Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-05-21T15:09:22Z No. of bitstreams: 1 PDF - Iana Luísa Melo de Assunção.pdf: 25322449 bytes, checksum: 291474ff35f85d58865c6f6a8e6ea732 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-05-23T17:00:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Iana Luísa Melo de Assunção.pdf: 25322449 bytes, checksum: 291474ff35f85d58865c6f6a8e6ea732 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T17:00:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Iana Luísa Melo de Assunção.pdf: 25322449 bytes, checksum: 291474ff35f85d58865c6f6a8e6ea732 (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / Every year, an average of 2 million people are victims of burns in Brazil. The treatment of the lesions is complex and requires care in order to avoid mainly local and generalized infections. Plants with antimicrobial activity may help in the microbiological treatment of these lesions. Schinopsis brasiliensis Engler is a plant used in folk medicine for the treatment of fungal and bacterial infections. In this context, the aim of this work was to develop a topical, semi-solid formulation with antimicrobial activity from the dry extract of Schinopsis brasiliensis Engler. The hydroalcoholic extract was produced from a 70% (v / v) hydroalcoholic solution with the leaves of S. brasilienses, then nebulized by spray using Aerosil 200® as a pharmacotechnical adjuvant. The extract was analyzed against the strains ATCC of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Candida albicans, by the microdilution technique. After this, a compatibility study was carried out, using the binary mixtures system, between the extract and excipients used in the cream formulation. The mixtures were submitted to studies by differential thermal analysis (DTA), thermogravimetry (TG) and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). Phytochemical prospecting for secondary metabolites was also carried out by ultraviolet spectroscopy. The results showed that the extract was sensitive to all strains tested, being the most sensitive to Pseudomonas aeruginosa with MIC of 0.031 mg.mL^-1 and that the polyphenols were the secondary metabolites in the most analyzed extract. The compatibility study showed that there were no interactions of chemical origin in the binary mixtures studied, with cold cream being chosen. The cream produced had an average pH within that considered acceptable, between 5.5 and 6.5. Among the preliminary stability tests, only the centrifugation test showed a change in its appearance. In the analysis of the efficacy of the formulation, the cream was classified as active and moderately active for the analyzed strains. Thus, it was possible to obtain a formulation from the dried extract of Schinopsis brasiliensis with proven antimicrobial activity in vitro. / Todos os anos, em média, 2 milhões de pessoas são vítimas de queimaduras no Brasil. O tratamento das lesões é complexo e exige cuidados, a fim de se evitar principalmente as infecções locais e generalizadas. Plantas com atividade antimicrobiana podem ajudar no tratamento microbiológico dessas lesões. A Schinopsis brasiliensis Engler é uma planta utilizada na medicina popular no tratamento de infecções fúngicas e bacterianas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver uma formulação tópica, semissólida e com atividade antimicrobiana a partir do extrato seco de Schinopsis brasiliensis Engler. O extrato hidroalcoólico foi produzido, a partir de uma solução hidroalcoólica 70% (v/v) com as folhas de S. brasilienses, em seguida foi nebulizado por aspersão, utilizando Aerosil 200® , como adjuvante farmacotécnico. O extrato produzido foi analisado frente às cepas ATCC de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e Candida albicans, pela técnica da microdiluição. Após isto foi realizado um estudo de compatibilidade, utilizando o sistema de misturas binárias, entre o extrato e excipientes usados na formulação de creme. As misturas foram submetidas a estudos por análise térmica diferencial (DTA), termogravimetria (TG) e espectroscopia por infravermelho com transformada de Fourier (FTIR). Foi realizada também a prospecção fitoquímica para metabólitos secundários por espectroscopia de ultravioleta. Os resultados obtidos mostraram que o extrato foi sensível a todas as cepas testadas, sendo a mais sensível a Pseudomonas aeruginosa com CIM de 0,031 mg.mL^-1 e que os polifenóis foram os metabólitos secundários em maior quantidade no extrato analisado. O estudo de compatibilidade demonstrou que não houve interações de origem química nas misturas binárias estudadas, sendo escolhido o cold cream. O creme produzido apresentou pH médio dentro do considerado aceitável, entre 5,5 e 6,5. Dentre os testes de estabilidade preliminar, apenas o teste de centrifugação apresentou alteração em sua aparência. Na análise da eficácia da formulação, o creme foi classificado entre ativo e moderadamente ativo para as cepas analisadas. Assim, foi possível obter uma formulação a partir do extrato seco de Schinopsis brasiliensis com atividade antimicrobiana comprovada in vitro.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-06-19T14:04:27Z No. of bitstreams: 1 PDF - Ibrahim Vieira Rocha.pdf: 50898078 bytes, checksum: c4f8b8a31f362dd3548a8bb36cbc1ecf (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-07-03T17:47:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Ibrahim Vieira Rocha.pdf: 50898078 bytes, checksum: c4f8b8a31f362dd3548a8bb36cbc1ecf (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-03T17:47:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Ibrahim Vieira Rocha.pdf: 50898078 bytes, checksum: c4f8b8a31f362dd3548a8bb36cbc1ecf (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / The plants have been a rich source of medicinal agents, serving as a foundation for the synthesis of drugs, and making the Caatinga, like the other biomes, a valuable barn for the discovery of new antimicrobial agents, valuing the ethnobotanical knowledge and its phytogeography. Guapira graciliflora Lundell belonging to the family Nyctaginaceae is popularly known as João-Mole and has been shown to be a strong candidate with antimicrobial action. This work aimed to develop a new mouthwash formulation from the G. graciliflora Lundell nebulized extract, in order to decrease and control the dental biofilm. The extract obtained by spraying was submitted to a toxicity test in Artemia salina. Phytochemical and microbiological screenings of the nebulized extract of joão-mole, for determination of its secondary metabolites and its major compound, and evaluation by microdilution, against the microorganisms involved with the formation of the dental biofilm: Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus parasanguis and Streptococcus oralis. Quantitative phytochemical screening indicated the presence of flavonoids in the concentration of 13.89mg mL-1, and tannins 5.96mg mL-1. Identification of the major component was performed using Mass Spectrometry with electrospray ionization (ESI-MS), suggesting the presence of pinitol, rutin and kaemptoferol. G. graciliflora Lundell, and the final formulation showed antimicrobial activity against three of the four strains tested. The physicochemical analyzes showed that the nebulized extract is highly hygroscopic, has low density, poorly acidic pH and loss by desiccation within the parameters recommended by the Brazilian Pharmacopoeia. A preformulation study was performed with pharmaceutical excipients and the nebulized extract through Thermal Analysis, Fourier Transform Spectroscopy (FT- IR). The compatibility study demonstrated that sodium lauryl sulfate, propylparaben and sorbitol were the excipients chosen to make up the formulation. As for the lots produced, the pH, viscosity and organoleptic characteristics observed after 24 hours of manipulation and at the end of thermal stress and centrifugation tests presented stability, thus representing an excellent herbal alternative for the prevention and control of dental biofilm. / As plantas têm sido uma rica fonte de agentes medicinais, servindo de alicerce para a síntese de fármacos, e tornando a Caatinga, como os demais biomas, um valioso celeiro para a descoberta de novos agentes antimicrobianos, valorizando o conhecimento etnobotânico e a sua fitogeografia. Guapira graciliflora Lundell pertencente à família Nyctaginaceae é conhecida popularmente como joão-mole e tem se mostrado um forte candidato com ação antimicrobiana. Este trabalho teve como objetivo desenvolver uma nova formulação de enxaguatório bucal a partir do extrato nebulizado de G. graciliflora Lundell, com o intuito de diminuir e controlar o biofilme dentário. O extrato obtido por aspersão foi submetido a teste de toxicidade em Artemia salina. Realizou-se screenings fitoquímico e microbiológico do extrato nebulizado de joão-mole, para determinação de seus metabolitos secundários e seu composto majoritário, e avaliação, por micodiluição, frente aos microrganismos envolvidos com a formação do biofilme dentário: Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus parasanguis e Streptococcus oralis. O screening fitoquímico quantitativo indicou a presença de flavonoides na concentração de 13,89mg mL-1,e taninos 5,96mg mL-1. A identificação do componente majoritário foi realizada através da Espectrometria de Massas com ionização por eletrospray (ESI-MS), sugerindo a presença de pinitol, rutina e kaemptoferol. G. graciliflora Lundell, e a formulação final apresentaram atividade antimicrobiana frente a três das quatro cepas testadas. As análises físico-químicas mostraram que o extrato nebulizado é altamente higroscópico, tem baixa densidade, pH fracamente ácido e perda por dessecação dentro dos parâmetros recomendados pela Farmacopéia Brasileira. Um estudo de préformulação foi realizado com excipientes farmacêuticos e o extrato nebulizado através de Análise Térmica, Espectrotroscopia com Transformada de Fourier (FT-IR). O estudo de compatibilidade demonstrou que o lauril sulfato de sódio, propilparabeno e sorbitol foram os excipientes eleitos para compor a formulação. Quanto aos lotes produzidos, o pH, viscosidade e as características organolépticas observadas após 24 horas de manipulação e ao término dos testes de estresse térmico e de centrifugação apresentaram estabilidade, representando assim, uma excelente alternativa fitoterápica para o prevenção e controle do biofilme dental.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / As plantas sintetizam proteÃnas que possuem propriedades antimicrobianas, podendo ser utilizadas em substituiÃÃo aos defensivos quÃmicos no campo e como fonte de novas drogas para o controle de infecÃÃes bacterianas em humanos. Dentre as diversas estruturas vegetais, ÃrgÃos reprodutivos como as flores parecem ser uma fonte promissora de tais molÃculas ativas contra patÃgenos, particularmente se considerado o seu relevante papel fisiolÃgico, o qual deve ser preservado. Nesse contexto, a presente pesquisa experimental teve como objetivos a prospecÃÃo de proteÃnas com aÃÃo antimicrobiana em flores silvestres e posterior purificaÃÃo, caracterizaÃÃo bioquÃmica e avaliaÃÃo da atividade antimicrobiana de um inibidor de tripsina presente em flores de Cassia fistula Linn. (Chuva-de-ouro). O extrato total das flores de C. fistula foi preparado em tampÃo fosfato de sÃdio 50 mM, pH 7,5. Esse extrato apresentou atividade inibitÃria de tripsina (42,41 Â 0,35 UI/mgP) e de papaÃna (27,10 Â 0,23 UI/mgP), alÃm de mostrar a presenÃa de peroxidase (20,0 Â 0,18 UAP/mgP) e quitinase (1,70 Â 0,21 ηkatal/mgP), estando ausentes as atividades hemaglutinante, β-1,3-glucanÃsica, ureÃsica e proteÃsica. O inibidor de tripsina de C. fistula, denominado CfTI, foi purificado do extrato total por fracionamento com Ãcido tricloroacÃtico (2,5%), seguido de cromatografias de afinidade (anidrotripsina-Sepharose-4B) e fase reversa (Vydac C-18TP 522). CfTI Ã uma glicoproteÃna com massa molecular aparente de 22,2 kDa, pI 5,0 e sequÃncia NH2-terminal exibindo alta similaridade com o inibidor de tripsina da soja do tipo Kunitz (SBTI). O inibidor mostrou-se pouco estÃvel ao calor, reduzindo sua atividade inibitÃria para 23,4% quando incubado a 60 ÂC, durante 15 minutos. No entanto, ele se mostrou bastante estÃvel a variaÃÃes no pH. CfTI (100 Âg/mL) retardou o crescimento dos fungos fitopatogÃnicos de importÃncia agrÃcola, Colletotrichum lindemuthianum e Fusarium solani, alÃm de apresentar atividade antibacteriana frente Ãs bactÃrias patogÃnicas ao homem, Staphylococcus aureus e Enterobacter aerogenes. Os resultados obtidos demonstram o potencial das flores como fonte diversificada de proteÃnas bioativas, evidenciando o inibidor de tripsina presente em flores de C. fistula, fomentando sua aplicaÃÃo biotecnolÃgica frente a fungos e bactÃrias de relevÃncia para a Agricultura e SaÃde. / Plants synthesize proteins that have antimicrobial properties, which can be used to substitute chemical pesticides in agriculture and as new drugs for the control of bacterial infections in humans. Among the various plant structures, the flowers seem to be a promising source of active molecules against pathogens, particularly if considered its important physiological role, which should be preserved. Therefore, this experimental research aimed at the prospection of novel proteins with antimicrobial activity in wild flowers and to subsequent purification, biochemical characterization and evaluation of antimicrobial activity of a trypsin inhibitor present in flowers of Cassia fistula Linn (the golden shower tree). The total extract of C. fistula flowers was prepared in 50 mM sodium phosphate buffer, pH 7.5. This extract presented trypsin inhibitory activity (42.41 Â 0.35 IU/mgP) and papain (27.10 Â 0.23 IU/mgP), besides to the presence of peroxidase (20.0 Â 0.18 UAP/mgP) and chitinase (1.70 Â 0.21 ηkatal/mgP). On the other hand, the hemagglutinating, β-1,3-glucanase, protease and urease activities were not detected. The trypsin inhibitor of C. fistula, named CfTI, was purified by fractionating the crude extract with trichloroacetic acid (2.5%) followed by affinity (anidrotripsina-Sepharose-4B) and reverse phase (Vydac C-18TP 522) chromatographies. CfTI is a glycoprotein with an apparent molecular mass of 22.2 kDa, pI 5.0 and NH2-terminal sequence showing high similarity with Kunitz soybean trypsin inhibitor (SBTI). The inhibitor was not stable to heat, and loss 23.4% when incubated at 60 ÂC for 15 minutes. However, it proved to be stable to changes of pH. CfTI (100 Âg/mL) slowed the growth of pathogenic fungi of agricultural importance, Colletotrichum lindemuthianum and Fusarium solani, and also presented antibacterial activity against the human pathogenic bacteria, Staphylococcus aureus and Enterobacter aerogenes. The results demonstrate the potential of the flowers as a source of diverse bioactive proteins, as the trypsin inhibitor present in C. fistula flowers, promoting its biotechnological potential application against fungi and bacteria of relevance to Agriculture and human health.

A Mitracapus (Rubiacea) à um gÃnero neotropical, com trÃs centros de diversidades no MÃxico, Brasil e Caribe. Em relaÃÃo à Mitracarpus baturitensis, ainda nÃo existe relatos na lieratura de estudos fitoquÃmicos e biolÃgicos, devido à mesma ser uma espÃcie recÃm-descoberta. Portanto o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana dos compostos obtidos do extrato etanÃlico das partes aÃreas de Mitracarpus baturitensis contra a bactÃria Streptococcus mutans. Os triterpenos Ãcido 3β-hidroxi-urs-12-en-28-oico (Ãcido ursÃlico â AU) e o Ãcido 28- O-β-D-glucopiranosil-ester (Ãcido pomÃlico) foram isolados do extrato etanÃlico empregando tÃcnicas cromatogrÃficas usuais como: cromatografia gravitacional em gel de sÃlica, cromatografia flesh e cromatogrÃfia de camada delgada. A caracterizaÃÃo estrutural destes compostos foi realizado pelo uso de RNMâH e 13C, alÃm de comparar mÃtodos espectroscÃpico IV, reaÃÃes com base na literatura. ApÃs a identificaÃÃo foram realizados teste de ConcentraÃÃo InibitÃria MÃnima (CIM), ConcentraÃÃo Bactericida MÃnima (CBM), Curva do Tempo de Morte, aÃÃo antibiofilme e ensaio de ataque ao biofilme. O Ãcido ursÃlico inibiu o crescimento bacteriano nas concentraÃÃes de 500-62,5 μg. mL-1 sendo bactericida na concentraÃÃo de 500 μg. mL-1. AlÃm disso, o mesmo teve aÃÃo sobre a morte de S. mutans em apenas 30 minutos de contato. Ãcido ursÃlico tambÃm apresentou efeito sobre a formaÃÃo do biofilme reduzindo a biomassa em 97,37%, nÃo obtendo o mesmo resultado sobre o biofilme formado por 24 horas. NÃo foram obtidos resultados semelhantes para o Ãcido pomÃlico. Assim, Ãcido ursÃlico pode ser considerado como um candidato à insumo biotecnolÃgico com impacto na pesquisa de antimicrobianos. / The Mitracapus (Rubiaceae) is a neotropical genus with three centers of diversity in Mexico, Brazil and the Caribbean. Regarding Mitracarpus baturitensis, there is still no report in lieratura phytochemical and biological studies due to it being a newly discovered species. Therefore the aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of the ethanolic extract obtained composts of parts of flights Mitracarpus bauritensis against the bacteria Streptococcus mutans. Compounds ursolic acid (3β-hidroxi-urs-12-en-28-oico acid) and pomolic acid (28- O-β-D-glucopiranosil- Ãcido pomÃlico ester) were isolated from the ethanolic extract by chromatographic assays, CCD and identified through the RNM. After identification were performed testing the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (CBM), curve of the time of the death, action antibiofilm, assay attack of the biofilm. The increase inhibited bacterial growth at concentrations from 500 to 62,5 Âg. mL-1 and bactericide concentration of 500 Âg. mL-1. Furthermore, the AU had an effect on biofilm formation by reducing the biomass 97,37% same result is not obtained on the biofilm for 24 hours. Similar results were not obtained for the AP. Thus, AU can be analized as a candidate for biotechnological inputs impacting on research antimicrobial

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Currently, there is a demand for natural antimicrobials for use in the food industry. Some tropical fruits have a promising potential , not investigated at the moment. This study aimed to identify and quantify resveratrol, quercetin and coumarin in pulps and byproducts of tropical fruits, develop nanoparticles with extracts that showed higher levels of these compounds and evaluate the antimicrobial activity against Listeria sp. and E. coli K12. The Surinam cherry and mango byproducts, as well as caja, acerola and Surinam cherry pulps showed higher levels of quercetin, representing sources of this substance. Guava and Surinam cherry byproducts showed resveratrol in their content, may be considered as sources of this compound. Similarly, for coumarin, passion fruit, guava and Surinam cherry byproducts, as well as mango pulp, can be considered natural sources. Among the analyzed material, the acerola pulp and passion fruit and guava byproducts were selected for further characterization and nanoencapsulation. Nanoparticles synthesized using co-glycolide (PLGA) 65:35 poly lactide showed higher particle sizes (from 153.37 to 376.70 nm), as compared with the synthesized PLGA 50:50 (136.53 to 369.25 nm). All samples showed low polydispersity index, corresponding to a heterogeneous distribution in the emulsion analyzed for particle size obtained. The nanoparticles synthesized with PLGA 65:35 showed higher encapsulation efficiency, with the exception of the sample containing acerola (best EE % for PLGA 50:50) and for the release analysis, all samples showed similar behavior, providing maximum release compound within 30 minutes, with constant release thereafter during 72 hours analysis. In general, nanoparticles synthesized with PLGA 65:35 had lower minimum inhibitory concentration for E. coli K12 and L. monocytogenes compared with the 50:50 PLGA nanoparticles synthesized. The synthesis of PLGA nanoparticles using extracts of fruits (especially using PLGA 65:35) may have important applications in the food industry to inhibit microorganisms (E. coli K12 and L. monocytogenes). Besides antimicrobial activity, these compounds show various fruits with antioxidant properties, which are responsible for reducing the risk of various diseases. / Atualmente hà uma demanda por antimicrobianos naturais para uso na indÃstria de alimentos e, neste sentido, as frutas tropicais apresentam, um potencial promissor, porÃm ainda pouco investigado. Este trabalho teve como objetivo identificar e quantificar resveratrol, quercetina e cumarina em polpas e subprodutos de frutas tropicais, elaborar nanopartÃculas com os extratos que apresentaram maiores teores destes compostos e avaliar a atividade antimicrobiana contra os microrganismos Listeria sp. e E. coli K12. Os subprodutos de pitanga roxa e manga, assim como as polpas de cajÃ, acerola e pitanga roxa apresentaram maiores teores de quercetina, representando fontes desta substÃncia. Subprodutos de goiaba e pitanga apresentaram resveratrol em suas constituiÃÃes, podendo ser considerados fontes deste composto. Para a cumarina, os subprodutos de maracujÃ, goiaba e pitanga, assim como a polpa de manga, podem ser considerados fontes naturais. Entre os materiais analisados, a polpa de acerola e os subprodutos do maracujà e da goiaba foram selecionados para posterior caracterizaÃÃo e nanoencapsulaÃÃo. As nanoparticulas sintetizadas utilizando Ãcido poli lactÃdeo co-glicolÃdeo (PLGA) 65:35 apresentaram maiores tamanhos de partÃcula (153,37 a 376,70 nm), quando comparadas Ãs sintetizadas com PLGA 50:50 (136,53 a 369,25 nm). Todas as amostras apresentaram baixo Ãndice de polidispersidade, correspondendo a heterogÃnea distribuiÃÃo na emulsÃo analisada quanto ao tamanho das partÃculas obtidas. As nanopartÃculas sintetizadas com PLGA 65:35 apresentaram maior eficiÃncia do encapsulamento (%EE), com exceÃÃo da amostra contendo acerola, a qual apresentou melhor EE% para PLGA 50:50. Em relaÃÃo à anÃlise de liberaÃÃo, todas as amostras avaliadas apresentaram comportamento semelhante, obtendo liberaÃÃo mÃxima do composto nos primeiros 30 minutos, apresentando liberaÃÃo constante apÃs esse perÃodo, durante 72 horas de anÃlise. De uma maneira geral, as nanopartÃculas sintetizadas com PLGA 65:35 apresentaram menor concentraÃÃo inibitÃria minima para E. coli K12 e L. monocytogenes quando comparadas Ãs nanopartÃculas sintetizadas com PLGA 50:50. A sÃntese de nanopartÃculas de PLGA utilizando extratos fenÃlicos de frutas, especialmente utilizando PLGA 65:35, pode apresentar importantes aplicaÃÃes, como na indÃstria de alimentos, a conservaÃÃo desses produtos, considerando seu efeito na inibiÃÃo de microrganismos (E. coli K12 e L. monocytogenes). AlÃm do efeito antimicrobiano, essas frutas apresentam diversos compostos com propriedades antioxidantes, que sÃo responsÃveis pela reduÃÃo do risco de diversas doenÃas.

A resistência bacteriana aos antibióticos tem se disseminado mais rapidamente do que a introdução de novos compostos, portanto, a investigação e desenvolvimento de novas moléculas para o controle microbiano é necessário. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana de diferentes óleos de copaíba OC(S), OC(C) e OC(E), do gel de quitosana/gelatina (QG) e de emulsões de quitosana/gelatina/óleo de copaíba (QGOC) frente às linhagens de Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27873. A quitosana foi obtida a partir de gládios de lula por desmineralização, desproteinização e desacetilação e uma solução a 2% foi preparada em ácido acético 1%. O gel de gelatina 2% foi obtido por dissolução de gelatina comercial (Sigma) em água, sendo gelatinizada a 60ºC por 30 min. O gel QG e as emulsões QGOC(S), QGOC(C) e QGOC(E) foram preparadas pela mistura dos géis de quitosana e gelatina na proporção 2:1 sob agitação constante. A concentração das emulsões QGOC foi ajustada de acordo com a concentração inibitória mínima (CIM) encontrada para o gel QG e para os óleos individualmente. Os ensaios de atividade antimicrobiana foram realizados utilizando-se a técnica de microdiluição em caldo para a determinação da CIM e da concentração bactericida mínima (CBM). O efeito citotóxico dos compostos também foi investigado sobre células VERO. Os valores de CIM e CBM para o gel QG sobre S. aureus, E. coli e P. aeruginosa foram de 31, 2; 62,5 e 31, 2 &#956g/mL, respectivamente, no entanto para P. aeruginosa observou-se que o gel mostrou atividade bacteriostática. Os óleos de copaíba apresentaram atividade apenas para S. aureus, com CIM e CBM de 2000 &#956g/mL para OC(S), 500 &#956g/mL para OC(C) e 62,5 &#956g/mL para OC(E), com caráter bactericida. A interação entre os antimicrobianos na forma da emulsão QGOC(E) sugere efeito sinérgico para S. aureus. As demais emulsões não apresentaram efeito sinérgico, entretanto, a atividade antimicrobiana e o efeito bactericida foram mantidos com a adição dos óleos no gel QG, com exceção da bactéria P. aeruginosa em que a adição dos óleos reduziu a eficácia do gel QG. Os óleos de copaíba apresentaram efeito citotóxico sobre as células VERO, enquanto o gel QG e a combinação na forma de emulsões não mostraram citotoxicidade. Os resultados desse estudo evidenciam que a combinação QGOC pode ser uma fonte em potencial para o desenvolvimento de um novo agente antimicrobiano seletivo no controle de infecções bacterianas. / Antibiotic resistance increases faster than the introduction of new compounds thus, the research and development of new drugs and antimicrobial systems is required. This study aimed to evaluate the antimicrobial activity of different copaiba oils CO(S), CO(C) and CO(E), chitosan/gelatin gel (CG) and chitosan/gelatin/copaiba oil (CGCO) emulsions against the strains of Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27873. Chitosan was obtained from squid pens by desmineralization, desproteinization and deacetylation and a 2% solution was prepared in 1% acetic acid. A 2% gelatin gel was obtained by dissolution of commercial gelatin (Sigma) in water and gelatinized at 60ºC for 30 min. CQ gel and CQCO emulsions were prepared by mixing chitosan and gelatin gels at 2:1 (w/w) ratio under constant stirring. The concentration of CGCO emulsions were adjusted according to the minimum inhibitory concentration (MIC) for CG gel and oils separately. MIC and minimum bactericidal concentrations (MBC) with oils, CG gel and CGCO emulsions were determined using the micro-broth dilution technique. The cytotoxicity effect of compounds on VERO cell line was also evaluated using the MTT assay. CG gel inhibited S. aureus, E. coli and P. aeruginosa growth showing a MIC and a MBC of 31.2; 62.5 and 31.2 &#956g/mL, respectively except for P. aeruginosa, that showed bacteriostatic effect. Copaiba oils inhibited only S. aureus with MIC and MBC of 2,000 &#956g/mL to CO(S), 500 &#956g/mL to CO(C) and 62.5 &#956g/mL to CO(E). The combined emulsion CGCO(E) suggesting synergistic effect to S. aureus. However, the other emulsions showed not synergistic effect, but showed the same MIC and MBC values as those obtained for the isolated compounds, except for P. aeruginosa where the addition of oils reduced the effectiveness of CQ gel. The copaiba oils showed toxicity to VERO cells, while the CG gel and the CGCO were not cytotoxic. The results of this study demonstrated that the combination of CGCO may be a potential source for the development of a new selective agent to control these important bacterial pathogens.

A diferenciação entre processos infecciosos e inflamatórios representa um grande desafio na área de diagnóstico. A complexação do antimicrobiano ciprofloxacino (CIP) com o tecnécio (99mTc-CIP) vem sendo estudada com objetivo de desenvolver um radiofármaco com alta especificidade no diagnóstico de infecções, baseado em seu amplo espectro de atividade antibacteriana. O mecanismo de ação do fármaco consiste na ligação deste com a enzima ADN-girase da bactéria, permitindo sua ligação à bactéria ativa e a obtenção de imagens devido a fótons emitidos pelo 99mTc. Tendo em vista que o local de formação do complexo envolve os mesmos grupos funcionais responsáveis pela ligação do fármaco à enzima, sua eficácia pode ser prejudicada. A diferenciação entre processos infecciosos e inflamatórios representa um grande desafio na área de diagnóstico. A complexação do antimicrobiano ciprofloxacino (CIP) com o tecnécio (99mTc-CIP) vem sendo estudada com objetivo de desenvolver um radiofármaco com alta especificidade no diagnóstico de infecções, baseado em seu amplo espectro de atividade antibacteriana. O mecanismo de ação do fármaco consiste na ligação deste com a enzima ADN-girase da bactéria, permitindo sua ligação à bactéria ativa e a obtenção de imagens devido a fótons emitidos pelo 99mTc. Tendo em vista que o local de formação do complexo envolve os mesmos grupos funcionais responsáveis pela ligação do fármaco à enzima, sua eficácia pode ser prejudicada. O objetivo deste trabalho foi avaliar as condições ideais para ligação do 99mTc a duas quinolonas (CIP e pefloxacino), utilizando diferentes agentes redutores (SnCl2 e FSA), pH da solução e temperatura de incubação. A complexação dos fármacos ao radioisótopo 99mTc foi avaliada através do controle radioquímico, utilizando cromatografia em camada delgada. Posteriormente, testou-se sua atividade antimicrobiana in vitro utilizando diferentes microorganismos. O agente redutor FSA não foi eficiente na formação do complexo, resultando em uma concentração alta de Tc livre (37%). A formulação com Sn aumentou a formação de colóide com aquecimento (100 ºC). A complexação dos antimicrobianos ao Tc impediu sua ligação à ADN-girase. A taxa de ligação variou de 10% (filtração) a 16% (centrigugação). Além disso, verificou-se boa correlação entre a formação de colóide e quantidade de radiação ligada à bactéria em ambos os testes. Esta perda de atividade vem de encontro a alguns estudos clínicos relatados na literatura, que revelam a não diferenciação entre processos infecciosos e processos inflamatórios pelas quinolonas marcadas com 99mTc. / Differentiation between inflammation and infection represents a major challenge in clinical diagnostics. Several studies using ciprofloxacin (CIP), a broad spectrum antimicrobial agent, complexed with technetium (99mTc) have been reported in order to evaluate its capacity to diagnose infections. CIP mechanism of action involves its binding with bacterial DNA-gyrase during the growth phase and the acquisition of images due to 99mTc radioactivity. The fact that the sites of complexation are the same as those involved in bacterial binding it may affect its antimicrobial activity. The objective of the present work was to evaluate the ideal conditions for the complexation of CIP and pefloxacin with 99mTc using stannous chloride and formamidinesulfinic acid (FSA) as reducing agents, different pH and temperatures. The efficiency of complexation was monitored using radiochemical control as well as thin layer chromatography. Furthermore the antimicrobial activity of both complexes was evaluated in vitro. FSA was not adequate as a reducing agent and SnCl2 was better at room temperature than using heat (100 oC). The complexes did not bound well to the bacterias with binding efficiencies ranging from 10 (filtration method) to 16% (centrifugation method). Besides that, a good correlation between colloid formation (impurity) and radioactivity bound to bacterias was found. This decrease in bacterial activity was previously reported in some articles suggesting that quinolones complexed with 99mTc are not suitable to diagnose infections in the presence of inflammation.

O estudo objetivou avaliar a atividade antibacteriana, in vitro, dos óleos essenciais de erva cidreira (Lippia alba (Mill) NEBr), hortelã-pimenta (Mentha x piperita L.), alfavaca-cravo (Ocimum gratissimum L.), açafrão (Curcuma longa L.) e gengibre (Zingiber officinale Roscoe) cultivados nas condições de Manaus/AM frente a 20 amostras de Salmonella enterica isoladas de frango resfriado, carne mecanicamente separada de frango, farinha de vísceras e farinha de carne e ossos. A concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) foram determinadas empregando-se o método de microdiluição. Os óleos foram analisados quanto a composição química através de cromatógrafo à gás acoplado ao espectrômetro de massa (CG-EM). Além da atividade dos óleos essenciais a resistência a antimicrobianos fármacos também foi avaliada através da técnica de disco-difusão. Os compostos majoritários foram: para o óleo de Lippia alba (Mill) NEBr) (carvona 61,7% e limoneno 17,5%), Mentha x piperita L. (mentol 27,5%, mentofurano 22,5%, pulegona 12,8%, acetato de metila 12,5% e mentona 11%), Ocimum gratissimum L. (eugenol 43,3% e 1,8-cineol 28,2%), Curcuma longa L. (ar-tumerona 17,9%, alfa-tumerona 14,6% e 1,8- cineol 14,2%) e para Zingiber officinale Roscoe (geranial 23,9%, neral 17,2%, 1,8- cineol 16,0% e canfeno 11,4%). Os resultados deste estudo permitiram evidenciar a superioridade da atividade dos óleos de Lippia alba (Mill) NEBr, Ocimum gratissimum L. e Zingiber officinale Roscoe (média das CIM´s de 4821 a 5750 μg/mL e média das CBM´s de 6190,5 a 6500,1 μg/mL) frente às salmonelas isoladas, em comparação aos óleos de Mentha x piperita L. e Curcuma longa L., demonstrando o potencial como agente antibacteriano natural destas três espécies frente a diferentes sorovares do patógeno avaliado. Todos os isolados apresentaram resistência a pelo menos dois agentes antimicrobianos. Os isolados foram frequentemente resistentes à estreptomicina (95%), ácido nalidixico (75%) e gentamicina (70%) e sensíveis à norfloxacina (45%), ciprofloxacina (20%) e cloranfenicol (20%). Entre as 20 amostras de Salmonella enterica foram identificados oito sorovares diferentes com predomínio da Salmonella Mbandaka, Salmonella Enteritidis, Salmonella Agona e Salmonella Schwarzengrund, sendo que os sorovares Mbandaka e Enteritidis foram os que apresentaram maior resistência aos fármacos antimicrobianos. A resistência antimicrobiana significativa verificada em diferentes sorovares de Salmonella enterica indica que estratégias de prevenção devem ser adotadas, como estudos epidemiológicos e uso consciente de antimicrobianos tanto na alimentação animal, quanto no tratamento de pacientes, visando minimizar o aparecimento de sorovares ainda mais resistentes ou resistentes a princípios ativos atualmente eficazes. Neste sentido, os óleos essenciais de Ocimum gratissimum L., Lippia alba (Mill) NEBr e Zingiber officinale Roscoe, representam uma alternativa para o controle de Salmonella enterica, entretanto, demais estudos abordando o sinergismo com carne de frango e farinhas de origem animal são indicados. / The study aimed to evaluate the antibacterial activity in vitro of the essential oils of cidreira (Lippia alba (Mil) NEBr), peppermint (Mentha x piperita L.), alfavaca-cravo (Ocimum gratissimum L.), turmeric (Curcuma longa L.) and ginger (Zingiber officinale Roscoe) grown under conditions of Manaus / AM front of 20 samples of Salmonella enterica isolates from chilled poultry, mechanically separated chicken meat, meat and bone meal and poultry viscera meal. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) were determined employing a microdilution method. The oils were analyzed for chemical composition by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS). Besides the activity of essential oils, the resistance to antimicrobial drugs was also assessed by disk diffusion technique. The major compounds were: for Lippia alba (Mil) NEBr oil (carvone 61,7% and limonene 17,5%), Mentha x piperita L. (menthol 27,5%, menthofuran 22,5 %, pulegone 12,8 %, methyl acetate 12,5% and menthone 11%) Ocimum gratissimum L. (eugenol 43,3% and 1,8-cineole 28,2%), Curcuma longa L. (ar tumerona 17,9%, alphatumerona 14,6% and 1,8-cineole 14,2%) and Zingiber officinale Roscoe (geranial 23,9%, neral 17,2%, 1,8-cineole 16,0% and camphene 11,4%). The results of this study showed the superiority activity of Lippia alba (Mil) NEBr, Ocimum gratissimum L. and Zingiber officinale Roscoe oil (CIM's average from 4821 to 5750 and CBM's average from 6190.5 to 6500.1 μg/mL) against Salmonella isolated compared to Mentha x piperita L. and Curcuma longa L. oils, demonstrating the potential as natural antibacterial agent of these three species against different serovars of the pathogen evaluated. All isolates were resistant to at least two antimicrobial agents. The isolates were often resistant to streptomycin (95%), nalidixic acid (75%) and gentamicin (70%) and sensitive to norfloxacin (45%), ciprofloxacin (20%) and chloramphenicol (20%). Among the 20 strains of Salmonella enterica serovars were identified eight different with a predominance of Salmonella Mbandaka, Salmonella Enteritidis, Salmonella Agona and Salmonella Schwarzengrund, and the Enteritidis and Mbandaka serovars showed the highest antimicrobial resistance. The significant antimicrobial resistance occurs in different serovars of Salmonella enterica indicates that prevention strategies should be adopted, such as epidemiological studies and conscious use of antimicrobials both in animal feed, as in the treatment of patients in order to minimize the emergence of even more resistant serovars or resistant tho currently effective active principles. In this sense, the essential oil of Ocimum gratissimum L., Lippia Alba (Mill) NEBr and Zingiber officinale Roscoe represent an alternative for the control of Salmonella enterica, however, other studies addressing the synergism with chicken meat and animal meal are indicated.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-12T14:10:11Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Milca Rachel Lins.pdf: 1979007 bytes, checksum: 7b7578df72bbd18f6f6eb8e97761a7cc (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-12T14:10:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Milca Rachel Lins.pdf: 1979007 bytes, checksum: 7b7578df72bbd18f6f6eb8e97761a7cc (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / FACEPE / O bioma Caatinga é exclusivo do Brasil e inexplorado em relação ao isolamento de micro-organismos produtores de substâncias importantes para agroindústria. As actinobactérias são bactérias filamentosas Gram positivas distribuídas na natureza e são capazes de produzir auxinas e substâncias antimicrobianas, além de disponibilizar nutrientes como fosfato e nitrogênio favorecendo o desenvolvimento de plantas. O presente trabalho teve como objetivo analisar 80 actinobactérias isoladas de rizosferas de plantas da Caatinga produtoras de metabólitos bioativos que auxiliam na promoção de crescimento vegetal. A produção de auxina foi avaliada e observado que 86,25% (69) das linhagens produziram auxina em concentrações variando de 1,75 a 76,48 μg.mL-1. Também foi determinado o Índice de Solubilização (IS) de fosfato nos meios de cultura VERMA e NBRIP e observado que 93,75% (75) das linhagens solubilizaram o fosfato nos dois meios com IS variando de 1,15 a 2,25, sendo o meio VERMA estatisticamente melhor para solubilização de fosfato. A produção de fosfatases foi evidenciada em 97,5% (78) das actinobactérias. A atividade antimicrobiana contra bactérias e fungos fitopatógenos mostrou que 15,0% (12) produziram substâncias antimicrobianas contra os fungos (Fusarium oxysporum UFPEDA 2455 e Colletotrichum sp. UFPEDA 2419) e 6,25% (5) apresentaram atividade para Xanthomonas campestres UFPEDA 407. A produção de amônia foi observada em 80% (64) das linhagens em concentrações variando de 3,59 a 292,31 μg.mL-1. A análise de variância e a comparação entre as médias pelo teste de Tukey (5%) evidenciaram que as actinobactérias PR 34 e TUR 704 são as linhagens que se destacaram em relação aos teste realizados. Através das análises cromatográficas foi possível identificar e quantificar o ácido 3-indolacético produzido pela PR 34. As linhagens pertencem ao gênero Streptomyces pela técnica de microcultivo, confirmado pelo sequenciamento do gene 16S rRNA, o qual indicou que as linhagens PR 34 e TUR 704 são similares as actinobactérias Streptomyces fimbriatus NBRC15411 e Streptomyces xanthocidicus NBRC 13469, respectivamente. Os resultados obtidos sugerem que as actinobactérias da Caatinga apresentam potencial biotecnológico, pois apresentam mecanismos que auxiliam no desenvolvimento vegetal, sendo necessário avaliar a viabilidade destes micro-organismos em plantas visando a diminuição do uso de defensivos agrícolas na agroindústria.

Submitted by Eduardo Barros de Almeida Silva (eduardo.philippe@ufpe.br) on 2015-04-17T12:26:06Z No. of bitstreams: 2 Tese Francis Gomes.pdf: 5639938 bytes, checksum: b41b350b8bb203e515d1ec8c699ab414 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T12:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese Francis Gomes.pdf: 5639938 bytes, checksum: b41b350b8bb203e515d1ec8c699ab414 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-08-26 / CAPES / Schinus terebinthifolius (aroeira-da-praia) e Myracrodruon urundeuva (aroeira-dosertão) são plantas utilizadas na medicina popular para tratamento de doenças humanas causadas por microorganismos. Este trabalho relata 1) o isolamento e caracterização estrutural das lectinas isoladas de folha (SteLL) e entrecasca (SteBL) de S. terebinthifolius e do inibidor de tripsina isolado de entrecasca de S. terebinthifolius (SteBI) e 2) a investigação da atividade antimicrobiana de infusão e extrato metanólico de entrecasca de S. terebinthifolius, de SteLL, SteBL, SteBI e de lectinas de entrecasca (MuBL), folha (MuLL) e cerne (MuHL) de M. urundeuva isoladas de acordo com procedimentos previamente estabelecidos. Bactérias e fungo que causam doenças em humanos e em peixes foram utilizados nos ensaios e os valores de concentrações mínima inibitória (CMI), bactericida (CMB) e fungicida (CMF) foram determinados. Adicionalmente foi avaliado o efeito das lectinas de M. urundeuva na aderência e capacidade invasiva de bactérias em células de peixe (SAF-1) e humanas (HeLa) bem como na produção de produtos extracelulares por bactérias. SteLL, isolada após eluição da coluna de quitina com ácido acético 1 M, é um glicopeptídeo de 14 kDa com atividade hemaglutinante (AH) inibida por N-acetilglicosamina, não afetada por Ca2+ e Mg2+, estável entre 30 e 100 °C e pH 5,0-8,0. SteBL, isolada após eluição da coluna de quitina com ácido acético 1 M, é um peptídeo não-glicosilado de 20 kDa, com maior AH em pH 7,5 e inibida por N-acetilglicosamina e fetuína. SteBI, isolado durante o mesmo procedimento cromatográfico que isolou SteBL, representando a fração protéica ao suporte cromatográfico, é um peptídeo de 16 kDa que inibiu em 89,5% a atividade de tripsina bovina. SteLL apresentou atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis e Staphylococcus aureus. Maiores efeitos bacteriostáticos e bactericidas foram detectadas para S. enteritidis (CMI: 0,45 μg/ml) e S. aureus (CMB: 7,18 μg/ml), respectivamente. SteLL inibiu o crescimento (CMI: 6,5 μg/ml) e matou (CMF: 26 μg/ml) Candida albicans. SteBL mostrou atividade bacteriostática contra E. coli, S. aureus, Enterococcus faecalis (CMI: 200 μg/ml), atividade bactericida contra S. aureus (CMB: 400 μg/ml) e não apresentou atividade antifúngica contra C. albicans. SteBI não apresentou atividade antibacteriana e foi fungicida (CMF: 7,5 μg/ml) contra C. albicans. MuBL, MuHL e MuLL apresentaram atividade bacteriostática e bactericida contra S. aureus, E. coli e Photobacterium damselae subsp. piscicida (CMI e CMB de 1 a 122 e 2 a 225 μg/ml, respectivamente) e bacteriostática contra linhagens de Yersinia ruckeri (CMI entre 34 a 489,8 μg/ml). A infusão da entrecasca de S. terebinthifolius foi bactericida contra S. aureus, E. faecalis e E. coli (CMB de 14,85 a 29,7 mg/mL de proteínas e 0,026 a 0,052 mg/mL de fenóis) e fungicida contra C. albicans (CMF de 3,71 mg/mL de proteínas e 0,007 mg/mL de fenóis). Extrato metanólico mostrou atividade bactericida contra S. aureus e E. faecalis, com CMB de 13,19 e 3,29 mg/mL de proteínas e 4,1 e 1,02 mg/mL de fenóis, respectivamente e não contem atividade antifúngica. As lectinas de M. urundeuva promoveram redução na adesão e capacidade invasiva de S. aureus, E. coli, Y. ruckeri e P. damselae subsp. piscicida em SAF-1 e HeLa e alteração no padrão de produtos extracelulares liberados por S. aureus, E. coli, Y. ruckeri e P. damselae subsp. piscicida. O estudo demonstrou a purificação, caracterização e propriedades biológicas de lectinas ligadoras de quitina e inibidor de tripsina presentes em tecidos de S. terebinthifolius e M. urundeuva. Adicionalmente o estudo confirmou a ação antimicrobiana da infusão da entrecasca de S. terebinthifolius usada pela população para tratar infecções.