Orientador: Chung Man Chin / Banca: Maria do Carmo Longo / Banca: Maria Luiz Cruz / Resumo: A doença de Chagas representa um dos mais sérios problemas médico-sanitários da América Latina. Nos 21 países endêmicos, estima-se que 18 a 20 milhões de pessoas estejam infectadas e cem milhões estão sob risco. No Brasil apenas o benznidazol está disponível para o tratamento apresentando alta incidência de efeitos adversos e ineficácia na fase crônica da doença. O desenvolvimento de fármacos mais eficazes e com menor toxicidade contra a doença de Chagas é necessário, e para tal é importante o conhecimento dos alvos terapêuticos para o planejamento racional por novos compostos. Estudos demostraram que a tripanotiona redutase (TR) é a enzima chave do metabolismo anti-oxidativo do T. cruzi. Os nitrofuranos atuam como substratos da TR e são também efetivos inibidores enzimáticos da redução do tripanotiona dissulfeto. Entre os compostos nitrofurânicos, o nitrofural apresentou atividade contra T. cruzi, mas alta toxicidade por via oral e severos efeitos adversos. A latenciação de fármacos é um dos métodos de modificação molecular que tem como objetivo melhorar as características de fármacos protótipos. Sabendo disto, Chung (1996) sintetizou uma série de pró-fármacos recíprocos seletivos de nitrofural e primaquina, culminando na obtenção do derivado hidroximetilnitrofural (NFOH). Este se mostrou mais ativo de todos os derivados sintetizados, tanto em formas amastigotas quanto em tripomastigotas nos ensaios in vitro contra T. cruzi. Os compostos que possuem grupos nitro na sua molécula geralmente apresentam atividade mutagênica, estudos indicaram que a latenciação do nitrofural em NFOH foi capaz de diminuir a atividade mutagênica em aproximadamente 4 vezes. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi iniciar os estudos de toxicidade do derivado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The Chagas' disease represents one of the most serious sanitary medical problems of Latin America. In the 21 endemic countries, it is estimated that 18 to 20 million people are infected and 100 million are under risk. Only one drug is available in Brazilian market: benznidazole, which shows high side effects and is ineffective in the chronic phase of the disease. The development of more efficient drugs with lower toxicity against the Chagas disease is necessary and for it, it is important the knowledge of therapeutic targets for the design of new compounds. Studies showed that trypanothione reductase (TR) is a key enzyme of the antioxidant metabolism of T. cruzi. Nitrofurans act as substrates of TR and are also effective enzymatic inhibitors of the reduction of trypanothione disulfide. Among the nitrofurans conpounds, nitrofurazone presented activity against T cruzi, but showed high toxicity by oral route and severe side effects. Latentiation is one process of molecular modification, which has the purpose to improve pharmaceutical and physical-chemical properties and decrease drug toxicity. In this way, Chung (1996) has synthesized the prodrug hydroxymethylnitrofurazone (NFOH), showing high activity in amastigotes forms in vitro assay against T. cruzi. Nitrocompounds generally presents mutagenic activitys. Studies suggested that the latentiantion of nitrofurazone giving NFOH was able to reduce toxicity activity in four times. According to this, the purpose of this work was to accomplish toxicity studies of the derivative compound. The results obtained in the tests acute toxicity in mice and rate suggested a lower toxicity of NFOH, obtaining a median lethal dose in relation to NF...(Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Laboratório Multidisciplinar de Pesquisa em Doença de Chagas, 2014. / Submitted by Eric de Oliveira Sousa (eriol.draven@gmail.com) on 2014-10-10T14:42:59Z No. of bitstreams: 1 2014_AdrianaJesusBenevidesAlmeidaGuimaraes.pdf: 3593637 bytes, checksum: 63d552687595edcf7270bbb18a6eb529 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-10-10T14:55:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_AdrianaJesusBenevidesAlmeidaGuimaraes.pdf: 3593637 bytes, checksum: 63d552687595edcf7270bbb18a6eb529 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-10T14:55:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_AdrianaJesusBenevidesAlmeidaGuimaraes.pdf: 3593637 bytes, checksum: 63d552687595edcf7270bbb18a6eb529 (MD5) / Morbidade e mortalidade em humanos infectados cronicamente com o Trypanosoma cruzi são observados em aproximadamente 30% dos infectados. Os fatores que selecionam esses chagásicos, entre todos os demais infectados, à aquisição da doença crônica são desconhecidos. Estudos de genética molecular demonstraram a transferência de sequências de minicírculos de kDNA do parasito para sítios específicos do genoma do hospedeiro. O sítio de integração identificado com maior frequência foi o retrotransposon LINE-1. Observou-se ainda que o kDNA pôde ser mobilizado para outros sítios do genoma pela atividade do LINE-1. Esses dados sugeriram a possibilidade de associação das variações clínicas da doença com as mutações no genoma. As mutações de kDNA se comportariam como força motriz da patogênese da cardiopatia chagásica. Neste estudo, foram avaliados 95 indivíduos do Pará, 36 voluntários de municípios de Minas Gerais e Goiás e 136 controles do Distrito Federal, com dados do eletrocardiograma, teste ergométrico, holter 24h e ecodopplercardiograma. Foram feitas análises estatísticas visando a associar esses dados clínicos com os achados de integração de kDNA em múltiplos loci na maioria dos cromossomos. Tendo a análise dos exames clínicos revelado que a maioria dos indivíduos da amostragem estava na fase indeterminada da infecção crônica pelo T. cruzi, sem alteração significativa nos exames, sem frequência elevada de alterações nos grupos de risco para desenvolvimento da doença, não foi possível associar qualquer mutação como valor preditivo para desenvolvimento da cardiopatia chagásica. Os resultados indicam o caráter benigno da evolução das infecções crônicas, na fase clinicamente indeterminada. Entretanto, esses achados não excluem a hipótese de associação das mutações com a patogênese da cardiopatia chagásica. Outros estudos clínico-epidemiológicos de médio e longo prazo são necessários para a identificação de fatores preditivos das manifestações cardíacas da doença de Chagas. / Morbidity and mortality in humans chronically infected with Trypanosoma cruzi are observed in approximately 30% among infected people. The factors of selection of chagasic, among the infected population, towards development of the chronic Chagas disease, are unknown. The studies on molecular genetics showed the transfer of the kDNA minicircle sequences from T. cruzi to the human host's genome. The kDNA integration loci were often identified in the LINE-1 retrotransposon. It was also observed that the kDNA mutations could be mobilized by the retrotransposon from the primary to a secondary site at the genome. These findings suggested the possibility of association of Chagas disease clinical manifestations with the kDNA integrations. In this regard, the kDNA mutations could be triggers of the pathogenesis of the chagasic cardiopathy. In this study, we evaluated 95 patients from the State of Para, 36 from counties of Minas Gerais and Goias, and 136 controls patients, from the Federal District, Brazil. The electrocardiogram, ergometric test, 24h recording electrocardiogram, and ecodopplercardiogram were analysed. The statistical analyses, which aimed at the association among the clinical findings with those of the integration of the kDNA at multiple sites at various chromosomes, were carried out. The evaluations of clinical parameters of the heart function showed majority all patients were in the undeterminate phase of the chronic chagasic infection, and no clinical manifestation. This observation explains why, in the absence of statistical differences among the groups of risk-patients, there was no demonstrable association. Therefore, it was not shown any particular loci of mutation as a predictive risk-factor for development of the Chagas cardiopathy. The result indicates the benign feature of the chronic chagasic infections, clinically undetermined. However, the findings in the undeterminate phase of the infection do not exclude the hypothesis of possible association of the kDNA mutations with the pathogenesis of the Chagas’ heart disease. Long range clinic-epidemiologic studies are necessary to identifying predictive factors of the clinic manifestation of the chronic Chagas disease.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Ciências Farmacêuticas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-10-17T16:52:09Z No. of bitstreams: 1 2014_IhatandersonAlvesdaSilva.pdf: 2649581 bytes, checksum: cf225b434bbe6bb6216ca02284ec8395 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2014-10-20T18:55:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_IhatandersonAlvesdaSilva.pdf: 2649581 bytes, checksum: cf225b434bbe6bb6216ca02284ec8395 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-20T18:55:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_IhatandersonAlvesdaSilva.pdf: 2649581 bytes, checksum: cf225b434bbe6bb6216ca02284ec8395 (MD5) / Orientação: Marcílio Sérgio Soares da Cunha Filho ; Coorientação: Eliana Martins Lima Dissertação (mestrado) - Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Ciências Farmacêuticas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2014 Inclui bibliografia Notas de Resumo A doença de Chagas, considerada uma doença negligenciada, apresenta-se como um importante problema de saúde pública, afetando aproximadamente 8 milhões de pessoas, em 21 diferentes países do mundo. Apesar de sua importância, a doença de Chagas não possui um tratamento medicamentoso eficaz, especialmente na sua fase crônica. Uma das alternativas mais promissoras para o tratamento dos pacientes chagásicos pode estar na quimioterapia combinada, com destaque para o efeito sinérgico encontrado entre benznidazol (BNZ) e outros derivados azólicos, como itraconazol (ITZ). Neste contexto, a utilização de sistemas multiparticulados, como péletes, fornece uma grande flexibilidade na combinação de diferentes dosagens dos fármacos e constituem sistemas muito adequados para a modificação de sua liberação. Este trabalho teve como objetivo a elaboração de péletes de BNZ e ITZ por extrusão-esferonização para o tratamento da doença de Chagas em terapia dose fixa combinada. Os estudos de compatibilidade realizados utilizando análise térmica e outros ensaios auxiliares evidenciaram a compatibilidade de ITZ com os excipientes MgST, ciclodextrinas, MCC e NaCrosc, enquanto que o BNZ mostrou-se compatível com os materiais CMC, NaCrosc, NaGlico e PEG. Em contrapartida, as associações de ITZ com PVP e HPMC são incompatíveis e potencialmente instáveis. Os estudos de compatibilidade conduzidos entre os fármacos BNZ e ITZ mostraram forte interação física com repercussões na estabilidade química desses compostos. Esse resultado condicionou o processamento farmacêutico utilizado na sequencia do estudo, optando-se por elaborar péletes de cada um dos fármacos separadamente. Os péletes de BNZ e ITZ foram elaborados utilizando os fármacos na forma de micropartículas, de forma a otimizar a sua dissolução. Os péletes de microcristais de BNZ apresentaram características físico-químicas apropriadas, formato cilíndrico, excelentes propriedades de fluxo e rápida desintegração e dissolução. O uso de NaCrosc e PEG demonstrou um bom desempenho em promover uma rápida desintegração desses péletes. Os péletes elaborados com microcristais de ITZ mostraram igualmente características físico-químicas e farmacopeicas adequadas, apresentando desintegração praticamente instantânea, devido ao elevado percentual de NaCrosc na formulação. Dessa forma, o estudo conduzido obteve êxito em desenvolver sistemas multiparticulados de BNZ e ITZ que podem ser facilmente combinados em diferentes proporções, possibilitando estudos futuros em terapia dose fixa combinada para o tratamento da doença de Chagas. / Chagas’ disease, considered as neglected disease, appears to be an important health problem, affecting approximately 8 million of persons in 21 different countries in the world. Despite the importance, Chaga’s disease does not have an effective pharmaceutical treatment for chronic phase. One of the most promising treatment alternatives for chagasic patients can be related to the combined chemotherapy, specially highlighted by the synergic effect achieved of benznidazole (BNZ) and other Azole derivate coumpound, as itraconazole (ITZ). In this context, the use of multiparticulate systems, like pellets, provides much more flexibility for different drug dosage combinations and creates most adequate systems with modified release profiles. This study had the objective of design of pellets compound of BNZ and ITZ, produced by extrusion-spheronisation process for Chagas’ disease with combined fix therapy. The compatibities studies utilizing thermo analysis and other auxiliary tests showed compatibility between ITZ and other excipients, as MgSt, cyclodextrins, MCC, NaCrosc, meanwhile BNZ showed to be compatible with MCC, NaCrosc, NaGlico and PEG. On other hand, the associations of ITZ with PVP and HPMC are incompatible and potentially instable. The compatibility assays showed high physical interaction between BNZ and ITZ and may reverberate over the chemical stability of these compounds. This evidence delimitated the pharmaceutical processing over the study sequence, making the choice of the pellet formulation of each one drug in separate. The BNZ and ITZ pellets were formulated in micro particulate forms to optimize the dissolution profiles. The BNZ microcrystal pellets showed appropriated physical-chemical characteristics, cylindrical shapes, excellent flow properties and fast disintegrations and dissolution profiles. The addiction of NaCrosc and PEG in pellets showed excellent performance promoting fast disintegration. As well, The ITZ microcrystal pellets showed adequate physical-chemical and pharmacopeia characteristics, exhibiting practically instantaneous disintegration due elevated percentage of NaCrosc in the formulation. In this manner, the present study succeeded in developing multiparticulate systems of BNZ an ITZ, which can be easily combined in different proportions, allowing further studies in combined fix dosage therapy for Chagas’ disease treatment.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas,Departamento de Biologia Celular, Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-10-24T19:05:26Z No. of bitstreams: 1 2014_RicardoCamargo.pdf: 4754357 bytes, checksum: 6816b37d8d754523a1dc517382a3970b (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-11-04T18:12:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RicardoCamargo.pdf: 4754357 bytes, checksum: 6816b37d8d754523a1dc517382a3970b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-04T18:12:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RicardoCamargo.pdf: 4754357 bytes, checksum: 6816b37d8d754523a1dc517382a3970b (MD5) / Ao longo da evolução o Trypanosoma cruzi (agente etiológico da doença de Chagas) desenvolveu estratégias bastante eficientes para evadir-se do sistema imune de seu hospedeiro mamífero. Como consequência, a infecção por este organismo tende a ser crônica, sugerindo que o T. cruzi escapa da vigilância do sistema imune por meio da regulação negativa das vias de processamento de antígenos. Na via de apresentação de antígenos intracelulares MHC de classe I, a grande maioria dos peptídeos antigênicos é gerada pelo proteassoma, um complexo proteico multicatalítico responsável pela degradação de proteínas. Entretanto, sob estimulação com interferon-γ (IFN-γ), as subunidades catalíticas β1, β2 e β5 do proteassoma constitutivo são substituídas pelas subunidades β1i/LMP2, β2i/MECL-1 e β5i/LMP7, formando o imunoproteassoma. O imunoproteassoma tem a sua atividade proteolítica modificada e especializada na geração de peptídeos apresentados pelas moléculas de MHC de classe I. Nesse cenário, nós avaliamos se a expressão e a atividade do proteassoma constitutivo, do imunoproteassoma e também de outros componentes da via de MHC classe I são alteradas pela infecção com T. cruzi em linhagem de célula não imune. Em análises por RT-PCR e géis bidimensionais, foi demonstrado que a expressão e a composição do proteassoma constitutivo não são afetadas pelo parasita. Em contraste, nós mostramos que a biossíntese das subunidades do imunoproteassoma β1i, β2i, β5i, de PA28β, de TAP1 e da molécula de MHC de classe I foi inibida em culturas de células infectadas e tratadas com IFN-γ. Nessas culturas, as atividades proteolíticas do proteassoma também foram drasticamente reduzidas. Em experimentos de citometria de fluxo e microscopia de fluorescência, nós constatamos que a infecção com T. cruzi reduz a densidade de moléculas de MHC de classe I na superfície da célula hospedeira. Tomados em conjunto, os nossos resultados sugerem que o protozoário Trypanosoma cruzi é capaz de modular especificamente a sua infecção por meio de um mecanismo pós-transcricional que inibe a expressão dos componentes da via de MHC de classe I.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2014. / Submitted by Larissa Stefane Vieira Rodrigues (larissarodrigues@bce.unb.br) on 2014-11-06T16:19:36Z No. of bitstreams: 1 2014_AndréaPedrosaRibeiroAlvesOliveira.pdf: 661055 bytes, checksum: a75988e809252f034d1a42d408c9609c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-11-11T16:42:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_AndréaPedrosaRibeiroAlvesOliveira.pdf: 661055 bytes, checksum: a75988e809252f034d1a42d408c9609c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-11T16:42:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_AndréaPedrosaRibeiroAlvesOliveira.pdf: 661055 bytes, checksum: a75988e809252f034d1a42d408c9609c (MD5) / Introdução: A doença de Chagas é doença altamente prevalente nas Américas do Sul e Central, sendo considerada problema de saúde pública nesta região. Sua forma esofágica cursa com acalasia e consequente dilatação do esôfago, chamada megaesôfago. Visando aliviar os sintomas da acalasia diversas técnicas cirúrgicas foram desenvolvidas. Para casos avançados ou recorrentes de megaesôfago não existe consenso na literatura acerca da melhor técnica, sendo realizadas a técnica de Serra-Dória, a esofagectomia subtotal e a cardioplastia à Thal-Hatafuku. Existem poucos dados na literatura acerca de eficácia a médio e longo prazo da operação de Thal-Hatafuku. Objetivo: avaliar o resultado tardio da operação de Thal-Hatafuku modificada, avaliando a melhora clínica e nutricional e a incidência de refluxo gastroesofágico. Método: Foram avaliados 30 pacientes submetidos a cardioplastia à Thal-Hatafuku modificada no Hospital Universitário de Brasília no período de 1998 a 2008. Foram realizadas avaliações clínica, nutricional, endoscopia digestiva alta com cromoscopia, manometria esofágica e pHmetria de 24h para avaliar os resultados tardios da operação. Resultados: 86% relataram melhora total dos sintomas após a operação e , no momento da avaliação clínica, 63% dos pacientes queixaram-se de algum grau de disfagia para sólidos. A maioria foi classificada como Visick I e II.O índice de massa corporal médio foi de 22,5Kg/m2,sendo 20% dos pacientes com desnutrição, 63% com eutrofia e 17% com pré-obesidade ou obesos. A endoscopia digestiva alta mostrou mucosa normal em 83% dos pacientes e 14% de áreas iodo-claras à cromoscopia. À manometria esofágica, todos apresentaram ondas isobáricas não propagáveis, relaxamento do esfíncter esofágico inferior incompleto em 53%, completo em 13%, inexistente em 20% e hipotônico em 14%; todos com relaxamento completo do esfíncter esofágico superior. A pHmetria de 24h 50% apresentaram refluxo patológico. Conclusão: A operação de Thal-Hatafuku modificada levou à melhora dos sintomas que mais repercutem na qualidade de vida dos pacientes com megaesôfago, que são a disfagia para líquidos ou até total, com consequente perda de peso e desnutrição. Apesar de os pacientes apresentarem outros sintomas após a operação estes eram aliviados com uso de medicamentos. Não foi observada associação entre as queixas clínicas, os achados endoscópicos, o grau de comprometimento manométrico e a presença de refluxo gastroesofágico patológico destes pacientes. / Background: Chagas disease is a serious public health issue in South and Central America due to its high prevalence, morbidity, and mortality. The esophageal form of the disease leads to achalasia and consequent megaesophagus. In advanced or recurrent cases of megaesophagus, there is no consensus as to which of three established techniques—the Serra-Dória procedure, subtotal esophagectomy, or Thal-Hatafuku cardioplasty—is best. Very few studies have investigated the average efficacy and long-term outcomes of the Thal-Hatafuku procedure. Objective: investigate the long-term outcomes of the Modified Thal-Hatafuku procedure, and evaluate the clinical and nutricional improvement and the gastroesophageal reflux incidence. Methods: The Modified Thal procedure (MTC) was performed in 30 patients at Hospital Universitário de Brasília between 1998 and 2008. All underwent clinical and nutritional evaluation, upper gastrointestinal endoscopy with chromoscopy, esophageal manometry, and 24-hour pH monitoring. Results: Overall, 86% experienced resolution of all symptoms after surgery and 63% complaint of some grade of disphagia for solids. Most patients were classified as Visick grade I or II. The average body mass index was 22.5 Kg/m2 with 20% of desnutrition, 63% of eutrophy and 17% of preobesity or obesity. Upper gastrointestinal endoscopy showed normal mucosa in 83% of patients, and 14% had unstained areas on chromoscopy. Esophageal manometry demonstrated incomplete lower esophageal sphincter (LES) relaxation in 53% of patients, complete LES relaxation in 13%, no LES relaxation in 20%, and hipotonic LES in 14%. All showed isobaric waves that did not propagate in the esophagus and complete relaxation of the upper esophageal sphincter. On 24-hour pH monitoring, reflux was pathological in 50% of patients. Conclusions: The modified Thal-Hatafuku procedure improved symptoms—namely, dysphagia to liquids with resulting weight loss and malnutrition—in patients with megaesophagus. Although patients have shown other symptoms after MTC this condition can be treated with medication and, based on Visick’s criteria, it does not negatively affects the quality of life of most patients. No correlations were found between clinical complaints, endoscopic findings, the degree of manometric abnormality and the incidence of pathological gastroesophageal reflux in these patients.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Centro de Desenvolvimento Sustentável, 2014. / Submitted by Paula Martinez (paula.assis.martinez@gmail.com) on 2014-11-21T13:28:56Z No. of bitstreams: 1 2014_DianaRocioRodriguezTriana.pdf: 18437141 bytes, checksum: 2c4da1329b91719e1bc074523a55c095 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-11-21T14:04:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_DianaRocioRodriguezTriana.pdf: 18437141 bytes, checksum: 2c4da1329b91719e1bc074523a55c095 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-21T14:04:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_DianaRocioRodriguezTriana.pdf: 18437141 bytes, checksum: 2c4da1329b91719e1bc074523a55c095 (MD5) / A forma mais efetiva de controlar o risco da doença de Chagas é melhorando a estrutura das casas. Não obstante, as carências socioeconômicas das populações que são mais afetadas por essa doença diminuem as possibilidades de construir casas com materiais diferentes ao barro. Diferentes intervenções tem sido realizadas com o objetivo de melhorar as condições dos lares, não obstante não tem conseguido atender as demandas da população. Na América Central diferentes instituições tem utilizado a abordagem ecossistêmica para promover a utilização de materiais locais para melhorar os lares e controlar a transmissão vetorial da doença de Chagas. Em Honduras muitas comunidades estão expostas ao risco de contrair Chagas. Assim em 2011 uma intervenção foi iniciada com o objetivo de informar a população sobre a transmissão e prevenção da doença e motivando-as na utilização de materiais locais para a benfeitoria das casas. No presente trabalho realizou-se uma análise de redes sociais para conhecer as características individuais e relacionais associadas a adoção de materiais locais para a benfeitoria das casas e redução no risco de contrair a doença. Selecionou-se uma comunidade do estado de Intibucá para realizar o estudo de duas redes sociais: a comunicação sobre temas relacionados com a doença de Chagas e outra de colaboração para a benfeitoria das casas. Os resultados revelam que 75% (setenta e cinco porcento) da população adotou a técnica para o melhoramento dos lares e prevenção da doença. A adoção foi associada com as relações de colaboração principalmente entre as mulheres e os homens. As mulheres que colaboraram com homens tiveram maior probabilidade de adotar do que aquelas que não colaboraram. A condição socioeconômica foi uma característica individual mais associada a adoção da inovação para as mulheres, oposto aos homens que tiveram maior probabilidade de adotar segundo o nível de educação e participação nas atividades lideradas pelo projeto. A rede de comunicação evidenciou que os homens participam mais ativamente que as mulheres para comunicar temas relacionados com a doença de Chagas. Também, que essa rede possibilita aos membros da comunidade ter conhecimentos sobre a transmissão e prevenção da enfermidade. A análise de redes sociais contribuiu na compreensão dos aspectos da adoção de inovações no contexto hondurenho úteis para identificar estratégias que podem contribuir com o controle da doença de Chagas e melhorar a qualidade de vida da população. / The most effective way to control and reduce risks of Chagas disease is improving traditional housing conditions. However, as poor social conditions are the main reason why communities build houses with mud, different interventions have had limited success in improving housing. In Central America different institutions used an ecohealth approach to promote the use of local materials in traditional housing aiming at controlling Chagas exposure. In Honduras, many communities are highly exposed to Chagas disease and a participatory intervention started in 2011 to inform people about the transmission and prevention of the disease and to motivate them to adapt their houses using local materials. In this work, a social network analysis was used to investigate the adoption of the use of local materials in improving housing to reduce risk of Chagas disease. One village in Intibucá was selected to map two community social networks: the discussion network about Chagas issues and the colaboration network to improve housing. Seventy five of the population had adopted the technique to improve housing to prevent the disease. Adoption was associated with the number of individuals in the collaboration personal networks for women and men. Some differences were found between genders. Women who colaborated with men were more likely to adopt the house intervention than those who did not. Socioeconomic conditions were found to be more important for women who adopte it, as opposed to men, who were more affected by education and participation in activities. However, men were more likely to communicate on Chagas issues than women. Besides the education and socioeconomic conditions, communication was associated with knowledge about transmission and disease prevention. Finally, research permitted greater comprehension of aspects related to adoption of innovations in Honduras. It is useful to identify strategies to control Chagas disease and improve well-being.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-10-26T11:51:09Z No. of bitstreams: 1 2011_ElianeCardosodePadua.pdf: 1676473 bytes, checksum: ddf7f45a3053db483ea063a857eddc6f (MD5) / Rejected by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br), reason: Alaíde, O arquivo carregado é de outra autora. Por favor, trocá-lo. Obrigada, Jacqueline on 2012-10-29T10:51:00Z (GMT) / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-10-31T10:29:20Z No. of bitstreams: 1 2012_JoyceMendesPereira.pdf: 3622938 bytes, checksum: b50d63ac2756d285929af40885b0d17d (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-10-31T10:40:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_JoyceMendesPereira.pdf: 3622938 bytes, checksum: b50d63ac2756d285929af40885b0d17d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-31T10:40:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_JoyceMendesPereira.pdf: 3622938 bytes, checksum: b50d63ac2756d285929af40885b0d17d (MD5) / Casos agudos da doença de Chagas ainda têm sido detectados na Região Centro-Oeste (RCO) do Brasil. O risco de transmissão vetorial de Trypanosoma cruzi ao homem permanece devido à constante presença de triatomíneos em unidades domiciliares. A estimativa de áreas de risco para ocorrência de triatomíneos sinantrópicos na RCO é, portanto, uma informação relevante para a vigilância entomológica. O presente trabalho analisa a distribuição geográfica das espécies de triatomíneos em municípios dos estados da RCO e os fatores climáticos e socioeconômicos para sua ocorrência. Foram compilados 3.396 registros de 27 espécies de triatomíneos sinantrópicos na RCO. Modelos de nicho ecológico baseados em 13 variáveis climáticas e altitude foram produzidos para 8 espécies que ocorreram no mínimo em 20 municípios usando o algoritmo maxent. Análises de regressão foram realizadas para testar a associação entre riqueza de espécies de triatomíneos e variáveis socioeconômicas dos municípios da RCO. Os resultados indicam maior adequabilidade climática para ocorrência de triatomíneos sinantrópicos em áreas de cerrado no estado de Goiás, diferente de áreas de floresta amazônica do norte do estado do Mato Grosso. A sazonalidade da temperatura foi a variável que melhor explicou os modelos, os quais indicaram ainda uma associação negativa entre riqueza de espécies de triatomineos e indicadores socioeconômicos (alfabetização, produto interno bruto, crescimento populacional) nos municipios da RCO. Os resultados indicam que praticamente todo o território da RCO apresenta condições climáticas para ocorrência de pelo menos uma espécie de triatomíneo e que a ocorrência está associada à fatores socioeconômicos. Dessa forma, recomenda-se reforçar a vigilância entomológica na RCO, principalmente nas áreas indicadas no presente estudo. / Acute cases of Chagas disease have yet been detected in the Midwest Region of Brazil (MRB). The risk of vectorial transmission of Trypanosoma cruzi to humans remains due to the constant presence of infected bugs in households. The estimation of greatest risk areas for occurrence of synanthropic triatomine bugs in the MRB is therefore a relevant information for entomological surveillance. In this work, we analyze the climatic and socioeconomic factors for triatomine occurrence in the midwest region of Brazil (MRB). Overall, 3,396 records of 27 species of synanthropic triatomines were recorded and analyzed. Using the maxent algorithm, ecological niche models based on 13 climatic variables and altitude were produced for 8 species occurring in at least 20 municipalities. Regression analyses were performed to test the association between species richness and socioeconomic variables, in the municipalities of MRB. Cerrado areas in the state of Goiás were found to be more suitable to the occurrence of synanthropic triatomines than Amazon forest areas in the north of the state of Mato Grosso. Temperature seasonality constitutes the variable that best explains the models. A negative correlation between triatomine species richness and socioeconomic indicators (literacy, gross domestic product and population growth) was found in the municipalities of MRB. The results indicate that practically the entire territory of MRB presents climatic conditions for occurrence of at least one species of triatomine, and that occurrence is also associated to socioeconomic factors. Therefore, it is recommended that entomological surveillance be reinforced in the MRB, particularly in the areas indicated by this study.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-11-19T12:07:48Z No. of bitstreams: 1 2012_CarlosFernandoRochaPimentel.pdf: 4136753 bytes, checksum: 3e1660d2869e3ec5c9235fa6a84074b5 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-11-21T14:25:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_CarlosFernandoRochaPimentel.pdf: 4136753 bytes, checksum: 3e1660d2869e3ec5c9235fa6a84074b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-21T14:25:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_CarlosFernandoRochaPimentel.pdf: 4136753 bytes, checksum: 3e1660d2869e3ec5c9235fa6a84074b5 (MD5) / Este estudo é parte de linha de pesquisa do Laboratório Multidisciplinar de Pesquisa em Doença de Chagas, na Faculdade de Medicina da Universidade de Brasília, que visa ao mapeamento das integrações de sequências de minicírculos de DNA mitocondrial (kDNA) de Trypanosoma cruzi em famílias de residentes em diferentes ecossistemas brasileiros. Nesta dissertação foram analisados sêmens de 53 adultos de dois municípios do Estado do Pará. O trabalho foi conduzido para identificar e caracterizar os sítios de integração das mutações de kDNA em células do sêmem e determinar a de presença do DNA nuclear (nDNA) do T. cruzi em adultos na idade reprodutiva. Foram analisadas amostras de DNA do sêmen de 53 homens. Os testes PCR mostraram que em 44 amostras (83%) havia nDNA. Em mais quatro amostras (48/53) os testes PCR revelaram amplicons de kDNA parasita. Estes quatro últimos sugerem que as sequências de minicírculos poderiam estar integradas ao genoma de pessoas sem a infecção ativa pelo T. cruzi. Então, a técnica tpTAIL-PCR foi usada para caracterizar as mutações de kDNA nos cromossomos das células analisadas. Foram encontradas 142 mutações no genoma de 38 indivíduos (72%) do estudo. Essas mutações foram localizadas (56,6%) em LINE-1 dispersos nos genomas. Ademais, verificou-se que 32,5% dessas mutações achavam-se no locus AL7313741.4 de LINE-1, no cromossomo X. Apenas nove eventos de integração de kDNA ocorreram em regiões codificadoras do genoma. Entre essas, encontram-se mutações em genes de quinases, receptor olfatório e em outros sítios não determinados. Em 24 casos (16,8%) o kDNA ligado ao LINE-1 estava acompanhado de fragmento de sequência de DNA retroviral, sugerindo recombinação e “hitchhiking’’. De grande interesse, os resultados sugerem a possibilidade de transmissão da infecção por 83% dos homens que tem o nDNA do T. cruzi no sêmen e, assim, a reprodução sexuada pode contribuir para transferência e herança das mutações de kDNA nas progênies das famílias do estudo. / This study stems for a research line that has been carried on the Chagas Disease Multidisciplinary Research Laboratory at the Faculty of Medicine, University of Brasilia, which aims at the mapping of the integrations of the mithocondrial minicircle sequences (kDNA) from Trypanosoma cruzi in members of familes living in different Brazilian ecosystems. Herein, we analysed samples of semen from 53 men from two counties at the State of Pará, Brazil. The research was conducted aiming at the identification and characterization of kDNA mutation hotspots in semen cells, so as to determine the rate of presence of the parasite nuclear DNA (nDNA) in adults at reproductive age. A total of 53 semen samples DNA were analysed. The PCR exams showed nDNA in 44 samples (83%), and further four samples (48/53) yielded kDNA amplicons. These results suggest that sequences of kDNA minicircles can integrate into the human genome in the absence of an active T. cruzi infection. Then, we used the tpTAIL-PCR technique to characterize the kDNA mutations on chromosomes of analyzed cells. A minimum of 142 mutations were disclosed in the genome of 38 family members (72%). These mutations were localized in LINE-1 (56.6%) disperse all through the genome. However, it was observed that 32.5% of such mutations were present in the locus AL7313741.4 of LINE-1, a chromosome X. Nine mutation events were found in coding regions of the genome. Among these, there were mutations in protein-kinase, and in the olfactory genes, and, also in undetermined sites. Further 24 mutations (16.8%) showed the kDNA covalently linked to LINE-1, and these chimeras were attached to fragments of retroviral DNA sequences, thus suggesting recombination and hitchhiking. Of great interest, the results suggest the possibility of transmission of the infections from 83% of men showing the DNA from T. cruzi in the semen, and, therefore, sexual reproduction may contribute to lateral transfer and inheritance of kDNA mutations in the progeny of the study families.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-02-07T11:37:05Z No. of bitstreams: 1 2012_HugodeAlmeidaSilva.pdf: 26275960 bytes, checksum: e989f3c1ea7ff8962448ff618330ac1a (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-02-07T11:57:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_HugodeAlmeidaSilva.pdf: 26275960 bytes, checksum: e989f3c1ea7ff8962448ff618330ac1a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-07T11:57:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_HugodeAlmeidaSilva.pdf: 26275960 bytes, checksum: e989f3c1ea7ff8962448ff618330ac1a (MD5) / Apesar de afetarem praticamente um sexto da população mundial, doenças como a dengue e o mal de Chagas continuam sendo negligenciadas pela indústria farmacêutica e pelo governo. Assumindo a responsabilidade da pesquisa de base, as instituições de ensino superior podem tornar o desenvolvimento de fármacos contra as doenças negligenciadas mais atraentes aos olhos da indústria. Com a proposta de diminuir os gastos e o tempo na busca de novos medicamentos contra essas doenças, o presente trabalho buscou aplicar métodos de análise in silico para a implementação de uma plataforma de descoberta racional de fármacos voltada para as doenças importantes no Brasil. Dessa forma, duas doenças para as quais não existem vacinas ou tratamento efetivo foram escolhidas para um estudo piloto: a dengue e a doença de Chagas. Um dos alvos mais promissores contra a dengue é a protease virai NS3, que, associada ao seu cofator NS2B, promove o processamento da poliproteína virai e, consequentemente, a replicação do vírus. Por meio de técnicas de modelagem comparativa, dinâmicas moleculares e triagem virtual, um possível papel para o cofator NS2B e para o ligante no efeito de ajuste induzido do sítio ativo da NS3 foi proposto. Além disso, quatro famílias de conformações foram encontradas e exploradas em uma campanha de triagem virtual, onde foram obtidos quatro moléculas com atividade inibitória comprovada. Ao mesmo tempo, técnicas similares foram aplicadas a dois alvos de Trypanosoma cruzi já estudados pelo nosso grupo: a catepsina B (TcCatB) e a metiltioadenosina fosforilase (TcMTAP). Os modelos construídos se mostraram estáveis durante simulações de dinâmica molecular, e também foram submetidos à triagem virtual. Moléculas com atividade inibitória putativas contra esses alvos foram identificadas. Os resultados deste trabalho apontam para a viabilidade de estabelecer-se uma plataforma de busca racional de fármacos contra outras doenças negligenciadas. / Despite affecting about one-sixt of the world's population, diseases like dengue fever and Chagas disease are still overlooked by the government and pharmaceutical industries. By assuming the responsibility over basic research, public institutions of higher education may play a role in making the development of new drugs against neglected diseases more attractive to the big pharma companies. With the aim of cutting costs and time for searching new drugs against those diseases, this work intended to apply in silico analysis methods towards the implementation of a rational drug design platform against neglected diseases occurring in Brazil. Thus, two illnesses for which there are no vaccines or effective treatments were chosen for a pilot study: dengue fever and Chagas disease. One of the most promising targets against dengue fever is the viral NS3 protease, which, together with its cofactor NS2B. promotes the viral polyprotein processing and therefore viral replication. By using comparative modeling techniques, molecular dynamics simulations and virtual screening, a possible role of the NS2B cofactor and the ligand binding in the induced fit effect at the NS3 active site was proposed. Also, four conformational families were found and explored in a virtual screening campaign, in which four compounds with proven inhibitory activity were found. At the same time, similar techniques were applied to two targets of Trypanosoma cruzi already studied by our team: the cathepsin B (TcCatB) and the methyltioadenosine phosphorilase (TcMTAP). The built models were shown to be stable during molecular dynamics simulations, and were also subjected to virtual screening campaigns. Molecules with putative inhibitory activity against those targets were detected. Together, those results point to the viability in establishing a rational drug discovery platform against neglected diseases.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-10-08T15:51:32Z No. of bitstreams: 1 2008_RodrigoGurgelGoncalves.pdf: 6113992 bytes, checksum: 6877e14dbfe0f48f5a28cf454844cb2b (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-07-21T18:22:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_RodrigoGurgelGoncalves.pdf: 6113992 bytes, checksum: 6877e14dbfe0f48f5a28cf454844cb2b (MD5) / Made available in DSpace on 2010-07-21T18:22:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_RodrigoGurgelGoncalves.pdf: 6113992 bytes, checksum: 6877e14dbfe0f48f5a28cf454844cb2b (MD5) Previous issue date: 2008 / Triatomíneos silvestres do gênero Rhodnius freqüentemente invadem casas na América Latina, mantendo o risco de transmissão da doença de Chagas. Nesta tese, foram feitas análises filogeográficas, morfométricas e de distribuição geográfica potencial de populações de Rhodnius no Brasil central, focando Rhodnius neglectus, a principal espécie encontrada em palmeiras no Cerrado. Os triatomíneos foram capturados em palmeiras (Mauritia flexuosa) de quatro bacias hidrográficas (Tocantins, São Francisco, Paraná e Paraguai) e os índices de infestação e infecção por tripanossomatídeos foram analisados. A morfometria geométrica foi aplicada para identificar quais espécies de Rhodnius do grupo R. prolixus são encontradas em palmeiras e casas no Brasil central e para analisar a variação morfológica de populações silvestres de R. neglectus. A distribuição geográfica potencial de R. neglectus foi analisada usando modelagem de nicho ecológico (GARP) baseada na relação entre variáveis ambientais e os registros de ocorrência obtidos durante o estudo. A análise filogeográfica de R. neglectus foi baseada no polimorfismo de seqüências de citocromo b do DNA mitocondrial, testando a hipótese de diferenciação entre populações pelo processo de isolamento por distância. A freqüência de palmeiras infestadas variou de 11 a 100% nas 40 áreas amostradas, sendo coletados 1.581 espécimes em 177 palmeiras, principalmente em ninhos de pássaros; 3,8% dos triatomíneos examinados estavam infectados por tripanossomatídeos (Trypanosoma cruzi e T. rangeli). As análises morfométricas permitiram uma reclassificação quase perfeita dos indivíduos em suas respectivas espécies. Os padrões de forma não revelaram diferenças consistentes entre a maioria dos espécimes coletados nas casas no Brasil central e R. neglectus, mostrando também que R. robustus e R. neglectus ocorrem simpatricamente ao sul da Amazônia. Esses resultados suportam fortemente a idéia que espécimes de R. neglectus, e não de R. prolixus, têm invadido as casas no Brasil central. Os métodos de morfometria geométrica aplicados para explorar a variação fenotípica em R. neglectus mostraram variação significativa de tamanho de asas e, principalmente, cápsulas cefálicas entre as populações analisadas. A temperatura foi a variável ambiental que mais influenciou o tamanho, sendo os menores espécimes encontrados nas áreas mais frias. Entretanto, nenhuma variação significativa de forma foi observada entre populações de diferentes bacias hidrográficas. Os modelos de nicho ecológico foram capazes de predizer, com alta probabilidade, áreas de ocorrência de R. neglectus no bioma Cerrado. Áreas de Caatinga, savanas amazônicas, Pantanal e Chaco boliviano apresentaram menores probabilidades de ocorrência da espécie. Uma grande sobreposição foi observada entre a distribuição de R. neglectus, palmeiras e pássaros. Ao incluir novos registros de R. neglectus, o presente estudo revelou um aumento da distribuição a oeste e nordeste do Brasil na 'diagonal de ecorregiões abertas/secas da América do Sul'. O seqüenciamento da porção 5´ do citocromo b em 144 indivíduos de 33 populações resultou em um fragmento de 567pb, revelando a existência de 13 haplótipos únicos e 22 sítios variáveis. Os haplótipos obtidos formaram um grupo monofilético bem suportado, sendo identificados como R. neglectus e separados claramente das outras espécies de Rhodnius do grupo R. prolixus. Os dois haplótipos mais freqüentes ocorreram em áreas separadas por distâncias maiores que 1.700 km e de três bacias hidrográficas. Haplótipos compartilhados foram observados em áreas de ambas as margens dos principais rios e ambos os lados da Serra Geral de Goiás. As populações de Alto Paraíso-GO e da bacia do Paraguai (Mato Grosso) apresentaram haplótipos únicos e altos níveis de diversidade nucleotídica e divergência entre populações. A rede de haplótipos apresentou dois grupos geograficamente distintos (oeste e leste), mas não houve evidência de isolamento por distância (Mantel, p = 0,446). A dispersão de espécimes de R. neglectus entre no Brasil central poderia ocorrer a partir de um mecanismo passivo de transporte por aves. Finalmente, esses resultados podem auxiliar os programas de vigilância vetorial da doença de Chagas, visto que a invasão das casas por espécimes de Rhodnius mantém o risco de transmissão e limita a eficiência das estratégias de controle. / Sylvatic triatomines of the genus Rhodnius commonly fly into houses in Latin America, maintaining the risk of Chagas disease transmission. In this thesis, phylogeographical, morphological and potential geographical distribution analyses of Rhodnius populations in central Brazil were carried out, focusing in R. neglectus, the major species found in palm trees in the Brazilian Savannah. Bugs were captured in Mautitia flexuosa palm trees from four hydrogeographic basins (Tocantins, Sao Francisco, Parana and Paraguay); the infestation and trypanosomatid infection indices were analyzed. Geometric morphometric methods were applied to identify the Rhodnius species of the R. prolixus group and to analyze the morphometric variation among R. neglectus populations from these basins. The hypothesis of phenotypic plasticity related to some environment variables was also tested. The potential geographical distribution of R. neglectus was analyzed by using ecological niche modeling (GARP) based on the relation of environmental variables and occurrence records. The phylogeographic analyses of R. neglectus populations were based on polymorphisms of cytochrome b sequences, testing the hypotheses of differentiation and isolation by distance. The frequency of infested palms varied from 11 to 100% in the 40 sampled areas, and 1,581 specimens were collected in 177 palms, mainly in bird nests; 3.8% of the examined bugs were infected by trypanosomatids (Trypanosoma cruzi and T. rangeli). Morphometric analyses of shape variation allowed for an almost perfect reclassification of individuals to their putative species. Shape patterning revealed no consistent differences between most specimens collected inside houses in central Brazil and R. neglectus, and also showed that R. robustus and R. neglectus occur sympatrically in southern Amazonia. These results strongly support the idea that R. neglectus, and not R. prolixus, is the species invading houses in central Brazil. The geometric morphometric methods applied to assess the intraspecific phenotypic variation in R. neglectus showed significant size variation among populations.Wing and head size were influenced by temperature: the smallest specimens were found in the coldest areas. Nevertheless, no significant shape variation was observed among populations of different geographical basins. The ecological niche models were able to predict the occurrence of R. neglectus as a characteristic (although not endemic) species of the Cerrado biome. Meanwhile, Caatinga, Amazonian savannas, Pantanal, and the Bolivian Chaco appear as areas with lower predicted presence probability for the species. A high overlap was observed among the distributions of R. neglectus, some palm trees and birds. By including new records for R. neglectus, the present study has revealed a wider distribution towards the west and northeast areas of Brazil in the ‘diagonal of open/dry ecoregions of South America’. The sequencing of 5´- end of the cytochrome b gene in 144 individuals from 33 populations resulted in a fragment of 567bp, revealing the existence of 13 different haplotypes and 22 variable sites. These haplotypes formed a well-supported monophyletic group identified as R. neglectus and clearly separated for other Rhodnius species of the ‘R. prolixus group’. The two more frequent haplotypes occurred in areas separated by a distance over 1,700 km and from three different hydrogeographic basins. Shared haplotypes were also observed in areas from both sides of large rivers and both sides of ‘Serra Geral de Goias’. The populations from Alto Paraiso-GO and from the Paraguay basin (Mato Grosso) presented unique haplotypes and higher levels of nucleotide diversity and divergence among populations. The haplotype network analysis showed two geographically distinct groups (western and eastern) but there was no evidence of isolation by distance (Mantel, p = 0,446). The dispersal of R. neglectus specimens among the basins may occur through passive carriage by birds. Finally, these results should help the Chagas disease vector surveillance program, given that household invasion by Rhodnius species maintains disease transmission risk and limits the effectivenes of control strategies.