Orientador: José Luiz Laus / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Alexandre Pinto Ribeiro / Resumo: Avaliou-se o efeito da instilação local de morfina 1% sobre a expressão do fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa), da interleucina-1 beta (IL-1beta), da prostaglandina E2 (PGE2) e da mieloperoxidase (MPO) e a turbidez do humor aquoso (flaremetria a laser) em olhos de coelhos com uveíte induzida por injeção intravítrea de endotoxina. Empregou-se 30 leporinos da raça Nova Zelândia Branco, separados em 5 grupos (n=6), a saber : basal, grupo controle (GC), grupo morfina (GM), grupo naloxona (GN), grupo morfina-naloxona (GMN). Sob anestesia dissociativa, injetou-se 0,1 mL, contendo 0,2 μg de endotoxina (parede celular de Salmonella typhimurium), na câmara vítrea do olho direito de cada animal para a indução da uveíte experimental. Para a avaliação, realizou-se a flaremetria a "laser" antes da injeção intravítrea de endotoxina (basal), e às 10 e 20 horas da indução da uveítes, ocasião em que os olhos tratados foram enucleados para a quantificação do fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa), da interleucina-1 beta (IL-1beta), da mieloperoxidase (MPO) e da prostaglandina E2 (PGE2) por ELISA. Os dados foram analisados estatisticamente, quanto contagem de fótons no humor aquoso (flaremetria a "laser"), aplicando-se análise de variância não paramétrica de Friedman, seguida do "post hoc test" de Dunn, ao nível mínimo de significância de p>0,05 e quanto à quantificação das citocinas, utilizando-se Análise de Variância de via única, seguida pelo teste de Tukey, nas avaliações entre grupos. Considerou-se o nível mínimo de significância p<0,05. Observou-se, após a indução da uveíte, elevação significativa no nível TNF-alfa e IL-1beta, comparativamente aos olhos basais (p<0,05) em todos os tratamentos estudados (GC, GM, GN, GMN). A atividade da MPO apresentou uma elevação não significativa após a indução da uveíte. Os níveis dessas citocinas ... / Abstract: To evaluate the effects of instillation of morphine 1% on the expression of tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha), interleukin-1 beta (IL-1beta), prostaglandin E2 (PGE2) and myeloperoxidase (MPO) and the turbidity of aqueous humor (laser flaremetry) in the eyes of rabbits with uveitis induced by intravitreal injection of endotoxin. Were used 30 New Zealand White rabbits, separated into 5 groups (n = 6), as follows: healthy control group (CG), morphine group (GM), naloxone group (GN), morphine-naloxone group (GMN). Under dissociative anesthesia it was injected 0.1 mL containing 0.2 mg of endotoxin (cell wall of Salmonella typhimurium) in the vitreous of the right eye of each animal to induce experimental uveitis. For the evaluation, it was used laser flarimetry before intravitreal injection of endotoxin (baseline) and at 10 and 20 hours after the induction of uveitis, at which time the treated eyes were enucleated for the quantification of tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha), interleukin-1 beta (IL-1beta), mieloperoxidase (MPO) and prostaglandin E2 (PGE2) by ELISA. The data were treated statistically, the photon count in the aqueous humor (laser flarimetry), applying Friedman's nonparametric two-way analyses of variance test, then the Dunn's "post hoc test", the minimum level of significance was p> 0.05 and for quantification of cytokines using ANOVA one-way followed by Tukey test in ratings between groups. Considered the minimum level of significance p <0.05. It was observed after induction of uveitis, significant increase in the level of TNF-alpha and IL-1beta compared to baseline eyes (p <0.05) in all treatments (GC, GM, GN, GMN). The MPO activity showed a nonsignificant increase after induction of uveitis. The levels of these cytokines between groups presented similar except in the quantification of PGE2, which showed significant variation between groups GM and GNM (p <0,05). Based ... / Mestre

Orientador: Lenice do Rosário de Souza / Banca: Alexandrina Sartori / Banca: Francisco Hideo Aoki / Resumo: O Brasil é um dos países mais afetados pelo HIV, com notificação de 608.230 casos acumulados de 1980 até junho de 2011, com a maior concentração na região Sudeste. Sabe-se que, entre muitos outros fatores a progressão para aids sofre influência de variáveis metabólicas, virológicas e imunológicas. Além disso, persistente ativação imune e contínuo estímulo inflamatório, mesmo durante a terapia antirretroviral (TARV) ou ausência de sintomatologia, podem levar ao desequilíbrio de várias citocinas e influenciar, potencialmente, a progressão da própria doença ou outras comorbidades, que são determinantes para aumentar a morbidade e mortalidade, associadas ou não à aids. Foram estudados 80 voluntários atendidos no Serviço de Ambulatórios Especializados e Hospital Dia "Domingos Alves Meira", FMB/UNESP e no Hemocentro de Botucatu, divididos em quatro grupos: 20 pacientes com infecção pelo HIV, virgens de tratamento (G1); 20 pacientes em uso de TARV com carga viral (CV) detectável (G2); 24 pacientes em uso de TARV com CV indetectável (G3); 16 indivíduos saudáveis, grupo controle (GC). O objetivo do estudo foi avaliar parâmetros imunovirológicos (contagem de linfócitos T CD4+, T CD8+ e dosagem da CV plasmática do HIV) de pacientes infectados pelo HIV, correlacionando citocinas séricas inflamatórias (IL-6, IL-17, TNF- e IFN-) e antinflamatória (IL-10) pelo método de ELISA, tempo de infecção, uso de TARV e outros exames laboratoriais (hemograma, perfil lipídico, glicemia, enzimas hepáticas, DHL, creatinina e PCR). As comparações das variáveis numéricas em relação aos grupos foram feitas utilizando o teste de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis, seguido de teste de Dunn e análise da variância ANOVA, seguido de Tukey... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Brazil is one of the most affected countries by HIV, reporting 608,230 cases that have accumulated from 1980 to June 2011 with the largest concentration in the south-east. It is known that, among many other factors, progression to AIDS is influenced by metabolic, virological and immunological variables. Moreover, persistent immune activation and continuous inflammatory stimulus, even during antiretroviral therapy (ART), or the absence of symptomatology may lead to the instability of various cytokines and potentially influence the progression of the disease itself or other comorbidities that are determinant to increase morbidity and mortality in association with AIDS or not. Eighty volunteers were assisted and studied in the Specialized Outpatient Service and Day Hospital "Domingos Alves Meira" at the Botucatu School of Medicine (FMB) - UNESP and at the Hemocenter of Botucatu. They were divided into four groups: 20 HIV-infected patients who had never been treated (G1); 20 patients using ART with a detectable viral load (VL) (G2); 24 patients using ART with undetectable VL (G3); 16 healthy individuals, control group (CG). The study aimed at evaluating immunovirological parameters (T CD4+, T CD8+ lymphocyte count and HIV plasma VL quantification) of HIV-infected patients and correlate them with inflammatory (IL-6, IL-17, TNF- and IFN-) and anti-inflammatory (IL-10) serum cytokines by the ELISA method, time of infection, ART use and other laboratory tests (hemogram, lipid profile, glycemia, liver enzymes, LDH, creatinine and CRP). Comparison of numeric variables in relation to the groups were performed by using the Mann-Whitney, Kruskal-Wallis test followed by Dunn's test, analysis of variance ANOVA and Tukey's test. Associations were made between variables and the study groups by analyzing contingency tables with the application of the... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

INTRODUÇÃO: Lúpus eritematoso (LE) é uma doença inflamatória crônica, autoimune. A presença de citocinas do tipo 1 nas lesões cutâneas discoides sugere que estas sejam críticas para a indução, desenvolvimento e manutenção destas manifestações. As citocinas do tipo 2 em combinação com Interferon- local podem estar relacionadas com a fisiopatologia do lúpus cutâneo. O perfil das citocinas ainda é desconhecido nas lesões orais do LE. MÉTODOS: Foram investigadas e comparadas as expressões das citocinas Th1 e Th2, representadas por IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, fator de necrose tumoral alfa (TNF-) e interferon gama (IFN-), de 29 biopsias de LE de mucosa intraoral (área não exposta ao sol) e semimucosa labial (área exposta) por meio da técnica de imuno-histoquímica. RESULTADOS: O infiltrado inflamatório das lesões de LE foi fortemente positivo para IFN- (97%) e TNF- (90%), ambas citocinas Th1. Interleucina 10 (IL-10), citocina Th2, foi fortemente expressa. Outras citocinas foram apenas moderadamente positivas. O padrão de citocinas foi semelhante nas lesões orais do LE na mucosa intraoral (área não exposta) e na semimucosa labial (área exposta). CONCLUSÕES: As lesões orais de LE estão associadas tanto a citocinas Th1 quanto a citocinas Th2, caracterizadas por expressão forte de IFN-, TNF- e IL-10. Além disso, os achados sugerem que apesar da radiação ultravioleta estar envolvida na indução das lesões de LE, os mecanismos de formação das lesões podem ser similares nas áreas expostas e não expostas ao sol. / Lupus erythematosus (LE) is a chronic inflammatory disease, autoimune. Presence of type 1 cytokines in cutaneous discoid lesions suggests that they may be critical for induction, development and maintenance of these manifestations. Type 2 cytokines in combination with local interferon (IFN-) are thought to be related to the physiopathology of cutaneous LE. Cytokines profiles are still unknown in oral LE lesions. Material and Methods: Expression of Th1 and Th2 cytokines (including IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, tumor necrosis factor (TNF-) and IFN- was investigated and compared in 29 biopsies of intra-oral (sun-protected) and labial lesions (sun-exposed) of LE using immunohistochemistry. Results: Inflammatory infiltrate of LE lesions was strongly positive for IFN- (97%) and TNF- (90%), both Th1 type cytokines. Interleukin-10, a Th2 cytokine was also strongly expressed. Other cytokines were only mildly positive. Cytokines patterns were similar in intra-oral (sun-covered) and labial (sun-exposed) LE lesions Conclusions: Oral LE lesions are associated with both type 1 and type 2 cytokines, characterized by stronger expression of IFN-, TNF- and IL-10. These findings suggest that although ultraviolet light is involved in the induction of LE lesions, mechanisms of lesions formation may be similar in sun-exposed as well as sun-covered areas.

Enxertos gengivais livres são importantes para garantir condições necessárias para o estabelecimento da homeostasia do periodonto de proteção. O processo de inflamação não ocorre por igual em todos os tecidos conjuntivos do organismo e os fibroblastos têm a capacidade de reagir a estímulos agressivos por meio de liberação de diversas citocinas, que desempenham importante função na formação do infiltrado inflamatório. Até o presente trabalho, não há relatos na literatura acerca da comparação do comportamento dos fibroblastos que compõem a mucosa palatina não marginal e dos fibroblastos provenientes de enxerto gengival livre (EGL) marginal em resistir aos estímulos agressores que ocorrem na doença periodontal. Dessa forma, a proposta do presente trabalho foi investigar se os fibroblastos da mucosa palatina não marginal mudariam seu perfil de secreção de citocinas quando enxertados na margem gengival. Foram coletadas biópsias da mucosa palatina no momento da cirurgia de EGL (período inicial) e após 4 meses (período final) no momento da cirurgia para recobrimento radicular. Os fibroblastos foram cultivados e estimulados com LPS de Porphyromonas gingivalis (Pg) e de Escherichia coli (Ec) por 24h e 48h para avaliação comparativa da expressão de citocinas e mediadores do reparo tecidual, como: IL-6, IL-8/CXCL8, MIP-1&#x3B1;/CCL3, TGF-&#x3B2;, VEGF e CXCL16. As citocinas foram quantificadas no sobrenadante das células por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA). Para a citocina IL-6, os fibroblastos da mucosa palatina não marginal mantiveram o mesmo perfil de secreção quando enxertados na área gengival marginal; para MIP-1&#x3B1; a secreção se mostrou aumentada de forma estatisticamente significativa pelos fibroblastos obtidos do enxerto gengival marginal após 48h de estímulo por Pg em comparação com os fibroblastos da área palatina não marginal; a secreção de IL-8 pelos fibroblastos da mucosa palatina não marginal foi maior em resposta ao desafio por LPS de Pg e os fibroblastos obtidos do enxerto gengival marginal exibiram secreção até mesmo sem o estímulo de LPS; apenas os fibroblastos do enxerto gengival marginal apresentaram secreção de TGF-&#x3B2;, mesmo na ausência de estímulo por LPS; a secreção de VEGF e CXCL16 não foi detectada pelos fibroblastos analisados. Conclui-se que os fibroblastos provenientes de uma mucosa palatina não marginal parecem se adaptar às condições locais quando enxertados na área gengival marginal, oferecendo evidência de sua participação efetiva na produção de mediadores inflamatórios importantes para o processo de homeostasia do periodonto marginal. / Free gingival grafts are important to ensure conditions for the establishment of homeostasis of the periodontal soft tissues. The process of inflammation does not occur the same way in all connective tissues and fibroblasts have the ability to respond to aggressive stimuli through the release of various cytokines, which play an important role in the inflammatory infiltrate formation. In literature, there are no studies comparing the behavior of fibroblasts from palatal mucosa (not marginal) and fibroblasts from marginal free gingival graft (FGG) regarding their resistance towards periodontal disease aggressive stimuli. Thus, the purpose of this study was to investigate whether fibroblasts from the palatal mucosa behave differently when grafted to the gingival margin considering their mechanism of cytokine secretion. Biopsies from the palatal mucosa were collected at the time of FGG surgery (initial period) and after 4 months (final period) when surgery for root coverage was performed. The fibroblasts were cultured and stimulated with LPS of Porphyromonas gingivalis (Pg) and Escherichia coli (Ec) for 24 and 48 hours in order to make a comparative evaluation of cytokines and mediators of tissue repair expression, such as IL-6, IL-8/CXCL8, MIP-1&#x3B1;/CCL3, TGF-&#x3B2;, VEGF and CXCL16. Cytokines were measured in the cell supernatant by enzyme immunoassay (ELISA). For cytokine IL- 6, fibroblasts from palatal mucosa maintained the same secretion pattern when grafted to the gingival margin; for MIP-1&#x3B1; the secretion was significantly increased by fibroblasts from the marginal gingival graft after 48 hours of stimulation with Pg when compared to palatal mucosa fibroblasts; IL-8 secretion by palatal mucosa fibroblasts did not increase in response to Pg LPS challenge and fibroblasts from marginal gingival graft showed secretion even without the stimulus of LPS; only fibroblasts from marginal gingival graft showed secretion of TGF-&#x3B2;, even in the absence of LPS stimulation; VEGF and CXCL16 secretion by fibroblasts was not detected. It was concluded that fibroblasts from palatal mucosa seem to adapt to local conditions when grafted to the gingival margin area, providing evidence of its effective participation in the homeostasis of marginal periodontium through the production of important inflammatory mediators.

O aumento da adiposidade corpórea pode gerar diversos mediadores inflamatórios com capacidade de influenciar a proliferação e a diferenciação hematopoética e, consequentemente, a complexa regulação da hematopoese. Por isso, propusemo-nos, neste trabalho, avaliar a influência do aumento da adiposidade corpórea sobre a proliferação e a diferenciação de células hematopoéticas, bem como sua capacidade em sintetizar citocinas. Ratos Wistar, machos foram alimentados com uma dieta rica em lipídios durante 14 semanas. Após esse período foram avaliados hemograma, mielograma, perfil lipídico, concentrações séricas de leptina, insulina e adiponectina. Citômetria de fluxo foi utilizada para avaliação da porcentagem de células CD34+/CD133+, bem como o ciclo celular de células medulares. Células medulares foram utilizadas para avaliar a atividade proliferativa in vitro e a capacidade de diferenciação, in vitro, na presença de IL-3, EPO, GM-CSF e G-CSF. Animais, alimentados com dieta hiperlipídica, apresentaram maiores concentrações de leptina circulante, com aumento de gordura corporal, aumento da concetração de proteína C reativa, colesterol total, LDL, VLDL e triacilglicerol. O hemograma apresentou neutrofilia absoluta e a medula óssea apresentou-se hipercelular com aumento do número de granulócitos maduros e da população celular CD133-/CD34+. Os resultados dos testes in vitro demonstraram aumento da capacidade de síntese de IL-3 e aumento de G-CSF, com aumento do potencial proliferativo, também evidenciado pelo maior número de células medulares na fase S/G2/M, bem como o aumento da diferenciação granulocítica. Esses resultados sugerem que a leucocitose e neutrofilia observadas em situações de aumento da adiposidade corpórea são decorrentes de uma complexa modulação do sistema hematopoético. / The body fat increase can generate various inflammatory mediators, that are capable to influence the proliferation and differentiation of hematopoietic cells and consequently modulate the complex regulation of the hematopoiesis. In this study we have proposed to evaluate the effect of increase body fat on the proliferation and differentiation of hematopoietic cells, as well as its ability to synthesize cytokines. Male Wistar rats were subjected to a high fat diet during a period of 14 weeks. After that period were evaluated hemogram, mielogram, lipid profile and the serum concentrations of leptin, insulin and adiponectin. Flow cytometry was used to evaluate the percentage of CD34+/CD133+, as well as the cell cycle of bone marrow cells. Bone marrow cells were used to perform the proliferation and differentiation capacity in vitro in the presence of IL-3, EPO, GM-CSF and G-CSF. Animals fed high-fat diet had higher concentrations of circulating leptin with increase body fat, and increase of C-reactive protein, total cholesterol, LDL, VLDL and triacylglycerol concentrations. The hemogram showed absolute neutrophilia and a hypercellular bone marrow with increase of granulocytic mature population and CD133-/CD34+ cells. The results in vitro, showed an increase of IL-3 and G-CSF production, and higher proliferative potential with an increase in S/G2/M bone marrow cell cycle phases, as well as an increase of the granulocytic differentiation. The results suggest that leukocytosis and neutrophilia observed in this model of body fat increase are in fact a result of a complex modulation of the hematopoietic system.

Objetivos: Comparar os níveis séricos de citocinas entre voluntários saudáveis e em pacientes bipolares tipo 1 em mania, depressão e eutimia. Comparar os níveis séricos de quimiocinas entre voluntários saudáveis e pacientes bipolares tipo 1 em eutimia. Metodologia: Sessenta e um pacientes bipolares foram recrutados para a avaliação dos níveis séricos de citocinas. Desses, 24 estavam eutímicos, e 23 e 24 estavam em mania e depressão, respectivamente. Este grupo foi comparado a outro, composto por 25 voluntários saudáveis. As seguintes citocinas foram exainadas através de citometria de fluxo: TNF-alfa, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-gama e comparadas entre os grupos. Além dessa análise, 30 pacientes bipolares tipo 1 foram comparados a igual número de voluntários saudáveis para estudar os níveis séricos das seguintes quimiocinas: CCL2, CCL3, CCL8, CCL 9, CCL10, CCL11 e CCL24, dosadas através de ELISA sandwich. Resultados: Duarnte a mania, as citocinas pró-inflamatórias IL-2, IL-4 e IL-6 estavam elevadas nos pacientes com TB em comparação com o grupo de voluntários saudáveis. Já os pacientes em episódio depressivo, apresentavam somente elevação da IL-6. Não houve modificação dos níveis de citocinas nos pacientes eutímicos, exceto pelo aumento da IL-4. Quanto as quimiocinas, enquanto os níveis séricos de CXCL10 estavam elevados nos pacientes bipolares, os níveis de CCL24 estavam diminuídos. / Objectives: Compare serum levels of cytokines between healthy volunteers and patients with bipolar disorder type 1 in mania, depression and euthymia. Compare serum levels of chemokines between healthy volunteers and bipolar patients in euthymia. Methods: Sixty-one bipolar patients were recruited for assessment of serum cytokine levels. Of these, 14 were in euthymic state, 23 and 24 were in manic and depressive episodes, respectively. A healthy comparison group included 25 healthy volunteers. Cytokines involved in Th1/Th2 balance, such as TNF- , IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN- , were examined by flow cytometry. In addition, serum chemokine levels of 30 euthymic patients with BD type I and 30 healthy volunteers were investigated and compared. The chemokines assessed were CCL2, CCL3, CCL8, CCL 9, CCL10, CCL11, and CCL24. Results: During mania, proinflammatory cytokines, IL-2, IL-4 and IL-6, were increased in comparison with healthy subjects. Patients in depressive episode showed only increased IL-6 levels. There were no significant differences in cytokine levels between patients in remission and healthy subjects, except for IL-4. Regarding chemokines, patients with BD showed significant differences in chemokine levels when compared with healthy subjects. While serum levels of CXCL10 were increased, CCL24 levels were lower in bipolar patients when compared with controls. There was no statistical difference in the serum levels of CCL2, CCL3, CCL24, CXCL9, and CXCL11 between patients and controls.

Orientador: Renato Passini Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-11-27T11:36:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Politano_GabrielTilli_D.pdf: 2041428 bytes, checksum: b671b24f9261d0181d5efd46b02c080f (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Introdução: A doença periodontal, afecção que pode acometer os tecidos de sustentação dos dentes, induz à liberação local e sistêmica de mediadores inflamatórios. A pré-eclâmpsia, caracterizada pela hipertensão e proteinúria em gestantes, também parece ter sua etiopatogenia parcialmente relacionada ao sistema imunológico, com aumento dos níveis plasmáticos de algumas citocinas. Objetivos: Esta pesquisa teve os seguintes objetivos: revisar a literatura quanto à associação entre doença periodontal e pré-eclâmpsia, analisar a influência do Fator de Necrose Tumoral-alfa (TNFa) e da Interleucina-6 (IL-6) na pré-eclâmpsia e avaliar a associação entre a doença periodontal e o desenvolvimento de pré-eclâmpsia, incluindo a análise das citocinas inflamatórias sistêmicas neste processo. Método: inicialmente procedeu-se à revisão de literatura sobre a relação entre doença periodontal e pré-eclâmpsia, seguida de estudo do tipo caso-controle, realizado em 58 gestantes com pré-eclâmpsia (casos) e 58 gestantes normotensas (controles). Foi realizada a coleta do sangue periférico para avaliação laboratorial da expressão sistêmica do RNA mensageiro (RNAm) das citocinas inflamatórias IL-6 e TNFa por meio do exame de Reação de Polimerização em Cadeia em Tempo Real (PCR em Tempo Real). Todas as gestantes tiveram o periodonto avaliado para se estabelecer presença ou ausência de periodontite. Para avaliação da homogeneidade entre os grupos foram utilizados o teste exato de Fisher, teste de Mann-Whitney, teste T de Student e teste qui-quadrado. O teste de Mann-Whitney também foi utilizado para comparação dos dados periodontais e de citocinas entre os grupos. Foram calculados odds ratio bruto e ajustado, através da regressão logística, para os fatores de exposição. A correlação entre todas as variáveis periodontais e a expressão das citocinas foi realizada por meio do teste de correlação de Spearman. O Risco Atribuível Populacional foi avaliado através da Fórmula de Levin. Resultados: Gestantes com pré-eclâmpsia apresentaram maior expressão do RNAm do TNFa, mas não diferiram do grupo-controle em relação à IL-6. Os dados evidenciaram associação entre a periodontite e a pré-eclâmpsia [odds ratio ajustado = 3,73 (IC 95% 1,32 a 10,58)]. Não houve correlação entre a periodontite e a expressão do RNAm das citocinas TNFa e IL-6. Conclusão: Observou-se associação clínica significativa entre a periodontite e a pré-eclâmpsia; no entanto, não se pôde confirmar a atuação das citocinas inflamatórias neste processo. Além disso, a maior expressão do TNFa em gestantes com pré-eclâmpsia reforça o envolvimento do sistema imunológico na doença / Abstract: Introduction: Periodontitis, an infectious disease affecting the supporting structures of the teeth, leads to local and systemic liberation of various inflammatory mediators. Preeclampsia, a disorder that occurs only during pregnancy and the postpartum period is characterized by high blood pressure and the presence of protein in the urine and also seems to have an immunological etiology, with increased plasma levels of some cytokines. Objectives: the aim of the present study was to explore existing literature surrounding the association between periodontitis and preeclampsia as well as to evaluate the influence of Tumor necrosis factor-alpha (TNFa) and Interleukin-6 (IL-6). This work also aimed to evaluate the association between periodontitis and preeclampsia development, including the analysis of systemic inflammatory cytokines. Methods: A review of the literature on the relationship between periodontal disease and preeclampsia was initially performed, followed by a case-control analysis of 116 pregnant women, 58 with preeclampsia (cases) and 58 normotense pregnant women (controls). Peripheral blood samples were also collected for laboratorial analysis of IL-6 and TNFa messenger RNA (mRNA) systemic expression, through realtime polymerase chain reaction (Real Time PCR). All participants underwent a clinical periodontal examination in order to assess the presence or absence of periodontal disease. Crude and adjusted odds ratio were calculated by multivariate logistic regression for exposure factors. Student's t-test, MannWhitney U-test, Fisher's exact test and Chi-Square test were used to ensure homogeneity of the groups. Mann-Whitney U-test was also used for intragroup comparison regarding level of cytokines and periodontal data. Correlations between all periodontal data and cytokines expression were determined by Spearman rank test. Population attributable risks were estimated using Levin's Formula. Results: the results showed increased TNFa mRNA expression from pre-eclamptic women as compared with normal pregnant women. There were no statistically significant differences in IL-6 between case and control groups. There was an association between periodontitis and preeclampsia [adjusted odds ratio = 3,73 (IC 95% 1,32 to 10,58)]. There was no correlation between periodontitis and IL-6 and TNFa messenger RNA (mRNA) expression. Conclusion: There was a significant clinical correlation between periodontitis and preeclampsia; however, an immunologic correlation via inflammatory cytokines could not be determined in our study. In addition, the high expression of TNF-a mRNA in pregnant women emphasizes the immunological mechanisms involved in periodontal disease / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Tocoginecologia

A cirurgia do fígado apresentou extraordinário avanço desde a primeira ressecção planejada realizada por Langenbuch em 1888, e o primeiro transplante de fígado realizado por Starzl em 1963, até atualmente quando extensas ressecções e transplantes de partes do fígado são possíveis. Isso se deve graças, entre outros fatores, ao reconhecimento da grande capacidade regenerativa do fígado. A regeneração hepática tem sido objeto de estudo por quase 100 anos, no entanto, o mecanismo pelo qual o hepatócito é estimulado à replicação não foi completamente elucidado. As citocinas têm papel fundamental no mecanismo de regeneração do fígado, destacando-se entre elas o TNF- e a IL-6. Elas favorecem a indução de outras citocinas e estimulam a regeneração. Elas, no entanto, contribuem também no mecanismo de lesão do hepátocito em situações como a da isquemia e reperfusão. Alguns dados da literatura são conflitantes e mostram respostas diferentes na regeneração hepática provocadas pela inibição do TNF-. A pentoxifilina é um derivado da metilxantina que tem uma potente ação inibidora da síntese de TNF-. O presente estudo visa a avaliar o efeito da administração de pentoxifilina na regeneração hepática em ratos submetidos a ressecção de 70% do parênquima hepático. Os animais foram divididos em 4 grupos: Controle, grupo I (laparotomia), Grupo II (hepatectomia + salina) e grupo III (hepatectomia + pentoxifilina). Foram realizadas dosagens de transaminases (AST e ALT) 2, 6 e 48 horas após o procedimento, de citocinas (TNF- e IL-6) no soro e no tecido hepático 2 e 6 horas após a operação, e realizado estudo histológico para avaliação do índice mitótico e do PCNA com o intuito de quantificar a regeneração hepática 48 horas após o procedimento. Os resultados mostraram que a pentoxifilina foi efetiva no bloqueio do TNF- e da IL-6 no soro, mas não no tecido hepático dos animais, e que esse bloqueio melhorou a regeneração hepática documentada pelo índice mitótico e pelo PCNA. Pudemos então concluir que a pentoxifilina, nas condições do presente estudo, melhorou a regeneração do fígado após ressecção de 70% do parênquima hepático por mecanismo relacionado a redução das citocinas séricas e manutenção das citocinas do tecido hepático / Liver surgery has grown extraordinarily from the first planned ressection performed by Langenbuch in 1888, and the first successful orthotopic liver transplantation by Starzl in 1963 to the extended liver resections and living donors liver transplantations currently performed in many centers. It occurred, among others factors, because of the recognition of the great liver regenerative capacity. Liver regeneration has been object of study for almost 100 years. However the mechanism by which hepatocytes replication is stimulated is not completely elucidated. Cytokines, mainly TNF- and IL-6, play a pivotal role in liver regeneration mechanism. However they also contribute to hepatocytes damage mechanisms, like in ischemia-reperfusion injury. Indeed some studies are conflicting, and show different effects of TNF- inhibition in liver regeneration. Pentoxifylline is a methylxanthine compound known to inhibits TNF- production by monocytic cells. The present study aims to evaluate the effect of pentoxifylline in liver regeneration in rats submitted to 70% hepatectomy. The animals were randomized into 4 groups: Control, group I (sham), Group II (hepatectomy + saline) and group III (hepatectomy + pentoxifylline). AST and ALT serum levels were determined at 2, 6 and 48 hours after the procedure, TNF- and IL-6 serum levels and liver tissue levels were determined at 2 and 6 hours after the operation. Mitotic index and PCNA were performed to quantify liver regeneration 48 hours after the procedure. We found that pentoxifylline reduces TNF- and IL-6 serum levels, without changes in the liver tissue levels. These results were associated with an improvement liver regeneration evaluated by the mitotic index and the PCNA. We concluded that pentoxifylline improved liver regeneration after 70% hepatectomy by a mechanism that comprises blood but not hepatic cytokines reduction

Resumo: A rotura prematura de membranas pré-termo (RPM-PT), é uma das principais causas de prematuridade, ocorrendo em 30% a 40% dos nascimentos prematuros. Sua etiologia está relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Quantificar a expressão de IL-18 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com a presença de corioamnionite histológica. Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto. Como grupo controle, foram avaliadas 30 gestantes normais, fora de trabalho de parto, que tiveram indicação de cesárea para resolução da gestação de termo. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm de interleucina (IL)-18 pela técnica de PCR em tempo real. Outros fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2%. A presença de corioamnionite foi de 44% no grupo RPM-PT. A concentração relativa de RNAm de IL-18 não foi estatisticamente diferente nos grupos estudados. Não houve relação entre concentração relativa de RNAm de IL-18 e presença de corioamnionite. Conclusão: A RPM-PT não é capaz de induzir aumento na concentração relativa de RNAm de IL-18 e não existe relação entre expressão relativa dessa citocina e corioamnionite. / Abstract: Preterm premature rupture of the membranes (PPROM) is one of the major causes of prematurity, accounting for 30-40% of all preterm births. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. To quantify the expression of the inflammatory cytokine interleukin-18 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the correlation of this expression with the presence of the chorioamnionitis present in the membranes. Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 normal pregnant that underwent selective cesarean section without labor were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. In the study period, the incidence of PPROM was 6.2% and in 44% of these samples the presence of chorioamnionitis was observed. mRNA expression of IL-18 was not statistically different in the groups studied. No difference occurred in the presence of chorioamnionitis in the membranes and the concentration of IL-18 mRNA. Conclusion: The concentration of IL-18 mRNA in the chorioamniotic membranes was not statistically different in the groups studied and this cytokine in PPROM is not related with the presence of the chorioamnionitis in the membranes. / Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Coorientador: José Carlos Peraçoli / Banca: Tânia Machado de Alcântara / Banca: Cilmery Suemi Kurokawa / Mestre

Orientador: Maria Aparecida Coelho de Arruda Henry / Resumo: A doença do refluxo gastroesofágico (DRGE) é uma das mais importantes afecções digestivas, tendo em vista as elevadas e crescentes incidências, a intensidade dos sintomas e a gravidade das complicações. Existem alguns grupos de riscos independentes para o desenvolvimento desta doença e a obesidade está entre os principais fatores de risco para a DRGE. A DRGE pode acarretar em algumas complicações como o desenvolvimento de esôfago de Barrett, estenose, úlcera e sangramento esofágico, além de perda da qualidade de vida. Síndrome metabólica (SM) é uma associação central da obesidade, definido por medidas de circunferência abdominal em relação ao IMC, seguido por outros parâmetros como triglicérides alto, colesterol HDL baixo, pressão sistólica e/ou diastólica elevadas e glicemia em jejum acima de 100 mg/dL ou ainda algum tratamento prévio para uma ou mais dessas doenças citadas. A observação da possível associação de alterações clínicas às disfunções celulares e moleculares em pacientes com DRGE e/ou SM, torna-se crucial para o melhor entendimento da doença, bem como fornecer subsídios para a busca de novas alternativas terapêuticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a relação dos aspectos clínicos e celulares da DRGE e SM. Os resultados encontrados sugerem que há uma relação entre DRGE e a presença de SM ou obesidade central e ainda sugere que pessoas com circunferência abdominal, triglicérides e HDL alterados, podem apresentar DRGE. Também foram encontrados marcadores mol... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Gastroesophageal reflux disease (GERD) is one of the most important digestive disorders, due to the high and increasing incidence, the intensity of the symptoms and the severity of the complications. There are some groups of independent risks for the development of this disease and obesity is among the main risk factors for GERD. GERD can lead to complications such as the development of Barrett's esophagus, stenosis, ulcer and esophageal bleeding, and loss of quality of life. Metabolic syndrome (MS) is a central association of obesity, defined by measures of waist circumference in relation to BMI, followed by other parameters such as high triglycerides, low HDL cholesterol, elevated systolic and / or diastolic blood pressure and fasting glycemia above 100 mg/dL or some previous treatment for one or more of these diseases. The observation of the possible association of clinical alterations to cellular and molecular dysfunctions in patients with GERD and / or MS is crucial for a better understanding of the disease, as well as providing subsidies for the search for new therapeutic alternatives. The aim of this study was to evaluate the relationship between clinical and cellular aspects of GERD and MS. The results suggest that there is a relationship between GERD and the presence of MS or central obesity and also suggests that people with altered abdominal circumference, triglycerides and HDL may present GERD. Different molecular markers were also found in the GERD + MS and MS gr... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre