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Microscopia eletrônica de varredura de campo amplo e mapeamento elementar de Raios-X de fósseis do período cretáceoOliveira, Naiara Cipriano January 2015 (has links)
OLIVEIRA, Naiara Cipriano. Microscopia eletrônica de varredura de campo amplo e mapeamento elementar de Raios-X de fósseis do período cretáceo. 2015. 60 f. Dissertação (Mestrado em Física) - Programa de Pós-Graduação em Física, Departamento de Física, Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Edvander Pires (edvanderpires@gmail.com) on 2015-10-28T18:05:40Z
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Previous issue date: 2015 / Neste trabalho, apresenta-se uma abordagem de microscopia eletrônica de varredura aplicada em um fóssil de camarão do período Cretáceo (com uma área de aproximadamente 280 mm2) recolhido no Membro Ipubi, da Bacia Sedimentar do Araripe, Brasil. Tal abordagem conta com a detecção de sinais de elétrons retroespalhados (BSE) e de raios-X (emitidos a partir do processo de ionização do espécimen) formando micrografias eletrônicas de campo amplo. A alta definição das imagens de campo amplo de BSE e de raios-X é obtida a partir da sobreposição coerente de milhares de imagens adjacentes obtidas durante o procedimento de varredura de toda a área do fóssil. Através da interpretação dessas imagens foi possível desvendar detalhes da morfologia do fóssil imperceptíveis pela microscopia ótica, assim como características composicionais do material fossilizado ao longo de escalas de comprimento que variam de micrômetros a centímetros. Detalhes morfológicos dos pleópodos, pereiópodos, antenas, antênules e somitos do camarão foram melhor visualizados nas imagens de campo amplo por BSEs, e também nos mapas elementares de campo amplo do cálcio (Ca) e do fósforo (P) (mineralizados como hidroxiapatita no fóssil, [Ca5(PO4)3OH]). Além disso, os mapas elementares de campo amplo dos elementos fósforo (P) e flúor (F) apresentaram uma correlação entre si, indicando ao indício da mineralização da fluorapatita [Ca5(PO4)3F], processo de fossilização que pode ser responsável pela preservação do fóssil. Outra informação importante, obtida pela correlação dos mapas elementares do zinco (Zn) e do enxofre (S), indicaram um processo de fossilização bastante raro, a mineralização por sulfeto de zinco (ZnS), observada pela primeira vez na Bacia Sedimentar do Araripe.
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Análise dos spreads de crédito de debêntures atreladas ao IPCARechtman, Marcos Vinícius Araújo 31 August 2015 (has links)
Submitted by MARCOS VINICIUS ARAUJO RECHTMAN (mvrechtman@gmail.com) on 2016-10-18T21:34:07Z
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Previous issue date: 2015-08-31 / Este trabalho investigou as emissões primárias de debêntures atreladas ao IPCA no Brasil, buscando entender quais são os fatores macro e microeconômicos que influenciam o investidor na decisão de comprar/apreçar esse título privado. Em outras palavras, quais são as variáveis que afetam o spread de crédito da debênture sobre as NTN-Bs, títulos públicos brasileiros atrelados ao IPCA e considerados 'livres de risco', na emissão primária. Com esse propósito, o estudo utilizou regressões multifatoriais, com os resultados indicando que o Rating da companhia é o fator que se mostrou mais significante; outros fatores como setor, duration e tamanho da companhia não se mostraram significativos e, por fim, algumas variáveis apresentaram sinais opostos ao esperado pela teoria econômica – nestes casos buscou-se uma interpretação com base nas características do mercado financeiro brasileiro.
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Microscopia eletrÃnica de varredura de campo amplo e mapeamento elementar de Raios-X de fÃsseis do perÃodo cretÃceo.Naiara Cipriano Oliveira 04 August 2015 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Neste trabalho, apresenta-se uma abordagem de microscopia eletrÃnica de varredura aplicada em um fÃssil de camarÃo do perÃodo CretÃceo (com uma Ãrea de aproximadamente 280 mm2) recolhido no Membro Ipubi, da Bacia Sedimentar do Araripe, Brasil. Tal abordagem conta com a detecÃÃo de sinais de elÃtrons retroespalhados (BSE) e de raios-X (emitidos a partir do processo de ionizaÃÃo do espÃcimen) formando micrografias eletrÃnicas de campo amplo. A alta definiÃÃo das imagens de campo amplo de BSE e de raios-X Ã obtida a partir da sobreposiÃÃo coerente de milhares de imagens adjacentes obtidas durante o procedimento de varredura de toda a Ãrea do fÃssil. AtravÃs da interpretaÃÃo dessas imagens foi possÃvel desvendar detalhes da morfologia do fÃssil imperceptÃveis pela microscopia Ãtica, assim como caracterÃsticas composicionais do material fossilizado ao longo de escalas de comprimento que variam de micrÃmetros a centÃmetros. Detalhes morfolÃgicos dos pleÃpodos, pereiÃpodos, antenas, antÃnules e somitos do camarÃo foram melhor visualizados nas imagens de campo amplo por BSEs, e tambÃm nos mapas elementares de campo amplo do cÃlcio (Ca) e do fÃsforo (P) (mineralizados como hidroxiapatita no fÃssil, [Ca5(PO4)3OH]). AlÃm disso, os mapas elementares de campo amplo dos elementos fÃsforo (P) e flÃor (F) apresentaram uma correlaÃÃo entre si, indicando ao indÃcio da mineralizaÃÃo da fluorapatita [Ca5(PO4)3F], processo de fossilizaÃÃo que pode ser responsÃvel pela preservaÃÃo do fÃssil. Outra informaÃÃo importante, obtida pela correlaÃÃo dos mapas elementares do zinco (Zn) e do enxofre (S), indicaram um processo de fossilizaÃÃo bastante raro, a mineralizaÃÃo por sulfeto de zinco (ZnS), observada pela primeira vez na Bacia Sedimentar do Araripe.
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Desenvolvimento de um sistema de imagem de campo amplo de fluorescência para localização de linfonodo sentinela empregando a indocianina verde / Development of a wide-field fluorescence imaging system to locate sentinel lymph node using indocyanine greenGovone, Angelo Biasi 25 February 2016 (has links)
A fluorescência é uma técnica amplamente empregada na área de diagnóstico médico, com aplicações distintas. Uma de suas aplicações é a detecção de um determinado marcador que pode ser injetado no paciente. A indocianina verde (ICG) é um exemplo de marcador fluorescente que pode ser empregado para auxiliar na identificação do linfonodo sentinela. A excitação é realizada em 780 nm e a emissão detectada ao redor de 850 nm. Tais comprimentos de onda são muito favoráveis para aplicação médica por apresentarem pouca absorção por tecidos biológicos. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de imagens por fluorescência de ICG. Este sistema é basicamente constituído por um dispositivo de iluminação e de aquisição e tratamento de imagem. Dois protótipos foram construídos e testados, um com excitação Laser e o segundo a LED. O dispositivo de iluminação oferece uma iluminação uniforme em uma área de 10 por 15 cm a uma distância de 30 cm. A fluorescência é captada por um sistema composto por duas câmeras perpendiculares uma à outra e um espelho dicroico angulado 45° a ambas, cuja função é separar a imagem por bandas. Uma das câmeras capta a imagem refletida do espelho no espectro visível e a outra capta a imagem transmitida pelo espelho no infravermelho. As imagens obtidas pelas câmeras recebem tratamento em uma rotina desenvolvida em plataforma LabVIEW® para destacar a região com fluorescência sobreposta na imagem sob iluminação branca em tempo real, sendo possível salvar figuras ou vídeos, dependendo da necessidade do operador. O equipamento foi testado no Hospital de Câncer de Barretos em pacientes para ressecção cirúrgica de tumores de cabeça e pescoço e de melanoma e apresentou resultados promissores. / Fluorescence is a widely used technique in medical diagnostic, with several applications. One of its applications is the screening of a particular marker that can be injected into the patient. The indocyanine green (ICG) is an example of fluorescent marker that can be used to assist the identification of the sentinel lymph node. The excitation is performed at 780 nm and the emission is detected around 850 nm. Such wavelengths are very suitable for medical applications due to their little absorption by biological tissues. The objective of this study was to develop a system of fluorescence imaging of ICG. This system is basically constituted by an irradiation and image acquisition device and a routine for image processing. Two prototypes were built and tested, the first one with Laser excitation and the second with LED. The lighting device provides uniform illumination in an area of 10 by 15 cm at a distance of 30 cm. The fluorescence is collected by a system with two cameras orthogonal to each other and a dichroic mirror angled 45 ° to both, whose function is to separate the image in bands. One of the cameras captures the image reflected from the mirror in the visible spectrum and the other captures the image absorbed by the mirror in the infrared. The images obtained by the cameras receive treatment on a routine developed in LabVIEW® platform to highlight the fluorescent region overlapping the image under white light in real time, making it possible to save pictures or videos, depending on the needs of the operator. The equipment was tested in Barretos\' Cancer Hospital in patients for surgical resection of head and neck tumors and melanoma tumors and presented promising results.
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Sobre a possibilidade de um conteúdo estreito numa teoria bi-dimensional epistêmica / The possibility of a narrow content in a two-dimensional epistemic theoryCarolina Ignacio Muzitano 28 February 2012 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O bi-dimensionalismo epistêmico é a tese de que os estados mentais de um indivíduo tem uma dupla divisão, tendo, então, um conteúdo amplo e um conteúdo estreito. Um conteúdo amplo é aquele cuja determinação depende em parte de propriedades extrínsecas ao sujeito: ou seja, é aquele que possui relação com o mundo externo ao sujeito, seja físico ou social. Já o conteúdo estreito é o conteúdo plenamente determinado por propriedades intrísecas ao sujeito, sem precisar recorrer a nada externo. Este conteúdo estreito será, de acordo com o bi-dimensionalismo de Jackson e de Chalmers, o conteúdo representativo de um estado mental, dado através de descrições sobre aquilo que o sujeito sabe e acredita sobre o mundo ao seu redor. O objetivo desta dissertação ao tratar sobre esta forma de bi-dimensionalismo é o de apresentá-lo como uma possível resposta para dois problemas gerados pela afirmação externalista de que nomes próprios e termos de tipos naturais são designadores rígidos e pela afirmação de que todo conteúdo de um estado mental é amplo. Estes dois problemas são a incompatibilidade do conteúdo amplo com o acesso privilegiado e a sua incompatibilidade com o papel explicatório que estados mentais intencionais parecem ter em relação aos comportamentos de um indivíduo, pois, se os indivíduos não possuem um acesso privilegiado aos conteúdos dos seus estados mentais, tal conteúdo amplo não poderá ser visto como sendo um causalmente relevante para os seus comportamentos. Contudo, os argumentos apresentados pelo externalismo semântico parecem ainda convincentes demais para considerar tais consequências como sendo um bom motivo para se abandonar a tese externalista. Além disso, vários exemplos do funcionamento da linguagem (como os casos do uso de nomes próprios e termos de espécies naturais) parecem indicar que o externalismo semântico é correto. Assim, neste trabalho, analisarei a teoria bi-dimensional à luz das afirmações externalistas sobre o significado e sobre a individuação dos conteúdos dos estados mentais, ou seja, como podendo ser uma teoria que, além de ser uma capaz de fornecer uma resposta viável para estes dois problemas, é também compatível com o conteúdo amplo da forma como é afirmado pelo externalismo. / The epistemic two-dimensionalism is the thesis that the mental states of a person have double division, possessing, therefore, a broad content and a narrow content. A broad content is the one whose determination depends partially on properties extrinsic to the individual: i.e., it is the one which is related to the world external to the individual, be it physical or social. On the other hand, the narrow content is the one completely determined by properties intrinsic to the individual, without the need of anything external. This narrow content is, according to Jacksons and Chalmers two-dimensionalism, the representative content of a mental state, presented through description of what the individual knows of and believes in the world around him. The objective of this dissertation dealing with this form of two-dimensionalism is to present it as a possible answer to two problems generated by the externalist affirmative that proper names and natural kind terms are rigid designators and the affirmative that all content in a mental state is broad. These two problems are the incompatibility of the broad content and the privileged access and its incompatibility with the explanatory role that intentional mental states seem to have regarding a persons behavior, for if people have no privileged access to the content of their mental states, such broad content cannot be seen as being causally relevant to their behaviors. However, the arguments presented by semantic externalism still seem too convincing to consider such consequences as being enough reason to all-together abandon the externalist thesis. Besides, a number of examples of languages functioning (as the use of proper names and natural kind terms) seem to point to the fact that semantic externalism is correct. Therefore, in this work, I shall analyze the two-dimensional theory under the light of externalist affirmatives on the meaning and on the individuation of the content of mental states, i.e., as being a thesis that not only is able to provide a viable answer to these two problems, but also is compatible with broad content as regarded by externalism.
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Índice de preços do subitem transporte aéreo no BrasilVasconcelos, Leonardo Siqueira 31 May 2017 (has links)
Submitted by Leonardo Siqueira Vasconcelos (leonardosiq@gmail.com) on 2017-06-29T19:00:55Z
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Previous issue date: 2017-05-31 / The availability of online prices represents a unique opportunity for the construction of price indexes and the measurement of inflation. This type of data can be collected remotely, at much higher frequencies, and a tiny fraction of the cost of traditional price- collection methods. The Brazilian Institute of Geography and Statistics (IBGE), through the Broad National Consumer Price Index (IPCA), already collects data online for the subitem airfare. The paper seeks to show evidence that simple collection on company websites is not always the best way to obtain price variations due to automatic price swings. Additionally, a review of the theoretical and empirical literature highlighting the national and international collection method is presented. In order to reach the proposed objective, we used the time-series econometric procedure using the Vector Autoregressive Model related to the National Civil Aviation Agency (ANAC) price changes. / A disponibilidade de preços online representa uma oportunidade única para a construção de índices de preços e mensuração da inflação. Esse tipo de dado pode ser coletado remotamente, com grande frequência e um custo reduzido em relação ao método tradicional de coleta de preços. O Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE), através do Índice Nacional de Preços ao Consumidor Amplo (IPCA), já realiza a coleta de dados online referente ao subitem passagem aérea. O trabalho procura mostrar evidências de que a simples coleta nos sites das empresas nem sempre é a melhor forma de se obter as variações de preço, em virtude das oscilações automáticas de preços. Adicionalmente apresenta-se uma revisão da literatura teórica e empírica destacando o método de coleta nacional e internacional. Para alcançar o objetivo proposto, utilizou-se o procedimento econométrico de séries temporais através do Modelo de Vetor Autoregressivo relacionado as variações de preços da Agência Nacional de Aviação Civil (ANAC).
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Sobre a possibilidade de um conteúdo estreito numa teoria bi-dimensional epistêmica / The possibility of a narrow content in a two-dimensional epistemic theoryCarolina Ignacio Muzitano 28 February 2012 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O bi-dimensionalismo epistêmico é a tese de que os estados mentais de um indivíduo tem uma dupla divisão, tendo, então, um conteúdo amplo e um conteúdo estreito. Um conteúdo amplo é aquele cuja determinação depende em parte de propriedades extrínsecas ao sujeito: ou seja, é aquele que possui relação com o mundo externo ao sujeito, seja físico ou social. Já o conteúdo estreito é o conteúdo plenamente determinado por propriedades intrísecas ao sujeito, sem precisar recorrer a nada externo. Este conteúdo estreito será, de acordo com o bi-dimensionalismo de Jackson e de Chalmers, o conteúdo representativo de um estado mental, dado através de descrições sobre aquilo que o sujeito sabe e acredita sobre o mundo ao seu redor. O objetivo desta dissertação ao tratar sobre esta forma de bi-dimensionalismo é o de apresentá-lo como uma possível resposta para dois problemas gerados pela afirmação externalista de que nomes próprios e termos de tipos naturais são designadores rígidos e pela afirmação de que todo conteúdo de um estado mental é amplo. Estes dois problemas são a incompatibilidade do conteúdo amplo com o acesso privilegiado e a sua incompatibilidade com o papel explicatório que estados mentais intencionais parecem ter em relação aos comportamentos de um indivíduo, pois, se os indivíduos não possuem um acesso privilegiado aos conteúdos dos seus estados mentais, tal conteúdo amplo não poderá ser visto como sendo um causalmente relevante para os seus comportamentos. Contudo, os argumentos apresentados pelo externalismo semântico parecem ainda convincentes demais para considerar tais consequências como sendo um bom motivo para se abandonar a tese externalista. Além disso, vários exemplos do funcionamento da linguagem (como os casos do uso de nomes próprios e termos de espécies naturais) parecem indicar que o externalismo semântico é correto. Assim, neste trabalho, analisarei a teoria bi-dimensional à luz das afirmações externalistas sobre o significado e sobre a individuação dos conteúdos dos estados mentais, ou seja, como podendo ser uma teoria que, além de ser uma capaz de fornecer uma resposta viável para estes dois problemas, é também compatível com o conteúdo amplo da forma como é afirmado pelo externalismo. / The epistemic two-dimensionalism is the thesis that the mental states of a person have double division, possessing, therefore, a broad content and a narrow content. A broad content is the one whose determination depends partially on properties extrinsic to the individual: i.e., it is the one which is related to the world external to the individual, be it physical or social. On the other hand, the narrow content is the one completely determined by properties intrinsic to the individual, without the need of anything external. This narrow content is, according to Jacksons and Chalmers two-dimensionalism, the representative content of a mental state, presented through description of what the individual knows of and believes in the world around him. The objective of this dissertation dealing with this form of two-dimensionalism is to present it as a possible answer to two problems generated by the externalist affirmative that proper names and natural kind terms are rigid designators and the affirmative that all content in a mental state is broad. These two problems are the incompatibility of the broad content and the privileged access and its incompatibility with the explanatory role that intentional mental states seem to have regarding a persons behavior, for if people have no privileged access to the content of their mental states, such broad content cannot be seen as being causally relevant to their behaviors. However, the arguments presented by semantic externalism still seem too convincing to consider such consequences as being enough reason to all-together abandon the externalist thesis. Besides, a number of examples of languages functioning (as the use of proper names and natural kind terms) seem to point to the fact that semantic externalism is correct. Therefore, in this work, I shall analyze the two-dimensional theory under the light of externalist affirmatives on the meaning and on the individuation of the content of mental states, i.e., as being a thesis that not only is able to provide a viable answer to these two problems, but also is compatible with broad content as regarded by externalism.
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Desenvolvimento de um sistema de imagem de campo amplo de fluorescência para localização de linfonodo sentinela empregando a indocianina verde / Development of a wide-field fluorescence imaging system to locate sentinel lymph node using indocyanine greenAngelo Biasi Govone 25 February 2016 (has links)
A fluorescência é uma técnica amplamente empregada na área de diagnóstico médico, com aplicações distintas. Uma de suas aplicações é a detecção de um determinado marcador que pode ser injetado no paciente. A indocianina verde (ICG) é um exemplo de marcador fluorescente que pode ser empregado para auxiliar na identificação do linfonodo sentinela. A excitação é realizada em 780 nm e a emissão detectada ao redor de 850 nm. Tais comprimentos de onda são muito favoráveis para aplicação médica por apresentarem pouca absorção por tecidos biológicos. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de imagens por fluorescência de ICG. Este sistema é basicamente constituído por um dispositivo de iluminação e de aquisição e tratamento de imagem. Dois protótipos foram construídos e testados, um com excitação Laser e o segundo a LED. O dispositivo de iluminação oferece uma iluminação uniforme em uma área de 10 por 15 cm a uma distância de 30 cm. A fluorescência é captada por um sistema composto por duas câmeras perpendiculares uma à outra e um espelho dicroico angulado 45° a ambas, cuja função é separar a imagem por bandas. Uma das câmeras capta a imagem refletida do espelho no espectro visível e a outra capta a imagem transmitida pelo espelho no infravermelho. As imagens obtidas pelas câmeras recebem tratamento em uma rotina desenvolvida em plataforma LabVIEW® para destacar a região com fluorescência sobreposta na imagem sob iluminação branca em tempo real, sendo possível salvar figuras ou vídeos, dependendo da necessidade do operador. O equipamento foi testado no Hospital de Câncer de Barretos em pacientes para ressecção cirúrgica de tumores de cabeça e pescoço e de melanoma e apresentou resultados promissores. / Fluorescence is a widely used technique in medical diagnostic, with several applications. One of its applications is the screening of a particular marker that can be injected into the patient. The indocyanine green (ICG) is an example of fluorescent marker that can be used to assist the identification of the sentinel lymph node. The excitation is performed at 780 nm and the emission is detected around 850 nm. Such wavelengths are very suitable for medical applications due to their little absorption by biological tissues. The objective of this study was to develop a system of fluorescence imaging of ICG. This system is basically constituted by an irradiation and image acquisition device and a routine for image processing. Two prototypes were built and tested, the first one with Laser excitation and the second with LED. The lighting device provides uniform illumination in an area of 10 by 15 cm at a distance of 30 cm. The fluorescence is collected by a system with two cameras orthogonal to each other and a dichroic mirror angled 45 ° to both, whose function is to separate the image in bands. One of the cameras captures the image reflected from the mirror in the visible spectrum and the other captures the image absorbed by the mirror in the infrared. The images obtained by the cameras receive treatment on a routine developed in LabVIEW® platform to highlight the fluorescent region overlapping the image under white light in real time, making it possible to save pictures or videos, depending on the needs of the operator. The equipment was tested in Barretos\' Cancer Hospital in patients for surgical resection of head and neck tumors and melanoma tumors and presented promising results.
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Ontogênese das estruturas axilares em Anacampserotaceae (Caryophyllales) / Ontogenesis of the axillar structures in Anacampserotaceae (Caryophyllales)Santos, Ligia Keiko dos 17 November 2015 (has links)
Anacampserotaceae pertence à ordem Caryophyllales, subordem Portulacineae, atualmente constituída por três gêneros (Anacampseros L., Grahamia Gill ex Hook e Talinopsis A. Gray) antes pertencentes à família Portulacaceae. Os representantes de Anacampserotaceae apresentam estruturas axilares lignificadas muito características, como tricomas, escamas (scales) e cerdas (bristles) e também apresentam células do tipo WBT que ocorre somente em mais outras duas famílias de Caryophyllales, Aizoaceae e Cactaceae. Os caracteres axilares são muito informativos para o clado ACPT (Anacampserotaceae, Cactaceae, Portulacaceae e Talinaceae) e vêm revelando importantes dados aos estudos filogenéticos da subordem Portulacineae, no entanto, há uma controvérsia quanto a origem ontogenética das estruturas axilares de Anacampserotaceae, o que pode levar a interpretações equivocadas das relações filogenéticas do grupo. Diante disso, este trabalho realizou um estudo ontogenético das estruturas presentes na região da axila foliar de oito espécies de Anacampserotaceae e analisou as WBTs do caule e de folhas quanto seu tipo de espessamento e medidas quantitativas de seis espécies. Os resultados apontam a 1) origem estipular das escamas e não protodérmica, como mencionado na literatura; 2) primeiro relato de profilos na família e 3) WBTs ocorrem em Anacampseros e estão ausente em Talinopsis, grupo considerado basal na família. / Anacampserotaceae belongs to the order Caryophyllales, suborder Portulacineae, currently consists of three genus (Anacampseros L., Grahamia Gill ex Hook and Talinopsis A. Gray) formerly circumscribed to the family Portulacaceae. Anacampserotaceae\'s representative presents lignified axillary structures very distinctive, like trichomes, scales and bristles and also WBT cells that is presented only by two other families of Caryophyllales, Aizoaceae e Cactaceae. The axillary characters are very informative for the ACPT clade (Anacampserotaceae, Cactaceae, Portulacaceae and Talinaceae) and has been revealing important data for the phylogenetic studies on the Portulacineae suborder, nevertheless, there is a controversy regarding the Anacampserotaceae axillary structures ontogenetic origin, what may lead to misguided interpretations for the ACPT phylogenetic relationships. Before it, this research have accomplished the ontogenetic study of the structures present on the leaf axil of eight Anacampserotaceae species and examined stem and leaf WBTs, as for its secondary thickening type and quantitative measurements of six species. The results points 1) that at least one structure (scale) has leaf origin instead of protodermic origin, as stated by some authors; 2) first report of prophylls for the family and 3) WBTs occur in Anacampseros but they are absent in Talinopsis, a basal group of Anacampserotaceae.
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Avaliação do efeito fotodinâmico a partir da associação dos precursores da PPIX (ALA e MAL) em epitélio suíno / Photodynamic effect evaluation from the association of the precursors of PPIX (ALA and MAL) in swine epitheliumFujita, Alessandra Keiko Lima 23 May 2016 (has links)
A terapia fotodinâmica (TFD) utilizando ácido 5-aminolevulinico (ALA) e derivados em aplicação tópica e, como precursor da protoporfirina IX (PPIX) apresenta alguns limitantes relativos a baixa permeação das substâncias na pele. Comportamento este que afeta a produção e homogeneidade da distribuição da PPIX na superfície e camadas mais profundas da pele. Para resolver essa limitação muitos autores propõem alternativas modificando a molécula do ALA e derivados, bem como modificando as propriedades químicas da fase externa da emulsão (mais hidrofílica ou hidrofóbica) ou então o sistema de entrega para a emulsão. O objetivo desse estudo é avaliar qual a proporção de ALA e metil-5-aminolevulinato (MAL) que quando misturados levam ao aumento da quantidade e uniformidade da formação da PPIX na superfície e em profundidade na pele. Para esse estudo foi realizada análises de fluorescência e histologia. O estudo foi conduzido in vivo e ex vivo usando biópsias de pele de porco cultivadas in vitro. A produção de PPIX foi monitorada utilizando espectroscopia de fluorescência, imagem de fluorescência de campo amplo e microscopia confocal de fluorescência. E para a aplicação da TFD os parâmetros usados foram de 125 mW/cm2 de intensidade e 150 J/cm2 de dose. A análise do dano causado pela irradiação foi realizada por meio de histologia da pele após 24 e 48 horas da aplicação da TFD. O ALA e MAL na concentração de 20% foram misturados nas seguintes proporções: ALA ou M, M2 (80% ALA - 20% MAL), M3 (60% ALA 40% MAL), M4 (50% ALA MAL), M5 (40% ALA 60% MAL), M6 (20% ALA 80% MAL) e MAL como M7. As diferentes proporções foram incorporadas em emulsões óleo em água (O/A) e água em óleo (A/O). De acordo com os resultados, as misturas M3, M4 e M5 mostraram maior produção de PPIX na superfície da pele segundo as medidas de fluorescência em 3h de incubação e, no estudo da cinética mostraram produzir PPIX em menor tempo. No estudo de permeação do creme in vitro em pele ex vivo, por microscopia confocal de fluorescência, observou-se que as misturas M3, M4 e M5 produziram mais PPIX nas camadas da pele do que ALA e MAL. As análises histológicas das misturas apresentaram maior dano fotodinâmico na superfície e profundidade das camadas da pele após a TFD, independente da emulsão. A análise em até 48h observou-se predominantemente a fase do processo de reparo referente à fase inflamatória, mas existem indícios ao longo das análises tanto macroscópicas e histológicas que o processo de reparo referente as fases subsequentes de proliferação e remodelamento estão iniciando-se em paralelo. A mistura M4 em ambas as emulsões apresentou elevada quantidade de formação de PPIX em menor tempo de incubação. M4 em emulsão O/A apresentou menor dano fotodinâmico já que a evolução do processo reparo foi mais rápida sugerindo-se potencial de aplicação em TFD voltado para área cosmética-estética. Já M4 em emulsão A/O levou a um maior dano fotodinâmico já que a evolução do processo de reparo foi mais lenta sugerindo-se potencial de aplicação em TFD voltado para área oncológica e de doenças de pele. De modo geral o estudo proposto apresentou impacto positivo para a otimização da terapia fotodinâmica em aplicação tópica. / Photodynamic therapy (PDT) using 5-aminolevulinic acid and derivatives on topical application and as a precursor of protoporphyrin (PPIX) has some limitations for low permeation of substances into the skin. This behavior affects PPIX production and homogeneous distribution on the surface and deeper layers of the skin. To resolve this limitation, many authors propose alternatives such as modifying the molecule of ALA and its derivatives, as well as changing the chemical properties of the external phase of the emulsion (more hydrophilic or hydrophobic) or the delivery system to the emulsion. The aim of this study is to assess the proportion of ALA and methyl-5-aminolevulinate (MAL) that when mixed leads to an increase in the amount and uniformity of the PPIX formation on surface and deep skin. For this study we performed fluorescence analysis and histology. The studies were conducted in vivo and also using pig skin biopsies (ex vivo) cultured in vitro. The PPIX production was monitored using fluorescence spectroscopy, widefield fluorescence imaging, and fluorescence confocal microscopy. For the application of PDT an intensity of 125 mW/cm2 and a dose 150 J/cm2 were used. Analysis of the damage caused by irradiation was performed through skin histology after 24 and 48 hours after PDT application. ALA and MAL in concentration of 20% were mixed in the following proportions: ALA or M, M2 (80% ALA - 20% MAL), M3 (60% ALA - 40% MAL), M4 (50% ALA - MAL) M5 (40% ALA - 60% MAL), M6 (20% ALA - 80% MAL) MAL and as M7. Different proportions were incorporated in oil-in-water emulsions (O/W) and water-in-oil (W/O). The fluorescence measurements for 3h of incubation showed better PPIX production in the skin surface for mixtures M3, M4 and M5. Moreover, the kinetics study showed PPIX production in less time for these mixtures. In the study of cream permeation of ex vivo skin in vitro by confocal fluorescence microscopy, we observed that the mixtures M3, M4 and M5 produced more PPIX in the skin layers than ALA and MAL. The histological analyses of the mixtures showed higher photodynamic damage on the surface and deeper layers of the skin after PDT, independent of the emulsion. The analysis in 48 hours predominantly observed the phase of the healing process regarding the inflammatory phase but there are signs along both macroscopic and histological analysis that the healing process concerning the subsequent stages of proliferation and remodeling are initiating in parallel. The mixture M4 in both emulsions had high amounts of PPIX formation in shorter incubation time. M4 emulsion O/A showed a lower photodynamic damage since the evolution of the healing process was faster suggesting to potential application in PDT facing cosmetic-aesthetic area. M4 already in W/O emulsion led to a greater photodynamic damage since the evolution of the healing process was slower suggesting to potential application in PDT facing oncology and skin diseases. Overall the proposed study had a positive impact on the optimization of photodynamic therapy for topical application.
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