OLIVEIRA, Francisco Fábio Bezerra de Oliveira. Efeito antinociceptivo e anti-inflamatório do óleo da polpa de pequi Caryocar coriaceum Wittm na artrite induzida por zymosan em ratos. 2013. 119 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-17T13:08:31Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_ffboliveira.pdf: 2206279 bytes, checksum: 06894b438b98ba4a1dd96b59e57da58e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-17T13:09:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_ffboliveira.pdf: 2206279 bytes, checksum: 06894b438b98ba4a1dd96b59e57da58e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-17T13:09:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_ffboliveira.pdf: 2206279 bytes, checksum: 06894b438b98ba4a1dd96b59e57da58e (MD5) Previous issue date: 2013 / Arthritis is an inflammatory disease that affects synovial joints. The most common symptoms are increased sensitivity to joint pain (hyperalgesia or hypernociception) and edema. An alternative to treating the disease is the inclusion of medicinal plants. The oil extracted from the fruits of Pequi (Caryocar coriaceum Wittm) has wide applicability in popular medicine. Pre-clinical tests have demonstrated the therapeutic properties of the oil, such as anti-inflammatory, gastroprotective and healing. Based on this background, the objective of this study was to investigate the antinociceptive and anti-inflammatory oil Pequi (OPCC) in zymosan-induced arthritis in rats. The study was approved by the Ethics Committee on Animal Research of the Federal University of Ceará (nº 83/11). Arthritis was induced by intraarticular injection in right knee of zymosan (1mg/50µL) and evaluated the articular incapacitation (hypernociception), joint swelling, leukocyte migration, cytokine release and expression of inflammatory mediators. The animals were pretreated orally with OPCC (100, 200 e 400mg/kg) or carrier for 7 consecutive days either as a single dose 45 minutes before the induction of arthritis. Dexamethasone, indomethacin or dipyrone were used as positive controls. The articular incapacitation was assessed 4 hours after injection of zymosan. Then the animals were euthanized, proceeding to wash the joint cavity EDTA in PBS for evaluation of leukocyte infiltration, myeloperoxidase activity and cytokine. The tissue synovial fluid was harvested for immunohistochemical analysis of TNF-α and COX-2. We also evaluated edema (transverse diameter of the joint) and increased vascular permeability by the method of Evans blue extravasation. The antinociceptive effect was evaluated further by testing plant mechanical hyperalgesia (von Frey electronic). The results showed a significant decrease (p <0.05) joint of disability in all groups treated with OPCC for 7 days, but with only a single dose, higher doses were effective. Compared to the migration of leukocytes into the synovial fluid all groups treated with the OPCC (single dose and daily doses) showed a significant reduction p <0.05) in the number of leukocytes in the BAL joints, accompanied by a decrease (p <0.05) in myeloperoxidase activity. There was a decrease (p <0.05) cytokine release (TNF-α and IL-1β) in the synovial fluid as well as expression of TNF and COX-2 in synovial tissue. The edema was inhibited (p <0.05) treatment with all doses in OPCC. Moreover, the groups treated with 100 and 400mg/kg of OPCC showed a significant reduction (p <0.05) in vascular permeability. The results also showed that the OPCC significantly reduced (p <0.05) hypernociception and PGE2 induced by carrageenan. The data suggest that the OPCC exhibits anti-inflammatory effect evidenced by arthritis model in rats induced by zymosan, which can be associated with the inhibition of the production of proinflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β). Apparently this action may be involved in the inhibition of neutrophil migration. We also suggest that the OPCC hypernociception prevents the development of carragenan-evoked inflammatory mechanical and PGE2 (direct blockade of hypernociception) in rats. / Artrite é uma doença inflamatória que afeta as articulações sinoviais. Os sintomas mais comuns são o aumento da sensibilidade à dor nas articulações (hiperalgesia ou hipernocicepção) e edema. Uma alternativa para o tratamento da doença é a inclusão de plantas medicinais. O óleo extraído dos frutos do pequi (Caryocar coriaceum Wittm), tem ampla aplicabilidade na medicina popular. Ensaios pré-clínicos demonstraram propriedades terapêuticas do óleo, tais como anti-inflamatória, gastroprotetora e cicatrizante. Com base neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar a atividade antinociceptiva e anti-inflamatória do óleo de pequi (OPCC) na artrite induzida por zymosan em ratos. O estudo foi aprovado pela Comissão de Ética em Pesquisa Animal da Universidade Federal do Ceará (nº 83/11). A artrite foi induzida por uma injeção intrarticular, no joelho direito, de zymosan (1mg/50µL) e foram avaliados a incapacitação articular (hipernocicepção), edema articular, migração de leucócitos, liberação de citocinas e expressão de mediadores inflamatórios. Os animais foram pré-tratados, por via oral, com OPCC (100, 200 e 400mg/kg) ou veículo durante 7 dias consecutivos ou em dose única, 45 minutos, antes da indução de artrite. Dexametasona, indometacina ou dipirona foram utilizadas como controles positivos. A incapacitação articular foi avaliada durante 4 horas após a injeção de zymosan. Em seguida os animais foram eutanasiados, procedendo-se a lavagem da cavidade articular com EDTA em PBS para avaliação de infiltração de leucócitos, atividade de mieloperoxidase e dosagem de citocinas. O tecido sinovial foi colhido para análise imunohistoquimica de TNF-α e COX-2. Também foram avaliados o edema (diâmetro transversal da articulação) e o aumento da permeabilidade vascular pelo método de extravasamento do Azul de Evans. O efeito antinociceptivo foi avaliado ainda através do teste de hiperalgesia mecânica plantar (Von Frey eletrônico) utilizando carraginia e PGE2. Os resultados demonstraram uma diminuição significativa (p<0,05) da incapacitação articular de todos os grupos tratados com OPCC durante 7 dias, no entanto com a dose única apenas as doses maiores foram eficazes. Em relação à migração de leucócitos para o líquido sinovial todos os grupos tratados com o OPCC (dose única e doses diárias) apresentaram significativa redução (p<0,05) do número de leucócitos no lavado articular, acompanhada de uma diminuição (p<0,05) na atividade da mieloperoxidase. Observou-se uma diminuição (p<0,05) da liberação de citocinas (TNF-α e IL-1β) no líquido sinovial, assim como expressão de TNFα e COX-2 no tecido sinovial. O edema foi inibido (p<0,05) com o tratamento com OPCC em todas as doses administradas diariamente. Além disso, os grupos tratados com 100 e 400mg/kg de OPCC apresentaram uma redução significativa (p<0,05) da permeabilidade vascular. Os resultados mostraram ainda que a OPCC reduziu significativamente (p < 0,05) a hipernocicepção induzida pela carragenina e PGE2. Os dados sugerem que o OPCC exibe efeito anti-inflamatório evidenciado pelo modelo de artrite induzida por zymosan em ratos, que pode ser associada com a inibição da produção de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-1β). Aparentemente essa ação pode estar envolvida com a inibição da migração de neutrófilos. Sugerimos ainda que o OPCC previne o desenvolvimento da hipernocicepção inflamatória mecânica evocada por carragenina e PGE2 (bloqueio direto da hipernocicepção) em ratos.

Made available in DSpace on 2016-03-28T12:39:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 luana_correa_ioc_mest_2015.pdf: 2768105 bytes, checksum: b1e9a130c709b0d2bade1edd2959792a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O galato de metila (GM) é um derivado de ácidos fenólicos encontrado em várias espécies de plantas, que apresenta efeitos biológicos dos quais se destacam sua ação antioxidante, antitumoral e antimicrobiana. Evidências indiretas sugerem um possível efeito antiinflamatório do GM, dentre eles a redução da produção de interleucina (IL)-6 e óxido nítrico (NO) ao inibir a fosforilação de ERK1/2 em macrófagos estimuladas por LPS. No entanto, não há relatos na literatura demostrando o efeito anti-inflamatório do GM em modelos in vivo. A artrite reumatoide (AR) é uma doença autoimune, inflamatória e sistêmica no qual fatores genéticos e ambientais contribuem para o seu desenvolvimento. A inflamação e o dano articular são mediados pelo influxo de leucócitos para o espaço sinovial, como neutrófilos e macrófagos. Essas células são responsáveis pela produção de mediadores inflamatórios tais como citocinas, quimiocinas e mediadores lipídicos que contribuem para a formação de um tecido invasivo denominado de pannus. Diferentes modelos experimentais são utilizados para o estudo da fisiopatologia da AR, incluindo a artrite induzida por zimosan que apresenta similaridades com a doença humana. Nas últimas décadas, a AR tem sido tratada com anti-inflamatórios não esteroidais, glicocorticoides e os fármacos antirreumáticos modificadores da doença. Recentemente, agentes biológicos (anticorpos ou receptores solúveis) foram incorporados a terapia. Apesar da eficácia clínica desses medicamentos, muitos pacientes não têm uma resposta significativa ou interrompem o tratamento devido a efeitos adversos Além disso, a disponibilidade limitada de produtos biológicos eficazes em países em desenvolvimento, a necessidade de administração parentérica, e o custo relativamente elevado destes produtos, restringem o acesso a essas terapias em muitos pacientes com AR e isso promove uma busca contínua para a identificação de novos alvos terapêuticos e desenvolvimento de novos medicamentos. Produtos derivados de plantas com ação anti-inflamatória têm um potencial na luta contra a artrite. Estes incluem os flavonóides, terpenos, quinonas, catequinas, alcaloides e derivados de ácidos fenólicos. No presente trabalho, demonstramos que o GM possui efeito anti-inflamatório nos modelos de edema de pata, pleurisia e artrite induzidos por zimosan. O GM foi capaz de inibir diferentes parâmetros da artrite experimental tais como: a formação de edema articular, a migração de leucócitos para a articulação inflamada e a produção de mediadores inflamatórios tanto proteicos quanto lipídicos em dois períodos do processo inflamatório, 6 e 24 horas. Além disso, o GM foi capaz de inibir diretamente a migração e adesão dos neutrófilos e também alterou a polimerização de filamentos de actina necessários para mobilização celular. Por fim, o GM foi capaz de inibir a ativação de macrófagos induzida por zimosan e IFN-\03B3 através da redução da produção da citocina IL-6, NO, expressão das enzimas COX-2 e iNOS, além de diminuir o influxo de cálcio dos compartimentos intracelulares para o citosol da célula. Tomados em conjunto, os resultados demonstraram um efeito anti-inflamatório do GM em modelos de inflamação induzido pelo zimosan, principalmente na artrite experimental inibindo o acúmulo de neutrófilos e a ativação de macrófagos / Methyl Gallate (MG) is a phenolic acids derivative found in several plant species, which has biological effects with the following highlights antioxidant, antimicrobial and antitumor actions. Indirect evidences suggest a possible anti - inflammatory effect o f MG , among them the reduction in the interleukin (IL) - 6 and nitric oxide (NO) production by inhibiting the ERK1/2 phosphorylation in LPS - stimulated macrophages. However, there are no reports in the literature demonstrating the anti - inflammatory effect of M G in in vivo models. Rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune, inflammatory and systemic disease, wherein genetic and environmental factors contribute to their development. Inflammation and joint damage are mediated by the leukocytes influx into the syn ovial space, such as neutrophils and macrophages. These cells are responsible for inflamm atory mediators production such as cytokines, chemokines, and lipid mediators that contribute to the formation of an invasive tissue called pannus. Different experimen tal models are used to study the RA pathophysiology, including zymosan - induced arthritis which presents similarities to the human disease. In recent decades, RA has been treated with nonsteroidal anti - inflammatory drugs, glucocorticoids and the disease - mod ifying antirheumatic drugs. Recently, biological agents (antibodies or soluble receptors) were added to the therapy. Despite the clinical efficacy of these drugs, many patients do not have a significant response or interrupt the treatment due to adverse ef fects. In addition, the limited availability of effective biological products in developing countries, the need of parenteral administration, and the relatively high cost of these products, restrict access to these therapies in many patients with RA and th at promotes a continuous search for identification of new therapeutic targets and development of new medicines. Products derived from plants with anti - inflammatory action have a potential in combating arthritis. These include flavonoids, terpenes, quinones , catechins, alkaloids and derivatives of phenolic acids. In this study, we demonstrate that MG has anti - inflammatory effects on paw edema, pleurisy and arthritis models induced by zymosan. M G was able to inhibit different parameters of the experimental ar thritis such as edema formation, leukocyte migration into the inflamed joint, and inflammatory mediators production protein and lipid mediators in two periods of the inflammatory process, 6 and 24 hours. Moreover, the MG was able to directly inhibit the ne utrophil migration and adhesion and has also changed the actin filaments polymerization required for cell mobilization. Finally, the MG was able to inhibit macrophage activation induced by zymosan and IFN - γ by reducing the cytokine IL - 6 and NO production , COX - 2 and iNOS expression , in addition to reduce the calcium influx of intracellular compartments into the cytosol of the cell. Taken together, the results demonstrated an anti - inflammatory effect of MG in zymosan - induced inflammation models, especially in the experimental arthritis by inhibiting the neutrophils accumulation and macrophage activation

LEITE, Ana Caroline Rocha de Melo. Efeitos antiinflamatórios e antinociceptivos do fitol, um ativador de NADPH oxidase, e tadalafil, um inibidor de 5-fosfodiesterase, em modelos experimentais. Fortaleza, CE, 119 f. Tese (Doutorado) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-05T13:21:05Z No. of bitstreams: 1 2010_tese_acrmleite.pdf: 1394350 bytes, checksum: 3e38574f74cf12a0cefe12cf1c1e4a60 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-10-07T16:56:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_tese_acrmleite.pdf: 1394350 bytes, checksum: 3e38574f74cf12a0cefe12cf1c1e4a60 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-07T16:56:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_tese_acrmleite.pdf: 1394350 bytes, checksum: 3e38574f74cf12a0cefe12cf1c1e4a60 (MD5) Previous issue date: 2010 / Reactive oxygen species (ROS) and nitrogen (RNS) promote tissue destruction in inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis. However, agents that activate ROS production by NADPH oxidase reduce inflammation in experimental models. Considering the controversial participation of via NO-cGMP in nociception, inhibitors of phosphodiesterase-5 have controversial role in models of pain. In this study, it was investigated the effect of phytol, an activating of NADPH oxidase, and tadalafil, a phosphodiesterase-5 inhibitor, in models of zymosan-induced arthritis (ZyA) and Zy-induced peritonitis as well as osteoarthritis by anterior cruciate ligament transection (ACLT) and acetic acid writhing. In ZyA, rats and mice received 1 mg and 100 µg zymosan intra-articular (i.art.), respectively. In peritonitis or writhing, mice received 100 µg of Zy or acetic acid intraperitoneal (i.p.), respectively. In osteoarthritis, rats underwent ACLT. Rats received phytol subcutaneous (s.c) 30 min – 8 d before ZyA or tadalafil orally (p.o.) 2 h after Zy. Other rats received SIN-1 (i.art.), ODQ (i.art.) or naloxone (i.p.) 1.5 – 2 h after Zy. Mice received phytol s.c. 1 – 24 h before Zy i.art.. Other mice received phytol i.art. 1 h before or 1.5 h after Zy. In peritonitis or writhing, phytol s.c. was injected 30 min – 24 h before Zy or acetic acid, respectively. In osteoarthritis, it was done one s.c. phytol administration 5 d before and 35 d after ACLT or tadalafil p.o. from 4 – 7 d after ACLT. Control groups received Zy i.art. or i.p. or acetic acid or were submitted to ACLT. The hypernociception was assessed by articular incapacitation test recorded as paw elevation time - PET. Cell influx (CI) was quantified in joint lavage after 6 h or 7 d of ZyA and in peritoneal lavage after 4 h of peritonitis. NO, IL-1, TNF-α, IL-10 and CINC-1 were measured in acute articular supernatant in rats while cartilage glycosaminoglycans (GAGs) were quantified after 7 d of ZyA in rats. Results were expressed as mean ± SEM, submitted to ANOVA and Tukey test or to Student’s t test (P <0.05). In writhing, data were expressed as median and submitted to the Kruskal-Wallis test (P<0.05). In ZyA, systemic (s.c.) and prophylactic administration of phytol decreased acute CI, independent of dose and time of administration, in mice. Local (i.art.) prophylactic or therapy injection of phytol decreased significantly CI in mice submitted to ZyA. Similar to the acute phase, phytol reduced significantly chronic CI. In ZyA in rats, phytol decreased acute and chronic CI as well as PET. As to GAGs, there was significant increase by phytol, reaching a level similar to naive animals. In peritonitis or writhing, phytol decreased CI or number of writhing, respectively, regardless of administration time. In osteoarthritis, phytol decreased significantly PET on days 1, 7, 9 and 11 as well as the peak between 4th and 7th d after ACLT. NO, IL-1, TNF-α and IL-10 were reduced in ZyA too. As tadalafil, there was decreased acute IC and PET, in a dose-dependent, in ZyA in rats. ODQ, administered prior tadalafil, reversed tadalafil effect about CI and PET in ZyA, that didn’t happen with a prior injection of naloxone. Tadalafil reduced TNF-α and IL-10 in ZyA and PET in osteoarthritis. The results show that phytol promotes anti-inflammatory and antinociceptive effects species, stimulus, tissue and route of administration independent. These actions are associate with the local release of NO and cytokines. In parallel, tadalafil has similar anti-inflammatory and antinociceptive effects associated with the lock on the local release of TNF. These findings suggest that activators of NADPH oxidase, possibly from compounds in the diet, modify the natural history of inflammatory arthropathy. The antinociceptive effect of phosphodiesterase-5 inhibitors should be explored, since these compounds are progressive indication in inflammatory diseases that occur with vascular damage and hypoxia. / Espécies reativas de oxigênio (EROs) e nitrogênio (ERNs) promovem destruição tecidual em doenças inflamatórias, como artrite reumatoide. Entretanto, agentes ativadores de NADPH oxidase, produtores de EROs, reduzem o processo inflamatório em modelos experimentais. Considerando-se a participação controversa da via NO-GMPc na nocicepção, inibidores de 5-fosfodiesterase têm papel contraditório em modelos de dor. Nesse trabalho, investigou-se o efeito do fitol, um ativador de NADPH oxidase, e tadalafil, um inibidor de 5-fosfodiesterase, em modelos de artrite induzida por zymosan (AZy) e peritonite induzida por Zy, bem como em osteoartrite por transecção do ligamento cruzado anterior (TLCA) e contorção abdominal por ácido acético. Na AZy, ratos e camundongos receberam 1 mg e 100 µg de Zy intra-articular (i.art.), respectivamente. Na peritonite ou contorção, camundongos receberam 100 µg de Zy ou ácido acético intraperitoneal (i.p.), respectivamente. Na osteoartrite, ratos foram submetidos à TLCA. Ratos receberam fitol subcutâneo (s.c.) 30 min – 8 d antes da AZy ou tadalafil via oral (v.o.) 2 h após Zy. Outros ratos receberam SIN-1 (i.art.), ODQ (i.art.) ou naloxona (i.p.) 1,5 – 2 h após Zy. Camundongos receberam fitol s.c. 1 – 24 h antes do Zy i.art.. Outros camundongos receberam fitol i.art. 1 h antes ou 1,5 h após Zy. Na peritonite ou contorção, fitol s.c. foi injetado 30 min – 24 h antes do Zy ou ácido acético, respectivamente. Na osteoartrite, foi feita a administração de fitol s.c. 5 d antes e 35 d depois da TLCA ou de tadalafil v.o do 4 – 7 d após TLCA. Grupos controles receberam Zy i.art. ou i.p. ou ácido acético ou foram submetidos à TLCA. A hipernocicepção foi avaliada pelo teste de incapacitação articular, registrada como tempo de suspensão da pata – TSP. O influxo celular (IC) foi quantificado no lavado articular, após 6 h ou 7 d da AZy e, no lavado peritoneal, após 4 h da peritonite. NO, IL-1, TNF-α, IL-10 e CINC-1 foram medidos no sobrenadante articular agudo em ratos, enquanto os glicosaminoglicanos (GAGs) da cartilagem foram quantificados após 7 d da AZy em ratos. Resultados foram expressos como média ± e.p.m., submetidos à ANOVA e teste de Tukey ou ao teste t de Student (P<0,05). Na contorção, dados foram expressos em mediana e submetidos ao teste de Kruskal-Wallis (P<0,05). Na AZy, a administração sistêmica (s.c.) e profilática de fitol diminuiu IC agudo, independente da dose e tempo de administração, em camundongos. A injeção local (i.art.) profilática ou terapêutica de fitol diminuiu de forma significativa IC em camundongos submetidos à AZy. Semelhante à fase aguda, fitol reduziu significativamente IC crônico. Na AZy em ratos, fitol diminuiu IC agudo e crônico, bem como TSP. Quanto aos GAGs, houve aumento significativo pelo fitol, atingindo nível semelhante ao dos animais naive. Na peritonite ou contorção, fitol reduziu IC ou número de contorções, respectivamente, independente do tempo de administração. Na osteoartrite, fitol reduziu significativamente TSP nos dias 1, 7, 9 e 11, bem como no pico entre 4º e 7º d após TLCA. NO, IL-1, TNF-α e IL-10 também foram reduzidos na AZy. Quanto ao tadalafil, houve diminuição do IC agudo e TSP, de forma dose-dependente, na AZy em ratos. ODQ, administrado previamente ao tadalafil, reverteu o efeito do tadalafil sobre IC e TSP na AZy, o que não ocorreu com a injeção prévia de naloxona. Tadalafil reduziu TNF-α e IL-10 na AZy e o TSP na osteoartrite. Os resultados mostram que fitol promove efeitos antiinflamatórios e antinociceptivos independente da espécie, estímulo, tecido e via de administração. Essas ações se associam à redução na liberação local de NO e citocinas. Paralelamente, tadalafil tem efeito antiinflamatório e antinociceptivo similar, associado ao bloqueio na liberação local de TNF. Esses achados sugerem que ativadores de NADPH oxidase, possivelmente a partir de compostos da dieta, modifiquem a história natural de artropatias inflamatórias. O efeito antinociceptivo de inibidores de 5-fosfodiesterase deve ser explorado, uma vez que esses compostos encontram progressiva indicação em patologias inflamatórias que cursam com dano vascular e hipóxia.

ALCÂNTARA, Antônia Célia de Castro. Avaliação dos pacientes com artrite idiopática juvenil acompanhados no Hospital Universitário Walter Cantídio no período de maio de 2008 a maio de 2012. 2013. 95 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-02-19T13:06:38Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_accalcântara.pdf: 1620976 bytes, checksum: ff011f9bd870ab2a8e57717c2e052fda (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-02-19T13:14:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_accalcântara.pdf: 1620976 bytes, checksum: ff011f9bd870ab2a8e57717c2e052fda (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-19T13:14:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_accalcântara.pdf: 1620976 bytes, checksum: ff011f9bd870ab2a8e57717c2e052fda (MD5) Previous issue date: 2013 / Juvenile idiopathic arthritis (JIA) is the most common chronic disease of childhood in USA and Europe. In Brazil, there are few epidemiological studies on the specific disease. This is the first study in Northeast Brazil who described the clinical profile, response to treatment with biological drugs and non-biological drugs and adverse events in JIA. Exclusion criteria were secondary causes of chronic arthritis. Two reviews with an average interval of 37 months were conducted: the first at baseline, the second at the end, which was researched treatment given, assessment of disease activity through DAS28 (Disease Activity Score), functional assessment by the CHAQ (Childhood Health Assessment Questionnaire) and joint damage by JADI AM (The Modified Juvenile Arthritis Damage Index). Seventy-four patients were enrolled and 05 were excluded because alternative diagnosis of chronic arthritis. We followed sixtynine: 46 girls and 23 boys. Forty-seven (68.1%) came from the capital, 48 (69.5%) lived with both parents. The mean age at onset was 7.89 ± 3.5 years, the average age of definitive diagnosis 9.70 ± 3.9 years and the time interval between the onset of symptoms and definitive diagnosis 12 months (01-60). At the time of definitive diagnosis, the average number of active joints was 7.7. ± 4.7, extra-articular manifestations occurred in 43 (62.3%) and joint deformity in 16 (23%), ESR was elevated in 68 (98.5%).The rheumatoid factor was positive in 16 (23.1%) and the Fan in 08 (11.5%). According to the ILAR classification: 23 (33.3%) had polyarticular negative rheumatoid factor, 13 (18.8%) polyarticular positive rheumatoid factor, 18 (26.0%) as oligoarticular (08 persistent and 10 extended), 10 (14.5%) as systemic, 04 (5.8%) with arthritis associated to enthesitis and 01 (1.4%) as psoriatic arthritis. The deformity group showed greater time interval between onset of symptoms and definitive diagnosis (p=0.04) and more active joints at diagnosis compared to those without deformity (p =0.008). The mean DAS28 at the beginning was 5.42 ± 0.77 and 3.25 ± 1.42 at the end. The mean duration of disease at study was 12.4 ± 6.2 years. In 21.97%, CHAQ was zero. Nineteen (27.5%) patients presented JADI AM> 0. During the study, 50.7% used NSAIDs, 17.3%, intraarticular steroid, 82.6% Methotrexate (MTX), Leflunomide (LFN) 62.3%, 28.9% etanercept, 5.7% adalimumab. MTX monotherapy do not sustained low disease activity in most patients; LFN was a safe and effective therapeutic option to MTX monotherapy before initiating biologic therapy. Etanercept was the most widely used biologic after failure with non-organic. The strategy adopted treatment reduced pain, discomfort, and contributed to improving the quality of life of children. / Artrite idiopática juvenil é a doença crônica mais comum da infância nos países do hemisfério Norte e na Europa. No Brasil, há poucos estudos epidemiológicos específicos sobre a doença. Esse é o primeiro estudo no Nordeste brasileiro que descreveu o perfil clínico, a resposta ao tratamento com drogas não biológicas e biológicas e eventos adversos dos pacientes com esse diagnóstico. Critério de exclusão consistiu no diagnóstico de artrite crônica de outra causa definida. Duas avaliações com intervalo médio de 37 meses foram realizadas: a primeira no início do estudo; a segunda ao final, onde foi pesquisado tratamento utilizado, avaliação de atividade de doença pelo DAS28 (Disease Activity Score), avaliação funcional pelo CHAQ (Childhood Health Assessment Questionaire) e de dano articular pelo JADI AM (The modified Juvenile Arthritis Damage Index). Setenta e quatro pacientes foram selecionados, 05 foram excluídos devido diagnóstico alternativo de artrite crônica. Sessenta e nove foram seguidos: 46 meninas e 23 meninos. Quarente e sete (68,1 %) procedia da capital, 48 (69,5 %) residia com ambos os pais. A idade média no início dos sintomas foi de 7,89 ± 3,5 anos, a idade média do diagnóstico definitivo 9,70 ± 3,9 anos e o intervalo de tempo entre o início dos sintomas e o diagnóstico definitivo 12 meses (min 01, máx. 60). Na época do diagnóstico definitivo, o número médio de articulações ativas foi 7,7. ± 4,7; manifestação extra-articular ocorreu em 43 (62,3 %) e deformidade articular em 16 (23 %); VHS estava elevado em 68 (98,5 %); 08 (11,5 %) apresentavam FAN reagente e 16 (23,1 %) fator reumatoide positivo. De acordo com a classificação da ILAR:23 (33,3 %) apresentou o subtipo poli articular soronegativo, 13 (18,8 %) poli articular soropositivo, 18 (26,0 %) oligo-articular: 08 (11,6 %), persistente e 10 (14,5 %), estendido; 10 (14,5 %) sistêmico, 04 (5,8 %) relacionado à entesopatia e 01 (1,4%) a forma psoriática. O grupo com deformidade apresentou maior intervalo de tempo entre o início dos sintomas e o diagnóstico definitivo (p=0,04) e mais articulações ativas no diagnóstico comparado ao grupo sem deformidade (p=0,008). A média do DAS28 no início foi 5,42 ± 0,77 e no final 3,25 ± 1,42. O tempo de doença médio ao final do estudo foi de 12,4 ± 6,2 anos. Em 21,97 % CHAQ foi igual a zero. Dezenove (27,5 %) pacientes apresentou JADI AM > 0. Durante o estudo 50,7 % utilizou anti-inflamatório não esteroidal, 17,3 % corticoide intra-articular, 82,6 % Metotrexato (MTX), 62,3 % Leflunomida (LFN), 28,9 % etanercepte, 5,7 % adalimumabe. Monoterapia com MTX não sustentou baixa atividade de doença na maioria dos pacientes; LFN foi uma opção terapêutica segura e eficaz à monoterapia com MTX antes de iniciar terapia biológica. Etanercepte foi o biológico mais utilizado após falha com não biológicos. A estratégia de tratamento adotado reduziu a dor e o desconforto e contribuiu para melhoria da qualidade de vida das crianças.

CARMO, Luana David do. Proteínas isoladas do látex de Himatanthus drasticus (MART.) Plumel apocynaceae reduzem a resposta inflamatória e nociceptiva na artrite induzida por zymosan em camundongos. 2015. 91 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-04-10T14:14:08Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_ldcarmo.pdf: 1347108 bytes, checksum: 71a70f834b3099fffa263f0419790148 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-04-10T14:21:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_ldcarmo.pdf: 1347108 bytes, checksum: 71a70f834b3099fffa263f0419790148 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-10T14:21:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_ldcarmo.pdf: 1347108 bytes, checksum: 71a70f834b3099fffa263f0419790148 (MD5) Previous issue date: 2015 / Himatanthus drasticus is a laticiferous plant of the family Apocynaceae found in South America and popularly known as janaguba. Your latex is known as "janaguba milk" and has several pharmacological activities. This work aimed to study the effect of isolated proteins from Himatanthus drasticus latex (HdLP) zymosan (Zy) induced arthritis. Arthritis was induced in male Swiss mice (n = 6) by administering 0.1 mg Zy intra-articular. The animals were treated with HdLP (5 and 50 mg/kg i.v.) or Saline i.v. 1 hour after the Zy and HdLP (50 mg/kg v.o.) or Dexamethasone (2 mg/kg s.c.) 1 hour before Zy. After six hours of induction the animals were euthanized, the joint washing carried, and collected for leukocyte count, determination of the myeloperoxidase (MPO) activity and inflammatory mediators (NO, TNF-α, IL-1β, IL-6 and IL-10). The edema was evaluated by measuring the diameter articular and the vascular permeabilitym through extravasation. In addition, we evaluated the effect of HdLP on synovial inflammation as well the mechanical hypernociception. For statistical analysis we used the ANOVA/Bonferroni or Kruskal Wallis/Dunns; p <0.05 considered significant. This study was approved by the Ethics Committee on Animal Research of the UFC - CEPA (38/14). HdLP (50 mg/kg i.v.) a significant decrease on the leukocyte count in MPO activity and levels (NO, IL-1β, and IL-6). It was also observed a decrease in swelling and damage to the synovial membrane. The nociceptive threshold was increased by HdLP 50 mg/kg i.v. and 50 mg/kg v.o. HdLP has antinociceptive and anti-inflammatory activity in the model of arthritis induced by Zy. The effect seems to be related to the decreased migration of neutrophils and the release of inflammatory mediators, reducing damage to the synovial membrane and hypernociception. / Himatanthus drasticus é uma planta laticífera pertencente à família Apocynaceae encontrada na América do Sul e conhecida popularmente como janaguba. Seu látex é conhecido como “leite de janaguba” e apresenta várias atividades farmacológicas. O presente trabalho teve como objetivo estudar o efeito das proteínas isoladas do látex de Himatanthus drasticus (HdLP) em modelo de artrite experimental induzida por zymosan (Zy). A artrite foi induzida em camundongos machos swiss (n=6) através da administração de 0,1 mg Zy i.a. Os animais foram tratados com HdLP (5 e 50 mg/kg i.v.) ou Salina i.v. 1 hora após o Zy e com HdLP (50 mg/kg v.o.) ou Dexametasona (2 mg/kg s.c.) 1 hora antes do Zy. Seis horas após a indução os animais foram eutanasiados, foi realizada a lavagem da articulação e o lavado articular coletado para avaliação do efeito de HdLP sobre a migração de leucócitos, atividade da mieloperoxidase (MPO) e liberação de mediadores inflamatórios (NO, TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-10). O edema foi avaliado pela medição do diâmetro transversal da articulação e pela avaliação da permeabilidade vascular. Além disso, foi avaliado o efeito de HdLP sobre processo inflamatório na membrana sinovial e sobre a hipernocicepção mecânica utilizando uma versão eletrônica (VonFrey). Para as análises estatísticas foi utilizado o teste ANOVA/Bonferroni ou Kruskal Wallis/Dunns; p <0,05 foi considerado significante. Este estudo foi aprovado pela Comissão de ética em Pesquisas com Animais da UFC - CEPA (38/14). HdLP 50 mg/kg i.v. apresentou uma diminuição significativa na contagem de leucócitos, nos níveis de MPO e na liberação de medidores inflamatórios (NO, IL-1β, e IL-6). Também foi observado uma diminuição do edema e no dano à membrana sinovial. Na hipernocicepção mecânica os grupos (HdLP 50 mg/kg i.v. e 50 mg/kg v.o.) apresentaram um aumento no limiar nociceptivo. HdLP apresenta atividade antinociceptiva e anti-inflamatória no modelo de artrite induzida por Zy. O efeito parece estar relacionado com a diminuição da migração de neutrófilos e da liberação de mediadores inflamatórios, reduzindo o dano na membrana sinovial e a hipernocicepção.

FIGUEIREDO, Vilena Barros de. Avaliação clínico-laboratorial de pacientes com artrite reumatóide : análise comparativa do fator reumatóide e de anticorpos anticitrulina. 2005. 56 f. Dissertação (Mestrado em Patologia)- Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-03T16:08:31Z No. of bitstreams: 1 2005_dis_vbfigueiredo.pdf: 244358 bytes, checksum: 5be4031210fb0076ce4a29be0ea4e157 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:33:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_dis_vbfigueiredo.pdf: 244358 bytes, checksum: 5be4031210fb0076ce4a29be0ea4e157 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:33:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_dis_vbfigueiredo.pdf: 244358 bytes, checksum: 5be4031210fb0076ce4a29be0ea4e157 (MD5) Previous issue date: 2005 / Rheumatoid arthritis is an inflammatory, chronic and auto-immune disease that develops in degrees of articular destruction and extra-articular changes being able to lead to functional disability. Besides clinical assessment the diagnosis is based on the determination of the rheumatoid factor being this one also positive in healthy people as well as in other infectious and auto-immune diseases. Anticyclic citrullinated peptide (anti-CCP) antibodies have been used in diagnosis of rheumaoid arthritis (RA) and seen to be superior to rheumatoid factor (RF) in early onset RA diagnosis. The target of the study is to demonstrate the presence of anticitrulline antibodies in patients with rheumatoid arthritis diagnostic comparing with laboratory, clinical parameters and with the assessment of the quality of life of these patients. The “Health Assessment Questionnaire” has been used to assess the quality of life. We performed an immunoturbidimetry test for detection of RF (Roche,Indianopolis, USA) and an ELISA for anti-CCP antibodies (Inova, San Diego, USA) in 69 patients presenting, at least, 4 of the American College of Rheumatology criteria for classification of RA and in 20 healthy controls. For statistical analysis we used thr Fisher exact test and the Spearmann test Significance was reached wuth P<0.05. RA patients were aged between 18-75 years (mean = 43.9 years), 66 (95.7%) of then were female, controls age ranged between 20-60 years.The period of RA onset varied from 4 to 384 months (mean = 74.0 and median = 48.0). RF was positive in 48 (69.6%) patients and in 1 (0,5%) control. The anti-CCP was positive in 36 (52.2%) patients and in 2 (10%) controls. A significant correlation of RF and anti-CCP tests was observed with P< 0,0001 and this study suggests that anti-CCP was not superior to RF in diagnosis of established RA. / A artrite reumatóide é uma doença auto-imune crônica e inflamatória que evolui com graus de destruição articular e alterações extra-articulares podendo levar a incapacidade funcional. Além da avaliação clínica o diagnóstico baseia-se na determinação do fator reumatóide (FR) sendo que este é também positivo em indivíduos saudáveis como também em outras doenças auto-imunes e infecciosas. Os anticorpos antipeptídeos citrulinados cíclicos (anti-CCP) tem sido usados no diagnóstico da artrite reumatóide sendo superiores ao fator reumatóide (FR) no diagnóstico da artrite reumatóide (AR) recente. O estudo teve como objetivo demonstrar a presença de anticorpos anticitrulina em pacientes com o diagnóstico de artrite reumatóide comparando com parâmetros clínicos, laboratoriais e com a avaliação da qualidade de vida desses pacientes. Para avaliar a qualidade de vida foi aplicado o questionário “Health Assessment Questionnaire.” Foi realizado um teste por imunoturbidimetria, para a detecção de FR (Roche, Indianopolis, EUA) e ELISA para o anti-CCP (Inova , San Diego, EUA) em 69 pacientes apresentando, ao menos, 4 dos critérios do Colégio Americano de Reumatologia para a classificação de AR e em 20 controles saudáveis. A análise estatística utilizou o teste exato de Fisher e teste de Spearmann com significância alcançada com P<0.05. Os pacientes com AR tinham entre 18-75 (média = 43.9 anos), 66 (95.7%) eram mulheres, os controles com idades variando entre 20-60 anos. O início da AR variou de 4 a 384 meses (média = 74.0 e mediana = 48.0). FR foi positivo em 48 (69.6%) pacientes e 1 (0,5%) controle. O anti-CCP foi positivo em 36 (52.2%) pacientes e em 2 (10%) controles. Foi observada uma correlação significante dos testes FR e anti-CCP com P< 0.0001 e este estudo sugere que o anti-CCP não foi superior ao FR no diagnóstico da AR estabelecida.

CAVALCANTE, Cid Freitas. Estudo do efeito da fração não dialisável do látex de Calotropis procera (ait) R. Br em modelos experimentais de inflamação, com ênfase em artrite. 2007. 89 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-09T12:26:59Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_cfcavalcante.pdf: 571371 bytes, checksum: 9d6fb276b87dfaccfb5726f2ee96e864 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-12T12:13:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_cfcavalcante.pdf: 571371 bytes, checksum: 9d6fb276b87dfaccfb5726f2ee96e864 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-12T12:13:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_cfcavalcante.pdf: 571371 bytes, checksum: 9d6fb276b87dfaccfb5726f2ee96e864 (MD5) Previous issue date: 2007 / The objective of this dissertation was to investigate the effect of the latex from Calotropis procera in experimental models of inflammation, with special focus on arthritis. The plant belongs to Asclepiadaceae family and is largely found in Northeast of Brazil. The plant latex presents clear anti-inflammatory effects, which is kept by its non-dialyzable protein fraction (NDPF), a less toxic and rubber free fraction. NDPF was obtained according to a procedure established by our group, which, in short, involves several steps of centrifugation and dialysis. Male Wistar rats (230 – 280g) and Balb/c and Swiss male mice (18 – 35g) were organized in groups of 6 animals: a control group (no treatment), a sham group, in which only the inflammatory event was induced (arthritis by zymosan – AZy), an antigen-induced arthritis group (AIA), an infectious peritonitis group (IP) and an experimental group, treated with NDPF. The AZy group was submitted to an articular incapacitation test to measure the paw elevation time (PET, in seconds) and, after sacrifice, total and differential cell count in the intra-articular fluid, histopathological study of the articulation, vascular permeabilization, ADA and TNF-α assays. The results were expressed in means + S.E.M. and significative differences were accepted if p<0.05 (ANOVA/Bonferroni). NDPF inhibited PET in AZy with a maximum effect in the dose of 3mg/kg, at 4h after inflammation induction. There was also a significative reduction of vascular permeability, TNF-α and ADA serum levels and an improvement of the histopathological profile. NDPF also reduced the intra-articular influx of cells in AZy and AIA, especially of neutrophils. In IP, NDPF inhibited the cellular migration and the levels of ADA. So, the results confirmed the expected anti-inflammatory effect of NDPF in arthritis and peritonitis models and suggested a possible mechanism of action involving either an increase of adenosine concentration due to the reduction of ADA levels or an inhibition of TNF-α or both events. Finally, the NDPF chronical toxicity was evaluated confirming that the dose of 10mg/Kg presents well defined pharmacological effects without significant alterations on the animal parameters. The characteristics of NDPF open an interesting possibility for alternative therapy to substitute the toxic effects of steroidal and some non-steroidal drugs, used in rheumatoid diseases, so prevalent among our population. / Tendo em vista a prevalência de doenças inflamatórias reumáticas tais como a artrite reumatóide em nosso meio e a necessidade constante de novas terapias alternativas às drogas esteróides e não esteroidais, que apresentam tantos efeitos nocivos em uso prolongado, decidimos investigar a ação do látex de Calotropis procera em modelos experimentais de inflamação, com foco na artrite. O látex dessa planta da família Asclepiadaceae, vastamente encontrada no Nordeste brasileiro, tem efeitos sabidamente antiinflamatórios em algumas situações, notadamente a sua fração protéica majoritária, não dialisável (FNDL), menos tóxica e desprovida de borracha. A fração foi obtida a partir de um protocolo estabelecido por nossos colaboradores, que, em suma envolve várias etapas de centrifugação e diálise até o produto final liofilizado. Utilizamos ratos Wistar machos com peso entre 230 e 280g e camundongos, Balb/c e Swiss, pesando entre 18 e 35g, em grupos de seis indivíduos nos quais um controle, outro sham em que foi induzido o evento inflamatório (artrite por Zy - AZy, artrite induzida por antígeno - AIA ou peritonite infecciosa - PI) e o experimental no qual foi tratado com FNDL. O grupo AZy foi submetido a teste de incapacitação articular pelo modelo de tempo de suspensão da pata (TSP) e, após sacrifício, à contagem de células total e diferencial no lavado articular, estudo histopatológico da articulação, avaliação de permeabilidade vascular, dosagem de ADA e TNF-α. Os resultados foram expressos em média ± e.p.m. e comparados em testes estatísticos ANOVA/Bonferroni, admitindo-se P<0.05 para significância. A FNDL inibiu o TSP na AZy com efeito máximo na dose de 3mg/kg no t = 4h. Houve também redução significativa da permeabilidade vascular, nos níveis séricos de TNF-α e de ADA, e melhora no quadro histopatológico. Também reduziu o influxo celular sinovial na AZy e AIA, sobretudo de neutrófilos. Na PI, inibiu a migração celular e os níveis de ADA. Dessa forma, os resultados confirmaram o efeito antiinflamatório da FNDL nestes modelos de artrite e peritonite e sugeriram um possível mecanismo de ação relacionado a um aumento da adenosina, por conta da redução dos níveis de ADA, ou por inibição do TNF-α. Por fim procedemos a avaliação da toxicidade da droga em tratamento crônico, constatando que a dose de 10mg/Kg apresenta bons efeitos farmacológicos sem alterações significativas nos parâmetros selecionados.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-07-04T04:05:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 346860.pdf: 2067486 bytes, checksum: 4f626583d552b3f9e2067337f918e42f (MD5) Previous issue date: 2017 / A osteoartrite (OA) e a artrite reativa (ReA) são artropatias que apresentam importante impacto social, médico e econômico mundial, devido a dor incapacitante que se desenvolve como principal sintoma. Recentemente, devido ao grande número de efeitos adversos observados com o uso de analgésicos e anti-inflamatórios administrados para o tratamento das doenças articulares, o tramadol foi proposto como analgésico de primeira escolha em diferentes condições musculoesqueléticas por fornecer analgesia multimodal e com melhor perfil de segurança que opioides convencionais. A escolha de um analgésico com mínimos efeitos colaterais, aliada à administração pela via intratecal, que permite a modulação da transmissão nociceptiva ao nível espinhal, pode ser um tratamento com significativas vantagens. O presente estudo objetivou demonstrar o efeito analgésico e antiedematogênico do tramadol administrado pela via intratecal no modelo de OA induzida por iodoacetato monossódico (MIA) e ReA induzida por carragenina/LPS. Os resultados demonstraram que a administração intratecal de tramadol reduz a incapacitação e o edema articular induzidos pelo MIA e LPS, confirmando o efeito antinociceptivo do tramadol evidenciado em outros modelos de dor e testes clínicos. Foi também proposto que este analgésico pode inibir o processo inflamatório, contudo, os mecanismos exatos da ação do tramadol na medula espinhal ainda não estão completamente elucidados. O tramadol foi capaz de inibir a nocicepção e o edema articular nos modelos de OA e ReA, sugerindo que este fármaco pode ser efetivo no tratamento de artropatias como a OA e a ReA. Até onde é de nosso conhecimento, este trabalho é o primeiro a relatar o efeito simultâneo antinociceptivo e antiedematogênico do tramadol intratecal em modelos de OA e ReA. Além disso, este estudo demonstra que a administração do tramadol pela via intratecal pode ser uma alternativa ao tratamento pela via oral nas artropatias, proporcionando melhor eficácia e redução da quantidade de fármaco necessária para o efeito analgésico.<br> / Abstract : Osteoarthritis (OA) and reactive arthritis (ReA) are both threatening kinds of arthropaties which bring significative social, medical and economic burden, mainly due to the incapacitating pain among a multitude of symptoms. Recently, tramadol has been proposed as a first choice analgesic in several musculoskeletal diseases for its analgesic features associated with a lower side-effects profile than conventional analgesic and anti-inflammatory drugs. In addition, the use of intrathecal route for drug administration may even enhance the analgesic effects with further protection against systemic side-effects. The aim of the present study was to test the analgesic and anti-edematogenic effects of tramadol given by the intrathecal route in the monosodic iodoacetate (MIA) and carrageenan/LPS models of arthritis in rats, as an approach of osteoarthritis and reactive arthritis, respectively. Tramadol diminished both incapacitation and articular edema produced by MIA and LPS confirming its analgesic effect and also evidencing an anti-edematogenic property when given by intrathecal route. Such effects were obtained with doses at least a hundred times lower than systemic doses. In conclusion, tramadol given by intrathecal route was suggested to produce a better overall therapeutic effect than systemic administration, at least in the present experimental arthritis models. The lower doses needed to obtain such therapeutic effects also suggest the risk of systemic side-effects is lesser than that expected with oral or intravenous dosages.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-03-15T04:04:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337680.pdf: 39867224 bytes, checksum: aa1fb541ef4c32f9c62b09d17db51970 (MD5) Previous issue date: 2015 / A apresentação bilateral de sinais clínicos de uma doença sugere um envolvimento do sistema nervoso na sua fisiopatogenia. Neste estudo em ratos, a partir de um modelo animal, um estímulo pró-inflamatório de adjuvante incompleto de Freund (CFA) (250 µg de Mycobacterium tuberculosis e 100 µl de adjuvante), unilateral e não sistêmico na pata, conduziu ao comprometimento articular da pata contralateral homóloga após 21 dias do estímulo flogístico. Durante o desenvolvimento do quadro inflamatório foi possível observar uma inter-relação entre o aumento de volume da pata ipsilateral com o aumento da contralateral nos animais onde a lateralização ocorreu. Quanto aos mecanismos dessa simetria, a incidência da doença contralateral foi reduzida quando uma potente neurotoxina para TRPV1, a resiniferatoxina, foi administrada (760 ng) pela via intratecal, cinco dias antes do CFA. A redução da magnitude do quadro bilateral também, foi reduzida com a administração intratecal do bloqueador do co-transportador de Cl- (NKCC1), a bumetanida (60 µg) 30 minutos após o CFA e diariamente por mais 4 dias. Sendo assim, ficou demonstrado haver uma participação de fibras nervosas TRPV1 positivas com envolvimento do Reflexo da Raiz Dorsal (RRD). O RRD dá origem a uma transmissão que percorre de forma antidrômica as fibras sensoriais primárias (fibras C e Ad) e libera neuropeptídeos na periferia que são pró-inflamatórios e pró-artritogênicos com participação do NKCC1. A compreensão da passagem da informação de um hemisfério ao outro considerou a notável relação entre as células neuronais e não neuronais, que identifica as células gliais como responsivas aos sinais vindos da periferia, implicando a capacidade dessas células em intermediar um efeito contralateral. A ativação microglial, vista pelo aumento da imunorreatividade `a marcação pelo anticorpo anti- Iba-1, foi observada em ambos os hemisférios do modelo de artrite simétrica deste estudo, mas também, com a administração intratecal de Zymosan A (0,01 ou 100 ng), um ligante exógeno do receptor TLR2 que é, principalmente, encontrado em microglia. Concomitantemente, houve um aumento da incidência de lateralização em ambos os casos. A prevenção da ocorrência da simetria foi associada ao bloqueio da ativação microglial pela administração intratecal prévia e repetida de minociclina (50 µg), o que não ocorreu com a administração intraperitoneal da mesma droga, mostrando por essa dose e via um mecanismo medular exclusivo. Um ponto de partida para especular a forma como ocorre a comunicação entre as células da microglia e as fibras TRPV1 positivas, capaz de promover a ocorrência de um processo inflamatório em articulação contralateral, foi obtido com a administração IT prévia de Fractalcina (CX3CL1) (30 ng) e TNF-a (3 ng). Ambos os tratamentos aumentaram e anteciparam o desenvolvimento de simetria associado a uma maior ativação microglial bilateral. Por consequência, considerando-se o papel da medula na etiologia de enfermidades, o tratamento de muitas doenças não se resumiria apenas na inibição da atividade neuronal aferente, mas também poderia envolver igualmente estratégias para reduzir a atividade eferente das fibras sensoriais e do estado de interação neurônio-glia. A medula espinhal não é apenas uma simples via de transmissão de uma informação sensorial da periferia para o cérebro, mas um local potencial para a modulação da resposta inflamatória durante um insulto periférico.<br> / Abstract : The bilateral expression of clinical signs of a disease suggests the involvement of the nervous system in its physiopathology. In the present study in rats, an animal model of joint damage with unilateral, non-systemic pro-inflammatory CFA stimulus (250 µg) on the paw showed the development of arthritis in the homologous contralateral paw after 21 days of the inflammatory stimulus. In addition, an inter-relation was found between the increased volume of the ipsilateral paw and the increase of the contralateral paw among the animals that showed lateralization. This model  which offers an ideal opportunity to study the mechanisms and develop treatment strategies of the progressions in arthritic lesions  shows a role in the symmetry of TRPV1-positive and capsaicin-sensitive nervous fibers with the involvement of the dorsal root reflex (DRR). DRR originates a transmission that runs antidromically across the primary sensory fibers (fibers C and Ad) and releases pro-inflammatory and pro-arthritogenic neuropeptides in the periphery. The understanding of the passage of information from one hemisphere to the other considered the notable relation between neuronal and non-neuronal cells, which identifies the glial cells as responsive to the signs from the periphery, thus implying the ability these cells have to intermediate a contralateral effect. The microglial activation, noticed through the increase in immunoreactive marking by the anti-Iba-1 antibody, was observed in both hemispheres in the symmetric arthritis model in this study, but also through the intrathecal administration of Zymosan A, an exogenous ligand of the receptor TLR2 mainly found in microglia. At the same time, the incidence of lateralization increased in both cases. Symmetry prevention was associated with the blocking of the microglial activation by the prior repeated intrathecal administration of minocycline, which did not occur with the intraperitoneal administration of the same drug, thus showing an exclusive medullar mechanism through this dose and administration pathway. One starting point to speculate about how the communication takes place between the microglia cells and the TRPV1-positive and capsaicin-sensitive fibers, able to promote an inflammatory process in the contralateral joint, was obtained by previous IT administration of Fractalkine (CX3CL1) and TNF-a. Both treatments increased and brought forward the development of symmetry associated with greater bilateral microglial activation. Consequently, given the role of the medulla in the etiology of disorders, the treatment of many diseases would not be limited to simply inhibiting the afferent neuronal activity, but could also equally involve strategies to reduce the efferent activity of the sensory fibers and of the neuron-glia interaction status. The spinal cord is not only a simple transmission path of sensory information from the periphery to the brain, but rather a potential site to modulate the inflammatory response during a peripheral injury.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T13:03:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339419.pdf: 1426935 bytes, checksum: 0d8c0c0486e49626e60185221fcff86b (MD5) Previous issue date: 2015 / Leflunomida e metotrexato são drogas modificadoras do curso da doença classicamente utilizadas por via sistêmica no tratamento da artrite reumatoide e o sucesso clínico está relacionado com a inibição da proliferação de células imunes e de citocinas na cavidade articular. Baseado nestes potenciais efeitos inibitórios, nossa principal hipótese é que a administração direta dessas drogas na medula é capaz de reduzir a infiltração de leucócitos, edema e incapacitação articular em um modelo de artrite induzida por LPS. Ratos Wistar fêmeas, pesando entre 200 e 220 g, receberam as drogas por via intratecal, 2 horas antes da administração de LPS (30 ng/ 50 µl; i.a.) nas articulações de joelho previamente sensibilizadas com carragenina (300 µg/ 20 µl; i.a.). A incapacitação articular foi avaliada pelo tempo de elevação da pata (TEP; s) durante o deambular de 1 min; o edema pelo aumento do diâmetro articular (DA; cm) e a migração celular pela contagem total de leucócitos (CT; cel/mm3) do fluido sinovial coletado ao final de 5 horas de observação dos parâmetros. As administrações por via intratecal de teriflunomida (metabólito ativo da leflunomida) (0,1 e 20 µg/ 10 µl) e metotrexato (25 µg/ 10 µl) foram capazes de reduzir a migração celular para o fluido sinovial, a incapacitação e o edema articular promovidos pelo LPS, ao contrário de quando administrados por via intraperitoneal, sugerindo que o sítio de interação para os efeitos antiartríticos das drogas foi restrito ao ambiente medular. A coadministração com uridina (10 µg) reverteu apenas os efeitos inibitórios produzidos pela menor dose de teriflunomida, sugerindo que apenas em maiores concentrações o mecanismo de ação da droga independe da inibição da síntese de novo de nucleotídeos. A coadministração por via intratecal de teriflunomida (0,1 µg) e bumetanida (60 µg), um bloqueador do reflexo da raiz dorsal, não potencializou o efeito inibitório da teriflunomida na redução da incapacitação, edema e migração celular, sugerindo que a inibição do reflexo da raiz dorsal e consequentemente da inflamação neurogênica estejam envolvidos na ação medular da teriflunomida. A coadministração de teriflunomida (0,1 µg) e metotrexato (25 µg) por via intratecal promoveu um efeito somatório na inibição da inflamação articular, provavelmente pela adição do mecanismo imunomodulador do metotrexato na inibição da síntese de citocinas pelas células gliais. O presente estudo sugere que o tratamento por via intratecal com teriflunomida e metotrexato modula a inflamação periférica provavelmente por reduzir o aumento da quantidade de citocinas inflamatórias na medula, através da inibição da atividade glial que inibea sensibilização dos terminais neuronais medulares envolvidos na sinalização nociceptiva e na indução da inflamação neurogênica. Esta estratégia pode representar uma nova abordagem terapêutica para o tratamento da artrite reumatoide com menos efeitos colaterais sistêmicos.<br> / Abstract : Leflunomide and methotrexate are disease-modifying antirheumatic drugs classically used systemically in the treatment of rheumatoid arthritis and clinical success is related to inhibition of proliferation of immune cells and cytokines in the joint cavity. Based on these potential inhibitory effects, our central hypothesis is that the direct administration of these drugs on the spinal cord is able to reduce articular incapacitation, edema and synovial leukocyte infiltratio induced in a model of LPS-induced arthritis. Female Wistar rats, weighing between 200 and 220 g were given the drugs intrathecally 2 hours before administration of LPS (30 ng/ 50 µl; i.a.) in the knee joints previously sensitized with carrageenan (300 µg/ 20 µl; i.a.). Inflammatory-induced incapacitation was measured hourly by the paw elevation time (TEP; s) in 1-min period of observation, and edema was evaluated by the articular diameter increase (DA; cm) taken just after each incapacitation measurement. After the 5-h period of observation parameters the synovial fluid was collected from articular capsule for total leukocyte count (CT; cells/ mm3). Intrathecal administration of teriflunomide ( active metabolite of teriflunomide) (0.1 and 20 µg/ 10 µl) and methotrexate (25 g/ 10 µl) were able to reduce cell migration to the synovial fluid, incapacitation and joint edema induced by LPS, unlike when given by intraperitoneal route, suggesting that the interaction site for antiarthritic effects of drugs was restricted to spinal cord microenvironment. Co-administration with uridine (10 µg) just reverses the inhibitory effects produced by the lower dose of intrathecal teriflunomide, suggesting that only in the higher concentrations of the drug mechanism of action independent from inhibition of de novo synthesis of nucleotides. Co-administration of intrathecal teriflunomide (0.1 µg) and bumetanide (60 µg), a blocker of the dorsal root reflex did not potentiate the inhibitory effect of teriflunomide on the reduction of incapacitation, edema and cell migration, suggesting that inhibition of dorsal root reflex and neurogenic inflammation are involved in spinal action of teriflunomide. Co-administration of teriflunomide (0,1 µg) and methotrexate (25 µg) intrathecally caused a summation effect on inhibition of joint inflammation, probably due to the addition of methotrexate immunomodulatory mechanism of inhibition on cytokine synthesis released by glial cells. Thus, this study proposes that the intrathecal methotrexate and leflunomide modulates the peripheral inflammation by inhibiting on increase of cytokines in spinal cord that sensitizes neuronal terminals involved in nociceptive signaling andinduction of neurogenic inflammation. This strategy may represent a novel therapeutic approach for the treatment of rheumatoid arthritis with fewer systemic side effects.