Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5614.pdf: 2554069 bytes, checksum: 3a7c896176869a2cab51dd48cfa6f9cf (MD5) Previous issue date: 2013-09-14 / Universidade Federal de Minas Gerais / 4-Quinolinone derivatives and hydantoins are important classes of cyclic nitrogen compounds which have very interesting biological activity against a variety of biological targets. Phytochemical studies of plants of the genus Dictyoloma, guided by in vitro bioassays, led to the isolation of three new 4-quinolinone alkaloids, the dictyolomides A and B and 6- methoxydictyolomide, which showed good activity against Leishmania. The absolute configuration of the natural dictyolomides is still unkown. This work aimed the asymmetric synthesis of these alkaloids. In order to introduce the enantiomeric enriched side chains in the 4-quinolinone core, some synthetic routes have been tested employing organometallic chemistry, among other techniques. A series of 4-quinolinone derivatives was also synthesized, using methods described in the literature, especially the one described by Ding et al., in which it uses microwave irradiation. The study of the synthesis of hydantoin derivatives was also performed using microwave irradiation as a source of energy. New organocatalysts were tested in order to obtain new amino acid derivatives which would be employed as starting materials in the synthesis of hydantoins. The synthesized compounds were submitted to bioassays focus on antiparasitic activity and enzyme inhibition. The result obtained with 4- quinolinone derivatives against proliferation of Leishmania amazonensis promastigotes and epimastigotes of Trypanosoma cruzi showed that the compounds possess in general better leishmanicidal than trypanocidal activity. Nevertheless, two of the synthesized compounds showed an excellent trypanocidal activity, even better than the standard, benznidazole. The 4- quinolinones have also shown good inhibitory activity against cathepsin L and V enzymes. / Derivados de 4-quinolinonas e hidantoínas são importantes classes de compostos cíclicos nitrogenados que apresentam atividade biológica bastante interessante frente a uma série de alvos biológicos. Estudos fitoquímicos de plantas do gênero Dictioloma, guiados por bioensaios in vitro, levaram ao isolamento de três novos alcaloides do tipo 4- quinolinonas, as dictiolomidas A e B, e a 6-metoxidictiolomida A, que apresentaram uma boa atividade antileishmania. As substâncias isoladas possuem um centro estereogênico, cuja elucidação seria efetuada via síntese destes compostos sendo, portanto um grande desafio sintético a obtenção destas moléculas. Visando esta síntese foram testadas algumas rotas, nas quais se fez uso de uma série de ferramentas químicas, como a química de organometálicos. Neste trabalho sintetizou-se ainda uma série de derivados de 4- quinolinonas, empregando metodologias descritas na literatura, em especial a metodologia descrita por DING et al.1, na qual se utiliza a irradiação de microondas na obtenção de derivados de 4-quinolinonas. O estudo da síntese dos derivados de hidantoínas também foi realizado utilizando a irradiação de microondas como fonte de energia. Foram testados novos organocatalisadores para a obtenção de derivados de aminoácidos a serem utilizados na síntese dos derivados de hidantoínas. Os compostos sintetizados tiveram suas atividades biológicas avaliadas frente a alguns alvos biológicos. O resultado de atividade obtido dos derivados de 4-quinolinonas frente a proliferação de formas promastigotas de Leishmania amazonensis e formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi demonstrou que os compostos apresentaram em geral uma melhor atividade leishmanicida do que tripanocida, porém dois dos compostos sintetizados apresentaram uma excelente atividade tripanocida, inclusive melhor que o padrão utilizado, o benzonidazol. Foi avaliada também a atividade inibitória das enzimas Catepsinas V e L dos derivados de 4-quinolinonas, apresentando uma boa atividade inibitória destas enzimas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1910.pdf: 5624011 bytes, checksum: 1f711c93bef1eb05247d258e994dfe38 (MD5) Previous issue date: 2008-02-29 / Universidade Federal de Minas Gerais / The phytochemical study of Hortia in this work aims to contribute with the chemosystematics of the Rutaceae and with the best classification of the genus inside the family. The study of the species H. oreadica, H. brasiliana and H. superba led us to isolate 15 compounds, such as the dihydrocinnamic acids derivatives 3-phenyl-[2 ,6 -dimethoxy-(3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 - dimethylpirano]propionic acid (01), methyl 3-phenyl-[2 -methoxy-(3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 - dimethylpirano]propionate (02), methyl 3-phenyl-[2 ,6 -dimethoxy-(3 ,4 :5 ,6 )- 2 ,2 -dimethylpirano]propionate (03), methyl 3-phenyl-[2 ,5 -dimethoxy- (3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 -dimethylpirano]propionate (04), 3-phenyl-[2 -methoxy- (3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 -dimethylpirano]propionic acid (05), 3-phenyl-[2 ,5 -dimethoxy-(3 , 4 -O:5 ,6 ) 2 ,2 -dimethylpyrano]propionic acid (06), being structure 06 new for specie H. oreadica; coumarin 5-methoxyseselin (07); cinnamic acid derivative E- 3,4-dimethoxy-á(3-hydroxy-4-carbomethoxyphenyl)cinnamic acid (08), new in literature, the alkaloids rutaecarpine (09), 7,8-dehydrorutaecarpine (10) new in the genus Hortia, dictamine (11), N-methylflindersine (12) and the limonoids guyanin (13), hortiolide E (14) and hortiolide G (15), being structure 14 described for the first time in the specie H. oreadica and 15 in literature. The phytochemical study of the species from Hortia genus still not allow classify correctly it inside the family. Hortia presents limonoids with C and D rings modified, characteristic of Meliaceae. However the presence of metabolites such as alkaloids, coumarins, dihydrocinnamic and cinnamic acids derivatives confirm that Hortia belongs the Rutaceae family, even so are not clear its accurate positioning. The presence of limonoids highly modified could indicated that genus can not belong nor to the Todallieae and nor the Cusparieae, being located separately inside of the Rutaceae family. Several biological assays had been performed with crude extracts and compounds isolated from Hortia, with a collection of the synthetic compounds and the lasiodiplodin, compound isolated from the pathogenic fungus. The Minimum Inhibitory Concentration of many substances was related against the bacteria Xylella fastidiosa that causes Citrus Variegated Chlorosis. The promising substances were synthetic quinolinones 2-methyl-6-fluor-4-quinolone (S2) and 2-methyl-5-methoxy-7-hydroxy-4-quinolone (S4) and the alkaloid rutaecarpine (09) with MIC from 0.5 to 1.0 mg/mL. We have studied the in vitro antimicrobial activity against oral pathogens that permitted to determine hexane extract such as successful against all microorganisms assayed and limonoid guyanin (13) and alkaloid dictamine (11) with the best MIC, being 200 and 100 µg/mL, respectively. The assays against alimentary pathogens revealed that lasiodiplodin, 2-methyl-6-fluor-4-quinolone (S2) and 2-methyl-5,7-dimethoxy-4- quinolone (S4) synthetics as the more effective among all substances. Therefore, this work showed that several substances with properties antibacterial constitute an important source for the discovery of new antimicrobial products. / O estudo fitoquímico de Hortia descrito neste trabalho visa contribuir com a quimiossistemática da família Rutaceae e também com a melhor classificação do gênero dentro da mesma. O estudo das espécies H. oreadica, H. brasiliana e H. superba levou ao isolamento de 15 substâncias, sendo, derivados do ácido diidrocinâmico ácido 3-fenil-[2 ,6 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propiônico (01), 3-fenil-[2 -metoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propionato de metila (02), 3-fenil-[2 ,6 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propionato de metila (03), 3-fenil-[2 ,5 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propionato de metila (04), ácido 3-fenil-[2 -metoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propiônico (05), ácido 3-fenil-[2 ,5 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propiônico (06), sendo que a estrutura 06 parece ser nova para a espécie H. oreadica; a cumarina 5-metoxiseselina (07); o derivado do ácido cinâmico E-ácido 3,4-dimetoxi-á(3-hidroxi-4-carbometoxifenil)cinâmico (08), novo na literatura; os alcalóides rutaecarpina (09), 7,8-desidrorutaecarpina (10) inédita no gênero Hortia, dictamina (11) e N-metilflindersina (12) e os limonóides guianina (13), hortiolida E (14) e hortiolida G (15), dos quais a estrutura 14 está sendo descrita pela primeira vez na espécie H. oreadica e 15 na literatura. O estudo fitoquímico das espécies do gênero Hortia ainda não permite classificá-la corretamente dentro da família. Hortia apresenta limonóides com anéis C e D modificados, característicos de Meliaceae. No entanto a presença de metabólitos como alcalóides, cumarina, derivados do ácido diidrocinâmico e cinâmico vêm confirmar que Hortia pertence à família Rutaceae, embora não esteja claro seu exato posicionamento dentro da mesma. A presença de limonóides bastante modificados para Hortia poderia indicar que o gênero não pertença à Todallieae ou Cusparieae, podendo estar posicionado separadamente dentro da família Rutaceae. Vários ensaios biológicos foram realizados com os extratos e compostos isolados, com uma coleção de compostos sintéticos e a lasiodiplodina, composto isolado de um fungo patogênico. São relatadas as Concentrações Inibitórias Mínimas de diversas substâncias frente a bactéria causal da Clorose Variegada dos Citros, Xylella fastidiosa. As substâncias promissoras foram as quinolinônicas sintéticas 2-metil-6-flúor-4-quinolona (S2) e 2-metil-5-metoxi-7- hidróxi-4-quinolona (S4) e o alcalóide rutaecarpina (09), com CIM entre 0,5 e 1,0 mg/mL. Foi realizado a investigação do potencial antimicrobiano in vitro frente a alguns patógenos bucais que permitiu determinar o extrato hexânico como o mais promissor frente a todas as cepas ensaiadas e o limonóide guianina (13) e o alcalóide dictamina (11) com os melhores valores de CIM, sendo 200 e 100 µg/mL, respectivamente. Os ensaios frente à patógenos de origem alimentar revelaram que as substâncias lasiodiplodina e as sintéticas 2-metil-6-flúor-4- quinolona (S2) e 2-metil-5,7-dimetoxi-4-quinolona (S4) foram as mais eficazes dentre todas as ensaiadas. Portanto, a partir deste trabalho verificou-se que algumas substâncias com propriedades antibacterianas revelaram importantes fontes na descoberta de novos produtos com potencial antimicrobiano.

Orientador: Ângela Regina Araujo / Banca: Silvia Noeli López / Banca: Mônica Tallarico Pupo / Banca: Maria da Conceição Farreira de Oliveira / Banca: Luce Maria Brandão Torres / Resumo: Este trabalho, descreve a busca de substâncias bioativas a partir do estudo químico e biológico dos extratos brutos produzidos pelos fungos endofíticos AM-01 identificado como Penicillium sp1, AM-02 e AM-03 não identificados e AM-04, também pertencente ao gênero Penicillium, que foram isolados das folhas de Alibertia macrophylla. Os fungos endofíticos isolados, foram cultivados em meio líquido MBD, e sólido (milho) a 25oC, sob agitação, e no modo estático, respectivamente. Para o meio líquido, o caldo foi separado do micélio e submetido à partição com AcOEt, fornecendo os extratos brutos após a evaporação do solvente. Para o meio sólido, foi realizado uma extração com metanol, seguido de filtração e evaporação do solvente, originando os extratos brutos. Após análises por RMN de ¹H e CLAE-DAD, os extratos brutos obtidos em milho, foram fracionados por cromatografia em coluna, seguida de separação via Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAEprep.). O extrato bruto de AM-01 (Penicillium sp1) forneceu seis substâncias da classe das isocumarinas, sendo duas inéditas. O fracionamento cromatográfico do extrato bruto de AM-02, conduziu ao isolamento de três sesquiterpenos inéditos identificados como Xylarenonas C, D e E. Também do extrato bruto de AM-02 foi isolado um composto furânico identificado como (E)-5-(1- hidroxialil)-4-(pent-1-enil)-2,5-diidrofurano-3-ácido carboxílico. O fracionamento cromatográfico de AM-04, permitiu o isolamento de um benzenóide, identificado como orcinol. O estudo químico dos extratos brutos obtidos em MBD, de AM-03 e AM-04, permitiram o isolamento das dicetopiperazinas ciclo (Pro-Try) e ciclo (L-Pro- L-Val), além da uracila. As substâncias isoladas foram identificadas por análises de RMN 1D e 2D e espectrometria de massas, bem como por comparação com dados da literatura... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work describes the search for bioactive substances from the chemical/biological of the crude extracts produced by endophytic fungi AM-01 identified as Penicillium sp1, AM-02, AM-03 and AM-04 also belonging to the genus Penicillium isolated from the leaves of Alibertia macrophylla. The endophytic fungal isolates were grown in liquid medium and solid MBD to 25 °C under shaking and static mode, respectively. For the liquid medium the mycelium was separated from the broth and subjected to partition with AcOEt, giving the crude extracts after evaporation of the solvent. For solid medium, the extraction was performed with MeOH, followed by filtration and evaporation of the solvent yielding the crude extracts. After analysis by the ¹H NMR and HPLC-DAD, the crude extracts from maize were fractionated by chromatography on a column followed by separation using High Performance Liquid Chromatography (HPLCprep.). The crude extract of AM-01 (Penicillium sp1) provided six isocoumarins, two news. Chromatographic fractionation of the crude extract of AM-02 led to the isolation of three novel sesquiterpenes identified as Xylarenonas C, D and E and a furanic compound identified as 2,5-dihydro-5-(1-hydroxyallyl)-4-(E)-pent-1-enyl)furan-3-carboxylic acid. Chromatographic fractionation of AM-04 allowed the isolation of a benzenoid, identified as orcinol. The chemical study of AM-03 crude extracts and AM-04 cultivated in MDB allowed the isolation of diketopiperazines cyclo (Pro-Try), cyclo (L-Pro-L-Val), and uracil. The substances isolated were identified through analysis of 1H NMR, mass spectrometry and by comparison with literature data. The crude extracts and pure substances were submited for trials for antifungal agents, antioxidants, anticholinesterasic and inhibition of protease. All substances showed biological activities. / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-11-11Bitstream added on 2014-06-13T19:55:56Z : No. of bitstreams: 1 pupin_b_me_jabo.pdf: 580848 bytes, checksum: d8086b4efc4bd654f31341b062e4af6c (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A cultura da cana-de-açúcar tem sido conduzida por cortes sucessivos e para isso é intensamente adubada e mecanizada. A influência sobre as bactérias totais, nitrificantes e desnitrificantes, os fungos, a biomassa microbiana-C, as atividades, respiratória, amonificante, nitrificante e solubilizadora e das enzimas desidrogenase, urease e fosfatase foram estudada em um solo após seis cortes da cultura de cana-de-açúcar. As amostras de solo foram coletadas na linha e entrelinha na profundidade do solo de 0-20 cm. Para a colheita, a palha da cana do 2º e 3º cortes foi queimada. As demais não foram queimadas. Reduções sucessivas foram encontradas nas contagens e atividades microbianas do solo após os sucessivos cortes. A não queima da palha no 4º corte acarretou aumento nas contagens dos fungos e das atividades amonificante, nitrificante, solubilizadora e das enzimas urease e fosfatase, que em seguida diminuíram. As contagens das bactérias totais, nitrificantes e desnitrificantes e dos fungos diminuíram de 55%, 22%, 17% e 77%, respectivamente, do primeiro corte ao sexto corte. Foram também observadas as seguintes reduções: biomassa microbiana-C 43%, atividades respiratória 39%, amonificante 35%, nitrificante 40% e solubilizadora 35%. A atividade das enzimas desidrogenase (58%) e urease (36%), mas não a da fosfatase. Redução significativa foi observada no conteúdo de umidade do solo (33%). Cortes sucessivos da cana-de-açúcar têm importante impacto nas populações e atividades microbianas, acarretando conseqüências negativas nos ciclos do C, N e P e diminuição da produtividade da cultura. Tendo em vista que a compactação é um dos fatores mais agravantes para a qualidade do solo, objetivou-se avaliar o efeito da compactação a comunidade e atividade enzimática microbiana de um solo sob cultura de milho. Seis níveis de compactação foram obtidos pela passagem... / Sugarcane culture has been cultivated by successive cuts and for that it is fertilized intensely and mechanized. The influence on the total bacteria, nitrifying and denitrifying, the fungi, the C of the biomass microbial, the activities, respiratory, amonifying, nitrifying and phosphates solubilizers and of enzymes dehydrogenase, urease and phosphatase it was studied in a soil after six cuts of the sugarcane culture. The soil samples were collected in the line and space between lines in the depth of the soil of 0-20 cm. For de harvest, the straw of the sugarcane of the 2º and 3º cuts it was burned. The others were not burned. Successive reductions were found in the counts and microbial activities of the soil after the successive cuts. It doesn't burn of the straw in the 4º cut caused increase in the counting of fungi and of the activities amonifying, nitrifying, solubilizers and of the enzymes urease and phosphatase that soon after decreased. The counting of the total bacteria, nitrifying and denitrifying and of the fungi they decreased of (55%), (22%), (17%) and (77%), respectively, of the first cut to the sixth cut. They were also observed the following reductions: C of the biomass microbial (43%), activities respiratory (39%), amonifying (35%), nitrifying (40%) and solubilizers (35%). The activity of enzymes dehydrogenase (58%) and urease (36%), but not it of phosphatase. Significant reduction was presented in the content of humidity of the soil (33%). Successive cuts of the sugarcane have important impact in the populations and microbial activities, causing negative consequences in the cycles of C, N and P and decrease of the productivity of the culture. Tends in view that the compaction is one of the most agravating factors for the soil quality, however the effect in the community and microbial enzymatic activity has not been studied sufficiently. Six compaction levels were... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Jessica Bortoletto null (jessica.bortoletto@hotmail.com) on 2017-05-03T21:27:53Z No. of bitstreams: 1 Dissertação- Jessica Bortoletto.pdf: 1558671 bytes, checksum: 1d2e7fe2c5dce7eda993fe7ef74c63f4 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-05-05T13:18:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bortoletto_j_me_araiq.pdf: 1558671 bytes, checksum: 1d2e7fe2c5dce7eda993fe7ef74c63f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T13:18:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bortoletto_j_me_araiq.pdf: 1558671 bytes, checksum: 1d2e7fe2c5dce7eda993fe7ef74c63f4 (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Os efeitos antimicrobianos e a baixa toxicidade da prata em seres humanos continuam a despertar o interesse científico. A associação entre íons prata e ligantes biologicamente ativos é uma estratégia bem sucedida para obter complexos com efeitos mais potentes contra microorganismos patogênicos. Dessa forma, o planejamento de compostos de coordenação que possuam ligantes sulfurados e nitrogenados, em específico, visa obter drogas mais eficazes frente à Mycobacterium tuberculosis visto que o surgimento de casos de Tuberculose multi-droga-resistente faz com que o tratamento atual seja ineficaz. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi sintetizar e caracterizar novos complexos de prata (I) do tipo [Ag(phen)n(imt)]X e [Ag(dppz)(imt)]X, onde phen= 1,10-fenantrolina, n = 1, 2; dppz = dipirido[3,2-a:2’,3’-c]fenazina, imt= imidazolidina-2-tiona e X= BF4-, CF3SO3-, NO3-. Os complexos foram caracterizados pelas técnicas de condutância molar, espectroscopia vibracional na região do IV, ressonância magnética nuclear (1H), análise elementar e espectrometria de massas. A atividade biológica in vitro dos compostos [Ag(phen)(imt)]NO3 (1), [Ag(phen)2(imt)]BF4 (2), [Ag(phen)(imt)]CF3SO3 (3), [Ag(dppz)(imt)]NO3 (4), [Ag(dppz)(imt)]BF4 (5), [Ag(dppz)(imt)]CF3SO3 (6) foi avaliada frente ao patógeno Mycobacterium tuberculosis e os resultados obtidos indicaram que a variação do ligante quelante nitrogenado afeta a atividade biológica. Os compostos contendo a dipirido[3,2-a:2’,3’-c]fenazina mostraram-se inativos enquanto que os compostos contendo 1,10-fenantrolina apresentaram resultados de MIC menores que 10 µg.mL-1. Além disso, verificou-se que a substituição da tiouréia por imidazolidina-2-tiona e a alteração dos contra-íons não resultou em uma potencialização do efeito tuberculostático. Os complexos sintetizados nesse trabalho foram tóxicos frente às células de fibroblasto pulmonar MCR5, refletindo em índices de seletividades (SI) desfavoráveis. / The antimicrobial effects of silver ion together with its low toxicity in the human body have attracted considerable attention. Combining silver ions with biologically active ligands represents a well-succeeded strategy to afford complexes with enhanced effects towards pathogenic microorganisms. Therefore, the design of new coordination compounds bearing nitrogen/súlfur-based ligands aims at obtain more active agents against Mycobacterium tuberculosis since the outbreak of multidrug resistant tuberculosis is currently hampered by the lack of available treatments. In this work novel silver complexes of the type [Ag(phen)n(imt)]X and [Ag(dppz)(imt)]X (phen= 1,10-phenantroline, n = 1, 2; dppz = dipirido[3,2-a:2’,3’-c]phenazine, imt= imidazolidine-2-thione; X= BF4 - , CF3SO3 - , NO3 - ) have been synthesized and characterized. The complexes have been characterized by infrared spectroscopy, 1H nuclear magnetic resonance, elemental analysis, conductance measurements and mass spectrometry techniques. The in vitro biological activity of the compounds [Ag(phen)(imt)]NO3 (1), [Ag(phen)2(imt)]BF4 (2), [Ag(phen)(imt)]CF3SO3 (3), [Ag(dppz)(imt)]NO3 (4), [Ag(dppz)(imt)]BF4 (5) and [Ag(dppz)(imt)]CF3SO3 (6) has been evaluated against foram estudadas frente Mycobacterium tuberculosis and the obtained results suggest that the nature of chelating ligand affects the biological activity. Compounds bearing the dipyrido[3,2-a:2’,3’-c]phenazine demonstrated to be inactive whereas those containing 1,10-phenantroline exhibited MIC values less than 10 µg mL-1 . Besides that, it was verified that the replacement of thiourea by imidazolidine-2-thione did not result in any increase of the tuberculostatic activity. The complexes were cytotoxic towards pulmonar fibroblast cells MCR5, resulting in unfavorable Selectivity Indexes (SI).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:38:14Z : No. of bitstreams: 1 barra_cv_me_araiq.pdf: 3280115 bytes, checksum: d562dbced1d24167c8d53a0a9e51c447 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A quimioterapia é uma das principais formas de combate ao câncer. Sendo assim, muitas pesquisas vêm sendo feitas com o objetivo de desenvolver compostos que solucionem, ou minimizem, os problemas decorrentes deste tipo de tratamento, como os efeitos colaterais e a resistência que as células desenvolvem aos medicamentos. Os pirazóis e seus complexos são conhecidos por possuírem atividade antitumoral, antiinflamatória, antibacteriana e antipirética. Tendo em vista estas propriedades, ligantes pirazólicos foram utilizados na síntese de complexos de paládio(II) com a finalidade de obter compostos com atividade antitumoral. A escolha deste metal foi baseada na similaridade entre sua química de coordenação e a da platina(II), cujos complexos, como a cisplatina e a carboplatina, são amplamente utilizados como agentes antitumorais. Neste contexto, o presente trabalho descreve a síntese, caracterização e avaliação da atividade antitumoral de duas séries de compostos paládio(II) de fórmula geral [PdX2(HdmIPz)2] {HdmIPz = 3,5-dimetil-4-iodopirazol; X = Cl (1), Br (2), I (3), SCN (4)} e [PdX2(HmPz)2] {HmPz =4-metilpirazol; X = Cl (5), Br (6), I (7), SCN (8)}. Os compostos foram caracterizados por análise elementar, espectroscopia vibracional na região do infravermelho, ressonância magnética nuclear de 1 H e 13 C{ 1 H}, termogravimetria e análise térmica diferencial. Os complexos sintetizados e os ligantes livres foram submetidos a testes de atividade citotóxica frente a células tumorais murinas. A cisplatina foi usada como droga padrão, sendo submetida às mesmas condições. A citotoxicidade dos compostos 1-4 também foi avaliada frente a macrófagos peritoneais de camundongos / Chemotherapy is one of the main methods of treating cancer. Thus, much research has been undertaken with the aim of developing compounds that can solve or minimize the problems caused by this type of treatment, as the side effects and cell resistance. Pyrazoles and their complexes are known to possess antitumor, anti-inflammatory, antiamoebic, antibacterial, antipyretic activities. Considering these properties, pyrazole ligands were used in the synthesis of palladium(II) complexes with the aim to obtain compounds displaying antitumor activity. The choice for using this metal was based on the similarity of its coordination chemistry to that of platinum(II) whose compounds, such as cisplatin and carboplatin, are widely used as antitumor agents. In this context, this work describes the synthesis, characterization and investigation of the antitumor activity of two series of palladium(II) complexes of general formulae [PdX2(HdmIPz)2] {HdmIPz = 3,5-dimethyl-4-iodopyrazole; X = Cl (1), Br (2), I (3), SCN (4)} e [PdX2(HmPz)2] {HmPz =4-methylpyrazole; X = Cl (5), Br (6), I (7), SCN (8)}. The compounds were characterized by elemental analysis, infrared vibrational spectroscopy, 1 H and 13 C{ 1 H} nuclear magnetic resonance, thermogravimetry and differential thermal analysis. The complexes and the free ligands were tested for cytotoxic activity against murine tumor cells. Cisplatin was used as standard drug, being subject to the same conditions. The cytotoxicity of compounds 1-4 was also evaluated towards peritoneal macrophages of mice

Esta dissertação é dedicada ao estudo de algumas das propriedades e aplicações do speckle dinâmico no monitoramento de atividade em tecidos biológicos. As estatísticas espaço-temporais de primeira e segunda ordem são discutidas em vias gerais. As principais técnicas para obtenção de dados a partir do granulado óptico são apresentadas, com especial destaque para a função de autocorrelação, as matrizes de co-ocorrência, o método de Fujii e a Análise de Contraste do Laser Speckle (LASCA). Uma nova metodologia de análise, baseada no estudo do contraste das correlações sucessivas, é proposta. Diversas simulações numéricas, utilizando diferentes funções densidade de probabilidade para as velocidades dos centros espalhadores, foram realizadas com intuito de testar os métodos de análise e fornecer subsídios para a interpretação de resultados in vivo. Tecidos vegetais e animais foram investigados, realizando-se o monitoramento do processo de senescência e mapas de vascularização em folhas, acompanhamento de frutos contaminados por fungos, mapeamento de atividade em flores e análise de cicatrização em ratos submetidos à cirurgia abdominal. Ensaios explorando o uso do biospeckle em microscopia são implementados. Por fim, é avaliado o potencial da técnica como ferramenta de diagnóstico em um caso de úlcera venosa crônica submetida a tratamento por meio de laserterapia de baixa intensidade. Os resultados encontrados revelaram o grande potencial em aplicações biológicas, através da construção de mapas que permitiram, por exemplo, a visualização detalhada da rede vascular de folhas vegetais. Também foi possível a identificação de áreas atacadas por micro organismos. Os estudos em tecidos animais e humanos apontaram perspectivas bastante promissoras do uso do biospeckle em ambiente clínico. / This master thesis is devoted to the study of some properties and applications of dynamic speckles on monitoring of activity in biological tissues. The first and second order space-time statistics are dicussed in an overview perspective. The main techniques used to obtain information from grainy pattern are presented, with special prominence to autocorrelation function, co-occurrence matrices, Fujii's method and the Laser Speckle Contrast Analisys (LASCA). A new methodology, based on the study of the contrast of sucessive correlations, is proposed. Several numerical simulations, using different probability density functions to velocities of scatterers, are done in order to test the analysis methods and supply subsidies for interpretation of in vivo results. Vegetable and animal tissues are investigated by monitoring of senescence process and construction of vascularization maps of leaves, accompanying of fungi contamined fruits, mapping of activity in flowers and analysis of healing in rats undergone to abdominal surgery. Experiments using the biospeckle phenomenon in microscopy are carried out. At last, it is evaluated the potentiality of the technique as diagnosis tool in a chronic vein ulcer undergone to treatment through low intensity laser therapy. The found results showed the great potential in biological applications, through the construction of maps that maked possible, for example, the detailed visualization of the vascular net on leaves. It was allowed the identification of areas injured by micro organisms. The studies on animal and human tissues pointed very promising perspectives of the use of biospeckle in clinical environment.

O estudo fitoquímico das folhas de Ocotea catharinensis (Lauraceae) resultou no isolamento da neolignana tetraidrofurânica veraguensina (1) e do flavonóide glicosilado afzelina (10), ainda não descritas para a espécie, além de quatro neolignanas hexaidrobenzofurânicas (2-5) anteriormente descritas para mesma. Nos embriões somáticos in vitro constatou-se o acúmulo de duas neolignanas hexaidrobenzofurânicas (2, 3) e duas biciclo[3.2.1]octânicas (6, 7), dois sesquiterpenos (8, 9) e um fenilpropanóide (11). A neolignana biciclo[3.2.1]octânica (7S,8R,1\'R,2\'R,3\'R)-2\'-acetoxi-3,4-metilenodioxi-3\',5\'-dimetoxi-4\'-oxo-Δ1,3,5,5\',8\'-8.1\',7.3\'-neolignana (7), o sesquiterpeno (-)-eudesm-11-em-4α-ol (9) e o fenilpropanóide 6-metóxieugenol (11) não haviam sido isolados anteriormente desta espécie. O perfil dos metabólitos secundários incluiram análises do óleo essencial das folhas cuja análise indicou a predominância de mono- e sesquiterpenos e ausência de fenilpropanóides. Além disso, foram avaliadas atividades antifúngica e antioxidante nos extratos e substâncias isoladas. A fração de CHCl3 do extrato etanólico mostrou atividade antifúngica contra Cladosporium cladosporioide ou C. sphaerospermum. As frações de CHCl3 e de AcOEt do extrato etanólico, as neolignanas hexaidrobenzofurânica (5), biciclooctânica (6), o flavonóide glicosilado (10) e o fenilpropanóide (11) apresentaram atividade antioxidante através do método de DPPH (1,1-difenil-2-picril-hidrazila). A avaliação de hipóteses biossintéticas envolvidas na formação de neolignanas em O. catharinensis fizeram uso de culturas embriogênicas como modelo experimental. Foram realizados diversos estudos de bioconversões de precursores como o isoeugenol e 5-metoxieugenol utilizando-se suspensões celulares e frações enzimáticas porém as conversões in vivo utilizando-se precursores marcados e os embriões foram melhor sucedidas. Entre os precursores radioativos, a L-[U-14C]-fenilalanina foi incorporada às neolignanas hexaidrobenzofurânicas (2, 0,30% e 3, 0,19%) e biciclooctânica (6, 0,12%). No caso do ácido [8-14C]-ferúlico, esse foi incorporado à neolignana hexaidrobenzofurânica (2, 0,17%). Por outro lado, o uso de L-[1-13C]-fenilalanina e análise por espectrometria de massas-massas confirmou o enriquecimento de 13C nas neolignanas hexaidrobenzofurânicas (2 e 3). A análise por RMN de 13C indicou o enriquecimento de 4,3 e 5,0% nos carbonos C9 e C9\', respectivamente. Desta maneira, através dos dados de incorporação desses precursores, desvenda-se parte da via biossintética de neolignanas em O. catharinensis. / The phytochemical study of Ocotea catharinensis (Lauraceae) leaves resulted in the isolation of tetrahydrofuran neolignan veraguensin (1) and glycosylated flavonoid afzelin (10), not yet described for this species, besides four hexahydrobenzofuran neolignans (2-5), which had been previously described. The in vitro somatic embryos showed the accumulation of two hexahydrobenzofuran (2, 3) and two bicyclo[3,2,1]octane (6, 7) neolignans, two sesquiterpenes (8, 9) and one phenylpropanoid (11). Among these compounds (7S,8R,1\'R,2\'R,3\'R)-2\'-acetoxy-3,4-methylenedioxy-3\',5\'-dimethoxy-4\'-oxo-Δ1,3,5,5\',8\'-8.1\',7.3\'-neolignan (7), (-)-eudesm-11-en-4α-ol (9) and 6-methoxy-eugenol (11) have not been previously described for this species. The profile of secondary metabolite included the analysis of essential oil of leaves which indicated the predominance of mono- and sesquiterpene and no phenylpropanoids. In addition, antifungal and antioxidative activities were performed with extracts and isolated compounds. The CHCl3 fraction of ethanol extract exhibited antifungal activities against Cladosporium cladosporioide or C. sphaerospermum. The CHCl3 and EtOAc fractions of ethanol extract, the hexahydrobenzofuran (5) and a bicyclo[3.2.1]octane (6) neolignans, afzelin (10) and 6-methoxy-eugenol (11) displayed antioxidant activities using DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl). The evaluations of biosynthetic hypothesis for neolignan formation in O. catharinensis were based on the use of embriogenic culture as an experimental model. Several assessment for conversion of putative precursors such as eugenol and 5-methoxyeugenol were evaluated using suspension cells and cell free preparations but none of them were as effective as in vivo conversion using labeled precursors directly in embryos. Among the radioactive precursors L-[U-14C]-phenylalanine was incorporated to hexahydrobenzofuran (2, 0.30%; 3, 0.19%) and bicyclo[3.2.1]octane (6, 0.17%) neolignans while [8-14C]-ferulic acid was incorporated only to the hexahydrobenzofuran neolignan (2, 0,17%). The tandem mass spectrometry analysis confirmed the incorporation of 13C atoms in the neolignans (2, 3) indicating the incorporation of one or two molecules of L-[1-13C]-phenylalanine. The analysis of 13C NMR data revealed the enrichment of 4.3 and 5.0% at the positions C9 and C9\', respectively. In summary, the labeling experiments have contributed to unravel the biosynthesis of neolignans in O. catharinensis.

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Stem cells isolated from apical papilla cells were donated by the cell bank from Pharmaceutical Nanotechnology Laboratory and Drug Delivery Systems, Federal University of Goiás (UFG). Cells were cultured in 75cm^2 bottles and kept in a humidified stove at 37 °C in a saturated atmosphere at 5% CO2. Standard culture medium used was composed of Dulbecco's modified Eagle's medium nutrient mixture F-12 (DMEM / F12), 10%, fetal bovine serum ,100 ug / ml streptomycin and 100 U / ml penicillin. For irradiation, the semiconductor laser diode(InGaAlP) was used at a wavelength of 660 nm, 100mW power, 6J energy, 60 seconds for irradiation time and 200 J / cm². Dose. Initially, the intensity of mitochondrial metabolism was evaluated by immunofluorescence. For this, we used Mitotraker Red in a concentration of 100mM. Intensities of mitochondrial activity was compared in non-irradiated cells, and after two irradiation times: immediately to the application of LILT and 24h after application. In order to assess the immunoreactivity of proteins involved in cell proliferation, it performed immunocytochemistry using Ki-67, p53, Bcl-2, Cyclin B1, TGF-β2 and TGF-β3 .The incubation time for the primary antibody exposure was standardized at 2hours. For each antibody, two different groups were analyzed: non-irradiated (CNT) and irradiated (G6J). The progression of the cell cycle analysis was performed, by flow cytometry. The results obtained in the groups irradiated and non-irradiated were compared. The normality of the data distribution was tested using the Kolmogov- Sminorv test. To check the diferences in the immunoreactivity between the groups, were used the Mann-Whitney test and to check whether there was a statistical difference between the groups regarding the progression of the cell cycle, we used the nonparametric T test. In both cases, it was adopted significance of 5%. Increased mitochondrial activity was evident immediately from the time of irradiation, and this metabolic activity increase even more after 24 hours of exposure to LILT The irradiated group showed greater median percentage of immunopositive Ki-67 and Cyclin B1. However, in both cases, there was no statistical significance when compared to control groups. There was no difference in TGF-β expression. Likewise, it was also no difference obtained as the p53 and Bcl-2, which indicates that the LILT does not deregulating the maintenance of cell cycle progression and control of apoptosis. There was no disagreement on the chronology of cell cycle progression between the groups irradiated and non-irradiated. Thus, it is possible to conclude that the LILT increases mitochondrial metabolism of isolated stem cells of the apical papila and it can influence the imunoexpression of proliferation marker. Furthermore, the irradiation of SCAPs does not result in any damage to regulation of cell proliferation and apoptosis functions. / O objetivo deste trabalho consistiu na análise dos efeitos da laserterapia de baixa intensidade (LBI) na atividade biológica de células-tronco isoladas da papila apical (SCAPs). Foram utilizadas células-tronco isoladas da papila apical doadas pelo banco de células do Laboratório de Nanotecnologia Farmacêutica e Sistemas de Liberação de Fármacos da Universidade Federal de Goiás (UFG). As células foram cultivadas em garrafas de 75cm^2 e mantidas em estufa umidificada a 37°C em atmosfera saturada em 5% de CO2. Foi utilizado meio de cultura padrão composto por Dulbecco's modified Eagle's medium nutrient mixture F-12 (DMEM/F12), soro fetal bovino a 10%, 100 µg/mL de estreptomicina e 100 U/mL de penicilina. Para irradiação, foi utilizado o laser semicondutor diodo (InGaAlP), no comprimento de onda de 660 nm, potência de 100mW, energia de 6J, tempo de irradiação de 60 segundos. Inicialmente, foi avaliada a intensidade do metabolismo mitocondrial por meio de imunofluorescência com o uso do Mitotraker Red. Foram comparadas as intensidades de atividade mitocondrial em células não irradiadas, e após dois tempos de irradiação: imediato à aplicação do LBI e 24h após a aplicação. Com o intuito de avaliar a imunoexpressão de proteínas reguladoras, foi realizada imunocitoquímica, empregado os marcadores Ki-67, Ciclina B1, TGF-β2 e TGF-β, p53, Bcl-2. Para cada anticorpo, foram analisados dois grupos distintos de células: um não irradiado (CNT) e outro irradiado (G6J). A análise da progressão do ciclo celular foi realizada no tempo de 8h por meio da marcação com Iodeto de Propídeo, as células foram quantificadas de acordo com a fase do ciclo em que se encontravam, por meio de citometria de fluxo. Foram comparados os resultados obtidos nos grupos irradiados e não irradiados. A normalidade de distribuição dos dados foi testada utilizando o teste de Kolmogov-Sminorv. . Para verificar as diferenças nos percentuais de imunoreatividade, foi utilizado o teste de Mann- Whitney e para verificar se houve diferença estatística entre os grupos quanto a progressão do ciclo celular, foi utilizado o teste T não paramétrico. Em ambos os casos, foi adotada significância de 5%. O aumento da atividade mitocondrial foi evidente desde o momento imediato da irradiação, sendo este aumento metabólico ainda maior após 24h de exposição ao LBI. As células irradiadas com LBI vermelho apresentaram maiores medianas de percentuais de imunopositividade ao Ki-67 e a Ciclina B1. Não houve diferença quanto à expressão de TGF-β. Da mesma forma, também não foi obtida diferença quanto à imunoexpressão do p53 e Bcl-2, o que indica que o LBI não desregula genes importantes na manutenção da progressão do ciclo celular e controle da apoptose. Também não houve divergências quanto à cronologia da progressão do ciclo celular entre os grupos irradiados e não irradiados. Desta forma, é possível concluir que a absorção da luz pelas SCAPs resulta em aumento imediato do metabolismo mitocondrial que pode influenciar a maior expressão do marcador de proliferação nestas células. Também foi demonstrado que a irradiação destas células não resulta em nenhum dano à regulação das funções vitais de proliferação celular e apoptose.

Além das funções mecânicas, sabe-se que o colágeno do tipo I é um dos componentes mais ativos na modulação das atividades biológicas que ocorrem na matriz extracelular (MEC) tais como a adesão celular, a coagulação e a mineralização do osso. Estes eventos ocorrem nos limites do período D, que é provavelmente o domínio funcional que mais prevalece em relação à transferência da informação extracelular para o interior da célula. O objetivo deste trabalho foi estudar as correlações existentes entre as atividades biológicas da MEC e as características estruturais do colágeno do tipo I, principalmente em relação à distribuição topográfica dos aminoácidos (aa) ácidos, básicos e hidrofóbicos. A metodologia empregada foi baseada em informações já existentes sobre a estrutura colágeno do tipo I e suas atividades relacionadas com a MEC. Os resultados mostraram que aa ácidos, básicos e hidrofóbicos formam duas regiões distintas. Em uma delas, aa ácidos e básicos se alojam em áreas delimitadas por aa hidrofóbicos; na outra, aa básicos, ácidos e hidrofóbicos formam aglomerados localizados principalmente nas proximidades dos limites Overlap:Gap. Exceto para os eventos de natureza estrutural são as regiões do colágeno do tipo I mais envolvidas na modulação das atividades da MEC, com a interface Overlap:Gap funcionando como um divisor do controle destas atividades. Enquanto 83,2% das atividades de adesão estão localizadas na zona do Overlap, 93,3% das atividades de natureza estruturais ocorrem a partir da zona limite Overlap:Gap e em direção à zona Gap. Embora nenhuma correlação possa ter sido estabelecida para a resultante de carga, sugere-se que a participação do colágeno do tipo I nas atividades da MEC, possa estar associada a diferenças de interações dos ligantes (carga, massa molecular e hidrofobicidade) com gradientes eletrostático e hidrofóbico existentes ao longo do período D. / Besides mechanical function, it is known today that type I collagen plays a major role in the modulation of many of the activities occurring in the extra-cellular matrix (ECM) such as cell adhesion, coagulation cascade and mineral deposition during bone formation. All these events occur by interaction of cells and ligands within the D-period of collagen microfibrill assembly, which is perhaps the most prevalent module of ECM information in the body. The purpose of this work was the study of correlations between the biological activities of ECM and the structural features of collagen associated with the distribution of acidic, basic and hydrophobic amino acids (aa) within the D period. The methodology used was based on existing information with respect to the structure of type I collagen and its function with respect to ECM activities. The results showed that acidic, basic and hydrophobic aa are found in two major distinct regions: one in which acidic and basic aa are located in areas defined by hydrophobic aa barriers; the other in which acidic, basic and hydrophobic aa forming clusters located preferentially in the boundaries of the Overlap:Gap zones. Except for the structural event, these clusters are the major sites for the interaction involving cell adhesion. The results also suggest that the Overlap:Gap interface function as a borderline for collagen interactions with ECM since 83,2% of the activities related to cell adhesion are located in the Overlap region while 93,3% of the activities of structural nature are enclosed within the limiting zone of Overlap:Gap to the direction of the Gap zone. Although no correlation could be established for net charge along the D period it is suggested that type I collagen participation in the activities of the ECM may also be associated to differences in ligand interactions (charge, molecular mass and hydrophobicity) with the electrostatic and the hydrophobic gradients that exists within the D period.