Los antioxidantes son sustancias de mucho interés, considerados como protectores de los sistemas biológicos contra la oxidación, que ocasionan procesos degenerativos por la presencia de radicales libres. La evaluación de la actividad antioxidante de la especie vegetal se realizó aplicando dos métodos: el método químico, mediante la neutralización del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidracil (DPPH) y el método electroquímico, empleando la voltametría cíclica. De la separación, guiada por la actividad antioxidante, de la fracción AE de la Bauhinia guianensis var. kuntiana Aubl., se aisló el compuesto con mayor actividad, la 5,7,3´,4´-tetrahidroxiflavanona (eriodictiol) con p.f= 216 °C, quien ha sido identificado mediante sus espectros IR, UV, EM, RMN 1H, RMN 13C, 1H-1H COSY y 1H-13C HETCOR. El flavonoide eriodictiol aislado presentó la mayor actividad antioxidante, de 90,42 % a la concentración de 10 g/mL y un potencial de oxidación a pa1 0,206 V. El valor determinado para su EC50 fue de 1,81 g/mL, lo que indica que a muy baja concentración presenta buena actividad antioxidante y es comparable con los estándares rutina y quercetina. Se encontró la relación entre estructura – actividad – potencial redox del principio activo responsable de la actividad antioxidante en la especie. El grupo catecol (dos -OH adyacentes) en el compuesto, es el responsable de la mayor actividad antioxidante a un menor potencial de oxidación. / Tesis

Thesis (Ph. D.)--Oregon State University, 2007. / Printout. Includes bibliographical references (leaves 119-130). Also available on the World Wide Web.

GOIS, Roberto Wagner da Silva. Estudo químico e avaliação biológica de Bauhinia acuruana Moric. 2015. 218 f. Tese (Doutorado em química)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-10-11T17:25:31Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_rwsgois.pdf: 7198772 bytes, checksum: 661dca62d02387220a2ff6ec267d54f4 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-10-11T23:52:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_rwsgois.pdf: 7198772 bytes, checksum: 661dca62d02387220a2ff6ec267d54f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T23:52:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_rwsgois.pdf: 7198772 bytes, checksum: 661dca62d02387220a2ff6ec267d54f4 (MD5) Previous issue date: 2015 / The present work reports the chemical research of the roots, stem and leaves from Bauhinia acuruana. In this study were obtained the extracts in hexane, ethyl acetate and methanol of the leaves and ethanol extracts of the roots and stems. The chromatographic fractionation of extracts allowed the isolation of sesquiterpenes 1β, 6α- dihydroxy 4-(14)-eudesmene (BA-1) and aromadendrane-4β,10α-diol (BA-2); the steroid glycosylated sitosterol (BA-4); the bibenzys 2-hydroxy-2’,3’,5’- trimethoxybybenzyl (BA-5) and 2-hydroxy-3’,5'-dimethoxybybenzyl (BA-6); the oxepin derivatives pacharin (BA-7) and bauhiniastatin 1 (BA-8); the flavonoids quercitrin (BA-3), (-)-fisetinidol (BA-9), (2R, 3S)-2-(3’,4’-dihydroxiphenyl)-5-methoxycroman-3,7-diol (BA-10), (2R,3S)-2-(3’,4’-dihydroxiphenyl)-5-methoxy-6-methylcroman-3,7-diol (BA-11) and astilbin (BA-13), as well as the steroidal mixture sitosterol and stigmasterol (BA-12). It is worth noting that the secondary metabolites BA-1 and BA-2 are unprecedented in the genus, while BA-5 and BA-11 unprecedented in the literature and BA-10 unpublished as natural product. The structures of the compounds were elucidated through spectroscopic techniques (IV, NMR 1D and 2D), mass spectrometry and comparison with data reported in literature. Ethanol extracts of the roots and of the stems were evalueted for antioxidant activity, showing significant activity at concentrations of 0.1 mg/mL and 1.0 mg/mL, respectively. BA-7 was evaluated for its larvicidal activity against Aedes aegypti and presented LC50 value of 78.9 ± 1.8 µg/mL. In addition, BA-5, BA-7, BA-8, BA-9, BA-10 and BA-11 were submitted to evaluation of cytotoxic activity and BA-5, BA-7 and BA-8 presented significant cytotoxic activity. / O presente trabalho relata a investigação química das raízes, do caule e das folhas de Bauhinia acuruana. Nesse estudo foram obtidos os extratos em hexano, em acetato de etila e em metanol das folhas e os extratos em etanol das raízes e do caule. O fracionamento cromatográfico destes extratos permitiu o isolamento dos sesquiterpenos 1β, 6α-diidróxi-4(14)-eudesmeno (BA-1), aromadendrano-4β,10α-diol (BA-2); do esteroide sitosterol glicosilado (BA-4); dos bibenzis 2-hidroxi-2’,3’,5’-trimetoxibibenzila (BA-5) e 2-hidroxi-3’,5’-dimetoxibibenzila (BA-6); dos derivados oxepínicos pacharina (BA-7) e bauhiniastatina 1 (BA-8); dos flavonoides quercitrina (BA-3), (-)-fisetinidol (BA-9), (2R, 3S)-2-(3’,4’-diidroxifenil)-5-metoxicromano-3,7-diol (BA-10), (2R, 3S)-2-(3’,4’-diidroxifenil)-5-metoxi-6-metilcromano-3,7-diol (BA-11) e astilbina (BA-13); bem como da mistura dos esteroides sitosterol e estigmasterol (BA-12). Cabe ressaltar que os metabólitos secundários BA-1 e BA-2 são inéditos no gênero, enquanto BA-5 e BA-11 são inéditos na literatura e BA-10 é inédito como produto natural. As estruturas dos compostos foram elucidadas através de técnicas espectroscópicas (IV, RMN 1D e 2D), espectrometria de massas e comparação com dados descritos na literatura. Os extratos em etanol das raízes e dos caules foram submetidos a testes de atividade antioxidante, apresentando atividades significativas nas concentrações de 0,1 mg/mL e 1,0 mg/mL. BA-7 foi avaliado quanto à sua atividade larvicida sobre Aedes aegypti e apresentou valor de CL50 igual a 78,9±1,8 µg/mL. Por outro lado, BA-5, BA-7, BA-8, BA-9, BA-10 e BA-11 foram submetidos à avaliação de atividade citotóxica frente a seis linhagens tumorais (HCT 116, SF 295, OVCAR, MCF-7, NCIH292 e HL60). BA-5, BA-7 e BA-8 apresentaram atividade citotóxica significativa.

SOUSA, Leôncio Mesquita de. Estudo químico e avaliação biológica de Phanera glabra (Jacq.) Vaz & Bauhinia ungulata L. (FABACEAE). 2016. 263 f. Tese (Doutorado em Química)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2016-12-21T20:43:17Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: 3899ad5625838e46813ab9727472fabc (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-12-27T16:16:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: 3899ad5625838e46813ab9727472fabc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-27T16:16:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: 3899ad5625838e46813ab9727472fabc (MD5) Previous issue date: 2016 / This paper describes the chemical and biological study of species Phanera glabra (Jacq.) Vaz and Bauhinia ungulata L. The chemical composition of essential oil from leaves of B. ungulata, obtained by hydrodistillation, was analysed by gas chromatography-mass spectroscopy (GC-MS) and gas chromatography-flame ionization detector. Twenty-two constituents were identified representing 85.90% of the total composition: Caryophyllene oxide (22.99%), (E)-caryophyllene (14.53%) and α-copaene (7.17%) were the major constituents. Larval bioassay against Aedes aegypti of B. ungulata essential oil showed LC50 value of 75.12 ± 2.82 µg/mL. The cytotoxic effect against four human tumor cell lines HL-60, MCF-7, NCI-H292 and HEP-2 was evaluated, showing IC50 values of 10.57; 22.25; 23.11 and 26.56 µg/ mL, respectively. The study of the non-volatile constituents was initiated with the preparation of the hexane and ethanol extracts from stems of P. glabra. The chromatographic fractionation of these extracts allowed the isolation of lupenone (PG–1), the mixture of sitosterol and stigmasterol (PG–2), 4'-hydroxy-7- methoxyflavone (PG–3), 3',7-dimethoxy-4'-hydroxyflavone (PG–4) and 5,5'- dihydroxy-2',3,7-trimethoxyflavone (PG–5). Taraxerol (BU–1), betulinic acid (BU–2), taraxerone (BU–3), glutinol (BU–4), the mixture of sitosterol and stigmasterol (BU–5), pacharin (BU–6), naringenin (BU–7) and eriodictyol (BU–8), liquiritigenin (BU–9), guibourtinidol (BU–10) and fisetinidol (BU–11) were obtained from the extracts from stems of B. ungulata; while 3,5-dimethoxy-4-methyl-2’-hydroxybibenzyl (BU–12) and 3,5-dimethoxy-2’-hydroxybibenzyl (BU–13) were isolated from the ethanol extract of the roots. The structures of the compounds were elucidated by spectroscopic methods as IR, MS, 1D and 2D NMR, and by comparison with previously reported data in the literature. It's worth noting that BU–12 is unprecedented in the literature and the 13C NMR data of BU–13 are reported for the first time in this work. The cytotoxicity of BU–12 has been evaluated against four human cancer cell lines, showing IC50 values of 4.3 and 6.5 µg/mL against pro-myelocytic leukemia (HL-60) and cervical adenocarcinoma (HEP-2) cell lines, respectively. / O presente trabalho relata o estudo químico e biológico das espécies Phanera glabra (Jacq.) Vaz e Bauhinia ungulata L. A composição química do óleo essencial das folhas de B. ungulata, obtido por hidrodestilação, foi determinada e quantificada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) e detector de ionização por chama (CG-DIC), sendo, portanto, identificado 85,90% dos seus constituintes: Óxido de cariofileno (22,99%), (E)-cariofileno (14,53%) e α-copaeno (7,17%) foram os constituintes majoritários. O óleo essencial teve sua atividade larvicida avaliada sobre Aedes aegypti, sendo obtido um valor de CL50 igual a 75,12 µg/mL. A atividade citotóxica do OEBU foi realizada sobre quatro linhagens tumorais humanas HL-60, MCF-7, NCI-H292 e HEP-2, através do método do MTT. O estudo dos componentes não voláteis foi iniciado com a preparação dos extratos hexânico e etanólico dos caules de P. glabra. O fracionamento cromatográfico destes extratos permitiu o isolamento de lupenona (PG–1), mistura de sitosterol e estigmasterol (PG–2), 4’-hidroxi-7-metoxiflavana (PG–3), 3’,7-dimetoxi-4’-hidroxiflavana (PG–4) e 5,5'-dihidroxi-2',3,7-trimetoxiflavona (PG–5). Taraxerol (BU–1), ácido betulínico (BU– 2), taraxerona (BU–3), glutinol (BU–4), mistura de sitosterol e estigmasterol (BU–5), pacharina (BU–6), naringenina (BU–7), eriodictiol (BU–8), liquiritigenina (BU–9), guibourtinidol (BU–10) e fisetinidol (BU–11) foram isolados a partir dos extratos dos caules de B. ungulata; enquanto do extrato etanólico das raízes de B. ungulata foram isolados 3,5-dimetoxi-4-metil-2’-hidroxibibenzil (BU–12), substância inédita na literatura, e 3,5-dimetoxi-2’-hidroxibibenzil (BU–13) cujos dados de RMN 13C são descritos pela primeira vez neste trabalho. As estruturas dos compostos foram elucidadas através de técnicas espectroscópicas tais como IV, EM, RMN 1D e 2D, e por comparação com dados descritos na literatura. O bibenzil 3,5-dimetoxi-4-metil-2’- hidroxibibenzil mostrou atividade citotóxica significativa contra as linhagens celulares humanas HL-60 e HEP-2 com valores de IC50 de 4,3 e 6,5 µg/mL, respectivamente.

SOUSA, Leôncio Mesquita de. Estudo Químico e Avaliação Biológica de Phanera glabra (Jacq.) Vaz & Bauhinia ungulata L. (FABACEAE). 2016. 263 f. Tese (Doutorado em Química)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2017-01-24T21:20:20Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: e022dc323cde53950dcc209fb460ecf4 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-26T20:20:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: e022dc323cde53950dcc209fb460ecf4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T20:20:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: e022dc323cde53950dcc209fb460ecf4 (MD5) Previous issue date: 2016 / This paper describes the chemical and biological study of species Phanera glabra (Jacq.) Vaz and Bauhinia ungulata L. The chemical composition of essential oil from leaves of B. ungulata, obtained by hydrodistillation, was analysed by gas chromatography-mass spectroscopy (GC-MS) and gas chromatography-flame ionization detector. Twenty-two constituents were identified representing 85.90% of the total composition: Caryophyllene oxide (22.99%), (E)-caryophyllene (14.53%) and α-copaene (7.17%) were the major constituents. Larval bioassay against Aedes aegypti of B. ungulata essential oil showed LC50 value of 75.12 ± 2.82 g/mL. The cytotoxic effect against four human tumor cell lines HL-60, MCF-7, NCI-H292 and HEP-2 was evaluated, showing IC50 values of 10.57; 22.25; 23.11 and 26.56 g/ mL, respectively. The study of the non-volatile constituents was initiated with the preparation of the hexane and ethanol extracts from stems of P. glabra. The chromatographic fractionation of these extracts allowed the isolation of lupenone (PG–1), the mixture of sitosterol and stigmasterol (PG–2), 4'-hydroxy-7-methoxyflavone (PG–3), 3',7-dimethoxy-4'-hydroxyflavone (PG–4) and 5,5'-dihydroxy-2',3,7-trimethoxyflavone (PG–5). Taraxerol (BU–1), betulinic acid (BU–2), taraxerone (BU–3), glutinol (BU–4), the mixture of sitosterol and stigmasterol (BU–5), pacharin (BU–6), naringenin (BU–7) and eriodictyol (BU–8), liquiritigenin (BU–9), guibourtinidol (BU–10) and fisetinidol (BU–11) were obtained from the extracts from stems of B. ungulata; while 3,5-dimethoxy-4-methyl-2’-hydroxybibenzyl (BU–12) and 3,5-dimethoxy-2’-hydroxybibenzyl (BU–13) were isolated from the ethanol extract of the roots. The structures of the compounds were elucidated by spectroscopic methods as IR, MS, 1D and 2D NMR, and by comparison with previously reported data in the literature. It's worth noting that BU–12 is unprecedented in the literature and the 13C NMR data of BU–13 are reported for the first time in this work. The cytotoxicity of BU–12 has been evaluated against four human cancer cell lines, showing IC50 values of 4.3 and 6.5 g/mL against pro-myelocytic leukemia (HL-60) and cervical adenocarcinoma (HEP-2) cell lines, respectively. / O presente trabalho relata o estudo químico e biológico das espécies Phanera glabra (Jacq.) Vaz e Bauhinia ungulata L. A composição química do óleo essencial das folhas de B. ungulata, obtido por hidrodestilação, foi determinada e quantificada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) e detector de ionização por chama (CG-DIC), sendo, portanto, identificado 85,90% dos seus constituintes: Óxido de cariofileno (22,99%), (E)-cariofileno (14,53%) e α-copaeno (7,17%) foram os constituintes majoritários. O óleo essencial teve sua atividade larvicida avaliada sobre Aedes aegypti, sendo obtido um valor de CL50 igual a 75,12 μg/mL. A atividade citotóxica do OEBU foi realizada sobre quatro linhagens tumorais humanas HL-60, MCF-7, NCI-H292 e HEP-2, através do método do MTT. O estudo dos componentes não voláteis foi iniciado com a preparação dos extratos hexânico e etanólico dos caules de P. glabra. O fracionamento cromatográfico destes extratos permitiu o isolamento de lupenona (PG–1), mistura de sitosterol e estigmasterol (PG–2), 4’-hidroxi-7-metoxiflavana (PG–3), 3’,7-dimetoxi-4’-hidroxiflavana (PG–4) e 5,5'-dihidroxi-2',3,7-trimetoxiflavona (PG–5). Taraxerol (BU–1), ácido betulínico (BU–2), taraxerona (BU–3), glutinol (BU–4), mistura de sitosterol e estigmasterol (BU–5), pacharina (BU–6), naringenina (BU–7), eriodictiol (BU–8), liquiritigenina (BU–9), guibourtinidol (BU–10) e fisetinidol (BU–11) foram isolados a partir dos extratos dos caules de B. ungulata; enquanto do extrato etanólico das raízes de B. ungulata foram isolados 3,5-dimetoxi-4-metil-2’-hidroxibibenzil (BU–12), substância inédita na literatura, e 3,5-dimetoxi-2’-hidroxibibenzil (BU–13) cujos dados de RMN 13C são descritos pela primeira vez neste trabalho. As estruturas dos compostos foram elucidadas através de técnicas espectroscópicas tais como IV, EM, RMN 1D e 2D, e por comparação com dados descritos na literatura. O bibenzil 3,5-dimetoxi-4-metil-2’-hidroxibibenzil mostrou atividade citotóxica significativa contra as linhagens celulares humanas HL-60 e HEP-2 com valores de IC50 de 4,3 e 6,5 μg/mL, respectivamente.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-20T11:50:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 199962.pdf: 3302622 bytes, checksum: 3101bbf063467ff00c177e24f3b0a2ae (MD5)

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-04-01T18:31:54Z No. of bitstreams: 1 2016_KarinaOliveiradaCosta.pdf: 2735810 bytes, checksum: 2755a4d40bbd144db37c37b9740ac24e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-04-26T21:44:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_KarinaOliveiradaCosta.pdf: 2735810 bytes, checksum: 2755a4d40bbd144db37c37b9740ac24e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-26T21:44:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_KarinaOliveiradaCosta.pdf: 2735810 bytes, checksum: 2755a4d40bbd144db37c37b9740ac24e (MD5) / Variações no ambiente de crescimento de microrganismos podem ter impactos consideráveis sobre a quantidade e diversidade de metabólitos secundários produzidos por esses. Assim, a otimização de culturas microbianas, pode ter efeitos significativos quando se quer aumentar o rendimento de um determinado metabólito. Este trabalho foi realizado para avaliar a influência de alguns fatores nutricionais e ambientais sobre a produção de compostos fenólicos (flavonoides e polifenóis), assim como foi conduzida a otimização das condições experimentais que resultassem em uma atividade antioxidante mais elevada dos extratos dos metabólitos produzidos pelo fungo Phomopsis sp., isolado a partir de folhas da Bauhinia variegata. Para a otimização da produção de polifenóis totais, flavonoides e da atividade antioxidante dos extratos (variáveis dependentes – respostas preditas), foi realizado um delineamento experimental fatorial 23 no modelo de faces centradas (DFC), com três variáveis independentes denominadas pH inicial do meio, temperatura de incubação (°C) e concentração de peptona no meio (g/L). As variáveis independentes foram codificadas em três níveis (-1, 0, +1). Utilizando-se a ferramenta de planejamento experimental com a metodologia de superfície de resposta (MSR) foi possível investigar a influência das variáveis independentes, assim como a forma de interação entre elas. O comportamento da produção de flavonoides e polifenóis, assim como da atividade antioxidante quando em diferentes condições ambientais foi eficientemente compreendido através de métodos estatísticos. Modelos polinomiais de segunda ordem foram utilizados para prever cada uma das três respostas. A análise de regressão da resposta atividade antioxidante mostrou que 93,9% da variação foi explicada pelo modelo. Estes resultados indicam que fatores nutricionais e ambientais desempenham um papel importante na produção de metabólitos secundários com atividade antioxidante pelo fungo Phomopsis sp. _______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Variations in microbial growth environment can have significant impacts on the quantity and diversity of secondary metabolites produced. Thus, the optimization of microbial cultures may have significant effects when one wants to increase throughput of a particular metabolite. This study was conducted to evaluate the influence of nutrition and environmental factors on the production of phenolic compounds (polyphenols and flavonoids), as well as optimization of the experimental conditions that would result in a higher antioxidant activity on the extracts of the metabolites produced by the fungus Phomopsis sp. isolated from Bauhinia variegata leaves. For optimization of the production of total polyphenols, flavonoids as well as extracts with high antioxidant activity (dependent variables - predicted responses) a factorial experimental design 23 was performed using a face-centered cubic design (FCD) of experiments, with three independent variables, namely initial pH, incubation temperature (°C) and concentration of peptone (g/L). The independent variable were coded at three levels (-1, 0, +1). Using the experimental design tool with the response surface methodology (RSM) was possible to investigate the influence of the independent variables, as well as the form of interaction between them. Second order polynomial models were used to predict each of the three answers. The regression analysis of the antioxidant activity response showed that 93.9% of the variation was explained by the model. These results indicate that nutritional and environmental factors play an important role in production of secondary metabolites with antioxidant activity, which can be better understood and studied using mathematical and statistical methods. The production profile of flavonoids and polyphenols, as well as antioxidant activity of the extracts produced by Phomopsis sp. in different environmental conditions were efficiently predicted using statistical methods.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5003_1.pdf: 1484239 bytes, checksum: 04b84269045a9fccab4418903a3a27bc (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2002 / A lectina de folhas de Bauhinia monandra (BmoLL) foi previamente purificada por fracionamento com sulfato de amônio (F 0-60%) seguido por cromatografia de afinidade com gel de Guar. Para o estudo da BmoLL foi desenvolvido um anticorpo policlonal em coelho contra esta lectina; anti-BmoLL IgG foi purificada em coluna de Sepharose-Proteína A. Em imunodifusão, anti-BmoLL IgG apresentou reações cruzadas com lectinas de Bauhinia purpurea e Ulex europaeus I. Lectinas de Bandeiraea simplicilofia II e Triticum vulgaris reagiram inespecificamente com substâncias presentes no antissoro mas ausentes na preparação obtida de IgG. Precipitações de anti-BmoLL IgG com extratos de outros tecidos de B. monandra, revelaram outras formas moleculares da lectina. Anti-BmoLL IgG foi conjugada com peroxidase e aplicada em ELISA, confirmando os resultados de imunodifusão. Para a sua aplicação no biossensor piezoelétrico, o rendimento do método de imobilização foi testado imobilizando anti-BmoLL IgG em placas de ouro (4 x 4 x 0.5 mm3) em quantidades de 0, 110 e 220 mg em 100 ml utilizando dextrana tratado com bromocianeto. As concentrações de IgG não imobilizada foram medidas pela quantificação de proteína após a imobilização e lavagens com PBS. As quantidades de 110 e 220 mg de anti-BmoLL IgG apresentaram respectivamente, rendimentos de imobilização de 46% e 33%. Anti-BmoLL IgG (110 mg/ml) foi imobilizada na superfície de ouro de Microbalança de Cristal de Quartzo (do inglês Quartz Crystal Microbalance, QCM). Na execução de ensaio de piezoelétrico, a QCM foi incubada com solução de BmoLL (91 mg/ml) seguido de uma redução de freqüência com 5 kHz, mostrando um grande reconhecimento da lectina pela IgG imobilizada. No potenciometro e no medidor de turbidez, anti-BmoLL IgG não provocou nenhuma alteração na ligação de galactose por BmoLL, indicando que a IgG purificada não tem afinidade pelos sítios de ligação de carboidrato de BmoLL

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:29:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2105_1.pdf: 921878 bytes, checksum: 53bc8f4065add9d378d44c0576858d98 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Os flavonóides constituem uma classe amplamente distribuída no Reino vegetal e apresentam diversas funções biológicas e atividades farmacológicas. Este grupo tem sido bastante relatado no gênero Bauhinia, sendo o possível responsável por suas indicações populares. Bauhinia cheilantha (Bong.) Steudel é uma espécies nativa da Caatinga e possui diversos usos etnofarmacológicos. Fatores ambientais podem interferir na síntese destes metabólitos, alterando as respostas terapêuticas esperadas. No Brasil, diversos fitoterápicos possuem em sua constituição plantas do gênero Bauhinia, entretanto, por não estar de acordo com as normas vigentes, muitos não possuem registro. A Resolução RE nº 899, de 29 de maio de 2003 da na Agência Nacional de Vigilância Sanitária, determina que para validar a metodologia analítica faz-se necessário avaliar os parâmetros especificidade, linearidade, robustez, limites de detecção e quantificação, precisão e exatidão. O presente estudo visa compreender as condições ambientais que a Caatinga desempenha sobre a produção de flavonóides e validar a metodologia analítica empregada. Amostras de B. cheilantha foram coletadas no fragmento de Caatinga pertencente à Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuária (IPA), em Caruaru/PE durante os meses de abril a setembro/2006. O material testemunho foi depositado no Herbário Prof. Vasconcelos Sobrinho da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Após secagem, as folhas foram pulverizadas e quantificadas por metodologia espectrofotométrica, sendo os resultados expressos como equivalentes do padrão rutina (em μg/mL). Os dados pluviométricos foram obtidos na Estação Climatológica do IPA. Os resultados foram analisados estatisticamente pelo programa BioEstat 4.0. Todos os parâmetros exigidos pela RE nº 899 foram avaliados e estão de acordo com as normas, o que confirma a validação do método. Não foi possível correlacionar à produção de flavonóides com a pluviosidade. Contudo, foi observado que o teor destes metabólitos é maior nos indivíduos da borda do fragmento. A realização deste estudo contribui para a compreensão da ecologia química de plantas da Caatinga, uma vez que há poucas pesquisas enfocam este tema e forneceu às indústrias o procedimento analítico validado para a realização mais eficiente do controle de qualidade de seus produtos comercializados

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:29:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2743_1.pdf: 2012890 bytes, checksum: 990d95aa03c535d23d043c7880f92539 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A espectrofotometria no ultravioleta-visível (UV/Vis) e a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) destacam-se dentre os métodos analíticos empregados para quantificação de flavonóides em drogas vegetais. Entretanto, questionamentos sobre a especificidade e equiparação de seus resultados vem sendo suscitados diante das características e limitações de cada técnica. Dessa forma, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar comparativamente a CLAE e metodologias espectrofotométricas para quantificação de flavonóides em folhas de Bauhinia forficata Link (pata de vaca), com o intuito de estabelecer especificações analíticas que permitam que as técnicas possam ser empregadas alternativamente. Buscou-se também estabelecer especificações para o controle de qualidade da espécie escolhida, por meio de amostras do material vegetal, obtidas de duas regiões do Brasil, que foram submetidas à caracterização fitoquímica e físicoquímica (granulometria, perda por dessecação, teor de cinzas e teor de extrativos). Para a avaliação dos métodos analíticos, foram desenvolvidas e validadas, segundo o ICH e RE nº 899/03 (ANVISA), técnicas espectrofotométricas para quantificação de flavonóides totais, uma por diluição direta e outra por hidrólise ácida, e uma metodologia por CLAE para quantificação do marcador canferitrina. As respostas encontradas para três níveis de concentração foram avaliadas estatisticamente. Observou-se para as duas amostras um perfil fitoquímico similar, apresentando: flavonóides, proantocianidinas, leucoantocianidinas, triterpenos e esteróides. Constatou-se que o tamanho de partícula e a umidade residual mostraram-se divergentes em virtude da origem e do processamento adotados pelos fornecedores. Sendo que os valores do teor de cinzas mostraram-se dentro das especificações e não foi observada diferença significativa para o teor de extrativos. As metodologias desenvolvidas mostraram-se específicas, sensíveis, precisas, exatas e robustas, sendo adequadas para as análises realizadas. As amostras de B. forficata mostraram resultados similares para os dois procedimentos espectrofotométricos, porém apenas uma delas apresentou canferitrina. Por isso, questiona-se a adoção desse constituinte como marcador apropriado para a espécie, haja vista que pode comprometer o emprego de CLAE como ferramenta analítica. Por outro lado, considerando que a canferitrina apresenta as propriedades físico-químicas de seu grupo de metabólitos, sua ausência em uma das amostras não invalida a avaliação do desempenho dos métodos, pois a observação de desempenho similar para o método seletivo (CLAE) e o método para quantificação de grupos, pode conferir maior confiabilidade a técnica geral e sugere comportamento similar para compostos estruturalmente semelhantes. Portanto, o estudo comparativo foi conduzido apenas com a amostra contendo canferitrina e permitiu estabelecer correlação positiva e ausência de erros sistemáticos significativos entre todos os procedimentos, indicando que os mesmos podem ser utilizados alternativamente sem que haja prejuízo de suas respostas. Dessa forma, considerando ainda a simplicidade, baixo custo de execução e variabilidade intrínseca da matriz em questão, a adoção das técnicas espectrofotométricas permanecem como alternativas válidas para análise de flavonóides em folhas de B. Forficata. Por fim, os resultados obtidos neste trabalho contribuíram no processo de identificação e padronização de parâmetros de qualidade para a planta supracitada