotricha passou a ser utilizada como padrão interno, em todos os estudos de citometria com meliponíneos. Atualmente, valores de apenas 63 espécies de abelhas estão disponíveis, mostrando uma escassez de dados nesse grupo. Uma das razões para esse desprovimento de dados, pode ser devido à dificuldade do acesso as larvas e pupas, que foram as únicas utilizadas, até o momento, nos estudos de quantificação do genoma de abelhas. Sendo assim, a busca pela utilização de material mais acessível, pode ser uma estratégia para que mais espécies sejam analisadas. Portanto, o presente estudo teve como objetivo testar diferentes tampões para a quantificação do conteúdo de DNA nuclear em abelhas adultas. Para a preparação das suspenções nucleares, a serem analisadas no citômetro de fluxo, foram utilizadas abelhas adultas da espécie S. xantotricha e o padrão interno Drosophila melanogaster, juntamente com os tampões LB01, Galbraith, MgSO 4 e TRIS. Os histogramas obtidos, apresentaram bons níveis de resolução e coeficiente de variação satisfatórios, com percentuais menores do que 5%, variando de 2,24% com o tampão Galbraith a 3,34% com o tampão LB01. O tamanho do genoma de adultos de S. xantotricha apresentou valores muito próximos ou idênticos aos dados disponíveis na literatura para as larvas e pupas dessa mesma espécie. Da mesma forma, a razão experimental não apresentou grandes variações em relação à teórica (2,39), sendo o tampão MgSO 4 com razão de 2,34 o mais distante. Em relação à porcentagem de debri celular, as amostras que utilizaram os tampões Galbraith, MgSO 4 e TRIS, mostraram-se mais limpas em relação as que utilizaram o tampão LB01. Por fim, os resultados dos parâmetros analisados, no mesmo dia da extração e 24 após extração, foram muito semelhantes. Mediante o exposto, podemos concluir que a utilização de abelhas adultas para a determinação do conteúdo de DNA é tão eficaz quanto ao uso de larvas e pupas, visto que seus resultados não apresentaram diferenças estatisticamente significantes quando comparados com os dados da literatura. / The first work of flow cytometry using bees from Meliponini tribe quantified the genome of three species, to which they presented DNA content of 0.43 pg in Scaptotrigona xantotricha, 0.93 pg in Melipona rufiventris and 0.95 pg in Melipona mondury. After the determination of its genomic content, S. xantotricha became to be was used as the internal standard in all the studies of meliponine cytometry. Currently, values of just 63 species of bees are available, showing a scarcity of data in this group. One of the reasons for this data shortage may be due to the difficulty of access the larvae and pupae, which were the only ones used, until the moment, in the studies of quantifying the genome of bees. Thus, the search for the use of more accessible material may be a strategy for more species to be analyzed. Therefore, the present study aimed to test different buffers for the quantification of nuclear DNA content in adult bees. For the preparation of the nuclear suspensions, to be analyzed in the flow cytometer, adult bees of the species S. xantotricha and the internal standard Drosophila melanogaster, along with LB01, Galbraith, MgSO4 and TRIS buffers. The histograms obtained had good resolution levels and coefficient of variation of satisfactory, with percentages lower than 5%, ranging from 2.24% with Galbraith buffer to 3.34% with LBO1 buffer. The size of the genome obtained with the use of adults of S. xantotricha values very close or identical to the available data in the literature for the larvae and pupae of the same species. Similarly, the experimental coefficient did not show great variations in relation to the theoretical one (2.39), and the MgSO4 buffer with a ratio of 2.34 was the most distant. In relation to the percentage of debri cell, the samples using the Galbraith, MgSO4 and TRIS buffers were cleaner compared to those using the LB01 buffer. Finally, the results of analyzed parameter in the same day of extraction and 24 hours after extraction were very similar. In front of this fact, we can conclude that the utilization of adult bee for the determination of DNA content is so effective as to use of larvae and pupae, since its result not showed significant statistical differences when compared with the literature data.