This dissertation research aims to present a new proposal for videogames analysis. This new look is articulated based on understanding video games as a group of discursive practices. In this way we propose a methodology that allows the discourse to emerge produce video games. For these analyzes the video game "Pokemon Mystery blue team" in order to present the concrete practices that articulate the naturalization of neoliberal social reality. Research report presents an exhaustive review on the development video game the cultural and academic area through different theoretical approaches. In the same way, we analyze different dimensions related to the study of video games such as the economy, education or psychology. It discusses the most important currents within the Games Studies, a discipline that was created with the purpose of studying the videogames as a field of study itself. The second part of the research an empirical analysis a specific case from the previously proposed methodology. From the proposed Foucaultian discourse analysis methodology is proposed which pays special attention to the historical, material and political discourse. A qualitative proposal defending a different way of approaching the cultural object from its relation to other discursive practices. Finally, it addresses the question posed by the five great discourses that emerge from the analysis. These speeches are the recreational-technological, pedagogical-legal, psychological-narrative, management-economist and competition-winning. At the same time, it raises the three elements that are modified mainly through the gaming experience, discourse, power and subjectivity. Key elements to understand the subtle strategies of naturalization of neoliberal social reality.

Acid-base disturbances have been reported in the veterinary literature concerning the field of the small animal intensive care. Such disorders have diagnostic, therapeutic, and prognostic implications in terms of morbidity and mortality in such population. Besides albumin is a weak acid that can affect pH and plays a key role in the metabolic component of the acid-base balance often is not taken into account during the acid-base assessment. The main goal of the first study was to compare the traditional and the quantitative approaches for the assessment of acid-base imbalances in hypoalbuminemic dogs. This study was designed as a prospective observational clinical study and included the evaluation of 105 critically ill patients and 135 healthy patients as controls. Jugular venous-blood samples were collected from each patient on admission to determine: TP, Alb , BUN, Glu , hematocrit, , Na+ , Cl- , K +, Pi , pH , pCO2 , HCO3 - , AG, AGalb and /or AGalb-phos, SBE, SID, Atot , and SIG. Patients were divided into two groups according to the severity of hypoalbuminemia: mild hypoalbuminemia (Alb = 2.1 to 2.5 g /dL) and severe hypoalbuminemia (Alb ≤ 2.0 g/dL). According to the HH approach most frequent imbalances were simple disorders (51.4 %) mainly metabolic acidosis (84.7%), in most cases associated to a high AG acidosis. However, when using the quantitative method 58.1% were complex disorders, and SIG acidosis (74.3 %) and Atot alkalosis (33.3 %) were the most frequent acid -base imbalances. The second study allowed us to conclude that the agreement between the traditional and quantitative methods of interpretation of acid-base balance was poor, and many imbalances were detected using the quantitative approach but would remain undetected using the traditional approach to acid-base status. Moreover, these alterations were different according to the severity of hypoalbuminemia and characteristics of the disease in each hypoalbuminemic patient, especially in SIRS/septic patients. In humans, SIRS is relatively frequent condition and is associated with high mortality rates. However, data on the incidence of SIRS and the usefulness of biomarkers in veterinary medicine is scarce. The main goal of the second study was to determine the diagnostic and prognostic value of plasma iron vs the inflammatory markers albumin, CRP and fibrinogen on admission and over the ICU stay of dogs with SIRS. This study was designed as prospective observational study and included 116 client-owned dogs: 54 dogs with SIRS/sepsis, 42 with local inflammation and 20 clinically healthy dogs as a control group. Blood samples were taken on admission in all study groups, and then on alternate days until discharge or death in both inflammation groups. On admission, dogs with SIRS had significantly lower plasma iron (65 ± 5.8 µg/dL, p=0.001) concentrations than dogs with local inflammation (89.5 ± 6.2 µg/dL, p=0.001). Plasma iron, albumin, and CRP were able to separate dogs in the SIRS/sepsis group from those presenting local inflammation with AUCs for the ROCs curves of 0.679, 0.834, and 0.704 respectively. The admission values for these variables did not separate survivors and non survivors within the SIRS/sepsis group. However, the increase in iron and the decrease in CRP, from admission to discharge, was higher in survivors than in non-survivors within the SIRS/septic group (22.8 vs. 2.51 μg/dL respectively, p = 0.021 for iron; -67.1 vs. -4.1 mg/L respectively, p = 0.002 for CRP), resulting in discharge iron and CRP concentrations for survivors similar to those in the local inflammation group. The second study allowed us to conclude that hypoferremia is a sensitive marker of systemic inflammation in dogs. In this study, the increase in iron concentrations during the hospitalization period of SIRS/septic dogs was associated to a better prognosis, suggesting that plasma iron in combination with other biomarkers of inflammation such as CRP and albumin might be used to monitor the inflammatory process.

La asociación entre un parásito y un hospedador ofrece una excelente oportunidad para el estudio de tazas de especiación y evolución. La base para dichos estudios sólo puede ser enfocada mediante el análisis de filogenético de la asociación parásito-hospedador. Los elementos transponibles son secuencias cortas de ADN que se comportan como parásitos intragenómicos. Ellos son transmitidos verticalmente a través de las generaciones, aunque la transferencia horizontal ha sido propuesta como un paso esencial en su dinámica evolutiva a largo plazo. Galileo es un miembro de la Superfamilia P de transposones de ADN. Galileo fue inicialmente descubierto en Drosophila buzzatii, en donde es responsable de la generación de tres inversiones cromosómicas y subsecuentemente reportado en especies cercanas y en seis genomas secuenciados de Drosophila. En este estudio se ha ejecutado una búsqueda exhaustiva del transposon Galileo en 234 muestras de 133 especies de los géneros Drosophila, Scaptodrosophila, Scaptomyza and Zaprionus con muestras provenientes de ocho regiones zoo-geográficas. Para detectar Galileo se realizaron búsquedas bioinformáticas y experimentales mediante PCR + clonación de la región más conservada de la transposasa. Galileo fue detectado en 152 muestras de 51 especies de Drosophila de los subgéneros Sophophora, Drosophila y Siphlodora. Simultáneamente, la filogenia de 174 especies de Drosophilidae (que incluye todas las especies en las que se realizó la búsqueda de Galileo) se construyó con secuencias parciales de cuatro genes: SinA, ND2, COI y COII. Los resultados son consistentes con una antigua coevolución de Galileo en el género Drosophila. Galileo ha sido encontrado en especies de los subgéneros Sophophora, Drosophila and Siphlodora, que divergieron hace ca. 40-57 millones de años. Un hecho interesante es que Galileo fue detectado en varias poblaciones del subgénero Sophophora de Asia, en donde se piensa ha tenido su origen el ancestro de dicho subgénero. En comparaciones de ambas filogenias, de las especies y Galileo se han encontrado: 1) ocurrencia discontinua (distribución parcheada) entre 31 grupos de especies, 2) incongruencias entre las topologías de los árboles filogenéticos de las especies hospedadoras y Galileo, 3) en el último caso, la divergencia las secuencias de Galileo fue más pequeña entre los genes de las especies hospedadoras, y 4) una señal biogeográfica en la filogenia de Galileo. Los resultados encontrados en este estudio sugieren que el transposon Galileo estuvo presente en el ancestro común más reciente del subgénero Sophophora. La invasión de Galileo en el subgénero Drosophila y Siphlodora puede ser datada en ca. 40-56 Ma, cuando estos clados se separaron. Dentro de su hospedador, Galileo ha sido mayoritariamente transmitido verticalmente con pérdidas estocásticas y propagaciones horizontales antiguas. / Host-parasite assemblages offer exciting possibilities for the comparative study of rates of speciation and evolution. The basis for such studies can only be approached from a phylogenetic analysis of host-parasite association. Transposable elements are short DNA sequences that behave as intragenomic parasites. They are vertically transmitted through many generations, although horizontal transfer has been proposed as an essential step in their long-term evolutionary dynamics. Galileo is a member of the P superfamily of DNA transposons. It was initially discovered in Drosophila buzzatii, where it is responsible for the generation of three chromosomal inversions, and subsequently reported in closely related species and in six Drosophila genomes sequenced. Here in a thorough search of the Galileo transposon has been carried out in 234 samples of 133 species from the genera Drosophila, Scaptodrosophila, Scaptomyza and Zaprionus. The samples come from eight zoo-geographical regions. In order to detect Galileo, in silico BLAST searches and experimental searches by PCR + cloning of the most conserved region of the TPase were performed. Galileo was unequivocally detected in 152 samples of 51 Drosophila species from the subgenera Sophophora, Drosophila and Siphlodora. Simultaneously, the phylogeny of 174 Drosophilid species (including all taxa in which Galileo was searched) was inferred from partial coding sequences of four genes: SinA, ND2, COI and COII. The results are consistent with an ancient coevolution of Galileo in the genus Drosophila. Galileo has been found in species of the subgenera Sophophora, Drosophila and Siphlodora, that diverged ca. 40-57 million years ago. An interesting fact is that Galileo was detected in several populations of the subgenus Sophophora from Asia, where it is thought the ancestor of Sophophora has its origin. In comparisons of both, the Drosophila species and Galileo transposon phylogenies, it was found: 1) discontinuous occurrence of Galileo across 31 species groups (patchy distribution), 2) incongruence between host and TE tree topologies, 3) in the latter case, divergence between Galileo sequences was smaller than between genes of the host species, and 4) a bio-geographical signal in the Galileo phylogeny. These results found herein suggest that the Galileo transposon was present in the most recent common ancestor of the Sophophora subgenus. The invasion of Galileo in the subgenera Drosophila and Siphlodora could be dated at ca. 40-56 Mya, when this clades split. Inside its host, Galileo has been mostly vertically transmitted with stochastic losses and occasional ancient horizontal spreads.

En esta Tesis Doctoral, el doctorando estudia el papel que pueden tener las técnicas moleculares recientemente introducidas en el análisis del ganglio centinela en el cáncer de mama, con el fin de poder mejorar la información que aporta éste por sí solo. De este modo, y fruto del estudio multicéntrico del que el doctorando fue Investigador Personal y que supone la base de esta Tesis Doctoral, demostró que la cantidad de tumor presente en los ganglios centinela (expresada en ARN mensajero de citoqueratina) es capaz de predecir la afectación de más ganglios, aportando una información adicional al mero hecho de decir si el ganglio analizado es positivo o no. Estos datos proporcionan una nueva herramienta a los diferentes especialistas implicados en el tratamiento de las pacientes con cáncer de mama que permite individualizar más la conducta a seguir. En el primer trabajo se estudia el valor predictivo del análisis molecular del ganglio centinela como valor predictivo de afectación de más ganglios axilares. Para ello se diseñó un estudio multicéntrico retrospectivo que reclutó a 697 pacientes. En todas ellas se determinó la Carga Tumoral Total del ganglio centinela (definida como la suma de copias de ARNm de CK19/µL, obtenida mediante el anàlisis molecular de la muestra) y se relacionó con la afectación de ganglios linfáticos no-centinela. El estudio uni y multivariado demostró que se trataba de un valor altamente relacionado con la afectación de más ganglios, por lo que podría emplearse en la práctica clínica para conocer el riesgo individual de cada paciente. Este trabajo fue publicado en la revista Breast Cancer Research and Treatment siendo el doctorando el primer autor del mismo. Tomando como base los resultados del primer trabajo se decidió construir un nomograma predictivo de afectación axilar que incorporase la Carga Tumoral Total junto con el resto de variables que mostraron tener una correlación estadística con la afectación de ganglios no-centinela. Para ello se tuvo que validar el nomograma derivado del trabajo preliminar, por lo que fue necesario una segunda población de pacientes diferente a la anterior. Se realizó por tanto un nuevo estudio multicéntrico que reunió a 436 nuevas pacientes y confirmó los hallazgos anteriormente descritos. El trabajo fue de nuevo publicado en la revista Breast Cancer Research and Treatment siendo el doctorando el último firmante del mismo. En resumen, esta Tesis Doctoral da un paso más allá en la información que aporta el ganglio centinela, a la vez que abre nuevas vías de investigación que ya han comenzado (en concreto conocer el valor pronóstico de esta nueva herramienta). En la época actual, en la que el papel del ganglio centinela está sufriendo un profundo debate, estas nuevas aportaciones ayudan a definir mejor su rol. De hecho, en los últimos meses se han ido extendiendo, tanto a nivel nacional como internacional, los trabajos que siguen con la idea de la Carga Tumoral Total como nueva herramienta para el tratamiento de las pacientes con cáncer de mama. A su vez, múltiples centros sanitarios españoles han adoptado ya las conclusiones de los trabajos presentados en esta Tesis Doctoral en su práctica diaria. / In this thesis, the student studies the role that may have recently introduced molecular techniques in the analysis of sentinel lymph node in breast cancer, in order to improve the information provided by this alone. Thus, and as a result of the retrospective multicentric study conducted by the researcher and which is the basis of this thesis, he showed that the amount of tumor present in the sentinel nodes (expressed in mRNA of cytokeratin 19) is able to predict the involvement of more nodes, providing additional information tan just saying if the node is positive or not. These data provide a new tool to clinicians involved in the treatment of breast cancer patients allowing to individualize more. In the first study, the predictive value of sentinel lymph node to predict non-sentinel lymph nodes involvement is studied. For this purpose a multicentric retrospective study that enrolled 697 patients was designed. In all of them, the Total Tumor Load (defined as the amount of CK19 mRNA copies/µL, obtained by molecular analysis of the node) was correlated with non-sentinel lymph nodes metastasis. The uni and multivariate study showed that it was highly related to the involvement of more lymph nodes, so it could be used in clinical practice to know the individual risk of each patient. This work was published in Breast Cancer Research and Treatment. Based on the results of the first work, the same group decided to build a nomogram predicting the axillary involvement that incorporated Total Tumor Burden along with the rest of variables shown to have a statistical correlation with the involvement of non-sentinel lymph nodes. To do so, they had to validate the nomogram derived from the preliminary work so a second population of patients, different from the first one was necessary. A new multicentric study gathered 436 new patients and confirmed the findings described in the first study. This work was published again in Breast Cancer Research and Treatment. In summary, this thesis takes a step beyond the information provided by the sentinel node, while opening new ways of research that have already started (i.e. to determine the prognostic value of this new tool). In the current era, in which the role of sentinel lymph node is undergoing a deep debate, these new contributions help to better define its role. In fact, in the last months, many papers have been published that follow with the idea of Total Tumor Load as a new tool for the treatment of breast cáncer patients. Furthermore, many Spanish institutionshave already adopted the conclusions of the work presented in this thesis in their daily practice.

L'objectiu general d'aquesta tesi és valorar la utilitat del tractament de rehabilitació neuropsicològica en pacients esquizofrènics amb dèficits cognitius i predomini de la simptomatologia negativa. El programa utilitzat és l'anomenat Teràpia Integrada de l'Esquizofrènia (IPT, Integriertes Psychologisches Therapieprogramm) dissenyat pel grup de Brenner que disposa d'un manual protocol·litzat a més d'un model teòric susceptible d'estudi empíric. Els efectes de la rehabilitació són analitzats a tres àmbits diferents: funcions cognitives, funcionalisme cerebral mesurat a partir de SPECT i funcionament psicosocial. Per a la realització dels diferents estudis hem aplegat una mostra de 94 pacients diagnosticats d'esquizofrènia amb predomini de la simptomatologia negativa. D'aquests pacients 27 complien els criteris d'inclusió pel que fa a simptomatologia negativa i també el criteri qualitatiu de deterioració cognitiva que queda definit a l'estudi. Aquests pacients han estat sotmesos al tractament de rehabilitació neuropsicològica durant tres mesos. A una mostra de 10 pacients se'ls hi va estudiar amb mètodes de neuroimatge amb SPECT. Un grup de pacients amb predomini dels símptomes negatius però sense dèficit cognitiu han actuat com a control. La part experimental consta de quatre estudis, tres dels quals ja han estat publicats i un està acceptat per publicació. En aquests estudis hem pogut demostrar que els dèficits cognitius s'associen a un pronòstic més perniciós: evolució més cronificada, nivell més baix d'adaptació general, estades més llargues d'hospitalització i una adherència més pobra al tractament farmacològic. Els resultats recolzen que el tractament de rehabilitació neuropsicològica és útil i produeix millories a les funcions prèviament deficitàries. Tal i com estableix el model de Brenner, els canvis a les funcions cognitives elementals (atenció i codificació) estan lligades als canvis a les funcions cognitives més superiors (recuperació i funció executiva). I el que és més important, la millora neuropsicològica està associada a una millora del funcionament psicosocial, concretament un augment de l'autonomia personal i del funcionament psicosocial general. Per altra banda el tractament de rehabilitació neuropsicològica produeix canvis en el flux sanguini cerebral frontal detectable mitjançant estudis d'SPECT realitzats en condicions de neuroactivació. Aquests canvis suposen una reducció de la hipofrontalitat que es deu a la millora del funcionament neuropsicològic.Per tant l'estudi ha pogut confirmar les hipòtesis i es pot concloure que la rehabilitació neuropsicològica és una eina terapèutica que possibilita una millora del funcionament cognitiu, una reducció de l'hipofuncionalisme del flux cerebral frontal, un augment de l'autonomia personal i una millora del funcionament psicosocial als pacients esquizofrènics de pitjor pronòstic.

Prenent com a referència el marc teòric plantejat per la hipòtesi de covariació (Thierry, 2004), al llarg d’aquesta tesi es pretenia elaborar un model d’estructura social en primats integrant les conductes de competició (agressió), de cooperació (grooming) i les relacions de parentiu (kinship). Facilitant així, la comprensió dels processos que intervenen en la formació i manteniment de l’estructura social en primats, integrant-los un únic model més parsimoniós, on l’emergència de les conductes complexes s’explica a partir de la interacció entre regles de conducta simples. Per aconseguir aquests objectius vàrem combinar dues vies d’investigació: a) l’observació naturalista centrada en un grup de Cercocebus torquatus residents al Parc Zoològic de Barcelona; i b) l’elaboració d’un model basat en agents (MBA) anomenat A-KinGDom que està basat en altres MBA ja existents que permeten l’estudi d’estructura social en el gènere Macaca (Hemelrijk, 1998 i Puga-González et al., 2009). La combinació d’ambdues vies de recerca aportaren dades quantitatives sobre els patrons de conducta que determinen l’estructura social en la subfamília Cercopithecinae. Els resultats van mostrar existència de concordança entre les dades procedents de les simulacions i les dades procedents de l’observació naturalista, permeten emprar el model basat en agents com a eina predictiva d’estructura social en Cercopithecinae. / Using as reference the theoretical framework proposed by the covariation hypothesis (Thierry, 2004), this thesis aims to develop a model of social structure in primates integrating competitive behavior (aggression), cooperation (grooming) and kinship. Facilitating the understanding of the processes involved in the formation and maintenance of social structure in primates, integrating them in a single model, where the emergence of complex behavior is explained through the interaction of simple rules of conduct. In order to achieve these objectives, we combine two lines of research: a) naturalistic observation centered on a group of Cercocebus torquatus living at Barcelona Zoo, and b) the development of an agent based model called A-Kingdom. The combination of both pathways contributed to obtain quantitative values that determine the social structure in the subfamily Cercopithecinae. The results showed the existence of concordance between data from the simulations and data from naturalistic observation, so we can use the model based on agents as a predictive tool of social structure in Cercopithecinae.

Introducció: la introducció deis antipsicòtics i la desinstitucionalització ha col•locat en els familiars de pacients amb esquizofrènia la responsabilitat de la cura informal. Això comporta especialment en els cuidadors principals una disminució en la seva qualitat de vida en part deguda a l'increment de la seva percepció de càrrega en les tasques de la cura, a la pèrdua de les seves relacions socials i l'escàs suport professional en els centres sanitaris. Objectius: aquesta recerca analitza la relació existent entre la percepció de càrrega i la qualitat de vida dels cuidadors de pacients amb esquizofrènia. S'estudia també l'associació existent entre aquestes variables i amb altres factors com són les característiques sociodemogràfiques, el suport social i professional del cuidador, podent així aportar indicis sobre les possibles causes que alterarien la percepció carrega i la qualitat de vida del cuidador. Material i mètodes: a través d'un estudi quantitatiu i transversal es va comptar amb la participació de 100 cuidadors d'un centre de salut mental que van ser avaluats mitjançant I' Escala de Sobrecarga del Cuidador Zarit, WHOQOL­ Bref, el Social Network Questionnaire -que va ser adaptat i validat al castellà-, el qüestionari APGAR i I' Escala de Apoyo Profesional que va ser un instrument específicament elaborat i validat per a aquesta recerca. Resultats: el perfil deis cuidadors principals correspon a dones de mitjana edat, progenitores, casades amb estudis basics, que no treballen i salen ser les úniques persones que cuiden del seu familiar. Existeix relació significativa entre la qualitat de vida i la percepció de càrrega. Els cuidadors presenten una baixa qualitat de vida, sobretot en les dimensions social i psicològica. Menys d'un terç: refereixen sobrecàrrega intensa amb el risc de claudicació en la tasca de la cura i la meitat expressen sentir-se sobrecarregats. Ambdues variables guarden al mateix temps relació significativa amb el suport social i professional. La Social Network Questionnaire validada al castellà presenta unes bones propietats mètriques per ser utilitzada igual que I' Escala de Apoyo Profesional que resulta eficaç per avaluar el suport professional als cuidadors. Aquestes troballes són essencials de cara a plantejar pautes i programes d'intervenció familiar que millorin la qualitat de vida i disminueixin la percepció de carrega en els cuidadors. / Introducción: La introducción de los antipsicóticos y la desinstitucionalización ha colocado en los familiares de pacientes con esquizofrenia la responsabilidad del cuidado informal. Ello conlleva especialmente en los cuidadores principales una disminución en su calidad de vida en parte debida al incremento de su percepción de carga en las tareas del cuidado, a la pérdida de sus relaciones sociales y el escaso apoyo profesional en los centros sanitarios. Objetivos: esta investigación analiza la relación existente entre la percepción de carga y la calidad de vida de los cuidadores de pacientes con esquizofrenia. Se estudia también la asociación existente entre dichas variables y con otros factores como son las características sociodemográficas, el apoyo social y profesional del cuidador, pudiendo así aportar indicios sobre las posibles causas que alterarían la percepción carga y la calidad de vida del cuidador. Material y métodos: a través de un estudio cuantitativo y transversal se contó con la participación de 100 cuidadores de un centro de salud mental que fueron evaluados mediante la Escala de Sobrecarga del Cuidador Zarit, WHOQOL­ Bref, el Social Network Questionnaire -que fue adaptado y validado al castellano-, el cuestionario APGAR y la Escala de Apoyo Profesional que fue un instrumento específicamente elaborado y validado para esta investigación. Resultados: el perfil de los cuidadores principales corresponde a mujeres de mediana edad, progenitoras, casadas con estudios básicos, que no trabajan y suelen ser las únicas personas que cuidan de su familiar. Existe relación significativa entre la calidad de vida y la percepción de carga. Los cuidadores presentan una baja calidad de vida, sobre todo en las dimensiones social y psicológica. Menos de un tercio refieren sobrecarga intensa con riesgo de claudicación en la tarea del cuidado y la mitad expresan sentirse sobrecargados. Ambas variables guardan a su vez relación significativa con el apoyo social y profesional. La Social Network Questionnaire validada al castellano presenta unas buenas propiedades métricas para ser utilizada al igual que la Escala de Apoyo Profesional que resulta eficaz para evaluar el apoyo profesional a los cuidadores. Dichos hallazgos son esenciales de cara a plantear pautas y programas de intervención familiar que mejoren la calidad de vida y disminuyan la percepción de carga en los cuidadores. / Introduction: The introduction of the antipsychotics and deinstitutionalization has placed in the relatives of patients with schizophrenia the responsibility of informal care. This entails especially in the main caregivers a decrease in their quality of life in part due to the increase of its perception of load in the care tasks, to the loss of their social relations and the little professional support in the health centres. Aim: This research analyzes the relationship between the perception of load and the quality of life for caregivers of patients with schizophrenia. It also examines the association between these variables and with other factors, such as the sociodemographic characteristics, social support and professional of the caregiver, and can thus provide clues about the possible causes that would alter the perception load and the quality of life of the caregiver. Material and methods: through a quantitative and transversal study that counted with the participation of 100 caregivers in a mental health centre that were evaluated by the Zarit Burden lnterview, WHOQOL-Bref, the Social Network Questionnaire, which was adapted and validated into Spanish-, the questionnaire APGAR and the Professional Support Scale which was a tool specifically developed and validated for this research. Results: the profile of the primary caregivers corresponds to middle-aged women, progenitor, married with basic studies, which do not work and tend to be the only person who care for their family. There is significant relationship between the quality of life and the perception of load. Carers have a low quality of life, especially in the social and psychological dimensions. Less than one-third refer intense overload with risk of claudication in the task of caring for and half express feel overloaded. Both variables saved in turn significant relation to the social and professional support. The Social Network Questionnaire validated into Spanish presents favorable metric properties to be used, the same as the Professional Support Scale which results effective for evaluating the professional support to carers. These findings are essential to raise standards and programs of family intervention to improve the quality of life and decrease the perception of load in the caregivers.

El trabajo recoge los principales aspectos de la producción recombinante de una lipasa del hongo Rhizopus oryzae (ROL) expresada en la levadura Pichia pastoris. El sistema de expresión empleado está basado en la utilización del promotor de la alcohol oxidasa (PAOX1) de la levadura y, por lo tanto es dependiente de la utilización de metanol como substrato inductor. El trabajo recoge una serie de estudios de producción en bioreactor, operando en fed-batch, en los que la productividad del sistema se incrementa hasta en un factor de 11, mediante el estudio de la estrategia de adición del metanol a lo largo de la etapa de producción. Asimismo, estos cultivos se han realizado utilizando un medio de composición sintética, mucho mas económico que el complejo. La optimización de la producción también se ha abordado mediante la construcción de cepas multicopia para el gen ROL, estudiando igualmente, el efecto de la expresión recombinante de la lipasa sobre la cepa hospedadota.Por otro lado, se han construido vectores de expresión basados en la utilización de promotores independientes de la utilización del metanol. Se han obtenido cepas de P. pastoris que expresan la ROL de forma constitutiva y mediante inducción por fuente de nitrógeno.El trabajo recoge en último lugar un protocolo para la recuperación de la ROL recombinante desde el caldo de cultivo hasta la obtención de un extracto liofilizado de lipasa ROL. La purificación de la lipasa se ha llevado a acabo a través de la combinación de los pasos de cromatografía, de intercambio catiónico e interacción hidrofóbica. El grado de pureza obtenido es el adecuado para la utilización de la enzima como biocatalizador en reacciones de química fina y para la obtención de anticuerpos contra la misma. / This work summarises the main aspects of the recombinant production of a lipase of the fungi Rhizopus oryzae (ROL) expressed in the yeast Pichia pastoris. The expression system used is based on the utilization of the alcohol oxidase promoter (PAOX1) of the yeast and therefore is dependent on methanol as the inductor substrate. The productivity of this system has been increased by a factor of 11 by studying the methanol feeding strategy during fed-batch fermentations in bioreactors. Moreover, a synthetic cultivation media has been used for these experiments, which is much more inexpensive than the regular complex ones. Furthermore, ROL multicopy strains have been also developed in order to optimise the final lipase production of the system.In addition, the study of the ROL production has been carried out based on the development of different expression vectors independent of the use of methanol as an inductor of the expression. In this context, we have developed new recombinant P. pastoris strains for the constitutive and nitrogen-dependent expression of ROL.Finally, a down-stream process for the recovery of the lipolitic enzyme has been defined through all stages: from the broth media to the final lyophilised product. The ROL purification has been achieved through two single-chromatography steps, which are cationic exchange and hydrophobic interaction. The final product has a purity which is appropriate for its use in fine chemical reactions and the development of antibodies against it.

La patología producida por C.gattii, se asemeja en muchos casos a la producida por patógenos primarios, por el hecho de ser capaz de afectar a personas y/o animales inmunocompetentes. La criptococosis por esta especie, hasta ahora ha sido considerada una micosis de mayor prevalencia en países tropicales o sub-tropicales. Al ser considerado Cryptococcus gattii como una nueva especie separada filogenéticamente de C. neoformans y al actuar patológicamente como un patógeno primario infectando sujetos inmunocompetentes; sería posible demostrar diferenciasen sus factores de patogenicidad y en los patrones de sensibilidad con respecto al C. neoformans.ObjetivoEstudiar en Cryptococcus gattii y C. neoformans serotipos; las características fenotípicas y genotípicas de dos de los factores de patogenicidad considerados mas importantes y analizar los patrones de sensibilidad a los antifúngicos, utilizados para el tratamiento de la criptococosis y a los antifúngicos de última generación.Materiales y Métodos: Todas las cepas de Cryptococcus neoformans y Cryptococcus gattii utilizadas en éste trabajo pertenecen o se encuentran almacenadas en la colección de URMIM, del Institut Municipal de Investigació Mèdica; ubicada en el edificio del Parc de Recerca Biomèdica de Barcelona. Actualmente, las cepas también se encuentran en el laboratorio de Micología, Facultad de Medicina de la Universidad Miguel Hernández en Sant Joan d'Alacant, Alicante.Resultados y Conclusiones:Para poder estudiar las diferencias en la actividad ureasa de ambas especies, C. neoformans y C. gattii, se diseñó un método original y reproducible que permitió realizar la cuantificación de esa actividad enzimática. Utilizando ese método in vitro, se comprobó que los aislados de Cryptococcus neoformans presentaban estadísticamente mayor actividad ureasa que las de C. gattii, independientemente del origen de las cepas. Realizando una adaptación de la técnica utilizada par medir la actividad fenoloxidasa de Mycobacterium leprae, fue posible analizar cuantitativamente la producción de esta enzima a partir de cultivos puros de C. gattii aislados de cabras, comparándolos con cepas de referencia de la misma especie y de C. neoformans. Los resultados obtenidos demostraron que, en conjunto, C. gattii presentaba in vitro mayor actividad lacasa (fenoloxidasa) que C. neoformans. Las tres cepas con mayor producción de lacasa fueron los agentes de otros tantos brotes epidémicos de criptococosis en cabras, sugiriendo que esta enzima tiene un papel destacado en la virulencia de C. gattii. El estudio molecular de cepas seleccionadas de C. gattii demostró que el gen CNLAC1 de esta especies, presenta una región exclusiva en sus dos serotipos B y C. Se pudo demostrar in vitro que la región identificada en el gen CNLAC 1, es utilizada en la trascripción de la expresión de la enzima lacasa, específicamente en C. gattii serotipos B y C. Utilizando un método de microdilución estandarizado de referencia, las 80 cepas de C. neoformans y de C. gattii, evaluadas resultaron sensibles a los tres antifúngicos estudiados, fluconazol, voriconazol y posaconazol. Las CMI de los dos últimos triazoles fueron muy similares, no superando los 0,5 &#956;g/mL. Se analizó la concentración mínima fungicida de estas cepas a los trestriazoles, comprobándose que resultados equivalentes a los de las CMI. A pesar de que el posaconazol presentó mayor actividad que los otros azoles, no se hallaron diferencias estadísticamente significativas en los resultados obtenidos entre las dos especies de Cryptococcus, ni entre sus serotipos. Se evaluó la utilidad del método Etest como alternativa al micrométodo, para determinar las CMI del posaconazol en C. gattii y C. neoformans, encontrándose un buen nivel de concordancia entre ambos métodos. La elevada sensibilidad de ambas especies de Cryptococcus al posaconazol, sugieren que este nuevo antifúngico puede ser una alternativa terapéutica en el tratamiento de la criptococosis. / Criptococcus gattii produced an infectious disease in immunosuprised mammals. In the last years this mycosis has been show a high prevalence in tropical and subtropical countries. This new specie, C. gattii, it is already philogenetic separated from C. neoformans and it is considered a real pathogen from human and animals. In this work, we have been study differences among virulence factors and in vitro susceptibility in both, C. neoformans and C. gattii.Objective: Demonstrate differences phenotypic and genotypic of laccase and urease enzymes between C. neoformans and C. gattii. Analyze in vitro susceptibility of fluconazole (FNZ), voriconazole (VNZ) and posaconazole (PNZ) of both species of Cryptococcus.Materials and methods: All strains used in this work were from a private collection of Laboratory of Infectious disease and Mycology (URMIM) in Barcelona. Results and Conclusions: The original method for determinate the urease activity in C. neoformans and C. gattii, showed high activity of urease in 76% of C. neoformans and 15.6% of C. gattii, by the other hand, the methodology for determinate laccase activity showed more laccase in C. gattii than C. neoformans. The molecular study of 55 strains of Cryptococcus showed a specific fragment of CNLAC1 gene, exclusive in C. gattii B and C serotypes, totally absent in C. neoformans. In this work, have been demonstrated the in vitro transcription of the fragment of 500bp in the laccase synthesis.Using a CLSI M27-A2 microdilution method for susceptibility of FNZ, VNZ and PNZ, 80 strains of Cryptococcus were study. The minimal inhibitory concentration (MIC) of VNZ and PNZ were < 0,5 &#956;g/mL. The minimal fungicidal concentration (MFC) was determined. MFC and MIC were homogeneous in all three antifungics. Non statistical significance results were show between the two species or among the four serotypes.

Aquesta tesi doctoral fa una aproximació a l'estudi dels aficionats al futbol des d'una perspectiva global, per l'estudi de la qual es menester considerar variables tant de l'entorn com de les persones. Els objectius principals són descriure les característiques de l'entorn de l'aficionat i les variables individuals implicades en l'afició al futbol, i avaluar les conseqüències cognitives, afectives y comportamentals d'aquesta afició. Per això, s'ha dissenyat una recerca que integra metodologia qualitativa, a partir de l'observació participant, per a l'estudi de l'entorn en el que es desenvolupa el futbol professional en diferents ciutats de l'estat espanyol; i metodologia quantitativa, a partir de la realització d'una enquesta per l'estudi dels valors, motivacions i emocions que expressen els aficionats en els mateixos estadis. Com a resultat del treball de camp s'han obtingut: a) un diari de camp composat per 11 registres d'observació d'esdeveniments en diferents ciutats en que es juguen partits de la Liga de Fútbol Profesional, material editat per clubs i associacions d'aficionats, material de premsa i reflexions de l'investigador; i b) 1719 qüestionaris contestats en 17 estadis de primera y segona divisió. De l'anàlisi combinat de les dades es desprèn que l'entorn (tant real com hiperreal o virtual) de l'aficionat al futbol té una influencia important en la definició i el manteniment de l'afició. El futbol espectacle és un continuum de futbol real i futbol virtual que es perllonga gairebé sense interrupció en el temps. A nivell individual, el públic es pot classificar en espectadors, aficionats presencials, aficionats virtuals i entusiastes. Els entusiastes són l'únic grup que es caracteritza per valorar el guanyar per sobre de qualsevol altre valor. La motivació principal dels aficionats es recolzar l'equip amb el que s'identifiquen tant quan van als estadis com quan veuen futbol televisat. La identificació implica que normalment s'experimentin emocions positives davant d'estímuls que provenen del propi equip mentre que davant dels rivals i dels àrbitres s'experimenta una major dispersió emocional. L'expressió comportamental de les emocions porta els aficionats a les grades a fer tant individualment com grupal (cants i coreografies) comportaments favorables, neutres o desfavorables al fair play, arribant en ocasions a l'agressió (aspecte que més s'ha estudiat dels espectadors pels problemes que comporta). Una de les conseqüències de la combinació de factores de l'entorn i factors individuals sobre l'afició és el nivell de compromís dels aficionats, el compromís de les aficionades amb el futbol es igual que el dels aficionats (tot i que en els camps n'hi ha proporcionalment menys), els aficionats més veterans estan més compromesos que els joves. Finalment, els entusiastes són els aficionats més compromesos, seguits dels aficionats presencials i els aficionats virtuals, els espectadors per la seva banda no mostren cap compromís amb el futbol. / Esta tesis doctoral hace una aproximación al estudio de los aficionados al fútbol desde una perspectiva psicológica global, para cuyo estudio hay que considerar variables tanto del entorno como de las personas. Los objetivos principales son describir las características del entorno del aficionado y las variables individuales implicadas en la afición al fútbol, y evaluar las consecuencias cognitivas, afectivas y comportamentales de dicha afición. Para cubrir estos objetivos, se ha diseñado una investigación que integra metodología cualitativa, a partir de la observación participante, para el estudio del entorno en el que se desarrolla el fútbol profesional en distintas ciudades del estado español; y metodología cuantitativa, a partir de la realización de una encuesta, para el estudio de los valores, motivaciones y emociones que expresan los aficionados en los mismos estadios. Como resultado del trabajo de campo se han obtenido: a) un diario de campo compuesto por: 11 registros de observación de acontecimientos en otras tantas ciudades en que se disputaban partidos de la Liga de Fútbol Profesional, material editado por clubes y asociaciones de aficionados, material de prensa y reflexiones del investigador; y b) 1719 cuestionarios contestados en 17 estadios de primera y segunda división. Del análisis combinado de los datos se desprende que el entorno (tanto real como hiperreal o virtual ) del aficionado al fútbol tiene una influencia importante en la definición y mantenimiento de la afición. El fútbol espectáculo es un contiuum de fútbol real y fútbol virtual que se prolonga casi ininterrumpidamente en el tiempo. A nivel individual, el público se puede clasificar en espectadores, aficionados presenciales, aficionados virtuales y entusiastas. Los entusiastas son el único grupo que se caracteriza por valorar el ganar por encima de cualquier otro valor. La motivación principal de los aficionados es apoyar al equipo con que se identifican tanto cuando acuden a los estadios como cuando ven fútbol televisado. La identificación implica que normalmente se experimenten emociones positivas ante estímulos que provienen del propio equipo mientras que ante los rivales y los árbitros se experimenta mayor dispersión emocional. La expresión comportamental de las emociones lleva a los aficionados en las gradas a hacer tanto individual como grupalmente (cantos y coreografías) comportamientos favorables, neutros o desfavorables al fair play, llegando en ocasiones a la violencia (aspecto que más se ha estudiado de los espectadores por los problemas que conlleva).Una de las consecuencias de la combinación de factores del entorno y factores individuales sobre la afición es el nivel de compromiso de los aficionados, el compromiso de las aficionadas al fútbol es igual que el de los aficionados (a pesar de que en los campos hay proporcionalmente menos mujeres), los aficionados más veteranos están más comprometidos que los jóvenes. Finalmente, los entusiastas son los aficionados más comprometidos, seguidos de los aficionados presenciales y los aficionados virtuales, les espectadores por su parte no muestran compromiso alguno con el fútbol.