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Regeneração, maturação e germinação in vitro de embriões somáticos em palma de óleo (Elaeis guineenses Jacq) / Regeneration, maturation and germination in vitro of somatic embryos in oil palm (Elaeis guineenses Jacq)

Queiroz, Vanessa de 08 March 2017 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-09-05T12:27:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1405237 bytes, checksum: 84fc43b2211735210b5e82015bc1e5f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-05T12:27:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1405237 bytes, checksum: 84fc43b2211735210b5e82015bc1e5f0 (MD5) Previous issue date: 2017-03-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A palma de óleo (Elaeis guineenses Jacq.) é uma palmeira oleaginosa de importância econômica mundial. O desenvolvimento de plantios comerciais desta palmeira a partir da propagação in vitro de plantas elites oferece vantagens, como a padronização do crescimento das plantas e da produção de frutos, facilitando as práticas de manejo. A embriogênese somática pode contribuir para a propagação da palma de óleo, onde as etapas de regeneração e maturação de embriões somáticos e sua posterior conversão em plântulas, são essenciais para a obtenção de clones em longa escala. Entretanto, fatores intrínsecos e extrínsecos podem interferir no sucesso destas etapas. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da combinação dos níveis do fitormônio ácido abscísico (ABA), do regulador osmótico polietilenoglicol (PEG) e dos aminoácidos (AA) - asparagina, arginina e glutamina, na maturação de embriões somáticos em meio de cultura de regeneração/maturação. Adicionalmente, analisou-se a formação de plântulas (quantitativa e qualitativamente) em meio de germinação. Para tanto, estes componentes foram adicionados ao meio de maturação, sendo este composto pelos sais e vitaminas Y3 (Eeuwens, 1978), suplementado com 60 g L -1 de sacarose, 1 g L -1 de caseína hidrolisada, 100 mg L -1 de mio-inositol, 0,1 μM de ácido beta-naftoxiacético (BNOA) e 1000μM de putrescina, acrescido de 3 g L -1 de carvão ativado. O meio de germinação, também foi composto por sais e vitaminas Y3, suplementados com 30 g L -1 de sacarose, 1 g L -1 de caseína hidrolisada, 100 mg L -1 de mio-inositol, 330 mg L -1 de arginina, 330 mg L -1 de asparagina, 330 mg L -1 de glutamina, 0,54 μM de ANA e 1000 μM de putrescina. Foram utilizados calos embriogênicos do genótipo AM 21, preestabelecidos em meio de cultura de multiplicação. O experimento foi montado em um Delineamento Inteiramente Casualisado (DIC), no esquema fatorial 2x2x5; sendo, dois níveis de AA em mg L -1 (AA100 e AA330), dois níveis de PEG em g L -1 (PEG0 e PEG50) e cinco níveis de ABA em μM (ABA0, ABA3, ABA6, ABA12 e ABA24) totalizando 20 tratamentos e 4 repetições por tratamento. Os resultados da ANOVA apontam que a utilização do PEG, combinado com as doses 3, 6, 12 e 24 μM de ABA reduziram o número de embriões somáticos e posteriormente o número de plântulas em meio de germinação. Porém, a redução do potencial osmótico proporcionada pela adição de PEG, associado ao ABA, acelerou a maturação dos embriões somáticos. Os resultados histológicos e histoquímicos apontam que os embriões tratados com ABA e PEG apresentavam-se mais desenvolvidos e maduros, e tiveram respostas positivas para a presença de grãos de proteínas, lipídeos e amidos. Além disso, os embriões somáticos, oriundos de meio com menor potencial osmótico (PEG50) formaram plântulas em menor período de tempo. / The oil palm (Elaeis guineenses Jacq.) is an oleaginous palm of global economic importance. The development of commercial plantations of this palm from the in vitro propagation of elite plants offers advantages such as the standardization of plant growth and fruit production, facilitating management practices. Somatic embryogenesis may contribute to the propagation of oil palm, where the stages of regeneration and maturation of somatic embryos and their subsequent conversion to seedlings are essential for obtaining large scale clones. However, intrinsic and extrinsic factors may interfere with the success of these steps. The objective of this work was to verify the effect of the combination of the levels of the abscisic acid phormium (ABA), osmotic regulator polyethylene glycol (PEG) and amino acids (asparagine, arginine and glutamine) on the maturation of somatic embryos in culture medium Regeneration/maturation. In addition, seedling formation was (quantitatively and qualitatively) analyzed in germination medium. In order to achieve this, these components were added to the medium, which was composed of the salts and vitamins Y3 (Eeuwens, 1978), supplemented with 60 g L -1 sucrose, 1 g L -1 hydrolyzed casein, 100 mg L -1 of myo-inositol, 0,1 μM of beta-naphthoxyacetic acid (BNOA) and 1000 μM putrescine, plus 3 g L -1 of activated carbon. The germination medium was also composed of salts and vitamins Y3 supplemented with 30 g L -1 sucrose, 1 g L -1 hydrolyzed casein, 100 mg L -1 myo-inositol, 330 mg L -1 arginine, 330 mg L -1 asparagine, 330 mg L -1 glutamine, 0,54 μM ANA and 1000 μM putrescine. Embryogenic calluses of the AM 21 genotype were used, pre-established in a multiplication culture medium. The experiment was set up in a Completely Randomized Design, in the 2x2x5 factorial scheme; two levels of PEG in g L -1 (PEG0 and PEG50) and five levels of ABA in μM (ABA0, ABA3, ABA6, ABA12 and ABA24) and two levels of AA in mg L -1 (AA100 and AA330), totaling 20 treatments, 4 replicates were made per treatment. The results of ANOVA indicate that the use of PEG, combined with doses 3, 6, 12 and 24 μM of ABA reduced the number of somatic embryos and later the number of seedlings in germination medium. However, the reduction of the osmotic potential afforded by the addition of PEG, associated with ABA, accelerated the maturation of somatic embryos. The histological and histochemical results indicate that embryos treated with ABA and PEG were more developed and mature, and had positive responses to the presence of protein, lipid and starch grains. In addition, somatic embryos from medium with lower osmotic potential (PEG50) formed seedlings in a shorter period of time.
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Efeito da administração de células-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea ou seu meio condicionado na obstrução ureteral unilateral em ratas / Effect of bone marrow-derived mesenchymal stem cells or their conditioned medium in unilateral ureteral obstruction in rats

Silva, Andrei Furlan da [UNIFESP] January 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O potencial efeito terapeutico das celulas-tronco mesenquimais (MSCs) e seu meio condicionado (CM) tem sido extensivamente estudados. Eles possuem a capacidade de reparar tecidos, reduzir inflamacao local e modular respostas imunologicas. A inflamacao tubulo-intersticial progride para fibrose e pode levar a doenca renal cronica (DRC). A obstrucao ureteral unilateral (UUO) e um modelo bem estabelecido de fibrose renal. No presente estudo examinamos fatores que podem ser influenciados pela administracao de MSCs ou de seu CM na modelo de UUO. As MSCs foram extraidas de femures e tibias de ratos, cultivadas in vitro e caracterizadas por citometria de fluxo e diferenciacao celular. Quatro grupos de ratas foram usados nos experimentos (n=7, cada): SHAM, UUO (Obstrucao Ureteral Unilateral), UUO+MSCs (Obstrucao+ MSCs) e UUO+CM (Obstrucao + CM). As MSCs ou seu CM foram administrados via veia cava abdominal apos total ligadura do ureter. Apos 7 ou 14 dias os animais foram eutanasiados e tiveram soro e rins coletados. Foram observadas reducoes nas expressoes de moleculas como COL1A1, α-SMA e TNF-α nos animais tratados com MSCs ou seu CM. Observou-se, por imunohistoquimica, reducoes nos niveis de caspase-3 ativada, α-SMA and PCNA nos animais tratados. Os resultados sugerem que a administracao intravenosa de MSCs ou de seu CM reduz a progressao da fibrose e modula fatores envolvidos na apoptose, inflamacao proliferacao celular e transdiferenciacao epitelio-mesenquimal (EMT) em ratas Wistar submetidas a UUO, indicando uma possivel ferramenta na prevencao ou reducao na progressao para DRC / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Ocorrência de Salmonella spp em amostras de carcaças e miúdos de frango obtidas em uma feira e um mercado municipal na zona oeste da cidade de São Paulo: análise crítica entre a técnica convencional em meios de cultivo e reação em cadeia pela polimerase - PCR / Occurence of Salmonella spp in whole broiler carcasses and organ samples obtained at a commercial retail market in the western area of the city of São Paulo: a critical analysis of traditional culture media growth technique and polymerase chain reaction PCR

Maldonado, Alessandra Grangel 02 July 2008 (has links)
O presente estudo teve por objetivos estudar a ocorrência de Salmonella spp em amostras de carcaças e miúdos de frango obtidas em uma feira e um mercado municipal da zona oeste da cidade de São Paulo e fazer uma análise crítica entre a técnica convencional em meios de cultivo e reação em cadeia pela polimerase PCR. Foram utilizadas 63 carcaças de frangos e 63 conjuntos de miúdos, obtidos no período de novembro de 2006 a maio de 2007. Pesquisou-se salmonela nas amostras pela técnica convencional em meios de cultivo e pela PCR. Pela técnica convencional identificou-se Salmonella em (6/63) das amostras de carcaça e (5/63) das amostras de miúdos e, pela PCR obteve-se (20/63) das amostras de miúdos e (28/63) das amostras de carcaça. As estirpes sorotipificadas como Salmonella oriundas das amostras de carcaças foram identificadas, como S. Senftenberg; S. Kentucky; S. Enteritidis; S. Montevideo; S. Infantis, S. enterica subsp enterica (0: 6.7). S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis. As estirpes provenientes das amostras de miúdos foram identificadas como S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis. As (18/21) estirpes identificadas como Salmonella pelo estudo apresentaram resistência aos antimicrobianos testados. O método convencional é indispensável quando se necessita a obtenção da estirpe para estudos de outras naturezas, para se cumprir a legislação brasileira que se vale de padrões microbiológicos estabelecidos pelos métodos convencionais. A técnica da PCR é válida e útil desde que seja padronizada de acordo com as necessidades e condições de cada laboratório; é bastante útil na implementação de sistema APPCC; no monitoramento de agentes específicos dentro de produções de alimentos; para estudos epidemiológicos da ocorrência, dinâmica de distribuição do agente. / The aim of this study was to evaluate the presence of Salmonella spp in whole broiler carcasses and multiple-organ samples collected at a commercial retail point in the western area of the city of São Paulo and to conduct a critical analysis of the traditional culture media growth technique and polymerase chain reaction PCR. A total of 63 whole broiler carcasses and a 63 multiple-organ samples were collected between November 2006 and May 2007. The conventional technique revealed the presence of Salmonella in 6/63 whole carcasses and in 5/63 multiple-organ samples, PCR detected Salmonella in 28/63 whole carcasses and in 20/63 multiple-organ samples The following strains were identified in the whole carcasses S. Senftenberg; S. Kentucky; S. Enteritidis; S. Montevideo; S. Infantis, S. enterica subsp enterica (0: 6.7). S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis were identified in multiple organ samples. The (18/21) Salmonella strains identified in this study were resistant to the antimicrobial agents tested in this study. In conclusion, the traditional method is essential for the collection of strains for different study purposes; for the observance of the Brazilian legislation, which is based on microbiological standards that were established using traditional methods. Polymerase chain reacton is a valid and useful technique, as long as it is standardized according to the needs and conditions of each laboratory. Polymerase chain reacton is remarkably useful in the implementation of the APPCC system; in the monitorization of specific agents within the food production chain; and for epidemiological studies that evaluate the occurrence, dynamic and distribution of a specific agent.
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Herbicidas: seletividade para mudas de macaúba e eficácia no controle de plantas daninhas / Herbicides: selectivity for macaw palm seedlings and efficiency in weed control

Costa, Yanna Karoline Santos da 23 February 2018 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-04-23T12:31:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 308710 bytes, checksum: b0af0d03da9244b266b11357cae29b19 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-23T12:31:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 308710 bytes, checksum: b0af0d03da9244b266b11357cae29b19 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O período necessário para formação das mudas de macaúba (Acrocomia aculeata) é de aproximadamente 10 meses. Em razão da indisponibilidade de herbicidas seletivos para essa cultura na fase de mudas, o controle das plantas daninhas tem sido feito de forma manual. Neste trabalho, avaliou-se a seletividade e eficácia de herbicidas em diferentes formas de aplicação na produção de mudas de macaúba, por meio da condução de dois experimentos. No primeiro, mantido sem infestação de plantas daninhas, avaliou-se a seletividade dos herbicidas em ensaio conduzido em esquema fatorial 4 x 3 + 1, com quatro herbicidas (indaziflam, isoxaflutole, oxyfluorfen e sulfentrazone), três formas de aplicação (herbicidas incorporados ao solo, aplicados em pré-transplantio sobre a superfície do solo e em pós-transplantio sobre as mudas de macaúba), mais um tratamento adicional (sem herbicida). O segundo experimento, com o objetivo de avaliar a eficácia dos herbicidas sobre o controle das plantas daninhas, foi conduzido em esquema fatorial 4 x 3 + 2, com os mesmos herbicidas e os modos de aplicação do experimento anterior, mais dois tratamentos sem herbicidas (com capinas e sem capinas). Nos dois experimentos, nas plantas de macaúba, foram realizadas avaliações visuais de intoxicação, altura de plantas, área do limbo foliar e matéria seca da planta. No segundo, realizou-se avaliações visuais de controle das plantas daninhas aos 14, 21, 42 e 56 dias após a aplicação (DAA). A plantas daninhas foram separadas por espécie para determinação da densidade e acúmulo de matéria seca aos 56 DAA. O indaziflam foi seletivo quando aplicado em pós-transplantio, promovendo incremento no crescimento das plantas em relação à testemunha e aos demais tratamentos. Os herbicidas avaliados foram eficientes para o controle da maioria das espécies de plantas daninhas, independente do modo de aplicação. / The period necessary for the formation of macaw palm seedlings (Acrocomia aculeata) is approximately 10 months. Due to the unavailability of selective herbicides for this crop in the seedling stage, weed control has been done manually. In this work, the selectivity and efficacy of herbicides in different forms of application in the production of macaw palm seedlings were evaluated through the conduction of two experiments. In the first, maintained without weed infestation, we assessed the selectivity of the herbicides in the test conducted in a factorial 4 x 3 + 1, four herbicides (indaziflam, isoxaflutole, oxyfluorfen and sulfentrazone), three forms of application (herbicides incorporate into soil, applied in the pre-transplant at the soil surface and post-transplanting on macaw seedlings), more one an additional treatment (without herbicide). The second experiment, with the objective of evaluating the efficacy of herbicides on weed control, was conducted in a factorial 4 x 3 + 2, same herbicides and forms of application, more two an addition treatment without herbicide (with weeding and no weeding). In both experiments, macaw palm was submitted to visual evaluations of intoxication, height of plants, area of the leaf blade and dry matter of the plant. In the second, evaluations visual of weed control was performed at 14, 21, 42 and 56 days after application (DAA). The weeds were by species for density determination and dry matter accumulation at 56 DAA. The indaziflam was selective when applied in post-transplanting, promoting increase in the growth of the plants in relation to the control and other treatments. The herbicides evaluated were for the control of most weed species, independent of the forms of application.
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Produtividade, compostos bioativos e características físico-químicas de tomates obtidos em diferentes sistemas e ambientes de cultivo / Yield, bioactive compounds and physical-chemical characteristics of tomatoes cultivated in different growing systems and environments

Almeida, Victor de Souza 15 December 2016 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-09-04T18:43:22Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 557094 bytes, checksum: e68719b5f5d4cf095b234d11db47ea12 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-04T18:43:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 557094 bytes, checksum: e68719b5f5d4cf095b234d11db47ea12 (MD5) Previous issue date: 2016-12-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foi lançado recentemente um sistema de cultivo do tomateiro, denominado Sistema Viçosa, onde os autores propuseram uma série de práticas culturais com o objetivo de aumentar a produtividade e qualidade dos frutos. Este sistema foi avaliado em quatro densidades de plantio e comparado com sistemas tradicionalmente utilizados pelos agricultores, chegando-se a conclusão de que o Sistema Viçosa, na densidade de 25.000 plantas ha -1 , poderia aumentar em até 61% e 223% a produtividade e o lucro, respectivamente, sem alterar as características físico-químicas do fruto. No entanto, esse sistema foi avaliado apenas em condição de campo na densidade máxima de 25.000 plantas ha -1 e não foram estudadas características nutricionais como os compostos bioativos. Assim, o objetivo neste estudo foi comparar a produção, as características físico-químicas e os compostos bioativos do Sistema Viçosa de cultivo do tomateiro em uma maior densidade de plantio com sistemas tradicionalmente utilizados, em condições de campo e ambiente protegido. Dois experimentos foram conduzidos em blocos ao acaso e sistema fatorial duplo (2 ambientes x 4 sistemas de cultivo) com nove repetições. Para a avaliação das características físico-químicas e dos compostos bioativos foram utilizadas quatro repetições. O Sistema Viçosa constitui-se das práticas culturais: espaçamento 2 x 0,2 m (25.000 plantas ha -1 ), tutoramento com inclinação de, aproximadamente, 75° em relação ao solo, no qual as plantas são inclinadas alternadamente para um lado e para o outro formando um “V”, condução das plantas com uma haste, raleamento de frutos deixando-se quatro a seis por rácemo, oito rácemos por planta, retirada das duas inflorescências após o 8o rácemo deixando-se nove folhas acima deste e retirada das folhas baixeiras até o terceiro rácemo. No Sistema Viçosa Adensado, as práticas culturais são as mesmas do sistema Viçosa, porém as plantas são conduzidas no espaçamento 1,6 x 0,1 m (62.500 plantas ha -1 ). Esse sistema proposto foi comparado aos sistemas Viçosa, Vertical e Cerca Cruzada. Avaliou-se a produção por planta e por área em cada classe de fruto (comercial, grande e médio) bem como a cor, acidez titulável (AT), sólidos solúveis totais (SST), pH, firmeza, relação SST/AT, fenólicos totais, capacidade antioxidante e carotenoides. As médias foram submetidas à análise de variância e teste Tukey a 5% de probabilidade. As condições de ambiente protegido foram responsáveis pelo aumento da produção por área no experimento I (33%) e o sistema mais produtivo em ambos experimentos foi o Sistema Viçosa Adensado, com incremento de até 148% na produtividade. Porém, observou-se frutos menores com 99.5 g a 124.5 g. Não foi verificado efeito significativo dos sistemas de cultivo nas características físico-químicas e nos compostos bioativos dos frutos. No entanto, frutos produzidos em condições de campo possuíam maior concentração de fenólicos totais nas duas épocas avaliadas. Portanto, o sistema Viçosa Adensado pode ser indicado para cultivo em condição de campo ou ambiente protegido, desde que o tamanho do fruto não seja fator limitante para o mercado local. / A system of tomato cultivation was recently launched, named Viçosa Tomato Growing System, where the authors proposed a series of cultural practices with the objective of increasing fruit yield and fruit quality. This system was evaluated in four planting densities and compared to systems traditionally used by farmers, and it was concluded that the Viçosa System, at a density of 25,000 plants ha -1 , could increase yield and pofitability up to 61% and 223%, without changing the physical- chemical characteristics of the fruit. However, this system was evaluated only under field condition at a maximum density of 25,000 plants ha -1 and no nutritional characteristics such as bioactive compounds were studied. Thus, the objective of this study was to compare the yield, physico-chemical characteristics and bioactive compounds of the Viçosa System of tomato cultivation in a higher plant density with systems traditionally used under field and greenhouse conditions. Two experiments were conducted in randomized blocks in a double factorial system (2 environments x 4 growing systems) with nine replications. Four replicates were used for the evaluation of physicochemical characteristics and bioactive compounds. The Viçosa System is constituted by the following cultural practices: spacing 2.0 x 0.2 m (25,000 plants ha -1 ), tiling with a slope of approximately 75° to the ground, in which the plants are inclined alternately to a side to side forming a "V", plants pruned to one a stem, thinning of fruits leaving four to six per truss, eight trusses per plant, removal of the two inflorescences after the 8 th truss leaving nine leaves above it and lower leaves removal until the third truss. In the Viçosa Adensado System, the cultural practices are the same as those of the Viçosa System, but the plants are conducted in spacing of 1.6 x 0.1 m (62,500 plants ha -1 ). This proposed system was compared to Viçosa, Vertical and Cerca Cruzada systems. It was evaluated the plant productivity, marketable yield, fruit yield in each class (large and medium), collor, titrable acicidty, Total soluble solids, pH, firmness, ratio SST / AT, total phenolics, antioxidant capacity and carotenoids. The means were submitted to analysis of variance and Tukey test at 5% of probability. The greenhouse condition were responsible for the increase in yield in experiment I (33%) and the most productive system in both experiments was the Viçosa Adensado System, with an increase of up to 148% in yield. However, smaller fruits were observed with 99,5 to 124,5 g. No significant effect of the growing systems was observed on the physical-chemical characteristics and the bioactive compounds of the fruits. However, fruits produced under field conditions had a higher concentration of total phenolics in the two evaluated periods. Therefore, the Viçosa Adensado System system can be indicated for cultivation under field or greenhouse conditions, provided that the size of the fruit is not a limiting factor for the local market.
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Identification phenotypic, genotypic virulence factors and characterization in isolated environmental Aeromonas spp / IdentificaÃÃo fenotÃpica, genotÃpica e caracterizaÃÃo de fatores de virulÃncia em isolados ambientais de Aeromonas spp

Camila MagalhÃes Silva 28 November 2014 (has links)
This study aimed to identify through polyphasic approach (phenotypic and genotypic methods) strains of Aeromonas spp. isolated from surface water and sediment from three different points of the Coco River, Cearà following the salinity gradient of the water. Sampling was conducted between October 2011 and March 2012 each collection consisted of six samples. Aeromonas strains were isolated according to the technique described in the literature Gelatin Phosphate Salt Agar (agar plus GSP 20 μg/mL ampicillin). The physico-chemical parameters (salinity, pH and temperature) of water were on a track that favored not only survival, but also the multiplication of micro-organisms in both sites. Among this sample was isolated 140 strains suspected of Aeromonas and (36.4%) 51 strains were confirmed like Aeromonas spp., wich will be identifiyed until species for fenotipic and genotipic tests. In parallel to the insulation work was done a survey of alternative culture media, where we assessed the efficiency of culture media with different compositions in the characterization of colonies of multiple species of Aeromonas. While the antimicrobial susceptibility profile of Aeromonas strains were resistant 100% penicillin (PEN) and cephalothin (CFL) and 100% antimicrobial susceptibility Amikacin (AMI) and imipenem (IMP) among the nine antimicrobials tested and generally A. caviae was the species that showed resistance to antimicrobials. Among the 27 strains tested (45.8%) were multidrug-resistant by making a multiple resistence antibiotic (MRA) > 2. Five factors of different virulence and all strains were tested had at least one of the five virulence factors tested so that different combinations of virulence factors were found in isolates from the same sample. The results of genetic analysis using primers Aero16S-F and Aero16S-F showed that all isolates identified by conventional microbiological tests were confirmed by PCR and 65.6% of the species identified by conventional biochemical tests were confirmed by Box-PCR method. / Este trabalho teve como objetivo principal identificar atravÃs de abordagem polifÃsica (tÃcnicas fenotÃpicas e genotÃpicas) de cepas de Aeromonas spp. isoladas de Ãgua de superfÃcie e sedimento de trÃs pontos distintos do Rio CocÃ, Fortaleza, Cearà seguindo o gradiente de salinidade da Ãgua. Foram realizadas coletas no perÃodo de outubro de 2011 a marÃo de 2012, sendo cada coleta composta por seis amostras. As cepas de Aeromonas foram isoladas de acordo com a tÃcnica descrita na literatura em Ãgar Gelatina Fosfato Sal (Ãgar GSP acrescido de 20 μg/mL de ampicilina). Os parÃmetros fÃsico-quÃmicos (salinidade, pH e temperatura) da Ãgua estavam em uma faixa que favorecia nÃo sà a sobrevivÃncia, mas tambÃm a multiplicaÃÃo dos micro-organismos em dois pontos de coleta. Foram isoladas 140 cepas suspeitas de Aeromonas, 36 (25,7%) foram identificadas atà espÃcie sendo elas: A. caviae, A. media, A. eucrenophila e A. veronii, sendo A. caviae a espÃcie que apareceu com maior frequÃncia. Em paralelo ao trabalho de isolamento foi feita uma pesquisa com dois meios de cultivo alternativos, Ãgar UNISC e Ãgar Amido Ampicilina (AAA), nos quais foi avaliada a eficiÃncia dos meios de cultura com diferentes composiÃÃes, na caracterizaÃÃo de colÃnias de vÃrias espÃcies de Aeromonas. O perfil de suscetibilidade antimicrobiana das cepas de Aeromonas apresentou resistÃncia de 100% a Penicilina (PEN) e Cefalotina (CFL) e 100% de sensibilidade aos antimicrobianos Amicacina (AMI) e Imipenem (IMP) entre os nove antimicrobianos testados e de forma geral A. caviae (38,9%) foi a espÃcie que mais apresentou resistÃncia. Dentre as cepas avaliadas 27 (45,8%) foram multirresistentes por apresentarem um MAR > 2. Foram testados cinco fatores de virulÃncia diferentes e todas as cepas apresentaram pelo menos um desses fatores, de forma que diferentes combinaÃÃes desses fatores foram observadas em isolados provenientes da mesma amostra. Os resultados da anÃlise genÃtica utilizando os iniciadores Aero16S-F e Aero16S-R mostraram que todos os isolados identificados atravÃs de testes clÃssicos de microbiologia foram confirmados por meio da tÃcnica de PCR e 65,6% das espÃcies identificadas por testes bioquÃmicos convencionais foram confirmadas pelo mÃtodo de Box-PCR.
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GERMINAÇÃO, DESENVOLVIMENTO E ACLIMATIZAÇÃO DE Miltonia flavescens Lindl. (Orchidaceae). / GERMINATION, AND DEVELOPMENT OF ACCLIMATIZATION Miltonia flavescens Lindl. (Orchidaceae).

Lemes, Camila Soares Rosa 02 February 2015 (has links)
Submitted by Cibele Nogueira (cibelenogueira@ufgd.edu.br) on 2016-06-02T17:56:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) CAMILALEMES.pdf: 923174 bytes, checksum: 5ba7bab406fd4bbb2402df5b8f62e01c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T17:56:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) CAMILALEMES.pdf: 923174 bytes, checksum: 5ba7bab406fd4bbb2402df5b8f62e01c (MD5) Previous issue date: 2015-02-02 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Among the Flowering Plants, orchids stand out for its diversity and size of your family. Human action, through the degradation of natural environments, has led many orchid species to extinction. For this reason, in vitro culture has been used as a tool for propagation, since it allows the germination and development of such plants in relatively less time to that observed in nature. Thus, the development of multiplication and development of plants grown in vitro protocols has become an important tool. This work was developed with the goal of developing an in vitro propagation protocol and acclimatization of Miltonia flavescens Lindl. Four experiments were performed in the in vitro culture laboratory and Jardinocultura area of the Faculty of Agricultural Sciences (FCA) of the Federal University of Grande Dourados (UFGD), in which were evaluated the germination and early development of protocorms in different media crops; the initial growth of plants grown in different media cultures supplemented with sucrose concentrations; the root growth in medium supplemented with different concentrations of auxin and cytokinin and acclimatization of plants under different light spectra. Germination at 30 days after sowing, and the initial development of protocorms, 180 days after sowing, were higher in cultivated seeds in MS and MS ½ medium. The initial growth of plants, 180 days after planting, was higher in plants grown on MS ½ medium supplemented with 25 g L-1 sucrose. The root growth was greater in plants grown for 180 days, MS ½ medium with hormonal favor of auxin. At 30 days after pre acclimatization under white fluorescent light (20.0 μmol m-2 s-1), there was 100% survival of plants, and after 180 days these plants exhibited the majority of the growth air ratio. Based on the results, establishes the M. flavescens cultivation protocol for propagation of the specie, both in reintroduction programs and for marketing. / Dentre as Angiospermas, as orquídeas destacam-se pela sua heterogeneidade e tamanho de sua família. A ação humana, através da degradação de ambientes naturais, tem levado muitas espécies de orquídeas à extinção. Por este motivo, o cultivo in vitro tem sido utilizado como ferramenta na propagação, uma vez que possibilita a germinação e o desenvolvimento destas plantas em tempo relativamente menor ao observado na natureza. Desta forma, a elaboração de protocolos de multiplicação e desenvolvimento de plantas cultivadas in vitro tem se tornado ferramenta importante. Assim, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de elaborar um protocolo de propagação in vitro e aclimatização de Miltonia flavescens Lindl. Foram realizados quatro experimentos no Laboratório de cultivo in vitro e na área de Jardinocultura da Faculdade de Ciências Agrárias (FCA) da Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD), nos quais avaliou-se a germinação e o crescimento inicial de protocormos em diferentes meios de cultivos; o crescimento inicial de plantas cultivadas em diferentes meios de cultivos suplementados com concentrações de sacarose; o crescimento do sistema radicular em meio suplementado com diferentes concentrações de auxina e citocininas e aclimatização de plantas sob diferentes espectros luminosos. A germinação, aos 30 dias após a semeadura, e o crescimento inicial de protocormos, aos 180 dias após a semeadura, foram maiores em sementes cultivadas nos meios MS e MS ½. O crescimento inicial das plantas, 180 dias após o plantio, foi maior em plantas cultivadas em meio MS ½ suplementado com 25 g L-1 de sacarose. O crescimento do sistema radicular foi maior nas plantas cultivadas por 180 dias, em meio MS ½ com balanço hormonal favorável à auxina. Aos 30 dias após a pré aclimatização, sob luz fluorescente branca (20,0 μmol m-2 s-1), observou-se 100% de sobrevivência das plantas, e após 180 dias, estas plantas apresentaram a maior relação de crescimento da parte aérea. Com base nos resultados obtidos, estabelece-se o protocolo de cultivo de M. flavescens para fins de propagação da espécie, tanto em programas de reintrodução quanto para sua comercialização.
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Ocorrência de Salmonella spp em amostras de carcaças e miúdos de frango obtidas em uma feira e um mercado municipal na zona oeste da cidade de São Paulo: análise crítica entre a técnica convencional em meios de cultivo e reação em cadeia pela polimerase - PCR / Occurence of Salmonella spp in whole broiler carcasses and organ samples obtained at a commercial retail market in the western area of the city of São Paulo: a critical analysis of traditional culture media growth technique and polymerase chain reaction PCR

Alessandra Grangel Maldonado 02 July 2008 (has links)
O presente estudo teve por objetivos estudar a ocorrência de Salmonella spp em amostras de carcaças e miúdos de frango obtidas em uma feira e um mercado municipal da zona oeste da cidade de São Paulo e fazer uma análise crítica entre a técnica convencional em meios de cultivo e reação em cadeia pela polimerase PCR. Foram utilizadas 63 carcaças de frangos e 63 conjuntos de miúdos, obtidos no período de novembro de 2006 a maio de 2007. Pesquisou-se salmonela nas amostras pela técnica convencional em meios de cultivo e pela PCR. Pela técnica convencional identificou-se Salmonella em (6/63) das amostras de carcaça e (5/63) das amostras de miúdos e, pela PCR obteve-se (20/63) das amostras de miúdos e (28/63) das amostras de carcaça. As estirpes sorotipificadas como Salmonella oriundas das amostras de carcaças foram identificadas, como S. Senftenberg; S. Kentucky; S. Enteritidis; S. Montevideo; S. Infantis, S. enterica subsp enterica (0: 6.7). S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis. As estirpes provenientes das amostras de miúdos foram identificadas como S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis. As (18/21) estirpes identificadas como Salmonella pelo estudo apresentaram resistência aos antimicrobianos testados. O método convencional é indispensável quando se necessita a obtenção da estirpe para estudos de outras naturezas, para se cumprir a legislação brasileira que se vale de padrões microbiológicos estabelecidos pelos métodos convencionais. A técnica da PCR é válida e útil desde que seja padronizada de acordo com as necessidades e condições de cada laboratório; é bastante útil na implementação de sistema APPCC; no monitoramento de agentes específicos dentro de produções de alimentos; para estudos epidemiológicos da ocorrência, dinâmica de distribuição do agente. / The aim of this study was to evaluate the presence of Salmonella spp in whole broiler carcasses and multiple-organ samples collected at a commercial retail point in the western area of the city of São Paulo and to conduct a critical analysis of the traditional culture media growth technique and polymerase chain reaction PCR. A total of 63 whole broiler carcasses and a 63 multiple-organ samples were collected between November 2006 and May 2007. The conventional technique revealed the presence of Salmonella in 6/63 whole carcasses and in 5/63 multiple-organ samples, PCR detected Salmonella in 28/63 whole carcasses and in 20/63 multiple-organ samples The following strains were identified in the whole carcasses S. Senftenberg; S. Kentucky; S. Enteritidis; S. Montevideo; S. Infantis, S. enterica subsp enterica (0: 6.7). S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis were identified in multiple organ samples. The (18/21) Salmonella strains identified in this study were resistant to the antimicrobial agents tested in this study. In conclusion, the traditional method is essential for the collection of strains for different study purposes; for the observance of the Brazilian legislation, which is based on microbiological standards that were established using traditional methods. Polymerase chain reacton is a valid and useful technique, as long as it is standardized according to the needs and conditions of each laboratory. Polymerase chain reacton is remarkably useful in the implementation of the APPCC system; in the monitorization of specific agents within the food production chain; and for epidemiological studies that evaluate the occurrence, dynamic and distribution of a specific agent.
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Seleção de microalgas dulcícolas e elaboração de meios de cultivo visando a produção de biodiesel e luteína / Selection of freshwater microalgae and elaboration of culture media for the production of biodiesel and lutein

D’Alessandro, Emmanuel Bezerra 31 March 2017 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-04-19T15:54:36Z No. of bitstreams: 2 Tese - Emmanuel Bezerra D’Alessandro - 2017.pdf: 5468492 bytes, checksum: 142fd12ec077386e23484e261e25c7ea (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-04-19T15:55:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Emmanuel Bezerra D’Alessandro - 2017.pdf: 5468492 bytes, checksum: 142fd12ec077386e23484e261e25c7ea (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-19T15:55:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Emmanuel Bezerra D’Alessandro - 2017.pdf: 5468492 bytes, checksum: 142fd12ec077386e23484e261e25c7ea (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Global energy needs are steadily increasing, driven by the rise in both industrialization and population. The major sources of energy are non-renewable and highly polluting. Therefore, the demand for renewable fuels is increasing. One source of renewable fuels is biomass, such as that of microalgae. Microalgae biomasses are a source of lipids and antioxidant pigments and have great potential for biodiesel production and lutein, which have high commercial value. Therefore, in this study I tested the feasibility of producing biodiesel and lutein from microalgae of extremophile environmental of Central Brazil. The freshwater microalgae T. minimum, P.morum, D. communis, N. digitus, E. planctonicus and A. obliquus were collected, isolated, and cultivated in the laboratory, comparing their lipid productivity with that of soybean and lutein productivity with that of Marigold, which is the main raw material for this pigment . The percentage of Fatty Acid Methyl Esters (FAME) of microalgae varied from 9.6 to 21.3%, being A. obliquus the species with the highest content of fatty acids, E. planctonicus with the highest content of lutein and D. communis the one with the highest productivity of biomass, biodiesel and lutein. The D. communis fatty acid profile was also suitable for biodiesel production, since it produced up to 21 times more biodiesel than soybean, but consuming up to 4.8% of the area and 42 times less water. Microalgae cultivation for biodiesel production can be done with less complex and low-cost culture media, including waste water from biodiesel plants. Thus, although the BBM medium had higher biodiesel productivity, the less nutritive media (DAF + OGR and DAF) also yielded adequate biodiesel amounts, being 72% cheaper than BBM. Thus, the biodiesel yield of A. obliquus grown in DAF + OGR was 46 times higher than that of soybeans, using 7.2% of water and 2.2% of the area. These results demonstrate the potential of microalgae in the biodiesel production chain / A demanda por energia aumenta continuamente em nível mundial, impulsionadas tanto pelo aumento da industrialização como também pelo aumento populacional, sendo grande parte dessas necessidades ainda supridas fontes não renovável e altamente poluente e, portanto, limitados às reservas existentes. Assim, a procura por combustíveis derivados de fontes renováveis vêm aumentando a cada dia, sendo intensa a busca por biomassa tais como as microalgas, as quais, por serem fontes de lipídios e pigmentos antioxidantes, vêm sendo estudadas com respeito a seu potencial para produção de biodiesel e luteína, que possui alto valor comercial. Dessa forma, este estudo buscou avaliar a viabilidade da utilização de microalgas de ambientes extremófilos do Brasil Central na produção de biodiesel e luteína. As microalgas dulcícolas T. minimum, P.morum, D. communis, N. digitus, E. planctonicus e A. obliquus foram coletadas em ambientes extremófilos, isoladas e cultivadas em laboratório, tendo sua produtividade lipídica comparada com a da semente de soja e a produtividade de luteína comparada com as flores de Marigold, que é a principal matéria-prima para tal pigmento. As microalgas extremófilas apresentaram potencial para biodiesel, gerando porcentagem de ésteres metílicos de ácidos graxos variando de 9,6 a 21,3%, sendo A. obliquus com maior teor de ácidos graxos, E. planctonicus com maior teor de luteína e D. communis com maior destaque na produtividade de biomassa, biodiesel e luteína. D. communis também apresentou perfil de ácidos graxos adequados para biodiesel, além de produzir até 21 vezes mais biodiesel que a semente de soja. Através das estimativas comparativas concluiu-se que D. communis consumiria até 4,8% da área e 42 vezes menos água do que a usada pelo cultivo de soja para produzir a mesma quantidade de biodiesel. Verificou-se que o cultivo de microalgas para a produção de biodiesel pode ser feito com o uso de meios de menor complexidade e custo, usando inclusive águas residuais que podem ser encontradas em usinas de biodiesel. Assim, apesar do meio de cultivo convencional BBM apresentar maior produtividade em biodiesel, os meios com menos nutrientes (DAF+OGR e DAF), também proporcionaram adequados rendimentos em biodiesel, sendo 72% mais econômicos que o meio BBM. Assim, verificou-se que para A. obliquus cultivada no meio de menor custo, DAF+OGR, a produtividade em biodiesel foi 46 vezes superior ao da soja, com uso de 7,2% de água e 2,2% da área usada no cultivo de soja para produção de mesma quantidade de biodiesel, mostrando o potencial das microalgas para a cadeia de produção e uso de biodiesel.
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Avaliação inflamatória do uso de células tronco mesenquimais em modelo animal de doador de pulmão com choque hipovolêmico / Inflammatory evaluation of the use of mesenchymal stem cells in animal model of a lung donor with hypovolemic shock

Dias, Vinicius Luderer 31 May 2019 (has links)
espera por transplante pulmonar. A baixa taxa de aproveitamento do pulmão nas captações de órgãos figura como questão de destaque. Como causas, listamos a rigidez nos critérios de seleção, vulnerabilidade do órgão, cuidados inadequados com os pacientes em morte encefálica, edema pulmonar neurogênico pela morte encefálica e trauma com choque hemorrágico, que leva à hipoperfusão dos pulmões, acidose metabólica e inflamação tecidual. Morte encefálica e choque representam importantes causas de deterioração pulmonar, levando à recusa do órgão na captação ou à disfunção primária do enxerto pós-transplante. Na tentativa de melhorar a condição do enxerto pulmonar para se obter maior número de pulmões viáveis para o transplante, e para reduzir os índices de rejeição, algumas estratégias foram adotadas pelas equipes transplantadoras. O uso de células tronco mesenquimais (Mesenchymal Stem Cells - MSCs) para tratamento de afecções inflamatórias é objeto de estudo de alguns grupos, dadas as propriedades anti-inflamatórias e imunomodulatórias já conhecidas. Nossa hipótese baseia-se na realização de tratamento com MSCs ou seus fatores solúveis (FS-MSCs) em doadores com choque hemorrágico. O objetivo deste trabalho é avaliar inflamação pulmonar em ratos, após o tratamento do choque hemorrágico com reposição sanguínea, associada à infusão in vivo de MSCs ou FS-MSCs. Quarenta e oito ratos foram divididos em 4 grupos: Sham (Sham n=12); Choque (Choque n=12); FS (Choque + FS-MSCs n=12) e MSC (Choque + MSCs n=12). Após anestesia, os animais foram submetidos à cateterização da artéria e veia femoral para registro de pressão arterial média (PAM), indução de choque hemorrágico e infusão de MSCs ou FS-MSC nos grupos de tratamento. No grupo Sham foi realizada apenas a monitorização dos parâmetros hemodinâmicos. Nos grupos Choque, FS e MSC foi realizado o choque hemorrágico (40 mmHg), e tratamento com FS-MSCs (1ml de secretoma em dose única) no grupo FS ou MSCs humanas (1x107células em dose única) no grupo MSC. Após 190 minutos, o experimento foi finalizado e o bloco pulmonar extraído. Foram analisadas: a histopatologia do tecido pulmonar e a concentração de marcadores inflamatórios (Tnf-alfa, IL1-beta, IL-6, IL-10, iCAM e vCAM) no lavado broncoalveolar e no tecido pulmonar. Na análise histológica a densidade de neutrófilos apresentou diferença estatística significante com o grupo FS apresentando a menor densidade quando comparado aos grupos Choque e MSC (p < 0,001). A dosagem de IL-10 no grupo FS foi superior aos demais grupos (p=0,044). Concluímos que os pulmões de ratos submetidos ao choque hemorrágico tratados com FS-MSCs apresentam redução de inflamação pela redução do infiltrado neutrofílico / Many factors are responsible for the large number of patients on waiting list for a lung transplant. The low rate of lung utilization in organ uptakes appears as a critical issue. As causes, we highlight the rigorous selection criteria, organ vulnerability, inadequate care for patients in brain death, neurogenic pulmonary edema due to brain death and trauma with hemorrhagic shock, that leads to hypoperfusion of the lungs, metabolic acidosis and tissue inflammation. Brain death and shock represents important causes of pulmonary deterioration, leading to organ rejection at the uptake or primary graft dysfunction in post-transplantation. To improve the pulmonary graft condition in order to obtain a larger number of viable lungs for transplantation and to reduce rejection rates, some strategies were adopted by transplantation teams. The use of mesenchymal stem cells (MSCs) for treatment of inflammatory conditions is the object of study of many groups, due to the anti-inflammatory and immunomodulatory properties of these cells previously described. Our hypothesis is based on treatment with MSCs or their soluble factors (FS-MSCs) in donors with hemorrhagic shock. The aim of this work is to evaluate pulmonary inflammation in rats, after hemorrhagic shock treatment with blood replacement, associated with in vivo infusion of MSCs or FS-MSCs. Forty-eight rats were divided into 4 groups: Sham (Sham n = 12); Shock (Shock n = 12); FS (Shock + FS-MSCs n = 12) and MSC (Shock + MSCs n = 12). After anesthesia, animals were submitted to femoral artery and vein catheterization for monitoring of mean arterial pressure (MAP), induction of hemorrhagic shock and MSCs or FS-MSC infusion in treatment groups. At Sham group, only hemodynamic parameters were monitored. Hemorrhagic shock (40 mmHg) was performed in Shock, FS and MSC groups, and treatment with FS-MSCs (1ml secretome in single dose) were performed in the FS group or human MSCs (1x107 cells in single dose) in the MSC group. After 190 minutes, the experiment was terminated and the lung block was removed. The histopathology of lung tissue and the concentration of inflammatory markers (Tnf-alpha, IL-1Beta, IL-6, IL-10, ICAM and vCAM) in the bronchoalveolar lavage fluid and tissue were analyzed. In histological analysis, the neutrophil density showed a statistically significant difference with FS group presenting the lowest density when compared to Shock and MSC groups (p < 0.001). IL-10 dosage in FS group was higher than all other groups (p = 0.044). We conclude that the lungs of rats submitted to hemorrhagic shock treated with FS-MSCs present reduction of inflammation by the reduction of neutrophilic infiltrate

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