Orientador: Carmen Regina Marcati / Banca: Veronica Angylossy / Banca: Patricia Soffiatti / Banca: Silvia Rodrigues Machado / Banca: Fábio Akira Mori / Resumo: - Este estudo abordou a sazonalidade da atividade cambial e da fenologia vegetativa, a relação existente entre estes dois eventos e a relação destes com fatores climáticos e ambientais, bem como os efeitos de anelamento caulinar na estrutura do xilema secundário em espécies de cerrado. Para o estudo da sazonalidade da atividade cambial, amostras do caule principal de Kielmeyera grandiflora (Wawra) Saddi (Calophyllaceae) foram coletadas mensalmente, entre setembro de 2011 e dezembro de 2012. No mesmo período, foram feitas observações mensais das fases fenológicas vegetativas para avaliar a sazonalidade na produção de folhas e comparar estes dados com a atividade cambial. Para verificar quais os fatores ambientais e climáticos relacionados com a brotação e com o início da atividade cambial, foram calculadas as médias de temperatura e do fotoperíodo, e obtido o somatório da precipitação em uma escala de tempo que variou de 1 a 30 dias antes da brotação e do início da atividade cambial. Em seguida, foi calculado o coeficiente de variação das médias para avaliar a variabilidade entre os anos. Para o estudo do efeito de anelamento caulinar na estrutura do xilema secundário foi montado um experimento em campo com a espécie Aegiphila verticillata Vell. (Lamiaceae). O experimento foi composto por dois grupos, anelamento e controle. No grupo anelamento, a casca e o câmbio vascular foram removidos completamente do caule principal na porção central do tronco, formando um anel completo. O objetivo do anelamento foi interromper o fluxo polar de auxina produzido na copa para avaliar os efeitos dessa interrupção na estrutura do xilema secundário. No grupo controle, o caule não foi anelado. Para identificar o xilema secundário formado antes do anelamento do formado posteriormente ao tratamento foi feita uma incisão na casca, nas porções acima e abaixo do anelamento, até atingir o câmbio vascular. Esta incisão... / Abstract: This study approached the seasonality in cambial activity and vegetative phenology, the relationship between these events and their relation with wheater and environmental factors, and also the effects of stem girdling in the structure of secondary xylem in Cerrado species. In order to study of seasonality in cambial activity, monthly samples from main stem of Kielmeyera grandiflora (Wawra) Saddi (Calophyllaceae) were collected from September 2011 to December 2012. In the same period, observations of vegetative phenological phases were made to assess the seasonality in leaf production, and to compare these data with cambial activity. In order to certify which environmental and weather features are related with bud opening and onset of cambial activity, it was calculated the mean value of temperature and photoperiod, and obtained the sum of rainfall in a time scale that ranged from 1 to 30 days before bud opening and the onset of cambial activity. After that, the coefficient of variation was calculated to assess the variability between years. In order to evaluate the stem girdling effect in the structure of secondary xylem was conducted an experiment in field with the species Aegiphila verticillataVell (Lamiaceae), composed of two groups, girdling and control. In girdling group, bark and cambium were completely removed from the central portion of main stem, forming a complete ring. The purpose of girdling was to interrupt the polar flow of auxin produced in the crown, and to assess the effect of its disruption in the structure of secondary xylem. In control group, it has not made a girdling in the stem. To distinguish the xylem formed before girdling from xylem formed after the treatment, an incision (03 cm in length) was made in the regions above and below girdling until reaches the vascular cambium. In the same way, in control group an incision in the bark was made at a central point of the ... / Doutor

Orientador: Fábio Tebaldi Silveira Nogueira / Resumo: O processo de frutificação é definido como a transição de um ovário em estágio quiescente para estágio de iniciação de formação do fruto. Esta transição é iniciada em resposta aos eventos de polinização e fertilização, os quais induzem o início dos processos fisiológicos e moleculares, que, ao final, irão originar o fruto. A frutificação é fundamental para reprodução nas plantas com flores (Angiospermas). Já foi demonstrado que hormônios (tais como auxina e giberelina) podem atuar em paralelo com fatores de transcrição durante o desenvolvimento do fruto. Alguns desses fatores de transcrição são pós-transcricionalmente regulados por microRNAs. MicroRNAs, são pequenos RNAs (20-22 nt) que regulam pós-transcricionalmente a expressão de genes endógenos, modelando o transcriptoma e a produção de proteínas.Entretanto, vias genéticas orquestradas por microRNAs associadas com o desenvolvimento de ovário, e consequentemente, do fruto em tomateiro (Solanum lycopersicum L.), permanecem pouco exploradas. Neste trabalho, foi investigada a contribuição da via SlymiR159/GAMYB-like durante o processo de desenvolvimento do ovário e frutificação em tomateiro. O miR159 e seus alvos (SlyGAMYB1 e 2) são dinamicamente expressos durante os estágios de desenvolvimento do ovário e consequentemente do fruto. Eventos transgênicos de tomateiro (cv. Micro-Tom) apresentando super-expressão do precursor SlyMIR159 (denominados OE-159) exibiram frutificação precoce quando comparadas aos controles. Notavelment... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fruit set, defined as the shift from quiescent ovary to a fast-growing young fruit, is a key process for fruit production in flowering plants. It has been shown that hormones (such as auxin and gibberellin) act in parallel with transcription factors during fruit set. Some of these are post-transcriptionally regulated by microRNAs (miRNAs). MiRNAs are a group of small non coding RNAs (21-22 nt) that act by regulating post-transcriptionally genes in plants and animals However, microRNA-regulated genetic pathways associated with tomato (Solanum lycopersicum L.) ovary development and fruit set remain poorly exploited. Here, we investigated the functional role of miRNA159/SlyGAMYBlike in tomato ovary development and fruit set. MiR159 and its targets were dynamically expressed in developing flowers, ovaries and fruit tissues. Transgenic tomato (cv. Micro-Tom) plants over-expressing the SlyMIR159 (termed OE-159) exhibited fruit set earlier when compared with control plants. Strikingly, all transgenic lines presented parthenocarpy fruits. Such developmental modification may be a result of the repression of SlyGAMYB1 in pre-anthesis ovaries, our data suggest that SlyGAMYB1 activity is important to prevent fruit set before pollination. In addition as a consequence of this repression, the miR167 node (miR167/SlyARF8 pathway) was mis-regulated in OE-159 ovaries. In addition, we observed that levels of auxin, gibberellin (GA) and abscisic acid (ABA) in pre-anthesis ovaries of several tran... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-18Bitstream added on 2014-06-13T19:39:48Z : No. of bitstreams: 1 000759027.pdf: 1191880 bytes, checksum: d0c116ca5fc35cc4b949cc914859e8dd (MD5) / O Brasil triplicou sua produção florestal de eucalipto desde 1970, alcançando médias de 45m3.ha-1.ano-1. Muitos avanços técnicos contribuíram para esta produtividade, dentre eles a utilização de herbicidas para o controle de plantas daninhas, evitando assim grande parte da matocompetição e melhor desenvolvimento do vegetal quanto à iluminação e assimilação de nutrientes. O produto 2,4-D destaca-se como herbicida seletivo às dicotiledôneas utilizado nas grandes culturas, dentre elas está a cultura do eucalipto. O 2,4-D também pode ser usado como regulador vegetal, auxina (Ax), podendo gerar incrementos nutricionais e auxiliar no desenvolvimento morfológico do vegetal após testes preliminares para obtenção de dosagem ideal. O presente trabalho objetivou avaliar a influência e as interações entre a obtenção de dosagem ideal, à espécie e estágio de desenvolvimento (mudas), no primeiro teste do produto 2,4-D como regulador vegetal, para posteriormente ser aplicado em teste de progênies de Eucalyptus grandis para estimar os parâmetros genéticos quantitativos. Os experimentos foram realizados no viveiro de mudas do Departamento de Ciências Florestais – FCA/UNESP, Botucatu-SP. Utilizando mudas procedentes do Horto Florestal de Itatinga. Os delineamentos utilizados 2 foram em blocos casualizados, com cinco tratamentos e cinco repetições para o primeiro teste, com 25 indivíduos por bloco, totalizando 150 indivíduos. E para o teste de progênies foram usadas 20 progênies em três repetições, totalizando 960 plantas. A avaliação de médias para o primeiro teste foi realizada pelo teste Tukey a 5% de probabilidade, com o programa estatístico ASSISTAT 7.6 beta e para o teste de progênies foram obtidos os parâmetros genéticos quantitativos pelo programa computacional SELEGEN. Como fatores norteadores após 15 dias da aplicação do produto foram avaliados... / The Brazil tripled its eucalyptus production reaching averages 45m3.ha-1.year-1 in comparison to 70's decade. Many technical advances have contributed to this productivity, among it the use of herbicides for weed control, thus avoiding much of the weed competition and better development of the plant as the lighting and nutrient assimilation. The 2,4-D product stands out as selective herbicide for broadleaved used in major crops, among them is the cultivation of eucalyptus. 2,4-D may also be used as plant growth regulator like synthetic auxin (Ax) and may generate nutritional helper increases and the morphological development of the plant after preliminary testing to obtain optimal dosage. This study aimed to evaluate the influence and interactions between obtaining optimal dosing in the first test of 2,4-D product as plant growth regulator, to subsequently be applied in progeny test of Eucalyptus grandis to estimate quantitative genetic parameters. The experiments were performed in the seedling nurseries of the Department of Forest Sciences - FCA / UNESP, Botucatu-SP. Using seedlings coming from Horto de Itatinga. The designs were used in a randomized block design with five treatments and five repetitions for the first test, with 25 trees each, totaling 150 individuals. And for the 20 progenies progeny tests were used in three replications, totaling 960 plants. The rating average for the first test was performed by Tukey test at 5% probability, with the 7.6 beta ASSISTAT statistical program and the progeny test with the obtention the quantitative genetic parameters were obtained by SELEGEN computer program. As guiding factors after 15 days of product application were evaluated macro and micronutrients (N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mn and Zn) in plant tissues of aerial part and performed evaluations of characters morphological as height and diameter and direct measurements of dry ...

O eucalipto é uma das espécies arbóreas mais plantadas no mundo atualmente, principalmente devido ao seu uso como matéria prima para as indústrias de celulose, papel e madeireira. Eucalyptus globulus e seus híbridos possuem baixos teores de lignina e despertam grande interesse da indústria, já que essa característica facilita e diminui o custo do processo de extração da celulose. Entretanto, essa espécie é recalcitrante ao enraizamento adventício, o que dificulta a propagação vegetativa de suas mudas. Com o objetivo de melhor entender os mecanismos moleculares envolvidos na recalcitrância ao enraizamento em E. globulus, o presente estudo envolveu análises de parâmetros morfológicos, anatômicos e moleculares durante a rizogênese adventícia nesta espécie. A exposição à auxina exógena reverteu o fenótipo recalcitrante em E. globulus, aumentando significativamente a porcentagem de enraizamento. O câmbio vascular foi identificado como uma região de acúmulo de auxina e local de origem das raízes adventícias. Através de análises da expressão gênica em células do câmbio, observou-se que TOPLESS e IAA12, repressores da sinalização de auxina, e ARR1, envolvido na rota de sinalização de citocininas, parecem atuar como reguladores negativos do enraizamento adventício. A alta expressão destes genes em plantas controle foi significativamente diminuída com aplicação de auxina exógena. Comparativamente, em espécie de fácil enraizamento, E. grandis, a expressão destes genes se manteve em níveis mais baixos em ambas as condições de tratamento, e a concentração de ácido indol-3-acético endógeno em plantas controle mostrou-se mais elevada. Análises do padrão proteico durante o enraizamento em plantas de E. globulus tratadas ou não com auxina exógena identificaram proteínas envolvidas em diversos processos biológicos, principalmente estresse oxidativo e metabolismo energético. Diferenças interessantes foram identificadas ao comparar as diferentes condições e fases do enraizamento. Várias proteínas foram claramente relacionadas com o respectivo fenótipo apresentado pela planta em cada situação, principalmente considerando plantas controle. Os resultados aqui apresentados representam avanços relevantes no conhecimento sobre a rizogênese adventícia em plantas lenhosas, podendo ser utilizados como ferramentas no desenho de estratégias visando melhorar o enraizamento em genótipos recalcitrantes de valor para a indústria. / Eucalyptus is one of the most planted tree species in the world today, mainly due to its use as raw material for paper, cellulose and wood industries. Eucalyptus globulus and its hybrids have low lignin contents and are of great interest to industry, as this feature facilitates and reduces costs of the cellulose extraction process. However, this species is recalcitrant to adventitious rooting, making vegetative propagation by cuttings difficult. Aiming at a better understanding of the molecular mechanisms involved in rooting recalcitrance in E. globulus, this study analyzed changes in morphological, anatomical and molecular patterns during adventitious rooting in this species. Exogenous auxin exposure reversed the recalcitrant phenotype in E. globulus, significantly increasing rooting percentage. The vascular cambium was identified as a region of auxin accumulation and also the site from where adventitious roots originated. Gene expression analysis in cambium cells indicated that TOPLESS and IAA12, auxin signaling repressors, and ARR1, involved in cytokinin signaling pathway, appear to act as negative regulators of adventitious rooting. The high expression of those genes in control plants was significantly decreased by exogenous auxin treatment. Comparatively, in an easy-to-root species, E. grandis, the expression of these genes was significantlylower in both treatment conditions, and the concentration of endogenous indole- 3-acetic acid in control plants was higher. Analysis of the protein pattern during rooting in E. globulus plants treated or not with exogenous auxin allowed the identification of proteins involved in diverse biological processes, mainly oxidative stress and energy metabolism. Interesting differences were identified when comparing different rooting conditions or phases. Several proteins were clearly associated with the respective plant phenotype in each situation, particularly considering control plants. These results represent relevant advances in the knowledge about adventitious rooting in woody plants and can be used as tools in the design of strategies aiming at improving adventitious rooting in recalcitrant genotypes of industrial value.

O eucalipto é uma das espécies arbóreas mais plantadas no mundo atualmente, principalmente devido ao seu uso como matéria prima para as indústrias de celulose, papel e madeireira. Eucalyptus globulus e seus híbridos possuem baixos teores de lignina e despertam grande interesse da indústria, já que essa característica facilita e diminui o custo do processo de extração da celulose. Entretanto, essa espécie é recalcitrante ao enraizamento adventício, o que dificulta a propagação vegetativa de suas mudas. Com o objetivo de melhor entender os mecanismos moleculares envolvidos na recalcitrância ao enraizamento em E. globulus, o presente estudo envolveu análises de parâmetros morfológicos, anatômicos e moleculares durante a rizogênese adventícia nesta espécie. A exposição à auxina exógena reverteu o fenótipo recalcitrante em E. globulus, aumentando significativamente a porcentagem de enraizamento. O câmbio vascular foi identificado como uma região de acúmulo de auxina e local de origem das raízes adventícias. Através de análises da expressão gênica em células do câmbio, observou-se que TOPLESS e IAA12, repressores da sinalização de auxina, e ARR1, envolvido na rota de sinalização de citocininas, parecem atuar como reguladores negativos do enraizamento adventício. A alta expressão destes genes em plantas controle foi significativamente diminuída com aplicação de auxina exógena. Comparativamente, em espécie de fácil enraizamento, E. grandis, a expressão destes genes se manteve em níveis mais baixos em ambas as condições de tratamento, e a concentração de ácido indol-3-acético endógeno em plantas controle mostrou-se mais elevada. Análises do padrão proteico durante o enraizamento em plantas de E. globulus tratadas ou não com auxina exógena identificaram proteínas envolvidas em diversos processos biológicos, principalmente estresse oxidativo e metabolismo energético. Diferenças interessantes foram identificadas ao comparar as diferentes condições e fases do enraizamento. Várias proteínas foram claramente relacionadas com o respectivo fenótipo apresentado pela planta em cada situação, principalmente considerando plantas controle. Os resultados aqui apresentados representam avanços relevantes no conhecimento sobre a rizogênese adventícia em plantas lenhosas, podendo ser utilizados como ferramentas no desenho de estratégias visando melhorar o enraizamento em genótipos recalcitrantes de valor para a indústria. / Eucalyptus is one of the most planted tree species in the world today, mainly due to its use as raw material for paper, cellulose and wood industries. Eucalyptus globulus and its hybrids have low lignin contents and are of great interest to industry, as this feature facilitates and reduces costs of the cellulose extraction process. However, this species is recalcitrant to adventitious rooting, making vegetative propagation by cuttings difficult. Aiming at a better understanding of the molecular mechanisms involved in rooting recalcitrance in E. globulus, this study analyzed changes in morphological, anatomical and molecular patterns during adventitious rooting in this species. Exogenous auxin exposure reversed the recalcitrant phenotype in E. globulus, significantly increasing rooting percentage. The vascular cambium was identified as a region of auxin accumulation and also the site from where adventitious roots originated. Gene expression analysis in cambium cells indicated that TOPLESS and IAA12, auxin signaling repressors, and ARR1, involved in cytokinin signaling pathway, appear to act as negative regulators of adventitious rooting. The high expression of those genes in control plants was significantly decreased by exogenous auxin treatment. Comparatively, in an easy-to-root species, E. grandis, the expression of these genes was significantlylower in both treatment conditions, and the concentration of endogenous indole- 3-acetic acid in control plants was higher. Analysis of the protein pattern during rooting in E. globulus plants treated or not with exogenous auxin allowed the identification of proteins involved in diverse biological processes, mainly oxidative stress and energy metabolism. Interesting differences were identified when comparing different rooting conditions or phases. Several proteins were clearly associated with the respective plant phenotype in each situation, particularly considering control plants. These results represent relevant advances in the knowledge about adventitious rooting in woody plants and can be used as tools in the design of strategies aiming at improving adventitious rooting in recalcitrant genotypes of industrial value.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-28T13:43:43Z No. of bitstreams: 1 Andresa Priscila de Souza Ramos.pdf: 2860451 bytes, checksum: 3fdb7bbde9ea81f39f6781ff6c556c67 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T13:43:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andresa Priscila de Souza Ramos.pdf: 2860451 bytes, checksum: 3fdb7bbde9ea81f39f6781ff6c556c67 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Plant growth promoting bacteria shows beneficial mechanisms that can promote better development of the host plant. The interaction between host and bacteria can be affected by several factors, such as plant genotype, plant specie, and the niche with microorganims lived. The citros culture have a great socieoeconomic importance for the country, which is one of the largest producers and exporters of citrus fruits. The aim of this study were to evaluate the bacterial communities associated with diferente hybrid citrus genotype, and observed the bacterial density, associated with niches diferents and evaluate the potencial ability to become culture inoculantes. through the study of production growth promoters production substances. Bacterial strains were isolated from the rhizosphere niches, roots, stems and leaves of 13 different genotypes rootstock hybrids of citrus and evaluated its production capacity of amylase, cellulase, pectinase (polygalacturonase and pectate lyase), inorganic phosphate solubilization, IAA producing dependent pathway of tryptophan, the potential biological nitrogen fixation and production of siderophores. Data were analyzed using statistical nonparametric test of Kruskal-Wallis and Wilcoxon using the R software. The results showed that bacteria associated with citrus plants have great potential, and the population density varies from the niche and host plant. Of the 183 isolates from 80% of the isolates were positive for the production of IAA, producing up 85μg.mL-1, 55.7% produced one or more types of enzymes, solubilized 48% phosphate, 37% were positive for nitrogen fixation and 60% for the production of siderophores. Confirming the potential to be potential inoculants culture. / Bactérias promotoras de crescimento de plantas mostram mecanismos benéficos que podem promover o melhor desenvolvimento da planta hospedeira. A interação entre hospedeiro e bactéria pode ser afetada por diversos fatores, como o genótipo da planta, a espécie, e o nicho do qual o micro-organismo foi originado. A cultura dos citros tem grande importância socioeconômica para o país, que é um dos maiores produtores e exportadores dos frutos. Diante disso, os objetivos deste trabalho foram estudar a comunidade bacteriana associada a diferentes genótipos híbridos de citros, observar a densidade bacteriana associada a diferentes nichos e avaliar a potencial capacidade de se tornarem futuros inoculantes para a cultura, através do estudo da produção de sustâncias promotoras de crescimento, e avaliar a diversidade genética através do BOXPCR. Foram estudados isolados bacterianos dos nichos rizosfera, raízes, caules e folhas de 13 diferentes genótipos de híbridos de porta-enxertos de citros e avaliada sua capacidade de produção das enzimas amilase, celulase, pectinases (poligalacturonase e pectato liase), solubilização de fosfato inorgânico, produzir AIA via dependente de triptofano, a potencial fixação biológica de nitrogênio e produção de sideróforos. Os dados foram analisados através do teste estatistico não-paramétrico de Kruskal-Wallis e Wilcoxon utilizando o software R. Os resultados demostraram que bactérias associadas a plantas de citros apresentam grande potencial e que a densidade populacional varia em relação ao nicho e ao hospederio. Dos 183 isolados obtidos, 80% do isolados foram positivos para a produção de AIA, produzindo até 85μg.mL-1, 55,7% produziram um ou mais tipos de enzimas, 48% solubilizaram fosfato, 37% foram positivos para fixação de nitrogênio e 60% para a produção de sideróforos. Confirmando o potencial para serem potenciais inoculantes da cultura.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:25:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Fabricio_Carlotto_Ribeiro.pdf: 690403 bytes, checksum: c4c774a79c4c65c49064168d12f774bb (MD5) Previous issue date: 2010-03-26 / Brazil has a large consumer market for olive-derived products (Olea europaea L.); however, this new culture requires further technical investigation. Therefore, the determination of an efficient method of propagation is the first step in obtaining sufficient amount of plants for the establishment of a sustainable production system. Due to the lack of information surrounding the olive propagation, especially in Brazil, the present work aimed to improve the efficiency of the vegetative propagation by rooting of semi-hardwood cuttings and whip grafting. The trial was carried out at Embrapa Clima Temperado, Pelotas/RS, and it was divided into three experiments. The first one aimed to obtain information about performance of different substrates (Perlite, Vermiculite and Plantmax) to promote rooting of olive 'Frantoio'. It was evaluated the rooting of cuttings (%) and/or callus formation (%) and quality of rooting (root amount grown). The second experiment aimed to evaluate the rooting of semi-hardwood cutting of Olives 'Arbequina' and 'Arbosana' submitted to different sources and concentrations of auxin (0mg.L-1, IBA 2000mg.L-1, IBA 4000mg.L-1, NAA 250mg.L-1 and NAA 500mg.L-1). Also, it was evaluated the rooting of cuttings (%) and/or callus formation (%) and quality of rooting (root amount grown). The third batch assessed the behavior of different olive cultivars (Itrana, Tanche, Bosana, Barnea, Manzanilla, Seggianese, Canino, Picual, Taggiasca and Cipressino) grafted on privet. The measurements here were living grafts (%), shooting grafts (%), number of shoots and length of shoots (cm). It was verified that: in the first experiment the substrate associated with the use of IBA (2000mg.L-1), has no influence on the amount and quality of roots formed on semi-hardwood cuttings of olive 'Frantoio'. In the second experiment, olive cuttings of 'Arbequina' and 'Arbosana' reached up to 18.64% of rooting, indifferently of auxin source and concentration. Rooted cuttings of olive 'Arbequina' and 'Arbosana', untreated and treated with butyric acid (IBA) and naphthaleneacetic acid (NAA), showed low quality of rooting (around one to four main roots). In the third experiment, regarding whip grafting of olive grafts on privet tree, there are considerable variations among living grafts (grafts that remain green but without shooting), grafting set (grafts that show shoots and union between scion/rootstock), number and average length of shoots. The highest grafting set rates and number of shoots per olive graft on privet, occur after 120 days of grafting. / O Brasil apresenta amplo mercado consumidor para os produtos derivados da oliveira (Olea europaea L.), porém, esta nova cultura, necessita de maiores conhecimentos técnicos. Assim, a determinação de um método de propagação eficiente é o primeiro passo na obtenção de quantidades de mudas suficientes para a implantação de um sistema de produção. Em conseqüência da falta de informações que envolvem a propagação de oliveira, principalmente no Brasil, realizou-se o presente trabalho com o objetivo de melhorar a eficiência da propagação vegetativa por enraizamento de estacas semilenhosas e enxertia de garfagem. Foram conduzidos na Embrapa Clima Temperado, Pelotas/RS, três experimentos, sendo o primeiro para obter informações sobre o potencial de diferentes substratos (Perlita, Vermiculita e Plantmax) para promover o enraizamento de estacas de oliveira Frantoio‟. Avaliou-se o enraizamento de estacas (%) e/ou formação de calo (%) e qualidade de enraizamento (quantidade de raízes emitidas). No segundo experimento objetivou-se avaliar o enraizamento de estacas semilenhosas de oliveiras Arbequina‟ e Arbosana‟ submetidas a diferentes fontes e concentrações de auxina exógena (0mg.L-1, AIB 2000mg.L-1, AIB 4000mg.L-1, ANA 250mg.L-1 e ANA 500mg.L-1). Também avaliou-se o enraizamento de estacas (%) e/ou formação de calo (%) e qualidade de enraizamento (quantidade de raízes emitidas). O terceiro teve-se como objetivo, avaliar o comportamento de diferentes cultivares de oliveira (Itrana, Tanche, Bosana, Barnea, Manzanilla, Seggianese, Canino, Picual, Taggiasca e Cipressino) enxertadas sobre ligustro, sendo avaliados os enxertos vivos (%), enxertos brotados (%), número médio de brotações e o comprimento médio das brotações (cm). Através dos resultados obtidos verificou-se que: no primeiro experimento, o tipo de substrato, associado ao uso de AIB (2000mg.L-1), não tem influência sobre a quantidade de raízes formadas em estacas semilenhosas de oliveira Frantoio‟. No segundo experimento, indiferentemente da fonte e da concentração de auxina exógena, estacas de oliveiras Arbequina‟ e Arbosana‟ atingem, no máximo, 18,64% de enraizamento; Estacas enraizadas de oliveira Arbequina‟ e Arbosana‟, não tratadas e tratadas com ácido indolbutírico (AIB) e ácido naftalenoacético (ANA), apresentaram baixa qualidade de enraizamento, (entre uma e quatro raízes principais). No terceiro experimento, verificou-se que na enxertia de garfagem de oliveira sobre ligustro, existem consideráveis variações entre enxertos vivos (enxertos que permanecem verdes, porém sem apresentar brotação), pegamento de enxertos (enxertos que apresentam brotações e união entre enxerto/porta-enxerto), número e comprimento médio das ii brotações. O maior pegamento e número médio de brotações por enxerto de oliveira sobre ligustro, ocorrem após 120 dias de realização da enxertia.

O ácido indol-3-acético (AIA) é uma auxina natural, metabólito do triptofano, e é produzido em células animal, vegetal e em alguns microrganismos podendo atuar como antioxidante. O objetivo do presente estudo foi o de avaliar o poder antioxidante do AIA, frente a um estresse oxidativo hepático induzido pelo hepatocarcinógeno dietilnitrosoamina (DEN). Foram utilizados camundongos BALB/c com dois meses. Em uma primeira etapa do estudo foram utilizados machos e fêmeas com o propósito de se avaliar somente o efeito do AIA administrado diariamente por 15 dias nas doses de 100, 200 e 500 mg/Kg de peso vivo. Em uma segunda etapa foram utilizados somente machos submetidos ao AIA (50, 250 e 500 mg/Kg de peso vivo) por 15 dias e no 16o dia foram expostos ao DEN por 4 h ou por 24 h. Foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) evolução do peso e porcentagem relativa do fígado; 2) alterações metabólicas hepáticas avaliadas pelas atividades de alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST) no soro; 3) perfil oxidativo hepático nas atividades das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx) e glutationa redutase (GR) e dos níveis de glutationa reduzida e glutationa oxidada e 4) fragmentação de DNA hepático. Os resultados foram analisados pela análise de variância (ANOVA) com significância de 0,05 usando o teste de Tukey.O AIA não demonstrou efeito tóxico nas doses utilizadas tanto para machos quanto para fêmeas em nenhum dos parâmetros analisados, pois esses parâmetros não apresentaram diferença significativa em relação aos controles (apenas tampão fosfato salina, pH 7,4). A exposição dos animais ao DEN por 4 h demonstrou diminuição na atividade da CAT e GR em 30% e 23%, respectivamente em relação ao controle. O DEN induziu fragmentação de DNA, somente após 24 horas, correspondentes a 210, 410 e 610 pares de bases (pb). A atividade da CAT e GR nos animais que receberam AIA e expostos ao DEN por 4 h não apresentaram alteração significativa em relação aos controles. Porém, a administração de AIA protegeu, apenas parcialmente o DNA dos efeitos defragmentação causados pela exposição ao DEN por 24 horas, pois se observou uma redução dessa fragmentação em 42%, 51% e 48% para os fragmentos de 210 pb, em 54%, 56% e 55% para os fragmentos de 410 pb e em 51%, 57% e 53% para os fragmentos de 610 pb nos animais que receberam AIA nas respectivas doses de 50, 250 e 500 mg/Kg de peso vivo, em relação aos controles. Concluiu-se que o AIA nas doses administradas, não alterou a evolução do peso, massa relativa do fígado, atividade de ALT e AST e perfil oxidativo hepático dos animais, sugerindo que esta auxina, não é tóxica; e que o AIA promoveu a proteção do fígado dos animais frente aos efeitos deletérios causados pelo DEN, baseado na atividade das enzimas CAT e GR e fragmentação de DNA, demonstrando um efeito antioxidante dessa auxina. / The indol-3-acetic acid (IAA) is a natural auxin, metabolite of the tryptophane, is produced in animal cells, vegetable and in some microorganisms being to act like antioxidant. The objective of the present study was to evaluate the antioxidant effect of the IAA, facing a liver oxidative stress induced by the hepatocarcinogenic diethylnitrosoamine (DEN). Were utilized mice BALB/c with 2 months. In a first phase of the study were utilized males and females with the purpose of to evaluate only the effect of the IAA administered daily by 15 days in the doses of 100, 200 and 500 mg/Kg of body weight. In a second phase were utilized only males submitted to IAA (50, 250 and 500 mg/Kg of body weight) daily during 15 days and in the 16ht day the animals were exposed to the DEN for 4 h or for 24 h. They were evaluated the following parameters: 1) evolution of the weight of the animals and the relative percentage of the liver; 2) liver metabolic alterations evaluated by the activities of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) in the serum; 3) liver oxidative stress available by antioxidant enzyme activity as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) and glutathione reductase (GR) and by levels of the oxidized glutathione and reduced glutathione and 4) fragmentation of liver DNA. The results were analyzed by the analysis of variance (ANOVA) with significance at 0.05 using Tukey test. The IAA did not showed toxic effect in the doses utilized for both males and females for all analyzed parameters, those parameters did not shown significant difference to compare with the controls (only phosphate buffer saline, pH 7.4). The exposition of the animals to DEN for 4 h showed a reduction in the CAT and GR activity as 30% and 23%, respectively, compared with to the control. The DEN to induced DNA fragmentation, only after 24 hours of exposition, corresponding to 210, 410 and 610 pair of bases (pb). The activity of the CAT and GR in the animal treated with IAA and exposed to DEN for 4 h did not show significant alteration to compare with the controls. However, the IAA administration was shown a partially protection of the DNA fragmentation from DEN exposition for 24 hours such as 42%, 51% and 48% for the fragments of 210 pb, 54%, 56% and 55% for the fragments of 410 pb and in 51%, 57% and 53% for the fragments of 610 pb by respectively IAA doses 50, 250 and 500 mg/Kg of body weight, compared with the controls. Concluded that the IAA in the doses administered, did not alter the evolution of the body weight, relative percentage of the liver, activity of ALT and AST and liver oxidative stress in animals, suggesting that this auxin is not toxic; and that the IAA promoted the protection of the liver of the animal facing the harmful effects caused by the DEN based in the activity of the CAT and GR activity and DNA fragmentation, showing an antioxidant effect of this auxin.

Submitted by Cibele Nogueira (cibelenogueira@ufgd.edu.br) on 2016-06-02T17:56:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) CAMILALEMES.pdf: 923174 bytes, checksum: 5ba7bab406fd4bbb2402df5b8f62e01c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T17:56:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) CAMILALEMES.pdf: 923174 bytes, checksum: 5ba7bab406fd4bbb2402df5b8f62e01c (MD5) Previous issue date: 2015-02-02 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Among the Flowering Plants, orchids stand out for its diversity and size of your family. Human action, through the degradation of natural environments, has led many orchid species to extinction. For this reason, in vitro culture has been used as a tool for propagation, since it allows the germination and development of such plants in relatively less time to that observed in nature. Thus, the development of multiplication and development of plants grown in vitro protocols has become an important tool. This work was developed with the goal of developing an in vitro propagation protocol and acclimatization of Miltonia flavescens Lindl. Four experiments were performed in the in vitro culture laboratory and Jardinocultura area of the Faculty of Agricultural Sciences (FCA) of the Federal University of Grande Dourados (UFGD), in which were evaluated the germination and early development of protocorms in different media crops; the initial growth of plants grown in different media cultures supplemented with sucrose concentrations; the root growth in medium supplemented with different concentrations of auxin and cytokinin and acclimatization of plants under different light spectra. Germination at 30 days after sowing, and the initial development of protocorms, 180 days after sowing, were higher in cultivated seeds in MS and MS ½ medium. The initial growth of plants, 180 days after planting, was higher in plants grown on MS ½ medium supplemented with 25 g L-1 sucrose. The root growth was greater in plants grown for 180 days, MS ½ medium with hormonal favor of auxin. At 30 days after pre acclimatization under white fluorescent light (20.0 μmol m-2 s-1), there was 100% survival of plants, and after 180 days these plants exhibited the majority of the growth air ratio. Based on the results, establishes the M. flavescens cultivation protocol for propagation of the specie, both in reintroduction programs and for marketing. / Dentre as Angiospermas, as orquídeas destacam-se pela sua heterogeneidade e tamanho de sua família. A ação humana, através da degradação de ambientes naturais, tem levado muitas espécies de orquídeas à extinção. Por este motivo, o cultivo in vitro tem sido utilizado como ferramenta na propagação, uma vez que possibilita a germinação e o desenvolvimento destas plantas em tempo relativamente menor ao observado na natureza. Desta forma, a elaboração de protocolos de multiplicação e desenvolvimento de plantas cultivadas in vitro tem se tornado ferramenta importante. Assim, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de elaborar um protocolo de propagação in vitro e aclimatização de Miltonia flavescens Lindl. Foram realizados quatro experimentos no Laboratório de cultivo in vitro e na área de Jardinocultura da Faculdade de Ciências Agrárias (FCA) da Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD), nos quais avaliou-se a germinação e o crescimento inicial de protocormos em diferentes meios de cultivos; o crescimento inicial de plantas cultivadas em diferentes meios de cultivos suplementados com concentrações de sacarose; o crescimento do sistema radicular em meio suplementado com diferentes concentrações de auxina e citocininas e aclimatização de plantas sob diferentes espectros luminosos. A germinação, aos 30 dias após a semeadura, e o crescimento inicial de protocormos, aos 180 dias após a semeadura, foram maiores em sementes cultivadas nos meios MS e MS ½. O crescimento inicial das plantas, 180 dias após o plantio, foi maior em plantas cultivadas em meio MS ½ suplementado com 25 g L-1 de sacarose. O crescimento do sistema radicular foi maior nas plantas cultivadas por 180 dias, em meio MS ½ com balanço hormonal favorável à auxina. Aos 30 dias após a pré aclimatização, sob luz fluorescente branca (20,0 μmol m-2 s-1), observou-se 100% de sobrevivência das plantas, e após 180 dias, estas plantas apresentaram a maior relação de crescimento da parte aérea. Com base nos resultados obtidos, estabelece-se o protocolo de cultivo de M. flavescens para fins de propagação da espécie, tanto em programas de reintrodução quanto para sua comercialização.

Plant regeneration through de novo organogenesis is a critical step in most of the plant micropropagation and genetic transformation procedures. In the last years, significant progress has been made in the understanding of the mechanisms underlying de novo organogenesis in the worldwide crop tomato (Solanum lycopersicum). However, the hormonal and molecular factors involving the acquisition of competence for tomato shoot formation, an essential step for the regeneration process, are still not known. The failure in acquire competence can be the reason for the widely described absence of shoot regeneration from tomato root explants. In the first chapter, we conducted a temporal and hormonal characterization of the tomato acquisition of competence and the shoot induction phases using the model system cv. Micro-Tom. Regeneration was improved by pre-incubation on root-inducing medium (RIM) during the early two days in culture, a period corresponding to acquisition of competence step in cotyledon explants. Conversely, the pre-incubation on another auxin-rich condition, the callus-inducing medium (CIM), under the same period, abolished the regeneration achievement. The 2d RIM pre-treatment induced an extensive and intense endogenous auxin response in the explant, probably improving the cells competence to produce shoots under further cytokinin induction on shoot-inducing medium (SIM). This knowledge was applied to improve the Agrobacterium-mediated tomato genetic transformation procedure, leading to an efficient, simple, inexpensive and genotype-independent protocol. In the second chapter, we developed an unprecedented method for tomato shoot regeneration from root explants. The shoot organogenesis was obtained by adjusting the CIM pre-treatment to the acquisition of competence period, corresponding to the initial four days in culture for root explants. The number and quality of shoots formed were also augmented by the optimization of explants properties, medium components, and culture conditions. Taken the two chapters together, the knowledge obtained about organogenic competence advanced and created new regeneration and genetic transformation systems, which are very useful tools for biotechnology and functional studies of specific genes in tomato. / A regeneração de plantas através da organogênese de novo é uma fase crítica para a maioria dos procedimentos de micropropagação e transformação genética. Recentemente, progressos significativos tem sido alcançados no entendimento dos mecanismos fundamentais à organogênese de novo de tomateiro (Solanum lycopersicum). Entretanto, fatores hormonais e moleculares envolvidos na aquisição de competência para formação de gemas caulinares na espécie, etapa essencial ao processo de regeneração, permancece desconhecido. O fracasso em adquirir competência pode ser associado a amplamente descrita incapacidade de tomateiro em regenerar brotos caulinares a partir de raízes. No primeiro capítulo, realizou-se uma caracterização temporal e hormonal das fases de aquisição de competência e indução de gemas caulinares usando a cultivar modelo Micro-Tom. A eficiência de regeneração foi melhorada através de pré-incubação em meio indutor de raízes (RIM) durante os dois primeiros dias de cultivo, período correspondente à fase de aquisição de competência em explantes cotiledonares. Diferentemente, a pré-incubação em outro meio rico em auxina, o meio indutor de calo (CIM), sob mesmo intervalo, aboliu completamente a regeneração. A pré-incubação de dois dias em RIM induziu uma intensa e extensa resposta a auxina endógena no explante, o que provavelmente aumentou a competência das células a induzir brotos caulinares em resposta a citocinina presente no meio indutor de gemas caulinares (SIM). A aplicação desse conhecimento na melhoria do procedimento de transformação genética via Agrobacteria levou a um eficiente, simples, barato e genótipo-independente protocolo. No segundo capítulo, nós desenvolvemos um método inédito de regeneração de tomateiro via explante radicular. A formação de brotos caulinares foi obtida por ajuste do pré-tratamento em CIM ao período de aquisição de competência, correspondente a quatro dias de cultivo em explantes radiculares. O número e qualidade dos brotos também foram elevados pela otimização do explante, composição do meio de cultivo, e condições de cultivo. Somando-se os dois capítulos, o conhecimento obtido a cerca da competência organogênica resultou em novos sistemas de regeneração e transformação genética, ferramentas importantes para processos biotecnológicos e estudos funcionais de genes específicos em tomateiro.