The thrombogenic process that affects the hypertensive patient is associated with regulatory mechanisms present in the vascular endothelium. These mechanisms involve the release of a endothelium-derived relaxing factor, ectonucleotidases and calcium ions. Considering that vasodilators act both on blood pressure and on homeostasis, we evaluated the interference of different vasodilators on platelet NTPDase activity in hypertensive and healthy patients, with the objective of verifying patient sensitivity to vasodilators. In addition, the kinetic behavior of NTPDase was determined in the presence of the vasodilator that showed the greatest inhibitory influence. The results showed a decrease in NTPDase activity in the presence of arginine (0.025 mM 3.0 mM), sodium nitroprusside (0.01 mM 2.0 mM) and hydralazine (20.0 μM 90.0 μM), when tested for ATP and ADP substrate. However, the hydrolysis of ATP and ADP substrates increased when tested in the presence of arginine in the control group. No effects on enzyme activities were observed when pharmacological doses of captopril were tested in vitro. Kinetic behavior studies were estimated in the presence of sodium nitroprusside, which caused a mixed inhibition. The Km values increased and Vmax decreased with increasing sodium nitroprusside concentrations. The IC50 values were 3.66 mM and 2.64 mM (control group) and 2.08 mM and 3.15 mM (hypertensive group) for ATP and ADP, respectively. The Ki values obtained were 0.345 mM and 2.00 mM for the control group and 0.167mM and 0.325 mM for the hypertensive group, using ATP and ADP as substrate, respectively. In conclusion, based on these results it is possible to speculate that there is an interaction between vasodilators, donors of nitric oxide, and the inhibition of adenine nucleotide hydrolysis on platelets of hipertensive patients. / O processo trombogênico que afeta os pacientes hipertensos está associado com mecanismos regulatórios presentes no endotélio vascular. Esses mecanismos envolvem o fator de relaxamento do endotélio, as ectonucleotidases e íons cálcio. Considerando que os vasodilatadores atuam em ambos, na pressão sangüínea e na homeostase, foi avaliada a interferência de diferentes vasodilatadores na atividade da NTPDase de plaquetas de hipertensos e pacientes saudáveis, com o objetivo de verificar a sensibilidade destes pacientes aos vasodilatadores. Além disso, foi determinado o comportamento cinético da NTPDase na presença do vasodilatador que apresentou maior influência inibitória. Os resultados mostraram uma diminuição na atividade da NTPDase na presença de arginina (0,025 mM 3.0 mM), nitroprussiato de sódio (0,01 2,0 mM) e hidralazina (20,0 μM 90,0 μM), quando testada para os substratos ATP e ADP em plaquetas do grupo hipertensos. Porém, a hidrólise dos substratos ATP e ADP aumentou quando testado na presença de arginina no grupo controle. Nenhum efeito foi observado sobre a atividade da enzima quando doses farmacológicas de captopril foram testadas in vitro. Estudos do comportamento cinético foram realizados na presença de nitroprussiato de sódio, o qual causou uma inibição mista. Os valores de Km aumentaram e os de Vmax diminuíram com o aumento da concentração de nitroprussiato de sódio. Os valores de IC50 foram 3,66 mM e 2,64 mM (grupo controle) e 2,08 mM e 3,15 mM (grupo hipertenso) para ATP e ADP, respectivamente. Os valores de Ki obtidos foram 0,167 mM e 0,325 mM para o grupo hipertensos, usando ATP e ADP como substrato, respectivamente. Contudo, baseado nos resultados encontrados, é possível sugerir que existe uma interação entre vasodilatadores, doadores de óxido nítrico e a inibição da hidrólise de nucleotídeos da adenina em plaquetas de pacientes hipertensos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Depression affects millions of people of different ages, races, religions and income at some period of their lives. The etiology of most mood disorders, although not fully understood, has come into sharper focus in the recent past. This might also be of relevance in psychiatry as a poor treatment response often results from giving every patient the same treatment. Selenium-containing molecules show promising pharmacological properties. The antidepressant-like action of methyl phenyl selenide (CH3SePh) in the mouse forced swimming test (FST) and the tail suspension test (TST), models predictive of depressant activity, were investigated in this study. Moreover, the involvement of dopaminergic system in the antidepressant-like action of CH3SePh was studied. The behavioral results showed that CH3SePh significantly reduced the immobility time in the FST (25 and 50 mg/kg, intragastrically; i.g.) and the TST (50 mg/kg, i.g.), without accompanying changes in ambulation when assessed in the open-field test (OFT). The anti-immobility effect of CH3SePh (50 mg/kg, intragastrically; i.g.) in the FST was prevented by pretreatment of mice with haloperidol (0.2 mg/kg, i.p., a dopamine D2 receptor antagonist), SCH 23390 (R-(+)-8-chloro-2,3,4,5-tetrahydro-3-methyl-5-phenyl-1H-3-benzazepine-7-ol) (0.05 mg/kg, s.c., a dopamine D1 receptor antagonist) and sulpiride (50 mg/kg, i.p., a dopamine D2 and D3 antagonist). These results suggest that CH3SePh produced an antidepressant-like action in the mouse FST and TST. The antidepressant-like action of CH3SePh, a simple selenium-containing molecule, seems most likely to be mediated through an interaction with the dopaminergic system. / A depressão é uma doença altamente incapacitante que atinge milhões de pessoas ao redor do mundo. Os tratamentos disponíveis para este transtorno embora eficazes apresentam efeitos adversos e altos índices de não responsividade ao tratamento. Moléculas orgânicas que contem selênio apresentam promissoras propriedades farmacológicas. Neste estudo, a ação do tipo antidepressiva do fenilseleniometil (CH3SePh) em camundongos fêmeas foi investigada utilizando-se o teste do nado forçado (TNF) e o teste de suspensão da cauda (TSC), que são modelos preditivos de atividade depressiva. Além disso, o envolvimento do sistema dopaminérgico na ação do tipo antidepressiva do CH3SePh foi estudado. Os resultados comportamentais demonstraram que o CH3SePh (25 e 50 mg/kg, administrado pela via intragastrica; i.g.) reduziu significativamente o tempo de imobilidade no TNF e no TSC (50 mg/kg, i.g.), sem alterar a locomoção quando analisados no teste do campo aberto (TCA). O efeito anti-imobilidade do CH3SePh (50 mg/kg, i.g.) no TNF foi prevenido pelo pré-tratamento dos camundongos com haloperidol (0.2 mg/kg, administrado pela via intraperitoneal, i.p., antagonista dos receptores dopaminérgicos D2), SCH 23390 (R-(+)-8-chloro-2,3,4,5-tetrahydro-3-methyl-5-phenyl-1H-3-benzazepine-7-ol) (0.05 mg/kg, s.c., antagonista dos receptores dopaminérgicos D1) e sulpiride (50 mg/kg, i.p antagonista dos receptores dopaminérgicos D2 e D3). Estes resultados sugerem que o CH3SePh produziu uma ação do tipo antidepressiva no TNF e TSC em camundongos, dois modelos bem aceitos para triagem de novas drogas com potencial antidepressivo. Portanto, a ação do tipo antidepressiva do CH3SePh, uma molécula orgânica de selênio e de síntese simples, parece estar sendo mediada por uma interação com o sistema dopaminérgico.

Bone marrow transplantation (BMT) has been used in the treatment of a number of diseases. Before BMT, patients are submitted to a conditioning regime (CR) that consists of administration of high doses of chemo- or radiotherapy. This CR has the objective of eradicating the residual disease and inducing an immunosuppression that will allow the engraftment of cells infused in the BMT. The action of the cytostatic drugs, of radiotherapy and of the BMT itself is associated with the production of a great quantity of reactive oxygen species (ROS), which, if anti-oxidant defenses are inadequate, can lead to oxidative stress, which in turn has been implied in the etiology of several diseases and post-BMT complications. The objectives of this study were: to evaluate the oxidative status and to analyze aminolevulinic acid dehydratase activity (d-ALA-D) as a possible marker of oxidative stress in allogeneic or autologous BMT patients and compare these two modalities of BMT; to compare different CRs to determine which is less toxic in terms of oxidative stress; and to analyze d-ALA-D in the different CRs. In order to achieve these objectives, some indicators of oxidative stress, such as thiobarbituric acid reactive species (TBARS), vitamin C, catalase, superoxide dismutase, protein thiol groups (P-SH), non-protein thiol groups (NP-SH) and d- ALA-D, were evaluated in patients undergoing BMT at the University Hospital of the Universidade Federal de Santa Maria, between March 2007 and March 2008. The results obtained showed that patients presented signs of oxidative stress before BMT, during the CR and up to 20 days after BMT. A decrease in antioxidant defenses and in d-ALA-D activity was verified and an increase in lipid peroxidation in the blood of allogeneic and autologous patients was observed. In addition, there was a decrease in enzymatic and non-enzymatic antioxidants and in d-ALA-D activity in all CRs analyzed (fludarabine + cyclophosphamide FluCy, busulfan + cyclophosphamide BuCy and cyclophosphamide + total body irradiation CyTBI, for allogeneic patients and cyclophosphamide + BCNU+ etoposide CBV and melphalan, for autologous patients). There was also an increase in lipid peroxidation in the blood in all CRs, however, it was more pronounced with the use of CyTBI in allogeneic patients and with melphalan in autologous patients. In conclusion, this study demonstrated oxidative stress in allogeneic and autologous BMT patients. All CRs analyzed brought about an elevation of oxidative stress, however, this increase was greater with CyTBI (allogeneic patients) and melphalan (autologous patients). Finally, evaluation of d-ALA-D seems to be an efficient biomarker of oxidative stress in BMT patients, as well as to be reduced in these patients, also showed a negative correlation with the levels of TBARS and positive with antioxidants / O transplante de medula óssea (TMO) vem sendo usado no tratamento de várias doenças. Antes do TMO, os pacientes são submetidos a um regime de condicionamento (RC), que consiste na administração de altas doses de quimioterapia ou radioquimioterapia. Este RC tem a finalidade de erradicar a doença residual do paciente e induzir uma imunossupressão que permita a pega das células infundidas no TMO. A ação das drogas citostáticas, da radioterapia e do próprio procedimento TMO está associada à produção de grandes quantidades de espécies reativas de oxigênio (EROs), que com uma defesa antioxidante inadequada pode resultar em estresse oxidativo, que por sua vez, tem sido implicado na etiologia de várias doenças e complicações pós-TMO. Os objetivos deste estudo foram avaliar o estatus oxidativo e também analisar a atividade da enzima d-aminolevulinato desidratase (d-ALA-D) como possível marcador de estresse oxidativo em pacientes transplantados de medula óssea, alogênico ou autólogo, comparando essas duas modalidades de TMO. Comparar diferentes RCs, visando determinar qual deles poderia ser menos tóxico para os pacientes transplantados de medula do tipo alogênico ou autólogo, em termos de estresse oxidativo. E também analisar a atividade da enzima d-ALA-D nos diferentes RCs. Para atingir tais objetivos, alguns indicadores de estresse oxidativo como, espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), vitamina C, catalase, superóxido dismutase, grupos tióis protéicos (P-SH), e não protéicos (NP-SH) e a enzima d-ALA-D, foram avaliados em pacientes submetidos à TMO no Hospital Universitário de Santa Maria, no período de Março de 2007 à Março de 2008. Os resultados obtidos revelaram que os pacientes apresentaram sinais de estresse oxidativo antes do TMO, durante o RC e até 20 dias após o TMO. Ocorreu uma diminuição nas defesas antioxidantes e na atividade da enzima d-ALA-D e um aumento na peroxidação lipídica no sangue dos pacientes alogênicos e autólogos. Com relação aos RCs, nos pacientes alogênicos e também nos autólogos, ocorreu uma diminuição nos antioxidantes enzimáticos e não enzimáticos e na atividade da enzima d-ALA-D em todos os RCs analisados (fludarabine+ciclofosfamida FluCy, bussulfan+ciclofosfamida BuCy e ciclofosfamida+irradiação corporal CyTBI, para pacientes alogênicos e ciclofosfamida+BCNU+etoposide CBV e melfalan, para pacientes autólogos), ocorreu também um aumento na peroxidação lipídica no sangue com todos os RCs, porém mais pronunciadamente com o uso de CyTBI nos pacientes alogênicos e melfalan nos autólogos. Concluindo, esse estudo demonstrou estresse oxidativo nos pacientes com TMO alogênico e autólogo. Todos os RCs analisados promoveram estresse oxidativo, porém este foi mais evidente com o uso de CyTBI (pacientes alogênicos) e melfalan (pacientes autólogos) e ainda a avaliação da atividade da enzima d-ALA-D, parece ser um biomarcador de estresse oxidativo em pacientes TMO, já que além de encontrar-se diminuída nestes pacientes, esta ainda mostrou uma correlação negativa com os níveis de TBARS e positiva com os antioxidantes.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fever is a systemic response that results of a cascade of events that usually begins with pathogenic infection. Its development represents an important aspect of host defense that is mediated by the central nervous system. However, antipyretic medication are routinely prescribed because fever is associated with discomfort and anxiety, apart from to represent a iminent risk of febrile seizures. The present study aimed to investigate the effect of diacerein on body temperature and Baker s Yeast- and prostaglandin E2 -induced fever in young male Wistar rats (28 30 days of age). The subcutaneous administration of diacerein (5mg/kg) did not alter basal rectal temperature. This dose attenuated the febrile response induced by Baker Yeast, however did not reversed prostaglandin E2 -induced fever. Moreover, diacerein (5mg/kg, s.c.) delayed the onset of fever induced by Baker Yeast, but it did not prevent their installation. Interestingly, diacerein inhibited the leukocyte migration enhancement that occurred in the control group after the intraperitoneal administration of Baker s Yeast. These data suggest that the diacerein exert a weak antipyretic effect, which may occur through inhibition of synthesis of proinflammatory cytokines. However, further studies are needed to elucidate the precise mechanism of this antipyretic action of diacerein. / A febre é uma resposta sistêmica que resulta de uma cascata de eventos que inicia, geralmante, com infecção patogênica. Seu desenvolvimento representa um importante aspecto de defesa do hospedeiro, que é mediado pelo sistema nervoso central. No entanto, medicações antipiréticas são rotineiramente prescritas porque a febre está associada com desconforto e ansiedade, além de representar um risco iminente de convulsões febris. O presente estudo objetivou investigar o efeito da administração subcutânea de diacereína sobre a temperatura retal e sobre a febre induzida por suspensão de Saccharomyces cerevisiae (fermento de padeiro) e por prostaglandina-E2 em ratos machos jovens da linhagem Wistar (28 30 dias). A administração subcutânea de diacereína (5mg/kg) não alterou a temperatura retal dos animais, ao longo das medidas. Esta dose atenuou a resposta febril induzida por fermento de pão, no entanto não reverteu a febre induzida pela administração intratecal de prostaglandina-E2. Além disso, diacereína (5mg/kg, s.c.) prolongou a latência para o início da febre induzida por fermento de padeiro, mas não preveniu a sua instalação. Interessantemente, a diacereína inibiu o aumento da migração leucocitária que ocorreu no grupo controle, após a administração intraperitoneal de fermento de padeiro. Estes dados sugerem que a diacereína exerce um fraco efeito antipirético, o qual pode ocorrer através da inibição da síntese de citocinas pró-inflamatórias. Porém, mais estudos são necessários para elucidar o mecanismo preciso da ação antipirética da diacereína.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic, multisystem inflammatory disease with autoimmune features evident, expressing a cellular response of Th1. Characterized primarily by chronic synovitis, erosive and symmetrical, preferably peripheral joints, where there is an intense inflammatory process. The purinergic signaling system plays an important role in the modulation of inflammatory and immune responses through extracellular biomolecules such as nucleotides adenine and adenosine derivative nucleodise therefore, which are essential to providing the trigger and maintain the trigger inflammatory response. The effects of these molecules are promoted by the action of purinergic receptors specific and controlled by ectoenzymes, in cell surface. Based on these principles, this study investigated the effect of cinnamaldehyde in thermal hyperalgesia, , arthritis score, paw edema and thermal hyperalgesia as well histolgical parameters beyond the activity of the E-NTPDase and E-ADA in lymphocytes in rats adjuvant arthritis. The rats were divided in four groups, of wich two were adjuvant induced arthritis in the other two control groups. The animal received the compound at a concentration of 2,1% orally for a period of 15 days. Not differences were observed among analysis the arthritis score, paw edema it is however noted differences in thermal hyperalgesia in about 60% and in group induced arthritic and treated with cinnamaldehyde. Compared histological analysis it was noticed a slight reduction the lynphocitytic inflammatory infiltration in rats induced arthritis and treated with cinnamaldehyde. We found the increased the ATP hydrolysis in about 94,14% in arthritis induced when compared with control group and 20,58% when compared with groups treated with cinnmaldehyde . However, E-NTPDase activity when used ADP as substrate rised in 152,56% in relation the control group and 122,76% in relation the control group treated with cinnamaldehyde. In E-ADA activity was observed the increased in about 151,84%%in group arthritis induced when compared with control groups and rise 69,7% when compared with group arthritis induced treated with cinnamakdehyde. In conclusion, the data indicate that cinnamaldehyde was able to reduce thermal hyperalgesia and alterations histological in rats induced arthritis, as well as decreased the ectonucleotidase cascade, once we observed a activity gradual decrease in lymphocytes in group induced arthritis and treated with cynnamaldehyde in relation with all others groups. Therefore cinnamaldehyde was act to skewing some effects inflammatory of induced arthritis. Although requiring further study, cinnamaldehyde could be used as a complementary fot the benefit of people with rheumatoid arthritis. / Artrite reumatoide (AR) é uma doença inflamatória crônica e multisistêmica, com características evidentes de autoimunidade, que expressa uma resposta celular do tipo Th1. Caracteriza-se basicamente por sinovite crônica, simétrica e erosiva, preferencialmente de articulações periféricas, onde existe um intenso processo inflamatório. O sistema de sinalização purinérgica desenvolve um papel importante na modulação das respostas inflamatórias e imunes, através de biomoléculas extracelulares, como os nucleotídeos de adenina e seu derivado nuclesídeo adenosina, os quais são indispensáveis para a iniciação e manutenção de respostas inflamatórias. Os efeitos de tais moléculas são promovidos pela ação dos receptores purinérgicos específicos e controlados por ectoenzimas, na superfície das células. Com base nestes princípios esta pesquisa avaliou os efeitos do cinamaldeído no escore de artrite, edema de pata e hiperalgesia termal bem como em análises histológicas além da atividade de E-NTPDae e E-ADA em linfócitos de ratos com artritre induzida por adjuvante. Os ratos foram divididos em quatro grupos, dois grupos com artrite induzida por adjuvante e dois grupos controles. Estes animais receberam o composto na concentração de 2,1%, via oral por um período de 15 dias. Não se observou diferenças entre análises de escore de artrite e edema de pata, porém notou-se-se alterações em hiperalgesia termal em cerca de 60% no grupo com artrite induzida tratado com cinamaldeído. Em relação às análises histológicas foi notada uma leve redução do infiltrado inflamatório linfocitico em ratos com artrite induzida e tratados com cinamaldeído. Mostrou-se um aumento da hidrólise do ATP em 94,14% no grupo com artrite induzida quando comparado com o grupo controle e em 20,58% quando comparado com o grupo tratado com cinamaldeído. Contudo, a atividade da E-NTPDase quando utilizado ADP como substrato obteve um aumento 152,56% no grupo artrite induzida quando comparado com o grupo controle e 122,76% quando comparado com grupo tratado com cinamaldeído. Na atividade da EADA foi observado um aumento em cerca de 151,84% no grupo artrite induzida em relação ao grupo controle e em 69,7% quando comparado com a grupo artrite induzida e tratado com cinamaldeído. Em conclusão, os dados indicam que cinamadeído foi capaz de reduzir hiperalgesia termal e alterações histológicas, como também diminui a cascata das ectonucleotidases, uma vez que observamos uma queda gradativa das atividades nos linfócitos no grupo com artrite induzida por adjuvante tratados com cinamaldeído quando comparado com os demais grupos. Desta forma cinamaldeído foi capaz de exercer seus efeitos desfavorecendo alguns eventos inflamatórios característico da artrite induzida por adjuvante. Embora careça de maiores estudos, o cinamaldeído poderia ser utilizado como alvo terapêutico complementar para a artrite reumatoide.

This study was designed to determine the effect of organoselenium compounds on experimental models of cancer and diabetes. In mammary carcinogenesis induced by N-nitroso-N-methylurea (NMU, 3 doses of 50 mg/kg, i.p.), it was observed that the use of diet supplemented with diphenyl diselenide (1ppm, 7 months) was efficient in increase the latency to tumor onset and in reduce mammary tumor incidence and total number of tumors induced by NMU. The use of diet supplemented with diphenyl diselenide did not cause toxic effects in animals such as loss of body weight and alterations in hepatic and renal markers. These results suggest that diphenyl diselenide compound exhibited low toxicity even when supplemented by long time period. The both antioxidant and pro-oxidant properties of selenium may be linked to its anti-carcinogenic activity. In this context, our results indicated that antioxidant property exhibited by diphenyl diselenide can contribute for its protective effect against mammary carcinogenesis. In fact, the diet supplemented with diphenyl diselenide normalized superoxide dismutase (SOD) activity and elevated blood, hepatic and spleenic vitamin C levels in NMU treated animals. On experimental models of diabetes mellitus two treatments using organo selenium were carried out: (1) animals were treated with diphenyl diselenide and ebselen (1 mg/kg, s.c.) by 3 months after diabetes induction; (2) animals were treated with a diet supplemented with diphenyl diselenide (10 ppm) after the wean phase at the end of experimental period. Diabetes was induced with a single dose streptozotcin (STZ) (50 mg/Kg, i.p.). In model 1, it was observed that only diphenyl diselenide treatment caused significant reduction in hyperglycemia induced by STZ. This effect of diphenyl diselenide was accompanied by a reduction in the levels of glycated proteins, which were elevated in diabetic rats. Treatment with diphenyl diselenide increased SOD activity and vitamin C levels that were decreased in STZ treated rats. Of particular importance, diphenyl diselenide treatment promoted per se an increase in hepatic, renal and blood reduced glutathione (GSH) levels in animals. Similary, diphenyl diselenide caused an increase in hepatic and renal GSH levels in STZ treated rats. The STZ treatment caused a decrease in hepatic δ-ALA-D activity, which was normalized by diphenyl diselenide and ebselen treatments. This reduction in δ-ALA-D activity was not observed in renal enzyme. In model 2, it was observed that the use of diet supplemented with 10 ppm of diphenyl diselenide did not produce significant toxicity and reduced significantly the mortality index caused by STZ administration. The antioxidant property of diphenyl diselenide can be associated with this protective effect, since pro-oxidative action of STZ is linked to destruction process of cells β pancreatics. As observed in model 1, the use of diet supplemented with diphenyl diselenide reduced the alterations in antioxidant defenses induced by STZ and caused per se an increase in hepatic and blood -SH levels of animals. STZ treatment caused a decrease in hepatic δ-ALA-D activity, which was restored by the use of diet supplemented with diphenyl diselenide. The activity of renal δ-ALA-D enzyme was not modified in diabetic rats. In summary, our findings suggest that diphenyl diselenide can be considered a compound with significant therapeutic value on treatment of cancer and diabetes. However, further studies are needed to elucidate the mechanism(s) of action and the efficacy of compound as anti-diabetogenic and anticarcinogenic agent. / O presente estudo foi delineado para avaliar o efeito de compostos orgânicos de selênio em modelos experimentais de câncer e diabetes. No modelo de carcinogênese mamária induzida por N-nitroso-N-metilurea (NMU, 3 doses de 50 mg/Kg, i.p.) observou-se que o consumo de uma dieta suplementada com disseleneto de difenila (1 ppm, 7 meses) foi eficaz em aumentar a latência para o aparecimento dos tumores e em reduzir a incidência e o número total de tumores induzidos pelo carcinógeno. O consumo da dieta não ocasionou efeitos tóxicos aos animais, como a perda de peso e alterações em marcadores de dano hepático e renal. Esses dados sugerem que o composto exibiu uma baixa toxicidade mesmo quando suplementado por períodos prolongados. A capacidade antioxidante e pró-oxidante do selênio; as quais dependem diretamente da sua concentração, podem estar associadas à sua atividade anticarcinogênica. Nossos resultados relacionados com tais aspectos indicam que a atividade antioxidante exibida pelo composto pode ter contribuído para o seu efeito protetor neste modelo experimental de carcinogênese mamária. De fato, o consumo da dieta suplementada com disseleneto de difenila normalizou a atividade da enzima superóxido dismutase (SOD) e elevou os níveis de vitamina C no sangue, fígado e baço dos animais tratados com NMU. Nos modelos experimentais de Diabetes Mellitus dois tipos de tratamento com selênio foram utilizados: (1) os animais foram tratados com disseleneto de difenila e ebselen (1mg/Kg, s.c.) durante 3 meses após a indução de diabetes; (2) os animais foram tratados com uma dieta suplementada com disseleneto de difenila (10 ppm) desde a fase de desmame até o final do período experimental. Em ambos os modelos, a indução de diabetes foi realizada pela administração de uma dose de streptozotocina (STZ) (50 mg/Kg, i.p.). No modelo 1 evidenciou-se que somente o tratamento com disseleneto de difenila causou uma significante redução na hiperglicemia induzida por STZ. Este efeito foi acompanhado por uma redução significativa nos níveis de proteínas glicadas; os quais foram elevados nos animais diabéticos. O tratamento com disseleneto de difenila causou um aumento na atividade da enzima SOD e nos níveis de vitamina C, os quais foram diminuídos nos animais tratados com STZ. De particular importância, o tratamento com este composto promoveu per se um aumento nos níveis de glutationa reduzida (GSH) de fígado, rim e sangue e na atividade da enzima SOD de rim. De maneira similar, o tratamento com o disseleneto de difenila aumentou os níveis de GSH hepático e renal nos animais tratados com STZ. O tratamento com STZ causou uma redução na atividade da enzima aminolevulinato desidratase (δ-ALA-D) hepática, a qual não foi revertida pelos compostos orgânicos de selênio. Esta redução de atividade causada pela STZ não foi observada na enzima renal. No modelo 2 evidenciou-se que o consumo da dieta suplementada com 10 ppm de disseleneto de difenila, não causou efeitos tóxicos aos animais e reduziu de forma significativa o índice de mortalidade induzido pela administração de STZ. A atividade antioxidante do disseleneto de difenila, mais uma vez pode estar relacionada com tal efeito, uma vez que a ação pró-oxidante da STZ está envolvida na sua capacidade de causar a destruição das células β pancreáticas. Assim como observado para o modelo 1, o consumo da dieta suplementada com disseleneto de difenila reduziu as alterações nas defesas antioxidantes nos animais tratados com STZ e causou per se um aumento nos níveis de -SH hepático e sanguíneo dos animais. Novamente, o tratamento com STZ causou um decréscimo na atividade da enzima δ-ALA-D hepática, a qual não foi revertida pelo consumo com a dieta suplementada com disseleneto de difenila. A atividade da enzima δ-ALA-D renal não foi modificada nos animais diabéticos. Em resumo, nossos dados apontam o disseleneto de difenila como um composto de valor terapêutico significativo para o tratamento de câncer e Diabetes Mellitus. No entanto, mais estudos se fazem necessários para comprovarem a eficácia do composto e seu provável mecanismo de ação.

It is known that most chemical agents readily cross the placenta and thus may be considered that maternal exposure to external agents can result in toxic effects on embryo-fetal organism. Considering the chemical characteristics of organotellurium compounds, such as lipid solubility and molecular weight that facilitate the cross placental barrier, toxicological studies should be conducted to verify the effects of these compounds on intrauterine development in experimental models. Furthermore, organotellurium compounds have been reported as a promising alternative in health by showing pharmacological properties in different models in which oxidative stress plays a role. Based on these considerations, this thesis investigated the toxic effects of organotellurium compounds, with emphasis on embryonic and fetal development in mice. Article 1, the maternal exposure to diphenyl ditelluride (PhTe)2 at single dose of 60 mg/kg, s.c on GD 4 or GD 14 was embryotoxic in the absence of maternal toxicity but different from the results in rats, which was toxic to the dams and teratogenic to fetus at dose extremely lower than that of mice. These findings showed that pharmacokinetic factors may be involved in susceptibility to teratogenesis differences between rats and mice as well as the period of gestation. In the first manuscript, mice orally exposed to a single dose of 32.8 mg/kg of 1-butyltellurenyl-2-methyl thioheptene (BTMT) at GD 8, one day of the organogenesis period, did not altered the parameters of maternal and fetal oxidative stress, but was embryolethal in the absence of maternal toxicity. These results indicate embryolethality caused by BTMT in mice. In the second manuscript, the exposure to 2-phenylethynyl-butyl tellurium (PEB) in mice at single dose of 10 mg/kg did not induce maternal toxicity, but affect the reproductive sucess at GD 14. In mice, the acute exposure to different organotellurium compounds at doses considerably high showed adverse effects on intrauterine development ranging from discrete embryotoxic insult to embryolethality. We assume that the main reason for the different effects found for PEB and BTMT when compared to (PhTe)2 is that the molecular structures of these organotellurium are very different. Ditellurides are more reactive than tellurides because of the weak Te-Te bond when compared to the Te-carbon bond, since biotransformation process has been seem to be important for the actions of these compounds in vivo. Together, these data suggest that acute exposure to different organic compounds of tellurium induced adverse effects on intrauterine development dependent on the route of administration, the chemical structure of compounds, dose, animal species and period of gestation, therefore making it difficult to compare effects seen in the article with the results of manuscripts 1 and 2, but that does not impossible or discarded the importance of continuity and further research into the pharmacological and toxicological properties of these compounds. / É sabido que a maioria dos agentes químicos atravessam facilmente a placenta e, dessa maneira, pode-se considerar que a exposição materna a agentes externos pode resultar em efeitos tóxicos sobre o organismo embrio-fetal. Considerando as características químicas dos compostos orgânicos de telúrio, tais como a solubilidade lipídica e o peso molecular o que possibilitaria a passagem pela barreira placentária, estudos toxicológicos devem ser conduzidos a fim de verificar os efeitos desses compostos sobre o desenvolvimento intrauterino em modelos experimentais. Além do mais, compostos orgânicos de telúrio têm sido vistos como uma alternativa promissora na área da saúde por apresentarem propriedades farmacológicas em diferentes modelos em que o estresse oxidativo está envolvido. Baseado nisso, esta tese propôs verficar o efeito toxicológico de compostos orgânicos de telúrio com ênfase sobre o desenvolvimento embrionário e fetal em camundongos. No artigo 1, a exposição materna ao ditelureto de difenila (PhTe)2 na dose aguda de 60 mg/kg, via subcutânea, foi embriotóxico no 4º e 14º dia de gestação e na ausência de toxicidade materna, mas diferente dos resultados obtidos em ratos (em nosso laboratório), que foi tóxico para as mães e teratogênico para os fetos, com dose extremamente inferiores a de camundongos. Esses achados mostram que fatores farmacocinéticos podem estar envolvidos na diferença de suscetibilidade a teratogênese entre ratos e camundongos, como também o período da gestação. No manuscrito 1, a administração aguda de 1-butiltelurenil-2-metil tiohepteno (BTMT) na dose de 32,8 mg/kg, via oral, no 8º dia de gestação, um dos dias do período da organogênese em camundongos, não alterou os parâmetros de estresse oxidativo materno e fetal, porém foi embrioletal na ausência de toxicidade materna. Esses resultados indicaram a embrioletalidade causada pelo BTMT. No manuscrito 2, a administração de 2-feniletinil-butil telúrio (PEB) na dose aguda por via oral de 10 mg/kg não induz a toxicidade materna, mas afeta o sucesso reprodutivo no 14º dia de gestação. Pode-se supor que a principal razão para os efeitos diferentes encontrados para o PEB e ao BTMT quando comparados com o (PhTe)2, é que a estrutura química dos diteluretos e dos monoteluretos, já estudadas e relatadas na literatura é muito diferente. Isso porque os diteluretos são mais reativos que teluretos por causa da fraca ligação Te-Te quando comparado com a ligação Te-carbono, uma vez que o processo de biotransformação parece ser importante para as ações desses compostos in vivo. Juntos, estes dados sugerem que a exposição aguda aos diferentes compostos orgânicos de telúrio induziu a efeitos adversos sobre o desenvolvimento intrauterino dependentes da via de administração, estrutura química dos compostos, dose, espécie animal e período da gestação, portanto, tornando difícil a comparaçao dos efeitos observados no artigo com os resultados dos manuscritos 1 e 2, mas que não impossibilitam ou descartam a continuidade e a importância de pesquisas adicionais sobre as propriedades farmacológicas e toxicológicas destes compostos.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Diabetes mellitus is a major public health problem throughout the world. Besides the most common complications in the peripheral nervous system, diabetes may also cause a series of cognitive, structural and functional alterations in the central nervous system (CNS). Acetylcholinesterase (AChE), NTPDase and 5 -nucleotidase are important enzymes involved in neurotransmission and alterations in their activities have been observed in various diseases including diabetes. Resveratrol is a polyphenol abundant in grapes and red wine that possesses many biological activities such as antioxidant, anti-inflammatory and neuroprotective. In this context, the objective of the present study was to investigate the effect of resveratrol on the activity of the enzymes AChE, NTPDase and 5 -nucleotidase in the brain from streptozotocin (STZ) -induced diabetic rats. Furthermore, the effects of diabetes and resveratrol on memory were investigated through the inhibitory avoidance test. The following groups were studied: Control/saline; Control/RV 10 mg/kg; Control/RV 20 mg/kg; Diabetic/saline; Diabetic/RV 10 mg/kg; Diabetic/RV 20 mg/kg. The animals were treated during 30 days after which time they were sacrificed and samples were collected for enzymatic assays. The results demonstrated that AChE activity in the supernatant of cortex, striatum, hippocampus, cerebellum, hypothalamus and cerebral cortex synaptosomes were increased in the diabetic/saline group compared to the control/saline group. Treatment with resveratrol prevented the increase of AChE activity in the diabetic/RV 10 and diabetic/RV 20 groups. When resveratrol was administered per se, a decrease in AChE activities was observed in the cortex, striatum and hippocampus in the control/RV 10mg/kg and control/RV 20 groups. In the inhibitory avoidance test, a decrease in step down latency was observed in the diabetic/saline group and the treatment with resveratrol prevented this increase in the diabetic /RV 10 and diabetic/RV 20 groups. In relation to NTPDase and 5 - nucleotidase, an increase in the activities was observed in the diabetic/saline group. Treatment with resveratrol produced a more pronounced increase in the activities of these enzymes in the diabetic /RV 10 and diabetic/RV 20 groups. When administered per se, resveratrol also triggered an increase in NTPDase and 5 -nucleotidase. The results obtained in the present study demonstrate that AChE, NTPDase and 5 - nucleotidase activities are altered in diabetic rats and treatment with resveratrol was able to modulate the activity of these enzymes, indicating that this compound may be promising in the treatment of disorders in the cholinergic and purinergic neurotransmission in the diabetic state. / O diabetes mellitus é um dos maiores problemas de saúde pública no mundo. Além das principais complicações no sistema nervoso periférico o diabetes pode também causar uma série de alterações cognitivas, funcionais e estruturais no sistema nervoso central (SNC). A acetilcolinesterase (AChE), NTPDase e 5 -nucleotidase são importantes enzimas envolvidas na neurotransmissão e alterações na sua atividade tem sido encontradas em várias doenças incluindo o diabetes. O resveratrol é um polifenol abundante em uvas e no vinho tinto, e possui muitas atividades biológicas como antioxidante, antiinflamatória e neuroprotetora. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do resveratrol na atividade das enzimas AChE, NTPDase e 5 -nucleotidase em encéfalo de ratos diabéticos induzidos com estreptozotocina. Além disso, foi investigado o efeito do diabetes e do resveratrol na memória através do teste de esquiva inibitória. Os seguintes grupos foram estudados (n=8-13): Controle/salina; Controle/RV 10mg/kg; Controle/RV 20 mg/kg; Diabético/salina; Diabético/RV 10 mg/kg; Diabético/RV 20 mg/kg. O tratamento foi realizado por 30 dias e após este período os animais foram sacrificados e as amostras coletadas para os ensaios enzimáticos. Os resultados demonstraram que a atividade da AChE em sobrenadante de córtex, estriado, hipocampo, cerebelo, hipotálamo e em sinaptossomas de córtex cerebral está aumentada no grupo diabético/salina comparado para o grupo controle/salina. O tratamento com resveratrol foi capaz de prevenir o aumento da atividade da AChE nos grupos diabético/RV 10 e diabético/RV 20. Quando o resveratrol foi administrado per se um decréscimo na atividade da AChE no córtex estriado e hipocampo nos grupos controle/RV 10; controle/RV 20 foi observado comparado com o grupo controle /salina. Na tarefa de esquiva inibitória um decréscimo no tempo de latência foi observado no grupo diabético/salina e o tratamento com resveratrol preveniu este decréscimo nos grupos diabético/RV 10 e diabético/RV 20. Em relação a NTPDase e 5 -nucleotidase um aumento na atividade foi observado no grupo diabético/salina comparado para o grupo controle/salina. O tratamento com resveratrol potencializou o aumento na atividade destas enzimas nos grupos diabético/RV 10 e diabético/RV 20. Quando administrado per se, o resveratrol também provocou um aumento na atividade da NTPDase e da 5 -nucleotidase. Os resultados obtidos no presente estudo demonstram que a atividade da AChE, NTPDase e 5 -nucleotidase está alterada em ratos diabéticos e o tratamento com resveratrol foi capaz de modular a atividade destas enzimas indicando que este composto pode ser promissor no tratamento de desordens na neurotransmissão colinérgica e purinérgica causadas no estado diabético.

Selenium is an element that can modulate the dopaminergic neurotransmission. Studies show that diphenyl diselenide, an organic compound of selenium, has antioxidant activity improves depressive-like behavior and reduce the activity of the enzyme monoamine oxidase (MAO). However, there are few studies concerning about possible alterations of diphenyl diselenide in dopaminergic system. Thus, the purpose of the present study was to evaluate the effects of acute and sub-chronic treatment of diphenyl diselenide on amphetamine-induced behavioral and biochemical alterations in mice. In the acute treatment, the mice were treated with diphenyl diselenide (5 and 10 mg/kg, s.c.) or vehicle (10% Tween 80, s.c.) 30 min before administration of amphetamine (1.25 mg/kg, i.p.). After 25 min, locomotor activity was assessed with an open field and, also, the time of stereotypy and immobility was assessed in a glass cage. Sub-chronic treatment was conducted with seven administrations of diphenyl diselenide (5 and 10 mg/kg, s.c.), or its vehicle being one administration per day. On the eighth day, amphetamine (1.25 mg/kg, i.p.) was administered and the behavioral tests were conducted after 25 min. In both treatments ex vivo tests were performed: isoform activity MAO-A and MAO-B, and measurement of total protein and non-protein thiol levels, oxidation of diclorofluorescein. Amphetamine increased the number of crossing and rearing in the open field test and diphenyl diselenide prevented only the increase in the number of crossings when acutely administered to mice. Furthermore, amphetamine increased the time of immobility and stereotypy in mice. Diphenyl diselenide did not prevent these effects. By contrary, at 10 mg/kg, sub-chronic administration of diphenyl diselenide increased per se the time of immobility and stereotypy. It was also found a positive correlation between immobility and stereotypy in acute and sub-chronic treatment with diphenyl diselenide. It was also detected a decrease in brain MAO-B activity caused by sub-chronic treatment with diphenyl diselenide either alone or in combination of amphetamine. Any change was detected in oxidative stress parameters. In conclusion, sub-chronic administration of diphenyl diselenide can promote a behavioral sensitization that seems to be, at least in part, dependent of MAO-B inhibition. / O selênio é um elemento químico capaz importante para o funcionamento celular, envolvido também na modulação do sistema dopaminérgico. Estudos mostram que o disseleneto de difenila, um composto orgânico de selênio, possui atividade antioxidante, melhora o comportamento tipo-depressivo relacionado à inibição da atividade da enzima monoamino oxidase (MAO). No entanto, existem poucos estudos acerca dos efeitos do disseleneto de difenila sobre o sistema dopaminérgico. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do tratamento agudo e sub-crônico do disseleneto de difenila sobre as alterações bioquímicas e comportamentais induzidas por anfetamina em camundongos. No tratamento agudo, os camundongos foram tratados com disseleneto de difenila (5 e 10 mg/kg, s.c.) ou veículo (10% de tween 80, s.c.) 30 minutos antes da administração de anfetamina (1,25 mg/kg, i.p.). Após 25 minutos, foram avaliados a atividade locomotora através do teste de campo aberto, além do tempo de estereotipia e imobilidade, avaliado em caixa espelhada. O tratamento subcrônico foi realizado com sete administrações de disseleneto de difenila ou veículo (5 e 10 mg/kg, s.c.) sendo uma administração por dia. No oitavo dia foi administrada a anfetamina (1,25 mg/kg, i.p.) e realizados os testes comportamentais 25 minutos após. Em ambos os tratamentos os testes ex-vivo realizados foram: atividade das isoformas MAO-A e MAO-B, níveis de tióis totais e não-protéico, oxidação da diclorofluoresceína. O tratamento com anfetamina aumentou o número de cruzamentos e de levantadas no teste do campo aberto e o disseleneto de difenila preveniu somente o número de cruzamentos quando administrado agudamente aos camundongos. Além disso, o tratamento com anfetamina aumentou o tempo de imobilidade e estereotipia em camundongos. O disseleneto de difenila não preveniu estes efeitos. Pelo contrário, na dose de 10 mg/kg, a administração subcrônica de disseleneto de difenila aumentou per se o tempo de imobilidade e de estereotipia. Uma correlação positiva entre o tempo de estereotipia e de imobilidade foi também encontrada tanto para o tratamento agudo como subcrônico com disseleneto de difenila. Também foi detectada uma diminuição na atividade cerebral da MAO-B causada pelo tratamento subcrônico com disseleneto de difenila tanto per se quanto em combinação com a anfetamina. Não foram encontradas alterações em parâmetros de estresse oxidativo. Em conclusão, o tratamento subcrônico com disseleneto de difenila pode promover uma sensibilização comportamental que parece ser, pelo menos em parte, dependente da inibição da MAO-B.

The objective of this study was to evaluate the effect of thorium (Th) on the metabolism of silver catfish (Rhamdia quelen) through biochemical parameters from the muscle tissue (glycogen, glucose, lactate, protein and ammonia), lipidic peroxidation levels (TBARS), catalase (CAT) and glutathione-S-transferase (GST) in the hepatic and muscular tissues and cytogenetic parameters through the evaluation of nuclear abnormalities in blood cells. Silver catfish juveniles (8.78 ± 0.10cm; 6.41 ± 0.17g) were exposed to different waterborne concentrations of ²³²Th (in μg.L-1): 33.6±8.7; 106.5±37.1; 191.6±19.0 and 758.4±150.4 for 15 days. The levels of muscle glycogen were significantly reduced in fish exposed to 106.5 μg.L-¹ Th, while glucose and protein increased in those exposed to 758.4 μg.L-¹ Th. Lactate levels were higher in fish maintained at 191.6 μg. L-¹ Th and ammonia was higher in those exposed to 33.6, 106.5 and 191.6 μg.L-¹ Th. The lipidic peroxidation levels were diminished in the liver of silver catfish exposed to all tested concentrations of Th. In the muscle lipidic peroxidation was higher in juveniles maintained at 106.5 μg.L-¹ Th and lower in those exposed to 191.6 and 758.4 μg.L-¹ Th. The CAT activity was higher in the hepatic tissue (but not muscle) of fish exposed to all tested concentrations of Th. The GST activity in the liver was lower in fish exposed to 33.6 and 106.5 μg.L-¹ Th, and in the muscular tissue of those maintained at 758.4 μg.L-1 Th. Silver catfish exposed to 106.5 μg.L-¹ presented a significant induction of micronuclei, but no alterations in other erythrocyte abnormalities were observed. These results suggest that exposure to waterborne Th induces changes in the metabolic state, increase of lipidic peroxidation in the liver, some alterations of CAT and GST, and DNA damage. / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de tório (Th) sobre parâmetros metabólicos (glicogênio, glicose, lactato, proteína e amônia), em tecido muscular de jundiás (Rhandia quelen), níveis de lipoperoxidação (TBARS), catalase (CAT) e glutationa-S-transferase(GST) nos tecidos hepático e muscular e parâmetros citogenéticos através da avaliação de anormalidades nucleares em células sanguíneas. Juvenis de jundiás (8,78±0,10cm; 6,41± 0,17g) foram expostos a diferentes concentrações de ²³²Th 33,6±8,7; 106,5±37,1; 191,6±19,0 e 758,4±150,4 em μg. L-¹ (três repetições por tratamento) por 15 dias. Os níveis de glicogênio muscular diminuíram significativamente a 106,5 μg. L-¹ Th. Glicose e proteína aumentaram na 758,4 μg. L-¹ Th. Os níveis de lactato apresentaram-se elevados em 106,5 μg. L-¹ Th. A amônia aumentou a 33,6; 106,5 e 191,6 μg.L-¹ Th. Os níveis de peroxidação lipídica diminuíram no fígado dos jundiás expostos a todas as concentrações de Th testadas. No músculo esquelético aumentaram a 106,5 μg. L-¹Th e diminuíram a 191,6 e 758,4 μg.L-¹ Th. A atividade da CAT no tecido hepático apresentou aumento em todas as concentrações testadas de Th. Nenhuma alteração foi observada no tecido muscular. A GST diminui no fígado a 33,6 e 106,5 μg.L-¹Th. No tecido muscular diminui a 758,4 μg.L-1 Th. Jundiás expostos a 106,5 μg. L-¹ apresentaram maior indução de micronúcleos. Não foi observadas alterações para outras anormalidades nucleares eritrocíticas. Os resultados obtidos sugerem mudanças nos intermediários metabólitos devido ao estresse provocado pelo Th, aumento da lipoperoxidação no fígado, sendo observado níveis variados no músculo esquelético, alterações das enzimas CAT e GST além de danos no DNA dos peixes expostos ao Th, comparando aos grupos controles.