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Douleur péri-opératoire chez le cheval : problématique de son évaluation et de son contrôle à l'aide des anesthésies locorégionales

Bussières, Geneviève January 2006 (has links)
Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.
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Contribution à l'étude de l'hémiplégie laryngée chez le cheval : prévalence de l'affection et modalités thérapeutiques / Laryngeal hemiplegia in horses : prevalence of the disease and aspects of surgical treatment

Tessier, Caroline 11 September 2018 (has links)
Résumé : L’hémiplégie laryngée (HP) est une affection courante et une cause majeure de contre-performances dans l’espèce équine. Plusieurs études ont montré que la prévalence était variable selon les races et les disciplines étudiées. De plus, un développement important des techniques chirurgicales peu invasives ont émergé ces dernières années. Les objectifs de ce travail étaient de 1) déterminer la prévalence de l’HL chez une population de Trotteurs Français (TF) à l’entrainement et son impact sur les performances, 2) évaluer la pertinence des protocoles actuels de sédanalgésie utilisés lors d’interventions chirurgicales sur cheval debout.Deux études ont été réalisées pour répondre aux objectifs. La première étude portait sur 112 TF en situation d’entrainement. La prévalence a été calculée sur l’ensemble de l’effectif puis une étude longitudinale sur l’évolution du grade HL a été réalisée sur 18 chevaux. La prévalence de l’HL chez ces chevaux était relativement importante mais aucune corrélation avec les performances, ni le sexe ou l’âge des animaux n’a pu être montrée. Une large proportion de chevaux voit son grade d’abduction se dégrader avec le temps. La deuxième étude a comparé 4 protocoles de sédanalgésie. Huit juments saines ont été utilisées et les effets des protocoles ont été notés. Les protocoles testés étaient adéquats pour les interventions envisagées mais des différences notoires ont été démontrées. L’utilisation du butorphanol entrainait des mouvements involontaires et brusques de la tête, tandis que la lidocaïne pouvait engendrer un collapsus pharyngé. Des recommandations pour l’utilisation de ces protocoles ont été émises. / Abstract : Laryngeal hemiplegia (LH) is a common disease in sport- and racehorses, but also a frequent cause of poor performance. Several studies have shown that the prevalence of the disease is rather variable among the different breeds and disciplines. Furthermore, minimally invasive surgical therapies to correct this condition have recently gained popularity. The objectives of our work were to 1) determine the prevalence of LH in a population of French Trotters in training and 2) assess the efficacy of sedation and analgesia protocols in minimally invasive upper airway surgery. Two experiments were conducted. The first experiment investigated the prevalence of LH in 112 French Trotters horses in training, showing that a large number of horses were affected but it did not severely impact their performance. A longitudinal study was performed in 18 of these horses showing that the LH grade decreased with time in a large proportion of horses. The second study compared 4 sedation/analgesia protocols used in upper airway standing surgery. All protocols tested were adequate to provide sedation and analgesia of the pharynx and larynx but there were some important differences between protocols. Butorphanol induced frequent head jerking as lidocaine caused pharyngeal collapse, which can impair proper surgical accuracy. Recommandations were made for the use of these protocols in upper airway surgery.
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Les cultures équestres du monde hellénistique : une histoire culturelle de la guerre à cheval (ca. 350 - ca. 50 a.C.) / The Equestrian Cultures of the Hellenistic World : une histoire culturelle de la guerre à cheval (ca. 350 - ca. 50 B.C.)

Clément, Jérémy 24 November 2018 (has links)
Les campagnes militaires de Philippe II et d’Alexandre le Grand ont bouleversé les équilibres politiques et militaires du monde grec classique. En développant une pensée militaire fondée sur la coordination des armes et non sur le primat de l’infanterie, ils ont donné à la cavalerie une importance tactique qu’elle n’avait pas dans les armées civiques de la période classique. L’épopée d’Alexandre représente, à cet égard, une aventure collective de dizaines de milliers d’hommes et de chevaux. Elle initie une conception de la guerre dans laquelle les chevaux sont des acteurs incontournables, infléchissant la stratégie, la tactique et la logistique de campagne. Dès lors, la production, la formation et la remonte des chevaux de guerre constituent des enjeux primordiaux de la construction des royaumes hellénistiques, car les dynasties des successeurs d’Alexandre se sont constamment préoccupées d’entretenir de cavaleries puissantes.Dans cette aventure cavalière, les cités emboitent le pas aux royaumes hellénistiques avec les ressources dont elles disposent, réformant leurs cavaleries ou en constituant de nouvelles, souvent dans une perspective fédérale leur permettant de nourrir de plus grandes ambitions militaires. Cela implique de trouver des chevaux, mais aussi des hommes capables de les monter et de les entretenir. Le consensus social établi entre les autorités civiques et les élites cavalières – une « classe d’écuyers » loin d’être homogène – diffère fortement d’une cité à l’autre en fonction de la culture équestre locale, c’est-à-dire des usages, pratiques et représentations des hommes de cheval dans le cadre – politique, économique et social – de la communauté civique à laquelle ils appartiennent. Les cultures équestres régionales ont donc en partie déterminé la capacité des cités à développer leurs cavaleries, mais, en retour, les mutations politiques et militaires de l’époque hellénistique ont considérablement influencé la culture équestre des élites en en renouvelant les pratiques – du prestige de l’hippotrophia aux réalités de l’équitation militaire – et en l’associant plus fortement qu’avant aux destinées politiques de la cité, à ses valeurs et à son système de représentation. / The military campaigns of Philip II and Alexander the Great upset the political and military balance of the classical Greek world. By developing a military way of thinking based on the coordination of arms and not on the primacy of the infantry, they gave the cavalry unprecedented tactical importance compared to other civil armies in the classical period. Alexander the Great's epic is, in this respect, a collective adventure of tens of thousands of men and horses. It introduced a conception of war in which horses were key players, bending strategy, tactics and campaign logistics. From then on, the production, training and upbringing of war horses became primordial issues in the construction of the Hellenistic kingdoms, because Alexander's successors' dynasties were constantly concerned with maintaining a powerful cavalry.In this equestrian adventure, the cities followed in the Hellenistic kingdoms' footsteps with the resources available to them: they reformed the cavalry or created new units, often in a federal perspective allowing them to feed greater military ambitions. This involved finding horses, but also men to mount and care for them. The social consensus established between the civic authorities and the cavalier elites - a far from homogeneous "squire class" - which differed greatly from one city to another depending on the local equestrian culture, i.e. the uses, practices and representations of horsemen in the political, economic and social context of the civic community to which they belonged. Regional equestrian cultures thus partly determined the capacity of cities to develop their cavalry, but, in return, the political and military changes of the Hellenistic period considerably influenced the elite's equestrian culture by renewing its practices - from the prestige of hippotrophia to the realities of military riding - and associating it more strongly than before with the political destinies of the city, its values and its system of representation.
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Imagerie par résonance magnétique de l'ostéoarthrose métacarpo-phalangienne équine : évaluation des paramètres non-cartilagineux

Olive, Julien January 2008 (has links)
Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal.
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Modélisation des programmes de sélection dans l'élevage du cheval de sport

Dubois, Clotilde 20 July 2008 (has links) (PDF)
La Selle-Français (SF) a été sélectionné avec comme objectif principal la réussite en concours de saut d'obstacle (CSO) et cette sélection a largement utilisé les croisements avec d'autres races. Comme pour les autres chevaux de selle à travers le monde, les éleveurs français veulent augmenter le nombre de caractères dans leur objectif de sélection. En plus du CSO, ils souhaitent améliorer leur population sur les allures, la conformation, le comportement, la fertilité et la santé. Pour ajouter tous ces caractères, en conservant un schéma de sélection efficace, différentes études ont été menées et sont exposées dans cette thèse. -Tout d'abord, une large présentation du SF avec ses spécificités est effectuée. -Une étude de l'efficacité de la sélection entre 1974 et 2002 est conduite afin d'identifier les qualités et les inconvénients du plan de sélection actuel du SF. Sur cette période, on dénombre entre 6000 à 10000 naissances par an. Depuis 1995, le gain génétique annuel pour le CSO est élevé (
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Etude de l'effet de l'origine botanique de l'amidon sur sa digestibilité antécoecale chez le cheval : mise en place d'une méthode de référence in sacco

Jevardat de Fombelle-Guermonprez, Alice 11 December 2003 (has links) (PDF)
L'amidon contenu dans les céréales est une source glucidique fréquemment utilisée dans l'alimentation des chevaux athlètes pour couvrir leurs besoins en énergie. Une partie de ce travail est consacrée à l'adaptation de la technique des sachets mobiles pour mesurer la digestibilité antécæcale de l'amidon. Cette méthode in sacco a permis de mettre en évidence que l'origine botanique est un facteur contrôlant l'intensité de la digestion antécæcale de l'amidon. Selon la source d'amidon, des digestibilités antécæcales comprises entre 36 % et 99 % ont été mesurées. Ces résultats permettent de proposer des données de référence, pour différentes matières premières, afin de prendre en compte le paramètre " amidon digestible en antécæcal ", dans le rationnement des chevaux. Un autre volet de ce travail est consacré à l'étude des mécanismes mis en ?uvre pour digérer l'amidon. L'étude des facteurs biotiques et abiotiques associés à la digestion des polysaccharides dans les différents compartiments du tractus digestif a mis en évidence la présence d'un écosystème microbien en antécæcal. Parce que le mode de digestion de l'amidon, chimique ou biologique, conditionne le rendement énergétique de ce glucide, des travaux complémentaires sur le rôle de l'écosystème gastrique et la partition de la digestion en antécæcal sont nécessaires pour une valorisation optimale de l'énergie fournie par l'amidon.
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Développement de méthodes physico-chimiques pour le contrôle de la médication par l'Harpagophytum et l'Eleutherococcus, principes actifs utilisés en phytothérapie équine.

Colas, Cyril 19 December 2006 (has links) (PDF)
Ce mémoire, consacré au développement de méthodes physico-chimiques pour le contrôle de la médication par l'Harpagophytum et l'Eleutherococcus, principes actifs utilisés en phytothérapie équine, est constitué de cinq chapitres. Le premier chapitre situe les enjeux des recherches entreprises ; il détaille le principe d'un contrôle de la méditation et le déroulement de celui-ci. Les propriétés, tant botaniques que pharmacologiques, des plantes étudiées, l'Harpagophytum procumbens et l'Eleutherococcus senticosus y sont également présentées. Dans le second chapitre, les différentes techniques expérimentales et les méthodes théoriques employées au cours de cette thèse sont détaillées. Cela concerne la préparation d'échantillon avec les différentes métho! des d'extraction, l'analyse par couplage chromatographie – spectrométrie de masse, et la modélisation moléculaire. Le troisième chapitre, dédié à l'étude de l'Harpagophytum, est présenté sur publications. L'extraction des principes actifs à partir des fluides biologiques équins, leur analyse par LC/MS, une approche théorique de la cationisation de l'harpagide par le sodium ainsi qu'une approche métabolique de l'harpagoside y sont développées. Une application directe de ces résultats à l'étude des éleutherocoques est présentée dans le chapitre 4, complétée par la recherche des principes actifs dans les compléments alimentaires. Le cinquième et dernier chapitre est un bilan des applications, des résultats et des perspectives qui découlent du travail effectué au cours de ces trois anné! es.
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IN VITRO NUCLEAR AND CYTOPLASMIC MATURATION OF THE EQUINE OOCYTE: INFLUENCE OF CYSTEAMINE

Deleuze, Stefan 08 September 2009 (has links)
Research on in vitro embryo production (IVP) in the equine is impeded by the limited availability of mature oocytes as the mare is mono ovulating and superovulation is still difficult (Dippert and Squires, 1994; Bezard et al., 1995; Alvarenga et al., 2001b). Despite recent improvement in IVM of equine oocytes, success rates of IVM in that species remain low in all culture media tested compared to other species (Goudet et al., 2000b). However, most studies have focused on the percentage of oocytes reaching the metaphase II stage (nuclear maturation) but few concentrated on the final oocyte competence as measured by its ability to develop into a blastocyst and further establish a pregnancy. Blastocyst production rate is influenced not only by culture environment but also by oocyte maturation conditions. Under in vitro culture conditions, oxidative modifications of cell components via increased ROS represent a major culture induced stress (Johnson and Nasr-Esfahani, 1994). Anti-oxidant systems can attenuate the deleterious effects of oxidative stress by scavenging ROS (Del Corso et al., 1994). Glutathione, a tripeptide thiol, is the major non-protein sulfydryl compound in mammalian cells that plays an important role in protecting the cell from oxidative damage (Meister and Tate, 1976; Meister and Anderson, 1983). It has been suggested that GSH content in oocytes may serve as a reservoir protecting the zygote and the early embryos from oxidative damage before genomic activation and de novo GSH synthesis occur (Furnus et al., 1998; de Matos and Furnus, 2000). The addition of GSH synthesis precursors, such as cysteamine, a thiol compound, to IVM media has been shown to improve IVP in various species (Takahashi et al., 1993; de Matos et al., 1995; Grupen et al., 1995; de Matos et al., 2002a; de Matos et al., 2002b; de Matos et al., 2003; Gasparrini et al., 2003; Oyamada and Fukui, 2004; Balasubramanian and Rho, 2007; Anand et al., 2008; Singhal et al., 2008; Zhou et al., 2008). Very little information on the use of thiol compounds in the equine is available. Conventional in vitro fertilization (IVF) has not been successful in the mare, and a repeatable IVF technique has not yet been developed (Alm et al., 2001). To overcome the limitation of conventional IVF procedures, other methods to produce embryos from oocytes, either in vivo or in vitro, have been investigated. Among these, intra cytoplasmic sperm injection (ICSI) has permitted efficient equine in vitro blastocyst production (Galli et al., 2002; Lazzari et al., 2002; Choi et al., 2006a; Choi et al., 2006c). However, ICSI requires specific equipment and skills. Transfer of an immature oocyte into the preovulatory follicle of an inseminated recipient mare (Intra-Follicular Oocyte Transfer, IFOT) has produced embryos but the success rate was low (Hinrichs and Digiorgio, 1991). Similarly, oocyte transfer (OT) into the oviduct of an inseminated recipient mare was investigated (McKinnon et al., 1988; Carnevale, 1996; Hinrichs et al., 1997; Carnevale et al., 2001; Carnevale et al., 2003; Carnevale, 2004), and commercial programs using OT for mares with reproductive abnormalities are now available (Carnevale et al., 2001). Unfortunately, IFOT is poorly documented in the literature and reports of OT have been published by various laboratories and under various conditions, making comparisons between results and choosing among these as substitutive techniques to ICSI or embryo transfer difficult. The first aim of the present work was to investigate if there is an influence of supplementation with 100 µM of cysteamine on conventional IVF success rate. Cumulus oocytes complexes (COCs) retrieved by transvaginal ultrasound guided aspiration were matured in vitro with or without cysteamine supplementation and were then submitted to conventional IVF using either calcium ionophore or heparin as capacitation treatment for spermatozoa. A total of 131 oocytes were evaluated for evidence of sperm penetration. Both techniques (ionophore or heparin) yielded 6% of IVF and results were similar both for the cysteamine and the control group. This success rate of IVF is low compared to some published data (Palmer et al., 1991; Dell'Aquila et al., 1996; McPartlin et al., 2009) but similar to what others reported in the literature (Choi et al., 1994; Dell'Aquila et al., 1997a). Although, it seems likely that cysteamine did not significantly improve IVF rates under our conditions, our general success rates for IVF procedures may be too low for us to conclude definitely about the effect of cysteamine. As ICSI was not available to us, the second aim of this work was to determine what in vivo technique could best bypass the lack of an efficient conventional IVF procedure. We compared embryo production following transfer of in vivo recovered oocytes (1) into a recipients oviduct or (2) into her preovulatory follicle either immediately after ovum pick up or (3) after in vitro maturation. Recipients were inseminated with fresh semen of a stallion with a known normal fertility. Ten days after transfer, rates of embryos collected in excess to the number of ovulations were calculated and compared for each group. Embryo collection rates were 32.5% (13/40), 5.5% (3/55) and 12.8% (6/47) for OT, post-IVM and immediate IFOT respectively. OT significantly yielded more embryos than immediate and post-IVM IFOT did. These results show that, when ICSI is not an option, intra-oviductal oocyte transfer is to be preferred to IFOT, as an in vivo alternative, to bypass the inadequacy of conventional in vitro fertilization and to assess oocyte developmental competence. After it was established that in comparison to IFOT, OT is the most reliable in vivo alternative to in vitro fertilization where ICSI technology is not available, this technique was used to assess the effect of cysteamine supplementation on nuclear maturation and oocyte competence. The third aim of this work was to investigate the influence of supplementation with 100 µM of cysteamine on in vitro nuclear and cytoplasmic maturation by specific DNA staining and the ability of oocytes to undergo in vivo fertilization after OT. Oocytes were collected by transvaginal ultrasound guided aspiration and matured in vitro with (cysteamine group) or without (control group) cysteamine. The nuclear stage after DNA Hoechst staining and the embryo yield following OT were used as a criterion for assessing nuclear and cytoplasmic maturation, respectively. Overall maturation rate was 52%, which is rates reported in the literature ranging from 40 to 70% in the equine (Goudet et al., 1997a; Bogh et al., 2002; Hinrichs et al., 2005; Galli et al., 2007). Nuclear maturation was not statistically different (p>0.05) between oocytes cultured with or without cysteamine (55% and 47% respectively). From 57 oocytes transferred to the oviduct in each group, the number of embryos collected was 10 (17%) in the control group and 5 in the cysteamine group (9%). Those two percentages were not statistically different (p>0.05). Contrary to the data described in other domestic species, there was no effect of cysteamine on in vitro nuclear maturation, or in vivo embryonic development under our conditions. Under our conditions, the addition of 100 µM of cysteamine to a classic culture medium does not improve equine oocyte maturation or embryonic development after OT. The same dose failed to increase GSH content in the equine (Luciano et al., 2006). However, the effect of cysteamine supplementation is highly species and concentration dependant. The inadequacy of the chosen concentration may explain that equine embryo production has not been increased by the cysteamine under our conditions as opposed to what has been observed in many other species. Alternatively, we can hypothesize that some substances present in the IVM medium can interfere with GSH synthesis. This has been suggested for FSH and estradiol (Bing et al., 2001) and, although our maturation medium is not supplemented with gonadotropins or estradiol, factors contained in fetal calf serum or EGF might also have an effect on GSH synthesis. Considering its beneficial effects in many other species, supplementation with cysteamine to different IVM media should be further investigated in the equine. Ideally combining different concentrations and ICSI or OT in order to determine an optimal concentration and its effects on oocyte developmental competence.
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Identification dune nouvelle molécule dintérêt chez le cheval atteint dobstruction récurrente des voies respiratoires: La Pentraxine 3/ Identification of a new molecule of interest in the recurrent airway obstruction-affected horse: The Pentraxin 3

Ramery, Eve 05 March 2010 (has links)
LORVR ou obstruction récurrente des voies respiratoires (ORVR) est la cause la plus fréquente de maladie pulmonaire chronique chez le cheval adulte. La maladie se caractérise par une hyperréactivité bronchique, une production excessive de mucus et une inflammation neutrophilique pulmonaire qui ont pour effet de réduire la compliance dynamique du poumon et daugmenter la résistance des voies respiratoires au débit aérien. Alors que la maladie est une entité documentée dans la littérature depuis plus de 200 ans, les mécanismes moléculaires qui la sous-tendent restent incomplètement élucidés à ce jour. De précédentes études ont montré l'implication de variations d'expression génique, pour la plupart grâce à l'utilisation combinée de la transcription inverse et de la réaction en chaîne par polymérase (RT-PCR). Cette technique bien connue ne permet l'étude que d'un nombre limité de gènes en simultané. Les microdamiers apparaissent comme la technique de choix pour l'étude de l'expression génique à large échelle. A lheure où cette étude a débuté, il nexistait pas de microdamier dexpression spécifiquement dédié au cheval sur le marché. Un microdamier hétérologue humain (Human Genome U133 Plus 2.0 GeneChip, Affymetrix®) a donc été utilisé pour tenter didentifier de nouveaux gènes dintérêt pour comprendre la pathogénie de lORVR chez le cheval. L'utilisation du microdamier a permis de détecter 46 gènes dont lexpression variait d'un facteur supérieur à 4 entre chevaux sains et atteints. Parmi les gènes mis en avant par le microdamier, trois gènes (CYBB, MARCKS et PTX3) présentaient un intérêt particulier au regard de la littérature et leur variation dexpression a été confirmée par RT-PCR quantitative (RT-qPCR). La pentraxine 3 (PTX3) notamment appartient à la composante humorale de la réponse immune innée. Elle agit comme un ancêtre fonctionnel des anticorps. En effet, elle reconnaît les microbes, active le complément et facilite la reconnaissance de certains pathogènes spécifiques, dont Aspergillus fumigatus (A. fumigatus), par les phagocytes. La suite du travail sest donc focalisée sur PTX3. LADN complémentaire (ADNc) codant pour PTX3 et lADN codant pour le second exon de PTX3 ont été clonés et séquencés. LADN codant pour le second exon de PTX3 équin présentait une délétion de 120 paires de bases par rapport à la séquence humaine. Par ailleurs, un épissage alternatif du second exon de PTX3 a été mis en évidence, résultant en deux formes de la protéine, "épissée" (32 kilodaltons) et "complète" (42 kilodaltons). Afin d'étudier les effets de lexposition à des poussières de foin sur l'expression de PTX3 dans les voies respiratoires, six chevaux sains et six chevaux atteints dORVR ont été soumis pendant dix jours à un challenge environnemental aux poussières de foin. Les chevaux ont été étudiés via des tests cliniques, fonctionnels et biochimiques. Les lavages broncho-alvéolaires (LBA) ont été récoltés lors de l'initiation du protocole et après les dix jours d'exposition aux poussières de foin. Par ailleurs, des sections bronchiques ont été réalisées chez deux chevaux atteints d'ORVR en crise et euthanasiés pour raisons éthiques et deux chevaux indemnes d'affections respiratoires provenant de l'abattoir. PTX3 était détectée dans les macrophages du LBA après exposition aux poussières de foin et dans les cellules épithéliales bronchiques. PTX3 était surexprimée dans les macrophages du LBA chez tous les chevaux après dix jours d'exposition aux poussières de foin. Cependant, le niveau de PTX3 était plus élevé dans le surnageant des cellules provenant des chevaux atteints d'ORVR que dans celui provenant des cellules des chevaux sains. Par ailleurs, il semble que PTX3 soit surexprimée dans les cellules épithéliales bronchiques chez le cheval atteint d'ORVR. Cette piste est intéressante sur le plan thérapeutique puisque l'activation de l'expression de PTX3 dans les cellules épithéliales bronchiques est sous le contrôle du facteur c-Jun N-terminal kinase (JNK), un facteur différent de celui qui contrôle l'expression de PTX3 dans les leucocytes, à savoir le facteur nucléaire kappa B (NF-κB). L'effet de différents stimuli sur la production et lexcrétion de PTX3 par les cellules du LBA a été étudié ex-vivo après mise en culture et stimulation à la poussière de foin, au lipopolysaccharide (LPS), à A. fumigatus et avec une solution saline tamponnée pour le phosphate (PBS), utilisée comme contrôle. La présence de PTX3 a été mesurée par Western Blot six heures et vingt-quatre heures après les différentes stimulations dans les cellules et dans les surnageants respectivement. PTX3 était détectée dans les cellules et dans les surnageants mais aucune différence significative d'expression na pu être mise en évidence que ce soit entre les différents stimuli, entre les différents temps ou avec le contrôle. Ces résultats suggèrent que la poussière de foin est un inducteur indirect de PTX3./ Recurrent airway obstruction (RAO) is the first respiratory disease in adult horses. Environmental causes of RAO are well described, but the molecular mechanisms of the disease remain unclear. Previous studies have highlighted the implications of variations in gene expression in the disease, most using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). This well-known technique limits the number of genes that can be studied in a single assay. The microarray appears to be the platform of choice for massively parallel gene expression profiling and provides a good tool for exploratory research. However, at the time of the experiment, there was no equine-specific microarray available on the market. Because they are commercially available, highly specific and well annotated, human and mouse large-scale microarrays are an exploratory alternative to equine-specific microarrays. The first part of the present study was performed to highlight new targets not previously related to the disease and able to improve our understanding of the molecular mechanisms of the disease. A human microarray (Human Genome U133 Plus 2.0 GeneChip, Affymetrix®) was used to study gene expression in nucleated cells originating from peripheral blood and bronchoalveolar lavage fluid (BALF) in RAO-affected horses. A total of 46 candidates were identified with differentially regulated genes between RAO-affected horses and controls. Based on their documented function, five of these genes were selected for the real-time quantitative RT-PCR (RT-qPCR) validation procedure: CYBB, MARCKS and PTX3. The RT-qPCR results confirmed those obtained with the microarray, pointing out these genes as new directions for future experiments. In particular, the long pentraxin 3 (PTX3) plays an important role in the host defence and over-expression of PTX3 may contribute to airways injury. Therefore, it was hypothesised that PTX3 may have relevance in the understanding of the pathogenesis of RAO. In the second part of the study, PTX3 and its implication in RAO in horses were characterized in more details. Six healthy horses and six RAO-affected horses were submitted to a dusty environment challenge. PTX3 DNA and cDNA were cloned and sequenced. A 120bp deletion was found in the DNA of the second exon of equine PTX3 in comparison to human PTX3. In addition, an alternative splicing of the second exon of PTX3 occurred, resulting in two forms of the protein: "spliced" (32 kilodaltons) and "full length" (42 kilodaltons). The pentraxin domain was very well conserved in the two forms with 94% of amino-acids conserved between equines and humans. The effects of dust exposure and subsequent RAO crisis on PTX3 expression in the BALF and the bronchial epithelial cells were studied. Dust exposure induced PTX3 in vivo in BALF macrophages both in healthy horses and in RAO-affected horses. However, PTX3 was over-expressed in the BALF supernatant and, interestingly, in the bronchial epithelial cells from RAO-affected horses in crisis. Considering epithelial cells as one of the major cell types in the airways, PTX3 produced at this level may play an important role in the disease process. The effects of different components (ie lipopolysaccharide and A. fumigatus) and different concentrations of hay dust suspension upon PTX3 expression and excretion in BALF cells have been tested ex-vivo and compared to control (ie. Phosphate-Buffered Saline). PTX3 was detected in cells and cell culture supernatant under all conditions but there was no difference between conditions including the control. These results suggest that dust is an indirect inducer of PTX3.
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Etude des infections sub-cliniques par herpèsvirus chez le cheval athlète dans l'étiologie des maladies inflammatoires des voies respiratoires/Study of subclinical herpesvirus infections in the athletic horse in the aetiology of airway inflammatory diseases

Fortier, Guillaume 04 December 2009 (has links)
Au moins 4 herpèsvirus majeurs peuvent infecter le cheval au niveau de ses voies respiratoires ; 2 alpha-herpèsvirus (les herpèsvirus équins 1 et 4) et 2 gamma-herpèsvirus (les herpèsvirus équins 2 et 5). Les deux gamma-herpèsvirus ont été identifiés partout dans le monde depuis très longtemps mais leur pouvoir pathogène demeure moins bien connu. Parallèlement, de nombreux travaux portant sur les maladies respiratoires sub-cliniques du cheval athlète ont pu mettre en évidence lintérêt de recherches approfondies sur le rôle des virus dans le déclenchement ou lentretien de ces pathologies souvent inflammatoires. . La prévalence de ces 4 virus a étéévaluée lors dune première étude portant sur plus de 700 liquides de lavages respiratoires à laide doutils de biologie moléculaire. Lherpèsvirus équin 2 sest avéré comme le plus présent dans un groupe de chevaux contre performants dans les liquides trachéaux. Une infection expérimentale conduite sur 6 chevaux a permis de reproduire la maladie, de détecter le virus dans divers compartiments biologiques dont la trachée pendant plus de 14 jours post infection. La présence du virus était contemporaine de ciliocytophtorie des cellules épithéliales et dune neutrophilie dans le liquide. Lherpèsvirus équin 2 peut donc induire une inflammation de la trachée et des anomalies morphologiques des cellules épithéliales ce qui en fait un co-facteur potentiel du syndrome dinflammation trachéale, préoccupant pour léconomie du cheval athlète / Equine gamma-herpesvirus 2 and 5 have been identified worldwide since many years. Their real pathogenic role has still to be determined. On the other hand, many important studies have been performed in order to better understand subclinical diseases of the athletic horse. Several publications pointed out the potential incidence of viruses in lower airway inflammation. Within the first step of this work, over 700 respiratory fluids were tested in order to detect and to evaluate the presence of equid herpesviruses in these biological samples. Using molecular tools, Equid herpesvirus 2 was found to significantly be the most important among the four herpesviruses detected in tracheal washes of a group of poorly-performing horses. An experimental infection with equid herpesvirus 2 was then conducted on 6 horses and succeeded in reproducing clinical and cytological signs of disease and virus shedding in most biological samples including tracheal washes. The virus shedding was concomitant with ciliocytophthoria of the exfoliated epithelial cells and liquid neutrophilia. Equid herpesvirus 2 can induce a tracheal inflammation and ciliocytophthoria. This virus could play a role in the new syndrome of tracheal inflammation, and could be an important feature for equine industry

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