Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RicheleJAM_DISSERT.pdf: 3022782 bytes, checksum: 46556132e4939175f840346baa8ae21f (MD5) Previous issue date: 2012-10-24 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / A sepse ? uma doen?a complexa, de alta gravidade e durante o seu desenvolvimento pode ocorrer eventos inflamat?rios graves, que podem levar o paciente ao ?bito. Inibidores de peptidases isolados de sementes de leguminosas est?o sendo estudados devido suas variadas atividades biom?dicas ou farmacol?gicas. Nesse sentido, o presente estudo consistiu na avalia??o das atividades multifuncionais do inibidor de tripsina presente nas sementes de Erythrina velutina (EvTIb). Dois inibidores de tripsina foram purificados por fracionamento com sulfato de am?nio (30-60%), cromatografia de afinidade em tripsina-sepharose e cromatografia de fase reversa. Os inibidores purificados foram denominados de EvTIa e EvTIb e suas massas moleculares determinadas por espectrometria de massa por electrospray (ESI) foram: 19.228,16 Da e 19.210,48 Da, respectivamente. Dentre eles, o EvTIb apresentou maior atividade espec?fica para tripsina e maior percentual de rendimento de extra??o, sendo, portanto, o escolhido para as an?lises adicionais. Os fragmentos desse inibidor gerados por tratamento enzim?tico com tripsina e pepsina foram analisados por espectrometria de massa MALDI-ToF-ToF, permitindo elucidar sua estrutura prim?ria parcial. O EvTIb exibiu uma atividade de inibi??o do tipo n?o-competitiva para a tripsina com IC50 de 22 nmol.L-1 e constante de inibi??o (Ki) de 10 nmol.L-1. Al?m da atividade de inibi??o para tripsina, EvTIb tamb?m inibiu o fator Xa e a elastase neutrof?lica, por?m n?o inibiu trombina, quimotripsina ou peptidase 3. EvTIb se manteve est?vel a varia??o de pH e temperatura. EvTIb n?o foi citot?xico e n?o inibiu o crescimento bacteriano de Escherichia coli e Staphylococcus aureus. EvTIb foi capaz de prolongar o tempo de coagula??o de maneira dose-dependente. Finalmente, observou-se que EvTIb foi capaz de restabelecer os n?veis hemost?ticos, inibir a migra??o leucocit?ria em camundongos s?pticos e diminuir a secre??o de TNF-α e n?o teve a??o sobre a libera??o de IL-6. Por outro lado, EvTIb promoveu um aumento na libera??o de IFN- α e IL-12. Esses dados sugerem que EvTIb pode constituir em uma nova mol?cula com potencial de uso no tratamento da sepse e doen?as relacionadas ? coagula??o

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FabianoMT.pdf: 637738 bytes, checksum: 985b4ebc65a8511464495683b08649e2 (MD5) Previous issue date: 2006-06-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Globulins fractions of legume seeds of Crotalaria pallida, Erytrina veluntina and Enterolobium contortisiliquum were isolated and submitted to assays against serine, cysteine and aspartic proteinases, as also amylase present in midgut of C. maculatus and Z. subfasciatus. Hemagglutination assays indicated presence of a lectin in E. veluntina globulin fractions. This lectin had affinity to human erythrocytes type A, B and O. Vicilins were purified by chromatography on Sephacryl S-300 followed of a chromatography on Sephacryl S-200, which was calibrated using protein markers. Vicilins from C. pallida (CpV) and E. veluntina (EvV) seeds had a molecular mass of 124.6 kDa and E. contortisiliquum a molecular mass of 151kDa. Eletrophoresis in presence of SDS showed that CpV was constituted by four subunities with apparent molecular mass of 66, 63, 57 and 45 kDa, EvV with three subunities with apparent molecular mass of 45kDa and EcV four subunities, two with 37.1 kDa and two with 25.8 kDa. Non denaturantig eletrophoresis displayed single bands with high homogeneity, where CpV had lower acidic behavior. All vicilins are glycoproteins with carbohydrate contents at 1 to1.5%. Bioassays were done to detect deleterious effects of vicilins against C. maculatus and Z. subfasciatus larvae. CpV, EvV and EcV exhibited a WD50 of 0.28, 0.19 and 1.03%; LD50 0.2, 0.26, and 1.11% respectively to C. maculatus. The dose responses of CpV, EvV and EcV to Z. subfasciatus were: WD50 of 0.12, 0.14, 0.65% and LD50 of 0.09, 0.1, and 0.43% respectively. The mechanism of action of these proteins to bruchids should be based on their properties of bind to chitin present in mid gut of larvae associated with the low digestibility of vicilin. In assays against phytopatogenous fungus, only EcV was capable of inhibit F. solani growth at concentrations of 10 and 20 ?g and its action mechanism should be also based in the affinity of EcV to chitin present in the fungi wall / Sementes de leguminosas das esp?cies Crotalaria pallida, Erythrina veluntina e Enterolobium contortisiliquum tiveram suas fra??es globul?nicas isoladas. As globulinas n?o apresentaram atividade de inibidores para as enzimas tipo ser?nicas, ciste?nicas, asp?rticas e para as amilases de homogenatos intestinais de larvas de Callosobruchus maculatus e Zabrotes subfasciatus. Os testes de atividades hemaglutinantes indicaram que apenas a globulina de Erytrina veluntina apresentou contamina??o com lectinas com afinidade para eritr?citos humanos do tipo A, B e O. As vicilinas foram ent?o purificadas usando-se duas cromatografias de filtra??o em gel, Sephacryl S-300 seguido de uma Sephacryl S-200 calibrada com marcadores de massa molecular conhecidos. Vicilinas de C. pallida (CpV) e E. veluntina (EvV) apresentaram massa molecular de 124,6 kDa e a de E. contortisiliquum (EcV) com massa molecular de 151 kDa..Eletroforese desnaturante mostrou que CpV possui 4 subunidades de massas moleculares aparentes de 66, 63, 57, 45 kDa; a de EvV com duas subunidades de massa molecular aparente de 66,2 e 63,8 kDa e EcV tr?s subunidades de massa molecular aparente de 54,9 kDa. Essas prote?nas mostraram ser homog?neas por eletroforese nativa com bandas ?nicas, onde CpV revelou ser a prote?na menos ?cida. Todas as vicilinas s?o glicoprote?nas,com conte?do de carboidrato variando de 1 a 1,5%. Bioensaios foram feitos para determinar o efeito delet?rio das vicilinas para C. maculatus e Z. subfasciatus. Cpv, EvV e EcV apresentaram WD50 de 0,28, 0,19 e 1,03%; LD50 de 0,2, 0,26 e 1,11% para C. maculatus, respectivamente . As curvas dose resposta para Cpv, EvV e EcV para Z. subfasciatus apresentou WD50 de 0,12, 0,14 e 0,65%; e LD50 de 0,09, 0,10 e 0,43%, respectivamente. Ensaios digest?rios utilizando se enzimas dos intestinos m?dio de bruqu?deos mostraram que as vicilinas s?o resistentes ? prote?lise, dentre elas destaca-se EcV, que mesmo depois de incubadas por 24 horas n?o foram hidrolisados pelas enzimas de de C. maculatus. Nos ensaios para fungos fitopat?genos apenas EcV foi capaz de inibir a germina??o de esporos de Fusarium solani ? concentra??o de 10 e 20 ?g. O mecanismo de a??o proposto para as vicilinas foi baseado na propriedade que essas prote?nas tiveram de se ligarem a quitina ou estruturas quitinosas presentes nos intestinos m?dios das larvas associado ? baixa digestibilidade destas prote?nas para enzimas dos insetos

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MagdaFDC.pdf: 1127289 bytes, checksum: e8f867febd165499040c2d067e137209 (MD5) Previous issue date: 2005-02-23 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / No Brasil, a Leishmania chagasi ? a esp?cie que causa a leishmaniose visceral (LV). A Leishmania tem a capacidade de causar um estado de parasitismo intracelular nos macr?fagos. A destrui??o dos parasitas, tanto no in?cio da infec??o, como na fase tardia, depende da ativa??o de macr?fagos por citocinas. Leishmania evade da resposta imunol?gica do hospedeiro e sobrevive sem o macr?fago durante a doen?a. A infec??o por Leishmania chagasi pode induzir hepatites, independente da co-infec??o com v?rus de hepatites (A-E). A infec??o por GBV-C est? sendo associada com prote??o ? progress?o da doen?a, e aumento da sobreviv?ncia em indiv?duos HIV-1 soro positivos. Neste estudo, objetivou-se avaliar se a infec??o subcl?nica por Leishmania Chagasi depende da modula??o de outros pat?genos dentre eles o v?rus da hepatite G. Um total de 322 indiv?duos, residentes em ?reas end?micas para LV e um total de 82 pacientes de banco de sangue participaram deste estudo. Usando a t?cnica de RT-PCR seguida do sequenciamento do fragmento da PCR da regi?o 5 NTR e submetendo-se os dados obtidos a um banco de genes (BLAST) para uma an?lise comparativa de seq??ncias do Genebank obteve-se uma identidade de 98% do clone GBV1 com o isolado 34,5 da hepatite G v?rus, 5 -UTR, parcial seq??ncia (AF489995. 1). Dentre os fen?tipos avaliados, DTH+, DTH-, e LV constatou-se uma maior preval?ncia do fen?tipo DTH+ nos indiv?duos GBV-C positivos se comparados com DTH- e LV( DTH+ 57%, DTH- 10%,LV 33%).Um subgrupo de 4 indiv?duos de fen?tipo LV e positivos para GBV-C no ano de 1996 foi submetido a novas coletas em 2004. An?lises bioqu?micas de enzimas,AST,ALT , YGT,LDH, Fosfatasse Alcalina e bilirrubinas foram realizadas, bem como, dosagens de marcadores de outras hepatites.Constatou-se que as dosagens bioqu?micas n?o sofreram altera??es significativas e que os pacientes positivos no ano de 1996 para GBV-C; no ano de 2004 apresentaram HVAG positivo, com marcadores negativos, para hepatite B e C. Sugerimos uma poss?vel intera??o do v?rus da hepatite G com pacientes do fen?tipo LV e DTH+, com poss?vel ativa??o da resposta imune celular

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnaKLN_DISSERT.pdf: 1765239 bytes, checksum: 7e63eba3061cff582da8c8d2fd3d9659 (MD5) Previous issue date: 2013-03-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Plukenetia volubilis conhecida popularmente como sacha incha ou amendoa lopo, ? uma planta oleaginosa e trepadeira, pertecente a fam?lia Euphorbiaceae. Suas sementes apresentam alto valor nutritivo e suas folhas s?o utilizadas pela popula??o amaz?nica para tratar doen?as de pele, contudo essa a??o n?o ? comprovada cientificamente. Dentro deste contexto, o presente trabalho prev? uma prospec??o qu?mica e biol?gica de diferentes extratos obtidos das folhas de P. volubilis. : extrato aquoso (EA), metan?lito (EM), etan?lico (EE), clorof?rmico (EC) e hex?nico (EH). A triagem fitoqu?mica foi realizada por meio de rea??es qu?micas de identifica??o e an?lise por cromatografia em camada delgada (CCD), utilizando diferentes eluentes e reveladores. Como parte das an?lises de constitui??o qu?mica dos extratos, foram realizadas dosagens de compostos fen?licos, a??cares totais e prote?nas. Em rela??o ?s atividades biol?gicas, foi avaliada a capacidade antioxidante dos extratos e seus efeitos sob c?lulas tumorais e normais. Com os resultados obtidos foi poss?vel detectar por meio das reacoes a presen?a de compostos fen?licos, flavonoides, saponinas e alcaloides. Por meio da an?lise por CCD foi poss?vel verificar a presen?a de compostos com estruturas de terpenos, polifen?is e flavon?ides. O extrato metan?lico (EM) apresentou uma banda de colora??o verde e Rf 0,65 similar ao padr?o de flavon?ide canferol. Com as metodologias de dosagem qu?mica foi observado uma elevada quantidade de a??cares totais nos extratos de P. volubilis. Os testes para avalia??o da atividade antioxidante revelaram que todos os extratos apresentam capacidade antioxidante. No teste de capacidade antioxidante total (expresso como equivalente em ?cido asc?rbico, EEA/g), os extratos apresentaram valores que variaram entre 59,31 a 97,76 EAA/g. Para o teste de DPPH os valores de sequestro variaram de 88,3% a 62,8%. O teste de viabilidade celular, verificado por meio da redu??o do composto MTT possibilitou observar que os extratos foram capazes de diminuir a viabilidade das c?lulas cancer?genas HeLa e A549, sendo mais eficazes para linhagem HeLa. Os extratos EM e EH (250 ?g/mL) apresentaram redu??o da prolifera??o de HeLa para 54,3 e 48,5%, respectivamente. Enquanto que os extratos EH e EA induziram de forma significativa a prolifera??o de fibroblastos normais 3T3, cerca de 70% a mais que o controle. Resultado semelhante foi observado em macr?fagos Raw, onde foi verificado que a prolifera??o dessas c?lulas tratadas com os extratos EM, EC e EA foi a duas vezes mais que o controle. Nenhum efeito foi observado nas c?lulas CHO quando tratadas com os extratos. Outra abordagem utilizada foi a de citometria de fluxo de modo a avaliar marcadores de morte celular em c?lulas HeLa quando expostas aos extratos de P. volubilis. Os resultados destes ensaio mostraram que os extratos induziram a morte celular via apoptose. Portanto, esses resultados sugerem que os extratos das folhas de P. volubilis s?o potenciais alvos para serem utilizados futuramente no desenvolvimento de f?rmacos com a??o antioxidante, proliferativa e antitumoral

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LarissaMA_DISSERT.pdf: 2537553 bytes, checksum: 12f02428f3ae0866d5e225dc96048ea4 (MD5) Previous issue date: 2013-05-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Dopamine (DA) is known to regulate both sleep and memory formations, while sleep plays a critical role in the consolidation of different types of memories. We believe that pharmacological manipulation of dopaminergic pathways might disrupt the sleep-wake cycle, leading to mnemonic deficits, which can be observed in both behavioral and molecular levels. Therefore, here we investigated how systemic injections of haloperidol (0.3 mg/kg), immediately after training in dark and light periods, affects learning assessed in the novel object preference test (NOPT) in mice. We also investigated the hippocampal levels of the plasticity-related proteins Zif-268, brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and phosphorylated Ca2+/calmodulin-dependent protein kinases II (CaMKII-P) in non-exposed (na?ve), vehicle-injected controls and haloperidol-treated mice at 3, 6 and 12 hours after training in the light period. Haloperidol administration during the light period led to a subsequent impairment in the NOPT. In contrast, preference was not observed during the dark period neither in mice injected with haloperidol, nor in vehicle-injected animals. A partial increase of CaMKII-P in the hippocampal field CA3 of vehicle-injected mice was detected at 3h. Haloperidol-treated mice showed a significant decrease in the dentate gyrus of CaMKII-P levels at 3, 6 and 12h; of Zif-268 levels at 6h, and of BDNF levels at 12h after training. Since the mnemonic effects of haloperidol were only observed in the light period when animals tend to sleep, we suggest that these effects are related to REM sleep disruption after haloperidol injection / A dopamina (DA) regula tanto o sono quanto o processo de forma??o de mem?rias, enquanto o sono desempenha uma fun??o essencial na consolida??o de diferentes tipos de mem?rias. Acreditamos que a manipula??o farmacol?gica das vias dopamin?rgicas possa afetar o ciclo sono-vig?lia, acarretando d?ficits mnem?nicos, os quais podem ser observados tanto em n?vel comportamental quanto molecular. Dessa forma, no presente estudo, investigamos o efeito do haloperidol (halo - 0,3 mg/kg; i.p.), administrado imediatamente ap?s sess?es de treino no per?odo da manh? e da noite, sobre o desempenho de camundongos no teste de prefer?ncia por objetos novos (TPON). Observamos que esse tratamento causou um preju?zo mnem?nico apenas nos camundongos testados pela manh?. Devido ? maior ocorr?ncia de epis?dios de sono durante a fase clara dos roedores, acreditamos que esse d?ficit pode estar associado a uma cascata de plasticidade hipocampal, a qual envolve a express?o de diferentes mol?culas em per?odos distintos ap?s a exposi??o ao est?mulo mnem?nico inicial. Para testar tal hip?tese, realizamos imunohistoqu?mica (IHQ) em tecidos de animais na?ve n?o expostos (NV), bem como de animais expostos aos objetos com posterior inje??o de halo ou salina (ve?culo - VH), perfundidos 3, 6 e 12h ap?s o est?mulo inicial. Quantificamos a express?o hipocampal (CA1, CA3 e GD) das prote?nas CaMKII-P, Zif-268 e BDNF, atrav?s de densitometria e contagem de c?lulas (somente para Zif-268). Observamos um aumento parcial na express?o de CaMKII-P em animais VH 3h, na regi?o CA3. Quanto ao grupo halo, houve uma redu??o dos n?veis de CaMKII-P nos tr?s hor?rios analisados; de Zif-268 em 6h, tanto em CA1 quanto CA3; e de BDNF em 12h, apenas no GD. Considerando-se o melhor desempenho diurno na consolida??o de mem?rias, associado ? fun??o do halo na regula??o do sono, propomos que a redu??o de plasticidade sin?ptica e os d?ficits no processo mnem?nicoocorreram devido ? supress?o do sono REM mediada pelo tratamento com haloperidol

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoseFlavioVC.pdf: 1066045 bytes, checksum: 95695454c994be62f483dac7ee237cd8 (MD5) Previous issue date: 2005-02-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Canine Visceral Leishmania (CVL) is an important zoonotic disease that has a world wide distribution and has a large impact on public health on the American Continent, especially in Brazil, where the nature of endemic diseases in humans affects a large part of the nation. The influence of the prevalence of CVL in the increased rate of human cases in endemic areas and in the unleashing of epidemic outbreaks shows the need for a more profound understanding, that would generate significant advances in the current measures used to control the reservoirs of sickness that are practiced by the Programa Nacional de Vigil?ncia e Controle da Leishmaniose Visceral. The present work describes and compares the clinical-laboratorial and histopathological findings of twenty-three dogs that were naturally infected by Leishmania chagasi, from endemic areas in metropolitan Natal, Rio Grande do Norte, Brazil. These animals, that were selected and given physical and serological exams (IFI and ELISA rK-39), were classified according to the degree of clinical severity and had blood samples drawn (whole blood and serum) for a complete hemogram and a coagulogram to be done as well as biochemical tests for kidney and liver function. The confirmation of infection by L. chagasi was done after the euthanasia of the animals, through the direct demonstration of the parasite in the impression of the spleen and liver crowned with GIEMSA and through a cultivation by means of NNN/Schneider. According to the clinical evaluation, the animals were classified as asymptomatic (7), oligosymptomatic (7) and polysymptomatic (9). Among the animals that were chosen to be autopsied, there were 2 asymptomatic, 3 oligosymptomatic and 3 polysymptomatic, for the purpose of studying their histopathology, having collected fragments of the spleen, liver, kidneys and skin and were fixed in 10% tamponed formol. The comparison between the average parameters of the clinical-laboratory tested animals in the groups was done through the Student t test (a<0.05). The main clinical signals observed were lymphadenomegaly, alopecy, dermatitis, exfoliation, cutaneous ulcers, onicogriphosis and emaciation. The main clinical-laboratorial alterations established, mainly in the polysymptomatic group, were anemia, hyperproteinemia, hyperglobulinemia, alterations in the albumin/globulin ratio and increased ALT activity. Renal alterations were not verified (urea and creatinine levels were normal). Thrombocytopenia was observed in three clinical groups. However, the other indicators of coagulation function (TAP and TTPA) did not have abnormal variations. There were inflammatory infiltrations and leishmania amastigotes in the skin of polysymptomatic dogs, however, they were not found in the skin of asymptomatic animals. Hypertrophy and hyperplasia of the phagocyte mononuclear system, leishmania amastigote parasites were found in the macrophages, extramedullary hematopoiesis and degenerative alterations were detected in the spleen and liver of 8 of the animals submitted to histopathological exams. In accord with these results, it was demonstrated that the expected alterations in the hematological and biochemical parameters in function of their viscerotropic nature of CVL are mainly observed in the more advanced stages of the disease. The absence of inflammatory infiltration and parasite load in the skin suggest that infected animals without symptoms may have an importance irrelevant to the infectiousness of the vector / A leishmaniose visceral canina (LVC) ? uma importante zoonose de distribui??o mundial com grande impacto em sa?de p?blica no Continente Americano, especialmente no Brasil, onde a natureza end?mica da doen?a humana afeta boa parte do territ?rio nacional. A influ?ncia da preval?ncia da LVC na amplia??o da taxa de casos humanos em ?reas end?micas e no desencadeamento de surtos epid?micos ainda carece de um entendimento mais profundo, o que geraria avan?os significativos nas atuais medidas destinadas ao controle de reservat?rios da doen?a preconizadas pelo Programa Nacional de Vigil?ncia e Controle da Leishmaniose Visceral. O presente trabalho descreveu e comparou os achados cl?nico-laboratoriais e histopatol?gicos de vinte e tr?s c?es infectados naturalmente pela Leishmania chagasi, provenientes de localidades end?micas da ?rea metropolitana de Natal-RN. Estes animais, escolhidos a partir de exame f?sico e sorologia (IFI e ELISA rK-39), foram classificados de acordo com o grau de comprometimento cl?nico e submetidos a coleta de sangue (sangue total e soro) para realiza??o de hemograma completo, provas bioqu?micas de fun??o renal e hep?tica, e coagulograma. A confirma??o da infec??o por L. chagasi foi realizada ap?s a eutan?sia dos animais, pela demonstra??o direta do parasita em impress?o de ba?o e f?gado corado com GIEMSA e atrav?s de cultivo em meio NNN/Schneider. De acordo com a avalia??o cl?nica, os animais foram classificados em assintom?ticos (7), oligossintom?ticos (7) e polissintom?ticos (9). Dentre os animais necropsiados, foram selecionados 2 c?es assintom?ticos, 3 oligossintom?ticos e 3 polissintom?ticos para o estudo histopatol?gico, sendo colhidos fragmentos de ba?o, f?gado rins e pele e fixados em formol a 10% tamponado. A compara??o entre as m?dias dos par?metros cl?nico-laboratoriais testados nos grupos foi realizada atrav?s do teste t de Student (&#945;<0,05). Os principais sinais cl?nicos observados foram linfadenomegalia, alopecia, dermatite esfoliativa, ?lceras cut?neas, onicogrifose e emacia??o. As principais altera??es cl?nico-laboratoriais estabelecidas, principalmente no grupo polissintom?tico, foram anemia, hiperproteinemia, hipoalbuminemia, hiperglobulinemia, altera??es no ?ndice albumina/globulina e aumento da atividade da ALT. Altera??es renais n?o foram verificadas (ur?ia e creatinina normais). Trombocitopenia foi observada no tr?s grupos cl?nicos, contudo, os outros indicadores da fun??o de coagula??o (TAP e TTPA) n?o apresentaram varia??es anormais. Foi observado Infiltrado inflamat?rio e amastigotas de leishmania na pele de c?es polissintom?ticos, por?m n?o na pele de animais assintom?ticos. Hipertrofia e hiperplasia do sistema fagocit?rio mononuclear, macr?fagos parasitados por amastigotas de leishmania, hematopoiese extramedular e altera??es degenerativas foram detectadas no ba?o e f?gado dos 8 animais submetidos a exame histopatol?gicos. De acordo com esses resultados, foi demonstrada que as altera??es esperadas nos par?metros hematol?gicos e bioqu?micos em fun??o da natureza viscerotr?pica da LVC s?o observadas principalmente em est?gios mais avan?ados da doen?a. A aus?ncia de infiltrado inflamat?rio e carga parasit?ria na pele sugerem que animais infectados sem sintomatologia talvez tenham import?ncia irrelevante na infectividade para o vetor

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielSCM_DISSERT.pdf: 1478409 bytes, checksum: 4c3dc0be5dfc867e58e628d7a5b789a7 (MD5) Previous issue date: 2013-03-04 / The use of medicinal plants to cure and treat various diseases is a common practice in the world and in Brazil. In several regions of the Brazil?s Northeast, the cactus Cereus jamacaru, known as mandacaru, is used popularly as a treatment to many diseases, including those related to heart respiratory diseases, gastric ulcers, scurvy, and kidney diseases. However, there is a scarcity in the scientific literature that proves scientifically the popular application of this cactus. Like other plants, Cereus jamacaru synthesizes several potentially bioactive molecules, like as polysaccharides. In this work, three polysaccharides-rich aqueous extracts, MCA80, MPM and MCP60, were obtained from this plant and analyzed chemically, as well as their cytotoxic and antioxidant potential. The data showed that all extracts consist mainly of polysaccharides (89.42 to 95.76%), but also protein (> 2%) and phenolic (3 to 8.87%) contaminants were detected. All extracts are rich in galactose, glucose and mannose. In addition, glucuronic acid was found in MCA80 and MCP60. The extracts showed total antioxidant capacity ranged from 55.21 to 68.13 of ascorbic acid equivalents (AAE). Besides, they exhibited reducer power and cupric chelation in a dose-dependent manner. None of the extracts inhibited the MTT reduction in the presence of prostate tumor cells (PC-3). However, MCP60 was the most effective extract by preventing the reduction of MTT by about 80% in the presence of cells 786. Nuclear fragmentation tests showed that this extract induces cell death. The data indicated that mandacaru synthesizes bioactive polysaccharides with potential as antioxidant and antitumor agents. For future studies, it is intended to purify and characterize these polysaccharides and its antioxidant and antitumor mechanisms / A utiliza??o de plantas medicinais para a cura e tratamento de diversas afec??es ? uma pr?tica comum no mundo e tamb?m no Brasil. Em v?rias regi?es do Nordeste brasileiro o cacto Cereus jamacaru, mais conhecido como mandacaru, ? utilizado popularmente no tratamento de v?rias doen?as, incluindo aquelas relacionadas com problemas card?acos, respirat?rios, ?lceras g?stricas, escorbuto, e problemas renais. Contudo, h? uma escassez na literatura cient?fica que comprove cientificamente a aplica??o popular do mandacaru. Assim como outras plantas, Cereus jamacaru sintetiza v?rias mol?culas potencialmente bioativas, como polissacar?deos. Neste trabalho, tr?s extratos aquosos ricos em polissacar?deos, MCA80, MPM e MCP60, foram obtidos dessa planta e analisados quimicamente, bem como, foi avaliado os seus potencias como agentes antioxidantes e citot?xicos. Os dados mostraram que todos os extratos s?o constitu?dos principalmente de polissacar?deos (89,42 a 95,76%), por?m foram detectados contaminantes proteicos (>2 %) e fen?licos (3 a 8,87%). Todos os extratos s?o ricos em galactose, glicose e manose. Al?m disso, de MCA80 e MCP60 apresentam ?cido glucur?nico em sua composi??o. Os extratos apresentaram capacidade antioxidante total variando de 55,21 a 68,13 equivalentes de ?cido asc?rbico (EAA). Por?m n?o apresentaram atividade sequestradora de ?on super?xido. Por outro lado, eles apresentaram atividade redutora e quela??o c?prica de forma dose-dependente. Nenhum dos extratos inibiu a redu??o do MTT na presen?a das c?lulas tumorais de pr?stata (PC-3). Por outro lado, as c?lulas HEK, HeLa e 786 tiveram seu poder redutor de MTT inibido em diferentes n?veis na presen?a dos extratos. MCP60 foi o extrato mais efetivo, impedindo a redu??o do MTT em cerca de 80% na presen?a das c?lulas 786. Ensaios de fragmenta??o nuclear mostraram que esse extrato induz morte celular. Os dados indicaram que mandacaru sintetiza polissacar?deos bioativos com potencial como agentes antioxidantes e antitumorais. Em estudos futuros pretende-se purificar esses polissacar?deos e caracterizar seus mecanismos de a??o antioxidante e antitumoral

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KarolineRTM_DISSERT.pdf: 1922479 bytes, checksum: 8abccc3ee5e2e3781906dadd1573c108 (MD5) Previous issue date: 2013-12-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Os cristais de Oxalato de C?lcio s?o os principais componentes dos c?lculos urin?rios e estes est?o intimamente relacionados com o estresse oxidativo na condi??o fisiopatol?gica da urolit?ase. Por causa disso, estudos recentes tem buscado componentes antioxidantes que tamb?m sejam capazes de inibir a forma??o desses cristais. Diante disso, esse trabalho tem como objetivo avaliar a atividade antioxidante de polissacar?deos sulfatados de alga marrons Dictyopteris justii e seu efeito sobre a cristaliza??o do oxalato de c?lcio in vitro. Assim, no presente estudo, quatro fra??es ricas em polissacar?deos sulfatados(DJ-0.3v, DJ-0.4v, DJ-0.5v, e DJ-1.2v) foram obtidas por prote?lise seguida de precipita??o sequencial com acetona a partir da esp?cie Dictyopteris justii. As an?lises qu?micas e o FT-IR mostraram que D. justii sintetiza popula??es de polissacar?deos sulfatados diferentes. A primeira, que se encontra em DJ-0.3v, ? rica em glicose, xilose e ?cido glucur?nico e apresenta tra?os de fucose; a segunda (DJ-0.4v), que tem como diferencial grandes quantidades de fucose; as duas popula??es que se encontram em DJ-0.5v e DJ-1.2v, que apresentam apenas glucose e tra?os de fucose, mas se diferenciam entre si pela quantidade de ?ons sulfato. Todos os polissacar?deos sulfatados extra?dos apresentaram atividade antioxidante para CAT, Poder Redutor e Quela??o de Cobre. No entanto, a fra??o DJ-0.4v foi a que apresentou melhor atividade antioxidante como tamb?m foi o que teve melhor capacidade de inibir a cristaliza??o de oxalato de c?lcio. Destaca-se tamb?m a fra??o DJ-0.5v, que foi o segundo composto mais potente inibidor da forma??o de cristais de oxalato, como tamb?m foi o composto que estabilizou os cristais dihidratados de oxalato (forma menos agressiva) impedindo-os de se transformarem em cristais monohidratados (forma mais agressiva). Os dados obtidos nos levam a propor que estes polissacar?deos s?o agentes promissores para serem utilizados posteriormente no tratamento da urolit?ase

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandoRFS2.pdf: 536272 bytes, checksum: 3a3c1cb63097447c30d5446bdc4b166a (MD5) Previous issue date: 2005-07-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The Iota, Kappa and Lambda commercial carrageenans are rarely pure and normally contain varying amounts of the other types of carrageenans. The exact amount of impurity depends on the seaweed source and extraction procedure. Then, different analysis methods have been applied for determination of the main constituents of carrageenans because these three carrageenans are extensively used in food, cosmetic and pharmaceutical industry. The electrophoresis of these compounds proved that the carrageenans are constituted by sulfated polysaccharides. These compounds were characterized by colorimetric methods and was observed that the Lambda carrageenan shown the greater value (33.38%) of sulfate. These polymers were examined by means of 13C NMR spectroscopy and infrared spectra. The polysaccharides consisted mainly of units alternating of sulfated galactoses and anhydrogalactoses. The aim of the study was also to test the inflammatory action of these different polysaccharides. A suitable model of inflammation is acute sterile inflammation of the rat hind limb induced by carrageenan. Paw edema was induced by injecting carrageenans (&#x3ba;, &#953; and &#955;) in saline into the hind paw of a male Wistar rats (175&#8211;200 g). The pathway to acute inflammation by carrageenan (kappa, iota and lambda) were expressed as time-edema dependence and measured by paw edema volume. For this purpose, was used an apparatus (pakymeter), which makes it possible to measure the inflammation (swelling of the rat foot) with sufficient accuracy. The results showed that &#954;-carrageenan (1%) have an edema of 3.7 mm and the paw edema increase was time and dose dependent; the &#953;-carrageenan (0.2%) caused an edema of 4 mm and the &#955;-carrageenan (1%) caused an edema of 3.6 mm. Other model was used in this study based in the inflammation of pleura for comparatives studies. Injection of carrageenans into the pleural cavity of rat induced an acute inflammatory response characterized by fluid accumulation in the pleural cavity, a large number of neutrophils and raised NO production. The levels of NO were measured by Griess reactive. The &#953;-carrageenan caused the greater inflammation, because it has high concentration of nitrite/nitrate (63.478 nmoles/rat), exudato volume (1.52 ml) and PMNs (4902 x 103 cells). Quantitative evaluation of inflammations of rats is a useful and important parameter for the evaluation of the efficacy of anti-inflammatory drugs / As carragenanas comerciais Iota, Kappa e Lambda s?o raramente puras e, normalmente, apresentam v?rios outros tipos de pol?meros. A quantidade exata de impurezas depende do m?todo de extra??o e da alga utilizada. Logo, diferentes m?todos t?m sido utilizados para a determina??o do conte?do das carragenanas, tento em vista que elas s?o extensivamente usadas nas ind?strias aliment?cia, de cosm?ticos e farmac?utica. A eletroforese desses compostos provou que eles s?o constitu?dos de polissacar?deos sulfatados. Estes compostos foram caracterizados por m?todos colorim?tricos e foi observado que a carragenana Lambda possui o maior teor de sulfato (33,38%). Esses pol?meros foram analisados por espectroscopias de IV e 13C RNM. Estes polissacar?deos consistem principalmente de unidades alternadas de galactose e anidrogalactose sulfatadas. Foi poss?vel avaliar a a??o inflamat?ria desses diferentes compostos atrav?s de um modelo cl?ssico de inflama??o, que ? o de inflama??o aguda, na pata de ratos, induzida por carragenanas. O edema plantar foi induzido pela inje??o das carragenanas (&#x3ba;, &#953; e &#955;) na pata direita de ratos machos da ra?a Wistar (175-200g). A inflama??o aguda induzida por carragenanas foi expressa pela rela??o tempo-edema e medida pelo volume do edema plantar. Para isto, foi utilizado um paqu?metro, que confere mais precis?o a mensura??o da inflama??o (incha?o na pata do rato). Os resultados mostraram que a carragenana Kappa (1%) induz um edema de 3,7mm e o aumento de volume do edema ? tempo e dose-dependente; a Iota (0,2%) provoca um edema de 4mm; e a Lambda (1%) um edema de 3,6mm. O outro modelo usado neste estudo comparativo ? baseado na inflama??o da pleura (pleurisia). A inje??o de carragenanas na cavidade pleural dos ratos induz uma resposta inflamat?ria aguda caracterizada pelo acumulo de l?quido na cavidade pleural, um grande n?mero de neutr?filos e aumento na produ??o de NO. A carragenana Iota provocou a inflama??o intensa, o que pode ser comprovado pela verifica??o do volume do exudato (1,52 ml), o teor de nitrato/nitrito (63,478 nmol/rato) e a contagem de leuc?citos polimorfonucleares - PMN (4902 x 103 c?lulas). A avalia??o quantitativa da inflama??o em ratos ? um par?metro importante para a avalia??o da efic?cia de drogas antiinflamat?rias

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MariaLC.pdf: 493490 bytes, checksum: ba60f2812dd358a875dfd794b36dacc3 (MD5) Previous issue date: 2007-06-15 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The fucoidan from Fucus vesiculosus is known for having diverse biological properties. This study analyzed the therapeutic action of populations of commercial fucoidan (F. vesiculosus) on zymosan-induced arthritis. Three populations of fucoidan were obtained after acetone fractionation; these were denominated F1 (52.3%), F2 (36.7%) and F3 (10.7%). Chemical analyses showed that F1 contained the largest amount of sulfate ion. The electrophoretic profile shows that the commercial or total fucoidan (TF), different from the other fucoidans and from glycosaminoglycan patterns, is quite polydisperse, which indicates that it is composed of a mixture of sulfate polysaccharides. On the other hand, the fucoidans obtained from TF showed only an electrophoretic band with much lower polydispersion than that observed for TF. Fucoidan F2 showed a migration between fucoidans F1 and F3. Owing to the small amount of mass obtained from F3, we used only fucoidans F1 and F2 in the induced arthritis tests. After 1 hour of induction, we administered F1 or F2 (10, 25 and 50 mg/kg i.p.) or diclofenac sodium (10 mg/kg i.p.) or lumiracoxib (5 mg/kg o.a.) or L-NAME (30 mg/kg i.p.). After 6 hours, we performed analyses of cell influx and nitrite levels in addition to histopathological analysis. Fucoidans F1 and F2 were more potent both in decreasing the number of leukocytes and the amount of nitric oxide found in the synovial fluid. This indicates that the anti-inflammatory mechanism of these fucoidans is not only related to selectin block, but also to nitric oxide synthesis inhibition / A fucoidana de Fucus vesiculosus ? conhecida por exibir fun??es biol?gicas diversas. Este trabalho analisou a a??o terap?utica de popula??es obtidas da fucoidana comercial (F. vesiculosus) no modelo de artrite induzida por zymosan. Ap?s fracionamento com acetona obteve-se tr?s popula??es de fucoidana que foram denominadas de fucoidanas F1 (52,3%), F2 (36,7%) e F3 (10,7%). As an?lises qu?micas demonstraram que F1, dentre as fucoidanas obtidas, foi a que apresentou a maior quantidade do ?on sulfato. O perfil eletrofor?tico mostra que a fucoidana comercial ou total (FT), diferente das outras fucoidanas e dos padr?es de glicosaminoglicanos, se mostrou bastante polidisperso, o que indicou que essa ? constitu?da por uma mistura de polissacar?deos sulfatados. Por outro lado, as fucoidanas obtidas a partir de FT mostraram apenas uma banda eletrofor?tica com uma polidispers?o bem menor do que aquela observada para FT. A fucoidana F2 apresentou uma migra??o intermedi?ria entre as fucoidanas F1 e F3. Devido a pequena quantidade de massa obtida de F3, utilizou-se apenas as fucoidanas F1 e F2 nos ensaios da artrite induzida. Ap?s 1 hora da indu??o foram administradas F1 ou F2 (10, 25 e 50 mg/Kg i.p) ou diclofenaco s?dico (10 mg/Kg i.p) ou lumiracoxibe (5 mg/Kg v.o) ou L-NAME (30 mg/Kg i.p). Ap?s 6 h, foram realizadas as an?lises do influxo celular e n?veis de nitrito e a an?lise histopatol?gica. As fucoidanas F1 e F2 foram mais potentes tanto na diminui??o do n?mero de leuc?citos, quanto na quantidade de oxido n?trico encontrado no lavado. O que indica que o mecanismo antiinflamat?rio dessas fucoidanas n?o est? s? relacionado com o bloqueio das selectinas, mas tamb?m com a inibi??o da s?ntese do oxido n?trico