Submitted by Carvalho Dias João Paulo (joao.dias@famerp.br) on 2018-04-04T13:34:51Z No. of bitstreams: 1 lucianigaspardetoledo_dissert.pdf: 1518015 bytes, checksum: e7bd4f850932330d46b398509046745b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-04T13:34:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lucianigaspardetoledo_dissert.pdf: 1518015 bytes, checksum: e7bd4f850932330d46b398509046745b (MD5) Previous issue date: 2016-06-24 / Introduction: Candida spp are opportunistic pathogens isolated from human biota in the gastrointestinal tract, oral and vaginal mucosa, which can lead to the development of superficial lesions to disseminated infections, especially in immunosuppression. The high toxicity, the high cost of treatment and the emergence of resistant strains justify the search for new therapeutic agents. The plant biodiversity is rich in active ingredients that have contributed to the development of new and effective drugs, less expensive treatments and population access. Cymbopogon nardus (L.) Rendle is a plant popularly known as citronella and cultivated in subtropical and tropical areas of Asia, Africa and America, including Brazil. Essential oils present in the Cymbopogon genus plants have been widely studied, but there are few studies involving chemical analysis and microbiological ethanol extract of C. nardus. Objective: The objective of this study was to evaluate the antifungal potential, in vitro, of ethanol extract (EE) and essential oil (EO) from the leaves of Cymbopogon nardus (L.) Rendle (citronella) clinical isolates against of Candida spp. Material and Methods: In this study the species Candida albicans, Candida krusei, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida parapsilosis sensu stricto and C. orthopsilosis were selected. EE was obtained by extraction ultrasonic bath and analyzed by ultra-performance liquid chromatography (UPLC-ESI-QTOF-MS). The EO was extracted by hydrodistillation and analyzed by gas chromatography-mass spectrometer (GC-MS). The antifungal activity of EE and EO was performed by determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), time-kill assay inhibition of hyphal growth of C. albicans and inhibit mature biofilm. Additionally, the cytotoxic evaluation (determination of IC50) was assessed in HepG-2 cell lines (hepatic) and MRC-5 (fibroblast). Results: The results of the chemical analysis of EE showed presence of glycosylated flavones and glycosylated phenylpropanoids. According to the EO chemical analysis, the main compounds observed were monoterpenes containing-oxygen: citronellal, geranial, geraniol, citronellol and neral. Biological assays showed effective antifungal activity of EE (MIC 1000 to 125 μg / ml) and of EO (MIC 1000 the 250 μg/ml). In the time-kill assay was observed inhibition of growth of the species tested for EE and EO. The hyphal growth of C. albicans was inhibited by EE (1000 to 31 μg/ml) and the EO (1000 to 15.8 μg/ml) for 12 and 24 hours. The EE and EO inhibit mature biofilm species C. albicans, C. krusei, and C. parapsilosis at concentrations of 50xCIM and 10xCIM, respectively. EE exhibited the lower IC50 values for HepG-2 (322 μg/ml) and MRC-5 (181.1 μg/ml) than essential oil that showed IC50 values for HepG-2 (96.6 μg/ml) and MRC-5 (33.1 μg/ml). Conclusions: The EE and EO from C. nardus present as a promising source of new molecules with antifungal activity especially to the inhibition of the main virulence factors such as formation of hyphae and biofilm. / Introdução: Leveduras do gênero Candida são patógenos oportunistas isolados da biota humana no trato gastrointestinal, mucosa oral e vaginal, que podem levar ao desenvolvimento de lesões superficiais até infecções disseminadas, especialmente em situações de imunossupressão. O alto custo para tratamento de infecções, a elevada toxicidade, e o surgimento de cepas resistentes justificam a busca de novos agentes terapêuticos. A biodiversidade vegetal é rica em princípios ativos que têm contribuído com o desenvolvimento de novos e efetivos medicamentos, mais econômicos e de fácil acesso populacional. Cymbopogon nardus (L.) Rendle, é uma planta popularmente conhecida como citronela e cultivada em áreas subtropicais e tropicais da Ásia, África e América, incluindo o Brasil. Os óleos essenciais presentes em plantas do gênero Cymbopogon têm sido amplamente estudados, porém, a analise química e microbiológica do extrato etanólico de C. Nardus,é pouco explorada Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial antifúngico, in vitro, do extrato etanólico (EE) e do óleo essencial (OE) das folhas de Cymbopogon nardus (L.) Rendle (citronela) frente isolados clínicos de Candida spp. Material e Métodos: Foram consideradas as espécies: Candida albicans, Candida krusei, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida parapsilosis sensu stricto e C. orthopsilosis. O EE foi obtido por extração em banho ultrassônico e analisado por cromatografia liquida de ultra performance (UPLC-ESI-QTOF-MS). O OE foi extraído por hidrodestilação e analisado por cromatografia gasosa acoplada a espectrômetro de massa (CG-EM). A atividade antifúngica do EE e do OE foi realizada através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), ensaio time-kill, inibição do crescimento hifal de C. albicans e inibição de biofilme maduro. Adicionalmente, a avaliação citotóxica (determinação de IC50) foi estabelecida em linhagens celulares HepG-2 (hepática) e MRC-5 (fibroblasto). Resultados: Os resultados da análise química do EE evidenciaram presença de flavonas e fenilpropanoides glicosilados. De acordo com a análise química do OE, os principais compostos observados foram monoterpenos contendo oxigênio: citronelal, geranial, geraniol, citronelol e neral. Os ensaios biológicos mostraram importante atividade antifúngica para o EE (CIM de 1000 a 125 μg/mL) e, para o OE (CIM de 1000 a 250 μg/mL). A inibição do crescimento ocorreu para todas as espécies avaliadas frente aos produtos, EE e OE. O EE (1000 até 31 μg/mL) e OE (1000 até 15,8 μg/mL) inibiram o desenvolvimento da hifa de C. albicans, durante 12 e 24 horas, além de inibir o biofilme maduro das espécies de C. albicans, C. krusei e C. parapsilosis, nas concentrações de 50xCIM e 10xCIM, respectivamente. O EE apresentou os menores valores de IC50 para HepG-2 (322 μg/mL) e MRC-5 (181,1 μg/mL) em comparação com o óleo essencial - IC50 para HepG-2 (96,6 μg/mL) e MRC-5 (33,1 μg/mL). Conclusões: O EE e OE de C. nardus apresentam-se como uma fonte promissora de novas moléculas com atividade antifúngica com destaque à inibição dos principais fatores de virulência: formação de hifa e biofilme.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:41:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CaioPSSpdf.pdf: 3119135 bytes, checksum: 46f81d35762fa5844ea534c57d40d0b2 (MD5) Previous issue date: 2008-07-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The quantitative chemical characterization of the inorganic fraction of scale products is very relevant in studying, monitoring and controlling corrosive processes of oil pipelines. The X-ray fluorescence spectrometry (XRF) is a very versatile analytical technique, which can be used in quantitative analysis in solid samples at low concentrations of the chemical element, in the order of few ppm. A methodology that involves sample preparation diluted in the proportion of 1:7 (one portion of the sample for seven of wax), pressed as pellets was used in the XRF calibration for chemical analysis of scale products from oil pipelines. The calibration involved the preparation of reference samples from mixtures of P.A. reagents, aiming to optimize the time consumed in the steps of sample preparation and analysis of Al, Ba, Ca, Fe, K, Mg, Mn, Na, P, S, Si, Sr and Ti, using the same pressed pellet for trace and major elements analysis / A caracteriza??o qu?mica quantitativa da fra??o inorg?nica de produtos de incrusta??o ? de grande relev?ncia no estudo, monitoramento e controle de processos corrosivos em dutos de petr?leo. A espectrometria por fluoresc?ncia de raios X (EFRX) ? uma t?cnica anal?tica muito vers?til, que pode ser utilizada na obten??o de resultados quantitativos de amostras s?lidas em baixas concentra??es do elemento qu?mico, da ordem de alguns ppm. Uma metodologia de prepara??o de amostras dilu?das na propor??o de 1:7 (uma por??o de amostra para sete de cera), posteriormente prensadas na forma de pastilhas foi utilizada na calibra??o do EFRX para an?lise de produtos de incrusta??o de dutos de petr?leo. O processo de calibra??o envolveu a confec??o de amostras de refer?ncia a partir de misturas de reagentes P.A., onde se buscou a otimiza??o do tempo envolvido nas etapas de prepara??o de amostras e an?lise dos elementos Al, Ba, Ca, Fe, K, Mg, Mn, Na, P, S, Si, Sr e Ti, utilizando-se as mesmas pastilhas para dosagem de elementos tra?os e maiores

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:42:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PaulinieAQF_DISSERT.pdf: 1577190 bytes, checksum: 2ee8830ed20d4b44b8e079fbf2fdf31c (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The pulps are products that add economic value enjoy the fruits of the surplus productions of the same. Have good market acceptance because of its practicality and diversity of flavors available year round. In order to assess the quality of the fruit pulp through the physical and chemical parameters and the characteristics of manufacturing industry, we analyzed 36 samples of frozen fruit pulp of three brands marketed in RIO Grande do Norte, 14 brand A, 12 of 10 brand B and brand C, which corresponded to 14 different flavors, of which 10 have identity Standards and Quality (ISQ S) established by the Minist?rio da Agricultura, Pecu?ria e Abastecimento (MAPA), totaling 27 samples with ISQ s. We conducted the following physicalchemical analyzes on samples of fruit pulp: Total solids, total soluble solids, pH, titratable acidity, total sugars and the determination of ascorbic acid. The percentage of failure for each parameter evaluated was 37, 04% in total soluble solids, 22,22% for total solids and titratable acidity, 7,40% in relation to pH. The total sugars were within the requirements demanded by the MAPA and ascorbic acid content, determined only in the pulp of acerola and cashew, presented a non compliance in the pulp of brand B. The percentage of failures of the pulps with ISQ S was 59% with brand A, B and C accounted for 3,70%, 33,33% and 22,22% respectively. The pulps which have no established atandards such as pineapple pulp, showed similar values between brands and literature data unlike the pulp of plum, jackfruit and tamarind which diverged greatly in parameters such as total solids and total soluble solids. The study demonstrates the need for greater quality control by the producers with respect to raw materials, processing, packing, stored and the importance of ISQ S to establish the flavors have not yet covered by existing legislation, but already highly commercialized / As polpas de frutas s?o produtos que agregam valor econ?mico as frutas e aproveitam o excedente da produ??o das mesmas. Apresentam boa aceita??o mercadol?gica em virtude de sua praticidade e pela diversidade de sabores dispon?veis o ano inteiro. Com o objetivo de avaliar a qualidade das polpas de frutas atrav?s dos par?metros f?sico-qu?micos e o perfil dessas ind?strias produtoras, foram analisadas 36 amostras de polpas de frutas congeladas de tr?s marcas comercializadas no Rio Grande do Norte, sendo 14 da marca A, 12 da marca B e 10 da marca C, que correspondeu a 14 sabores diferentes, dos quais, 10 apresentam Padr?es de Identidade e Qualidade (PIQ S) estabelecidos pelo Minist?rio da Agricultura, Pecu?ria e Abastecimento (MAPA), totalizando 27 amostras com PIQ S. Realizaram-se as seguintes an?lises f?sico-qu?micas nas amostras de polpas de frutas: S?lidos totais, s?lidos sol?veis totais, pH, acidez titul?vel, a??cares totais e a determina??o do ?cido asc?rbico. O percentual de reprova??o para cada par?metro avaliado foi de 37,04% nos s?lidos sol?veis totais, 22,22% para s?lidos totais e acidez titul?vel, 7,40% em rela??o ao pH. Os a??cares totais se encontraram dentro dos requisitos exigidos pelo MAPA e o teor de ?cido asc?rbico, determinado apenas nas polpas de acerola e caju, apresentou uma n?o conformidade na polpa de acerola da marca B. O percentual de reprova??es das polpas com PIQ s foi de 59% sendo as marcas A, B e C respons?veis por 3,70%, 33,33% e 22,22% respectivamente. As polpas que n?o disp?em de padr?es estabelecidos como a polpa de abacaxi, apresentaram valores similares entre as marcas e dados da literatura, ao contr?rio das polpas de ameixa, jaca e tamarindo que divergiram bastante em par?metros como s?lidos totais e s?lidos sol?veis totais. O estudo demonstra a necessidade de um maior controle de qualidade por parte dos produtores com rela??o ? mat?ria-prima, seu processamento, acondicionamento, armazenamento e a import?ncia de se estabelecer os PIQ s para sabores ainda n?o contemplados pela legisla??o vigente, mas j? bastante comercializados

Le travail de recherche qui sera présenté porte sur la mise en évidence des différentes formes du cuivre présentes et des échanges qui existent entre les fractions particulaires, dissoutes et colloïdales du milieu profond. Il s’intéresse à la zone de mélange entre les sources profondes et l’eau de mer. L’amélioration de nos connaissances et l’optimisation de l’instrumentation permettent aujourd’hui de proposer le développement d’une stratégie d’échantillonnage et d’une approche qui prennent en compte les contraintes associées à la nature et à l’accessibilité de ces milieux éloignés. Ce travail a donné lieu à la mise en place de méthodes d’analyse effectives pour la mesure du cuivre et de ses ligands. Nos résultats ont montré que la spéciation physique semble essentiellement contrôlée par le pH et l’évolution des caractéristiques oxydoréductrices du milieu au cours de la dilution du fluide hydrothermal par l’eau de mer. La spéciation chimique du cuivre semble quant à elle principalement contrôlée par les ligands soufrés et le caractère oxydant du milieu. Elle a montré que le milieu est globalement plus complexant sur le site hydrothermal Lucky Strike que dans le bassin de Guaymas. A l’échelle du fumeur, la pseudopolarographie et les mesures de capacité complexante ont montré que le milieu est plus complexant dans la zone anoxique, près de la source, que dans la zone oxique où le cuivre est généralement labile et en excès par rapport à ses ligands (ses concentrations peuvent atteindre 100 nM). Dans la zone oxique, environ 27% des complexes formés sont dissociés par oxydation, tandis qu’environ 73% des complexes organiques et inorganiques CuHS+ est stabilisée. / This work presents the copper speciation in the deep ocean and the exchanges existing between different size fractions : particulate, dissolved and colloidal. It focus on the mixing zone between deep sources and seawater. The enhancement of our knowledge and the optimization of instrumentation make possible the development of sampling and analysis strategies accorded with the nature and the accessibility of these extreme environments. A part of this work consisted in the development of effective analysis methods for the quantification of copper and copper’s ligands. Our results showed that physical speciation seems to be essentially controlled by the variations of pH and oxydoreductive caracteristics during the dilution of the hydrothermal fluid by seawater. The chemical speciation of copper seems essentially controlled by sulfide ligands and the oxydative caracteristics of the environment. The environment is generally more complexing on Lucky Strike vent field than in Guaymas Basin. Around each vent, pseudopolarography and complexing capacities showed that the environment is more complexing in the anoxic zone, near the source, than in the oxic zone. In the oxic zone, copper is generally labile and its concentrations (they can reach 100 nM) exceed the ligands concentrations. In the oxic zone, around 27% of the complexes are dissociated, whereas around 73% remains stabilised.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-02-26T14:26:31Z No. of bitstreams: 2 Tese - Gizelda de Siqueira Pedrosa Cardoso - 2014.pdf: 1778576 bytes, checksum: 2498b64eac789a9f7c7e2270a4e23dd0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-02T11:38:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Gizelda de Siqueira Pedrosa Cardoso - 2014.pdf: 1778576 bytes, checksum: 2498b64eac789a9f7c7e2270a4e23dd0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-02T11:38:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Gizelda de Siqueira Pedrosa Cardoso - 2014.pdf: 1778576 bytes, checksum: 2498b64eac789a9f7c7e2270a4e23dd0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-10-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Milkagroindustrial sector is one of the largest agribusiness systems in the world. Brazil is traditionally a large producer of this noble food and even whey along with the production of cheese. This study aimed to evaluate the physical, chemical and microbiological composition of milk and milk whey, as well as, fresh and mozzarella cheeses stored under different temperature conditions. The experiment was conducted during two different periods of the year 2013. We carried out physico-chemical and microbiological analyzes in milk, and pH measurements, determination of titratable acidity, protein content, electrophoretic profile and microbiological analyzes in milk whey, after 21 days of storage at temperatures at 4±1 ºC and 8±1 ºC. Data were compared using intervals of 95% confidence, built in each time, from the Student t variable, and the analyzes performed using the R version of 3.0.3 software. The results of physical-chemical analysis of milk samples analyzed indicated rates at odds with current legislation. In microbial count, both milk and milk whey studied presented values of non-compliance with legislation. Throughout the storage period, only the whey of fresh cheese, stored at 4±1 ºC showed compliance with the rules for pH and titratable acidity. The average levels of total protein in the whey of cheeses studied at temperatures of 4±1 ºC and 8±1 ºC were in accordance with the rules and, regardless of the type of cheese, no significant differences in protein (p > 0.05 ), was verified throughout the observation period. The electrophoretic profile of milk whey allows observation of a greater concentration in the bands representing up to the seventh day of storage at 09 th to 11th proteins with molecular weights of between 14.4 to 116 kDa in both gels produced. / O setor agroindustrial do leite representa um dos maiores sistemas agroindustriais do mundo. O Brasil é, tradicionalmente, um grande produtor deste nobre alimento e, inclusive de soro lácteo juntamente com a produção de queijo. Objetivou-se avaliar a composição físico-química e microbiológica do leite e dos soros lácteos dos queijos minas frescal e mussarela estocado sob diferentes condições de temperatura. O experimento foi conduzido durante dois períodos distintos do ano de 2013. No leite foram realizadas análises físico-químicas e microbiológicas. Nos soros lácteos, acompanhados por 21 dias de estocagem nas temperaturas de 4±1ºC e 8±1ºC, foram realizadas aferições de pH, determinações da acidez titulável, teor protéico, perfil eletroforético e análises microbiológicas. Os dados foram comparados por meio de intervalos de 95% de confiança, construídos, em cada tempo, a partir da variável t-Student, e as análises realizadas com o software R versão 3.0.3. Os resultados das análises físico-químicas das amostras dos leites analisados indicaram índices em desacordo com a legislação vigente. Na contagem microbiana, tanto o leite como os soros lácteos estudados apresentaram valores de não conformidade com a legislação. Durante todo o período de estocagem, somente o soro do queijo minas frescal, armazenado a 4±1 ºC apresentou conformidade com a legislação para o pH e acidez titulável. Os teores médios de proteína total nos soros dos queijos pesquisados, nas temperaturas de 4±1 ºC e 8±1 ºC apresentaram-se em acordo com a legislação e, independente do tipo de queijo, não apresentaram diferenças significativas de proteínas (p> 0,05), ao longo do período de observação. O perfil eletroforético dos soros lácteos permitiu a observação de uma concentração mais acentuada nas bandas representativas de até o sétimo dia de armazenamento com 09 a 11 proteínas com pesos moleculares entre 14,4 a 116 kDa, em ambos os géis produzidos.

Durante muito tempo, os fármacos quirais de origem sintética foram comercializados predominantemente como racematos. Atualmente, sabe-se que os enantiômeros de um fármaco quiral podem apresentar propriedades farmacocinéticas, farmacodinâmicas e toxicológicas bastante distintas. Assim sendo, técnicas analíticas enantiosseletivas são fundamentais para a pesquisa e para o controle da qualidade desses fármacos. O cetoprofeno e o fenoprofeno são dois fármacos quirais, pertencentes à classe dos agentes antiinflamatórios não-esteróides derivados do ácido propiônico. Seus enantiômeros apresentam significativas diferenças farmacodinâmicas. Por essa razão, pretendeu-se desenvolver, no presente trabalho, métodos de separação enantiomérica para ambos os fármacos. Para tanto, utilizou-se a técnica de cromatografia a líquido de alta eficiência em fase estacionária quiral (coluna Whelk-O 1), nos modos normal e reverso. Abordagens uni- e multivariadas foram utilizadas para desenvolver e otimizar os métodos de separação. Pôde-se observar que a enantiosseletividade exibida pela coluna Whelk-O 1 em fase normal é superior àquela exibida em fase reversa. Empregando a CLAE em fase normal, foi possível desenvolver métodos de separação apropriados para os enantiômeros de ambos os fármacos. Em fase reversa, no entanto, apenas os enantiômeros do fenoprofeno puderam ser separados satisfatoriamente. / For a long time, the synthetic chiral drugs were marketed mainly as racemates. Currently, it is known that enantiomers of chiral drugs may exhibit quite different pharmacokinetic, pharmacodynamic and toxicological properties. Therefore, enantioselective analytical techniques are critical to the research and quality control of these drugs. Ketoprofen and fenoprofen are two chiral drugs, belonging to the class of propionic acid-derived nonsteroidal anti-inflammatory agents. Their enantiomers show significant pharmacodynamic differences. For that reason, we aimed to develop, in this work, separation methods for the enantiomers of both drugs. In order to do so, it was used the high-performance liquid chromatography technique and the Whelk-O 1 column as the chiral stationary phase, under normal- and reversed-phase modes. Uni- and multivariate approaches were used to develop and optimize the separation methods. It was noted that the enantioselectivity exhibited by the Whelk-O 1 column under normal-phase mode is higher than that exhibited under reversed-phase mode. Under normal-phase mode, it was possible to achieve an appropriate separation for the enantiomers of both drugs. Under reversed-phase mode, however, only the enantiomers of fenoprofen could be successfully separated.

O veneno de C. d. terrificus tem sido descrito como sendo de pouca complexidade, tendo 4 frações caracterizadas, convulxina, giroxina. crotoxina e crotamina. O presente trabalho visou o isolamento e caracterização da Delta toxina cuja existência havia sido aventada em trabalhos anteriores. Após a realização de uma varredura de tampões em uma coluna de exclusão molecular Superdex-75 acoplada a um sistema FPLC, na presença de três diferentes tampões, chegou-se a uma condição ideal de fracionamento do veneno crotálico. Em seqüência realizou-se a segunda etapa de purificação em sistema HPLC em uma coluna C4, onde foi possível identificar o pico de interesse. O pico puro passou por análises em MALDI-ToF sendo sua massa estimada em 14.074,92 Da, Quando analisado por eletroforese em gel de poiiacrilamida, a delta toxina apresentou massa molecular de cerca de 14 kDa e uma migração anômala, Por eletroforese 2D, a proteína apresentou caráter ácido, com pl entre 4 e 5 e massa molecular de aproximadamente 42 kDa, revelando \"spots\" muito semelhantes podendo ser isoformas com características de uma proteína glicosiiada. Após digestão dos spots com tripsina, os fragmentos foram confrontados com o banco de dados do \"swissprot\", mostrando alto grau de homologia \"até 43% de cobertura\" com a troca ri na, um ativador de protrombina do veneno de Tropidechis carinatus, esses dados foram confirmados com a análise de aminoácidos. De posse desses resultados, optou-se por testar a capacidade da fração purificada de ativar fator X e II, usando substratos sintéticos. Os resultados apontaram para uma ativação direta do fator X, uma vez que não houve ativação do fator II, atividade que também não foi detectada no veneno total. A mesma se mostrou um potente ativador da agregação de forma direta, uma vez que os ensaios de agregação plaquetária foram realizados com plaquetas lavadas, logo na ausência de fatores séricos. Quando os ensaios de agregação foram realizados na presença de alguns inibidores observou-se que nem a atividade metalo proteinase, nem a serino proteinase, tampouco um domínio lectina estavam envolvidos no processo, uma vez que EDTA, benzamidina e D-galactose não inibiram a atividade da proteína. No presente trabalho isolamos a Delta toxina do veneno de C. d. terrificus. A mesma se comportou como previsto por Vital Brazil em 1980, eluindo na posição por ele aventada, sendo uma proteína ativadora de Fator X que ativa agregação plaquetária mesmo em concentrações muito baixas e de massa molecular de 40 kDa levando nos a crer se tratar de um homotrímero cujos componentes são unidos por ligações fracas. / The Crotalus durissus terrificus venom has been so far described as being of low complexity, with four major components described: convulxin, gyroxin, crotoxin and crotamine. In recent studies, other components of this venom were characterized as, for example, an analgesic factor. In 1980, Vital Brazil predicted the existence of a toxin which could be involved in platelet aggregation, and named it delta toxin. However, this toxin has never been isolated or characterized. The aim of the present work was to purify and characterize this toxin. After FPLC size exclusion chromatography followed by reverse phase HPLC, an homogeneous fraction was obtained, with a molecular weight of 14,074.92 Da. When analyzed by SOS-PAGE, this toxin presented an anomalous behavior, with a molecular weight of 14 kDa, while in 2D gels, spots around 40 kDa and with an isoelectrical point between 4 and 5 were observed suggesting isoforms with glicosilation microheterogeneity. After trypsin digestion, the fragments were submitted to the swissprot databank showing high homology (43% coverage, 15 matching peptides) with trocarin, a prothrombin activator from Tropidechis carinatus. These data were further confirmed by aminoacid analysis. The toxin was tested for its ability to activate factor II and X using synthetic substrates. Our data indicate a direct activation of factor X. The same toxin also behaved as a potent direct platelet aggregation activator on washed platelets. Assays with specific inhibitors indicate that neither metalloproteinase, nor serinoproteinase or t lectin domains are involved in the aggregating activity, since EDTA, benzamidin and D-galactose did not inhibit the toxin. In the present work, we were able to identify, purify and characterize a new toxin from the brazilian rattlesnake. It behaved as predicted by Vital-Brazil and displayed direct factor X activating properties, also inducing platelet aggregation, even at low concentrations. Our data also indicate that it is probably a homotrimer with the subunities linked by hydrophobic and/or electrostatic interactions.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-04-18T19:29:49Z No. of bitstreams: 1 2012 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1177577 bytes, checksum: 5ad9ebc406a8cd78d15ebfdc7acb27ff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T19:29:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1177577 bytes, checksum: 5ad9ebc406a8cd78d15ebfdc7acb27ff (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / CAPES / The grated parmesan cheese is a food commonly consumed in Brazil and, in the last decade, few studies evaluated their quality. The aim of this research was to evaluate the adequacy and the levels of aflatoxin M1 in the grated parmesan cheese marketed in the Metropolitan Region of Rio de Janeiro in relation to the recommendations of current legislation. For this, were analyzed 30 samples representing 10 major brands sold in the region. In the evaluation of quality, were analyzed the levels of moisture, water activity, pH, acidity, sorbic acid and indicator microorganisms of hygienic quality and sanitary. The research of AFM1 was carried out by high performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-DFL) preceded by purification by immunoaffinity chromatography. Only 14 of the 30 samples analyzed (46.7%) were in accordance with the legislation that regulates the product quality. Beyond the lack of uniformity in production, the major irregularities were due to excessive moisture content and also by the abusive addition of the preservative sorbic acid. These results suggest the occurrence of faults on Good Manufacturing Practices by the industries responsible for the brands tested, which represents beyond economic fraud, risks to consumers health, even if indirectly. With relation to research of AFM1, all samples showed satisfactory values with the national legislation. However, the existing limit for aflatoxin in this product is excessively high when compared with those established by others countries. If compared with the regulation prevailing in the European Union, 8 samples (26.7%) could be considered contaminated. / O queijo parmes?o ralado ? um alimento popularmente consumido no Brasil e, na ?ltima d?cada poucos trabalhos objetivaram estudar sua qualidade. Esta pesquisa objetivou avaliar a adequa??o do queijo parmes?o ralado comercializado na Regi?o Metropolitana do Rio de Janeiro em rela??o ao preconizado pela legisla??o atual e tamb?m pesquisar os ?ndices de aflatoxina M1 (AFM1) no produto. Para tal, foram analisadas 30 amostras representativas das 10 principais marcas comercializadas na regi?o. Na pesquisa da qualidade, foram analisados os teores de umidade, atividade de ?gua, pH, acidez titul?vel, conservante ?cido s?rbico e microrganismos indicadores da qualidade higi?nica e sanit?ria. J? a pesquisa de AFM1 foi realizada por cromatografia l?quida de alta efici?ncia com detec??o por fluoresc?ncia (CLAE-DF), precedida de purifica??o por Cromatografia de Imunoafinidade. Apenas 14 amostras das 30 analisadas (46,7%) estavam em acordo com a legisla??o que regulamenta a qualidade do produto. Al?m da falta de uniformidade na produ??o, as principais irregularidades constatadas foram referentes ao excessivo teor de umidade e tamb?m pela adi??o abusiva do conservante ?cido s?rbico. Tais resultados sugerem a ocorr?ncia de falhas nas Boas Pr?ticas de Fabrica??o pelas ind?strias respons?veis pelas marcas analisadas, o que representa al?m de fraude econ?mica, riscos ? sa?de do consumidor, mesmo que de forma indireta. Com rela??o a pesquisa de AFM1, todas as amostras se adequaram a legisla??o nacional. No entanto, o limite existente para a presen?a da toxina neste produto ? excessivamente alto quando comparado com os estabelecidos por outros pa?ses. Se comparado com a regulamenta??o predominante na Uni?o Europ?ia, 8 amostras (26,7%) poderiam ser consideradas contaminadas.

O arsênio é um importante contaminante estudado em toxicologia, pois pode estar presente em alimentos e no meio ambiente. Seus efeitos nocivos para humanos depende da forma química, onde os arsenicais trivalentes apresentam maior toxicidade e as formas inorgânicas são melhor absorvidas pelo organismo. Seus efeitos tóxicos podem envolver os sistemas respiratórios, gastrointestinal, cardiovascular, nervoso e hematopoiético. O arsênio pode ser encontrado em alguns gêneros alimentícios em concentrações menores que 1 mg/Kg. Em frutos do mar, tais como peixes pode conter teores que vão desde 1 a mais de 100 mg/Kg e em outros alimentos à base de peixe podem chegar à algumas miligramas por quilo, predominantemente na forma orgânica. A quantidade de arsênio ingerido pelo homem está diretamente influenciada pelo consumo de alimentos marinhos incluídos na dieta. Este trabalho tem por objetivo comparar duas técnicas: a colorimétrica, com o método do dietilditiocarbamato de prata e por absorção atômica com gerador de hidratos (HGAAS) e com isso avaliar a presença de arsênio em amostras de cação comercializadas na cidade de São Paulo. O método colorimétrico do dietilditiocarbamato de prata, baseia-se na transformação das diversas formas orgânica ou inorgânica de arsênio presentes nos alimentos, em pentóxido de arsênio e sua redução final à arsina, através do meio ácido e da presença de hidrogênio nascente liberado na reação do ácido com zinco metálico. No segundo método as amostras são mineralizadas e quantificadas no Absorção Atômica com gerador de hidretos(HGAAS).O método do dietilditiocarbamato de prata apresentou limite de detecção e quantificação de 0,05 e 0,1 µg/mL, respectivamente. A linearidade obtida com massas de 5 a 20 µg apresentou um coeficiente de determinação de 0,9970. Por este método foram analisadas 18 amostras de cação com níveis entre 0,17 à 3,79 mg/Kg. Com a técnica por HGAAS foi analisado MRC de ostra e foi obtido recuperação em torno de 94%. Foi encontrado limite de detecção de 0,93 µg/L e limite de quantificação de 1,49 µg/L. Foram analisadas 9 amostras por ambas as técnicas e 89% delas continham teores de arsênio total acima de 1 mg/Kg, que é o limite admitido pela legislação brasileira. / Arsenic is an important pollutant studied in toxicology, due to the fact that it can be present in food and in the environment. Its toxicity for humans depends on its chemical structure where trivalent arsenicals show higher toxicity and inorganic forms are better absorbed by the organism. Its toxicant effects can involve the respiratory, gastrointestinal, cardiovascular, nervous and blood systems. The arsenic can be found in some foods in smaller concentrations than 1 mg/Kg. Fish and crustaceous may contain 1 to 100 mg/Kg, in some cases, marine fishes may show amounts of As up to milligrams per killogram, predominantly in the organic form. The amount of arsenic ingested by man is directly influenced by the consumption of marine food included in the diet. This present work compare two techniques: the colorir11etric, with the method of the silver dietylditiocarbamate and the atomic absorption with hydride generator (HGAAS) aiming the evaluation of total arsenic present in samples of fish marketed in the city of São Paulo. The method using silver dietylditiocarbamate, is based on the transformation of all organic or inorganic forms of arsenic present in edible parts of fish, in arsenic pentoxide and its final reduction to arsine. In the second method the samples are mineralized and quantified by atomic absorption with hydride generator. The first method showed limit of detection and quantification of 0,05 and 0,1 µg/mL, respectively. Linearity obtained with masses of 5 to 20 µg showed a coefficient of determination of 0,9970. By this method 18 fish samples ware analyzed showing levels of 0,17 to 3,79 mg/Kg. By HGAAS method oyster certified reference material was analyzed and it was obtained a recovery of 94%, limit of detection of 0,93 µg/L and limit of quantification of 1,49 µg/L. Nine samples were analyzed by both techniques and 89% of them have As content higher than 1 mg/Kg, which is the limit admitted by the Brazilian legislation.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2018-05-10T17:08:58Z No. of bitstreams: 1 LUANA BARBOSA 1.pdf: 2486825 bytes, checksum: 885c15dce91c22870f7b1742cfae2a55 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-10T17:08:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LUANA BARBOSA 1.pdf: 2486825 bytes, checksum: 885c15dce91c22870f7b1742cfae2a55 (MD5) Previous issue date: 2018-03-01 / The environmental impact of a river basin is responsible for most socio-environmental problems of a municipality, since water resources are intrinsic to urbanization. This work aims to perform an environmental diagnosis in the Baixa Funda stream basin in the municipality of Araguaína-TO. The methodology used consisted of a bibliographical survey and observational field analysis with a quantitative and qualitative approach of 10 points, through geoprocessing and collection of water samples planned for the months of March and September of 2017, comprising the rainy season and the dry season. water collection at three points (P1, P7 and P10): upstream end, intermediate point of the channel and downstream end of the stream. Where laboratory physicochemical analysis was performed of the following parameters: water temperature, pH, Turbidity, total phosphorus, total nitrogen, total residue, dissolved oxygen (DO); Biochemical Oxygen Demand (BOD), Chemical Oxygen Demand (COD), total coliforms and thermotolerant coliforms, which were analyzed in the rainy season and in the drought period of the stream. The results showed technogenic deposits, severe environmental impact, with irregular disposal of solid wastes often in fragments, such as plastics, various metals, household waste, sewage, among others. It was concluded that the anthropic action showed to be the main active agent in the removal of the vegetation cover, in soil and subsoil contamination, being active in the acceleration of processes such as erosion, sedimentation and degradation. It is essential to assess the environmental consequences, their impacts and propose short- , medium- and long-term solutions. The data presented demonstrate that the studied area is in the process of environmental degradation, according to physicochemical evaluation, which shows the contamination of the water in the evaluated points. / O impacto ambiental ocorrido em uma bacia hidrográfica é responsável pela maioria dos problemas socioambientais de um município, uma vez que os recursos hídricos estão intrínsecos à urbanização. Este trabalho tem como objetivo realizar diagnóstico ambiental na bacia hidrográfica do córrego Baixa Funda no município de Araguaína- TO. A metodologia utilizada constitui em levantamento bibliográfico e análise de campo observacional com abordagem quantitativa e qualitativa de 10 pontos, através de geoprocessamento e coleta de amostras de água planejado para os meses de março e setembro de 2017, compreendendo o período chuvoso e de estiagem realizando a coleta de água em três pontos (P1, P7 e P10): extremidade montante, ponto intermediário do canal e extremidade jusante do córrego. Onde foi feito análise físicoquímica laboratorial dos seguintes parâmetros: temperatura da água, pH, Turbidez, Fósforo total, Nitrogênio total, Resíduo total, Oxigênio Dissolvido (OD); Demanda Bioquímica de Oxigênio (DBO), Demanda Química de Oxigênio (DQO), Coliformes Totais e Coliformes Termotolerantes, estes em análise no período chuvoso e no período de estiagem do córrego. Os resultados apresentados constataram depósitos tecnogênicos, impacto ambientais graves, com disposição irregular de resíduos sólidos frequentemente em fragmentos, como plásticos, metais diversos, lixo doméstico, esgoto, dentre outros. Conclui-se que a ação antrópica se mostrou como sendo o principal vetor atuante na remoção da cobertura vegetal, na contaminação do solo e subsolo, sendo atuante na aceleração de processos como: erosões, assoreamentos e degradação. É fundamental avaliar as consequências ambientais, seus impactos e propor soluções a curto, médio e longo prazo. Os dados apresentados demonstram que a área estudada se encontra em processo de degradação ambiental, conforme avaliação físico-química, que mostra a contaminação da água nos pontos avaliados.