Orientador: Lúcia Helena Simões da Costa Paiva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-11-07T13:42:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_Anderson_M.pdf: 3122120 bytes, checksum: dced5efa50ee11a7d5554366020908bb (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução: A prevalência de obesidade tem aumentado em todo o mundo e hoje já representa um problema de saúde pública. Na população feminina, seu aumento ocorre principalmente nos anos próximos da transição para menopausa. O aumento de peso representa um risco para diversas comorbidades, dentre elas um importante fator de risco para patologia endometrial. A etiologia e a patogênese dos pólipos não estão completamente esclarecidas. Estuda-se se o desenvolvimento dos pólipos endometriais está diretamente relacionado à presença de receptores hormonais, além de estar relacionado a mecanismos envolvidos à proliferação e à apoptose celular. Objetivos: Avaliar a imunoexpressão dos receptores de estrógeno (RE), progesterona (RP), Cox-2, Ki67 e Bcl-2 em pólipos endometriais benignos na pré e pós-menopausa e associação com a obesidade. Materiais e métodos: Dentre 1050 mulheres submetidas à histeroscopia cirúrgica no Hospital da Mulher Prof. Dr. Aristodemo Pinotti - CAISM/UNICAMP, de janeiro de 1998 a dezembro de 2008, 800 foram casos de polipectomia endometrial confirmados com exame anatomopatológico. Deste total, foram excluídas as usuárias de Tamoxifeno, as que faziam uso de terapia hormonal e os casos de pólipos malignos ou pré-malignos. Obteve-se uma amostra de 515 pólipos endometriais benignos em mulheres na pré e pós-menopausa. Foram avaliadas as expressões de RE, RP, Bcl-2, Ki67 e Cox-2, através de imuno-histoquímica, segundo a porcentagem de células coradas, intensidade da coloração e escore final. Os escores finais de RE, RP, Bcl-2, Cox-2 variam de 0 a 8 e o de Ki67 de 0 a 3. A mediana dos escores finais de RE, RP, Bcl-2, Cox-2 e Ki67 no epitélio glandular e no estroma dos pólipos foi comparada entre mulheres obesas e não obesas na pré e pós-menopausa, utilizando os testes qui-quadrado, exato de Fisher ou não paramétrico de Mann-Whitney. Resultados: A mediana do escore final de receptores hormonais mostrou maior expressão de RP no estroma e no epitélio glandular das mulheres obesas na pós-menopausa, sem diferença em relação à expressão dos RE. Em mulheres na pré-menopausa não houve diferença na expressão de RE e RP entre obesas e não obesas. Nos pólipos endometriais de mulheres pós-menopausadas houve maior expressão de Cox-2 e Bcl-2 no epitélio glandular das mulheres obesas do que em relação às mulheres não obesas. Não houve diferenças em relação ao estroma endometrial. Na pré-menopausa, houve maior expressão de Bcl-2 apenas no epitélio glandular das mulheres obesas. Não houve diferenças na expressão de Ki67 entre obesas e não obesas tanto na pós-menopausa quanto na pré-menopausa. Conclusões: Os pólipos de mulheres obesas apresentam, na pós-menopausa, maior expressão de RP glandular e estromal, Cox-2 glandular e Bcl-2 glandular, sem diferenças na expressão de Ki67. Estes dados sugerem que sua etiopatogênese dos pólipos em obesas parece estar mais relacionada aos receptores de progesterona, à inibição da apoptose e aos mecanismos relacionados à inflamação celular / Abstract: Introduction: The prevalence of obesity has increased worldwide and represents a public health problem nowadays. The female population, considerably presents its increase in the coming years of the transition to menopause. Weight gaining represents a risk for various comorbidities, but among them all, it is an important risk factor for the endometrial pathology. The polyps etiology and pathogenesis have not been completely clarified so far. It has been studied whether the endometrial polyps development is directly related to the presence of hormone receptors, besides being associated with mechanisms involved in the proliferation and cellular apoptosis.Objectives: To evaluate the immunoexpression of estrogen and progesterone receptors, Ki67, Bcl-2 and Cox-2 in benign endometrial polyps in pre and postmenopausal women and their association with obesity. Methods: It was observed that among 1050 women who underwent hysteroscopic surgery at the "Prof. Dr. José Aristodemo Pinotti" Women's Hospital-CAISM-UNICAMP from January 1998 to December 2008, 800 were confirmed with endometrial polyp anatomopathological diagnosis. Of this total amount, it was excluded tamoxifen users, those who used hormone therapy and cases of malignant or pre-malignant polyps. It was obtained a sample of 515 benign endometrial polyps in women before and after menopause. It was also assessed the expression of ER, PR, Bcl-2, COX-2 and Ki67 through immunohistochemistry according to stained cells percentage, staining intensity, and the final score. The ER, PR, Bcl-2, Cox-2 final score ranges from 0 to 8 and the Ki67 from 0 to 3). The ER, PR, Bcl-2, Cox-2 and Ki67 median final scores in the glandular epithelium and stroma of the polyps were compared among obese and nonobese women, in pre and postmenopausal condition, using the Chi-square Fisher's exact test or nonparametric Mann-Whitney test. Results: The hormonal receptors median final score has showed an increased expression of progesterone receptors in the stroma and glandular epithelium of postmenopausal obese women but there was no difference in expression of ER estrogen receptors. In premenopausal women, there was no difference in expression of ER and PR among obese and nonobese women. The endometrial polyps in postmenopausal women have showed a higher expression of Cox-2 and Bcl-2 in glandular epithelium in obese women rather than in nonobese women. There were no differences in the endometrial stroma. In premenopausal women, there was a higher expression of Bcl-2 only in the obese women glandular epithelium. There were no differences in Ki67 expression among obese and nonobese both postmenopausal and premenopausal women. Conclusions: Obese women polyps, in postmenopausal condition, have increased expression of glandular and stromal PR, Cox-2 and Bcl-2 glandular. However, there are no differences in the Ki67 expression . These data suggest that its etiopathogenesis in obese women polyps, seem to be related to progesterone receptors, apoptosis inhibition and also to mechanisms associated with cellular inflammation / Mestrado / Fisiopatologia Ginecológica / Mestre em Ciências da Saúde

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-31 / O carcinoma da mama é a neoplasia maligna mais freqüente entre as mulheres com grande impacto na mortalidade. Os estudos de quimioprevenção primária com tamoxifeno têm gerado boas expectativas e consideradas taxas de sucesso. Doses menores do tamoxifeno apresentam eficácia semelhante à dose padrão, com redução de custos e efeitos adversos. Estudou-se a imunorreação do anticorpo monoclonal Ki-67 (MIB-1) e a positividade dos receptores de estrogênio (1D5) e progesterona (PgR 636) no carcinoma de mama de mulheres tratadas com 10 mg de tamoxifeno por um período de 14 dias. Realizou-se estudo prospectivo, randomizado, com 38 mulheres, divididas em dois grupos: Grupo A: N = 20 (Grupo controle - sem medicação) e Grupo B: N = 18 (tamoxifeno 10 mg/dia por 14 dias). Todas as pacientes assinaram termo de consentimento previamente aprovado pelas duas instituições (Universidade Federal de São Paulo – Escola Paulista de Medicina e Hospital Materno Infantil de Goiânia-GO). A seguir foram submetidas à biópsia incisional e, após 14 dias, foi obtida nova amostra do tecido tumoral durante o tratamento cirúrgico definitivo. A positividade foi avaliada quantitativamente, contando-se no mínimo 1.000 células para cada lâmina. Para a análise estatística dos dados, foi utilizado o teste não paramétrico de Wilcoxon, fixandose α em 5%. Os dois grupos (A e B) foram considerados homogêneos em relação às variáveis de controle. No grupo A (controle) não houve redução estatisticamente significativa da positividade do Ki-67 (MIB-1) (p=0,627), e dos receptores de estrogênio (1D5) (p=0,296) e progesterona (PgR 636) (p=0,381). No grupo B (tamoxifeno 10 mg/dia) a porcentagem média de núcleos corados pelo Ki-67 (MIB-1) foi 24,7% antes e 10,4% após. Para o receptor de estrogênio (1D5), 59,5% antes e 25,9% após e para o receptor de progesterona (PgR 636), 59,3% e 29,6%, respectivamente. Houve redução significativa para os três marcadores (p<0,001). O tamoxifeno reduziu significativamente a positividade do anticorpo monoclonal Ki-67 (MIB-1), receptor de estrogênio (1D5) e receptor de progesterona (PgR 636) no epitélio mamário de pacientes com carcinoma, tratadas com tamoxifeno na dose de 10 mg por 14 dias. / Breast carcinoma is the most common malignancy among women, and it has a major impact on mortality. Studies of primary chemoprevention with tamoxifen have generated high expectations and considerable success rates. The efficacy of lower doses of tamoxifen is similar to that seen with the standard dose of the drug, and there is a reduction in medical care costs and adverse effects. The immune reaction to monoclonal antibody Ki-67 (MIB-1) and the expression of estrogen receptors (1D5) and progesterone receptors (PgR 636) in breast carcinoma were studied in patients treated with 10 mg of tamoxifen for a period of 14 days. A prospective randomized clinical trial was conducted with 38 patients divided into two groups: Group A: N = 20 (control group–without medication) and Group B: N = 18 (tamoxifen/10 mg/day for 14 days). All patients signed an informed consent term previously approved by both institutions (UNIFESP-EPM and Hospital Materno Infantil, Goiânia-GO). Patients underwent incisional biopsy before treatment and 14 days later a sample of tumor tissue was obtained during surgical treatment. Positivity was quantitatively assessed, counting at least 1.000 cells per slide. For statistical data analysis, a Wilcoxon non-parametric test was used, and α was set at 5%. Both groups (A and B) were considered homogeneous regarding control variables. In Group A (control), there was no statistically significant reduction in Ki-67 (MIB-1) (p=0.627), estrogen receptor (1D5) (p=0.296) and progesterone receptor positivity (PgR 636) (p=0.381). In Group B (tamoxifen 10 mg/day), the mean percentage of nuclei stained by Ki- 67 (MIB-1) was 24.7% before and 10.4% after tamoxifen treatment. Mean percentage of nuclei stained by estrogen receptor (1D5) was 59.5% before and 25.9% after tamoxifen treatment. Mean percentage of nuclei stained by progesterone receptor (PgR 636), was 59.3 before and 29.6% after tamoxifen treatment. A statistically significant reduction was found with the three markers (p<0.001). Tamoxifen significantly reduced monoclonal antibody Ki-67 (MIB-1), estrogen receptor (1D5) and progesterone receptor positivity (PgR 636) in the breast epithelium of patients with carcinoma, treated with a 10 mg dose of tamoxifen for 14 days. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-18Bitstream added on 2014-06-13T19:12:32Z : No. of bitstreams: 1 caetano_mc_me_araca.pdf: 1024075 bytes, checksum: aa12fb1ffe3cd0c2176481b1472ff87e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As células-tronco (stem cells) têm um papel fundamental nos processos reparativos e regenerativos da córnea. A exata localização destas é bem conhecida no olho do homem, bem como as suas funções. Entretanto, as mesmas ainda não foram descritas em medicina veterinária, sequer a sua localização em olhos de animais de companhia, tratando-se assim, de assunto que merece novas e originais investigações. Anticorpos monoclonais que reagem superficialmente com as citoqueratinas são empregados para determinar este tipo celular presente nos tecidos, no entanto, existem outros marcadores capazes de reagir antigenicamente com núcleos celulares. Entre eles, o PCNA (antígeno nuclear de proliferação celular) e o Ki-67 (antígeno de proliferação Ki-67) são capazes de marcar células em proliferação. Uma vez que isso nunca fora descrito anteriormente, e considerando-se a necessidade e importância científica em se determinar a localização de células em proliferação na superfície ocular de cães, o presente estudo teve por objetivos: 1) determinar a expressão de células em proliferação pela marcação imunoistoquímica com anticorpos monoclonais anti-PCNA e anti-MIB-1 (anticorpo monoclonal anti-Ki-67), bem como, sua localização na superfície ocular; 2) comparar se há diferença estatística significante na marcação dessas células em diferentes idades. Para tanto, foram utilizados 24 cães jovens e adultos, sadios, dos quais o bulbo ocular esquerdo foi removido, fixado e corado pela H.E. (hematoxilina e eosina), além da imunoistoquímica empregando-se os anticorpos monoclonais anti-PCNA e anti-MIB-1. Concluiu-se que a presença de células em proliferação imunomarcadas pelo PCNA e pelo MIB-1 foi observada em diferentes tecidos da superfície ocular de cães, sendo os tecidos mais marcados: o limbo e o epitélio da córnea... / The stem-cells has a fundamental paper in process of cornea s tissue repair and regeneration. In man, the well-know localization and functions had been descriebed a long time ago, however the same ones had not yet been descriebed in veterinary medicine, at least your localization in eyes of company animals, what deserve new and original inquiries. Monoclonais antibodies that react superficially with the cytokeratins are used to determine this cell type presence in ocular surface. However, exist another markers capable to react with cell nucleoli, for example, PCNA and MIB-1 are capable to mark proliferation cells. Considering the necessity and scientific importance to determining the localization of proliferation cells on dog s ocular surface, a time that, never was descriebed previously, the present study had for objectives: 1) determineted the expression of proliferation cells immunohistochemically by PCNA and MIB-1 and its localization in ocular surface; 2) compare if has statistically significant difference in immunoexpression of proliferation cells in different ages. In the study was used 24 healthy dogs, young and adults, witch had the left eyes removed, fixed in buffered formalin and stained with H.E. (hematoxilin and eosin) and with monoclonal antibodies anti-PCNA and anti-MIB-1. The presence of immunostained cells was most observed in corneal ephithelium and limbo. Probably the immunostained cells are stem-cells in dog s ocular surface, however for such evidence it is necessary ...(Complete abstract click electronic address below)

Orientador: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Adriana Morales / Banca: Renée Laufer Amorim / Resumo: As células-tronco (stem cells) têm um papel fundamental nos processos reparativos e regenerativos da córnea. A exata localização destas é bem conhecida no olho do homem, bem como as suas funções. Entretanto, as mesmas ainda não foram descritas em medicina veterinária, sequer a sua localização em olhos de animais de companhia, tratando-se assim, de assunto que merece novas e originais investigações. Anticorpos monoclonais que reagem superficialmente com as citoqueratinas são empregados para determinar este tipo celular presente nos tecidos, no entanto, existem outros marcadores capazes de reagir antigenicamente com núcleos celulares. Entre eles, o PCNA (antígeno nuclear de proliferação celular) e o Ki-67 (antígeno de proliferação Ki-67) são capazes de marcar células em proliferação. Uma vez que isso nunca fora descrito anteriormente, e considerando-se a necessidade e importância científica em se determinar a localização de células em proliferação na superfície ocular de cães, o presente estudo teve por objetivos: 1) determinar a expressão de células em proliferação pela marcação imunoistoquímica com anticorpos monoclonais anti-PCNA e anti-MIB-1 (anticorpo monoclonal anti-Ki-67), bem como, sua localização na superfície ocular; 2) comparar se há diferença estatística significante na marcação dessas células em diferentes idades. Para tanto, foram utilizados 24 cães jovens e adultos, sadios, dos quais o bulbo ocular esquerdo foi removido, fixado e corado pela H.E. (hematoxilina e eosina), além da imunoistoquímica empregando-se os anticorpos monoclonais anti-PCNA e anti-MIB-1. Concluiu-se que a presença de células em proliferação imunomarcadas pelo PCNA e pelo MIB-1 foi observada em diferentes tecidos da superfície ocular de cães, sendo os tecidos mais marcados: o limbo e o epitélio da córnea...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The stem-cells has a fundamental paper in process of cornea’s tissue repair and regeneration. In man, the well-know localization and functions had been descriebed a long time ago, however the same ones had not yet been descriebed in veterinary medicine, at least your localization in eyes of company animals, what deserve new and original inquiries. Monoclonais antibodies that react superficially with the cytokeratins are used to determine this cell type presence in ocular surface. However, exist another markers capable to react with cell nucleoli, for example, PCNA and MIB-1 are capable to mark proliferation cells. Considering the necessity and scientific importance to determining the localization of proliferation cells on dog’s ocular surface, a time that, never was descriebed previously, the present study had for objectives: 1) determineted the expression of proliferation cells immunohistochemically by PCNA and MIB-1 and its localization in ocular surface; 2) compare if has statistically significant difference in immunoexpression of proliferation cells in different ages. In the study was used 24 healthy dogs, young and adults, witch had the left eyes removed, fixed in buffered formalin and stained with H.E. (hematoxilin and eosin) and with monoclonal antibodies anti-PCNA and anti-MIB-1. The presence of immunostained cells was most observed in corneal ephithelium and limbo. Probably the immunostained cells are stem-cells in dog’s ocular surface, however for such evidence it is necessary ...(Complete abstract click electronic address below) / Mestre

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T16:39:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bonfitto_VeraLuciaLeite_D.pdf: 2371427 bytes, checksum: 9766d47098dc3a0a8725d3d05732303e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A angiogênese induzida pelo tumor é o resultado não somente do balanço entre indutores e inibidores da angiogênese, mas também da demanda metabólica tumoral. Nos carcinomas salivares com diferenciação mioepitelial, a densidade microvascular (DMV) é mais baixa do que nos carcinomas sem tal diferenciação. Apesar do fenótipo antiangiogênico da célula mioepitelial, as razões para essa associação ainda não foram completamente esclarecidas. Com a finalidade de aumentar o conhecimento sobre os fenômenos envolvidos na vascularização de carcinomas salivares, analisamos a DMV em tumores de diferentes tipos e graus histológicos. Além disso, em carcinomas adenóides císticos (CAC) com transformação para alto grau (CAC-TAG) analisamos a expressão de proteínas relacionadas ao metabolismo celular e a DMV entre áreas convencionais e transformadas. Estes achados foram também comparados com aqueles encontrados no CAC clássico. Material e Métodos: Em 42 carcinomas salivares com diferenciação mioepitelial e em 56 sem tal diferenciação, a vascularização tumoral foi avaliada através da DMV em lâminas coradas pelo CD34 (marcador pan-endotelial) e pelo CD105 (marcador de neoangiogênese). Além disso, em 7 casos de CAC-TAG e em 18 CACs foram examinadas as expressões dos marcadores relacionados ao metabolismo celular: transportador de glicose transmembrana (GLUT1) e antígeno mitocondrial (AMT), e do Ki- 67 (para análise do índice de proliferação). Resultados: Somente a DMV-CD105 foi significantemente diferente entre os diferentes subgrupos de tumores. Os tumores de alto grau apresentaram DMV-CD105 significantemente aumentada em relação aos de baixo grau. Os carcinomas com diferenciação mioepitelial e o carcinoma de células acinares mostraram DMV-CD105 semelhantes. Nos CAC-TAG, o componente transformado caracterizava-se pela perda da camada mioepitelial e índice aumentado de Ki-67. As áreas convencionais do CAC-TAG e o CAC clássico foram negativas para GLUT1 na maioria dos casos (83,3% e 81,3%, respectivamente) e exibiam expressão baixa ou ausente de AMT (100% e 66,7% dos casos respectivamente). Em contraste, as áreas transformadas do CAC-TAG exibiam aumento da expressão de GLUT1 (50% dos casos) e de AMT (100%). No CAC-TAG, comparando a DMV entre áreas convencionais e transformadas não se notou alteração significante. Conclusões: Nos carcinomas salivares, as células mioepiteliais não aparentam desempenhar papel crucial na vascularização tumoral, a qual é influenciada por fatores não necessariamente relacionados à demanda metabólica e progressão tumoral. A correlação da neoangiogênese com grau histológico tumoral sugere que a agressividade do carcinoma salivar pode ser um dos fatores indutores, embora por mecanismos ainda não esclarecidos / Abstract: Tumor-induced angiogenesis is not only determined by the net balance between inductors and inhibitors but also by factors related to tumor metabolic demand. Salivary carcinomas with myoepithelial component have been reported to have a lower microvascular density (MVD) than others without such cells. Despite the anti-angiogenic phenotype of the myoepithelial cells, the reasons for this association remain unclear so far. To broaden our understanding of phenomena involved in vascularization of salivary carcinomas we analyzed the MVD in tumors of different histological types and grade. In addition, in adenoid cystic carcinomas (ACC) with high-grade transformation (ACC-HGT), the expression of proteins linked to cellular metabolism as well as MVD was compared between conventional and HGT areas. We also compared the findings with ordinary ACC. Material and Methods: In 42 salivary carcinomas with myoepithelial differentiation and 56 without, tumor vascularization was assessed by measuring MVD in CD34 (pan-endothelial marker) and CD105 (neoangiogenesis marker) stained sections. In addition, in seven cases of ACC-HGT and in 18 ACCs the expressions of GLUT1, mitochondrial antigen (MTA) and Ki-67 (for evaluation of proliferation index) were also examined. Results: Only CD105-MVD was significantly different among the different tumor subgroups. High-grade tumors showed significantly higher CD105-MVD. Carcinomas with myoepithelial differentiation and acinic cell carcinomas exhibited similar CD105-MVD. In ACC-HGT, loss of myoepithelial layer was found only in the HGT component, which also showed higher Ki-67 index. Conventional areas of both ACC-HGT and ACC were negative for GLUT1 in most cases (83.3% and 81.3%, respectively) and exhibited low or no expression of MTA (100% and 66.7% of cases respectively). In contrast, the HGT component presented increased expression of both proteins (GLUT1+ in 50% of cases; MTA+ in 100%). MVD did not differ significantly between conventional and HGT components. Conclusions: In salivary carcinomas, myoepithelial cells do not appear to play a pivotal role in tumor vascularization, which is influenced by factors not necessarily related to metabolic demand and carcinoma progression. The correlation between tumor degree and neoangiogenesis (MVD-CD105) suggests that carcinoma aggressiveness may be one of the inductors but the mechanisms remain to be clarified / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Luiz Carlos Zeferino / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T23:00:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_LeonardoRobertoda_M.pdf: 1256988 bytes, checksum: f80a4677bb94a6755e6004d6c8021f20 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Introdução: Os carcinomas luminais de mama apresentam resposta variável à quimioterapia neoadjuvante. A identificação precoce das pacientes que se beneficiarão desse tratamento é importante para se evitar tratamento desnecessário e suas decorrentes toxicidades. O objetivo desse estudo é identificar preditores de resposta à quimioterapia neoadjuvante no carcinoma luminal de mama. Metodologia: Nós incluímos pacientes com carcinoma luminal de mama tratadas com quimioterapia pré-operatória em nosso serviço, no anos de 2013 e 2014. Dados demográficos, clínicos e patológicos foram coletados. Análises de imunoistoquímica para receptores de estrogênio e progesterona, HER2 e Ki67 foram realizadas em amostras obtidas antes do tratamento. A quimioterapia foi composta por esquema baseado em antraciclinas e taxanos. Resposta patológica completa (RPC) foi definida como ausência de doença invasora nas peças cirúrgicas da mama e da axila. Resultados: Foram incluídas cento e vinte pacientes, totalizando 131 tumores. As taxas de RPC foram de 6,11% na amostra geral, 5,26% para tumores luminais B-like (HER2-negativos) e 12,9% para luminais B-like (HER2-positivos). Nenhum preditor independente de RPC foi identificado. Cinquenta e dois tumores (39,7%) apresentaram resposta clínica completa, e grau histológico III (OR=9,05; IC95% 1,07-7,98; p=0,04), status pré-menopausal (OR=9,05; IC95% 2,01-40,87; p=0,004), e índice de Ki67 ? 20% (OR=2,71; IC95% 1,04-6,99; p=0,04) foram preditores independentes desse desfecho. A análise da curva ROC mostrou que o índice de Ki67 pré-tratamento tem baixo desempenho na identificação de pacientes que apresentarão resposta clínica completa (área sob a curva=0,660; IC95% 0,563-0,758). Pacientes com resposta clínica completa apresentaram maior chance de serem submetidas a cirurgia conservadora. Conclusões: A taxa de RPC é baixa entre os carcinomas luminais de mama submetidos a quimioterapia neoadjuvante. No entanto, parâmetros clinico-patológicos podem ajudar a identificar pacientes que apresentarão resposta clínica completa / Abstract: Purpose: Luminal breast cancers show a variable response to neoadjuvant chemotherapy. The early determination of those patients who will benefit from this treatment is important to avoid overtreatment and the resulting toxicity. The purpose of this study is to identify predictors of response to neoadjuvant chemotherapy in luminal breast cancer. Methods: We included patients with luminal breast cancer treated with neoadjuvant chemotherapy at the institution in 2013 and 2014. Demographic, clinical, and pathological data were collected. Immunohistochemistry analyses of estrogen and progesteron receptors, HER2 and Ki67 were conducted in samples obtained before treatment. Chemotherapy consisted in anthracycline/taxane-based scheme. Pathologic complete response was defined as the absence of invasive disease in the breast and axilla surgical specimens. Results: One hundred and twenty patients, totaling 131 tumors were included. Pathologic complete response rates were 6.11% in the overall sample, 5.26% for luminal B-like (HER2-negative) tumors and 12.9% for luminal B-like (HER2-positive) tumors. None independent predictor of pathologic complete response was identified. Fifty-two tumors (39,7%) showed complete clinical response, and histologic grade III (OR=2.92; 95% CI 1.07-7.98; p = 0.04), premenopausal status (OR=9.05, 95% CI 2.01-40.87; p = 0.004), Ki67 index ? 20% (OR=2.71, 95% CI 1.04 to 6,99; p = 0.04) were independent predictors for this outcome. ROC curve analysis showed that Ki67 index has a poor performance in identifying patients who will present complete clinical response (area under the curve=0.660, 95% CI 0.563-0.758). Patients with complete clinical response were more likely to be submitted to conservative surgery. Conclusions: Pathologic complete response rate is low among luminal tumors undergoing neoadjuvant chemotherapy. However, clinicopathological parameters can help identify patients who will present complete clinical response / Mestrado / Oncologia Ginecológica e Mamária / Mestre em Ciências da Saúde

O líquen escleroso vulvar é uma doença crônica e benigna, porém apresenta um potencial de malignização para o carcinoma de células escamosas de vulva. Foram estudadas trinta doentes com líquen escleroso vulvar, divididas em três grupos, que fizeram uso tópico de propionato de clobetasol a 0,05%, testosterona a 2% e um placebo, para avaliar a evolução dos sintomas e o comportamento das células marcadas com o anticorpo Ki-67 e a proteína p53 antes e após os tratamentos. Observou-se melhora dos sintomas clínicos com o uso do clobetasol e da testosterona, que foi estatisticamente superior ao placebo (p<0,01). Observou-se diminuição significante das células marcadas com Ki-67 após o tratamento das doentes com o clobetasol (p<0,01) e com a testosterona (p<0,02). Enquanto, nas doentes que utilizaram placebo, observou-se um aumento do Ki-67. Em relação à análise das células marcadas com a proteína p53 também observou-se diminuição significante após o tratamento com o clobetasol (p<0,01) e com a testosterona (p<0,01). Enquanto no grupo placebo observou-se um aumento do p53. Quando se compara a variação do p53 entre os grupos clobetasol, testosterona e placebo observou-se uma diminuição do p53 estatisticamente superior (p<0,001) nas doentes que utilizaram clobetasol. Assim, os resultados mostram uma redução dos marcadores celulares após os tratamentos, e com o p53 a diminuição foi estatisticamente maior no grupo que utilizou clobetasol, sugerindo a eficácia desse tratamento / Vulvar Lichen Sclerosus consists of a benign chronic disease, however featuring a malignant potential for vulvar squamous cell carcinoma. The present study targeted 30 patients diagnosed Vulvar Lichen Sclerosus, divided in three groups, and who made topical use of clobetasol propionate at 0.05%, testosterone at 2% and a placebo, so as to assess the evolution of the symptoms and the behavior of the cells marked with antibody Ki-67 and protein p53, before and after the treatments. The administration of clobetasol and testosterone has proven effective in the management of the clinical symptoms, which turned out to be statistically higher than the placebo (p<0.01). The number of cells marked with Ki-67 decreased significantly patients treated with clobetasol (p<0.01) and testosterone (p<0.02), while the number of such cells increased in those patients who made use of the placebo. The number of cells marked with protein p53 also decreased significantly after the treatment with clobetasol (p<0.01) and testosterone (p<0.01), whereas the placebo group revealed an increased p53. When comparing the decrease of the p53 in the clobetasol, testosterone and placebo groups, we noted a decrease of the p53 statistically higher (p<0.001) in patients under clobetasol; suggesting a reduction in the cellular markers after the treatment. As for the p53, the decrease was statistically higher in the group under clobetasol, suggesting the efficacy of the treatment.

Carcinomas de mama são heterogêneos e consistem de diversos tipos celulares. Perfis de expressão gênica usando DNA microarrays identificaram quatro subtipos moleculares fundamentais baseados na expressão de receptores hormonais (estrógeno e progesterona) e de fator de crescimento epidérmico (HER2) (luminal tipo A, luminal tipo B, tumores expressando somente HER2 e triplos negativos) refletindo a heterogeneidade molecular dos carcinomas. Sugeriu-se que esta heterogeneidade advém da presença de células tronco tumorais com a capacidade de se diferenciar ao longo de vias divergentes e outros estudos sugeriram que a presença destas células tronco tumorais pode ser evidenciada pela análise fenotípica de CD44 e CD24. Nosso objetivo foi detectar a freqüência de CD24 e CD44 isolados ou combinados, analisados por imunoistoquímica e sua associação com os subtipos moleculares e com diversos marcadores biológicos em 95 casos de carcinoma ductal infiltrativo organizados em um microarranjo tissular (TMA). Realizamos determinações imunoistoquímicas de CD44, CD24, citoqueratinas (CK5, CK6, CK18), claudina 7 e Ki67. Subgrupos moleculares foram definidos pela expressão imunoistoquímica de RE, RP e HER2. Resultados: Os tumores apresentaram uma maior freqüência dos grupos luminais (49,5%) atribuído à alta expressão de RP ou RE (47,4%), e freqüência menor de tumores triplo negativos (21,5%) e HER2 (9,5%). Os fenótipos CD44+CD24- e CD44-/CD24+ estavam respectivamente presentes em 8,4% e 16,8% dos tumores e o fenótipo duplamente positivo foi predominante (45,3%). Ausência de ambas as proteínas foi evidente em 6,3% dos tumores. Tumores com fenótipo CD44+CD24- (definido como um marcador de células tronco tumorais por estudos in vitro) foram mais comuns em tumores triplos negativos mas não demonstraram nenhum tipo de associação com características clinico-patológicas e demais marcadores. Este fenótipo não foi expresso nos tumores HER2 positivos. O fenótipo duplamente positivo CD44+CD24+ mostrou-se mais freqüente nos subtipos luminais ou com alta expressão de HER2. Os fenótipos (CD44-CD24+ e CD44-CD24-) não mostraram associação com os subgrupos. Tumores expressando CD24+ isolado, com grande freqüência deste marcador (74,7%), mostraram significativa associação com positividade do RE, RP e Ki67 e uma significância marginal com marcadores de diferenciação luminal (CK18 e claudina 7, p = 0,14). Nenhuma associação foi observada com tumores CD44+ quando analisado isoladamente. A expressão de claudina 7 e Ki67 não mostrou associação com os subgrupos e a expressão de CK5 apresentou uma tendência a uma maior negatividade nos subtipos luminais e uma freqüência maior de positividade nos tumores HER2 e triplo negativos. De outro lado, associação da freqüência da expressão positiva de CK18 nos subgrupos luminais foi estatisticamente significativa (p = 0,003). Para se determinar se CD24+ e CD44+ e seus subtipos combinados poderiam afetar a sobrevida global e o intervalo livre da doença preparamos curvas de sobrevida de acordo com Kaplan-Meier que foram analisadas estatisticamente (log rank test). A mediana do período de seguimento das pacientes do nosso estudo foi de 4,8 anos (0,36 10,9 anos). Estas análises não demostraram influência dos fenótipos CD44+CD24- ou CD44+ sobre a sobrevida global ou intervalo livre de doença, mas observamos uma tendência a um prognóstico mais favorável. Interessantemente tumores HER2 positivos não expressaram este fenótipo, sugerindo que outros marcadores de células tronco caracterizam estes tumores. O fenótipo CD44-CD24+ mostrou-se mais freqüente nos tumores luminais, mas não apresentou correlação com marcadores clínico-patológicos ou biológicos analisados. Não houve diferenças significativas com respeito a sobrevida global ou intervalo livre de doença . A expressão de CD24+ isolado associou-se a expressão dos marcadores de diferenciação celular e a uma diminuição do intervalo livre de doença. A sobrevida livre de doença (10 anos) indicou uma percentagem de 94,1% para CD24- e 72,1% para os pacientes CD24+ enquanto a sobrevida global foi de 84,2% para os pacientes CD24- e 72,1% para os pacientes CD24+. Citoqueratinas (CK5, CK18) e Ki67 não influenciaram a sobrevida e o intervalo livre de doença. No entanto a expressão positiva de claudina 7, embora não associada à sobrevida global, foi estatisticamente associada ao decréscimo do intervalo livre da doença (p = 0,05). Conclusão: As características dos tumores CD44+CD24- e sua tendência a associação um prognóstico mais favorável parecem não estar de acordo com as propriedades descritas na literatura para células tronco e enfatizam a necessidade de outros marcadores. A determinação da freqüência de CD44+ e claudina 7 positiva pode contribuir para a análise do prognóstico em carcinoma de mama / Background: Breast carcinomas consist phenotypically of diverse cells and exhibit intra tumoral heterogeneity being stratified in several subgroups based in gene expression profiles or histochemical biomarkers. It was suggested that this heterogeneity is derived in part from the transformation of different subsets of cancer stem cells (CSC) in each intrinsic subgroup. The presence of CSC can be evidenced by phenotypic analysis of CD44 e CD24. This study aimed to identify the CD24 and CD44 immunophenotype within invasive ductal breast carcinoma (IDC) subtypes and determine its influence on prognosis as well as its association with the expression of Ki67, citokeratins (CK5, CK6 and CK18) and claudin-7. Methods: Immuno expression of CD44 and CD24 alone or in combination was investigated in 95 IDC cases arranged in a tissue microarray (TMA). The association with intrinsic subgroups defined as luminal A (ER+, PR+, HER2-), luminal B (ER and or PR+, HER2+), HER2 subtype (ER-, PR-, HER2+) and triple negative (ER-, PR-, HER2-), and the other markers and prognosis was analyzed. Results: CD44+CD24- and CD44-CD24+ were respectively presents in 8.4% and 16.8% of the tumors, a lack of both proteins was detected in 6.3%, while CD44+CD24+ was determined in 45.3% of the tumors. Although there was no significant correlation between subgroups and different phenotypes, the CD44+CD24- phenotype was more common in the basal subgroups but the frequency of this subtype has not been associated with clinical characteristic or biological markers. The phenotype was absent in HER2 tumors whereas luminal tumors are enriched in CD44-CD24+ and CD44+CD24+ cells which did not show associations with clinical/biological markers features. There was also no significant association of the subtypes with the event free (DFS) and overall survival (OS) but the CD44+CD24- phenotype showed a more favorable prognostic as compared to CD44-CD44+ phenotype that showed a worse prognosis (p = 0.26) (median follow up, 4.8 years) CD44+ alone was evident in 57.9%, while CD24+ was positive in 74.7% of the tumors, the latter showing a significant association with ER, PR and Ki67 and a marginal association with CK18 and claudin-7. Expression of claudin-7 and Ki67 did not associate with the cancer subgroups, while a positive association between CK18 and the luminal subgroups was found. CD44+ was not significantly associated with OS (p = 0.684) and DFS (p = 0.386) whereas CD24+ expression was also no significantly associated with OS (p = 0.32) but was associated with a decrease in DFS (p = 0.07). CK5, CK18 and Ki67 expression had no influence in OS or DFS, however claudin-7 positive although not statistically associated with OS, was associated with reduced DFS (p = 0.05). Conclusions: The heterogeneity of cells with several CD44CD24 expression may indicate the presence of different stem cell populations. Ocurrence of CD44+CD24- phenotype is more common in triple negative tumors and lower in tumors of luminal type and absent in HER2 tumors. Although not associated significantly with patho-biological markers or OS and DFS, the CD44+CD24- phenotype has a tendency to be a favorable prognostic marker in breast cancer raising the possibilty that the putative tumorigenic ability may no be restricted to cells of this phenotype. The presence of CD44-CD24+ may indicat a worse prognosis. CD24+ was associated with ER, PR, Ki67and showed a marginal association with CK18 and claudin-7. CD24 and Claudin-7 positivity were the only biological markers associated with reduced DFS. These two investigated markers can be used to improve the assessement of prognosis in breast cancer

INTRODUÇÃO: Para os pacientes portadores de transposição das grandes artérias que perderam a chance da cirurgia de Jatene nas primeiras semanas de vida, indica-se realizar o preparo ventricular através da bandagem do tronco pulmonar (BTP), objetivando causar aumento na massa miocárdica. Entretanto, com o tempo, a câmara hipertrofiada pode apresentar disfunção contrátil; portanto, é importante conhecer a qualidade do tecido preparado, uma vez que já se sabe que tanto os miocardiócitos (MCD) quanto as células do interstício e vasos (I/V) são capazes de proliferar após o período neonatal. Baseando-se no condicionamento físico de atletas e considerando-se que os músculos cardíaco e esquelético são ambos estriados, postula-se a hipótese de que o tipo de preparo ventricular possa influenciar nas características do miocárdio treinado. OBJETIVOS: Identificar o tipo de mecanismo adaptativo (hipertrofia/hiperplasia) envolvido no preparo rápido do ventrículo pulmonar submetido à sobrecarga de pressão por meio de BTP, através da análise dos MCD e células do I/V, verificando se existem diferenças em relação ao tipo de treinamento (contínuo x intermitente) em comparação com os controles. MÉTODOS: Foram estudados experimentalmente 21 cabritos após o período neonatal, divididos em três grupos (C = grupo controle, n = 7, sem procedimento cirúrgico; EC = grupo de estimulação contínua, n = 7, com bandagem progressiva e permanente do tronco pulmonar durante 96 horas; EI = grupo de estimulação intermitente, n = 7, com bandagem progressiva, 12 horas ao dia, totalizando 48 horas). Todos foram submetidos a estudo ecocardiográfico basal e aqueles dos grupos EC e EI a ecocardiogramas diários para verificar a aquisição de massa muscular do ventrículo direito (VD). Após o estudo, os animais foram sacrificados, os corações retirados e cortes histológicos do VD, ventrículo esquerdo (VE) e septo interventricular (S) fixados em formalina e processados para análise. Foram estudados a porcentagem de área de colágeno através do Picro-sirius, o diâmetro dos MCD e seus respectivos núcleos e o número de MCD e células do I/V marcadas com Ki-67. As células marcadas foram avaliadas por campo microscópico e por índice (número de células Ki-67+/2000 células). O nível de significância considerado foi de 0,05. RESULTADOS: Ambos os grupos estimulados apresentaram ganho significativo de massa muscular do VD (p < 0,05). Não houve aumento na porcentagem de colágeno do VD nos grupos treinados (p = 0,403). Considerando-se o VD, os grupos EC e EI apresentaram diâmetro dos MCD maior que o grupo controle (p < 0,001), ocorrendo o mesmo com os respectivos núcleos (EI x C: p < 0,001 e EC x C: p = 0,005). O número de MCD marcados com Ki-67 foi maior no VD dos grupos estimulados comparado com o VE (p = 0,009, índice de proliferação; p = 0,001, contagem por campo), bem como para as células do I/V (p < 0,001, contagem por campo e índice). CONCLUSÕES: Tanto hipertrofia quanto hiperplasia celular estão envolvidas na adaptação do ventrículo pulmonar submetido à sobrecarga sistólica através da BTP. Ambos os tipos de condicionamento (contínuo e intermitente) provocaram hipertrofia e hiperplasia dos MCD, induziram também à mitose das células do I/V, sem deposição de colágeno intersticial ao final do experimento. / INTRODUCTION: Rapid ventricular conditioning induced by pulmonary artery banding (PAB) has been indicated to those patients with transposition of the great arteries (TGA) who have lost the chance for arterial switch operation ? Jatene?s procedure ? aiming at induce myocardial mass increase. However, with time, hypertrophied chamber may exhibit contractile dysfunction, so that, it is important to assess quality of the prepared tissue, once it is of knowledge that both cardiomyocytes (CMC) and interstitial/vessel (I/V) cells are capable of proliferating after neonatal period. Based on fitness of athletes and considering that cardiac and skeletal muscles are both striated, there is the hypothesis that the type of ventricular prepare may influence the characteristics of the training myocardium. OBJECTIVES: Through CMC and I/V cells analysis, identifies the type of adaptive mechanism (hypertrophy/ hyperplasia) involved in rapid prepare of subpulmonary ventricle submitted to pressure overload by PAB, and verifies if there are differences in relation to the kind of training (continuous x intermittent), comparing them to the controls. METHODS: Twenty-one goats, beyond neonatal period, were experimentally studied. They were divided in three groups: C (control group, n = 7, with no surgical procedure); CS (continuous stimulation group, n = 7, with progressive and permanent PAB, during 96 hours); IS (intermittent stimulation group, n = 7, with progressive PAB, 12 hours/day, totalizing 48 hours). All the animals were submitted to basal echocardiograms and those from CS and IS groups to diary echocardiograms to verify right ventricular (RV) muscular mass acquisition. After the study, goats were killed, hearts excised and histological sections from RV, left ventricle (LV) and ventricular septum (VS) were formalin fixed and histologically processed. Collagen area fraction (through Picro-sirius red staining), CMC and respective nuclei diameter, and number of CMC and I/V cells Ki-67 positive were studied. Marked cells were analysed per high-power fields and by index (Ki-67 positive cells/2000 cells). The statistical significant level was set at 5%. RESULTS: Both stimulated groups presented significant RV muscular mass increase (p < 0.05). There were no augmentation in RV collagen area fraction in training groups (p = 0.403). Considering the RV, CS and IS groups showed an increase in CMC diameter compared to the control group (p < 0.01), occurring the same to respective nuclei (EI x C: p < 0.001 e EC x C: p = 0.005). Number of CMC marked with Ki-67 was greater in RV from stimulated groups in relation to LV (p = 0.009, proliferation index; p = 0.001, number/high-power fields); the same occurred to I/V cells (proliferation index and number/high-power fields: p < 0.001). CONCLUSIONS: Both cell hypertrophy and hyperplasia are involved in adaptation of the pulmonary ventricle submitted to pressure overload through PAB. Both types of conditioning (continuous and intermittent) caused CMC hypertrophy and hyperplasia, besides induced I/V cells mitosis, without interstitial collagen deposition at the end of experiment.

Os tumores carcinoides broncopulmonares típicos são considerados tumores de baixo grau de malignidade, o que faz com que muitas vezes seja negligenciada sua capacidade de gerar metástases e levar a óbito. A atual impossibilidade de se fazer predições fidedignas do potencial metastático para individualizar a terapêutica e o manejo clínico do paciente portador de tumor carcinoide típico muitas vezes impõe situações de dúvida nas decisões da prática clínica diária. O conhecimento das características moleculares e genéticas desses tumores é a esperança de melhor compreensão de sua história natural, da identificação de seus fatores prognósticos e da avaliação de novas propostas terapêuticas. O objetivo deste estudo foi quantificar três imunomarcadores: o D2-40, o CD-34 e o Ki-67 e avaliar se eles são capazes de predizer metástase. Como informação adicional também foram avaliadas as variáveis clínicas e suas associações com metástases. Material e métodos: Foram analisados prontuários de 97 pacientes submetidos à cirurgia para tratamento de tumor carcinoide típico broncopulmonar e que apresentavam período de acompanhamento pós operatório de cinco anos completos. Foi estabelecido um banco de dados epidemiológicos, anátomopatológicos, cirúrgicos e clínicos relacionados à doença. Os blocos de parafina contendo os tumores primários, metastáticos e os linfonodos ressecados foram recuperados e reavaliados por dois patologistas para confirmação do diagnóstico histológico. Após confirmação diagnóstica foram realizadas as reações imunohistoquímicas para o D2-40, o CD34 e Ki-67. As variáveis demografia, gênero, idade, localização do tumor, tamanho do tumor, margem comprometida, total de linfonodos dissecados e a quantificação dos marcadores Ki-67, CD34 e podoplanina (área linfática e densidade) foram comparadas a cinco desfechos: metástase linfática; metástase em linfonodos hilares, peribrônquicos e pulmonares ipsilaterais (N1); metástase em linfonodos mediastinais ipsilaterais (N2); metástase hematogênica; metástase linfática ou hematogênica. Para análise estatística adotou-se o valor de significância <= 5% (p <= 0,05). Resultados: Há imunoexpressão do D2-40, do CD-34 e do KI67 nos tumores carcinóides broncopulmonares típicos, sendo possível sua quantificação. Nessa casuística não foi detectada a relação dos mesmos com metástases. Dentre as variáveis clínicas estudadas, a margem cirúrgica comprometida apresentou associação com metástase hematogênica (Mann-Witney, p=0,03) e o gênero masculino apresentou associação marginal com metástase linfática (p=0,051) / Typical bronchopulmonary carcinoid tumors are slow-growing tumors considered to be of low malignancy, a fact that often underscores their capacity to generate metastasis that leads to death. The literature does not contain any assessment of the metastatic potential that would allow for individualized and optimized therapy that could have a positive impact upon the survival rate of patients. Genetic and biomolecular studies are the most promising venues for better comprehension of the behavior and natural history of such tumors. The objective of this investigation was to analyze three immunomarkers associated to malignity phenotypes: D2-40, CD-34, and Ki-67, and to verify whether or not they are associated to metastasis. D2-40 is a specific marker of the proliferation of the lymphatic endothelium and allows for the quantification of lymphangiogenesis. CD-34 identifies the endothelial cells of micro vessels and quantifies angiogenesis. Ki-67 in turn is a marker of neoplasia cell proliferation. As additional information several clinical variables were scrutinized for their association to metastasis. Ninety-seven subjects were assessed herein. These had undergone surgery for typical bronchopulmonary carcinoid tumor and all had complied with a full 5-year follow-up period. The paraffin blocks containing the primary and metastatic tumors and the dried lymph nodes were recovered. Once the histologic diagnosis was confirmed immunohistochemical reactions were performed for D2-40, Ki-67, and CD-34. The variables demography, gender, age, tumor site, tumor size, compromised margin, total dissected lymph nodes and quantification of D2-40 (lymphatic area and density), Ki-67 and CD-34 markers were compared to 5 outcomes: lymphatic metastasis, metastasis in hilar, peribronchic and ipsilateral pulmonary lymph nodes (N1), metastasis in ipsilateral mediastinal lymph nodes (N2), haematogenic metastasis, and lymphatic or haematogenic metastasis. It was concluded that there is immunoexpression of D2-40, CD-34 and Ki-67 markers in typical bronchopulmonary carcinoid tumors, and their quantification was possible, but in this casuistic their relation to metastasis was not detected. Among the clinical variables that were investigated the compromised surgical margin presented association with haematogenic metastasis (Mann-Witney, p=0.03), and the male gender was boderline associated to lymphatic metastasis (p=0,051)