Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-08-30T12:54:32Z No. of bitstreams: 1 PDF - Michelangela Suelleny de Caldas Nobre.pdf: 1299620 bytes, checksum: 913e06322c3ba929d99335a5d289dcea (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-08-31T18:13:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Michelangela Suelleny de Caldas Nobre.pdf: 1299620 bytes, checksum: 913e06322c3ba929d99335a5d289dcea (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T18:13:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Michelangela Suelleny de Caldas Nobre.pdf: 1299620 bytes, checksum: 913e06322c3ba929d99335a5d289dcea (MD5) Previous issue date: 2015-08-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The goat milk whey is a by-product of cheese production and often discharged without any kind of treatment as effluent, becoming a source of pollution. Instead, the use of whey to produce dairy drinks has been a very attractive option, remarkably because of its nutritional value. Probiotic cultures contain microorganisms that bring health benefits to the host by improving its intestinal balance, and they can be used in fermented beverages. This study aimed to evaluate the influence of different potential probiotic lactobacilli cultures on the physicochemical and microbiological features, and also on the pattern of protein degradation on reconstituted and fermented goat Coalho Cheese whey powder. The fermentation process was performed in four trials, C1, C2, C3 and C4, added, respectively, of Lactobacillus casei BGP93, Lactobacillus paracasei BGP1, L. paracasei and Lactobacillus rhamnosus LPC37 LR32, all of them also added of Streptococcus thermophilus TA40 as starter culture. Titratable acidity, pH values, and viability of both S. thermophilus and Lactobacillus sp. were monitored in the reconstituted whey after adding cultures before fermentation (TI), after fermentation (TF), and after 1 (D1) and 7 (D7) days of storage at 4 °C. The use of near infrared spectroscopy (NIR) was evaluated as an alternative method for the determination of Lactobacillus sp. populations. The analyses of proteolysis by the method o-phthaldialdehyde (OPA), ultrafast reversed phase high-performance liquid chromatography (RP- UFLC) and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS- PAGE) were performed to evaluate the protein degradation in samples throughout the processing and storage period. The whey added of L. rhamnosus (C4) obtained the lowest pH (4.83) and the highest acidity (lactic acid 0.637g / 100 g) after 7 days of storage. The viability of Lactobacillus sp. in all trials (C1, C2, C3 and C4) obeyed the Brazilian criteria for probiotic foods, remaining above 9 log CFU in the recommended daily serving portion (200 ml). The calibration procedure for Lactobacillus sp. values in NIR analysis was adequate; however, it is required additional samples of each trial to improve the performance of calibration models and the construction of prediction models to be performed in future studies. The protein content was around 25 mg/g in all treatments over all sampling periods and, therefore, no significant difference between them was verified (p > 0.05). The chromatograms of the reconstituted whey without addition of cultures showed differences from those obtained for the TI, TF, D1 and D7 sampling periods in all trials, probably due to the thermal treatment of samples prior to the addition of cultures. The degree of proteolysis did not differ significantly between treatments (p > 0.05); however, according with the analysis of all the results, including electrophoresis and chromatography data for the C1 trial, in which low molecular weight fraction was formed, there was a trend towards of higher proteolytic activity in goat cheese whey added of the probiotic culture L. casei BGP93. / O soro caprino é um subproduto da produção queijeira e muitas vezes descartado sem nenhum tratamento como efluente, tornando-se uma fonte de poluição. Como alternativa, a utilização de soro de queijo para a produção de bebidas lácteas tem sido uma opção muito atraente, notadamente devido ao seu valor nutricional. Culturas probióticas são constituídas de microrganismos que conferem benefícios à saúde do hospedeiro, melhorando seu equilíbrio intestinal, podendo ser utilizadas em bebidas fermentadas. Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência de diferentes culturas de lactobacilos com potencial probiótico sobre as características físico-químicas, microbiológicas e sobre o padrão de degradação proteica de soro de queijo de cabra tipo coalho em pó reconstituído fermentado. O processo de fermentação foi realizado em quatro tratamentos, C1, C2, C3 e C4, adicionados, respectivamente, das culturas de Lactobacillus casei BGP93, Lactobacillus paracasei BGP1, L. paracasei LPC37 e Lactobacillus rhamnosus LR32, todos eles também adicionados de Streptococcus thermophilus TA40 como cultura starter. Foram monitorados os valores de pH, acidez titulável, S. thermophilus e Lactobacillus sp. no soro reconstituído após a adição das culturas antes da fermentação (TI), depois da fermentação (TF), e após um (D1) e sete (D7) dias de armazenamento a 4 °C. Foi avaliado o uso da espectroscopia de infravermelho próximo (NIR) como método alternativo para a determinação de populações de Lactobacillus sp. As análises de grau de proteólise pelo método o-ftaldialdeído (OPA), cromatografia líquida ultrarrápida de alta eficiência em fase reversa (RP-UFLC) e eletroforese em gel de poliacrilamida-dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) foram realizadas para avaliar a degradação proteica nas amostras ao longo do processamento e armazenamento. O soro contendo o microrganismo L. rhamnosus (C4) foi o que obteve pH mais baixo (4,83) e acidez mais alta (0,637g de ácido lático/100 g) após 7 dias de armazenamento. A viabilidade de Lactobacillus sp. em todos os tratamentos (C1, C2, C3 e C4) obedeceram aos critérios nacionais para alimentos probióticos, mantendo-se acima de 9 log UFC na porção diária recomendada (200 ml). O método NIR mostrou-se adequado no método de calibração para os valores de Lactobacillus sp.; no entanto, faz-se necessária quantidade maior de amostras de cada tratamento para melhorar a performance dos modelos de calibração e na construção de modelos de predição a serem realizados em trabalhos posteriores. O teor proteico foi próximo de 25 mg/g em todos os tratamentos durante todos os períodos de amostragem e, portanto, sem diferenças significativas entre eles (p > 0,05). Os cromatogramas do soro reconstituído sem adição da cultura apresentaram diferenças em relação àqueles obtidos para os tempos TI, TF, D1 e D7 em todos os tratamentos, provavelmente devido ao tratamento térmico aplicado nas amostras antes da adição das culturas. O grau de proteólise não diferiu significativamente entre os tratamentos (p > 0,05); entretanto, pela análise do conjunto de resultados obtidos, incluindo os dados de cromatografia e eletroforese para o tratamento C1, no qual houve o aparecimento de frações com baixo peso molecular, verificou-se uma tendência de maior atividade proteolítica no soro contendo a cultura probiótica L. casei BGP93.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:22:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Michelle de Oliveira Pedrosa.pdf: 2052461 bytes, checksum: a0cdbbd88b3af405d18dc8913c16a97e (MD5) Previous issue date: 2013-09-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The use of biodegradable polysaccharides in development of new drug delivery systems has gained much acceptance. The granules of hydrogels containing a therapeutic agent formed from the sodium alginate polymer in the presence of divalent ions are studied as a multiparticulate system for controlled release site specific, to protect the drug from adverse conditions and to improve its manufacture. The great majority of the substances used in actual therapeutic derived from the utilization of molecular modification, and the heterocyclic compounds that present sulfur atoms in its composition are the target of this strategy, since they exhibit antibacterial, antifungal, antiviral and antitumor activities. The thiophene derivatives containing the cycloalkyl group linked to the ring thiophenic present important pharmacological activities, mainly antifungal activities, being considered important molecules due the increasing demand for new drugs with this activity, but they have limited pharmacokinetic properties owing to its highly hydrophobic character. This study aimed to obtain a multiparticulate system of calcium alginate beads containing 2-[(2, 4-dichlorobenzylidene)-amino]-5,6-dihydro-4H-cyclopentyl[b]thiophene-3-carbonitrile (5CN06LSVM), a derivative thiophenic, by ionotropic gelation method from aqueous solution of sodium alginate 3% and O / W emulsion drug 0.1%, mixed in 5 different ratios (A, B, C, D and E) with solution of calcium chloride 10%. The morphology, the scanning electron microscopy (SEM), the yield of the granules, the loading rate, swelling and erosion and the thermal analysis were evaluated. The resulting granules, with the exception of sample B, were oval, not agglomerated and with a surface fissures. The yield ranged between 82% and 107%. The highly hydrophobic compound can be entrapped within the granules. The granules showed low degree o swelling in the simulation solution of gastric juice, but in phosphate buffer pH 7.4 swelled quickly with complete erosion of the polymer network in 60 minutes. The thermo gravimetric analyses showed that thermal stability of the drug was better when incorporated into the granules. I was concluded from this study, it is possible to obtain multiparticulate system using a simple, easy, and reproducible method, can be used for oral administration of hydrophobic drugs. / O uso de polissacarídeos biodegradáveis no desenvolvimento de novos sistemas transportadores de fármaco tem ganhado bastante aceitação. Os grânulos de hidrogel contendo um agente terapêutico formado a partir do polímero alginato de sódio em presença de íons divalentes, são estudados como um sistema multiparticulado para liberação controlada sítio especifica, para proteção do fármaco das condições adversas do meio e para melhorar a sua fabricação. A grande maioria das substâncias utilizadas na terapêutica atual derivou da utilização da estratégia de modificação molecular, e os compostos heterocíclicos que apresentam átomos de enxofre em sua composição são alvo dessa estratégia, visto que apresentam atividades antibacteriana, antifúngica, antiviral e antitumoral. Os derivados tiofênicos contendo o grupo cicloalquil ligado ao anel tiofênico apresentam importantes atividades farmacológicas, principalmente antifúngicas, sendo consideradas moléculas importantes devido a crescente demanda por novos fármacos com esta atividade, porém eles apresentam limitadas propriedades farmacocinéticas devido ao seu caráter altamente hidrofóbico. Este trabalho objetivou obter um sistema multiparticulado de grânulos de alginato de cálcio contendo o 2-[(2,4-dicloro-benzilideno)-amino]-5,6-diidro-4Hciclopentil[b]tiofeno-3-carbonitrila (5CN06-LSVM), um derivado tiofênico, pelo método de gelificação ionotrópica, a partir de uma solução aquosa de alginato de sódio 3% e emulsão O/A do fármaco 0,1%, misturadas em 5 diferentes proporções (A, B, C, D e E) com uma solução de cloreto de cálcio a 10%. A morfologia, a microscopia eletrônica de varredura (MEV), o rendimento dos grânulos, a taxa de carregamento, o intumescimento e erosão e a análise térmica foram avaliadas. Os grânulos resultantes, com exceção da amostra B, foram ovais, não aglomerados e com uma superfície apresentando fissuras. O rendimento variou entre 82% e 107%. O composto altamente hidrofóbico pode ser aprisionado até 67,17% dentro dos grânulos. Os grânulos mostraram baixo grau de intumescimento na solução de simulação de suco gástrico, mas em tampão fosfato pH 7,4 intumesceram rapidamente com erosão completa da rede polimérica em 60 minutos. A análise termogravimétrica mostrou que a estabilidade térmica do fármaco era melhor quando incorporado aos grânulos. Concluiu-se com este estudo, que é possível obter um sistema multiparticulado, utilizando um método simples, fácil e reprodutível, possível de ser utilizado para administração oral de fármacos hidrofóbicos.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:22:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Gabriela Muniz Felix Araujo.pdf: 3052812 bytes, checksum: d979f650ad09f6bbf8062f77a7aa642a (MD5) Previous issue date: 2013-05-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Leishmaniasis is one of the most neglected diseases in the world. Its most severe clinical form, called visceral, if left untreated, can be fatal. Conventional therapy is based on the use of pentavalent antimonials and includes amphotericin B (AmB) as a second choice drug. The micellar formulation of AmB, although effective, is associated acute and chronic toxicity. Commercially available lipid formulations emerged to overcome such drawbacks, but the high cost involved limits widespread use of these preparations. Nanosized drug delivery systems, such as nanoemulsions (NE), have proven ability to solubilize hydrophobic compounds, to improve absorption and bioavailability, to increase efficacy and to reduce toxicity of the encapsulated drug. NE become even more attractive because they are inexpensive and easily produced. The aim of this work was to develop NE to incorporate AmB. NE were made by sonication method, through a mixture of surfactants, Kolliphor HS 15 and Brij ® 52, with the oil isopropyl myristate. AmB was added directly to the samples under magnetic stirring, using acidic and basic solutions to solubilize the drug and for adjustment of final pH. All NE showed neutral pH, values of conductivity were consistent with oil in water systems, and isotropic behavior. NE presented spherical structures with negative zeta potential value, monomodal size distribution and average diameter of the droplets with drug ranged from 33 to 132nm. Thermal analysis showed that AmB was not able to modify the behavior of the system, possibly to be dispersed in the internal phase. With respect to preliminary stability tests, centrifugation caused precipitation of the drug, heat stress led to turbidity of samples and at the end of the freeze-thaw cycle all samples maintained their transparency. AmB-NE showed similar statistically antileishmanial activity to AmB micellar formulation, which enables those systems to further tests, to assess their toxicity and also prove its effectiveness on amastigotes, in order to offer them as an alternative for the treatment of visceral leishmaniasis. / A leishmaniose é uma das doenças mais negligenciadas do mundo. Sua forma clínica mais grave, denominada visceral, se não tratada, pode ser fatal. A terapia convencional baseia-se na utilização de antimoniais pentavalentes e inclui a anfotericina B (AmB) como fármaco de segunda escolha. A formulação micelar de AmB, embora efetiva está associada a relatos de toxicidade aguda e crônica. Formulações lipídicas surgiram para contornar tais inconvenientes, porém o alto custo envolvido limita o amplo uso dessas preparações. Sistemas de liberação de fármacos nanoestruturados, como as nanoemulsões (NE), possuem comprovada habilidade em solubilizar compostos hidrofóbicos, melhorar absorção e biodisponibilidade, incrementar a eficácia e reduzir a toxicidade dos fármacos encapsulados. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de NE para incorporação de AmB. As NE foram formuladas pelo método de sonicação, através do emprego da mistura dos tensoativos Kolliphor ® HS 15 e Brij ® 52 com o óleo miristato de isopropila. Adicionou-se a AmB diretamente nas amostras, sob agitação magnética, com o emprego de soluções básicas e ácidas para solubilização do fármaco e ajuste do pH final. Todas as NE tiveram pH neutro e condutividade condizente com sistemas óleo em água, além de comportamento isotrópico. As NE apresentaram estruturas de formato esférico, com potencial zeta negativo e distribuição de tamanho monomodal. O diâmetro médio das gotículas com o fármaco variou de 33 a 132nm. A análise térmica revelou que a AmB não foi capaz de alterar o comportamento térmico do sistema, possivelmente por estar dispersa na fase interna. Com relação aos testes de estabilidade preliminar, a centrifugação provocou a precipitação do fármaco. O estresse térmico levou à turvação das amostras. Ao final do ciclo gelo-degelo todas as amostras mantiveram sua transparência. A AmBNE mostrou eficácia leishmanicida estatisticamente igual a da formulação de AmB micelar, o que a habilita para futuros ensaios para avaliar sua toxicidade e comprovar sua eficácia também sobre formas amastigotas, com a finalidade de torná-la uma alternativa para o tratamento da leishmaniose visceral.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:22:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Danielle Rocha Silva.pdf: 2754617 bytes, checksum: a1a4ed8e7731d6234c2f03dc42a162ef (MD5) Previous issue date: 2013-04-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Biopolymers have been increasingly used in the production of various new drug delivery systems (NDDS), giving the active protection of the external environment or allowing a control of release, it s potential to vectorization. To this end, microparticles produced from biopolymers have been widely used in the pharmaceutical field for encapsulating drugs. The aim of this study was to develop a microparticulate system using cashew gum as polymer (Anacardium occidentale L.). The polysaccharide was obtained by extraction and purification of exudates from the stem of the tree. The characterization of cashew gum (CG) (powder) was made by analysis of rheological properties, analytical techniques (optical and scanning electron microscopy, thermal analysis, x- ray diffraction, infrared spectroscopy, humidity and ash content) and yield. Cashew gum microparticles were obtained by interfacial crosslinking polymerization (ICP) and characterized by their visual and microscopic appearance, analytical techniques (thermal analysis and FTIR) and resistance to pH variations. The study of flow properties of dry CG allowed to characterize the biopolymer as a material of low density and free flow property, also being easily obtained, extraction, purification and does not generate wastes into the environment. The x-ray diffraction showed that the CG is a predominantly amorphous polymer. The technique of ICP made CG insoluble in water which makes this biopolymer promising in obtaining microparticles. Furthermore, the microparticles show good thermal stability and showed sensitivity to slightly alkaline pH optimum for conveying drugs for the treatment of disorders of the colon. Therefore, the CG can be extracted eventually used as a binder for the manufacture of a NDDS. The microparticles show interesting physico-chemical properties which suggest the possibility of its application in the development of future. / Os biopolímeros têm sido cada vez mais empregados na produção de diversas formas farmacêuticas, conferindo ao princípio ativo a proteção do meio externo ou permitindo um controle de sua liberação, possibilitando também sua vetorização. Para tal, micropartículas produzidas a partir de biopolímeros têm sido amplamente utilizadas na área farmacêutica para encapsulação de fármacos. Em virtude deste panorama o foco deste trabalho foi desenvolver um sistema microparticulado utilizando a goma de cajueiro como polímero (Anacardium occidentale L.). O polissacarídeo foi obtido através da extração e purificação de exsudatos do caule do cajueiro. A caracterização da goma de cajueiro (GC) (pó) foi feita por análise das propriedades reológicas, técnicas analíticas (microscopia óptica e de varredura, análise térmica, difração de raios X, espectroscopia na região do infravermelho com transformada de Fourier, teor de umidade e cinzas) e rendimento. Micropartículas da goma de cajueiro foram obtidas por reticulação polimérica interfacial, e caracterizadas quanto ao seu aspecto visual, microscópico, técnicas analíticas (TG, DSC e FTIR) e resistência a variações do pH. O estudo das propriedades de fluxo da GC seca permitiu caracterizar o biopolímero como um material de baixa densidade e de fluxo livre, sendo de fácil obtenção, extração, purificação e sem gerar resíduos para o meio ambiente. A difração de raios-x mostrou que a GC é um polímero predominantemente amorfo. A técnica de reticulação polimérica interfacial (RPI) tornou a GC insolúvel em água o que torna este biopolímero, promissor na obtenção de micropartículas. Além disso, as micropartículas apresentaram uma boa estabilidade térmica e apresentou sensibilidade ao pH levemente alcalino ideal para veicular fármacos colónespecíficos. Portanto, a GC extraída pode ser futuramente usada como aglutinante para fabricação de novos sistemas de liberação de fármacos (NSLF). As micropartículas mostraram interessantes propriedades físico-químicas que sugerem a possibilidade de sua futura aplicação no desenvolvimento de NSLF.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:23:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Giovanna Rodrigues de Araujo Eleamen.pdf: 10221915 bytes, checksum: 528c62b7bbb4ef515ef8492b7879d457 (MD5) Previous issue date: 2013-04-22 / The 6CN10 is a 2-amino-thiophene derivative obtained from 2-amino-4,5,6,7tetrahydro-4H-benzo[b]thiophene-3-carbonitrile obtained through the reaction of Gewald, followed by condensation with 4-nitrobenzaldehyde. This drug showed good antifungal activity in in vitro tests, especially against Cryptococcus sp. and can be considered as a promising molecule for the development of a new antifungal drug. However, the therapeutic potential of 6CN10 is limited by its low water solubility. The formation of inclusion complexes between drugs poorly soluble in aqueous media and cyclodextrin has been one of the most used techniques to improve the solubility profile of drugs with low solubility in water. The present work aimed at obtaining inclusion complexes between 6CN10 and 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin and the characterization of this system. The inclusion complex of 2-hydroxypropyl-βcyclodextrin (HP-β-CD) and 6CN10 was prepared using the technique of lyophilization and characterized using the phase-solubility diagram, thermal analysis, FT-IR and Raman spectroscopy, X-ray diffraction and scanning electron microscopy. The phase solubility studies revealed a curve-type AL, suggesting the formation of inclusion complexes with 1:1 stoichiometry with a constant of stability of 96M . The water solubility of 6CN10 (2.4µg/mL) increased more than 29 times in the presence of 0.36M of HP-β-CD. Thermogravimetric analysis showed that the thermal stability of 6CN10 in the inclusion complex was improved due to additional interactions between the host and guest molecule. The reduction in the intensity and position of peaks in the spectra of FT-IR and Raman and the change in the crystallinity pattern of the complex 6CN10:HP-β-CD together with the observation of a product with features of a new amorphous single phase by scanning electron microscopy confirmed the formation of the inclusion complex. / O 6CN10 é um novo derivado 2-amino-tiofeno obtido a partir do 2-amino-4,5,6,7tetrahidro-4H-benzo[b]tiofeno-3-carbonitrila condensado com 4-nitrobenzaldeído. Este fármaco apresentou boa atividade antifúngica em testes in vitro, especialmente contra Criptococcus sp. e pode ser considerado como uma molécula promissora para o desenvolvimento de um novo medicamento antifúngico. No entanto, o potencial terapêutico do 6CN10 é limitado por sua baixa solubilidade em água. A formação de complexos de inclusão entre fármacos pouco solúveis em meio aquoso e ciclodextrina tem sido uma das técnicas mais utilizadas para melhorar o perfil de solubilidade de fármacos com baixa solubilidade em meio aquoso. O presente trabalho visou à obtenção de complexos de inclusão entre 6CN10 e 2-hidroxipropilβ-ciclodextrina e a caracterização desse sistema. O complexo de inclusão de 2hidroxipropil-β-ciclodextrina (HP-β-CD) e 6CN10 foi preparado utilizando a técnica de liofilização e caracterizado utilizando o diagrama de solubilidade de fase, análise térmica, espectroscopia de infravermelho e Raman, difratometria de raios-X e microscopia eletrônica de varredura. Os estudos de solubilidade de fases revelaram uma curva do tipo A L , sugerindo a formação de complexos de inclusão com estequiometria 1:1 com uma constante de estabilidade de 96M -1 . Na presença de 0,36M de HP-β-CD a solubilidade do 6CN10 (2,4µg/mL) aumentou mais de 29 vezes. Análise termogravimétrica mostrou que as estabilidade térmica do 6CN10 no complexo de inclusão foi melhorada devido a interação adicional entre o hospedeiro e a molécula hóspede. A redução da intensidade e posição dos picos nos espectros de FT-IR e Raman e a mudança na cristalinidade no difratograma do complexo 6CN10:HP-β-CD em conjunto com a observação de um produto com características amorfas e de fase única por microscopia eletronica de varredura confirmaram a formação do complexo de inclusão.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:23:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Jamilly Kelly Oliveira Neves.pdf: 16106200 bytes, checksum: 8dc99d4e55502b91c49642df1fad10ac (MD5) Previous issue date: 2013-06-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Copaiba oil, extracted from the Copaiba plant, a common tree to Latin America and West Africa. It is found over 20 species in Brazil, throughout Southeast, Midwest and Amazon regions. Among the various pharmacological activities studied for this oil, antimicrobial and anti-inflammatory stand out. It is taken topically or orally, but indiscriminately, often without any quality control. The extensive use of this oil has attracted increasing interest in pharmaceutical research to develop pharmaceutical forms containing them. This way, it is interesting the development of topically administered microemulsions (ME) O/W, in order to improve the skin permeability of this oil, as well as its therapeutic effect. Thus, the aim of this study was to develop and characterize ME containing copaiba oil and evaluate its antimicrobial and anti-inflammatory activity. It was initially determined the hydrophilelipophile balance (HLB) of the Copaifera multijuga oil (11-12) and it was subsequently defined the HLB of the mixture of surfactant/cosurfactant, guiding the choice of the pseudoternary phase diagrams (2:1 and 4:1). In ME regions of diagrams were selected seven formulations and chosen two (ME-F2 and ME-F6) for characterizing study. Regarding pH, all formulations were within the range of pH of the skin. All samples, after centrifugated, remained unchanged. The electrical conductivity and differential scanning calorimetry (DSC) techniques suggested a system of O/W. The transmission electron microscopy revealed spherical droplets of uniform size less than 200nm and homogeneous distribution. The polarized light microscopy showed dark fields that characterize isotropic systems of the type ME O/W. The size of the droplets was confirmed by dynamic light scattering (DLS) on which it was observed a phenomenon of destabilization by Ostwald ripening, increasing the diameter of the droplets when the system is diluted. All the ME showed negative zeta potential, low viscosity and Newtonian behavior. The ME-F2 and ME-F6 showed activity for the bacterial strain Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli and for the fungi Cryptococcus neoforman. Regarding the anti-inflammatory activity the ME-F6 showed acute activity higher than the positive control (diclofenac diethylamine emulgel). As for MEF2, it presented a lag time up to the third hour, but less intense than the control one. Therefore, the systems developed become promising agents in antimicrobial therapy and particularly for acute inflammation, which can be an alternative to use oral nonsteroidal antiinflammatory, thereby reducing side effects. However, it is necessary further studies for quality control of copaiba oil since there are many variables in relation to the composition and consequently the pharmacological activity. Thus, the use of this oil should be standardized as well as carried out studies of skin irritability and toxicity of the formulations. / O óleo-resina de copaíba é extraído das Copaibeiras, árvores comuns a América Latina e África Ocidental, encontradas em mais de 20 espécies no Brasil, distribuídas no Sudeste, Centro-Oeste e Amazônia. Dentre as várias atividades farmacológicas estudadas para este óleo, destacam-se a antimicrobiana e anti-inflamatória. É utilizado por via tópica ou oral, porém de forma indiscriminada, muitas vezes sem nenhum controle de qualidade. O uso extensivo deste óleo tem despertado cada vez mais o interesse da pesquisa farmacêutica em desenvolver formas farmacêuticas que o contenha. Desta forma, torna-se interessante o desenvolvimento de microemulsões (ME) de administração tópica do tipo O/A, a fim de melhorar a sua permeabilidade cutânea deste óleo, bem como o seu efeito terapêutico. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e caracterizar ME contendo o óleo de copaíba e avaliar sua atividade antimicrobiana e anti-inflamatória. Inicialmente foi determinado o Equilíbrio hidrófilo-lipófilo (EHL) do óleo Copaifera multijuga (11-12) e posteriormente foi definido o EHL da mistura de tensoativo/cotensoativo, direcionando a escolha dos diagramas de fases pseudoternários (2:1 e 4:1). Nas regiões de ME dos diagramas foram selecionadas 7 formulações e escolhidas duas (ME-F2 e ME-F6) para estudos de caracterização. Quanto ao pH, todas as formulações encontraram-se dentro da faixa do pH cutâneo. Todas as amostras, após centrifugação, mantiveram-se inalteradas. As técnicas de condutividade elétrica e Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC) sugeriram um sistema do tipo O/A. A microscopia eletrônica de transmissão revelou gotículas esféricas de tamanhos uniformes inferiores a 200nm e de distribuição homogênea. A microscopia de luz polarizada mostrou campos escuros característicos de sistemas isotrópicos do tipo ME O/A. O tamanho das gotículas foi confirmado pela técnica de espalhamento de luz dinâmica onde foi observado um fenômeno de desestabilização por maturação de Ostwald, ocorrendo o aumento no diâmetro das gotículas quando o sistema foi diluído. As ME apresentaram potencial zeta negativo, baixa viscosidade e comportamento Newtoniano. As ME-F2 e ME-F6 apresentaram atividade para as cepas bacterianas Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli e para o fungo Criptococcus neoformans. Em relação à atividade anti-inflamatória a ME-F6 apresentou atividade aguda superior ao controle positivo (Emulgel de diclofenaco dietilamônio). Já a ME-F2 apresentou um lag time até a terceira hora, porém menos intenso que o controle. Desta forma, os sistemas desenvolvidos tornam-se agentes promissores na terapêutica antimicrobiana e principalmente para inflamações agudas, podendo ser uma alternativa para utilização de anti-inflamatórios não esteroidais orais, reduzindo assim os efeitos colaterais. No entanto, tornam-se necessários mais estudos de controle de qualidade do óleo de copaíba visto as muitas variáveis em relação à composição e consequentemente a atividade farmacológica. Desta forma, deve-se padronizar a utilização deste óleo, como também realizar estudos de irritabilidade cutânea e toxicidade das formulações.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2017-08-29T18:48:40Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO VERSÃO FINAL - FABIANA SARI FERREIRA.pdf: 3287035 bytes, checksum: 4366071c4629680884533f5c945e6d0e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-29T18:48:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO VERSÃO FINAL - FABIANA SARI FERREIRA.pdf: 3287035 bytes, checksum: 4366071c4629680884533f5c945e6d0e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Carbamates are essential products for pesticide formulation, mainly used in agriculture for the elimination of insects. Although the production and trade of carbamates are for purpose insects elimination, it is common used to suicide attempts in our environment, in addition to accidental poisonings involving rural workers and children. The toxicological property is inhibit the acetylcholinesterase and buthyrylcholinesterase enzymes which leads a severe poisoning related to cholinergic crisis. The enzymes activity get back to normal only spontaneously, so the study of new substances that can intervene directly on the active site of these enzymes when it is inhibited and reverse this toxic action is necessity for the health. Researchs with Melia azedarach L. (Meliaceae) has been made searching for new strategies for treatment of enzime inhibity by methyl carbamate poisoning. Different concentrations of Melia azedarach L. buffered extract were tested in vitro and in vivo for acetylcholinesterase activity inhibited by methylcarbamate. The results showed that the extract of Melia azedarach L. has a potential reversion effect on the enzyme inhibited by methyl carbamate, becoming an alternative to treatment of carbamate intoxication / Os carbamatos são produtos fundamentais para a formulação de praguicidas. Embora sua produção e a comercialização sejam com a finalidade de eliminação de insetos, a sua utilização em tentativas de suicídio é comum em nosso meio, além das intoxicações acidentais envolvendo trabalhadores rurais e crianças, devido sua propriedade toxicológica em inibir as enzimas acetilcolinesterase e butirilcolinesterase. A atividade destas enzimas só volta ao normal espontaneamente, assim, o objetivo deste trabalho foi verificar a possível ação do extrato de folhas de Melia azedarach L. sobre o sistema colinérgico inibido por metilcarbamato. Foram testadas in vitro e in vivo, diferentes concentrações de extrato tamponado de Melia azedarach L., quanto a atividade da acetilcolinesterase inibida por metilcarbamato. Os resultados mostraram que o extrato de Melia azedarach L. tem potencial efeito de reversão sobre a enzima inibida pelo metilcarbamato, se tornando uma alternativa na terapia do tratamento de intoxicações com carbamatos.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2017-08-31T11:48:36Z No. of bitstreams: 2 cristiane Persel.pdf: 966698 bytes, checksum: 3cd3bbc33fd85ffcfae5c88b9acbec25 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T11:48:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 cristiane Persel.pdf: 966698 bytes, checksum: 3cd3bbc33fd85ffcfae5c88b9acbec25 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Wickerhamomyces anomalus is mycocin-producing yeast, these substances are glycoproteins secreted by some yeasts and have antimicrobial action with broad spectrum of activity. Escherichia coli is the predominant bacterium of the coliform group, its presence in the water indicates fecal contamination, being used as indicator in microbiological analyzes of water. Although belonging to the human and animal microbiota can be pathogenic, causing various types of infections. The immobilization of cells and substances shows great potential of biotechnological application in several areas. In this way, this work aimed to evaluate the activity of free and immobilized mycocins, obtained from W. anomalus, against strains of E. coli and fecal coliforms. The broth microdilution method was used to evaluate the action of the free mycocins, in different dilutions, against 45 multiresistant strains of E. coli isolated from clinical samples. Mycocins were immobilized at different concentrations of sodium alginate and calcium chloride and tested for antimicrobial activity against E. coli strain ATCC25922 and fecal coliforms present in fecal contaminated water samples. The free mycocins were able to inhibit all the strains used in the broth microdilution, with 100% of the strains being inhibited by the pure used mycocins and, even when diluted, the mycocins showed an inhibitory action, the dilution of 1:2 inhibited 78.2% of the multiresistant strains of E. coli. The concentration of sodium alginate influenced the shape of the granules obtained in immobilization, a result not observed when the calcium chloride concentration varied. The mycocins immobilized with 2% sodium alginate and 0.2 mol/L CaCl2 showed better antimicrobial activity against E. coli strain ATCC25922. Fecal coliforms were inhibited by immobilized mycocins after 48h of incubation. In summary, in this study, mycocins were able to inhibit E. coli and coliforms present in samples of water contaminated with feces. Considering the problem of multiresistant strains of antibiotics and the need for new alternatives to improve water quality and sewage effluents, these results demonstrate a possible application as an alternative to antimicrobial agents. / Wickerhamomyces anomalus é uma levedura produtora de micocinas, estas substâncias são glicoproteínas secretadas por algumas leveduras e possuem ação antimicrobiana com amplo espectro de atividade. Escherichia coli é a bactéria predominante do grupo de coliformes, sua presença na água indica contaminação fecal, sendo utilizada como indicador em análises microbiológicas de água. Apesar de pertencer à microbiota humana e animal pode ser patogênica, causando diversos tipos de infecções. A imobilização de células e substâncias demonstra grande potencial de aplicação biotecnológica em diversas áreas. Desta maneira, este trabalho objetivou avaliar a atividade de micocinas livres e imobilizadas, obtidas de W. anomalus, frente às cepas de E. coli e coliformes fecais. Utilizou-se o método de microdiluição em caldo para avaliar a ação das micocinas livres, em diferentes diluições, frente a 45 cepas multirresistentes de E. coli isoladas de amostras clínicas. As micocinas foram imobilizadas em diferentes concentrações de alginato de sódio e cloreto de cálcio, e testadas para verificar a atividade antimicrobiana frente à cepa de E. coli ATCC25922 e coliformes fecais presentes em amostras de água contaminadas com fezes. As micocinas foram capazes de inibir todas as cepas utilizadas na microdiluição em caldo, sendo que 100% das cepas foram inibidas pelas micocinas utilizadas puras e, mesmo diluídas, as micocinas apresentaram ação inibitória, a diluição de 1:2 inibiu 78,2% das cepas de E. coli multirresistentes. A concentração de alginato de sódio influenciou no formato dos grânulos obtidos na imobilização, resultado não observado ao variar a concentração de cloreto de cálcio. As micocinas imobilizadas com alginato de sódio a 2% e CaCl2 0,2 mol/L apresentaram melhor atividade antimicrobiana frente à cepa de E. coli ATCC25922. Os coliformes fecais foram inibidos pelas micocinas imobilizadas após 48h de incubação. Em síntese, neste estudo, as micocinas foram hábeis em inibir E. coli e coliformes presentes em amostras de água contaminada com fezes. Considerando a problemática de cepas multirresistentes a antibióticos e a necessidade de novas alternativas para melhorar a qualidade da água e efluentes de esgoto, tais resultados demonstram uma possível aplicação como alternativa para agente antimicrobiano.

O uso de praguicidas cresceu no Brasil nos últimos anos e, consequentemente, cresceram também os quadros de intoxicação provenientes da exposição à essas substâncias, principalmente em trabalhadores rurais. A classe dos praguicidas organofosforados (OF) é uma das mais utilizadas, todavia sua toxicidade também é elevada colocando, consequentemente, essa população em risco. Em vista disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar a exposição de trabalhadores rurais aos praguicidas OF por meio da determinação de bioindicadores associados à avaliação clínica, visando dar subsídios ao poder público para a implantação de uma rede de atenção primária à saúde. O estudo foi transversal, de base populacional e natureza avaliativa e aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade José do Rosário Vellano (UNIFENAS) e da Universidade Federal de Alfenas (UNIFAL-MG), pareceres nº 149718 e 415856, respectivamente) com uma amostragem total de 1027 trabalhadores rurais da Regional de Saúde de Alfenas, MG, considerando-se variáveis epidemiológicas, clínicas e riscos ocupacionais. Foram aplicados dois questionários estruturados, um para levantamento de dados epidemiológicos e clínicos dos trabalhadores rurais e o Instrumento de Avaliação da Atenção Primária (PCATool), além da determinação das colinesterases plasmática, eritrocitária e total, bem como as provas de função hepática e renal. Posteriormente, dessa população, selecionou-se dois grupos expostos ocupacionalmente à mistura complexa de praguicidas, contendo OF, (n = 94) e expostos ocupacionalmente à mistura complexa de praguicidas, sem OF, (n = 94), para a aplicação dos bioindicadores dialquilfosfatos urinários, testes de genotoxicidade (ensaios do citoma e do cometa) e análise polimórfica da CYP2C9, comparando esses resultados com aqueles obtidos em um grupo de indivíduos não expostos ocupacionalmente aos praguicidas, habitantes de zona urbana (n = 50). A partir das respostas observadas no PCATool (n = 1027), pode ser verificado que a despeito de uma alta cobertura, o risco ocupacional e suas consequências não têm sido detectados, pelos serviços de saúde da família, que se apresentam como não orientados à atenção primária. Quando comparado aos demais grupos de estudo, os resultados obtidos, a partir do levantamento de dados clínicos, mostraram alterações significativas no sistema nervoso central, sistema respiratório e auditivo nos trabalhadores expostos à mistura contendo OF. No tocante à determinação dos bioindicadores propostos, no grupo exposto ocupacionalmente à mistura contendo OF, a atividade da colinesterase plasmática, eritrocitária e total, encontrou-se diminuída em 63,8%, 12,8% e 14,8%, respectivamente, detecção de dialquilfosfatos na urina de 92,6% dos voluntários desse grupo e mudança significativa em todos os parâmetros de ensaio do citoma, quando comparado com o grupo não exposto ocupacionalmente aos praguicidas. O ensaio do cometa mostrou danos ao DNA por meio da diferença significativa entre os grupos expostos e o grupo não exposto ocupacionalmente, por meio da análise do Tail moment. A análise polimórfica de CYP2C9 mostrou maior frequência dos alelos *1/*2 e *1/*3, nos grupos expostos aos praguicidas em relação ao grupo não exposto ocupacionalmente, todavia, não foram observadas relações significativas entre essa e a atividade das colinesterases, a concentração de dialquilfosfatos na urina e os testes de genotoxicidade. Os resultados obtidos nesse pioneiro estudo, com uma população rural brasileira, sugerem que esses trabalhadores estão expostos aos praguicidas de forma arriscada, fato este que associado ao baixo grau de escolaridade e à precariedade de ações programáticas, aumenta a probabilidade de aparecimento de quadros de intoxicação, demonstrando assim a importância do treinamento das equipes de saúde para a promoção, a prevenção e o tratamento dessa população. O emprego de bioindicadores de dose interna, de efeito, de genotoxicidade e de suscetibilidade, em combinação, como utilizado no presente trabalho, é primordial para a avaliação da população rural, diminuindo a probabilidade do aparecimento de doenças advindas da exposição ocupacional aos praguicidas. / The use of pesticides in Brazil has been growing recently, leading to an increase in the intoxication cases caused by the exposure, especially of farm workers, to these substances. Among all the pesticides, the organophosphates (OF) are one of the most used groups, although they present high toxicity, which is risky for population. Thus, the aim of this study was to evaluate the exposure of farm workers to organophosphates pesticides through the determination of clinical evaluation associated biomarkers, providing information for the implementation of a primary health care system by the Government. It was a cross-sectional and population-based evaluation study approved by the Ethics Committees in Research of UNIFENAS and UNIFAL-MG (Document numbers 415856 and 149718), allowing the use of a 1,027 rural workers sample from Alfenas-MG health regional, considering epidemiological, clinical and occupational risk variables. Two forms were applied, one for collection of rural workers epidemiological and clinical data, and the Primary Care Assessment Tool (PCATool), as well as the determination of plasma, erythrocyte and total cholinesterase, and the evidences of liver and kidney function. Subsequently, from this population, two groups were selected: the occupationally exposed to the complex mixture of pesticides with OF (n = 94), and the occupationally exposed to the complex mixture of pesticides without OF (n = 94). Both groups were evaluated through urinary dialkyl phosphates biomarkers, genotoxicity assays (cytome and comet), and polymorphism of CYP2C9, comparing these results with those obtained in a group of individuals not occupationally exposed to pesticides, urban residents (n = 50). From the PCATool responses (n = 1027), it was noticed that despite high coverage, the occupational risk and its consequences have not been detected by the family health services, referring to a non-oriented primary care. When compared to other study groups, the clinical evaluated data showed significant changes in the central nervous, respiratory and auditory systems in workers exposed to the mixture containing OF. In the biological monitoring of the occupationally exposed group, the plasma, erythrocyte, and total cholinesterase activities changed in 63.8%, 12.8% and 14.8%, respectively, with 92.6% of dialkyl phosphates detection in urine. Moreover, in this group it was a significant change in all the test parameters cytome when compared with the group not exposed occupationally. The comet assay showed DNA damage through significant difference between exposed and unexposed groups by Tail moment. CYP2C9 polymorphism presented a higher frequency of allele * 1 / * 2 and * 1 / * 3 in the exposed population in relation to the unexposed group. However, there was no significant correlation between this test and cholinesterase activities, nor with dialkyl phosphates concentration in urine and genotoxicity tests. The results obtained in this ascertained study, with a Brazilian rural population, suggested that these workers are exposed to pesticides in a risky way. In addition to this fact, low education levels and precarious primary care actions increase the probability of intoxication events, indicating the importance of health teams training for promoting, preventing and treating this population. The combination of internal dose, effect, genotoxicity and susceptibility biomarkers can be an important tool to assess the exposure of rural population, decreasing the emergence of diseases resulting from occupational exposure to pesticides.

Mais estudos sobre ações neuromoduladoras das angiotensinas no Sistema Renina Angiotensina (SRA) poderiam melhorar a compreensão de muitas funções e distúrbios do sistema nervoso central. A via de sinalização de PTEN/PI3K/AKT/mTOR que pode ser ativada pela Angiotensina-(1-7) desempenha um papel essencial na regulação do crescimento, metabolismo e sobrevivência das células. Este estudo teve como objetivo identificar e descrever a(s) via(s) metabólica(s) angiotensinérgica(s) principal(is) no hipocampo de camundongos (Mus musculus); Estudar a regulação da cascata de sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a partir da ativação com a Ang-(1-7) e realizar ensaios de inibição com o antagonista do receptor Mas. Analisamos também a expressão das enzimas chave da cascata de mTOR, com foco na enzima PTEN. Inicialmente foi realizada a identificação da via metabólica angiotensinérgica no hipocampo de camundongos através do estudo da atividade proteolítica angiotensinérgica com o extrato hipocampal de camundongos Swiss para identificar as enzimas e peptídeos formados a partir de AngI e/ou inibidores em HPLC. Para o estudo da regulação da cascata de sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a partir da ativação/inibição do SRA os experimentos foram realizados em células imortalizadas de neuroblastoma denominadas SH-SY5Y e western blotting para determinação dos níveis de PTEN e S6k (total e fosforilada). Nossos resultados mostraram que a caracterização do perfil do sistema angiotensinérgico hipocampal gerou resultados preliminares, em que a partir de AngI, o principal peptídeo formado foi a Ang-(1-7) e, em menor quantidade, a Ang II. Concluímos então que a AngII pode estar sendo formada por carboxipeptidades de forma geral e a Ang-(1-7) pode estar sendo formada por endopeptidases. Além disso, a Ang-(1-7) provoca a diminuição da expressão da PTEN total, bem como, a diminuição da fosforilação da PTEN, e nesse caso, a diminuição da fosforilação significa geração de mais proteína desfosforilada e aumento da atividade fosfatase resultando em efeitos neuroprotetores. Esses resultados nos permitiram observar que em células SH-S5SY, o mecanismo pelo qual a Ang-(1-7) ativa mecanismos neuroprotetores pode estar relacionado com a ativação da enzima PTEN. / Further studies on neuromodulatory actions of angiotensins in the Renin Angiotensin System (RAS) could improve understanding of many central nervous system functions and disorders. The PTEN/PI3K/AKT/mTOR signaling pathway that can be activated by Angiotensin-(1-7) plays an essential role in regulating cell growth, metabolism and survival. The aim of this study was to identify and describe the main angiotensinergic metabolic pathway(s) in the hippocampus of mice (Mus musculus); Study the regulation of the PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade from activation with Ang-(1-7) and perform inhibition assays with the Mas receptor antagonist. We also analyzed the expression of the key enzymes of the mTOR cascade, focusing on the enzyme PTEN. Identification was initially performed of the angiotensinergic metabolic pathway in the mouse hippocampus was performed by studying the angiotensinergic proteolytic activity with the hippocampal extract of Swiss mice to identify the enzymes and peptides formed from AngI and/or inhibitors in HPLC. For the study of PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade regulation from the activation/inhibition of RAS the experiments were performed on immortalized neuroblastoma cells called SH-SY5Y and western blotting for determination of PTEN and S6k levels (total and phosphorylated). Our results showed that the characterization of the profile of the hippocampal angiotensinergic system generated preliminary results, in which from AngI, the main peptide formed was Ang-(1-7) and, to a lesser extent, Ang II. We conclude that AngII may be formed by carboxypeptids in general and Ang-(1-7) may be formed by endopeptidases. In addition, Ang-(1-7) causes a decrease in total PTEN expression, as well as a decrease in PTEN phosphorylation, in which case the decrease in phosphorylation means generation of more dephosphorylated protein and increased phosphatase activity resulting In neuroprotective effects. These results allowed us to observe that in SH-S5SY cells, the mechanism by which Ang-(1-7) activates neuroprotective mechanisms may be related to the activation of the PTEN enzyme. / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq