Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su tesis en el Portal de Tesis Electrónicas / INTRODUCCION. La rehabilitación de pacientes desdentados es vital para recuperar las funciones alteradas por la pérdida de las piezas dentarias. Existen distintos métodos de rehabilitación, siendo el más común la prótesis removible debido principalmente a razones económicas. El uso de estos aparatos produce una serie de alteraciones en la cavidad bucal, entre estas se encuentra la estomatitis asociada a levaduras del género Candida. El microorganismo que se ha detectado con mayor frecuencia en este tipo de lesiones es Candida albicans, por lo que se considera fundamental para el desarrollo de esta patología. Se ha visto que para que esta infección se produzca se debe colonizar en un primer momento la prótesis removible, este sería el primer paso para la generar la infección de la mucosa oral. El tratamiento de este tipo de lesiones puede resultar difícil, particularmente en pacientes con condiciones predisponentes. Por esta razón se deben promover acciones preventivas que eviten que esta se produzca. Actualmente se ha descubierto que nanopartículas metálicas poseen un fuerte efecto antimicrobiano, por lo que se están utilizando actualmente en el área médica con el objetivo de prevenir infecciones. Los metales más utilizados con este fin son el cobre y la plata. En el presente estudio se utilizaron nanopartículas de cobre (CuNPs) para fabricar un nuevo material en base a acrílico para determinar la capacidad de estas CuNPs de inhibir el crecimiento de C. albicans, una levadura comensal de la microbiota oral, analizando el fenómeno en la superficie de los compósitos como en el medio de cultivo en el cual se sumergieron las muestras. METODOS. Se fabricaron muestras de acrílico cargadas con distintas concentraciones de CuNPs. La caracterización de estas se realizó mediante espectroscopía VIS-UV y espectrometría de energía dispersiva. Las muestras de acrílico se sumergieron en caldos de cultivo en los que se sembraron colonias de Candida albicans para evaluar si se detectaba alguna actividad antimicrobiana en relación al control. Se realizó un recuento de unidades formadoras de colonia (UFC) a partir de diluciones del sobrenadante y del eluido desde de la superficie de las muestras. RESULTADOS. No se apreciaron diferencias significativas al comparar el crecimiento de microorganismos en el medio de cultivo. Sin embargo a partir de los eluídos se pudo ver una disminución considerable en el número de UFC obtenidas desde las muestras cargadas con CuNPs y las muestras control. Este efecto fue directamente proporcional a la cantidad de CuNPs presentes en la resina. La actividad antimicrobiana se mantiene con el paso de los días. CONCLUSIONES. Las resinas acrílicas cargadas con CuNPs poseen una marcada actividad antimicrobiana frente a Candida albicans cuando esta entra en contacto con su superficie. Este efecto es directamente proporcional a la cantidad de CuNPs presentes en su composición y es sostenido en el tiempo. Las propiedades presentadas por este material sugieren que podría ser utilizado para la fabricación de prótesis removible con el objetivo de disminuir la incidencia de Candidiasis oral.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su tesis en el Portal de Tesis Electrónicas / La estomatitis protésica (ESP) se define como un proceso inflamatorio crónico de la mucosa adyacente a la prótesis removible (PR) total o parcial. Su diagnóstico es fundamentalmente clínico. Se ha reportado que no todas las ESP están asociadas a la portación de levaduras del género Candida, por lo que realizar un diagnóstico microbiológico permitirá restringir el uso de antifúngicos a las expresiones clínicas que lo ameriten. En este estudio se determinó la ocurrencia e identificación de especies de Candida presentes en la cavidad oral de pacientes adultos portadores de PR. También se determinó la asociación entre: higiene protésica (HP), antigüedad de uso (AU) y hábito de uso (HU) de prótesis, con la presencia de ESP. Fueron seleccionados un total de 60 pacientes (42 mujeres y 18 hombres), según criterios de inclusión/exclusión, que consultaron por tratamiento protésico en el Centro de Diagnóstico Terapéutico (CDT) Eloísa Díaz, los cuales fueron divididos en 2 grupos, con y sin ESP, respectivamente. La frecuencia de levaduras del género Candida (LGC) presentes en mucosa oral, los niveles salivales de LGC y la identificación de especies fueron determinados con pruebas fenotípicas y, la asociación de los factores de riesgo (HP, AU y HU de PR) con ESP, también fue evaluada. La frecuencia de ESP en la muestra fue de 68,3%, siendo el diagnóstico más frecuente la ESP tipo II. No hubo diferencia estadísticamente significativa de LGC entre pacientes con y sin ESP. Los pacientes con ESP presentaron mayores niveles salivales de LGC que los pacientes sin ESP, siendo esta diferencia estadísticamente significativa. C. albicans fue la especie más frecuentemente aislada de muestras de saliva y mucosa oral en pacientes con y sin ESP. Hubo diferencias significativas entre HP y HU de PR entre los pacientes con y sin ESP. Sin embargo, no se encontró diferencia significativa en relación a la AU de PR de ambos grupos. El uso continuo de PR, una mala higiene protésica y altos niveles salivales de LGC son factores locales que podrían modificar el microambiente de la cavidad oral y favorecer la patogénesis de la ESP. 2

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: Diabetes mellitus tipo 2 (DM2) es una enfermedad crónica altamente prevalente que debe ser cuidadosamente controlada para evitar complicaciones asociadas a su descompensación, que se establece cuando los afectados presentan valores de Hemoglobina glicosilada (HbA1c) mayores a 7%. Este fenómeno se asocia con alteraciones salivales, como la acidificación del pH, lo que podría afectar el crecimiento y diferenciación de levaduras del género Candida con la consecuente aparición de manifestaciones clínicas asociadas (candidiasis). Es importante determinar número y especies de levaduras presentes en saliva de pacientes diabéticos para mejorar el enfoque terapéutico. Materiales y Métodos: Se recogieron muestras de saliva no estimulada de 52 pacientes con DM2 pertenecientes a la Asociación de diabéticos de Chile, a las que se les midió pH salival y se cultivaron en placas de Agar Sabouraud, realizando el recuento de colonias en UFC/ml. Posteriormente se identificaron las especies en forma presuntiva en CHROMAgar Candida confirmándose mediante PCR con partidores específicos para Candida sp. a 2 ó 4 representantes de cada especie presuntiva. En el caso de las especies no identificadas, se utilizó la galería API ID 32C ® para su determinación. Se utilizó el test de Spearman para correlacionar las variables HbA1c, pH salival y cantidad de UFC/ml y la prueba de Chi cuadrado para comparar valores entre pacientes compensados y no compensados. Se consideraron estadísticamente significativos valores de p < 0,05. Resultados: El 50 % de los pacientes estaban descompensados. El pH salival promedio fue de 7,54 (S=0,46). El 75% de los pacientes fueron portadores de levaduras, de cuyo total, el 66% fue Candida albicans, el 44% Candida no Candida albicans, el 0,05% Rhodotorula. El 0,35% no fue identificado. En pacientes con DM2 descompensada, se observó asociación inversa entre valores de HbA1c y pH i 7 salival. A mayor acidificación salival se observó mayor diversidad, cantidad de levaduras del género Candida y mayor recuento de Candida glabrata. Conclusión: La descompensación metabólica en pacientes con DM2 puede resultar en acidificación del pH salival afectando la cuantificación y la diversidad de levaduras presentes en boca lo que debiese ser considerado al momento de establecer un enfoque terapéutico. / Adscrito a Proyecto FIOUCH 13-002

Lipases (E.C. 3.1.1.3) são serina-hidrolases e agem em sobre ésteres de ácidos graxos de cadeia curta. Elas exibem atividade específica e enantiosseletiva, e sendo assim, há vasto interesse comercial, em pesquisa e indústria de biotecnologia. Lipases microbianas são interessantes para indústria, devido à facilidade de purificação e alta produção que permitem. Muitas leveduras possuem capacidade de produzir naturalmente estas enzimas, permitindo a obtenção de lipases não-transgênicas e com maior rapidez. Este trabalho teve como objetivo avaliar a produção de lipase em leveduras selvagens e otimizar a sua produção em uma linhagem selecionada, bem como caracterizar esta enzima. Uma varredura inicial foi realizada em placas de Tween 80 e Ágar-óleo. Leveduras com crescimento positivo foram então cultivadas em meio mínimo sob agitação, suplementado com óleo de soja, e o sobrenadante teve a sua atividade enzimática testada sobre p-nitrofenil palmitato (pNPP). Foram testadas 133 linhagens provenientes de diferentes substratos, e treze apresentaram uma atividade lipolítica significativamente alta em comparação com as demais (p <0,001). Otimizações preliminares mostram condições ótimas de secreção da enzima produzida pela levedura selecionada, Candida parapsilosis QU110, em meios de cultura com pH inicial em torno de 6,0, contendo triptona e óleo de oliva como fontes de nitrogênio e carbono, respectivamente. O extrato bruto (sobrenadante livre de células) apresenta estabilidade a surfactantes não-iônicos e n-hexano, mas não a etanol ou metanol. Condições ótimas de atividade da enzima, avaliadas pela metodologia de superfície de resposta, foram observadas a 36 °C e pH 8,0. / Lipases (E.C. 3.1.1.3) are serine-hydrolases, and act on long chain fatty acid ester bonds. They exhibit specific and enantioselective activities, and as such there is plenty of interest for industry. Microbial lipases are interesting for industry, because its ease of purification and high yelds it permits. Several yeasts possess the ability of naturallly produce these enzymes, allowing the fast production of non-transgenic lipases. This work aimed at evaluating lipase production in wild yeast strains and optimizing its production, as well as characterizing this enzyme. An initial screening was made on Tween 80 and oil-agar plates. Growing yeasts were then cultivated under agitation in oil-supplemented minimum medium, and the supernatant had its enzymatic activity tested over p-nitrophenyl palmitate (pNPP). One-hundred and thirty-three strains isolated from different substrates were tested, and thirteen showed significantly high lipolytic activity when compared to the others (p<0,05). Preliminary optimization of lipase production by the selected yeast, Candida parapsilosis QU110, showed optimal enzyme secretion in media with initial pH 6.0, containing olive oil and tryptone as carbon and nitrogen sources, respectively. The crude extract (cell-free supernatant) showed stability against surfactants and n-hexan, but not against ethanol or methanol. Optimal enzyme activity conditions, evaluated through surface response methodology, were observed at 36 °C and pH 8.0.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-02-24T19:12:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Rafaela Ferreira dos Santos.pdf: 1936237 bytes, checksum: 8bff854c5c7d1cb645a017af02d5e884 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-24T19:12:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Rafaela Ferreira dos Santos.pdf: 1936237 bytes, checksum: 8bff854c5c7d1cb645a017af02d5e884 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / CNPQ / Ageratum conyzoides L. (Asteraceae), conhecida vulgarmente como mentrasto ou catinga de bode e utilizado na medicina popular, como purgante, antitermico, anti-inflamatorio, analgesico, anestesico, antiulcerogenico, antidiarreico, hemorragico e contra disturbios mentais. Poucos estudos acerca do controle de qualidade da materia prima vegetal e da atividade antifungica do oleo essencial foram relatados na literatura. Dessa forma, objetivou-se a realizacao de uma padronizacao farmacognostica, nos ambitos farmacobotanico, quimico e fisico-quimico alem da avaliacao da atividade antifungica. Realizaram-se cortes transversais para analise microscopica da folha, peciolo, caule e raiz; nas folhas foram realizados ainda cortes paradermicos. Seguindo a Farmacopeia Brasileira realizaram-se ensaios fisico-quimicos. Atraves de Cromatografia em Camada Delgada (CCD) foram identificados os grupos de metabolitos. Foi realizada extracao por hidrodestilacao e caracterizacao por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas do oleo essencial das folhas calculando-se o seu rendimento. Avaliou-se a atividade antifungica do oleo essencial frente a especies de Candida. A raiz apresenta epiderme uniseriada com celulas irregulares no parenquima cortical, raios xilematicos bem desenvolvidos e parenquima medular com formas celulares variadas. O caule tem a epiderme unisseriada, com tricomas tectores pluricelulares e sistema vascular colateral. A folha e anfiestomatica com estomatos anisociticos em sua maioria. O mesofilo e assimetrico com uma camada de parenquima palicadico. A nervura central tem contorno biconvexo. A triagem fitoquimica revelou mono e sesquiterpenos, triterpenos e esteroides, flavanoides, cumarinas e alcaloides. O teor de umidade 12,1%, os teores de cinzas totais e insoluveis em acido foram de 9,8 e 1,07% respectivamente. A granulometria permitiu classificar o po como moderadamente grosso. O rendimento do oleo essencial foi de 0,16% (p/v). Os constituintes majoritarios foram Precoceno I e ƒÀ-cariofileno. O oleo de A. conyzoides demonstrou atividade antifungica para diferentes especies de Candidas dentre elas C. glabrata, C. krusei, C. tropicalis, C. guilliermondii, C. parapsilisis, Candida famata e C. albicans. Dessa forma, com a caracterizacao farmacognostica e atividade antifungica para Candida confirmada, A. conyzoides pode ser considerado um material vegetal em potencial para a elaboracao de novos antifungicos. / Ageratum conyzoides L. (Asteraceae), commonly known as ―mentrasto‖ or ―catinga de bode‖ is used in traditional medicine, as a laxative, antipyretic, anti-inflammatory, analgesic, anesthetic, anti-ulcerogenic, anti-diarrheal, antihemorrhagic and against mental disorders. In the literature are few scientific studies concerning the quality control of the raw material from the plant and the antifungal activity of its oil. Therefore, a Pharmacognostic standardization covering the areas of pharmacobotanic, chemistry and physic-chemistry was performed, as well as an evaluation of the antifungal activity. For a microscopic analysis, the leaf, petiole, stem and root were transversely sectioned; further, paradermal sections were undertaken in the leaves. Complying with the Brazilian Pharmacopeia, physic-chemical trails were performed. The identification of metabolites groups was performed through Thin Layer Chromatography (TLC). The essential oil from the leaves was extracted by hydrodistillation and characterized by Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry, and then its yield was calculated. The antifungal activity of the essential oil was evaluated in resistance to some Candida species. The root presents uniseriate epidermis with irregular cells in the cortical parenchyma, well developed xylem and medullary parenchyma with diverse cellular forms. The stem exhibits uniseriate epidermis, with multicellular tector trichomes and collateral vascular system. The leaf is anfiestomatic with anisocytic stomats mostly. The mesophyll is asymmetric with a layer of palisade parenchyma. The central rib has biconvex contour. The phytochemical screening revealed mono and sesquiterpenes, triterpenes and steroids, flavonoids, cumarins and alkaloids. The moisture content of 12.1%, and the levels of total ash and acid-insoluble were 9.8 and 1.07%, respectively. The granulometry classified the powder as moderately thick and the yield of essential oil was 0.16% (w/v). The major constituents were preconeno I and β-caryophyllene. The A. conyzoides oil displayed antifungal activity to several species of Candida, among them C. glabrata, C. krusei, C. tropicalis, C. guilliermondii, C. parapsilisis, C. famata and C. albicans. Hence, with the pharmacognostic characterization and antifungal activity for Candida confirmed, A. conyzoides can be considered a potential plant material for the development of new antifungal agents.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-08T17:28:14Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Suanni Lemos de Andrade.pdf: 7566032 bytes, checksum: 39c42072f2634d0cff4165f120178aca (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-16T22:06:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Suanni Lemos de Andrade.pdf: 7566032 bytes, checksum: 39c42072f2634d0cff4165f120178aca (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T22:06:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Suanni Lemos de Andrade.pdf: 7566032 bytes, checksum: 39c42072f2634d0cff4165f120178aca (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / FAPEAM / Neoplasia maligna bucal se desenvolve a partir do revestimento epitelial da mucosa da boca. De acordo com a Organização Mundial de Saúde, ocorrem 640.000 casos de câncer oral por ano, sendo o sexto tipo mais incidente e responsável por 10% de todos os tumores malignos no mundo. Diversos fatores estão envolvidos na carcinogênese, incluindo as infecções por micro-organismos. As leveduras podem desencadear mecanismos cancerígenos por metabolizar substâncias cancerígenas, como as nitrosaminas. Infecções fúngicas em pacientes portadores de câncer bucal são induzidas pelo desequilíbrio imunológico devido à terapia antineoplásica, assim como pela virulência do agente etiológico. A virulência das espécies de Candida pode ser determinada pela capacidade de aderência, proliferação, produção de enzimas como a protease, formação de tubo germinativo e resistência a drogas antifúngicas, o que torna importante a busca de novas alternativas terapêuticas, como a planta Indigoffera suffruticosa. O objetivo deste trabalho é estudar a relação da produção de nitrosamina, testar a susceptibilidade antifúngica in vitro de drogas convencionais e do extrato de I. suffruticosa em leveduras isoladas de neoplasia maligna bucal. Amostras foram isoladas de lesões malignas bucais através de biópsia, em seguida processadas para a realização de exame direto e cultura. As leveduras isoladas foram purificadas e posteriormente identificadas através da taxonomia clássica e automação. Em seguida, foram verificados fatores de virulência das leveduras quanto à produção de tubo germinativo, aderência às células epiteliais orais, detecção de protease e sensibilidade a antifúngicos (anfotericiana B, fluconazol, nistatina e o extrato de I. suffruticosa). Foram coletadas 68 amostras clínicas em pacientes que apresentavam tumores bucais. Ocorreu o predomínio do gênero masculino, da tumoração na língua e do tipo histológico Carcinoma escamocelular. Um paciente apresentou paracoccidioidomicose que simulava clinicamente lesões neoplásicas. Das amostras clínicas obtidas em tumores bucais, foram isoladas 14 espécies de leveduras, sendo Candida albicans (7), C. famata (2), C. tropicalis (3), C. lusitanie (1), C. parapsilosis (1). Destas apenas os isolados C. famata (7085) e C. tropicalis (7090) não formaram tubo germinativo. Todos os isolados foram capazes de aderir às células epiteliais orais, sendo que 57% apresentaram forte aderência, 14% moderada e 29% fraca aderência. C. famata (7085), C. tropicalis (7092) e C. albicans (7098) não apresentaram atividade proteásica. Com relação ao teste de susceptibilidade a antifúngicos, todas as leveduras foram sensíveis às drogas nistatina e anfotericina B. Os isolados C. albicans (7094) e C. famata (7096) apresentaram resistência ao fluconazol. A proteína inibe o crescimento de C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis e C. tropicalis com CIM de 64, 32, 8 e 16 μg.mL⁻¹, respectivamente. Leveduras isoladas em tumores bucais apresentam perfis diversos quanto a patogenicidade e susceptibilidade a drogas antifúngicas. Anfotericina B, nistatina e fluconazol podem ser utilizadas no tratamento de infecções fúngicas da mucosa oral ou sistêmicas em pacientes com câncer de boca. Contudo, se faz importante o diagnóstico micológico em pacientes com suspeita de câncer oral, devido ao perfil clínico que pode simular o câncer e as de infecções associadas. / Malignant oral neoplasm develops from the epithelial lining of the mucosa of the mouth. According to the World Health Organization, there are 640,000 cases of oral cancer, the sixth type being more accessible and responsible for 10% of all malignancies in the world. Several factors are involved in carcinogenesis, including microorganism infections. Yeasts can initiate cancer mechanisms by metabolizing carcinogens, such as nitrosamines. Fungal infections in patients with oral cancer are induced by immunological imbalance due to antineoplastic therapy, as by virulence of the etiological agent. The virulence of Candida species can be determined by the ability of adhesion, proliferation, production of enzymes such as protease, formation of germ tubes and resistance to antifungal drugs, which makes it important to search for new therapeutic alternatives, such as the Indigoffera suffruticosa. The objective of this work is to study the relationship of nitrosamine production, to test the in vitro antifungal susceptibility of conventional drugs and I. suffruticosa extract in yeast isolated from oral malignant neoplasia. Samples were isolated from oral malignant lesions by biopsy, then processed for direct examination and culture. The isolated yeasts were purified and later identified through classical taxonomy and automation. Afterwards, yeast virulence factors were verified for germ tube production, adhesion to oral epithelial cells, protease detection and antifungal sensitivity (amphotericin B, fluconazole, nystatin and I. suffruticosa extract). A total of 68 clinical samples were collected in patients with oral tumors. The predominance of the male gender, of the tumor in the tongue and of the histological type squamous cellular Carcinoma. One patient had paracoccidioidomycosis that clinically mimicked neoplastic lesions. From the clinical samples obtained in oral tumors, 14 yeast species were isolated, being Candida albicans (7), C. famata (2), C. tropicalis (3), C. lusitanie (1) and C. parapsilosis (1). Of these, only C. famata (7085) and C. tropicalis (7090) isolates did not form germ tubes. All isolates were able to adhere to oral epithelial cells, with 57% showing strong adhesion, 14% moderate and 29% poor adherence. C. famata (7085), C. tropicalis (7092) and C. albicans (7098) showed no protease activity. Regarding the antifungal susceptibility test, all yeasts were sensitive to the drugs nystatin and amphotericin B. Isolates C. albicans (7094) and C. famata (7096) showed resistance to fluconazole. The protein inhibits the growth of C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis and C. tropicalis with CIM of 64, 32, 8 and 16 μg.mL⁻¹, respectively. Yeasts isolated from oral tumors have different profiles regarding pathogenicity and susceptibility to antifungal drugs. Amphotericin B, nystatin and fluconazole may be used in the treatment of fungal infections of the oral or systemic mucosa in patients with oral cancer. However, the mycological diagnosis is important in patients with suspected oral cancer, due to the clinical profile that can simulate the cancer and the associated infections.

Orientador: Adilma Regina Pippa Scamparini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-27T02:03:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paiva_JosedoEgitode_D.pdf: 37888594 bytes, checksum: 4e67df202663e894e37668687801f4de (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: No processo de hidrólise do bagaço de cana-de-açúcar usou-se um delineamento fatorial 22 para estudar a produção de monossacarídeos em quatro tempos de reação: 11, 18, 30 e 50 minutos. As regressões nos tempos de 11 e 18 minutos foram altamente significativas (p:::;0,05)com R2 de 0,9757 e 0,9718, respectivamente. As regressões nos tempos de 30 e 50 minutos não foram significativas (p20,05) com R2de 0,8049 e 0,7707, respectivamente. Diferente dos tempos anteriores, os resíduos apresentaram evidentes falta de ajuste. A massa de açúcares produzidos nas melhores condições (18 min de reação; 126°C e 3,10 % (v/v) de H2S04),foi de 333,41 mg/g de bagaço, b.s., composto por 266,73mg de xilose; 40,09 mg de glicose e 26,59 mg de arabinose/g do bagaço, b.s. Meio sintético e hidrolisado hemicelulósico do bagaço de cana-de-açúcar foram empregados para produção de xilitol por leveduras. Dentre ~O linhagens de leveduras testadas, Candida parapsilosis IZ 1710 foi a que apresentou melhores resultados em hidrolisado hemicelulósico: produção de xilitol = 22,85 g/L; rendimento = 0,72 g/g e produtividade = 0,31 g/L.h, na temperatura de 30°C e 31,35 g/L de xilose. Esses resultados foram estatisticamente (p:::;0,05)diferentes daqueles obtidos com outras linhagens...Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: In the hydrolysis process of sugar cane bagasse a 22 factorial design was used to study the production of monossaccharides at four reaction times: 11, 18, 30 and 50 minutes. Regression models at 30 and 50 minutes were not significant (p~0.05), with R2= 0.8049 and 0.7707, respectively. In contrast to the earlier times, residues presented lack of fit. The mass of sugars produced at the best condition (18 minutes of reaction, 126°C and 3.1 % (v/v) of H2S04)was 333.41 mg/g (d.w.) of bagasse, constituted of 266.73 mg of xylose; 40.09 mg of glucose and 26.59 mg of arabinose /g of bagasse (d.w.). Synthetic media and hemicellulosic hydrolisate of sugar cane bagasse were used for xylitol production by yeasts. Among 50 tested yeast strains, Cand ida parapsilosis IZ 1710 presented the best result (xylitol production = 22.85 g/L, yield = 0.73 g/g, productivity = 0.31 g/L.h}Jn hemicellulosic hydrolisate at 30°C and 31.35 g/L of xylose. The results were different (p~0.05) from those obtained with the other strains...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Jose Francisco Hofling / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-27T09:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosa_EdvaldoAntonioRibeiro_D.pdf: 4106339 bytes, checksum: e10ec954dc70951353572a92c523a361 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Na presente tese, buscou-se estabelecer os graus de diversidade existentes entre diferentes espécies de leveduras do gênero Candida isoladas da cavidade oral de indivíduos saudáveis por meio do emprego da técnica de eletroforese de enzimas constitutivas. Para tanto, linhagens representativas de diferentes espécies de Candida (C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei, e C. guilliermondii) e também suas respectivas linhagens-tipo foram crescidas em frascos com meio de cultura líquido, os quais após incubação (37ºC, 150rprn, 18 horas) foram centrifugados e seus pel/ets lavados. As massas celulares obtidas foram processadas num disrruptor celular tipo Mini Bead-beater que permitiu a obtenção dos extratos citossólicos brutos, os quais foram aplicados em tiras de papel de filtro e suas proteínas separadas por eletroforese em gel de amido. A atividade enzimática foi acessada para 20 sistemas: álcool desidrogenase (ADH), lactato desidrogenase (LDH), malato desidrogenase (Iill)H), isocitrato desidrogenase (IDH), glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), aspartato desidrogenase (ASD), glucose desidrogenase (GDH), manitol desidrogenase (MADH), sorbitol desidrogenase (SDH), aconitase (ACO), enzima málica (ME), catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), transaminase glutâmico-oxalacética (GOT), a-esterase (EST), B-esterase (EST), leucina aminopeptidase (LAP), glicosil transferase (GTF), peroxidase (PO) e a-amilase (a-AM).A partir dos géis revelados foram feitos os diagramas representativos da mobilidade eletroforética das bandas que permitiram a confecção de fenogramas de similaridade para cada sistema enzimático. Os sistemas que forneceram bandas perceptíveis permitiram a análise da diversidade das espécies analisadas tanto em termos fenéticos quanto genéticos, que possibilitaram a redação de quatro artigos originais. Nesses originais pode-se observar a diversidade acessada através da análise conjunta de todas enzimas, da análise conjunta de todas as desidrogenases, e da análise genética dos diferentes loci, bem como uma comparação da capacidade discriminatória estabelecida entre a técnica de eletroforese de enzimas constitutivas (MLEE) e a técnica de eletroforese de proteínas totais em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) / Abstract: In the present thesis, it was intended to establish the existing diversity grades among different yeast speeies of Candida genus isolated ITom oral eavities of healthy individuais by means of multiloeus enzyme electrophoresis. For this, representative strains of different species of Candida (C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei, e C. guilliermondii) and their respective type-strains were grown in liquid eulture medium bottles, whieh, after ineubation (37°C, 15Orprn, 18 hours), were centrifuged and their pellets were washed. The cell masses were processed in a Mini Bead-beater cell disrupter in order to obtain the crude cytosolie extracts, whieh were separated by stare gel electrophoresis. The enzymatic activity was aeeessed for 20 systems: alcohol dehydrogenate (ADH), lactate dehydrogenate (LDH), maltase dehydrogenate (MDH), isocitrate dehydrogenase (IDH), glueose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH), aspartate dehydrogenase (ASD), glueose dehydrogenase (GDH), mannitol dehydrogenase (MADH), sorbitol dehydrogenase (SDH), aconitase (ACO), malie enzyme (ME), eatalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutamie-oxalaeetate transaminase (GOT), a-esterase (EST), esterase (EST), leueine aminopeptidase (LAP), glueosil transferase (GTF), peroxidase (PO) e aamylase (a-AM). From revealed gels it were built the diagrams representing the electrophoretie banding mobilities that allowed the Construction of similarity phenograms for eaeh enzymatie system. The systems whieh furnished detectable bands allowed the speeies' diversity analysis in phenetie and genetie tenns, what allowed the writing of four original papers. On these artieles one ean notiee the diversity aeeessed ITom the overall analysis of enzymes, Itom the overall analysis dehydrogenases, and ITom the genetie ana1ysis of different loei, as good as one eomparison of diseriminatory eapacity determined by multiloeus enzyme electrophoresis (MLEE) and whole-cell protein eleetrophoresis on polycrylamide gel slabs (SDS-P AGE) / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Odontologia

Orientador: Jose Francisco Hofling / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:49:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boriollo_MarceloFabianoGomes_D.pdf: 1293850 bytes, checksum: fbd35ae34bfd68ba5bf4a633b5b46de7 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O interesse em adquirir um melhor entendimento sobre a patogênese, epidemiologia, genética e evolução, das infecções causadas por C. albicans, tem conduzido ao desenvolvimento de inúmeras pesquisas, as quais empregaram sistemas fingerprinting, tais como Eletroforese de Enzima Multiloco (MLEE), Cariotipagem Eletroforética (EK), DNA Polimórfico Amplificado ao Acaso (RAPD) e Polimorfismo no Comprimento do Fragmento de Restrição (RFLP) com e sem hibridação. A efetividade destes sistemas tem sido examinada em diferentes níveis de discriminação. Uma estratégia de validação tem sido delineada, a qual compara dois ou mais métodos não relacionados. Para C. albicans, esta estratégia tem validado o emprego de MLEE, RAPD e Ca3 fingerprinting. Entretanto, seus diferentes padrões fingerprinting gerados poderiam ser registrados em programas de base de dados e submetidos a uma comparação com os parâmetros dos hospedeiros (i.e., idade, sexo, peso, características médicas, condições predisponentes, artigos protéticos, localização geográfica, fatores socioeconômicos, associação com outros indivíduos,...) e as características do patógeno (i.e., padrões de assimilação de açúcares, antigenicidade, secreção de proteinases, padrões de susceptibilidade as drogas, formação de hifa, switching fenotípico,...). Estes procedimentos permitiriam a comparação atual e retrospectiva de uma seleção de linhagens clínicas e epidemiologicamente importantes, as quais poderiam apresentar uma ou várias características do hospedeiro ou patógeno. Adicionalmente, a somatória deste crescente número de informações poderia contribuir ainda mais para o entendimento (i) da dinâmica dos organismos infecciosos em populações humanas, (ii) do complexo relacionamento entre comensalismo e infecção, (iii) dos mecanismos genéticos e evolucionários, ou ainda, (iv) identificar a origem de uma infecção e (v) monitorar a emergência de linhagens resistentes a diversos fatores / Doutorado / Microbiologia e Imunologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / INTRODUCCIÓN Los tumores odontogénicos (TO) constituyen un grupo heterogéneo de lesiones, algunas de ellas, con potencial metastásico. Actualmente la clasificación usada para este tipo de lesiones, se basa en la publicada por la OMS el año 2005 que considera su comportamiento biológico, así como, el tipo de tejido odontogénico involucrado. Otro tipo de lesiones de menor agresividad que se puede presentar en los huesos maxilares son los quistes del desarrollo, entre los cuales el más frecuente es el quiste dentígero, el cual puede presentar características clínicas y radiográficas similares a los tumores antes mencionados. Los mecanismos de desarrollo de los tumores odontogénicos son poco claros y tal como en muchas neoplasias es probable que en la tumorigénesis de éstos participen múltiples procesos. Para una mayor comprensión del comportamiento clínico de estas lesiones es necesario entender los mecanismos biológicos y moleculares involucrados en el desarrollo de ellas, es por esto que el objetivo del presente estudio es describir y comparar la expresión inmunohistoquímica de dos moléculas que podrían contribuir en los mecanismos del desarrollo de estas patologías: Ki-67 una molécula que se emplea como marcador de proliferación celular y COX-2, molécula que se sobreexpresa en varios tipos de tumores y cuyo rol en la tumorigénesis no se conoce claramente, sin embargo se ha demostrado que el uso de inhibidores de COX-2 retarda el desarrollo de algunas neoplasias. MATERIALES Y MÉTODOS El presente estudio contó con la aprobación del Comité Ético-Científico de la Facultad de Odontología de la Universidad de Chile (Anexo N° 2, pág 81). Se recolectaron 10 muestras de ameloblastoma sólido (AS), 10 muestras de tumor odontogénico queratoquístico (TOQQ) y 8 muestras de quiste dentígero (QD), entre los años 1997-2010, en todas las cuales se realizó técnica inmunohistoquímica para COX-2 y Ki-67. - 2 - RESULTADOS Todas las muestras presentaron marcación positiva para Ki-67 y COX-2. El índice de proliferación para Ki-67 de TOQQ, AS y QD fue de12,28%, 7,01% y 2,41% respectivamente. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas para Ki67, entre TOQQ v/s AS, AS v/s QD y también entre TOQQ v/s QD. COX-2 expresó un índice de marcación de 43,11% en TOQQ, un 36,82% en AS y un 14,86% en QD. No se observaron diferencias estadísticamente significativas en la expresión de COX-2 para TOQQ v/s AS y AS v/s QD. A diferencia de TOQQ v/s QD donde existió una diferencia estadísticamente significativa. CONCLUSIONES La expresión inmunohistoquímica para COX-2, fue mayor en TOQQ, lo cual podría estar indicando un rol, entre varios otros factores en el desarrollo de esta lesión y puede ser considerado un potencial blanco de tratamiento coadyuvante de los TOQQ. La proteína Ki-67, presentó una mayor expresión en TOOQ y AS lo cual indica que estos tumores presentan mayor índice de proliferación celular que el QD, sin embargo, para una mejor correlación con el comportamiento clínico se requiere analizar otros parámetros que participan en el crecimiento de los tumores como son las diferentes formas de muerte celular.