Esta tese foi conduzida para avaliar os efeitos da suplementação de diferentes enzimas exógenas e suas combinações em dietas milho e farelo de soja para frangos de corte. Dois experimentos (Exp.) de digestibilidade e um experimento de desempenho foram conduzidos utilizando um total de 2616 frangos de corte, machos Cobb 500. No Exp. 1, as aves foram alimentadas com uma ração basal milho-farelo de soja ou uma dieta com 60% da ração basal milho-soja + 40% de milho. Ambas dietas foram suplementadas com níveis crescentes de beta-xilanase [0, 50, 100, 150 e 200 unidades de β- xilanase fúngica (FXU)/kg de ração], distribuídas em 10 tratamentos com 8 repetições e 6 aves cada. O Exp. 2 consistiu do fornecimento de dietas milhosoja, formuladas com ou sem fitase [1000 unidades de fitase fúngica (FYT)/kg] e suplementadas com amilase [80 kilo-Novo unidades (KNU) de alfaamilase/ kg], xilanase (100 FXU/kg) ou a combinação de amilase + xilanase, em 6 tratamentos com 8 repetições e 7 aves cada. Nestes dois estudos foi utilizada a mesma formulação da ração basal milho-soja, mesmo milho e metodologia de análises. As aves foram avaliadas dos 14 aos 25 d, com coleta de excretas de 21 a 24 d e coleta de conteúdo ileal aos 25 d. Por fim, o Exp. 3 foi realizado para avaliar o desempenho de frangos de corte e a biodisponibilidade da energia até 40 d. Foram utilizados os mesmos produtos enzimáticos, e estes foram suplementados na mesma quantidade dos estudos anteriores. Não foram observadas interações entre xilanase e as dietas no Exp. 1 ou entre carboidrases e fitase no Exp. 2. A utilização da energia e a digestibilidade da proteína bruta e matéria seca aumentaram (P < 0,05) com a suplementação de 100 FXU/kg de xilanase em dietas milho-soja. Frangos de corte alimentados dos 14 aos 25 d com dietas formuladas com fitase ou suplementadas com amilase + xilanase tiveram maior ganho de peso (P < 0,05) e menor conversão alimentar (P < 0,05), quando comparados aos frangos que receberam dietas sem carboidrases de 14 a 25 d. A EMAn e a digestibilidade do amido no jejuno e no ileo aumentaram (P < 0,05), respectivamente, em 99 kcal/kg, 3,5% e 2,4% quando os frangos receberam dietas suplementadas com amilase + xilanase. No Exp. 3, no período de 1 a 40 d, a EMAn estimada para GP foi 99, 83 e 136 kcal/kg e para CA foi 40, 26 e 42 kcal/kg, respectivamente para amilase, xilanase e amilase + xilanase. Resultados destes experimentos mostraram que dietas milho-soja formuladas com fitase e suplementadas com xilanase, amilase e amilase + xilanase resultaram em melhor desempenho produtivo e maior EMAn e digestibilidade do amido para frangos de corte. / This thesis was conducted to evaluate effects of different exogenous enzyme supplementation and its combinations in corn-soybean meal diets for broilers. Two experiments (Exp.) of digestibility and one experiment of performance were done using a total of 2,616 Cobb 500 male broiler chickens. In Exp. 1, birds were fed a corn-soy basal diet or a diet with 60% corn-soy basal + 40% corn. Both diets were supplemented with increasing levels of beta-xylanase [0, 50, 100, 150, and 200 fungal β-xylanase units (FXU)/kg of feed], distributed in 10 treatments with 8 replications and 6 birds each. The Exp. 2 consisted of corn-soy diets formulated without or with phytase [1,000 fungal phytase units (FYT/kg)] and supplemented with amylase [80 kilo- Novo α-amylase units (KNU)/kg] or the combination of amylase + xylanase, to 6 treatments with 8 replications and 7 birds each. In these two studies, the same corn-soy basal diet was formulated and the same corn and methodology analysis were used. Birds were evaluated from 14 to 25 d, with excreta collection from 21 to 24 d and ileal content collection at 25 d. Finally, the Exp. 3 was done to evaluate broiler growth performance and energy equivalency until 40 d. The same enzyme products supplemented at the same amount of earlier studies were used. No interactions were found between xylanase and diets in Exp. 1 or between carbohydrases and phytase in Exp. 2. Energy utilization and digestibility of crude protein and dry matter increased (P < 0.05) with 100 FXU/kg xylanase supplementation in corn-soy diets. Broilers fed diets from 14 to 25 d formulated whit phytase or supplemented with amylase + xylanase had higher body weight gain (P < 0.05) and lower feed conversion rate (P < 0.05) when compared to broilers fed diets without carbohydrases. The AMEn and starch digestibility in jejum and ileum increased (P < 0.05), respectively by 99 kcal/kg, 3.5% and 2.4% when broilers were fed diets supplemented with amylase + xylanase. In Exp. 3, from 1 to 40 d, AMEn estimated for BWG was 99, 83, and 136 kcal/kg and for FCR was 40, 26, and 42 kcal/kg, respectively for amylase, xylanase, and amylase + xylanase. Results from these experiments show that corn-soy diets having phytase and supplemented with xylanase, amylase, and amylase + xylanase led to improved growth performance, and increased AMEn and starch digestibility in broiler chickens.

Aves domésticas são um dos principais alvos da contaminação alimentar com micotoxinas. O que contribui para o aumento dos prejuízos da indústria avícola devido a problemas como: alta mortalidade, redução do ganho de peso, alteração da conversão alimentar, imunossupressão, anormalidades embrionárias e morte embrionária precoce. Além disso, o acúmulo residual de micotoxinas na carne é uma preocupação da Saúde Pública. Diversos métodos são utilizados para a avaliação da citotoxicidade induzida por agentes tóxicos, incluindo a inibição do crescimento celular, a avaliação da capacidade celular de sintetizar macromoléculas necessárias para a replicação e da capacidade desse agente tóxico para induzir a peroxidação lipídica. Sendo assim, o objetivo geral do presente estudo foi avaliar os efeitos in vitro de ocratoxina A, deoxinivalenol e zearalenona sobre o sistema imunológico de frangos de corte, utilizando como parâmetros, a viabilidade celular, a atividade enzimática e o estresse oxidativo. Realizou-se cultivo primário de linfócitos das aves e o seu isolamento através da técnica de centrifugação por gradiente de densidade. Cada micotoxina foi adicionada ao meio celular, em uma confluência de 80%, em diferentes concentrações (0,001; 0,01; 0,1 e 1 μg/mL), analisando-se viabilidade celular, atividade de ecto-adenosina desaminase e acetilcolinesterase por ensaios colorimétricos e peroxidação lipídica através dos níveis de malondialdeído mensurados pela técnica de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico. Todos esses parâmetros foram analisados em 24, 48 e 72 h, em triplicata e os resultados expressos como média e erro padrão da média, utilizando nível de significância P<0,05. Os resultados obtidos demonstraram que tanto ocratoxina A como deoxinivalenol induziram proliferação linfocitária e baixa atividade de adenosina desaminase, enquanto zearalenona também induziu proliferação, mas nenhuma alteração na atividade da respectiva enzima. Quanto à avaliação da peroxidação lipídica, demonstrou-se a seguinte relação crescente de citotoxicidade: deoxynivalenol> ocratoxina A> zearalenona; enquanto que na avaliação da atividade de acetilcolinesterase esta relação foi inversamente proporcional. Este é o primeiro estudo in vitro realizado com ocratoxina A, deoxinivalenol e zearalenona sobre o cultivo primário de linfócitos de frangos de corte na avaliação desses parâmetros. / Poultry is one of the main targets of food contamination with mycotoxins. This contributes to the increase in the poultry industry losses due to problems such as high mortality, reduced body weight gain, change in feed conversion, immunosuppression, embryonic abnormalities and early embryonic death. Furthermore, the residual accumulation of mycotoxins in the meat is a public health concern. Various methods are used to assess the cytotoxicity induced by toxic agents, including inhibition of cellular growth, the evaluation of cell ability to synthesize macromolecules necessary for replication and the ability of this toxic agent to induce lipid peroxidation. Thus, the general objective of this study was to evaluate the in vitro effects of ochratoxin A, deoxynivalenol and zearalenone on the immune system of broiler chickens using as parameters, cell viability, enzymatic activity and oxidative stress. It was realized a primary culture of lymphocytes of birds and their isolation through density gradient centrifugation technique. Each mycotoxin has been added to the cell medium, at 80% confluence, at different concentrations (0.001, 0.01, 0.1 and 1 μg/ mL), analyzing cell viability, ecto-adenosine deaminase and acetylcholinesterase activity by colorimetric assays and lipid peroxidation through the malondialdehyde levels measured by thiobarbituric acid-reactive species test. All these parameters were evaluated at 24, 48 and 72 h, in triplicate and the results expressed as mean and standard error of the mean, using P<0.05 as significance level. The results showed that both ochratoxin A and deoxynivalenol induced lymphocyte proliferation and low adenosine deaminase activity, while zearalenone also induced proliferation, but no change in their enzyme activity. The assessment of lipid peroxidation demonstrated the following increasing cytotoxicity relation: deoxynivalenol>ochratoxin A>zearalenone; while in the evaluation of acetylcholinesterase activity this relationship was inversely proportional. This is the first in vitro study performed with ochratoxin A, deoxynivalenol and zearalenone on the primary culture of broiler chicken lymphocytes evaluating these parameters.

Tanto a luteína quanto o ácido linoleico conjugado (CLA) são nutrientes que já demonstraram efeitos benéficos na modulação do sistema imune em diferentes modelos experimentais, porém o uso de ambos em conjunto ainda não foi explorado. O CLA é incorporado nas membranas celulares e hipotetiza-se que a luteína, com seu potencial antioxidante, possa proteger a estrutura do CLA em situações de estresse oxidativo. Outra razão para se pensar na interação entre estes nutrientes é que já foram observados de forma individual, efeitos modulatórios do CLA e da luteína sobre receptores celulares que atuam em conjunto e possuem papel chave na regulação da resposta imune (receptores PPAR e RXR). Objetivou-se com o presente estudo avaliar o efeito da suplementação dietética de CLA e luteína no desempenho e na resposta imune de frangos de corte de 1 a 22 dias de idade. Foram testados 3 níveis de inclusão de CLA (0, 1 e 2%) em conjunto com luteína (0 e 50 mg/kg) na presença ou ausência de desafio imunológico com LPS. O CLA e a luteína apresentaram efeitos imunomodulatórios positivos, porém, não foi observada interação entre ambos os nutrientes para as avaliações relacionadas ao sistema imune. O CLA, adicionado em 2% na dieta, elevou a produção de IgY em resposta ao estímulo com albumina de soro bovino (BSA) e também foi capaz de aumentar a expressão de RXRα no fígado. A luteína diminuiu o óxido nítrico plasmático e também a expressão de TLR-4 no baço e de IL-1β e IL-12 no fígado apesar de ter aumentado a expressão de TLR-4 hepática. O desafio com LPS estimulou a resposta inflamatória aguda, evidenciado pela queda no ganho de peso, pelo aumento da relação fígado:peso corporal, pelo aumento na expressão de IL-1β e IL-12 hepáticos e diminuição na expressão de PPARα no duodeno e fígado e de PPARγ e RXRα no baço. Entretanto, nem a luteína e nem o CLA foram capazes de reverter ou atenuar os efeitos causados pelo desafio com LPS. Para desempenho, uma forte interação entre CLA e luteína foi observada, de forma que a suplementação com 1 ou 2% de CLA pioraram o peso corporal, o ganho de peso e a eficiência alimentar de 1 a 20 dias de idade, mas estes efeitos foram revertidos quando a luteína foi incluída na dieta com 1% de CLA. Concluiu-se que o CLA teve efeito benéfico sobre a resposta imune humoral, na dependência da sua dose. A luteína se mostrou como nutriente anti- inflamatório e também capaz de reverter o efeito negativo da inclusão dietética de 1% de CLA sobre o desempenho de frangos de corte. / Both lutein and conjugated linoleic acid (CLA) have beneficial effects on the modulation of the immune system. However, the simultaneous supplementation of both lutein and CLA has not yet been examined. CLA is incorporated into cell membranes, and it is hypothesized that lutein, as an antioxidant, protects CLA structure during oxidative stress. Additionally, an examination of the interaction of lutein and CLA is vital because individual effects of CLA and lutein on nuclear receptors that work together and have important roles in the immune response have been observed (PPAR and RXR receptors). The objective of this study was to evaluate the effects of dietary CLA and lutein supplementation on the performance and immune response of 1- to 22-d-old broiler chickens. Three CLA inclusion levels (0, 1 and 2%) and two lutein levels (0 and 50 mg/kg) were tested in the presence and absence of LPS immune challenge. Lutein and CLA showed positive immunomodulatory effects, but no interaction between these nutrients on the immune system was observed. A 2% CLA supplementation increased plasmatic IgY anti-BSA production and hepatic RXRα expression. Lutein decreased plasmatic nitric oxide and TLR-4 in the spleen and IL-1β and IL-12 in the liver in addition to increasing hepatic TLR-4. LPS challenge effectively promoted an acute inflammatory response, as illustrated by decreased body weight gain, increased liver:body weight ratio, increased expression of hepatic IL-1β and IL-12, decreased expression of PPARα in the duodenum and liver and decreased expression of PPARγ and RXRα in the spleen. However, neither lutein nor CLA reversed or attenuated the effects of the LPS challenge. A strong interaction between CLA and lutein was observed on performance: CLA supplementation at 1 or 2% decreased body weight, body weight gain and feed efficiency from 1 to 20 d old. However, these negative effects were reversed when lutein was included in the 1% CLA diet. In conclusion, CLA improved the humoral immune response (depending on CLA dose). Lutein was anti-inflammatory and could reverse the negative effects of dietary 1% CLA supplementation on broiler chicken performance.

Esta tese foi realizada objetivando comparar 4 programas alimentares, em dietas à base de milho e farelo de soja, formuladas com ou sem restrição de proteína bruta (PB), suplementadas ou não com L-Val e L-Ile, e usando diferentes níveis de lisina digestível (dig.). Os programas alimentares (PRG) foram: PRG 1, PB limitada a um mínimo (22,4, 21,1, 19,8, 18,4% para as fases pré-inicial, inicial, crescimento e final, respectivamente, com relações de AA:Lis definidos apenas para Met+Cis (0,72) e Tre (0,65); PRG 2, a PB não foi restrita e as relações estendidas para Val (0,77) e Ile (0,67); PRG 3, mesmas restrições do PRG 2 e suplementadas com L-Val; PRG 4, mesmas restrições do PRG 3, e suplementadas com L-Ile. Dois experimentos foram realizados, um com 1.800 e outro com 4.800 pintos machos Cobb x Cobb 500 de 1 dia de idade. No primeiro experimento, as rações foram formuladas usando os 4 PRG e níveis de Lis dig. de 1,324%, 1,217%, 1,095% e 1,006% ou 5% maiores, para cada fase, totalizando 8 tratamentos e 9 repetições cada. Para o segundo experimento, os 4 PRG foram utilizados até 1-21 d, totalizando 4 tratamentos com 48 repetições. E de 22 a 42 dias, cada PRG foi subdividido nos 4 PRG, passando cada PRG da fase anterior a receber todos os 4 PRG para as fases de crescimento e final, totalizando 16 tratamentos com 12 repetições cada. Não houve interação entre os tratamentos em ambos os experimentos, com exceção para o ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA) de 36 a 43d, no primeiro experimento, onde aves alimentadas com PRG 2 demonstraram melhorias no GP e CA quando alimentadas com um aumento de 5% no nível de Lis. Também, o GP e a CA acumulados aos 35 e 43d foram melhores quando as aves foram alimentadas com o PRG 2, sem diferença estatística para o PRG 3 e 4. Um aumento em 5% no nível de Lis dig. resultou na melhoria da CA acumulativa aos 43d. A gordura abdominal, como porcentagem da carcaça eviscerada aos 43d, foi maior para as aves alimentadas com a PRG 1. No segundo experimento, as aves alimentadas com PRG 2 tiveram melhor CA de 22 a 42d e de 1 a 42d, mas sem diferença estatística para os PRG 3 e 4. As aves alimentadas com PGR 1 de 1 a 42d apresentou o menor GP e o pior CA sem diferenças entre os PGR 2 e 3, e os PGR 3 e 4, respectivamente. Os dados do presente estudo demonstram que a suplementação de dietas para frangos de corte com fontes sintéticas dos cinco primeiros AA limitantes permitiram resultados de desempenho semelhantes a uma dieta com PB restrita a um valor mínimo. / This thesis was carried out to compare four corn-soy feeding programs formulated with or without crude protein (CP) restrictions supplemented with or without L-Val and L-Ile, and using different digestible (dig.) Lys levels. Feeding programs (PRG) were: PRG 1, CP was restricted to a minimum (22.4, 21.1, 19.8, 18.4% for pre starter, starter, grower and finisher phases, respectively) with AA to Lys ratios set only for TSAA (0.72) and Thr (0.65); PRG 2, CP was not restricted while minimum ratios were also extended to Val (0.77) and Ile (0.67); PRG 3, restrictions were as in PRG 2 but with L-Val added; PRG 4, restrictions were as in PRG 3, but with L-Ile added. For this two experiments were conducted, one using 1,800 and the other using 4,800 oneday- old Cobb 500 male broiler chicks. For the first experiment, feeds had formulated using the 4 PRG and dig. Lys as 1.324%, 1.217%, 1.095% and 1.006% or 5% higher, for each phase, totaling 8 treatments with 9 replicates each. For the second experiment, the 4 PRG were used from 1 to 21 d, totaling 4 treatments with 48 replicates. From 22 to 42d, each PRG was subdivided in 4 PRG having the same rational as it was done to 21d, where each of the 4 PRG began receiving all 4 PRG for grower and finisher phases, totaling 16 treatments with 12 replicates each. No interaction was found between treatments in both experiments, with one exception for body weight gain (BWG) and feed conversion ratio (FCR) from 36 to 43d, in the first experiment, with birds fed PRG 2 demonstrating improvements in BWG and FCR when fed the 5% increasing in dig. Lys. And also, cumulative BWG and FCR at 35 and 43d and in each individual feeding phases showed broilers from PRG 2 having the best BWG and FCR; however, mean separations using Tukey showed no difference from birds fed PRG 3 and 4. Feeding a dietary program with 5% increase in dig. Lys resulted in improvement in cumulative FCR at 43d. Abdominal fat, as a percentage of the eviscerated carcass at 43d, was highest for birds fed the PRG 1. For the second experiment, birds fed with PRG 2 led to the best FCR from 22 to 42d and from 1 to 42d, but without statistical difference from PRG 3 and 4. Birds fed PGR 1 from 1 to 42d showed the lowest BWG and the highest FCR without statistical differences from PGR 2 and 3 and PGR 3 and 4, respectively. Data from the current study demonstrate that the supplementation of broiler diets with crystalline sources of the first five limiting AA allowed performance results similar to those produced when CP is restricted to a minimum.

A justificativa para o número de animais em experimentos é uma preocupação inerente aos pesquisadores que buscam precisão nos resultados observando as recomendações dos guias de cuidados com animais em pesquisa e ensino. Embora seja do conhecimento de estudiosos a importância do número de repetições, uma vez que o seu aumento resulta em estimativas mais precisas do erro experimental, o seu cálculo no planejamento de experimentos ainda provoca incertezas entre pesquisadores. A determinação do tamanho da amostra também tem fundamental importância nesse contexto, pois a questão que surge é: Aumentar o tamanho da amostra em detrimento do número de repetições ou diminuir o tamanho da amostra favorecendo o aumento no número de repetições? A resposta dependerá da variabilidade dentro da parcela, da variação residual (variância entre parcelas) e dos recursos disponíveis. No presente trabalho, estudou-se a relação entre a variabilidade dentro da parcela e a variância do erro para dados de peso de frangos de corte em experimento completamente casualizado com número diferente de indivíduos por parcela. Tal relação foi confrontada com o número necessário de repetições para detecção de diferenças, entre as médias dos tratamentos, de 5 e 50 gramas, respectivamente, para os 7 e 42 dias. Verificou-se uma grande variabilidade entre os pesos individuais dentro da parcela, provavelmente, consequente da diferença entre as distribuições de pesos dos machos e das fêmeas que se encontravam dentro da mesma parcela no experimento descrito. Constatou-se o baixo poder de teste estatístico para detecção de 5 e 50 gramas, respectivamente, para os 7 e 42 dias e a necessidade de se aumentar o número necessário de repetições, para experimentos similares, no caso em que se queira detectar tais diferenças entre os pesos com poder de teste de, aproximadamente, 0,80 e nível de 5% de significância. / The justification for the number of animals in experiments is an inherent concern for researchers seeking accurate results noting the recommendations of care guides with animals in research and teaching . Although it is known to scholars the importance of the number of replicates, since its increase results in more accurate estimates of experimental error, the calculation in planning experiments still causes uncertainty among researchers. The determination of sample size also has fundamental importance in this context because the question arises: Increasing the sample size rather than the number of replicates or decrease the size of the sample favoring an increase in the number of replicates? The answer will depend on the variability within the plot, the residual variance (variance between plots) and available resources. In this work, we studied the relationship between the variability within the plot and the error variance for data on weight of broilers in a completely randomized experiment with different number of individuals per plot. This relationship was compared to the number of replicates needed to detect differences between the treatment means of 5 and 50 grams, respectively, for 7 and 42 days. There was a large variability between individual weights within the plot, probably resulting from the difference between the distributions of weights of males and females who were in the same plot in the experiment described. It was found low power statistical test for detecting 5 and 50 grams, respectively, for 7 and 42 days and the need to increase the number of replicates required for similar experiments in the case where one wants to detect such differences the weights with the power of approximately 0,80 and the level of significance 5%.

A produção de frangos de corte é um dos maiores segmentos em crescimento no mundo. É um importante fornecedor de proteínas para consumo humano, devido a sua facilidade e rapidez de produção. Devido a essa demanda, surgiram alguns problemas de manejo, que causam o aparecimento de problemas fisiológicos. Os problemas mais relevantes são relacionados com estresse, tanto físico como psicológico. No capítulo 1 estão descritas as alterações nas estruturas das miofibras e a distribuição de água na musculatura de frangos causada pelo estresse térmico em câmara climática. O estresse térmico pode causar alterações na fisiologia das aves, que levam a mudanças na cor, capacidade de retenção de água e maciez dos produtos cárneos, aspectos que influenciam diretamente na aquisição do produto pelo consumidor. Foram avaliados os seguintes parâmetros: hematócrito, creatina quinase plasmática, peso e rendimento de carcaça, vísceras, peito, pernas, asas e percentagem de água livre e ligada no peito. Conclui-se que a redução do hematócrito pode ser uma medida para prevenir uma possível hipovolemia devido à perda de água, principalmente pela hiperventilação. Embora exista efeito na estrutura da miofibra devido ao estresse térmico agudo, a drenagem de água de tecidos e órgãos nesta condição parece não envolver os músculos da ave, especialmente a musculatura do peito. No capítulo 2, estão descritas as modificações estruturais ao nível das proteínas musculares, que compõem a fibra muscular. O estresse térmico agudo causa alterações nas propriedades das miofibrilas, que afetam as características funcionais da carne, principalmente a capacidade de retenção de água. O presente experimento teve como objetivo identificar mudanças na proteólise miofibrilar e migração entre as frações miofibrilar e sarcoplasmática, decorrentes do estresse térmico pré-abate, através do índice de fragmentação miofibrilar (MFI), SDS-PAGE das frações miofibrilar e sarcoplasmática e imunodetecção de vinculina. Concluiu-se que a taxa de fragmentação miofibrilar pode ser prejudicada pelo estresse térmico agudo e que modificações na fração sarcoplasmática são observados em carne pálida, independente da condição ambiental pré-abate. / The production of broiler chickens is one of the biggest segments in growth in the world. It is an important protein supplier for human consumption, due to its easiness and velocity of production. Owed to this demand, some handling problems occurred and cause the appearance of physiological problems. The most important problems are related with stress, in such a way physicist as psychological. In chapter 1 the alterations in the structures of myofibril and the water distribution in the muscle of broilers caused by acute heat stress in climatic chamber are described. Acute heat stress can change birds physiology and leads to alterations in the colour, water holding capacity and tenderness of meat products, factors that affect consumers purchase decision. The following parameters had been evaluated: hematocrit, plasmatic creatine kinase, weight and yield of carcass, visceras, breast, legs, wings, back and percentage of free water in the breast. It is concluded that the hematocrit and creatine kinase can change due to acute heat stress. The weight of carcass and its parts is not altered. The percentage of free and bound water can change due to acute heat stress.In chapter 2, the structural modifications of the muscular proteins are described. The proteins are responsible for the structure of myofibrils and are related with the physical and biochemists processes which determine the characteristics of the meat product. Acute heat stress (AHS) causes alterations in the properties of myofibrils affecting functional characteristics of the meat, mainly the water holding capacity. The present experiment aimed to identify changes in myofibrillar proteolysis and migration between the myofibrillar and sarcoplasmatic fractions due to pre-slaughter heat stress. The myofibrillar fragmentation index (MFI), SDS-PAGE of the muscle protein fractions and western blot of vinculin were used. Its concluded that that AHS can be harmful in the process myofibrillar proteolysis. In the SDS-PAGE we observed modifications in sarcoplasmatic fraction, in pale meat, independent of the environmental condition.

Este trabalho propõe um modelo de qualidade e produtividade para o préabate de frangos de corte, processo que fornece a matéria prima inicial aos abatedouros. Existe grande interface de responsabilidades nas operações do préabate. Além disso, estas operações ocorrem em etapas e locais que vão desde os aviários até a recepção dos abatedouros. Estes fatores tornam muito difícil o controle do processo de pré-abate e qualquer problema ou perda incidirá sobre todos os processos subsequentes. O modelo foi construído com base em uma ampla revisão sobre o assunto, um estudo de caso descritivo de uma empresa do ramo e através do auxílio de especialistas do meio produtivo e acadêmico. Consiste de quatro módulos: módulo 1-aviários, apanha e carregamento, módulo 2-transporte e módulo 3-espera e pendura. O quarto módulo aborda o controle do processo e melhorias. Dentre as proposições do modelo destacam-se: o dimensionamento das equipes de apanha, frota e do galpão de espera; treinamento das equipes de apanha; uma série de quadros e tabelas que permitem a programação de coleta dos aviários, com estratégia de gerenciamento de riscos do estresse térmico por calor das aves, utilizando um índice de conforto térmico; um método de estratificação para identificar onde e em que parte das aves ocorreram hematomas e fraturas; por fim propõe-se a utilização de cartas de controle de medidas individuais de Shewart para monitoramento do processo. A validação do modelo ocorreu em duas empresas de grande porte. A conformidade foi de 78,8% na primeira empresa e 87,6% na segunda, em 113 recomendações técnicas rotineiras propostas. O modelo indicou dimensionamento adequado de equipes de apanha e frota para a primeira empresa e superdimensionamento na segunda nestes dois itens. Os galpões de espera das duas empresas comportam mais caminhões do que o necessário para o fluxo atual de abate, indicando que podem suportar ampliação deste fluxo. O método de estratificação apresentou restrições quanto à aplicabilidade nas duas empresas. A utilização de cartas de controle foi bem aceita para monitorar o processo de préabate. Os resultados indicam bom potencial de transferibilidade do estudo desenvolvido para as empresas nacionais de frangos de corte. / This paper puts forward a model of quality and productivity for the pre-slaughter of broilers, the process that begins with the capture of the birds at the site where they have been bred and ends with their being humanely killed in the slaughterhouse and their carcasses used as the initial raw material. There is a huge interface of responsibilities in pre-slaughter operations. Moreover, these operations occur in stages and locations ranging from the poultry houses to the receipt of the birds in the slaughterhouses. These factors make it very difficult to control the pre-slaughter process and any problem or loss will have an impact on all subsequent processes. The model was built after a comprehensive review of the subject and is based on a descriptive case study in an agrobusiness. It benefited from the assistance of experts from the productive sector and the academic world. The model consists of four modules: Module 1-poultry houses, catching and crating; module-2- transportation; module 3-holding and hanging. The fourth module deals with control of the process and improvements. Among the propositions of the model, the following are emphasized: sizing the teams of catchers, the fleet and holding area; training the teams of catchers; a series of charts and tables that allow collection from the poultry houses to be scheduled, with a strategy for managing the risks of the birds suffering from thermal stress because of excess heat by using a thermal comfort index; a stratification method to identify at what point during the process and on what part of the bird bruises and fractures occur; and finally the use of Shewhart control charts for individual measurements so as to monitoring the process is proposed. Validation of the model took place in two large companies. Conformity was 78.8% in the first company and 87.6% in the second, in 113 routine technical recommendations proposed. The model indicated the sizing of teams of catchers and the fleet were appropriate for the first company and there was over-sizing in the second company with regard to these two items. The holding areas of the two companies hold more trucks than necessary for the current flow of slaughter, which indicates they can support expansion of this flow. The stratification method revealed restrictions as to its applicability in the two companies. The use of control charts was readily accepted so as to monitor the pre-slaughter process. The results indicate there is good potential for the study to be transferable to national broiler chicken companies.

O aumento do custo das matérias primas para produção de rações e a crescente preocupação com o meio ambiente têm alavancado diversos estudos com enzimas exógenas adicionadas na alimentação de aves. No presente estudo, uma protease foi adicionada em dietas de frangos de corte formuladas com milho, farelo de soja e farinha de carne e ossos. Utilizou-se um total de 1764 pintos de 1 dia de idade machos Ross X Ross 308 alojados em 63 boxes, com 28 aves cada. Estas aves foram divididas em sete tratamentos, com nove repetições cada. O programa alimentar teve uma dieta Inicial do alojamento até 21 d (2915 kcal EM/kg. 21,5% PB) e uma dieta crescimento até 40 d (3000 kcal EM/kg. 19,0% PB). As dietas foram suplementadas com 0, 100, 200, 400, 800, 1600 g/ton de um mono-componente enzimático proteolítico. Dióxido de titânio (1 kg/ton) foi adicionado como um marcador indigestível na dieta na última semana. Os tratamentos foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado. Aos 40 d, 8 aves de cada repetição foram retiradas aleatoriamente e sacrificadas após insensibilização elétrica. Estas aves foram processadas e tiveram seu conteúdo ileal coletado e homogeneizado dentro de cada repetição para análise de aminoácidos. Não houve resposta significativa para ganho de peso corporal, no entanto, conversão alimentar apresentou uma melhora linear (p 0.05) de acordo com o aumento da concentração enzimática na dieta. A análise de contraste entre as aves alimentadas ou não com a protease apresentou uma melhora significativa da uniformidade do peso corporal aos 40 d nas aves suplementadas com a protease (p 0,05). Além disso, aves alimentadas protease mostraram melhora significativa (p 0,05) na digestibilidade de met e his em 2,6 e 2,1 %, respectivamente. / Increased costs of feedstuffs for animal production and growing concerns with the environment have been fuelling studies with exogenous enzymes added to poultry feeds. In the present study a protease was added to broiler diets formulated with corn. soybean meal and meat and bone meal. A total of 1,764 male Ross X Ross 308 broiler chicks were placed in 63 floor pens. 28 in each. Birds were divided into seven treatments with nine replications each. The feeding program had a starter from placement to 21 d (2,915 kcal ME/Kg. 21.5% CP) and a grower diets to 40 d (3000 Kcal ME/kg. 19.0% CP). Diets were supplemented with 0, 100, 200, 400, 800 e 1,600 g/ton of a mono component protease. Titanium dioxide was added as an indigestible maker in the last week’s diet at 1 kg/ton. Treatments were distributed in a complete randomized design. At 40 d. 8 broilers were randomly taken from each pen and sacrificed after electrical stunning. Ileal contents were collected from each processed bird and pooled by pen for amino acid analyses. There was no significant response for body weight gain; however. FCR was linearly improved (p 0.05) as enzyme was gradually increased in the diets. The contrast analysis between birds fed or not with the protease demonstrated significant improvement in body weight uniformity at 40 d for those fed the protease (p 0.05). Also. birds fed any level of the protease showed significant (p 0.05) improvements in the digestibility of methionine and histidine by 2.6 and 2.1 %. respectively.

Tanto a luteína quanto o ácido linoleico conjugado (CLA) são nutrientes que já demonstraram efeitos benéficos na modulação do sistema imune em diferentes modelos experimentais, porém o uso de ambos em conjunto ainda não foi explorado. O CLA é incorporado nas membranas celulares e hipotetiza-se que a luteína, com seu potencial antioxidante, possa proteger a estrutura do CLA em situações de estresse oxidativo. Outra razão para se pensar na interação entre estes nutrientes é que já foram observados de forma individual, efeitos modulatórios do CLA e da luteína sobre receptores celulares que atuam em conjunto e possuem papel chave na regulação da resposta imune (receptores PPAR e RXR). Objetivou-se com o presente estudo avaliar o efeito da suplementação dietética de CLA e luteína no desempenho e na resposta imune de frangos de corte de 1 a 22 dias de idade. Foram testados 3 níveis de inclusão de CLA (0, 1 e 2%) em conjunto com luteína (0 e 50 mg/kg) na presença ou ausência de desafio imunológico com LPS. O CLA e a luteína apresentaram efeitos imunomodulatórios positivos, porém, não foi observada interação entre ambos os nutrientes para as avaliações relacionadas ao sistema imune. O CLA, adicionado em 2% na dieta, elevou a produção de IgY em resposta ao estímulo com albumina de soro bovino (BSA) e também foi capaz de aumentar a expressão de RXRα no fígado. A luteína diminuiu o óxido nítrico plasmático e também a expressão de TLR-4 no baço e de IL-1β e IL-12 no fígado apesar de ter aumentado a expressão de TLR-4 hepática. O desafio com LPS estimulou a resposta inflamatória aguda, evidenciado pela queda no ganho de peso, pelo aumento da relação fígado:peso corporal, pelo aumento na expressão de IL-1β e IL-12 hepáticos e diminuição na expressão de PPARα no duodeno e fígado e de PPARγ e RXRα no baço. Entretanto, nem a luteína e nem o CLA foram capazes de reverter ou atenuar os efeitos causados pelo desafio com LPS. Para desempenho, uma forte interação entre CLA e luteína foi observada, de forma que a suplementação com 1 ou 2% de CLA pioraram o peso corporal, o ganho de peso e a eficiência alimentar de 1 a 20 dias de idade, mas estes efeitos foram revertidos quando a luteína foi incluída na dieta com 1% de CLA. Concluiu-se que o CLA teve efeito benéfico sobre a resposta imune humoral, na dependência da sua dose. A luteína se mostrou como nutriente anti- inflamatório e também capaz de reverter o efeito negativo da inclusão dietética de 1% de CLA sobre o desempenho de frangos de corte. / Both lutein and conjugated linoleic acid (CLA) have beneficial effects on the modulation of the immune system. However, the simultaneous supplementation of both lutein and CLA has not yet been examined. CLA is incorporated into cell membranes, and it is hypothesized that lutein, as an antioxidant, protects CLA structure during oxidative stress. Additionally, an examination of the interaction of lutein and CLA is vital because individual effects of CLA and lutein on nuclear receptors that work together and have important roles in the immune response have been observed (PPAR and RXR receptors). The objective of this study was to evaluate the effects of dietary CLA and lutein supplementation on the performance and immune response of 1- to 22-d-old broiler chickens. Three CLA inclusion levels (0, 1 and 2%) and two lutein levels (0 and 50 mg/kg) were tested in the presence and absence of LPS immune challenge. Lutein and CLA showed positive immunomodulatory effects, but no interaction between these nutrients on the immune system was observed. A 2% CLA supplementation increased plasmatic IgY anti-BSA production and hepatic RXRα expression. Lutein decreased plasmatic nitric oxide and TLR-4 in the spleen and IL-1β and IL-12 in the liver in addition to increasing hepatic TLR-4. LPS challenge effectively promoted an acute inflammatory response, as illustrated by decreased body weight gain, increased liver:body weight ratio, increased expression of hepatic IL-1β and IL-12, decreased expression of PPARα in the duodenum and liver and decreased expression of PPARγ and RXRα in the spleen. However, neither lutein nor CLA reversed or attenuated the effects of the LPS challenge. A strong interaction between CLA and lutein was observed on performance: CLA supplementation at 1 or 2% decreased body weight, body weight gain and feed efficiency from 1 to 20 d old. However, these negative effects were reversed when lutein was included in the 1% CLA diet. In conclusion, CLA improved the humoral immune response (depending on CLA dose). Lutein was anti-inflammatory and could reverse the negative effects of dietary 1% CLA supplementation on broiler chicken performance.

Esta tese foi realizada objetivando comparar 4 programas alimentares, em dietas à base de milho e farelo de soja, formuladas com ou sem restrição de proteína bruta (PB), suplementadas ou não com L-Val e L-Ile, e usando diferentes níveis de lisina digestível (dig.). Os programas alimentares (PRG) foram: PRG 1, PB limitada a um mínimo (22,4, 21,1, 19,8, 18,4% para as fases pré-inicial, inicial, crescimento e final, respectivamente, com relações de AA:Lis definidos apenas para Met+Cis (0,72) e Tre (0,65); PRG 2, a PB não foi restrita e as relações estendidas para Val (0,77) e Ile (0,67); PRG 3, mesmas restrições do PRG 2 e suplementadas com L-Val; PRG 4, mesmas restrições do PRG 3, e suplementadas com L-Ile. Dois experimentos foram realizados, um com 1.800 e outro com 4.800 pintos machos Cobb x Cobb 500 de 1 dia de idade. No primeiro experimento, as rações foram formuladas usando os 4 PRG e níveis de Lis dig. de 1,324%, 1,217%, 1,095% e 1,006% ou 5% maiores, para cada fase, totalizando 8 tratamentos e 9 repetições cada. Para o segundo experimento, os 4 PRG foram utilizados até 1-21 d, totalizando 4 tratamentos com 48 repetições. E de 22 a 42 dias, cada PRG foi subdividido nos 4 PRG, passando cada PRG da fase anterior a receber todos os 4 PRG para as fases de crescimento e final, totalizando 16 tratamentos com 12 repetições cada. Não houve interação entre os tratamentos em ambos os experimentos, com exceção para o ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA) de 36 a 43d, no primeiro experimento, onde aves alimentadas com PRG 2 demonstraram melhorias no GP e CA quando alimentadas com um aumento de 5% no nível de Lis. Também, o GP e a CA acumulados aos 35 e 43d foram melhores quando as aves foram alimentadas com o PRG 2, sem diferença estatística para o PRG 3 e 4. Um aumento em 5% no nível de Lis dig. resultou na melhoria da CA acumulativa aos 43d. A gordura abdominal, como porcentagem da carcaça eviscerada aos 43d, foi maior para as aves alimentadas com a PRG 1. No segundo experimento, as aves alimentadas com PRG 2 tiveram melhor CA de 22 a 42d e de 1 a 42d, mas sem diferença estatística para os PRG 3 e 4. As aves alimentadas com PGR 1 de 1 a 42d apresentou o menor GP e o pior CA sem diferenças entre os PGR 2 e 3, e os PGR 3 e 4, respectivamente. Os dados do presente estudo demonstram que a suplementação de dietas para frangos de corte com fontes sintéticas dos cinco primeiros AA limitantes permitiram resultados de desempenho semelhantes a uma dieta com PB restrita a um valor mínimo. / This thesis was carried out to compare four corn-soy feeding programs formulated with or without crude protein (CP) restrictions supplemented with or without L-Val and L-Ile, and using different digestible (dig.) Lys levels. Feeding programs (PRG) were: PRG 1, CP was restricted to a minimum (22.4, 21.1, 19.8, 18.4% for pre starter, starter, grower and finisher phases, respectively) with AA to Lys ratios set only for TSAA (0.72) and Thr (0.65); PRG 2, CP was not restricted while minimum ratios were also extended to Val (0.77) and Ile (0.67); PRG 3, restrictions were as in PRG 2 but with L-Val added; PRG 4, restrictions were as in PRG 3, but with L-Ile added. For this two experiments were conducted, one using 1,800 and the other using 4,800 oneday- old Cobb 500 male broiler chicks. For the first experiment, feeds had formulated using the 4 PRG and dig. Lys as 1.324%, 1.217%, 1.095% and 1.006% or 5% higher, for each phase, totaling 8 treatments with 9 replicates each. For the second experiment, the 4 PRG were used from 1 to 21 d, totaling 4 treatments with 48 replicates. From 22 to 42d, each PRG was subdivided in 4 PRG having the same rational as it was done to 21d, where each of the 4 PRG began receiving all 4 PRG for grower and finisher phases, totaling 16 treatments with 12 replicates each. No interaction was found between treatments in both experiments, with one exception for body weight gain (BWG) and feed conversion ratio (FCR) from 36 to 43d, in the first experiment, with birds fed PRG 2 demonstrating improvements in BWG and FCR when fed the 5% increasing in dig. Lys. And also, cumulative BWG and FCR at 35 and 43d and in each individual feeding phases showed broilers from PRG 2 having the best BWG and FCR; however, mean separations using Tukey showed no difference from birds fed PRG 3 and 4. Feeding a dietary program with 5% increase in dig. Lys resulted in improvement in cumulative FCR at 43d. Abdominal fat, as a percentage of the eviscerated carcass at 43d, was highest for birds fed the PRG 1. For the second experiment, birds fed with PRG 2 led to the best FCR from 22 to 42d and from 1 to 42d, but without statistical difference from PRG 3 and 4. Birds fed PGR 1 from 1 to 42d showed the lowest BWG and the highest FCR without statistical differences from PGR 2 and 3 and PGR 3 and 4, respectively. Data from the current study demonstrate that the supplementation of broiler diets with crystalline sources of the first five limiting AA allowed performance results similar to those produced when CP is restricted to a minimum.