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Metabólitos de origem fúngica : aplicações potenciais em processos biotecnológicos

Arboleda Valencia, Jorge William 01 July 2011 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2011. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2012-03-26T13:07:53Z No. of bitstreams: 1 2010_ClaudioJoseOliveiraSouza_Parcial.pdf: 391277 bytes, checksum: cd10f63fe321539df90cc7a62492c131 (MD5) / Rejected by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br), reason: on 2012-03-26T15:29:10Z (GMT) / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2012-03-26T16:34:28Z No. of bitstreams: 1 2011_JorgeWilliamArboledaValencia_Parcial.pdf: 305137 bytes, checksum: d980502aca4c6f93fd3f9a478bcda6aa (MD5) / Approved for entry into archive by Elzi Bittencourt(elzi@bce.unb.br) on 2012-03-29T14:50:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_JorgeWilliamArboledaValencia_Parcial.pdf: 305137 bytes, checksum: d980502aca4c6f93fd3f9a478bcda6aa (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-29T14:50:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_JorgeWilliamArboledaValencia_Parcial.pdf: 305137 bytes, checksum: d980502aca4c6f93fd3f9a478bcda6aa (MD5) / A biotecnologia visa atender inúmeros problemas que afetam a humanidade e para isto muitas moléculas devem ser exploradas como ferramentas para construir soluções alternativas. Metabólitos como os produzidos por fungos apresentam geralmente duplicidade de ação, o que permite explorar seu potencial uso em aplicações industriais em diferentes áreas, como farmacologia, agroindústria, bioprocessos, tecnologia ambiental e bioconversão. Com o objetivo de estabelecer o potencial dos metabólitos produzidos pelo fungo Beauveria bassiana, toxinas puras (beauvericina, basianina, tenellina, oosporeina) e extratos brutos foram testados em diferentes ensaios de atividade citotóxica e antimicrobiana. Os resultados mostram que a produção de beauvericina (BEA) foi significativamente diferente entre todos os isolados e sugerem uma ativa participação desses metabólitos na morte do inseto, mostrando diferenças estatisticamente significativas entre a CC50 de BEA sobre a linhagem celular Spodoptera frugiperda SF-9 (2,81 e 6,94 μM) e os valores das outras micotoxinas (4,23 - 11,95 μM). Adicionalmente, demonstrou-se o efeito no desenvolvimento da ferrugem e redução na germinação. Todos os tratamentos dos metabólitos puros e dos extratos brutos provenientes do crescimento do fungo B. bassiana apresentaram efeitos inibitórios sobre as diferentes espécies de bactérias utilizadas nos ensaios mostrando atividade bactericida contra o gênero Proteus sp. e bacteriostática sobre os gêneros Staphylococcus sp., Klebsiella sp., Salmonella sp .e E. coli. Da mesma forma, as enzimas digestivas β-glicosidases e Leucina-aminopeptidase (LAP) da broca gigante da cana-de-açúcar Telchin licus licus foram estudadas visando o controle da praga. Os resultados mostraram que as β–glicosidases da broca possuem uma Km e Vmax para p-nitrofenil-β-D-glicopiranosídeo (pNβG) de 1,74 mM e 0,005 mmol/min/mg de proteína respectivamente, a melhor atividade da enzima foi encontrada com pH 6,0 e 7,0 e temperatura entre 50 e 55° C. Do mesmo modo, demonstrou-se o efeito de diferentes inibidores e ativadores da enzima, registrando para Mg2+ o maior incremento em atividade. Na comparação da atividade especifica de LAPs com outros insetos, Hypothenemus hampei mostrou a maior atividade. T. licus licus possui 3 isoformas da enzima que são inibidas completamente com bestatin 0,1 mM a pH 7,0. Adicionalmente, um completo estudo da atividade holocelulase do fungo Schizophyllum commune demonstrou o efeito indutor do carboximetilcelulose (CMC) 1% e das diferentes fontes de carbono na produção das enzimas, aparentes Km e Vmax para pNβG das β–glicosidases de 0,303 mM e 0,504 mmol/min/mg de proteína, a melhor atividade da enzima foi a temperatura entre 50 - 60˚ C e pH 7,0. Finalmente, usando microscopia eletrônica de varredura (MEV) o mecanismo físico usado pelo fungo para degradar bambu (Guadua angustifolia) foi observado e o potencial dos metabólitos produzidos avaliado. Os dados aqui apresentados constituem uma valiosa ajuda no desenho de estratégias voltadas a geração de plantas resistentes aos insetos-praga estudados, na busca de novos compostos antibacterianos e no aproveitamento de resíduos lignocelulósicos para produção de álcool de segunda geração. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Biotechnology aims to address several problems affecting mankind. For this reason, many molecules should be explored as tool to develop new alternatives solutions. Metabolites produced by fungi have usually double action, which allow approach theirs potentials use in different industrial applications in areas such as pharmacology, agroindustry, bioprocess, environmental technology and bioconversion. In order to establish the potential of metabolites from Beauveria bassiana fungus, the cytotoxicity and antimicrobial activity of pures toxins (beauvericin, bassianin, tenellin, oosporein) and crude extracts were tested. The results show that beauvericin (BEA) production was significantly different among all isolates and suggest an active participation of these metabolites in the insect’s death. Statistical difference was found when BEA CC50 values on cell line Spodoptera frugiperda SF-9 (2.81 and 6.94 μM) were compared with those values from others mycotoxins (4.23 - 11.95 μM). Additionally, it was shown an effect on the development of rust, and reduced germination. All treatments of pure metabolites and crude extracts from B. bassiana growth showed inhibitory effects on different species of bacteria used in bioassays, showing bactericidal activity on the genus Proteus sp. and bacteriostatic effect on the genus Staphylococcus sp., Klebsiella sp., Salmonella sp. and E. coli. Likewise, digestive enzymes β-glucosidases and Leucine aminopeptidase (LAP) from sugarcane giant borer Telchin licus licus were studied in order to control the insect pest. The results showed apparent Km and Vmax towards p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside of 1.74 mM and 0.005 mmol/min/mg of protein respectively for β-glucosidases, the highest enzyme activity resulted with pH between 6.0 and 7.0 and temperature between 50 e 55 °C. Besides, it was shown an effect of activators and inhibitors on the enzyme with major increments with Mg2+. The LAP specific activity was compared among different insects and Hypothenemus hampei exhibited the highest activity. T. licus licus has three isoforms that are inhibited completely with 0.1 mM bestatin at pH 7.0. Finally, a complete study of holocellulase activity from Schizophyllum commune fungus showed inducing effect of 1% carboxymethyl-cellulose CMC and different carbon sources on enzyme production. Km and Vmax towards p-nitrophenyl-β-D- glucopyranoside (pNβG) of β-glucosidases were 0.303 mM and 0.504 mmol / min / mg protein respectively, the highest enzyme activity resulted with temperature between 50 - 60˚ C and pH 7.0. Finally, by using scanning electron microscopy (SEM), the physical mechanism used by the fungus to degrade bamboo (Guadua angustifolia) was observed and the potential of metabolites produced was evaluated. The data presented here constitute a valuable contribution in the design of strategies to generate plants resistant to insect pests, in search of new antibacterial compounds and the use of lignocellulosic residues for production of second generation biofuels.
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Ressonância magnética cerebral e espectroscopia de prótons por ressonância magnética na investigação de pacientes com mucopolissacaridose

Vedolin, Leonardo Modesti January 2006 (has links)
As mucopolissacaridoses (MPS) constituem um grupo de doenças lisossômicas caracterizadas pela deficiência de uma das enzimas responsáveis pela degradação das glicosaminoglicanos. A expressão neurológica da doença varia de acordo com cada deficiência enzimática, mas o retardo mental é característico da MPS III e de formas graves das MPS I, II e VII. Vários estudos com ressonância magnética (RM) demonstraram que atrofia cerebral, lesões na substância branca (SB) e hidrocefalia são freqüentemente observados em pacientes com MPS. Entretanto a correlação entre a RM, anormalidades bioquímicas e gravidade do quadro neurológico ainda não foi descrita na literatura. Além disso, a comparação dos achados de espectroscopia de prótons por RM (ERM) com a RM convencional é desconhecida. O objetivo deste trabalho foi analisar a aplicação da RM e da ERM na investigação de pacientes com MPS. Sessenta crianças com MPS tipos I, II, IV e VI foram avaliadas com RM e ERM. Os resultados foram comparados com tempo de doença, anormalidades bioquímicas e disfunção cognitiva. Os exames de RM foram realizados em equipamento de alto campo magnético (1.5 T). Pacientes com maior tempo de doença tiveram mais lesões na SB. A atrofia cerebral e o grau de dilatação ventricular não foram afetados pelo tempo de doença ou idade dos pacientes. Pacientes com MPS II e disfunção cognitiva apresentaram maior atrofia cerebral, hidrocefalia, lesões mais severas na substância branca e aumento da relação mioinositol/creatina na ERM. Estas informações podem ser úteis para o melhor entendimento da fisiopatogenia das MPS e do papel da RM na sua investigação. / The mucopolysaccharidosis are a group of lysosomal diseases characterized by enzymatic deficiency which leads incomplete degradation of glycosaminoglycans. Neurological expression varies according to each enzyme but mental compromise is characteristic of MPS III and the severe forms of MPS I, II and VII. Studies with magnetic resonance imaging (MRI) demonstrated that brain atrophy, white matter (WM) lesions and hydrocephalus are common in MPS patients. However, correlation among MRI, biochemical changes and severity of neurological deficit was not published so far. In addition, comparison between MR spectroscopy (MRS) and MRI is controversial. The purpose of this study was to analyze MRI and MRS findings in MPS patients. Sixty patients with MPS types I, II, IV and VI were evaluated with MRI and MRS. Results were compared with disease duration, biochemical changes and cognitive impairment. MRI exams were performed in high field MRI scanner (1.5 T). Patients with longer disease duration had more WM lesions. Brain atrophy and hydrocephalus were not affected by disease duration or patient´s age. Patients with MPS II and cognitive impairment had more brain atrophy, hydrocephalus, severe WM lesions and elevated myoinositol/creatine at MRS. These results can be useful to better understand the pathogenic process and to increase the applicability of MRI in the disease investigation.
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Criação de uma série de lentiventores para transferência gênica estável e regulada

Vargas, José Eduardo January 2009 (has links)
A transferência gênica baseada em retrovírus permite o carregamento e integração de um material genético exógeno ao genoma de uma célula alvo, o que permite a expressão estável do transgene tanto in vitro quanto in vivo. Até o momento não existiam lentivetores que permitam a clonagem de diferentes genes sob promotores de expressão gênica regulada por tetraciclina e também a análise de expressão através do IRES - sistema repórter. No presente trabalho, foi criada uma série de lentivetores contendo plasticidade estrutural para permitir a clonagem de diferentes genes, sítios únicos de clivagem para clonagem de diferentes promotores, elemento TRE para regular a expressão do transgene com tetraciclina ou doxiciclina e o sítio IRES expressando duas proteínas repórteres: GFP ou DsRed. A série de vetores produzidos, denominados pLR1, pLR2 e pLR3 possue o promotor RSV antecedido pelo elemento TRE e um sítio de clonagens múltiplas. Além disso, o pLR2 possui o sistema IRES-GFP e o pLR3 o sistema IRES-DsRed para geração de mRNA bicistrônico. A eficiência funcional de cada um dos elementos utilizados nas estruturas de cada um dos plasmídeos os transforma numa boa ferramenta biotecnológica para transferência gênica estável. / Gene transfer based upon lentiviral vectors allows the integration of exogenous genes into the genome of a target cell, turning these vectors into a powerful tool that allows stable expression of transgenes in mammalian cells both in vitro as well as in vivo. Currently, no plasmids for lentivirus are available that allow cloning of different genes to be regulated for different promoters or regulates by tetracycline and, also, that permit the analysis of the expression through a IRES - reporter gene system. In this work, we have generated a series of lentiviral vectors containing: a malleable structure to allow the cloning of different target genes in a multicloning site (mcs); unique sites to exchange promoters; TRE element to regulate the transgene expression with molecules such as tetracycline or doxicycline, and internal ribosome entry site followed by one of two reporter genes: GFP or DsRed. The series of vectors were named pLR1, pLR2 and pLR3. This vector serie has the RSV promoter flanked by a TRE element and a multicloning site. Also, the pLR2 plasmid has the IRES-GFP sequence after the mcs while pLR3 has IRES-DsRed for the generation of a bicistronic mRNA. The functional efficiency of each element used in the different plasmid structures transforms the plasmid serie into a powerful biotechnology tool for stable gene transfer.
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Estudo da associação de polimorfismos no gene receptor do tipo toll 3 (tlr3) e o diabetes mellitus tipo 1

Assmann, Taís Silveira January 2013 (has links)
Introdução: O diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é uma doença autoimune crônica e progressiva caracterizada por descompensações metabólicas frequentemente acompanhadas por desidratação e cetoacidose. Os agentes virais parecem ter um papel importante no desencadeamento da destruição autoimune que leva ao desenvolvimento do DM1. Entre as cepas virais estudadas, a família dos enterovírus foi associada ao surgimento da doença em humanos. Um dos mediadores do dano viral é o RNA fita dupla (RNAfd) gerado durante a replicação e transcrição do RNA e DNA viral. O gene TLR3 codifica um receptor endoplasmático pertencente à família dos Pattern- Recognition Receptors (PRR), o qual reconhece o RNAfd, tendo um importante papel na resposta imune inata desencadeada por infecção viral. A ligação do RNAfd ao TLR3 desencadeia a liberação de citocinas proinflamatórias, como interferons, as quais exibem uma potente ação anti-viral; assim, protegendo as células não infectadas e induzindo apoptose naquelas já contaminadas. Dessa forma, esse estudo teve como objetivo investigar a associação entre polimorfismos no gene TLR3 e o DM1. Métodos: As frequências dos polimorfismos rs5743313, rs11721827, rs3775291, rs13126816 e rs7668666 no gene TLR3 foram analisadas em 476 pacientes com DM1 e em 507 indivíduos não-diabéticos saudáveis. Os haplótipos construídos a partir da combinação dos cinco polimorfismos estudados e suas frequências foram inferidos utilizando o programa Phase 2.1, o qual implementa o método estatístico bayesiano. Resultados: Todos os genótipos estão de acordo com o esperado pelo Equilíbrio de Hardy-Weinberg. Os polimorfismos rs3775291 e rs13126816 foram associados com risco para DM1 em diferentes modelos de herança, com a associação mais forte sendo observada para o modelo aditivo [OR= 2,3 (IC 95% 1,3-4,1) e OR= 2,1 (IC 95% I 1,4-3,2); respectivamente]. Os demais polimorfismos estudados não foram associados ao DM1. Interessantemente, a frequência de DM1 aumentou quanto maior o número de alelos mutados dos cinco polimorfismos estudados presente nos haplótipos (p-trend= 0,002). Além disso, em pacientes com DM1, os alelos mais raros dos polimorfismos rs5743313 e rs11721827 foram associados com menor idade de diagnóstico do DM1 e a um pior controle glicêmico. Conclusão: Os polimorfismos rs3775291 e rs13126816 no gene TLR3 estão associados com risco para o DM1 em indivíduos do Sul do Brasil, enquanto os polimorfismos rs5743313 e rs11721827 estão associados com idade de diagnóstico precoce e a um pior controle glicêmico. O número de alelos de risco nos haplótipos formados pelos cinco polimorfismos estudados no gene TLR3 parece influenciar o risco para DM1, sugerindo que esses polimorfismos interagem na suscetibilidade para a doença. / Introduction: Type 1 diabetes mellitus (T1DM) is a chronic, progressive autoimmune disease characterized by metabolic decompensation often leading to dehydration and ketoacidosis. Viral agents seem to have an important role in triggering the autoimmune destruction that leads to the development of T1DM. Among several viral strains investigate so far, the enterovirus family has been consistently associated with the onset of T1DM in humans. One of the mediators of viral damage is the double-stranded RNA (dsRNA) generated during replication and transcription of viral RNA and DNA. The Toll-like receptor 3 (TLR3) gene codes for an endoplasmic receptor of the patternrecognition receptors (PRRs) family that recognizes dsRNA, playing an important role in the innate immune response triggered by viral infection. Binding of dsRNA to the TLR3 triggers the release of proinflammatory cytokines, such as interferons, which exhibit potent antiviral action; thus, protecting uninfected cells and inducing apoptosis of infected ones. Therefore, this study aimed to investigate whether TLR3 polymorphisms were associated with T1DM. Methods: Frequencies of the TLR3 rs5743313, rs11721827, rs3775291, rs13126816 and rs7668666 polymorphisms were analyzed in 476 T1DM patients and in 507 healthy subjects. Haplotypes constructed from the combination of these polymorphisms were inferred using Bayesian statistical method. Results: All genotypes are in agreement with those predicted by the Hardy-Weinberg equilibrium. The rs3775291 and rs13126816 polymorphisms were associated with T1DM in different inheritance models, with the strongest association being observed for the additive model [OR= 2.3 (95% CI 1.3-4.1) and OR= 2.1 (95% CI 1.4-3.2); respectively]. The other three polymorphisms were not significantly associated with T1DM. Interestingly, the prevalence of T1DM was higher as more risk alleles of the five polymorphisms were present (P trend = 0.002). Moreover, in T1DM patients, the minor alleles of the rs5743313 and rs117221827 polymorphisms were associated with an early age at diagnosis and worse glycemic control. Conclusion: The TLR3 rs3775291 and rs13126816 polymorphisms are associated with risk for T1DM in Southern Brazilian subjects, while the rs5743313 and rs11721827 polymorphisms are associated with age at T1DM diagnosis and worst glycemic control. The number of risk alleles of the five TLR3 polymorphisms in the haplotypes seems to influence the risk for T1DM, suggesting that these polymorphisms might interact in the susceptibility for the disease.
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Expressão e analise do gene do capsideo de isolados do virus da tristeza de diferentes especies e variedades de citros

Targon, Maria Luisa Penteado Natividade 12 September 1997 (has links)
Orientador: Marcos A. Machado / (Tese doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T21:50:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Targon_MariaLuisaPenteadoNatividade_D.pdf: 6263544 bytes, checksum: fc6bcef3ec00b19dbb7a60841e7d7717 (MD5) Previous issue date: 1997 / Doutorado / Genetica Vegetal / Doutor em Ciências Biológicas
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Diversidade de Pseudomonas spp. fluorescentes isoladas da rizosfera de culturas agricolas

Fantinatti-Garboggini, Fabiana, 1965- 23 October 1997 (has links)
Orientador: Wanderley Dias da Silveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T01:15:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fantinatti-Garboggini_Fabiana_D.pdf: 3998132 bytes, checksum: bcbedb630d02f71e8f06599cea06d49e (MD5) Previous issue date: 1997 / Doutorado / Genetica / Doutor em Ciências Biológicas
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Estudo das diferenças genomicas entre amostras de herpesvirus bovino tipo 1 e tipo 5 isoladas no Brasil atraves da analise com enzimas de restrição

D'Arce, Regina Celia Freitas 27 July 2018 (has links)
Orientadores: Clarice Weis Arns, Paulo Michel Roehe / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T02:28:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 D'Arce_ReginaCeliaFreitas_M.pdf: 3168538 bytes, checksum: e41e78694d9c979d5127fba297b57e4b (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado
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Estudo estrutural de membranas modelo que contém proteínas extrínsecas

Bigatto, Jose Otavio 12 August 2018 (has links)
Orientador: Iris C. L. Torriani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-08-12T00:08:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bigatto_JoseOtavio_M.pdf: 3280223 bytes, checksum: 91b8aeb170f846aad44d0b54f624ff66 (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: Bicamadas lipídicas livres de proteínas , foram estudadas intensamente durante os últimos anos, devido a grande similaridade entre tais sistemas e as membranas naturais. Recentemente, com o propósito de se obter uma melhor semelhança com os sistemas naturais, incorporou-se proteínas nas bicamadas lipídicas. Realmente, a localização e distribuição das proteínas no plano das membranas, não foram ainda completamente determinadas para um grande número de sistemas de membranas. Proteínas extrínsecas, como o citocromo-C, parecem estar superficialmente ligadas à membrana por forças eletrostáticas e permanecem quase que completamente sobre a fase aquosa, definida pelos grupos polares dos lipídeos (11,15). Mais recentemente, foi proposto que as proteínas extrínsecas poderiam também interagir hidrofobicamente com as cadeias de hidrocarbonos dos lipídeos ou até mesmo com as proteínas intrínsecas. Além disso, a existência de alguns estudos que parecem indicar que os citocromos-C tem uma pequena penetração nas bicamadas lipídicas (18, 28), motivaram o estudo estrututal por nós realizado. O preparo das amostras para os raios-X, para três sistemas de fosfolipídeos, foi feito segundo as técnicas usuais. Diagramas de difração de raios-X a baixo ângulo foram obtidos para multicamadas úmidas de Lecitina Dipalmítica -(D.P.L.), Cardiolipina/D.P.L. (1 : 4) e Cardiolipina/ D.P.L. /Citocromo-C (5 : 20 : 1). As razões molares aqui especificadas, provaram ser as que produziam melhores diagramas de difração. A análise da difração lamelar, usando-se uma das técnicas de determinação de fases, normalmente utilizada para este tipo de problema, permitiu-nos obter o perfil de densidade eletrônica das membranas modelo em estudo, com uma resolução de aproximadamente 5 Å. Um exame dos perfis de densidade eletrônica, mostrou alguma pertubação na região superficial da membrna quando da introdução do citocromo-C. A região hidrofóbica central parecia permanecer praticamente inalterada. Ambos estes resultados concordam com os recentemente obtidos por técnicas de N.M.R. e E.S.R. (18). O modelo proposto para o sistema DPL/ Cardiolipina /Citocromo-C é confirmado por nossos experimentos / Abstract: Protein free lipid bilayers have been intensely studied during the past few years due to the striking similarities between these systems and natural membranes. In recent years, with the purpose of attaining a better simulation with the natural systems, proteins have been incorporated into the bi1ayers. It is a fact that the location and tributiori of the protein in the plane of the membrane has not been completely determined for a number of membrane systems. Extrinsec proteins, like cytochrome C, seem to be superficially bound to the membrane by electrostatic forces and remain a1most completely on the aqueous side defined by the polar groups of the lipids (11, 15). More recently been proposed that extrinsec proteins might also have some hidrofobic interaction with the lipid hydrocarbon chains or even with the intrinsec proteins. Furthermore, the existence of some seem to indicate a slight penetration of Cyt.C in the 1ipid bilayes (18,28), have motivated the structural work undertaken by us. Preparation of X-ray samples of three phospholipid systems was done following the usual techniques. Low angle X-ray diffraction diagrams were obtained for wet rnultilayers of Dipalmitoyl Phosphatidyl Choline (DPL), Cardiolipin / DPL (1 : 4) and Cardiolipin / DPL / Cytochrome C. (5 : 20 : 1). The molar ratios here specified proved to be the ones that produced better diffraction patterns. Analysis of the lamellar diffraction using one of the usual phasing techniques for this kind of problem, allowed us to obtain the electron density profile of the model membrane systems under study, with a resolution of approximately 5 A. A close examination of the electron density profiles showed some perturbation in the membrane surface region upon introduction of the Cytochrome C. The hydrofobic central region seemed to remain practically unaltered. Both these results agree with the outcome of recent NMR and EPR experiments(18). A model proposed for the DPL / Card / Cyt C membrane is confirmed by our experiments / Mestrado / Física / Mestre em Física
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Alelos de histocompatibilidade de classe II associados ao perfil imunogenetico de individuos portadores de psoriase vulgar

Cardoso, Claudia Bueno 30 January 2002 (has links)
Orientador: Maria Helena Stangler Kraemer / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T06:29:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_ClaudiaBueno_M.pdf: 20377350 bytes, checksum: 387444b2ded3a59a00d62956bec6e611 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Nesta tese, foram analisados 100 indivíduos-controle sadios, da população de Campinas- Sudeste do Brasil, e 60 indivíduos com Psoríase Vulgar da mesma região geográfica. As tipificações dos alelos HLA de classe II (HLA-DRBl-5 - DQB1) foram efetuadas através do método molecular por DNA/PCR/SSP, para média e alta resolução. O DNA foi extraído por um procedimento "Salting out", do sangue periférico de cada indivíduo componente da pesquisa. Utilizando-se a técnica da PCR/SSP por "primers" da One Lambda, foram quantificados um total de 13 alelos DRB1, 3 alelos DRB3, 1 alelo DRB4, 2 alelos DRB5 e 5 alelos DQBl em média resolução ou genérica; e 45 alelos DRBl em alta resolução ou resolução específica, nos pacientes analisados. A análise dos resultados mostrou associações positivas, indicando susceptibilidade à Psoríase Vulgar, com os alelos- HLA-DRB3*02 (p<0,05, X2=4,36, RR= 2,14) e HLA-DRBl *0102 (p<0,05, RR= 5,44). E associações negativas indicando proteção à Psoríase Vulgar, com os alelos, HLA-DRB4*01 (p<0,001, X2= 6,55, RR= 0,53) e HLA-DRBI *1302 (p< 0,05, RR= 0,23). A análise efetuada nos haplótipos, revelou associações positivas para: HLA-DRBl *01O2/DQBl*05 (p<0,02, RR=9,00). (p<0,05, RR= 5,44) e HLA-DRBl *0701/DQBl *03 Os achados permitem definir a população-controle estudada como caucasóide miscigenada, e sugerem uma possível associação com o alelo DRB1 e o grupo de pacientes com início precoce da doença. No entanto, estes dados devem ser confirmados em estudos futuros / Abstract: In this thesis, we analyzed 100 healthy control individuals and 60 individuals with Psoriasis vulgaris ofthe population of Campinas, a city in the southeast of Brazil. Typification of class II HLA alleles (HLA-DRBI-5 e DQB1) was carried out through the DNA/PCR/SSP molecular method at medium and high resolution. DNA was extracted through a salting-out procedure of peripheral blood of each individual participating in the research. 13 DRB 1 alleles, 3 DRB3 alleles, 1 DRB4 allele, 2 DRB5 alleles, and 5 DQB1 alleles were quantified at a medium or generic resolution using the PCR/SSP technique for primers of "One Lambda"; and, 45 DRB1 alleles were quantified at a high resolution or specific resolution in analyzed patients. Results analysis showed positive associations suggesting susceptibility to Psoriasis vulgaris for HLA-DRB3*02 (p<0,05, X2=4,36, RR= 2,14) and HLA-DRB1 *0102 alleles (p<0,05, RR= 5,44). Negative associations indicating protection from Psoriasis vulgaris were found for HLA-DRB4*01 (p<0,001, X2= 6,55, RR= 0,53) and HLA-DRBl *1302 alleles (p< 0,05, RR= 0,23). Analysis carried out in haplotypes revealed positive association for HLA-DRBl *01O2/DQBl*05 (p<0,05, RR= 5,44) and HLA-DRBl *0701/DQBl *03 alleles (p<0,02, RR=9,00). Findings permit to define examined control population as Miscellaneous Caucasoide and suggest a possible association ofthe DRB1 allele with the group of patients showing an early onset ofthe illness. However, data has to be confirmed in future studies / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas
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Detecção do citomegalovirus em fragmento hepatico de pacientes com colestase neonatal extra-hepatica por meio da reação em cadeia da polimerase

De Tommaso, Adriana Maria Alves 27 September 2002 (has links)
Orientadores : Gabriel Hessel, Sandra Cecilia Botelho Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:18:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeTommaso_AdrianaMariaAlves_D.pdf: 19279921 bytes, checksum: cd6afa6d2f995d9363b2a6be309c7372 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: "Colestase" significa diminuição ou parada do fluxo biliar para o duodeno. Do ponto de vista anatômico, é classificada em intra- e extra-hepática, sendo a atresia de vias biliares (AVB) a principal causa dessa última. A AVB é uma das mais graves doenças hepáticas neonatais e sua etiopatogenia permanece desconhecida. Uma participação viral tem sido proposta, incluindo o citomegalovírus (CMV). A infecção por CMV ocorre em 1-2% dos recém-nascidos sendo assintomática em mais de 90% dos casos. O risco de transmissão para o feto é maior na infecção primária, porém a infecção reCOITenteconta com a maioria das infecções congênitas. O diagnóstico laboratorial se faz por isolamento viral em cultura de fibroblastos e detecção de anticorpos IgG e IgM contra o CMV. A amplificação de DNA pela reação em cadeia da polimerase (PCR), tomou sua detecção possível em amostras contendo pequeno número de cópias VJIa1s. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Colesthasis is the reduction or the interruption of the bile flow to the duodenun. The classification in causes intrahepatic and extrahepatic is very important, being the biliary atresia (BA) the major cause ofthe later. BA is the most severe hepatic disorder in newborns and its etiopathogenesis remains unknown. Viral involvement has been proposed, including the cytomegalovirus (CMV). CMV infection occurs in 1-2% of the newborns and is assymtomatic in more than 90% of the cases. The transmission to the fetus is greater in the primary maternal infection, although a recurrent infection account for the majority of the congenital infections. Laboratory diagnosis is made by serologic methods or by isolation of the virus in fibroblast cell culture. The amplification of DNA by the polymerase chain reaction (PCR) makes possible the diagnosis in specimens with few copies ofthe virus...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Pediatria / Doutor em Saude da Criança e do Adolescente

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