Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2010. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-09-21T14:21:33Z No. of bitstreams: 1 2010_FlaviadaSilvaNaderMotta.pdf: 3843006 bytes, checksum: be72ce6d2ae5ec4a5cde40aa3a698258 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-09-21T14:24:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_FlaviadaSilvaNaderMotta.pdf: 3843006 bytes, checksum: be72ce6d2ae5ec4a5cde40aa3a698258 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-09-21T14:24:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_FlaviadaSilvaNaderMotta.pdf: 3843006 bytes, checksum: be72ce6d2ae5ec4a5cde40aa3a698258 (MD5) / A linha de pesquisa do nosso grupo visa à identificação e caracterização de alvos potenciais para a quimioterapia da doença de Chagas tendo as proteases como principal enfoque, uma vez que estão envolvidas em processos biológicos fundamentais para a viabilidade e virulência de patógenos. Neste contexto, essa tese aborda alguns aspectos estruturais e funcionais de serino-proteases pertencente à família Prolil Oligopeptidase: a oligopeptidase B (OPBTc) e prolil oligopeptidase (POPTc 80) de Trypanosoma cruzi e a prolil oligopeptidase (POP Tb) de Trypanosoma brucei. A OPBTc participa da invasão celular por meio do recrutamento e fusão de lisossomos da célula hospedeira até o local de ligação do parasito por uma via dependente de Ca2+. Por meio deste trabalho, a OPBTc tornou-se a primeira oligopeptidase B a ter sua estrutura dimérica confirmada por ultracentrifugação analítica. Experimentos de dicroísmo circular mostraram que em altas temperaturas, a enzima conserva sua estrutura secundária, mas não a terciária. A perda da estrutura terciária por tratamento térmico acompanha a diminuição da atividade da enzima e a perda da dimerização, que ocorrem a partir de 50 °C. No entanto, a associação do dímero é resistente a altas concentrações de sal e a tratamento com reagentes redutores, indicando que esta interação não ocorre devido a pontes dissulfeto intermoleculares. Este trabalho também mostra a caracterização funcional da POP de T. brucei, protozoário causador da doença do sono. Esta protease foi capaz de hidrolisar colágeno tipo I semi-purificado in vitro e colágeno nativo em mesentério de rato, além de peptídeos hormonais. Foi observado ainda, que POP Tb é liberada na corrente sanguínea de camundongos infectados pelo T. brucei, onde permanece ativa, sugerindo sua contribuição para a patogênese da doença do sono. Como já proposto em estudos prévios, a POP Tc80 está envolvida na entrada do T. cruzi em célula hospedeiras não fagocíticas e alguns de seus substratos naturais foram caracterizados mostrando que a mesmo hidrolisa colágenos do tipo I e IV e fibronectina. O mecanismo desta catálise não é completamente entendido, porém cálculos de interação entre o modelo estrutural teórico da POP Tc80 com o colágeno mostraram que ocorre uma abertura dos domínios da enzima para entrada do substrato. Para verificar essa hipótese, mutações sítios dirigidas na POP Tc80 acarretaram na perda da sua atividade devido à rigidez da enzima, impedindo o acesso do substrato à fenda catalítica. Finalmente, ainda na tentativa de esclarecer o papel da POP Tc80 na infecção do T. cruzi, foi montada uma estratégia para silenciar seu gene. Os resultados preliminares indicam que um alelo do gene poptc80 sofreu recombinação homóloga sendo trocado pelo marcador de seleção, o gene de resistência a neomicina. / The research activities of our group aim the identication and characterization of potential targets for chemotherapy oT Chagas:s disease, and proteases are the main focus since they are involved in biological processes essential for the viability and virulence of pathogens. In this context, this thesis addresses some structural and functional features of seine-proteases that belong to the Prolil Oligopeptidase family: the oligopeptidase B (OPBTc) and prolyl oligopeptidase (POP Tc80) of Trypanosoma cruzi and the prolyl oligopeptidase (POPTb) of Trypanosoma brucei. The OPBTc participates in cell invasion through the recruitment and fusion of the host cell lysosomes to the binding site of the parasite by a Ca2+ dependent pathway. In this work, the OPBTc had a structural approach, being the first oligopeptidase B to have its dimeric structure confirmed by analytical ultracentrifugation. Circular dichroism experiments showed that at high temperatures, the enzyme retains its secondary structure but not the tertiary. The loss of tertiary structure by heat treatment follows the decline of enzyme catalytic ability, which occurs from 50 "C. However, the association of the dimer is resistant to salt high concentration and treatment with reducing reagents, indicating that this interaction is not dueto intermolecular disulfide bonds. This work also shows the functional characterization of the enzyme POP of T. brucei {protozoan that causes sleeping sickness), the POPTb. This protease was able to hydrolyze native and semi-purified collagen type I and peptide hormones. In addition, POPTb is released into the bloodstream of T. brucei infected mice, where it remains active, suggesting their contribution to the pathogenesis of sleeping sickness. As shown in previous studies, the POP Tc80 is involved in the entry of the parasite in the non-phagocytic host cell and some of its natural substrates were characterized showing that the enzyme hydrolyzes collagen type I and IV and fibronectin. The mechanism of this catalysis is not completely understood, but docking analysis of the theoretical structural model of POP Tc80 with collagen, showed that the enzyme domains open to substrate entry. To investigate this hypothesis, site directed mutations in POP Tc80 resulted in loss of its activity due to the rigidity of the enzyme, preventing the substrate access to the catalytic pocket. In a attempt to clarify the role of POP Tc80 in T. cruzi infection, it was set up a strategy to silence its gene. Preliminary results indicate that one allele of the poptc80 gene has been replaced by the selection marquee, the gene for resistance to neomycin, through homologous recombination.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-Graduação em Patologia Molecular, Laboratório de Bioquímica e Química de Proteínas, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-10-30T12:35:16Z No. of bitstreams: 1 2013_RaynerMyrLauterjungQueiroz.pdf: 2749536 bytes, checksum: 919b0cd19524ed0a125aae72c5a61ed3 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-30T12:49:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RaynerMyrLauterjungQueiroz.pdf: 2749536 bytes, checksum: 919b0cd19524ed0a125aae72c5a61ed3 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-30T12:49:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RaynerMyrLauterjungQueiroz.pdf: 2749536 bytes, checksum: 919b0cd19524ed0a125aae72c5a61ed3 (MD5) / O Trypanosoma cruzi é o protozoário causador da doença de Chagas, uma enfermidade que afeta milhões de pessoas especialmente na América latina onde é endêmica. O parasito passa por diversos processos de diferenciação para adaptar-se a diferentes condições dentro dos seus hospedeiros mamíferos e triatomíneos. A respeito especialmente do hospedeiro mamífero, os tripomastigotas, a forma sanguínea infectiva do T. cruzi, diferencia-se intracelularmente em amastigotas replicativos após um período de incubação dentro de fagolisossomos ácidos, em um processo denominado amastigogênese. Aqui buscamos encontrar novas informações concernentes a esse processo através da análise do subproteoma de superfície celular dos estágios de vida presentes no homem e do repertório protéico secretado/excretado por tripomastigotas em pH fisiológico e também nas primeiras 3 horas de amastigogênese axênica. Também realizamos uma análise quantitativa do proteoma total e do fosfoproteoma durante a amastigogênese. Todos os subproteomas foram aqui analisados por LC-MS/MS com um espectrômetro de massas Orbitrap Velos. Primeiro utilizamos epimastigotas, o estágio do parasito encontrado no inseto vetor, para padronizar e avaliar o enriquecimento de proteínas da superfície celular por duas técnicas distintas: uma baseada na tripsinização da superfície de células intactas e a outra baseada na biotinilação de proteínas expostas na superfície e seu enriquecimento por cromatografia de afinidade a estreptoavidina. Os resultados mostraram que essas abordagens ofereceram informações abrangentes e complementares sobre o subproteoma da membrana plasmática do parasito e, então, foram aplicadas na análise desse subproteoma nas formas amastigota e tripomastigota. A análise quantitativa do proteoma e fosfoproteoma usou parasitos diferenciados de forma axênica em quatro pontos do processo (0 min, 30 min, 2 h e 9 h) e os fosfopeptídeos foram enriquecidos com resina de TiO2. Finalmente, o secretoma de tripomastigotas foi obtido de uma maneira similar ao protocolo de aquisição de antígenos secretados/excretados, mas com cuidados adicionais para evitarmos lise mecânica das células. As análises renderam milhares de proteínas identificadas que eram comprovadamente ou preditas como associadas à membrana plasmática ou secretadas e são envolvidas na interação parasito-hospedeiro. Da mesma forma, várias proteínas e fosfopeptídeos relevantes possuíram expressão regulada durante a amastigogênese. / Trypanosoma cruzi is a protozoan that causes Chagas' disease, a neglected infectious illness that affects millions of people, mostly in the Latin America. The parasite undergoes several differentiation processes in order to adapt to different conditions inside both mammalian and triatomine hosts. Specially regarding mammalian hosts, the trypomastigote, an infective bloodstream life-form of the T. cruzi, differentiates intracellularly to the replicative amastigote stage after a period of incubation inside acidic phagolisossomes, in a process called amastigogenesis. Here we aim to bring further light to this process by analysing the cell surface subproteome of the mammalian hosted life-forms of the parasite and the secreted/excreted protein repertoire from trypomastigotes in physiological pH and also at the first 3 hours of the acidic pH induced amastigogenesis. Finally, we performed the quantitative proteome and phosphoproteome analysis of the amastigogenesis by iTRAQ labeling. All T. cruzi subproteomes were analysed by LC-MS/MS with Orbitrap Velos mass spectrometer. First we used T. cruzi epimastigotes, the insect hosted life-form, in order to prepare samples enriched in cell surface proteins by two distinct methodologies, which were optimized and evaluated. The first methodology was based on cell surface trypsinization (Shave) of intact living cells while the second approach used biotinylation of cell surface proteins followed by streptavidin affinity chromatography isolation of the labeled proteins. The results showed that the methodologies offered comprehensive and complementary information about the parasite's plasma membrane subproteome, which were applied afterwards in the trypomastigote and amastigote cells. The quantitative proteome and phosphoproteome analysis used the axenicaly differentiated parasites in four time points (0 min, 30 min, 2 h and 9 h) and the phosphopeptides were enriched using TiO2 beads. Finally, the trypomastigote secretome were obtained in a similar way to the protocols of acquisition of secreted/excreted antigens, but with further care to avoid mechanical lysis. The results yielded thousands of protein identifications which were either proved or expected to be associated to the plasma membrane or secreted and are involved in host-parasite interection and, in the same way, we found several proteins and phosphopeptides that have regulated expression during amastigogenesis.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade da Ceilândia, Programa de Pós-Graduação em Ciências e Tecnologias em Saúde, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-01-29T13:39:41Z No. of bitstreams: 1 2013_AlexandraCorrêaGervazoniBalbuenadeLima.pdf: 2450128 bytes, checksum: bc97b7297cecfa3405e603724c162cb3 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-02-03T12:59:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_AlexandraCorrêaGervazoniBalbuenadeLima.pdf: 2450128 bytes, checksum: bc97b7297cecfa3405e603724c162cb3 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-03T12:59:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_AlexandraCorrêaGervazoniBalbuenadeLima.pdf: 2450128 bytes, checksum: bc97b7297cecfa3405e603724c162cb3 (MD5) / Introdução: A insuficiência cardíaca (IC) é uma importante causa de hospitalização e mortalidade. A melhor compreensão dos mecanismos fisiopatológicos em diferentes etiologias pode levar a uma melhor identificação de pacientes com pior prognóstico e evolução. Objetivo: Comparar a função vascular pela tonometria de aplanação (TA) em pacientes com insuficiência cardíaca isquêmica e chagásica. Métodos: Trinta e dois indivíduos do sexo masculino, 11 IC isquêmica,10 IC chagásica, e 11 controles saudáveis pareados por idade e índice de massa corporal foram incluídos nesta análise. Manejo farmacológico antes do início do estudo foi mantido e as avaliações clínica e ecocardiográfica foram realizadas. A onda de pulso da artéria radial foi medida de forma não invasiva usando a TA. Resultados: Ambos os grupos isquêmico e chagásico apresentaram disfunção sistólica biventricular e disfunção diastólica em comparação ao grupo saudável. Os pacientes chagásicos apresentaram maiores diâmetros ventriculares e volume atrial esquerdo, associado com menor pressão arterial sistólica radial (PASr) e pressão arterial sistólica central (PASc), que estariam relacionados a um maior remodelamento ventricular e comprometimento hemodinâmico. Os pacientes isquêmicos demonstraram um índice de aumento (IAx) mais elevado, associado com aos fatores de risco cardiovascular clássicos, que contribuem para uma doença vascular inflamatória. Conclusão: Em conclusão, a partir da avaliação da função vascular pela TA foram observadas diferenças em pacientes portadores de IC isquêmica chagásica. Nossos resultados indicam que parecem existir mecanismos fisiopatológicos distintos na IC de etiologia isquêmica e chagásica. / Background: Heart failure (HF) is an important cause of hospitalization and mortality. The best comprehension of different pathophysiological mechanisms can lead to better identification of critically ill patients. Objective: Compare aplanation tonometry (AT) measurements in patients with ischemic and Chagas HF. Methods: Third-two male subjects, 11 ischemic HF, 10 Chagas HF, and 11 healthy controls matched by age and body mass index were included in this analysis. Pharmacological management prior to initiation of the study was maintained and both clinical and echocardiographic evaluations were made. The radial artery pulse wave was measured non-invasively using an AT. Results: Ischemic HF and Chagas HF patients demonstrated biventricular systolic dysfunction and diastolic dysfunction compared to the healthy group. Chagas’s patients had higher ventricular diameters and left atrial volume, associated with lower systolic radial and central systolic blood pressure, which would be related to greater ventricular remodeling and hemodynamic compromise. The ischemic patients demonstrated an augmentation index (IAX) higher, associated with the classic cardiovascular risk factors, which contribute to inflammatory vascular disease. Conclusion: In conclusion, key AT differences were observed in patients with ischemic and Chagas HF groups. Our findings indicate patients with Chagas and ischemic HF present with unique pathophysiologic mechanisms.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-03-24T11:22:58Z No. of bitstreams: 1 2013_ManuelaMacielBrittoAragao.pdf: 3783906 bytes, checksum: 311c40bb58b437085282bc5efc1bba24 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-03-24T11:52:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_ManuelaMacielBrittoAragao.pdf: 3783906 bytes, checksum: 311c40bb58b437085282bc5efc1bba24 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-24T11:52:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_ManuelaMacielBrittoAragao.pdf: 3783906 bytes, checksum: 311c40bb58b437085282bc5efc1bba24 (MD5) / A transferência lateral (TL) e vertical (TV) de minicírculos de DNA (kDNA) do Trypanosoma cruzi foram investigadas em 26 pessoas de quatro famílias. A infecção ativa foi documentada em cinco pessoas com o DNA nuclear do T. cruzi. Evidência da integração do kDNA foi documentada em todos esses casos. Foram obtidas sequências quimeras kDNA-DNA humano de 157 eventos de TL e TV as quais foram analisadas em bancos de dados. As integrações do kDNA foram mapeadas em 19 dos 23 cromossomos, e 72,4% das integrações ocorreram em elementos transponíveis: 80% dessas mutações ficaram retidas em retroelementos LINE-1. O gene do receptor olfatório RO1-17 reteve 10 das 18 integrações de kDNA em regiões codificadoras. A técnica tpTAIL-PCR específica para este gene gerou mais 37 quimeras, totalizando 194 mutações de kDNA-DNA humano. Em 105 eventos (54%) das mutações estavam inseridas em loci de indivíduos consanguíneos, verdadeiros eventos de TGV herdados pelas progênies. Em 15 desses eventos (14%) as quimeras kDNA-DNA hospedeiro tinham topologia sugestiva de herança Mendeliana. Os demais 90 eventos (86%) apresentaram diversidade nas sequências de nucleotídeos dos minicírculos integradas no mesmo sitio do genoma de parentais e progênies. Este achado sugere que a maioria das mutações do kDNA no genoma humano apresentam padrão não Mendeliano. Verificou-se ainda que a diversidade de sequências de minicírculos integradas foi aumentada pelos fenômenos de recombinação, truncamento, mobilização e embaralhamento de regiões dos minicírculos nas mutações herdadas. A demonstração de crescimento do genoma com diversidade genética sugere especiação sem limite conhecido. Ademais, TL e TV contribuem para o magnífico fenômeno da evolução, definida por Darwin como “descendentes com modificações”. / The lateral and the vertical gene transfers (LT and VT) of Trypanosoma cruzi kDNA minicircles was sought among 26 people in four families. The live T. cruzi infection was documented in five people showing the parasite nuclear DNA. The evidence of the kDNA integration was shown in all those cases. The kDNA-human DNA chimera sequences were obtained from 157 LT and VT events that were analyzed in databank. The kDNA mutations were found in 19 out of 23 chromosomes, and 72,4% of these integrations occurred in transposable elements; 50% of these mutations were present in the retrotransposable LINE-1. At the locus of the olfactory receptor OR1-17 there were 10 among 18 integrations. The tpTAIL-PCR technique with primers specific to the OR1-17 gene generated, additionally, 37 chimeras among a total of 194 chimeras kDNA-DNA disclosed in the human genome. A total of 105 (54%) mutations were inserted at various loci from bloodline individuals in four families, whose are truly events inherited from progeny. Among 15 of those events (14%) there were kDNA-host DNA mutations showing topology that suggests the Mendelian inheritance. The remaining 90 mutations (86%) revealed a broad genetic diversity arising from different minicircle sequences integrated at single loci in the parental and progeny. This finding indicates that a great majority of the kDNA mutations in the human genome is non-Mendelian. Additionally, it was shown an increasing diversity of minicircle sequences as a consequence of recombination, reshuffling, hitchhiking, and truncated minicircle at the inherited mutation sites. The documented genome growth and diversity of the minicircles flanking the host DNA at the mutation sites suggested unlimited speciation, hence LT and VT contribute for the magnificent unstoppable evolution, which was defined by Charles Darwin as “descendents with modifications”.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-05-06T12:27:16Z No. of bitstreams: 1 2013_MartaCarolinaDeusdaraRosa.pdf: 5650381 bytes, checksum: b0f8d3a33003d27e38c48565e316d0d4 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-05-07T10:37:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_MartaCarolinaDeusdaraRosa.pdf: 5650381 bytes, checksum: b0f8d3a33003d27e38c48565e316d0d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-07T10:37:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_MartaCarolinaDeusdaraRosa.pdf: 5650381 bytes, checksum: b0f8d3a33003d27e38c48565e316d0d4 (MD5) / A saliva do artrópode hematófago Rhodnius prolixus contém atividade apirásica (EC 3.6.1.5) que facilita a hematofagia inibindo a agregação plaquetária, no hospedeiro vertebrado, induzida por ADP. Este trabalho descreve a purificação de proteínas que representam membros da família das apirases da saliva de R. prolixus. O conteúdo das glândulas salivares foi injetado numa coluna Superdex 200 10/300 GL e eluída com o tampão (25 mM Tris-HCl, pH 8.0, 150 mM NaCl, 5.0 mM CaCl2) no fluxo de 0,5 ml/min. Os picos eluídos foram monitorados a 280 nm em cromatografia líquida rápida de proteínas (FPLC). As frações contendo atividade foram reunidas e submetidas à cromatografia de afinidade (coluna Hi-Trap Blue-Sepharose). Após eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), as bandas foram visualizadas por coloração com nitrato de prata. O zimograma revelou bandas proteicas entre 60 e 130 kDa que exerceram atividade apirásica. Os resultados sugerem que pode ocorrer um arranjo oligomérico entre as apirases salivares de R. prolixus. As apirases purificadas da saliva de R.prolixus são capazes de clivar nucleotídeos di- e trifosfato de maneira cálcio dependente. A purificação destas enzimas permitirá a caracterização mais detalhada de sua relação estrutura/atividade. / The saliva of the haematophagous arthropod Rhodnius prolixus contains apyrase (EC 3.6.1.5) activity that facilitates blood-feeding by inhibiting the ADP-induced aggregation of the host platelets. We report here the purification of proteins that likely represent the R. prolixus members of the apyrase family. Salivary glands content was injected into the Superdex 200 10/300 GL column and eluted with a buffer (25 mM Tris-HCl, pH 8.0, 150 mM NaCl, 5.0 mM CaCl2) at a flow rate of 0.5 ml/min. The eluted peaks were monitored at 280 nm on fast protein liquid chromatography. The fractions containing activity were pooled and subjected to affinity chromatography (Hi- Trap Blue-Sepharose column). Following sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, protein bands were detected with silver staining. As revealed by zymography, protein bands between 60 and 130 kDa exerted ATPase activity. The results suggest that oligomeric assembly among R. prolixus members with apyrase activity may occur. The purified R. prolixus apyrases are capable of cleaving nucleotide tri- and diphosphates in a calcium-dependent manner. The purification of these enzymes will allow more detailed characterization of their structure/activity relationship and it is plausible that they might be promising therapeutic molecules to target disorders of platelet aggregation.

Orientador: Antonio Carlos Corsini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T06:33:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Braz_ReginadeFatimadosSantos_M.pdf: 5113765 bytes, checksum: 7a069c4a98739dcb5e5cf6324e1f2026 (MD5) Previous issue date: 1981 / Resumo: Neste trabalho verificamos a importância dos anticorpos do tipo IgG na resposta imune de camundongos de diferentes raças ( 'CBAxC IND. 57'B1/10)'F IND. 1', BH e BL, infectados esperimentalmente com tripomastigotas de depa Y do trypanossoma cruzi. Para isto observamos: - a resposta humoral nos animais de diferentes raças infectados pelo T.cruzi. A parasitemia, a taxa de mortalidade e a resposta humoral em animais das diferentes raças, cuja resposta imune foi suprimida por esplenectomia ou tratamento com drogas imunossupressoras (hidrocortisona e ciclofamida). Nossos resultados nos permitem concluir que: 1- Camundongos da raça ( 'CBAxC IND. 57'B1/10)'F IND. 1' aprasentem grande à infecção por '10 POT. 2' tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi. 2- A primoinfecção com inólucos com doses letais do mesmo parasita, prorteção esta observada através da diminuição da moirtalidade, do aumento no título de anticorpos e do estudo histológico (ausência de infiltrado inflamatório e de ninhos de amastigotas nos órgãos). 3- As drogas imunossupressoras (ciclofosfamida e hidrocortisona) provocaram supressão relevandte no título de anticorpos, quando adminstradoas no período pré-patente da infecção, ao passo que esplenectomia não alterou o curso da infecção. 4- Quando as drogas foram adminstradas na crônica e próximas à reinfecção, a ciclofosfamida causou supressão importante, porém a hidrocortisona não alterou o curso da infecção crônica ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientadores: Irineu Jose Barsanti de Camargo , Annie Prouvost-Alvarez / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T20:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garcia_IrandaiaUbirajara_M.pdf: 18876528 bytes, checksum: af14351197aa0ead028c56ab4550e944 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Na doença de Chagas tem sido pouco a participação dos anticorpos anafiláticos e as suas interações com os mastócitos, certamente pelo fato de que em geral nas infecções por protozoários não há um aumento da síntese de IgE, como acontece nas helmintoses. Também, foram desenvolvidas poucas pesquisas de outros anticorpos anafiláticos além do IgE, que poderiam ter um papel efetivo em geral nas infecções. Neste trabalho nos propusemos investigar o papel da anafilaxia na infecção a T.cruzi, durante a fase aguda, utilizando duas linhagens de camundongos diferentes: O CBA/J (susceptível) e o C57Bl/10 (moderadamente resistente). Foram estudadas a cinética e a função biológica dos anticorpos anafiláticos (IgE e IgG1), como também suas interações com os mastócitos, participando de um processo inflamatório nos tecidos do mesentério. Com a utilização de uma metodologia apropiada nas análises das infecções, foi observado que durante a evolução da infecção chagásica há indícios de uma síntese de IgE específica a antígenos de T. cruzi, principalmente na linhagem resistente. Em nosso trabalho há evidência entretanto, de um fator (fatores), cujas características ainda não foram identificadas e que durante a infecção é liberado na circulação, produzindo uma inibição da excitose dos mastócitos. Esta exocitose foi induzida por antígenos não relacionados a T.cruzi, medida ou não por IgE ou IgG1, como também foi inibida a exocitose inespecífica, mediada ou não por IgE ou IgG1. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Marcos Garcia Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T20:34:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bezerra_RafaelCampos_M.pdf: 5590015 bytes, checksum: 72220028aedb6c55f240140fd0eece35 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: O período pré-patente, a parasitemia, a mortalidade e alterações hematológicas, esplênicas e medulares, foram estudados em camundongos Swiss, não isogênicos e em camundongos isogênicos BALB/c, CBA, C57BL/l0 e em híbridos (C57BL/l0xBALB/c)Fl e (C57BL/l0xCBA)Fl, infectados com inóculos variando de 100 a 100.000 tripomastigotas sanguíneas do Trypanasoma cruzi das cepas Y ou CL.As diferenças no período pré-patente, mostraram-se como decorrência direta do inóculo e das cepas de Trypanosoma cruzi empregadas, independente da linhagem de camundongo utilizada ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Daria Repka / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T14:39:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MalaguenodeSantana_Elisabeth_M.pdf: 1761462 bytes, checksum: 4ec50d59ddc72b11ec6a914ed4199ccd (MD5) Previous issue date: 1977 / Resumo: Uma fração designada FA contendo antígenos de superfície das formas epimastigotas foi estudada com o sentido de verificar se alguns determinantes antígenos presentes naquela fração estariam representados durante a infecção pelo T. cruzi. Soros de 10 pacientes humanos em fase crônica e soros de camundongos obtidos de diferentes períodos de infecções experimentais como duas amostras (Y e NIC) foram estudadas utilizando-se as técnicas de inibição de aglutinação e inibição da imunofluorescência Os resultados obtidos indicam que: Os soros humanos em fase crônicas não foram capazes de reagir com a FA; A Fa possui determinantes de superfícies da epimastigota que se acham representados durante a infecção experimental de T. cruzi em camundongos; A evolução dos títulos de anticorpos detectados pelas reações de imunofluorescência , sugerindo que estas reações detectam diferentes determinantes antigênicos; Existem uma atividade proteolítica, associada a FA, capaz de degradar a hemoglobina bovina ou os antígenos presentes na FA / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Antonio Carlos Corsini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T21:11:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_OdeteLimaPimentade_M.pdf: 8042024 bytes, checksum: 2b2f255ad0a7822fdfcb4286336ff6df (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: O presente trabalho compreende o estudo das alterações morfológicas e funcionais desenvolvidas principalmente no sistema imune dos camundongos (CBA/H x 'C IND. 57¿B1/10)F1 durante a fase aguda e crônica da infecção pelo T. cruzi, cepa Y. Seu objetivo principal foi o de conhecer pelo menos em parte, o comportamento imunbiológico destes animais em ambas as fases da infecção, uma vez que eles apresentam longa sobravida, e estabelecer um modelo experimental que possibilite a investigação dos mecanismos básicos, que uma vez desencadeados ocasionam a doença. Os resultados obtidos permitem concluir: 1- As raças de camundongo 'C IND. 3¿H/HeJ, CBA/H, 'C IND. 57¿B1/10 e (CBA/H x 'C IND. 57¿B1/10)F1 apresentam,em ordem decrescente, diferentes graus de susceptibilidade à infecção pelo T. cruzi. 2- A resistência dos camundongos híbridos é dependente do número de parasitas inoculados. Os animais são susceptíveis à inóculos contnedo ¿10 POT. 4¿ ou mais tripomastigotas. Inóculos menores, embora causem profundas alterações no sistema imune destes camundongos, não são fatais, pois estas regridem em um mês de infecção. 3- Na fase inicial da infecção ocorre m aumento da resposta imune humoral primária à hemácia de carneiro (HC), medida pelo número de células formadoras de placas (CFP) seguida de posterios supressão desta resposta, a partir do 2 dia de infacção ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas