A utilização de biomateriais a base de fosfato de cálcio tem revolucionado a medicina no reparo de partes danificadas do sistema ósseo. Dentre estes, os cimentos a base de fosfatos de cálcio de pega hidráulica tem despertado grande interesse em função de sua biocompatibilidade e endurecimento “in situ”, o que permite uma maior facilidade de manipulação e adaptação à forma e dimensões do defeito ósseo. Entretanto, estes cimentos possuem baixa resistência mecânica quando comparados com os ossos do corpo humano. Neste presente trabalho foi estudado a obtenção de pós de cimento de fosfato de cálcio e adicionados a fibras de poli(ácido co-glicólico) (PLGA) e Alginato de Sódio, visando o aumento das propriedades mecânicas destes cimentos. Foi utilizado um novo método de obtenção de fibras por gotejamento em reagente, tanto para o PLGA e o Alginato de Sódio, sendo depois congeladas essas fibras e liofilizadas. Ambos os métodos de obtenção de fibras por gotejamento foram Patenteados, além de publicações em revistas e congressos internacionais. Com este mecanismo foi possível obter-se fibras por método inovador e reforçar a matriz, o que favoreceu o aumento das propriedades mecânicas, permitindo, assim, a obtenção de materiais mais resistentes. Os materiais obtidos foram utilizados na construção de scaffolds para crescimento tecidual, possibilitando manter uma maior integridade mecânica. / The use of biomaterials based on the calcium phosphate has revolutionized the medicine to repair damaged parts of the skeletal system. Among these, the cements based calcium phosphates handle hydraulic has been much interest due to its biocompatibility and hardening "in situ", allowing greater ease of handling and adjustment to the shape and dimensions of the bone defect. However, these cements have lower mechanical strength when compared with the bones of the human body. In the present work to obtain powders of cement of calcium phosphate and added to fibers of poly (co-glycolic acid) (PLGA) and sodium alginate, in order to increase the mechanical properties of these cements. We used a novel method for obtaining fibers in drip reagent for both PLGA and sodium alginate; the fibers are then frozen and lyophilized. Both methods of obtaining fibers were patented drip, as well as publications in international journals and conferences. With this mechanism it was possible to obtain novel method for fibers and strengthen the matrix, thus favoring increased mechanical properties, thus allowing obtaining more resistant materials. The materials were used in the construction of scaffolds for tissue growth, allowing greater maintain mechanical integrity.

Made available in DSpace on 2014-06-12T17:35:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4434_1.pdf: 1195233 bytes, checksum: 867173a6365d8bbee6de86e619be8231 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Canais iônicos são proteínas que se encontram nas membranas biológicas. Essas estruturas protéicas podem assumir diferentes estados conformacionais, abertos e fechados, fenômeno este denominado de cinética de canais iônicos. A cinética das transições de um estado para o outro depende da barreira de energia potencial que separa os estados e pode ser controlada por campo elétrico, íons, substâncias químicas e outros agentes. Os tempos de permanências da proteína em cada um desses estados conformacionais têm sido modelados assumindo-se que este processo é Markoviano. Um modelo fractal também foi proposto para modelar a cinética de canal iônico (LIEBOVITCH et al., 1987). Neste trabalho utilizamos a análise R/S de Hurst para testar a correlação de longo alcance na cinética de um canal para potássio ativado por cálcio em células de Leydig. O coeficiente de Hurst H, um parâmetro que mostra a memória existente em um processo cinético (NOGUEIRA et al., 1995), foi calculado para um registro de um canal para potássio ativado por cálcio e encontrou-se um valor de H = 0,64 ± 0,064 (n=5), estatisticamente diferente daquele calculado para um processo sem memória. Neste trabalho, quando a análise R/S foi aplicada à seqüência temporal de aberturas e fechamentos obtida de um canal iônico simulado, usando-se os modelos Markoviano e fractal, mostrou-se que esses modelos não puderam descrever a correlação de longo alcance encontrada nos dados experimentais. Como conclusão, este trabalho mostra que: (i) tempos de permanência para aberturas e fechamentos do canal para potássio ativado por cálcio de células de Leydig apresentam correlação de longo alcance; (ii) os modelos Markoviano e fractal, que descrevem adequadamente as distribuições dos tempos de permanências do canal nos estados aberto e fechado, não são adequados para descrever a memória encontrada na cinética desse canal

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:59:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10940_Dissertação Messias Bicalho Cevolani.pdf: 9606488 bytes, checksum: d3a905de90140d93166c7de9e1064c85 (MD5) Previous issue date: 2017-04-10 / Este trabalho trata da caracterização da técnica de Análise Termobarométrica e aplicação à decomposição do Oxalato de Cálcio Monohidratado (CaC2O4.H2O), que é realizada em três etapas com produtos gasosos distintos. Com esta técnica é possível obter simultaneamente medidas diretas de temperatura e pressão durante o processo de tratamento térmico, que é realizado a volume constante dentro de uma ampola de quartzo. Consequentemente, a partir das medidas de pressão e temperatura foi possível identificar parâmetros termodinâmicos relacionados à transição de fase e conservação de energia como entalpia, entropia e energia livre de Gibbs. As amostras foram decompostas variando-se sistematicamente os parâmetros experimentais iniciais como a massa, taxa de aquecimento, temperatura final do tratamento térmico e pressão inicial. Os resultados obtidos permitiram a identificação e descrição de vários fenômenos físicos relacionados ao processo de decomposição do composto em questão. Foi possível identificar que o aumento da pressão deslocou a temperatura de transição da primeira e da terceira etapas para níveis mais elevados. Na segunda etapa de transição, o aumento da pressão fez a temperatura de transição deslocar-se para níveis mais baixos. Foi identificado que o aumento da pressão para cada etapa de transição é proporcional ao aumento da massa. Desta forma a variação da massa também desloca as temperaturas de transição das três etapas de decomposição. Através da análise das pressões iniciais de cada experimento foi possível identificar pequenas quantidades de H2O em forma de umidade nas amostras e no recipiente dedicado ao processo. A quantidade de H2O relativa a esta umidade é exponencial em relação à pressão inicial utilizada para fechamento das próprias ampolas. Neste trabalho também foi explorado algumas limitações da técnica de Análise Termobarométrica quando aplicada à decomposição do CaC2O4.H2O. Nesse sentido, a faixa de temperatura limitada a 800°C foi identificada como a mais adequada para a realização desse tipo de experimento.

Orientadores: Luis Antonio Violin Dias Pereira, Luis Guillermo Bahamondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T16:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santis_LucianaHelenade_M.pdf: 1888365 bytes, checksum: c15bc77fd1c517ee962df896bde92224 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O espermatozóide é uma célula altamente especializada, uma vez que apresenta diferenciações morfofisiológicas que garantem o sucesso da fecundação. Com o objetivo de adquirir a capacidade de fecundação precisam passar por três processos seqüenciais, maturação epididimária, capacitação e reação acrossômica (RA). A capacitação é um processo que acontece no trato reprodutor feminino e define-se como uma mudança bioquímica na membrana plasmática do espermatozóide, sendo a presença de progesterona e o aumento na concentração intracelular do cálcio ('Ca POT +2¿) eventos característicos e obrigatórios para a posterior RA. O levonogestrel (LNG) é um progestágeno sintético, semelhante a progesterona, o qual tem sido usado como contraceptivo feminino, seja na contracepção de emergência (CE), nas pílulas contraceptivas combinadas ou com o dispositivo intra-uterino (DIU). Entretanto, na literatura não há dados que relacionem a eficácia contraceptiva do lenovogestrel com possíveis efeitos deste hormônio sobre os espermatozóides humanos. Assim, com o objetivo de adicionar dados a respeito do mecanismo de ação contraceptiva do LNG, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de 5 concentrações de LNG, comparáveis as concentrações encontradas no plasma sanguíneo de mulheres, após a ingestão de LNG sob a forma de (CE) com a concentração intracelular do cálcio em espermatozóides capacitados de homens férteis. Um total de 24 amostras de sêmen, provenientes de 4 homens férteis foram avaliadas. Os espermatozóides foram selecionados através de um gradiente de Percoll, e foram submetidas a um período de capacitação. Às amostras foi adicionado o corante Fura2/AM e a seguir estas foram expostas às concentrações de 8, 10, 14, 1.000 e 10.000 ng/mL de LNG e a dois controles, um positivo e outro negativo, sendo respectivamente a progesterona (32 'mu' M = 11.000 ng/mL) e a meio de cultivo human tubal fluid (HTF). A seguir as amostras foram avaliadas através da espectrofotometria de fluorescência, com exitação de 340 nm e emissão de 510 nm. A taxa de fluorescência foi convertida em medidas de concentração intracelular de cálcio ([('Ca POT 2+¿]i), utilizando a equação de Grynkiewicz et al. (1985), a qual demonstrou que as concentrações de 8, 10, 14 e 1.000 ng/mL de LNG foram capazes de induzir um aumento na [('Ca POT 2+¿]i significativamente maior quando comparados ao obtido com HTF, e significativamente menor que ao obtido com progesterona (o indutor natural), excetuando-se a concentração de 10.000 ng/ml (32 'mu' M) de LNG, a qual foi estatisticamente similar que a progesterona 11.000 ng/ml (32 'mu' M). Assim, é possível sugerir que o LNG in vitro, em baixas concentrações, aumente a [('Ca POT 2+¿]i nos espermatozóides. No entanto, este mecanismo, de maneira isolada, não deva ser o responsável pela indução da RA. Entretanto a [('Ca POT 2+¿]i obtida através de altas concentrações de LNG (10.000 ng/ml) pode ser sim, um possível mecanismo de ação do LNG como droga contraceptiva / Abstract: The spermatozoa is a highly specialized cell because it contains morfophysiological modifications that guarantees fecundation success. Spermatozoa must undergo three sequential changes before they acquire their fertilizing capacity: maturation in epididymis, capacitation and acrosome reaction (RA). Capacitation is a process that takes place in the female reproductive tract and is defined as a biochemical modification on the spermatozoa plasmatic membrane. The presence of progesterone (P) and the intracellular calcium concentration increase inside the spermatozoa are typical and obligatory events in the capacitation stage for further RA. Levonogestrel (LNG) is a synthetic progestin, similar to P, which has being used as a female contraceptive in several manners, among them they are: emergency contraception (EC), contraceptive pills combine and with the intrauterine system (IUS). Nevertheless, there are no available data or the scientific literature that correlate LNG contraceptive efficacy with possible effects of the hormones over human spermatozoa. Therefore, to add data over the contraceptive action mechanism of LNG, the aim of this study was to evaluate the effect of 5 concentrations of LNG somes comparable to the levels found in serum following ingestion of LNG as EC on the calcium intracellular concentration (['Ca POT 2+¿]i) rates of capacitated spermatozoa of fertile men. A total of 24 semen samples from 4 fertile men were evaluated. The spermatozoa were selected by Percoll gradient, following incubation with human tubal fluid medium supplemented with bovine serum albumin (HTF/BSA) under capacitating conditions. The sperm suspensions were incubated with Fura2/AM Subsequently the cells were exposed to the following concentration of LNG: 8, 10, 14, 1,000 and 10,000 ng/mL, and two controls (positive and negative). The positive control was P (32 'mu' M=11,000 ng/ml) and the negative one was medium (HTF). Cells were transferred to a quartz cuvette to make the reading in the spectrofluorometer at 340 nm excitation with emission at 510nm. Fluorescence measurements were converted to ['Ca POT 2+¿]i by the equation of Grynkiewicz et al. (1985). The Grynkiewicz equation shown that LNG concentration of 8, 10, 14, and 1,000 ng/mL were able to induce increase in the ['Ca POT 2+¿]i with significantly higher values, when compared with the rate obtained with HTF medium ( as a negative control), and significantly lower than the rate obtained with natural P (as a positive control). However, the exception was the LNG concentration of 10,000 ng/mL (32 'mu' M) in which values of ['Ca POT 2+¿]i were similar to those observed with P at a concentration of 11,000 ng/mL (32 'mu' M). In conclusion, it is possible to suggest that although LNG in vitro, in low concentration, increase the ['Ca POT 2+¿]i in the spermatozoids. Despite the fact that this mechanism is not the only responsible for the RA induction the calcium obtained through high concentration of LNG (10,000 ng/ml) might have a contraceptive action in the spermatozoa / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador : Anibal Eugenio Vercesi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T23:51:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Catisti_Rosana_D.pdf: 27879026 bytes, checksum: 9ca11d6622077883543ad498337004ef (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O íon cálcio exerce papel essencial no controle de uma série de funções celulares, porém seu excesso pode desencadear tanto a morte celular programada (apoptose) quanto a acidental (necrose). Para avaliarmos os efeitos de ácido araquidônico (AA) na homeostase intracelular de cálcio, utilizamos dois modelos experimentais: mitocôndrias isoladas de fígado de rato e tripanossomatídeos. Comparamos a capacidade de abertura do poro de transição de permeabilidade, utilizando-se concentrações de AA e de carbonil cianeto p-trifluorometoxifenil-hidrazone (FCCP) capazes de causar, de modo similar, a dissipação do potencial elétrico transmembrana (? ?) em mitocôndrias de fígado de rato, na presença de cálcio e do substrato respiratório succinato. O efeito protonofórico de AA e FCCP foi muito pouco modificado por carboxiatractilosídeo. A abertura do poro de transição de permeabilidade, induzida por AA ou FCCP, mostrou ser sensível a catalase, EGTA, ADP, ditiotreitol, ciclosporina A, rotenona e por substratos respiratórios. Isto indica que a condição de estresse oxidativo associada ao estado oxidado dos nucleotídeos de piridina leva à oxidação de tióis das proteínas de membrana, abrindo o poro. Investigamos também o mecanismo de ação de AA na mobilização intracelular de cálcio, em formas tripomastigotas procíclicas de Trypanosoma brucei, promastigotas de Leishmania donovani e amastigotas de Trypanosoma cruzi. Verificamos que o influxo de cálcio é estimulado pela melitina, e bloqueado pelo inibidor da fosfolipase A2 ácido 3-(4-octadecil)-benzoilacrílico (OBAA). AA induz o influxo de cálcio, num mecanismo sensível a LaCb. Entretanto, melitina e AA induzem um aumento na [Ca2+]iem T. brucei, quando incubados em meio livre de Ca2+, indicando mobilização de Ca2+ de organelas intracelulares. Essa hipótese foi sugerida pelos experimentos mostrando que AA promove liberação de Ca2+de acidocalcisomas nestas células. Os resultados mostrando mudanças no potencial de membrana mitocondrial, liberação de alaranjado de acridina e Ca2+ dos acidocalcisomas, e transporte de Ca2+ através da membrana plasmática, sugerem que, em adição à possível estimulação nos processos mediados por canais de Ca2+,AA, na faixa de concentração aqui utilizada, tem outros efeitos não específicos em membranas de tripanossomatídeos / Abstract: Calcium ions play essential role in the control of many cellular functions, however the excess may act as a trigger for both programmed (apoptosis) or accidental cell death (necrosis). To evaluate the role of arachidonic acid (AA) in intracellular calcium homeostases, we used two experimental models: isolated rat liver mitochondria and trypanosomatids. We have compared the PTP opening ability of AA with that of carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (FCCP) at concentrations that cause similar quantitative dissipation of the membrane potential (? ?) in Ca2+-Ioaded rat liver mitochondria respiring on succinate. The protonophoric effects of AA and FCCP were only slightly modified by carboxyatractyloside and were followed by PTP opening, sensitive to catalase, EGTA, ADP, dithiothreitol, cyclosporin A, rotenone or NAD(P)H-linked substrates. These results indicate that a condition of oxidative stress associated with the oxidized state of PN underlies membrane protein thiol oxidation and PTP opening. We also studied the AA induced-calcium mobilization in Trypanosoma brucei procyclic trypomastigotes, Leishmania donovani promastigotes and Trypanosoma cruzi amastigotes. We verified that Ca2+influx was also stimulated in a dose-dependent manner (50-400 nM) by the amphiphilic peptide melittin. This effect was blocked by the phosphqlipase A2 inhibitor 3-(4-octadecyl)-benzoylacrylic acid. The unsaturated fatty acid AA, in the range of 10-75 µM, induced Ca2+entry by a mechanism sensitive to LaCb. However, both melittin and AA induced increase in [Ca2+]i in T. brucei procyclic trypomastigotes incubated in Ca2+-free medium implying Ca2+ mobilization trom intracellular stores. This hypothesis was supported by experiments showing that AA promoted Ca2+release from the acidocalcisomes of these cells. The results showing changes in mitochondrial membrane potential, release of acridine orange and Ca2+from the acidocalcisomes and Ca2+release across the plasma membrane suggest that in addition to the stimulation of a Ca2+channel mediated process, AA, in the range of concentrations used here, have other nonspecific effects on the trypanosomatids membranes / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Anibal Eugenio Vercesi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:48:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fortes_Fabiane_D.pdf: 6319841 bytes, checksum: 144a21dcedbb62affbf54b8f2970a375 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O dano oxidativo induzido por Ca2+e agentes prooxidantes em mitocôndrias é mediado pelo ataque de espécies reativas de oxigênio geradas pela própria mitocôndria. Estas espécies reativas de oxigênio atacam os grupos tióis de proteínas de membrana promovendo oxidação e ligações cruzadas que conduzem à abertura do poro de transição de permeabilidade mitocondrial (TPM). A TPM em mamíferos caracteriza-se por uma permeabilização não específica e dependente de ea2+que ocorre na membrana mitocondrial interna e é inibida por concentrações submicromolares de ciclosporina A (CsA). No presente estudo foi evidenciado que apesar de mitocôndrias isoladas de tubérculo de batata (Solanum tuberosum) não apresentarem captação e acúmulo significativo de Ca2+, sofrem permeabilização da membrana interna quando tratadas com Ca2+(> 0,2 mM). Esta permeabilização foi potencializada pela adição de diamida, um oxidante de grupos tiólicos que estabelece uma condição de estresse oxidativo devido à oxidação de nucleotídeos de piridina. Esta permeabilização foi inibida pela acidificação do pH do meio de reação, Mg2+ e pelos antioxidantes catalase e ditiotreitol, mas não foi prevenida por inibidores clássicos da TPM de mamíferos como: ADP, bongkrekato e CsA. A ausência de inibição da permeabilização mitocondrial de batata pela CsA contrasta com seu efeito inibitório sobre a atividade da enzima peptidilprolil cis-trans isomerase, que está relacionada com a proteína ciclofilina, um sítio de ligação para CsA. O mersalil, um reagente tiólico monofuncional induz um extenso inchamento insensível à CsA, mesmo na presença de baixas concentrações de Ca2+(> 0,01 mM). Com o objetivo de realizar um estudo comparativo utilizando mitocôndrias vegetais capazes de captar e acumular Ca2+presente no meio extramitocondrial, foram utilizadas mitocôndrias isoladas de batata doce (Impomoea batatas), as quais são capazes de captar Ca2+por um mecanismo eletroforético sensível ao vermelho de rutênio, o que caracteriza a presença de um sistema ativo de captação de Ca2+.O acúmulo de altas concentrações de Ca2+ por mitocôndrias isoladas de batata doce conduziu a uma permeabilização de membrana mitocondrial interna, demonstrada por inchamento da organela e por um lento efluxo de Ca2+. Esta permeabilização induzida por Ca2+também foi estimulada por diamida e inibida parcialmente por catalase. Assim como ocorreu com Solanum tuberosum, o bongkrekato não apresentou efeito inibitório sobre a permeabilização mitocondrial induzida por Ca2+, bem como a CsA não foi capaz de inibir o inchamento mitocondrial e o e fluxo de Ca2+em mitocôndrias de batata doce. Também na batata doce a atividade da enzima peptidilprolil cis-trans isomerase de mitocôndrias foi inibida por CsA. Considerando os resultados aqui apresentados, podemos concluir que foi identificada e caracterizada uma condição de transição de permeabilidade de membrana induzida por Ca2+e espécies reativas de oxigênio, insensível à CsA, em mitocôndrias isoladas de batata e de batata doce. É possível sugerir ainda que a possível existência de um sistema ativo de transporte de Ca2+nestes vegetais não está relacionada com a insensibilidade da transição de permeabilidade destas mitocôndrias vegetais a CsA / Abstract: Oxidative damage of mammalian mitochondria induced by Ca2+ and prooxidants is mediated by the atlack of mitochondria-generated reactive oxygen species on membrane proteins thiols, promoting oxidation and cross-linkage that leads to the opening of the mitochondrial permeability transition pore (MPT). In mammalian mitochondria, 1 / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Aloisio Jose Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-25T08:04:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luvielmo_MarciadeMello_M.pdf: 6782732 bytes, checksum: d6108770c893764bd233598d0967411a (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: No processo de fabricação de queijos e caseinatos são obtidas grandes quantidades de soro, resíduo poluidor que, no Brasil, é praticamente todo descartado. Em vários países o soro já vem sendo utilizado como concentrados (CPS) isolados (IPS) e frações protéicas. As propriedades funcionais desses produtos de soro são bem conhecidas e entre elas destaca-se a propriedade de formar géis que apresentam múltiplas aplicações em diversos sistemas alimentícios. A habilidade das proteínas em desempenhar esta função está relacionada com alguns fatores que são: pH, força iônica, concentração de cálcio e de outros íons polivalentes, açúcares, proteínas, temperatura e viscosidade. O alto custo dos produtos cárneos e a grande variação na qualidade das proteínas é um importante estímulo para o uso das proteínas não cárneas em produtos de carne triturada. Nestes produtos, duas propriedades são particularmente importantes: a capacidade de reter água (CRA) e a capacidade de ligar gordura e/ou emulsificar. É difícil incorporar novos produtos de proteínas em alimentos sem mudar seu gosto e/ou textura. As proteínas do soro podem ser usadas para este propósito, por terem um sabor suave, alto valor nutricional e propriedades gelatinizantes. O presente trabalho tem por objetivo, avaliar a influência da adição de íons Ca-'-+ e Mg++ na de géis de Concentrado Protéico de Soro de Leite Bovino (CPS), avaliar a substituição de parte da proteína cárnea por proteína do CPS e adição de CaCl2 em um sistema cárneo (salsicha) e verificar relações entre os sistema modelo e o sistema cámeo. Foi concluído que adições crescentes de Íons Ca++ ou Mg++ (O a 75 mM) aumentam respectivamente a dureza dos géis obtidos de CPS80 (6, 7 e 8% de proteína), em pH 6,3, tratados a 75°C/45 mino Os géis com adição de CaCh atingem valores de dureza significativamente maiores que os géis com MgCh ao nível de 5% (p<0,05). Em concentrações menores ou igual a 7,5 mM do sal adicionado ocorre o contrário. No estudo do efeito da substituição de proteína da carne por proteína do CPS80 ou CPS8002, a formulação que mais difere do padrão foi a formulação com 8% de proteína do CPS8002 que diferiu significativamente nos valores de Dureza, Mastigabilidade e no parâmetro de Cor L'. As adições de CaCl2 (0,015%, 0,03%, 0,06% e 0,15% na massa de salsicha) nas formulações com 7% e 8% de CPS80 influenciou (p<0,05) principalmente nas características de Dureza e Mastigabilidade e não influenciou (p<0,05) nas características de %UE, Elasticidade e o parâmetros de Cor L'. / Abstract: In the process of making cheese and caseinates, great amounts of whey are obtained, a polluting remain that, in Brazil. Is practically alI discarded. In several countries, the whey has been already used as isolated (WPI) concentrates (WPC) and fractions of proteins. The functional properties of these whey products are well known and, among them, the property of making gels that present multiple applications in several nourishing systems is the most detached one. The proteins ability to execute this function is related to some factors that are: pH, ionic strength, concentration of calcium and other polyvalent ions, sugar, proteins, temperature and viscosity. The high cost of meat products and the large variation in the quality of proteins is na important stimulus to the use of non-meat proteins in batters meat. In these products, two properties are of particular importance, i.e. water-holding capacity and their fat-binding and/or emulsifying abilities. It is difficult to incorporate new products of protein in foods without changing its taste and/or texture and the whey proteins can be used for this purpose, for having a light flavor, high nutritional value and interesting gelling properties. The present work has the purpose of evaluating the influence ofthe Ca-i-+ and Mg++ ions addition in the hardness of Whey Protein Concentrate (WPC) gels, evaluating the substitution of the meat protein part for WPS protein and addition of CaCh in a meat system (sausage) and verify relationships between the model system and the meat system. It was concluded that further additions of Ca++ ou MgH ions (O to 75 mM) increased respectively the hardness of the obtained gels of WPS80 (6%, 7% e 8% of protein) in a pH 6,3, treated in 75°CI 45 mino The gels with addition of CaCh reach hardness values significantly bigger than the gels with MgCh in the of 5% (p<0,05). In smaller or equal to 7,5 mM concentrations of the added salt, the opposite happens. In the study of the substitution effect of the meat protein by protein of WPS80 or WPC8002, formulation that most differs from the standard was the formulation with 8% of WPC8002 protein, which differed significantly in the values ofHardness, Chewiness and Color L*. The additions of CaCh (0,015%, 0,03%, 0,06% and 0,15% in the mass of the sausage) in the formulation with 7% and 8% of WPC80 influenced (p<0,05) mainly the characteristics of hardness and Chewiness and didn't influence (p<0,05) the %UE, Color L* and Color a* characteristics. / Mestrado / Nutrição Aplicada a Tecnologia de Alimentos / Mestre em Ciência da Nutrição

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:13:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341086.pdf: 1532214 bytes, checksum: 8324cea8227e11639dfb298ea22159c0 (MD5) Previous issue date: 2016 / O uso da vasopressina (AVP), em pequenas doses e associada à noradrenalina, tem sido preconizado durante a sepse. Isso porque a vasopressina tem um potente efeito vasoconstritor e seu uso, em altas concentrações, pode causar constrição disseminada e baixa perfusão tecidual, agravando a falência orgânica causada por esta condição. Neste contexto, faz-se necessário entender o efeito sistêmico e local da administração de AVP em diferentes estágios da sepse. Já foi demonstrado o envolvimento da via da Rho-A/Rho-quinase na reatividade a alguns vasoconstritores, dentre eles a própria vasopressina, a fenilefrina e a noradrenalina. Porém pouco se sabe se essa via é crucial nas alterações de reatividade à AVP descritas durante o choque séptico. Assim, utilizando o modelo de ligadura e perfuração do ceco (CLP), nós avaliamos a reatividade vascular sistêmica e renal frente a exposição à AVP além de investigar a participação da via clássica do cálcio, ativada por receptor acoplado à proteína Gq, e a via Rho-A/Rho-quinase na reatividade à vasopressina na sepse. Os animais submetidos à CLP apresentaram hipotensão, taquicardia, além de alterações na função renal e hematológica. A partir destes resultados preliminares, os animais foram divididos em 4 grupos experimentais: controle; CLP 6 horas; CLP 18 horas; e CLP 48 horas. A avaliação in vivo do efeito pressórico e de alterações do fluxo sanguíneo renal induzidos pela administração de AVP revelou um perfil hiporreativo na fase inicial, retornando à reatividade similar ao controle entre 18 e 48 horas após a indução da sepse por CLP. A avaliação por laser Doppler mostrou que a redução do fluxo sanguíneo renal gerada pela vasopressina é significativamente maior 48 horas quando comparado ao grupo controle após a indução da sepse pelo modelo de CLP. A análise dos níveis plasmáticos de vasopressina circulante durante a sepse mostrou-se elevada somente na 6ª hora após a CLP. Já a reatividade de anéis de aorta mostrou-se significativamente menor em todos os grupos CLP, comparado ao controle. O rim isolado e perfundido obtido de animais dos grupos CLP apresentaram-se hiper-reativos à vasopressina, mas não à fenilefrina e nem à noradrenalina. Essa resposta aumentada e sustentada parece ser uma característica das fases intermediária e tardia da sepse. A avaliação, in vitro e por imunoeletroforese, da atividade de V1aR e das vias intracelulares que regulam o mecanismo contrátil induzido pela AVP revelaram a participação dos canais de cálcio de membrana no aumento da reatividade 18 horas após a CLP, e o aumento da atividade de proteínas da via Rho-A/ROCK na fase tardia (48 h) da sepse. Em resumo, nossos resultados mostram a particularidade do leito vascular renal frente à administração de substâncias vasoativas, em especial à vasopressina, e o envolvimento da via de sensibilização do cálcio, Rho-A/Rho-quinase no aumento da reatividade à AVP no estágio tardio da sepse.<br> / Abstract : The administration of low doses of vasopressin (AVP) in association with norepinephrine has been recommended for some septic patients. Vasopressin has a potent vasoconstrictor effect and high amounts of this drug can cause widespread constriction and low tissue perfusion, worsening sepsis-induced organ failure. It has been demonstrated the Rho-A/Rho-kinase pathway plays a role in the effects of some vasoconstrictors, including vasopressin, phenylephrine and norepinephrine. However, it remains unknown whether the Rho-A/Rho-kinase pathway is involved in the changes of vascular reactivity to AVP described during septic shock. Using the cecal ligation and puncture (CLP) model of sepsis, we evaluated the systemic and renal vascular reactivity to AVP. We also evaluated the role of the classical calcium pathway activated by G protein coupled receptor, and the Rho-A/Rho-kinase pathway in the changes of the renal vascular reactivity to AVP. The animals subjected to CLP showed hypotension, tachycardia, hyperthermia followed by hypothermia, impaired blood cell counts and increased serum levels of nitrite (an indicative of nitric oxide production) in the first hours (3 to 6 h) after CLP, and disrupted renal function, with reduced diuresis and impaired excretion of electrolytes and urinary metabolic. The rats were allocated into four experimental groups: control; CLP 6 h; CLP 18 h; and CLP 48 h. The effects of AVP on systemic blood pressure were reduced in initial phases of sepsis, returning to normal values between 18 and 48 h after the CLP. The assessment of the renal blood flow showed that the reduction in the renal blood flow was significantly enhanced at 48 hours after CLP, compared with the control group. The plasma levels of vasopressin were increased only six hours after the CLP surgery. The reactivity of aortic rings to AVP was significantly lower in all CLP groups. The kidneys from the CLP 18 and 48 h groups were hyperreactive to vasopressin, but not to phenylephrine or norepinephrine. There were no changes in the expression of V1a receptors in the kidneys from CLP-subjected rats. However, the expression and activity of the Rho-A/ROCK pathway were increased in the CLP 48 h group, compared with control samples. Our study reveals that the renal vascular reactivity to vasopressin varies accordingly with the time point of sepsis, and that at least in late stages of sepsis the enhanced vascular effects of vasopressin in kidneys involves an augmented activation of the Rho-A/Rho-kinase pathway. Taken together, our results show the particularity of the renal vascular bed following administration of vasoactive substances, in special to vasopressin, and the involvement of calcium sensitization pathway, Rho-A/Rho-kinase, in the increased reactivity to AVP found in late stage of sepsis.

Orientador : Aloisio Jose Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-31T19:21:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Motta_ElianaMariaPettirossi_M.pdf: 18122229 bytes, checksum: 0f972fd12ca82d909bf550371231c62f (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Concentrados (80% de proteína) e isolado (90% de proteína) protéico de soro de leite, produzidos por processos de ltrafiltração/diafiltração foram avaliados quanto ao perfil de solubilidade, de textura e perfil eletroforético. Os concentrados e o isolado utilizado neste estudo apresentaram-se altamente solúveis em pH 7,0 e 4,6 (valores superiores a 84%). A solubilidade protéica de soluções preparadas com 10% de proteína em pH 7,0 em sistema dialisado e não dialisado, com adição de diferentes concentrações de CaCb (O, 10, 15, 25 e 35 mM) apresentou pequeno decréscimo quando houve a adição de 35 mM de CaClz indicando a formação de poucos agregados o que foi confirmado pelo perfil de transmitância das soluções. Géis produzidos a partir dessas soluções foram avaliados quanto a características de dureza, adesividade, elasticidade, coesividade, gomosidade, mastigabilidade e capacidade de retenção de água. Esses parâmetros mostraram-se dependentes da concentração de Caz+ e também da concentração de outros íons, principalmente ânions presentes nas amostras. Concentrados protéicos com a mesma concentração de cálcio total apresentaram perfil de textura diferenciado. O valor máximo de dureza foi obtido a concentrações específicas de cálcio. Soluções dialisadas foram mais sensíveis a adição de CaClz apresentando géis com maiores valores de dureza, mastigabilidade, gomosidade, elasticidade e coesividade. Géis produzidos de CPS Calpro 80 apresentaram valor máximo de dureza (613,02 g) quando foi adicionado 25 mM de CaCb, géis de CPS AMP 80 apresentaram dureza máxima (627,95 g) quando foi adicionado 15 mM de CaCb em sistema dialisado e géis de IPS apresentaram dureza máxima (1050,12 g) quando foi adicionado 10 mM de CaCb em sistema dialisado. Soluções com baixa força iônica produziram géis mais elásticos, mais coesos e com maior capacidade de retenção de água. A adição de Caz+ produziu géis menos elásticos e menos coesos. A capacidade de retenção de água máxima das três amostras foi obtida em sistema dialisado sem a adição de CaClz. O perfil eletroforético dos géis indicou que com a adição de 25 e 35 mM de CaCb a estrutura dos géis estava sendo mantida por interações eletrostáticas, enquanto que nos níveis de O, 10 e 15 mM de adição de CaCb a estrutura estava sendo mantida por ligações dissulfídicas e eletrostáticas e as proteínas envolvidas no processo de formação de agregados através de ligações S-S foram a-Iactalbumina e p-Iactoglobulina / Abstract: Whey protein concentrates (80% protein) and whey protein isolate (90% protein) manufactured by ultrafiltration and diafiltration were evaluated for their solubility properties, textural characteristics and electrophoretic pattem. Concentrates and isolate tested in this study showed high solubility at pHs 7,0 and 4,6 (solubility higher than 84%). Protein solubility in systems prepared with 10% protein at pH 7,0, dialysed and non-dialysed, with the addition of different concentrations of CaCb ( O, 10, 15, 25 and 35 mM) showed a small decrease when 35 mM CaCI2was added, indicating the formation of few aggregates, confirmed by the transmittance pattems of the solutions. Gels obtained from these solutions was evaluated for hardness, adhesiveness, elasticity, cohesiveness, gumminess, chewiness and water retention capacity. These parameters were Ca2+and other ions dependent , mainly of anions present in the samples. Whey protein concentrates with the same total Ca2+ concentration showed different texture profile.The highest values for hardness were obtained with specific concentrations of calcium. Dialysed solutions were more sensitive to CaCb addition showing higher values for hardness, chewiness, gumminess, elasticity and cohesiveness. The maximum hardness value for the WPC Calpro 80 was obtained at 25 mM CaCb (613,02 g); sample AMP 80 showed maximum hardness when 15 mM CaCb were added to a dialysed system (627,95 g); maximum hardness for the WPI was obtained at 10 mM CaCb when the salt was added to the dialysed system (1050,12 g). Solutions with low ionic strength produced elastic g els, more coesive and with higher water retention capacity. Ca2+addition produced less elastic gels and with lower coesivity. The maximum water retention capacity for the three samples was obtained in the dialysed system without CaCb addition. The electrophoretic pattem indicated that with the addition of 25 and 35 mM CaCb the gels structures were mantained by electrostatic interactions, while at the addition levels of O, 15 e 15 mM of CaCI2 the structure was supported by disulphide and electrostatic interactions and the proteins involved in the process of aggregates formation through interactions S-S were a-Iactalbumin and (3-lactoglobulin / Mestrado / Mestre em Alimentos e Nutrição

Orientador: Anibal Eugenio Vercesi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T01:15:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Coelho_JorgeLuizCavalcante_M.pdf: 3191844 bytes, checksum: 75e8bdd0512d82d89489430cd6cd04a5 (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: Medidas simultâneas da captação de 'Ca POT. 2+¿, consumo de oxigênio, efluxo de 'Mg POT. 2+¿ endógeno e aumento de volume em mitocôndrias cardíacas e hepáticas, energizadas por succinato na presença de rotenona, mostraram que mitocôndria cardíaca é mais resistente ao desacoplamento induzido por 'Ca POT. 2+¿ e fosfato, que mitocôndria hepática. A extensão do efluxo de 'Mg POT. 2+¿ e entumescimento mitocondrial, induzidos pelo acúmulo de 'Ca POT. 2+¿, são também muito menos pronunciados em mitocôndrias cardíacas. O desacoplamento e aumento de volume em mitocôndria hepática, foi demonstrado ser resultado da perda de 'Mg POT. 2+¿ ligado a membrana, em conseqüência da reciclagem de 'Ca POT. 2+¿ induzida por fosfato através da membrana. 'Mg POT. 2+¿ exógeno protege a mitocondria hepática contra o efeito deletério do 'Ca POT. 2+¿, através da inibição do efluxo de 'Ca POT. 2+¿ insensível à vermelho de rutênio induzido por fosfato. Este último não induz reciclagem de 'Ca POT. 2+¿ em mitocôndria cardíaca. Por outro lado, quando mitocôndria cardíaca é energizada com substratos-dependentes de NAD ou com succinato na ausência de rotenona, comporta-se como mitocôndria hepática quanto as alterações induzidas pelo movimento da 'Ca POT. 2+¿. Neste caso, a reciclagem de 'Ca POT. 2+¿ é conseqüência do estado mais oxidado dos nucleotídoes de piridina mitocondrial / Abstract: Parallel measurements of 'Ca POT. 2+¿ uptake, oxygen consumption, endogenous 'Mg POT. 2+¿ efflux and swelling in rotenone poisoned rat liver and rat heart mitochondria, showed that heart mitochondria is much more resistant to uncoupling by 'Ca POT. 2+¿ in the presence of phosphate than rat liver mitochondria. The extents of 'Mg POT. 2+¿ efflux and swelling induced by 'Ca POT. 2+¿ accumulation are also much less pronounced in heart mitochondria. Uncoupling and swelling in liver mitochondria seems to be a result of the loss of membrane bound 'Mg POT 2+¿ as a consequence of 'Ca POT. 2+¿ recycling across the membrane induced by phosphate. Exogenous 'Mg POT 2+¿ protects liver mitochondria against the deleterious effects of 'Ca POT. 2+¿ by inhibiting a ruthenium red-insensitive 'Ca POT. 2+¿ efflux induced by phosphate. Phosphate does not induce recycling of 'Ca POT. 2+¿ in heart mitochondria. On the other hand when respiring on NAD-linked substrates or with succinate in the absence of rotenone heart mitochondria behave like liver mitochondria with respect to the alterations caused by 'Ca POT. 2+¿ movements. In this case the recycling of 'Ca POT. 2+¿ is a consequence of the more oxidized state of mitochondrial Pyridine Nucleotides / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas