Submitted by Geverson Façanha da Silva (jeffacanha@gmail.com) on 2018-10-17T18:53:05Z No. of bitstreams: 1 Tese Geverson.pdf: 2521420 bytes, checksum: 8bb93cbf4beb945034e563dec4772721 (MD5) / Approved for entry into archive by PPGQ Química (ppgqsecretaria@gmail.com) on 2018-10-29T15:09:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Geverson.pdf: 2521420 bytes, checksum: 8bb93cbf4beb945034e563dec4772721 (MD5) / Rejected by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br), reason: No depósito deve consta: PDF da tese, Ata ou Folha de Provação e Carta de Encaminhamento para o Autodepósito. Informações em: http://biblioteca.ufam.edu.br/servicos/teses-e-dissertacoes on 2018-10-29T15:30:19Z (GMT) / Submitted by Geverson Façanha da Silva (jeffacanha@gmail.com) on 2018-11-11T22:04:50Z No. of bitstreams: 4 Tese Geverson.pdf: 2521420 bytes, checksum: 8bb93cbf4beb945034e563dec4772721 (MD5) CartaEncaminhamentoAutodepósito.pdf: 88758 bytes, checksum: 457909aeab3c9fb43aace1435dfce63b (MD5) PROGRAMA DE PÓS-GRADUACAO.pdf: 685620 bytes, checksum: a2aa2bcae09817858a53128bd49ad2e0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by PPGQ Química (ppgqsecretaria@gmail.com) on 2018-11-14T13:40:32Z (GMT) No. of bitstreams: 4 Tese Geverson.pdf: 2521420 bytes, checksum: 8bb93cbf4beb945034e563dec4772721 (MD5) CartaEncaminhamentoAutodepósito.pdf: 88758 bytes, checksum: 457909aeab3c9fb43aace1435dfce63b (MD5) PROGRAMA DE PÓS-GRADUACAO.pdf: 685620 bytes, checksum: a2aa2bcae09817858a53128bd49ad2e0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-11-14T14:24:26Z (GMT) No. of bitstreams: 4 Tese Geverson.pdf: 2521420 bytes, checksum: 8bb93cbf4beb945034e563dec4772721 (MD5) CartaEncaminhamentoAutodepósito.pdf: 88758 bytes, checksum: 457909aeab3c9fb43aace1435dfce63b (MD5) PROGRAMA DE PÓS-GRADUACAO.pdf: 685620 bytes, checksum: a2aa2bcae09817858a53128bd49ad2e0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-14T14:24:26Z (GMT). No. of bitstreams: 4 Tese Geverson.pdf: 2521420 bytes, checksum: 8bb93cbf4beb945034e563dec4772721 (MD5) CartaEncaminhamentoAutodepósito.pdf: 88758 bytes, checksum: 457909aeab3c9fb43aace1435dfce63b (MD5) PROGRAMA DE PÓS-GRADUACAO.pdf: 685620 bytes, checksum: a2aa2bcae09817858a53128bd49ad2e0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-12-14 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study regarding the employment of natural products, as plant extracts and essential oils, that present biological activities and can be used in the cosmetic industry, has increased intensely. Researches demonstrate that several plants that are part of our lives have presented a significant chemical potential due to their pharmacological effects, such as antimicrobial and antioxidant activities, and photoprotection effects, along with low toxicity. The Amazon has a rich biodiversity that stimulates the search for active biomolecules that add technological value when incorporated into phytocosmetics. In the present work, the plant casca-preciosa (Aniba canelilla) was studied, aiming the formulation of phytocosmetics, acquiring its essential oils and ethanolic extracts from leaves and branches, that were submitted to a liquid-liquid partition. Antioxidant activitiy was assessed by the free radical DPPH scavenging method, as well as by the β-carotene/linoleic acid system. Solar protection factor (SPF) was evaluated through the spectrophotmetric method described by Mansur. Antimicrobial activity was tested by agar diffusion method, and the citotoxicity was assessed against Artemia salina. The active compounds were monitored and separated by different chromatographyc techniques, such as thin layer chromatography (TLC), collumn chromatography (CC), and high efficiency liquid chromatography (HPLC). The essencial oils were characterized by gas chromatography coppled to a mass spectrometer (GC-MS). The active extracts were submitted to a phytochemical screening, and after purification of the extracts, the active molecules were elucidated by mass espectrometry (MS). Concerning the antioxidant activity, the active molecules were obtained from the hydroalcoholic phase of leaves and braches, and characterized as protocatecuic acid in leaves and luteoline in the branches. The SPF was higher in the dichloromethanic phase from leavess and branches, and the active molecules were characterized as cinnamic acid in leaves and siringic acid in the branches. Only the essential oils of leaves and braches were active against the fungi Aspergillus brasiliensis, Didymella bryoniae and Candida albicans. None of the tested bacteria was inhibited. The antifungic activity was probably due to the major component of the precisosa essential oil, 1-nitro-2-phenylethane, acting synergiccally with cariophylene. The essential oils of leaves and branches, as well as the hydroalcoholic phase from the branches presented toxicity against A. salina. Considering the found biological activitites, it was formulated: (i) an antioxidant emulsion; (ii) a photoprotecting emulsion; and (iii) an anticandida liquid soap. The formulations were elaborated and evaluated regarding its organoleptic and physical-chemical parameters. After being submitted to the preliminar stability tests, it was noticed that the antioxidant emulsion should not be submitted to temperatures above 40ºC, since it leads to pH variations and instability, committing the integrity of the formulation. The photoprotecting emulsion presented minor variations, after being submitted to abrupt changes of temperature, and the anticandida liquid soap was stable during all the analyses. Therefore, with this study it is verified that the extracts and essential oils of A. canelilla leaves and branches can be incorporated in cosmetics, adding biological activities to them. Further studies regarding the development of formulations should be accomplished, in order to optimize the preparation of the phyitocosmetic, and to reach a better physical-chemistry stability. Toxicity studies should also be accomplished, in order to guarantee the safety of the products when in contact with the skin. / O estudo relacionado ao emprego de produtos naturais, como extratos vegetais e óleos essenciais, que apresentem atividades biológicas que possam ser usadas na indústria cosmética, vem aumentando intensamente. Pesquisas demonstram que várias plantas que fazem parte de nosso cotidiano têm apresentado grande potencial químico por seus efeitos farmacológicos, tais como atividade antimicrobiana, antioxidante, fotoprotetora e ainda podem apresentar baixa toxicidade. A Amazônia dispõe de uma rica biodiversidade que estimula a pesquisa de biomoléculas ativas que agreguem valor tecnológico ao serem incorporadas em fitocosméticos. No presente trabalho estudou-se a casca-preciosa (Aniba canelilla) visando a obtenção de fitocosméticos, obtendo-se óleos essenciais e extratos etanólicos de folhas e galhos finos que foram submetidos à partição líquido-líquido. Foram realizados ensaios de atividade antioxidante, pelo sequestro do radical livre DPPH e pelo sistema β-caroteno/ácido linoleico, de determinação do fator de proteção solar (FPS), pelo método espectrofotométrico de Mansur, de atividade antimicrobiana, por difusão em ágar e de citotoxicidade frente à Artemia salina. Os componentes ativos foram monitorados e separados por diferentes técnicas cromatográficas tais como, cromatografia em camada delgada (CCD), cromatografia em coluna aberta (CCA) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os óleos essenciais foram caracterizados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Os extratos ativos passaram por uma triagem fitoquímica e após a purificação dos extratos, as moléculas ativas foram elucidadas por espectrometria de massa (EM). Para a atividade antioxidante, os extratos ativos foram obtidos da fase hidroalcoólica de folhas e galhos, encontrando as moléculas ácido protocatecuico nas folhas e luteolina nos galhos. O FPS apresentou-se maior nos extratos da fase diclorometânica das folhas e dos galhos, encontrando-se as moléculas ativas ácido cinâmico nas folhas e ácido siríngico nos galhos. Para a atividade antimicrobiana, apenas os óleos essenciais de folhas e galhos foram ativos contra os fungos Aspergillus brasiliensis, Didymella bryoniae e Candida albicans, sendo que as bactérias avaliadas não foram inibidas. A atividade antifúngica foi atribuída a substância majoritária presente no óleo essencial de preciosa, o 1-nitro-2-feniletano, em uma possível ação sinérgica com o cariofileno. Os óleos essenciais de folhas e galhos, assim como a fase hidroalcólica dos galhos apresentaram toxicidade contra a Artemia salina. Considerando as atividades encontradas, foram formulados: (i) uma emulsão antioxidante; (ii) uma emulsão fotoprotetora; e (iii) um sabonete líquido íntimo contra cândida. As formulações foram elaboradas e avaliadas quanto aos parâmetros organolépticos e físico-químicos. Após serem submetidas aos testes de estabilidade preliminar notou-se que a emulsão antioxidante não deve ser submetida à temperaturas superiores a 40 ºC pois a desestabiliza e provoca alterações de pH comprometendo a integridade da formulação. A emulsão fotoprotetora apresentou pequenas variações, após ser submetida a mudanças bruscas de temperatura, e o sabonete líquido íntimo apresentou-se estável durante todas as análises. Assim, com este estudo verifica-se que os extratos e óleos essenciais de folhas e galhos finos de A. canelilla podem ser incorporados em cosméticos, agregando atividades biológicas aos mesmos. Estudos completos de desenvolvimento de formulações devem ser realizados, a fim de otimizar o preparo dos fitocosméticos e alcançar uma maior estabilidade físico-química. Estudos mais abrangentes de toxicidade também devem ser realizados, a fim de garantir a segurança dos produtos quando em contato com a pele.

FERNANDES, G. S. Prospecção nutricional e bioativa de sementes de dez espécies vegetais da caatinga. 2011. 331 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2015-03-12T12:20:57Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_gsfernandes.pdf: 5814800 bytes, checksum: 3d2f892d92ceca14e725443a427c6d70 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-01-29T21:22:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_gsfernandes.pdf: 5814800 bytes, checksum: 3d2f892d92ceca14e725443a427c6d70 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-29T21:22:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_gsfernandes.pdf: 5814800 bytes, checksum: 3d2f892d92ceca14e725443a427c6d70 (MD5) Previous issue date: 2011 / The Caatinga Biome shows an heterogeneous vegetation with a taxonomic biodiversity of over 2,000 species of plants. Among these, approximately 220 belong to the Leguminosae family with 80 endemic species, unique to that biome. Many are used for various purposes in an indiscriminate manner, greatly reducing the variety and number of species even before the knowledge of their potential uses. Studies that can add economic value and enable the rational, sustainable use of these species, coupled with the constant search for new sources of plant protein to meet the ever increasing demand of the population are extremely important. Similarly important is the search for natural compounds which may help to combat human and plant pathogens. Thus, this study aimed to assess the nutritional and bioactive value of the seeds of ten plant species from Caatinga, highlighting the most promising ones. For this, the seeds were analyzed for nutritional composition, showing a high percentage of crude protein (10.9 ± 0.4 to 50.0 ± 3.4%), dietary fiber (0.8 ± 0 , 0 to 52.3 ± 1.0%) and energy (1,000 kJ/100g a1.804), with amino acid profile similar to that of soybeans, with higher amounts of lysine (1088-456 mg/gN) and histidine (199-918 mg/gN) and good mineral profile, with good content (mg/100 g flour) for all of them, especially, iron (3.8 to 20.2), calcium (31 to 268), magnesium (102-244) and potassium ( 366-1581). The seeds showed low amounts of lectins (80-2560 and 160-2560 UH / gF, when untreated and treated with enzymes, respectively), trypsin inhibitor (4.1 ± 0.4 to 27.4 ± 0.2 GTI / mgF), urease (465 ± 13 to 47,178 ± 3,351 U / KGF) and toxic activity in only three species, with LD50 ranging from 0.72 ± 0.03 to 1.12 ± 0.04 g / kg body weight . Was given an index of nutritional quality for all species, which pointed to Piptadenia moniliformis Benth. species (Catanduva) as the most promising one and because of that the seeds of this species was had the quality of its proteins evaluated in vivo. The thermal processing (boiling, microwave cooking and autoclaving) as well as the removal of α-galactosides did not improve animals performance. The nutritional parameters NPU and BV were improved when the animals were fed the seeds diet after removal of the α-galactosides. This may indicate that the search for apropriate processing methods may turn these seeds a promising source of proteins. Besides the high nutritional potential, the seeds of the ten studied species also have bioactive potential due to the presence of secondary metabolites such as alkaloids, catechins, calchonas, Auron, flavonols, flavones phenols, xanthones, flavononols, saponins and triterpenoids. These seeds also have bioactive proteins such as proteases, chitinases (0.23 ± 0.02 to 2.0 ± 0.33 nkat / mg P), β-1,3-glucanase (0.01 ± 0.0 to 0.8 ± 0, 01 nkat / mg P), and proteins active against microorganisms that are also considered antinutritional factors (lectins, trypsin inhibitors, urease and toxins). The evaluation of the crude extracts (CE) of the seeds showed that all species are active against the larvae of Aedes aegipti with mortality rates ranging from 13.33 ± 0.54 to 100.00 ± 0.00%, except that of Caesalpinea bracteosa which similarly to the CE of Dioclea megacarpa, was active against the bacterium Bacillus subtilis and against the fungus Fusarium oxysporum. Seeds extract of Senna rugosa species was able to inhibit the growth of Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus. The pathogenic fungi Aspergillus niger and Colletotrichum truncatum were inhibited by the CE of Piptadenia moniliformis and Enterolobium contortisiliquum. The latter was also active against Neurospora sp. and Trichoderma viridae. The species P. moniliformis was distinguished for its high chitinase activity (1.12 ± 0.0 nkat / mg P) in addition to its activity against biological models susceptible to this enzyme. For these reasons attempts were made for its purification. The purified protein fraction of P. moniliformis (PmFP) contains high activity of chitinases and caused a small reduction in the growth of the yeasts Saccharomyces cerevisiae and Candida tropicalis, and of the the bacterium B. subtilis. This protein fraction also inhibits the hatching of A. aegypti eggs with IC50 of 204. 42 ± 2.19 μgP / ml. It causes changes in the eggs structure and in the morphology of first stage larvae. Thus, investigation of bioactive and nutritional potential of the species showed good composition of nutrients, especially of proteins, and confirmed the presence of bioactive compounds from protein nature and secondary metabolites, making them promising sources of nutrients, antimicrobial and insecticides that can biotechnologically be used for agricultural and industrial purposes. / A Caatinga possui uma vegetação heterogênea cuja biodiversidade taxonômica conta com mais de 2.000 espécies de plantas. Dentre essas, cerca de 220 pertencem à família das leguminosas com 80 espécies endêmicas, únicas desse bioma. Muitas são usadas para diversas finalidades de forma indiscriminada, reduzindo consideravelmente a diversidade e o número de espécies antes mesmo do conhecimento de suas potencialidades. Estudos que possam agregar valor econômico e viabilizar o uso racional, sustentável e a conservação das mesmas, aliada à constante busca por novas fontes de proteínas vegetais para atender à demanda crescente da população, bem como a grande necessidade de descoberta de compostos naturais que auxiliem no combate aos patógenos humanos e de plantas, são de extrema relevância. Assim, o presente estudo objetivou avaliar o potencial nutricional e bioativo de sementes de dez espécies vegetais da Caatinga destacando a espécie mais promissora. Para tanto, dez espécies de leguminosas selvagens da Caatinga foram analisadas quanto a sua composição nutricional, apresentando elevado percentual de proteína bruta (10,9 ± 0,4 a 50,0 ± 3,4 %), fibras (0,8 ± 0,0 a 52,3 ±1,0 %) e energia (1.000 a 1.804 kJ/100g), com perfil de aminoácidos comparáveis aos da soja, com maiores teores de lisina (1088 a 456 mg/gN) e histidina (199 a 918 mg/gN) e bom perfil de minerais por apreentar boas quantidades de (mg/100g de farinha) de todos eles, em especial, de ferro (3,8 a 20,2), cálcio (31 a 268), magnésio (102 a 244) e potássio (366 a 1.581). As sementes apresentaram baixas quantidades de lectinas (80 a 2.560 e 160 a 2.560 UH/gF, quando não tratadas e tratadas com enzimas, respectivamente), inibidores de tripsina (4,1 ± 0,4 a 27,4 ± 0,2 gTI/mgF ), ureases (465 ± 13 a 47.178 ± 3.351 U/KgF) e atividade tóxica, em apenas três espécies, com DL50 variando de 0,72 ± 0,03 a 1,12 ± 0,04 g/Kg peso. Foi determinado um índice de qualidade nutricional para todas as espécies, o qual apontou a espécie Piptadenia moniliformis Benth. (Catanduva) como detentora de melhor qualidade nutricional, sendo assim destacada e avaliada in vivo a qualidade das proteínas de suas sementes. Os processamentos térmicos (fervura, cozimento em micro-ondas e autoclavagen) e o processo de extração de -galactosídios nas sementes dessas espécies não proporcionaram bom desempenho dos animais, tendo em vista a perda de peso apresentada. Melhoria nos parâmetros nutricionais, como NPU e VB foi verificada após a retirada de -galactosídios dessas sementes, sugerindo que a análise de outros processamentos para o aproveitamento das proteínas de suas sementes, pode torná-las uma fonte promissora. Além do alto potencial nutricional, as dez espécies apresentam também potencial bioativo devido à presença de metabólitos secundários como alcalóides, catequinas, calchonas, auronas, flavonóis, fenóis flavonas, xantonas, flavononóis, saponinas e triterpenóides. Possuem proteínas bioativas como proteases, quitinases (0,23 ± 0,02 a 2,0 ± 0,33 nKat/mgP), β-1,3-glucanases (0,01 ± 0,0 a 0,8 ± 0,01 nKat/mgP), além de proteínas ativas contra microorganismos que também são consideradas antinutricionais (lectinas, inibidores de tripsina, ureases e toxinas). A avaliação dos extratos brutos (EB) das espécies mostrou que todas são ativas contra larvas de Aedes aegipty com percentual de mortalidade variando de 13,33 ± 0,54 a 100,00 ± 0,00 %, exceto o EB de Caesalpinea bracteosa que foi ativo contra a cepa Bacillus subtilis e contra o fungo Fusarium oxysporum, juntamente como o EB de Dioclea megacarpa. A espécie Senna rugosa inibiu o crescimento das cepas Bacillus subtilis e Staphylococcus aureus. Os fungos fitopatogênicos Aspergilus niger e Colletotrichum truncatum foram inibidos pelos EBs de Piptadenia moniliformis e Enterolobium contortisiliquum, que além destes, foi ativo frente a Neurospora sp. e Trichoderma viridae. A espécie P. moniliformis destacou-se por sua elevada atividade quitinásica (1,12 ± 0,0 nKat/mgP) em adição à atuação contra modelos biológicos susceptíveis a essa enzima, tendo sido escolhida para sua purificação. A fração proteica purificada de P. moniliformis (PmFP) contém elevada atividade de quitinases e causou pequena redução no crescimento das leveduras Saccharomyces cerevisiae e Candida tropicalis, bem como da bactéria B. subtilis. Inibiu ainda, a eclosão de ovos de A. aegypti com CI50 de 204, 42 ± 2,19 µgP/ml e alterou a estrutura dos ovos e morfologia das larvas de primeiro estádio. A investigação do potencial nutricional e bioativo das espécies mostrou boa composição de nutrientes, em especial de proteínas e confirmou a presença de compostos bioativos de natureza proteica e de metabólitos secundários, tornando-as promissoras fontes de nutrientes e compostos antimicrobianos e anti-inseticidas que podem ser utilizados biotecnologicamente para fins agrícolas e industriais.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:16:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6503.pdf: 1740715 bytes, checksum: deb2330f845c5751bcb107b9549ba42f (MD5) Previous issue date: 2015-02-03 / Universidade Federal de Sao Carlos / The spectroscopy is a technique based on light-matter interaction, which provides information about the composition and structure of molecules. For this reason, it is used in various fields of science, including the biology. There are various types of spectroscopy, based on different physical phenomena, however, in this article, we had addressed only two types: Raman and photoluminescence. Raman spectroscopy consists in the analysis of the inelastic scattering of radiation by focusing on a molecule. The light-matter interaction in this case results in a molecular vibrational energy change. On the other hand, the photoluminescence spectroscopy analyzes the radiation emitted by molecules due to electronic transitions induced by absorption of a photon. This study addresses the application of both techniques in the problem of combating pathogenic microorganisms. Some fungi and bacteria are causative of serious diseases and, therefore, the enhancement of efficiency in identifying and combating these microorganisms is of great interest to public health. This work aimed the application of Raman spectroscopy and photoluminescence to the identification of three pathogenic microorganisms and changes in the spectra emitted by them by adding an antimicrobial agent. In this study a novel peptide with antifungal and antibiotic action was used, called polycerradin, with biological activity demonstrated by agar diffusion tests. The spectra obtained by the Raman scattering technique were not conclusive, since there was photoluminescence emission concomitantly. However, the photoluminescence spectra showed a significant decrease in peak intensity at 695 nm when the ELP was added, for all three microorganisms studied. These results demonstrate, therefore, the great potential application of photoluminescence spectroscopy not only for the identification of microorganisms as well as for determination of the inhibition and/or killing of the same by adding an antimicrobial agent. As a future prospect, we aim to develop a biosensor based on photoluminescence technique, to be used in the identification and monitoring of micro-organisms. This biosensor could be applied in various areas such as medical, food industry, sanitary, among others. / A espectroscopia é uma técnica baseada na interação luz-matéria, que propicia a determinação de informações sobre a composição e a estrutura de moléculas. Por esse motivo, é utilizada em diversos campos da ciência, dentre eles, a biologia. Existem diversos tipos de espectroscopia, baseados em fenômenos físicos distintos, no entanto, neste trabalho, são abordados apenas dois tipos: Raman e de fotoluminescência. A espectroscopia Raman consiste na análise do espalhamento inelástico da radiação ao incidir sobre uma molécula. A interação luz-matéria, neste caso, resulta em uma alteração na energia vibracional molecular. Por outro lado, a espectroscopia de fotoluminescência analisa a radiação emitida por moléculas decorrente de transições eletrônicas, induzidas pela absorção de um fóton. O presente estudo aborda a aplicação de ambas as técnicas na problemática de combate a micro-organismos patogênicos. Alguns fungos e bactérias são causadores de doenças graves e, portanto, o aprimoramento da eficiência na identificação e combate à esses micro-organismos é de grande interesse para a saúde pública. Este trabalho visou a aplicação das espectroscopias Raman e de fotoluminescência para a identificação de três microorganismos patogênicos e de alterações nos espectros emitidos por eles, ao se adicionar um agente antimicrobiano. Foi utilizado neste estudo um novo peptídeo com ação antifúngica e antibiótica, denominado de polycerradin, com atividade biológica comprovada por testes de difusão em ágar. Os espectros obtidos através da técnica de espalhamento Raman não foram conclusivos, uma vez que houve emissão de fotoluminescência concomitantemente. No entanto, os espectros de fotoluminescência mostraram uma significativa diminuição na intensidade do pico em 695 nm quando o extrato lipopeptídico (ELP) foi adicionado, para os três micro-organismos estudados. Estes resultados demonstram, portanto, a grande potencialidade da aplicação de espectroscopia de fotoluminescência, não só para a identificação dos micro-organismos, como também para a determinação da inibição e/ou morte dos mesmos ao se adicionar um agente antimicrobiano. Como perspectiva futura, objetivamos o desenvolvimento de um biossensor, baseado na técnica de fotoluminescência, a fim de se utilizar na identificação e no monitoramento de micro-organismos, podendo ser aplicado nas áreas médica, alimentícia, sanitária, dentre outras.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-08Bitstream added on 2014-06-13T20:29:34Z : No. of bitstreams: 1 silva_avr_me_rcla.pdf: 1706887 bytes, checksum: eda68ea29b93397b581e427121535611 (MD5) / Neste trabalho estudou-se a estrutura, função e mecanismo de ação do peptídeo antibacteriano Protonectarina-MP (isolado de veneno da vespa social Protonectarina sylveirae) tendo seu resíduo C-terminal nas formas ácida (-OH) e amidada (-NH2). Os peptídeos foram sintetizados, utilizando-se a estratégia Fmoc, purificados por cromatografia líquida de alta performance. O monitoramento do material sintético foi feito por espectrometria de massas ESI-MS e por seqüenciamento através de Química Degradativa de Edman. A estrutura secundária foi investigada pelo uso de espectroscopia de dicroísmo circular e modelagem molecular. Atividade lítica (extravasamento) e interação do resíduo de triptofano em vesículas foram investigadas pelo uso de espectrômetro de fluorescência. Foram realizados ensaios sobre as interações desses peptídeos em meio de vesículas zwitteriônicas e aniônica, formando complexos proteolipossomos que foram submetidos à troca isotópica H/D monitorada por espectrometria de massas ESI-MS e MS/MS. Além disso, foram realizados ensaios biológicos de atividade hemolítica, de desgranulação de mastócito, de liberação da enzima citoplasmática Lactato Desidrogenase e de atividade antimicrobianas. Os dados de CD revelam uma tendência dos peptídeos se estruturarem em hélice-α em ambiente hidrofóbico e em ambiente de membranas. Porém, o mesmo não pode ser observado em meio aquoso. Os modelos obtidos para ambos os peptídeos por modelagem molecular mostram uma estruturação em hélice-α anfipática. Nos ensaios de atividade lítica em vesículas, os peptídeos apresentaram um processo com cooperatividade positiva, com curvas de dose-resposta que mostram uma dependência sigmoidal com a concentração do peptídeo. Os resultados da fluorescência do triptofanos mostram um deslocamento da emissão para a região de onda do azul para o peptídeo... / In the present work was studied the structure, function and mechanism of action of the antibacterial peptide Protonectarina-MP (isolated from venom of social wasp Protonectarina sylveirae) with its carboxyamidation (-NH2) and carboxyl-free (-OH) Cterminal forms. The peptides were manually synthesized on-solid phase by using Fmoc strategy and purified under HPLC. The homogeneity of the synthetic material was analyzed by ESI mass spectrometry and Edman Degradation Chemistry. The secondary structure was investigated through circular dichroism (CD) spectroscopy and molecular modeling. Lytic activity and peptides interaction with the membranes was also investigated through tryptophan emission, by fluorescence spectrometry. The interaction of peptides with zwitterionic and anionic vesicles was investigated through the combination of H/D exchange and ESI-mass spectrometry. Some biological activities, like: mast cell degranulation, release of cytoplasmic enzyme lactate dehydrogenase, hemolysis and antibiosis were investigated for both peptides. The CD spectra revealed that the peptides in hydrophobic environments or in presence of biological membranes have the tendency to form helix conformations; however, organized structures were not observed in aqueous or buffer solutions. The models obtained by molecular modeling show that both peptides form an amphipathic α-helix. The peptides presented a positive cooperative process in the lytic activity of vesicles, with dose-response curves presenting a sigmoidal dependence with the peptide concentration. The results of the fluorescence of tryptophans showed a shift of the emission wavelength to the blue region of the peptide Protonectarina-MP (-NH2), which was not observed for its analogue presenting the C-terminal residue in free acid form. This is indicating a greater interaction of the amidated peptide in membranes, when compared to the peptide... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1655871 bytes, checksum: 7d0213ba4f9cfcbc052053c9cd7fbc98 (MD5) Previous issue date: 2012-05-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present study aimed to determine the rate of surgical site infection (SSI) in small animals surgery department at the Veterinary Hospital of the Federal University of Viçosa (UFV-VH) and associate this incidence to the following risk factors: surgery wound classification according to their potential contamination, antimicrobial prophylaxis, antimicrobial therapy and number of people present in the operating room during the procedure. For this, the residents were previously trained to standardize the diagnosis of SSI, as well as obtaining the data mentioned above. Animals from the surgical routine of the UFV-VH were included in the study, without changing it, from August 2, 2010 to July 01, 2011. During this period 401 animals were included, with 21 of them presenting ISC, determining an infection rate of 5.24%. After statistical analysis, an association was found between the incidence of SSI and a group of surgeries characterized by presenting contamination risk higher than 5%, which were the potentially contaminated, contaminated and infected surgeries, combined into a single group. Other risk factors evaluated showed no association with SSI, however, on the amount of people present in the surgery room, in absolute values, an SSI rate of 2.84 times higher was detected for surgeries in which the operating room had more than four people. Additionally, we aimed at using the same sample in the same period, to identify bacteria on the surgical wounds diagnosed with SSI in the UFV-VH, and trace its antimicrobial resistance profile. Thus, samples were collected from the 21 patients diagnosed with ISC, which were initially processed to obtain pure cultures. These 21 samples resulted in 61 isolates, which underwent biochemical tests for phenotypic characterization and subsequently by conventional PCR for their genotypic characterization. It was also determined the minimum inhibitory concentration for the most frequently antimicrobials used in the UFV-VH used as follows: amoxicillin/clavulanic acid, cephalothin, tetracycline, ampicillin and oxacillin for Gram-positive and amoxicillin/clavulanic acid, tetracycline, ampicillin and enrofloxacin for Gram negative. It was verified the occurrence of 12 genera of bacteria on the surgical wounds diagnosed with SSI in the UFV-VH, and 63,93% were characterized as Gram-negative and that among these, the genus Escherichia presented with greater frequency. Among the Gram-positive bacteria (36,07%) the genera Staphylococcus has been found in larger quantities. In this genus, resistance to oxacilin was determined in 76,47% of the samples and positive results for the coagulase test were verified. Finally, among all identified genera, greater resistance to ampicillin was detected, followed by tetracycline, cephalothin, enrofloxacin and amoxicillin/clavulanic acid. / O presente estudo teve como objetivo determinar a taxa de infecção do sítio cirúrgico (ISC) na Clínica Cirúrgica de Pequenos Animais do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Viçosa (HVT-UFV) e associar essa incidência com os seguintes fatores de risco: classificação da ferida cirúrgica de acordo com seu potencial de contaminação, realização de profilaxia antimicrobiana, prescrição de terapia antimicrobiana e quantidade de pessoas presentes na sala de cirurgia no momento do procedimento. Para isso os médicos veterinários residentes passaram por treinamento prévio para padronizar o diagnóstico de ISC, assim como a obtenção dos dados acima citados. Foram utilizados os animais atendidos na rotina cirúrgica do HVT-UFV sem alterá-la, no período de 02 de agosto de 2010 a 01 julho de 2011. Neste período foram incluídos no estudo 401 animais, entre cães e gatos, dos quais 21 apresentaram ISC, determinando uma taxa de infecção de 5,24%. Após análise estatística dos dados, foi verificada associação entre incidência de ISC e cirurgias com risco de contaminação maior que 5%, sendo estas denominadas cirurgias potencialmente contaminadas, contaminadas e infectadas, reunidas em um único grupo. Os demais fatores de risco avaliados não apresentaram associação com a ocorrência de ISC, porém, em relação à quantidade de pessoas presentes na sala de cirurgia detectou-se, em valores absolutos, uma taxa de ISC 2,84 vezes maior na sala em que estavam presentes mais de quatro pessoas. Objetivou-se ainda com a utilização da mesma amostra e no mesmo período, identificar as bactérias presentes nas feridas cirúrgicas com diagnóstico de ISC no HVT-UFV, assim como traçar seu perfil de resistência aos antimicrobianos. Diante disso, foram coletadas amostras dos 21 pacientes com diagnóstico positivo de ISC, as quais foram processadas para obtenção de culturas puras. A partir dessas 21 amostras foram obtidos 61 isolados, os quais passaram por testes bioquímicos para sua caracterização fenotípica e posteriormente por sequenciamento genético para sua caracterização genotípica. Foi também determinado o perfil de resistência aos antimicrobianos utilizados na Clínica Cirúrgica de Pequenos Animais do HVT-UFV, os quais foram analisados da seguinte forma: amoxicilina/ácido clavulânico, cefalotina, tetraciclina, oxacilina e ampicilina para as bactérias Gram positivas e amoxicilina/ácido clavulânico, tetraciclina, ampicilina e enrofloxacino paras as Gram negativas. Após análise dos dados obtidos pode-se verificar a ocorrência de 12 gêneros de bactérias presentes nas feridas cirúrgicas diagnosticadas com ISC no HVT-UFV. Caracterizaram-se como Gram negativas 63,93% das bactérias identificadas, e dentre estas, o gênero Escherichia foi observado em maior número. Entre as bactérias caracterizadas como Gram positivas (36,07%), o gênero Staphylococcus foi verificado em maior quantidade. Neste gênero foi detectada resistência à oxacilina em 76,47% dos isolados e resultados positivos para o teste da coagulase. Por fim, dentre todos os antimicrobianos testados, a ampicilina foi o antimicrobiano que apresentou maior número de isolados resistentes, seguida pela tetraciclina, cefalotina, enrofloxacino e amoxicilina/ácido clavulânico.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BarbaraC_DISSERT.pdf: 9281822 bytes, checksum: 18141307d7e5a4c2b984a98c9fdf7225 (MD5) Previous issue date: 2014-03-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Spondias mombin is a fruitful species dispersed in tropical regions of America, Africa and Asia. In Brazil, the species can be found mainly in the northern and northeastern regions. Scarce chemical and pharmacological studies have been reported for S. mombin and until this moment studies about chemical markers were not developed. In this context, the aims of this study were to characterize the chemical markers from S. mombin leaves and evaluate their anti-inflammatory, antioxidant and antiproliferative potentials. The chemical profile of the hydroethanolic extract from S. mombin leaves analyzed by HPLC-DAD, through a validated method, allowed the identification and quantification of ellagic acid and chlorogenic acid. This extract showed anti-inflammatory potential in acute peritonitis model induced by carrageenan. The hydroethanolic extract from S. mombin leaves was subjected to a liquid-liquid partition with the solvents: n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate and n-butanol. Regarding the anti-inflammatory potential of the fractions obtained they were active; however, ethyl acetate fraction at 200 mg/kg showed highlighted results. The compounds ellagic acid and chlorogenic acid also inhibited the leukocyte migration to the site of inflammation at 2.5, 5 and 10 mg/kg. The hydroethanolic extract, fractions and the chemical markers showed significant antioxidant potential when evaluated in different assays: DPPH Free-Radical Scavenging, Superoxide Radical Scavenging, Hydroxyl Radicals Scavenging and Reducing Power. Taken together our results showed that hydroethanolic extract of S. mombin leaves has ellagic acid and chlorogenic acid as bioactive markers and it demonstrated antiinflammatory and antioxidant properties besides no cytotoxicity against 3T3 cells. It enables us to suggest S. mombin as an important species to develop herbal drugs / S. mombin ? uma esp?cie frut?fera que se encontra dispersa em regi?es tropicais da Am?rica, ?frica e ?sia. No Brasil a esp?cie pode ser encontrada em v?rios estados tendo maior preval?ncia nas regi?es norte e nordeste do pa?s. Foram descritos poucos estudos qu?micos e farmacol?gicos para a esp?cie S. mombin e at? o momento n?o foram analisados os marcadores qu?micos da esp?cie. Diante desse contexto, este trabalho buscou caracterizar os marcadores qu?micos para as folhas e frutos de S. mombin e avaliar a atividade anti-inflamat?ria, antioxidante, antiproliferativa e antimicrobiana. O extrato das folhas (EHfl) secas e dos frutos (EHfr) in natura foram preparados por macera??o em meio hidroalco?lico. Para a caracteriza??o dos compostos ativos da esp?cie S. mombin, os extratos hidroetan?licos foram submetidos ? parti??o l?quido-l?quido com solventes de polaridade crescente n- hexano (Hex), diclorometano (Dcm), acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (ButOH). A avalia??o do perfil qu?mico das folhas por CCD e CLAE mostrou que a esp?cie ? rica em compostos fen?licos. Na an?lise por CCD foi observada a presen?a de quercetina, ?cido el?gico e canferol. A an?lise por CLAE permitiu a identifica??o e a quantifica??o de ?cido el?gico e ?cido clorog?nico no EHfl. A metodologia anal?tica foi validada segundo os par?metros estabelecidos pela RDC 899/ 2003 e pela ICH. Na an?lise qualitativa por CLAE do EHfr foram identificados o ?cido clorog?nico e a rutina. Os resultados da avalia??o da atividade antiinflamat?ria mostraram que o EHfl das folhas, nas doses de 100, 200, 300 e 500 mg/kg, apresentou efeito de inibi??o da migra??o de leuc?citos no modelo de peritonite aguda induzida por carragenina. Todas as fra??es foram ativas, no entanto, a fra??o AcOEt na dose de 200 mg/kg apresentou melhor atividade em rela??o ?s outras fra??es testadas.O EHfl e a fra??o AcOEt apresentaram importante perfil de inibi??o bacteriana no teste de difus?o em disco, principalmente frente ? bact?ria S. flexneri. O EHfl e as fra??es (Dcm, AcOEt, ButOH) das folhas assim como o EHfr apresentaram importante atividade antioxidante nos ensaios de DPPH, sequestro de radicais super?xidos, sequestro de radicais hidroxilas e poder redutor. No que se refere ? avalia??o da citotoxicidade do EHfl, das respectivas fra??es e do EHfr frente ? cultura de c?lulas de fibroblastos 3T3 n?o foi observada citotoxidade significativa. Os resultados mostraram que o EHfl possui atividade antiinflamat?ria, antioxidante e antimicrobiana. Verificou-se que o ?cido clorog?nico e o ?cido el?gico podem ser usados como marcadores biativos das folhas de S. mombin. O EHfr apresentou atividade antioxidante e foi observada a presen?a de ?cido clorog?nico e rutina. Al?m disso, n?o foi observada atividade citot?xica para o EHfr e para o EHfl

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-03-02T23:14:28Z No. of bitstreams: 1 EdinaraTarginoDeMelo_DISSERT.pdf: 2062041 bytes, checksum: b2de2a9d0f47d751e6c33c3d69b984a7 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-03-04T23:26:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 EdinaraTarginoDeMelo_DISSERT.pdf: 2062041 bytes, checksum: b2de2a9d0f47d751e6c33c3d69b984a7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-04T23:26:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdinaraTarginoDeMelo_DISSERT.pdf: 2062041 bytes, checksum: b2de2a9d0f47d751e6c33c3d69b984a7 (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / No Brasil, ? grande a incid?ncia de animais pe?onhentos, dentre os quais se destacam os escorpi?es por sua import?ncia m?dica, sendo sua pe?onha fonte de diversas subst?ncias qu?micas com atividades biol?gicas e farmacol?gicas ainda n?o compreendidas, incluindo diversos pept?deos bioativos. Pept?deos antimicrobianos (PAMs) s?o componentes do sistema imune de procariotos e eucariotos utilizados como primeira linha de defesa contra micro-organismos. No presente trabalho, foi caracterizado o primeiro PAM do escorpi?o Tityus stigmurus, nomeado Stigmurina, previamente identificado por meio do transcriptoma da gl?ndula de veneno desta esp?cie. As caracter?sticas da Stigmurina foram investigadas por modelagem computacional e constru??o de dendrograma. Al?m disso, as caracter?sticas estruturais da Stigmurina foram investigadas por dicro?smo circular em ?gua, em 2, 2, 2- trifluoethanol (TFE) e em dodecil sulfato de s?dio (SDS) e os modelos refinados por simula??es de din?mica molecular. Testes in vitro foram empregados para investigar a atividade antibacteriana, antif?ngica, hemol?tica e citot?xica do veneno bruto e da Stigmurina. Os resultados mostraram que a sequ?ncia selecionada codifica uma prote?na madura com 17 res?duos de amino?cidos e o dendrograma revela um caso de converg?ncia evolutiva. Os espectros de dicro?smo demonstraram flexibilidade conformacional, predominando estrutura estendida e ??folha, al?m de not?vel capacidade de renatura??o. A pe?onha bruta n?o apresentou atividade relevante nos testes antimicrobianos para as concentra??es testadas. No entanto, a Stigmurina mostrou um amplo espectro de atividade antibacteriana, com concentra??es inibit?rias m?nimas (CIMs) entre 31,25?g/mL a 250 ?g/mL para diferentes micro-organismos, enquanto que os resultados para a avalia??o da atividade hemol?tica nestas concentra??es foram baixas. Nos estudos de citotoxicidade, a pe?onha bruta foi incapaz de reduzir a viabilidade celular em c?lulas VERO E6, por?m sua toxicidade em c?lulas SiHa foi significativamente superior, correspondendo a uma IC50 de 3,6 ?g/mL. J? nos testes com a Stigmurina, as concentra??es capazes de reduzir a viabilidade celular das c?lulas VERO E6 e SiHa em 50% foram de 275,67 ?g/mL e 212,54 ?g/mL, respectivamente.Os resultados sugerem que a Stigmurina poder ser considerada como um potencial medicamento anti-infeccioso. / In Brazil, there is a high incidence of venomous animals. Among them, scorpions are highlighted by their medical importance, and for being their venom a source of several molecules with biological and pharmacological activity not yet fully understood, including several bioactive peptides. Antimicrobial peptides (AMPs) are components of the immune system in prokaryotes and eukaryotes, used in the first line of defense against microorganisms. In the present study, we characterized the first PAM previously identified through transcriptome of the venom gland of the scorpion Tityus stigmurus, named Stigmurin. The characteristics of Stigmurin were investigated by computational modeling and construction of dendrogram. In vitro tests investigated the antibacterial, antifungal, haemolytic and cytotoxic effects of crude venom and Stigmurin. In addition, the structural characteristics of Stigmurin were investigated by circular dochroism in water, 2, 2 , 2- trifluoethanol (TFE) and sodium dodecyl sulfate (SDS) and the models were refined by molecular dynamics simulations. The results showed that the selected sequence encodes a mature protein of 17 amino acid residues and the dendrogram reveals a case of convergent evolution. The crude venom showed no antimicrobial activity, however, Stigmurin exhibited a broad spectrum of antibacterial activity, with minimal inhibitory concentrations (MIC) ranging from 31.25 and 250 ?g/mL for different strains, while the hemolytic activity at these concentrations was low. In cytotoxicity studies, the crude venom was unable to reduce cell viability in VERO E6 cells; in contrast, its activity in SiHa cells was significantly higher, corresponding to IC50 of 3.6 ?g/mL. For Stigmurin the concentration sable to decrease cell viability of Vero E6 and SiHa cells in 50% were 275.67 ?g/mL and 212.54 ?g/mL, respectively. The dichroism spectra revealed the conformational flexibility, with predominating extended and ??sheet structures, as well as a remark able renaturation ability. The results suggest that Stigmurin could be considered as a potential antiinfective drug

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:01:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BrunoAAS.pdf: 4258750 bytes, checksum: 23e94d243172bf35909690337987df9d (MD5) Previous issue date: 2009-04-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Solid substrate cultivation (SSC) has become an efficient alternative towards rational use of agro industrial wastes and production of value-added products, mainly in developing countries. This work presents the production and functional application results of phenolic extracts obtained by solid substrate cultivation of pineapple (Ananas comosus L.) and guava (Psidium guajava L.) residues associated to soy flour and bioprocessed by Rhizopus oligosporus fungus. Two experimental groups were tested: (1) 9g of fruit residue and 1g of soy flour (A9 or G9); (2) 5g of fruit residue and 5g of soy flour (A5 or G5). After SSC, 100ml of distilled water was added to each Erlenmeyer flask containing 10g of bioprocessed material in order to obtain the phenolic extracts. Samples were taken every two days for total phenolic concentration (TPC) and antioxidant capacity evaluation by DPPH test during 12-day cultivation. The 2-day and 10-d ay extracts were selected and concentrated by ebullition until 1/10 of original volume was reached. After that, both non-concentrated and concentrated extracts were evaluated for their antimicrobial activity against Staphylococcus aureus and Salmonella enterica and a-amylase inhibitory capacity. It was observed an inverse relationship between total phenolic concentration (TPC) and antioxidant capacity during the cultivation. Besides that, the concentrated pineapple samples after two days were able to inhibit both pathogens tested, especially S. aureus. Guava concentrated extracts after 2 days showed expressive inhibition against S. enterica, but negative results against S. aureus growth. When it comes to a-amylase inhibition, A9 extracts after 2 days, both concentrated or not, completely inhibited enzyme activity. Similar behavior was observed for G9 samples, but only for concentrated samples. It was shown that concentration by ebullition positively affected the enzymatic inhibition of G9 and A9 samples, but on the other side, decreased antiamylase activity of A5 and G5 samples / O cultivo semi-s?lido tem se tornado nos ?ltimos anos uma alternativa eficiente no aproveitamento de res?duos agroindustriais para a produ??o de compostos de alto valor agregado, sobretudo em pa?ses em desenvolvimento. Este trabalho apresenta resultados da produ??o e funcionalidade de extratos fen?licos obtidos atrav?s de cultivo semi-s?lido de res?duos de abacaxi (Ananas comosus L.) e goiaba (Psidium guajava L.) associados ao farelo de soja por meio do fungo Rhizopus oligosporus. Dois grupos experimentais foram estudados: (1) 9g de res?duo e 1g de farinha de soja (A9 ou G9); (2) 5g de res?duo e 5g de farinha de soja (A5 ou G5). Ap?s o cultivo semi-s?lido, 100 mL de ?gua destilada foram adicionados a cada frasco Erlenmeyer contendo 10g de material bioprocessado para obten??o dos extratos fen?licos n?o concentrados. Amostras foram tomadas ao longo do cultivo e avaliadas quanto ? concentra??o de fen?licos totais e capacidade antioxidante pelo teste DPPH ao longo de 12 dias de cultivo. Os extratos aquosos obtidos ap?s dois e dez dias de cultivo foram selecionados e concentrados at? redu??o de 1/10 do volume original. Em seguida, tanto os extratos concentrados quanto os n?o-concentrados desses pontos foram submetidos ? avalia??o da atividade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus e Salmonella enterica e poder inibit?rio da enzima a-amilase. Durante o cultivo foi observada rela??o inversa entre a produ??o de fen?licos livres e capacidade antioxidante dos extratos. As amostras fen?licas concentradas dos res?duos de abacaxi ap?s dois dias de cultivo apresentaram capacidade de inibir o crescimento dos pat?genos testados, especialmente o S. aureus. Para o res?duo de goiaba, foi observado que os extratos fen?licos concentrados de ambos os grupos experimentais ap?s 2 dias de cultivo demonstraram expressiva inibi??o da Salmonella enterica, por?m, n?o apresentaram resultados positivos contra S. aureus. Quanto ? atividade anti-amilase, os extratos fen?licos do grupo experimental A9 ap?s dois dias de cultivo apresentaram capacidade de inibir completamente a a??o da enzima α-amilase. Comportamento similar foi detectado para as amostras do grupo experimental G9, por?m, apenas para as amostras concentradas. A concentra??o por ebuli??o dos extratos fen?licos nos grupos A9 e G9 favoreceu o aumento da inibi??o enzim?tica. Comportamento diferente foi observado nas amostras dos grupos A5 e G5 que apresentaram baixa atividade anti-amilase, possivelmente influenciada por modifica??es decorrentes da concentra??o por ebuli??o

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:30:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LizaBV.pdf: 651863 bytes, checksum: 861130b51ad28ee890a75755594ddae3 (MD5) Previous issue date: 2006-05-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The purpose of this study was evaluate the effectiveness of the chitosan at 0.4 with high molecular weight and high deacetylation degree mouthrinse over the total decrease of the streptococci, Streptococcus mutans, lactobaci/li and over the perceptible bacterial film and gingival bleeding indices. For that, a total of 68 healthy students between 11 and 13 years old, not allergic to crustacean and not users of antibiotics or antimicrobial agent for the last three months or during the treatment, was selected. From those, thirty two individuaIs used the mouthrinse test, and thirty six, the control one. The participants rinsed 10 mL of the solutions twice a day, one during the moming (which was supervised), and another one during the aftemoon (which was not supervised), for fifteen days. The saliva collect for the microbiological analysis, as well as the perceptible bacterial film and gingival bleeding indices check, were made before the use ofthe mouthrinses (base line), immediately after the last mouthrinse on the day (zero time) and fifteen days after (fifteen time). These data were collected at school and the saliva was carried inside the ice to the laboratory. The samples were diluted, and 0.1 mL ofthe 10 -1 dilution was seeded in Rogosa SL agar, for further analysis of the total of lactobaci/lus~ 0.1 mL of the 10-4 dilution in Mitis Salivarius with bacitracin, for S. mutans analysis; and 0.1 mL of the 10-6 dilution in Mitis Salivarius for the analysis ofthe total of streptococcus. The Rogosa SL agar plates were incubated in aerobic at 37?C for 72 hours and the MSB and the MS were incubated in anaerobic in Gaspak@ jars at 37?C for 48 hours for further count ofColonies Former Units (CFUs). The assay was made in duplicate for each bacterial group analyzed. The number of CFUs transformed in LOGlO was analyzed according to the following tests: ANOV A, t of Paired and Not Paired Student, Friedman, Man-Whitney and square-qui test. On the base line, alI the variables analyzed were similar on both tested groups. On both groups, for the total of streptococcus there was no significant difference along the time and for S. mutans there was a statistic significant increase of the CFUs from the base line to the zero time. For the total of lactobaccilus there was no significant difference on the test group along the time, and on the control there was a significant increase ofthe CFUs ITom the base line to the zero time. For both groups, there was significant decrease ofthe perceptible bacterial film index along the time, and that can be explained by the mechanic effect of the mouthrinse over the bacterial film and by the participation of the students on the research which could have motivated him to a better toothbrushing (Hawthome effect). The gingival bleeding index also showed a decrease along the time, even though it was not significant. Therefore, the conclusion of this study was that the chitosan at 0.4 % mouthrinse was not effective on the CFUs reduction of the three bacterial groups analyzed, as well as on the reduction of the perceptible bacterial film and gingival bleeding indices / O objetivo deste estudo foi avaliar a efic?cia do bochecho de quitosana a 0,4% com alto peso molecular e alto grau de desacetiliza??o sobre a redu??o do total de estreptococcus, Streptococcus mutans, total de lactobacilos e sobre os ?ndices de placa vis?vel e sangramento gengival. Para tanto, foram selecionados 68 estudantes saud?veis, com idade entre 11 e 13 anos, n?o al?rgicos a crust?ceos e que n?o tivessem usado antibi?tico ou antimicrobiano nos ?ltimos tr?s meses ou durante o tratamento. Trinta e dois indiv?duos utilizaram o bochecho teste e trinta e seis o controle. Os participantes bochecho 10 ML das solu??es duas vezes ao dia, um pela manh? (supervisionado) e outro ? tarde (n?o supervisionado, durante quinza dias. A coleta de saliva para an?lise microbiol?gica, bem como a aferi??o dos ?ndices de placa vis?vel e de sangramento gengival, deu-se antes do uso dos bochechos (linha base),no dia imediatamento ap?s o ?ltimo bochecho (tempo zero) e quinze dias ap?s (tempo quinze). Esses dados foram coletados na escola e a saliva transportada em gelo at? o laborat?rio. As amostras de saliva foram diluidas e 0,1ML da dilui??o 10 elevado a menos 1 foi semeada em Rogosa SL ?gar para a posterior an?lise do total de lactobacilos; 0,1mL da dilui??o 10 elevado a menos 4 em Mitis Salivarus com bacitracina, para an?lise de S mutans, e 0,1mL da dilui??o 10 elevado a menos 6 em Mitis Salivarius para an?lise do total de estreptococous. As placas de Rogosa SL ?gar foram incubadas em aerobiose a 37 grau cent?grado por 72 horas e as de MSB e MS foram incubadas em anaeribiose em jarras Gaspak a 337 grau cent?grado, por 48 horas, para posterior contagem das unidades formadoras de col?nias (UFCs). O ensaio foi feito em duplicadta para cada grupo bacteriano analisado. O n?mero de UFCs transformados em LOG10 foi analisado mediante os seguintes testes: ANOVA, t de Student emparelhado e n?o emparelhado, Friedman, Man-Whitney e teste do qui-quadrado. Na linha base, todas as vari?veis analisadas no estudo foram semelhantes nos dois grupos testados. Em ambos os grupos, para o total de estreptococcus n?o houve diferen?a significativa ao longo do tempo; para o S. mutans, houve aumento estatisticamente significativo das UFCs da linha base para o T0. Para o total de lactobacilos, n?o houve diferen?a no grupo teste ao longo do tempo e, no controle, houve aumento significativo das UFCs da linha base para o T0. Em ambos os grupos, houve diminui??o significativa do IPV ao longo do tempo. O ISG tamb?m apresentou redu??o ao longo do tempo, por?m n?o foi significativa. Portanto, este estudo concluiu que o bochecho de quitosana a 0,4% n?o foi eficaz na redu??o das UFCs dos tr?s grupos bacterianos analisados, assim como, na redu??o do IPV e ISG

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CAPÍTULO II: Peçonhas de serpentes são uma mistura complexa de compostos orgânicos e inorgânicos, proteínas e peptídeos, tais como as aminotransferases, acetilcolinesterases, hialuronidases, L-aminoácido-oxidases, fosfolipases A2, metaloproteases, serinoproteases, lectinas, desintegrinas, entre outros. As fosfolipases A2 influenciam direta ou indiretamente no efeito fisiopatológico no envenenamento, pois além de sua participação na digestão das presas, elas apresentam várias outras atividades como ação hemolítica indireta, neurotoxicidade, cardiotoxicidade, ação agregadora de plaquetas, atividades anticoagulante, edematogênica, miotóxica e inflamatória. Neste trabalho, descrevemos a caracterização funcional de BaltMTx, uma PLA2 de Bothrops alternatus que inibe a agregação plaquetária e apresenta efeito bactericida. A purificação de BaltMTx foi realizada por uma combinação de três passos cromatográficos (cromatografia de troca iônica em DEAE-Sephacel, seguido de cromatografia de interação hidrofóbica em Phenyl-Sepharose, e cromatografia de afinidade em Heparina HiTrap™ HP). A proteína foi purificada até à homogeneidade, tal como avaliado pelo seu perfil de migração em SDS-PAGE, corado com azul de Coomassie, que mostrou uma massa molecular de cerca de 15 kDa sob condições redutoras e cerca de 25 kDa em condições não redutoras. BaltMTx mostrou um efeito inibidor específico sobre a agregação plaquetária induzida por epinefrina em plasma humano rico em plaquetas, de uma maneira dose dependente. Todavia, apresentou pouco ou nenhum efeito sobre a agregação plaquetária induzida por colágeno e adenosinadifosfato. BaltMTx, também, mostrou atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Altas concentrações de BatlMTx estimulou a proliferação de Leishmania (Leishmania) infantum e Leishmania (Viania) braziliensis. BaltMTx induziu a produção de mediadores inflamatórios tais como IL-10, IL-12, TNF-α e NO. BaltMTx apresenta grande interesse médico, tanto como uma nova ferramenta para o desenvolvimento de novos agentes terapêuticos para a prevenção e tratamento de distúrbios trombóticos, quanto como agente bactericida. / CHAPTER II: Snake venoms are a complex mixture of organic and inorganic compounds, proteins and peptides such as aminotransferases, acetylcholinesterase, hyaluronidases, L-amino acid oxidase, phospholipase A2, metalloproteases, serine proteases, lectins, disintegrins, and others. Phospholipase A2 directly or indirectly influence the pathophysiological effect on envenomation, as well as their participation in the digestion of the prey. They have several other activities such as hemolytic indirect action, cardiotoxicity, aggregating of platelets, anticoagulant, edema, myotoxic and inflammatory activities. In this work, we describe the functional characterization of BaltMTx, a PLA2 from Bothrops alternatus that inhibits platelet aggregation and present bactericidal effect. The purification of BaltMTx was carried out through three chromatographic steps (ion-exchange on a DEAE-Sephacel column, followed by hydrophobic chromatography on Phenyl–Sepharose and affinity chromatography on HiTrap™ Heparin HP). The protein was purified to homogeneity as judged by its migration profile in SDS–PAGE stained with coomassie blue, and showed a molecular mass of about 15 kDa under reducing conditions and approximately 25 kDa in non-reducing conditions. BaltMTx showed a rather specific inhibitory effect on platelet aggregation induced by epinephrine in human platelet-rich plasma in a dose-dependent manner, whereas it had little or no effect on platelet aggregation induced by collagen or adenosine diphosphate. BaltMTx also showed antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Escherichia coli. High concentrations of BatlMTx stimulated the proliferation of Leishmania (Leishmania) infantum and Leishmania (Viania) braziliensis. BaltMTx induced production of inflammatory mediators such as IL-10, IL-12, TNF-α and NO. BaltMTx could be of medical interest as a new tool for the development of novel therapeutic agents for the prevention and treatment of thrombotic disorders as well as bactericidal agent. / Dissertação (Mestrado)