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Estudo da resistividade das vias aéreas em camundongos obesosTEIXEIRA, Vanessa Pereira 07 February 2014 (has links)
A obesidade está aumentando de forma epidêmica em todo o mundo e a mesma possui efeito profundo na fisiologia da respiração, estando associada com estado de crônica inflamação sistêmica, que pode promover a hiper-reatividade das vias aéreas. Para estudar os processos que ocorrem nas vias aéreas, o presente estudo teve como objetivo avaliar a resistividade das vias aéreas de camundongos da linhagem Swiss induzidos à obesidade. Como metodologia foi realizada a análise dos efeitos da indução da obesidade pelo modelo de redução de ninhada; mecânica respiratória para analisar a resistividade do sistema respiratório pela mensuração das variáveis: elastância tecidual (Htis), das resistências dos pulmões (Gtis) e das vias aéreas (Raw) e histeresividade (η); análise morfométrica do tecido pulmonar para quantificar as células inflamatórias e os alvéolos normais, colapsados e hiperinsuflados; quantificação das proteínas colágeno III e elastina dos animais da ninhada normal e reduzida por meio da técnica do Western Blot, para verificar a presença de remodelamento. De acordo com os resultados obtidos foi possível constatar a eficácia do modelo de indução, pois houve aumento do peso corporal, do índice de Lee e da massa de gordura periepididimal e retroperitoneal. Com relação à mecânica pulmonar, não houve diferença entre os grupos para os valores basais, após a administração de salina (Sal) e metacolina (MCh), nos parâmetros Raw, Gtis, Htis e η. Frente ao desafio com salbutamol (Salb), apenas o η, que representa relação entre dissipação e conservação de energia nos tecidos pulmonares, apresentou diferença entre os grupos, sendo maior no grupo ninhada reduzida. Esse resultado pode ser atribuído a heterogeneidade acarretada pela broncoprovocação e a diminuição da resposta a broncodilatadores promovida pela inflamação e pela alteração da matriz extracelular. Houve diminuição de alvéolos normais e aumento do colapso alveolar, que pode acarretar aumento da viscoelasticidade pulmonar e heterogeneidade apresentada pelo mesmo o que também pode ser atribuído à presença do aumento de colágeno III e diminuição da elastina, encontrados neste estudo. Essa alteração do conteúdo de fibras colágenas e elásticas sugere um processo de remodelamento. Houve aumento de células inflamatórias mononucleares e polimorfonucleares o que indica presença de processo inflamatório, que também pode auxiliar no processo de remodelamento e desencadear hiper-responsividade. Portanto, a obesidade acarretou aumento de células inflamatórias, alterações na matriz extracelular do parênquima pulmonar e colapso alveolar nos animais da ninhada reduzida, porém não houve modificação
nos parâmetros Raw, Gtis, Htis da mecânica pulmonar entre os grupos e no parâmetro η houve diferença após a administração do salbutamol, demonstrando que não houve alteração da responsividade. / Obesity is increasing in epidemic form throughout the world and it has a profound effect on the physiology of respiration and is associated with a state of chronic systemic inflammation, which can promote the hyperreactivity of the airways. To study the processes that occur in the airways, this study aimed to evaluate the resistivity of the airways strain obesity induced Swiss mice. We analyzed the effects of induction of obesity by reducing litter model; respiratory mechanics, to analyze the resistivity of the respiratory system by: tissue elastance (Htis), the resistances of the lungs (Gtis) and airway (Raw) and histeresividade (η), morphometric analysis of lung tissue for quantification of inflammatory cells and normal, collapsed and hyperinflated alveoli; quantification of the proteins collagen type III and elastin in animals normal and litter reduced by the technique of Western Blot to verify the presence of remodeling. According to the obtained results it can be seen that the induction model was effective because there was an increase in body weight, Lee index and mass periepididymal and retroperitoneal fat. With respect to lung mechanics, there was no difference between groups for baseline values after administration of saline (Sal) and methacholine (MCh) in Raw, Gtis, Htis and η parameters. Upon salbutamol (Salb) challenge, only the η, which represents a relationship between dissipation and energy conservation in the lung tissues, differed between groups, being higher in reduced litter group. This result can be attributed to heterogeneity entailed by bronchial provocation and diminished response to bronchodilators promoted by inflammation and alterations of the extracellular matrix. There was a decrease in normal alveoli and alveolar collapse increases, which can lead to an increased heterogeneity of lung and viscoelasticity for the same which can be attributed to the presence of increased and decreased collagen III, elastin, found in this study. This change of the content of collagen and elastic fibers suggests a remodeling process. There was an increase of mononuclear and polymorphonuclear inflammatory cells indicating the presence of inflammation, which can also aid in the remodeling process and lead to hyper- responsiveness. Therefore, obesity caused increase in inflammatory cells, changes in the extracellular matrix of the lung parenchyma and alveolar collapse in animals reduced litter, but there was no change in Raw, Gtis, Htis parameters of pulmonary mechanics between groups and the parameter η was no difference after administration of salbutamol, demonstrating that there had no change in responsiveness. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Preparação e caracterização de micropartículas de colágeno ou fibroína como suporte para células-tronco / Preparation and characterization of collagen or fibroin microparticles as support for stem cellsMontanha, Vanessa Camila 22 October 2012 (has links)
Diversos biomateriais podem ser aplicados na engenharia de tecidos, mas poucos são utilizados em contato direto com células-tronco na forma de suportes de micropartículas, devido à falta de adesão, espalhamento e toxicidade do material, de forma que os tornam inviáveis junto ao cultivo celular. Um biomaterial promissor para bioengenharia é a fibroína, proteína fibrosa presente no casulo do bicho da seda (Bombyx mori), devido à sua resistência mecânica, biocompatibilidade e mínima reação inflamatória, porém, suas caracteristicas são pouco conhecidas na literatura. O mesmo não ocorre com o colágeno que já é bastante estudado por pesquisadores e, assim como a fibroína, apresenta propriedades naturais que incluem baixa resposta imunológica, baixa toxicidade e habilidade de promover o crescimento celular, porém o uso do colágeno em sua maior parte é em forma de filmes, esponjas e membranas. Como existem poucos métodos relacionados para preparação e caracterização de micropartículas em formatos esféricos e porosos, este trabalho teve por objetivo desenvolver e caracterizar micropartículas à base de colágeno ou fibroína, tratadas ou não com glutaraldeído (GA), para ser utilizado como suporte para células-tronco mesenquimais e avaliar a citotoxicidade destes materiais em cultura celular.Nos resultados de Calorimetria Exploratória Diferencial para ambos os materiais, colágeno e fibroína quando submetidas a tratamento com GA, a temperatura de desnaturação e degradação aumenta, respectivamente. Na microscopia ótica, eletrônica de varredura e birrefringência, observa-se o aparecimento de rugosidade e poros e/ou bolhas de ar no interior das micropartículas em maior quantidade quando tratadas com GA, o que pode ser um fator positivo para aderência celular no suporte. A porcentagem de água absorvida é maior no colágeno devido às estruturas hidrofóbicas em maior quantidade na fibroína, porém, quando tratadas com GA, a absorção é estabilizada em um curto tempo em ambos os materiais. Os picos nos espectros de FTIR mostram as bandas amidas I, II e III dos materiais e as alterações sofridas quando em contato com GA e os testes de citotoxicidade que ambos materiais tratados ou não, são atóxicos, mas o desenvolvimento celular nas micropartículas de fibroína é mais lento e diminui quando tratados com GA, por possuir mais estruturas ordenadas na forma de -folha quando se necessita de um crescimento mais controlado das células nas micropartículas. / There are several biomaterials can that be used in tissue engineering, but few are used in direct contact with stem cells like scaffold in the microparticle form, because of the lack of adhesion, spreading and toxicity of the biomaterial, in order to make them nonviable in the cell culture. A promising biomaterial for bioengineering is fibroin, a fibrous protein present in the fibers of silkworm (Bombyx mori) cocoon, because of its mechanical strength, biocompatibility and minimal inflammatory reaction; however, little is still described in the literature. Not so with the collagen that is already well studied by researchers and as the fibroin, has natural properties that include low immune response, low toxicity and ability to promote cell growth, but the use of collagen is mostly in form of films, sponges and membranes. As there are few methods reported for preparation and characterization of microparticles in spherical shapes and porous, this study aimed to develop and characterize microparticles based on collagen or fibroin, treated or not with glutaraldehyde (GA), to be used as a support for cells mesenchymal stem cells and evaluating the cytotoxicity of these materials in cell culture.In the results of Differential Scanning Calorimetry (DSC) curves for both materials, collagen and fibroin when subjected to treatment with GA, the denaturation and degradation temperatures increases, respectively. In Optical Microscopy, MSCanning electronic Microscopy and Birefringence results, it is observed the onset of surface roughness and porosity and or air pockets within the microparticles in greater quantity when treated with GA, which may be a positive factor for cell attachment on the support. The percentage of water absorbed is greater in the collagen structures due to more hydrophobic structure than silk fibroin, but when in treated with GA, absorption is stabilized in a shorter time in both materials. The peaks in FTIR spectra show bands amide I, II and III of the materials and the changes suffered when in contact with GA and cytotoxicity tests are non-toxic to both biomaterials treated or not, however, in the growth of cells, the fibroin microparticles is slower and decreases when treated with GA, due to its more ordered structure in the form of -sheet and more spherical than collagen due to its more ordered -sheet structures, which may be very interesting when it needs a more controlled growth of cells on microspheres.
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Avaliação estrutural e quantificação de colágeno na porção atrial do coração de cães sadios e diabéticos / Structural evaluation and quantification of collagen in the atrial portion of the heart healthy and diabetic dogsPereira, Miler Rodrigo 18 December 2009 (has links)
O coração é formado por tecido muscular especializado e por um esqueleto de tecido conjuntivo que sustenta e dá inserção a musculatura. Este tecido conjuntivo é formado predominantemente por fibras colágenas tipo I, tipo III e fibras elásticas, as quais influenciam diretamente as propriedades estruturais e funcionais do miocárdio. Algumas doenças podem provocar alterações qualitativas e quantitativas no colágeno comprometendo a funcionalidade do órgão. Diante da inexistência de informações sobre os efeitos diretos do diabetes na estrutura atrial e a concentração de pesquisas em torno dos ventrículos, especialmente o esquerdo, que está ligado à circulação sistema, a proposta deste trabalho foi analisar as alterações morfológicas quantitativas e qualitativas do colágeno nas câmaras atriais comparando as diferenças entre os grupos de cães sadios e diabéticos. Além disto, esta pesquisa verificou a distribuição de outros constituintes do átrio como fibras elásticas e colágenas do tipo III. Foram utilizados corações de cães sem raça definida, machos e fêmeas, sadios e diabéticos. As estruturas foram examinadas por microscopia óptica, imunofluorescência e microscopia eletrônica de varredura. A taxa de colágeno nos átrios de cães diabéticos foi maior do que nos átrios de cães sadios. Isso indica que há uma mudança estrutural nos átrios de animais com doença metabólica, a partir da verificação de uma proteína estrutural importante como o colágeno. / The heart is composed of specialized muscle tissue and a skeleton of connective tissue that supports and gives muscle insertion. This tissue connective is formed predominantly of collagen type I, type III and elastic fibers, which directly influence the structural and functional properties of the myocardium. Some diseases can cause qualitative and quantitative changes in collagen compromising the functionality of the organ. Due to the lack of information on the direct effects of diabetes on atrial structure and the concentration of researches about the ventricles, especially the left, which is connected to the macro circulation system, the purpose of this study was to analyse the morphological quantitative and qualitative collagen in the chambers atrial comparing the differences between the groups of healthy and diabetic dogs. Moreover, this study found the distribution of other constituents like elastic and collagen type III fibers. We used hearts of mongreal dogs, males and females, healthy and diabetics. The structures were examined by light microscopy, immunofluorescence and scanning electron microscopy. The rate of collagen in the atria of diabetic dogs was greater than in the healthy dogs. This indicates that there is a structural change in the atria of animals with metabolic disease, from the finding of a major structural protein like collagen.
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Estudo comparativo pré e pós luz intensa pulsada no tratamento do fotoenvelhecimento cutâneo: avaliação clínica, histopatológica e imunoistoquímica / Comparative study of pre and post pulsed intense light in the treatment of skin photoaging: clinical evaluation, histopathologic and immunohistochemistryPatriota, Regia Celli Ribeiro 14 May 2009 (has links)
Introdução: A luz intensa pulsada(LIP) tem sido muito utilizada no tratamento do fotoenvelhecimento sem completo conhecimento de seu mecanismo de ação. Métodos: Foram acompanhados 26 pacientes apresentando fotoenvelhecimento grau II-III (GLOGAU, 1994), os quais foram submetidas à avaliação clínica , histológica e imunoistoquímica 6 e 12 meses após o término do tratamento com LIP. Foram realizadas cinco sessões com intervalos de trinta dias. Além da quantificação histomorfométrica das fibras colágenas e elásticas na derme, foram avaliados CD1, CD4, CD8 e ICAM-1. Resultados: Após 6 meses houve melhora clínica moderada e intensa em 76,92% dos casos e a nota média de satisfação foi 8,57 correspondendo à melhora moderada. Após 12 meses do término do tratamento observou-se que 51,52% das pacientes apresentaram uma melhora clínica moderada em relação à clínica inicial. Os efeitos colaterais foram eritema (11/26), edema (10/26), ardência (7/26) e crostas (8/26). A quantificação das fibras colágenas mostrou aumento médio de 51,33% proporção média de fibra colágena na derme após 6 meses de tratamento e o aumento em relação a 12 meses do término do tratamento foi 30,17%; as fibras elásticas mostraram aumento de 44,13% após 6 meses e aumento de 143,19% após 12 meses do término do tratamento. Na análise imunoistoquímica não houve alteração de CD1 e CD8. Em relação ao CD4 houve redução significante após 12 meses do término do tratamento. Quanto ao ICAM-1 houve aumento em 6 meses com retorno aos níveis normais após 12 meses do término do tratamento. Conclusão: A melhora clínica observada foi comprovada pelo estudo histopatológico, que mostrou aumento das fibras colágenas e elásticas na derme. Após 12 meses do término do tratamento observou-se discreta redução do aspecto clínico da pele correlacionado ao histopatológico. Poucos efeitos colaterais foram observados, sendo todos reversíveis. Desta forma, a LIP constitui boa opção de tratamento para o fotoenvelhecimento cutâneo, sendo uma técnica não ablativa, segura e eficaz. / Introduction: The intense pulsed light has been used in the treatment of photoaging without full knowledge of its mechanism of action. Material and Methods: 26 patients were followed-up presenting photoaging grade II-III (GLOGAU, 1994), who were submitted to clinical evaluation, histological and immunohistochemistry 6 and 12 months after the treatment termination with LIP. Five sessions were made with 30-day intervals. In addition to histomorphometric quantification of collagen and elastic fibers in the dermis, CD1, CD4, CD8 and ICAM-1 were evaluated. Results: After 6 months there were moderate and intense clinical improvement on 76.92% of the cases and the mean score of satisfaction was 8.57 corresponding to moderate improvement. After 12 months of the treatment termination, it was observed that 51.52% of the patients presented a moderate clinical improvement in relation to initial clinic. The side effects were erythema (11/26), edema (10/26), burning (7/26) and crusts (8/26). The quantification of collagen fibers has shown mean increase of 51.33% in the dermis after 6 months of treatment and the increase regarding to 12 months of the treatment termination was of 30.17%; the elastic fibers has shown an increase of 44.13% after 6 months and increase of 143.19% after 12 months of the treatment termination. In the immunohistochemistry analysis there was no alteration of CD1 and CD8. In relation to CD4, there was a significant reduction after 12 months of treatment termination. Regarding the ICAM-1, there was an increase in 6 months with return to normal levels after 12 months of treatment termination. Conclusion: The observed clinical improvement was verified by the histopathologic study, which showed increase in the elastic and collagen fibers in the dermis. After 12 months of treatment termination, it was observed a discrete reduction of clinical aspect of skin correlated to histopathology. A few side effects were observed, being all reversible. Thus, LIP constitutes good option of treatment for skin photoageing, being a non-ablative, safe and effective technique.
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Arranjo estrutural das fibras de colágeno do coração de cães normais e diabéticos / Structural arrangement of collagen fibers of the heart of normal and diabetic dogsBenedicto, Hildebrando Gomes 21 October 2005 (has links)
O coração é formado por um músculo especializado, cuja forma e função são fundamentais para o trabalho adequado e por um esqueleto de tecido conjuntivo que sustenta e dá inserção a esta musculatura cujas fibras, predominantemente colágenas, são responsáveis por certas propriedades do tecido. Esse colágeno é a única proteína do organismo que mostra mudanças conforme a idade como a tensão e distensão. A associação do diabetes mellitus e doenças cardiovasculares já foi estabelecida, sua relação com aumento das fibras colágenas cardíacas, ainda, permanece indefinido, porém os diabéticos apresentam aumento do risco de falência e fibrose cardíaca. Nosso objetivo, portanto, foi o de identificar o arranjo estrutural e arquitetônico das fibras de colágeno presentes no músculo cardíaco de cães normais e diabéticos, comparando e analisando seus aspectos morfológicos, bem como, comparar as diferenças existentes entre animais jovens e idosos. Para tanto utilizamos corações de animais normais e diabéticos submetidos ao processo de digestão controlada em NaOH e observados em microscopia eletrônica de varredura. Nossos resultados mostram que as fibras de colágeno da parede endomisial têm arranjo estrutural arquitetônico em forma de rede irregular de uma camada em cães normais e em cães idosos e diabéticos essa rede sofre um remodelamento adquirindo maior quantidade de fibras e de camadas se mostrando como um tapete de fibras modificando as relações de tensão/força do tecido. / The heart is composed by a specialized muscle, whose form and function are essential for an adequate work and for an amount of connective tissue which support and provide insertion for this muscle whose fibers, predominantly collagen, are responsible for determination of tissue feature. The collagen is the only protein of the organism that shows some changes according to the age, such as tension and distension. The association between diabetes and cardiovascular disease has already been established, but their relationship with increase of the cardiac collagen fibers, however, is still obscure, but the diabetics showed increase of the failure risk and cardiac fibrosis. Our objective was to identify the structural arrangement and architecture of the cardiac collagen fibers in normal and diabetic dogs, comparing the differences between young and old animals. Hearts of the normal and diabetic animals submitted to the process of the controlled digestion were used and observed by scanning electron microscope. Our results showed that the collagen fibers of the endomisial wall have structural arrangement and architecture composed by a irregular network with one layer in normal dogs but in diabetic dogs the network acquires a greater amount of the fibers and layers, looking like a \"rug\" of fibers modifying the relationships of the stress/strain of the tissue.
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Análise comparativa dos elementos estruturais e ultra-estruturais do músculo cardíaco em cães sadios e diabéticos / Comparative analysis of the structural and ultra-structural elements of the cardiac muscle in healthy and diabetic dogsAlbuquerque, Isaac Manoel Barros 15 March 2006 (has links)
A presente investigação científica visa estabelecer biometricamente a análise comparativa dos elementos estruturais e ultra-estruturais que compõe o músculo cardíaco, em cães sadios e diabéticos, avaliando a proporção existente entre a quantidade de tecido conjuntivo e a de fibras musculares cardíacas, estudando a densidade vascular presente no músculo cardíaco e quantificando a proporção de organelas presentes naquelas fibras. Utilizou-se doze corações de cães, machos e fêmeas, sendo seis animais sadios e seis animais diabéticos, onde efetuou-se a mensuração do coração em seus eixos longitudinal e transversal e, ainda as espessuras das paredes dos ventrículos e do septo interventricular. Submeteu-se o músculo cardíaco ao estudo de seus elementos estruturais a partir do emprego da microscopia de luz analisados com auxílio de Programa de Análise de Imagem e Morfometria KS-400 Zeiss®. Já, os elementos ultra-estruturais foram investigados através do emprego da microscopia eletrônica de transmissão. Os dados obtidos foram tratados estatisticamente considerando-se as variáveis relativas ao sexo na presença ou não de diabetes. / The present scientific inquiry aims at biometrically to establish a comparative analysis of the structural and extreme-structural elements that composes the cardiac muscle in healthy and diabetic dogs. This will be given evaluating the existing ratio enters the conjunctive amount of fabric and of cardiac muscular staple fibers, studying the present vascular density in the cardiac muscle and still quantifying the ratio of organelles existents in those staple fibers. For in such a way we will use twelve hearts of dogs, males and females, being six healthy animals and six diabetic animals. We will effect the mensuration of the heart in its longitudinal and transversal axles, still the thicknesses of the walls of the ventricles and septum to interventricular, with digital aid of electronic paquimeter. The cardiac muscle was submitted to the study of its structural elements using Microscopy of light analyzed with aid of optic microscope Axioscópio Zeiss® and the Program of Analysis of Image and Morfometric Ks-400 Zeiss®. Already, the extreme-structural elements was investigated through the electronic Microscopy of transmission, evaluating themselves thus the ultra fine cuts from the attainment of the electromicrografics gotten in electron microscope Jeol 1010. The gotten data was treated statistically considering the relative variable the sex, in relation to the healthy animals and those diabetic ones.
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Estudo ultraestrutural e imunohistoquímico do estroma uterino durante a gestação de camundongos deficientes em decorim. / Ultrastructural and immunohistochemical studies of the uterine stroma in the decorin-deficient mice during pregnancy.Sanches, Juliane Cristina Trevisan 27 March 2009 (has links)
No presente estudo realizamos uma análise ultraestrutural e imuhistoquímica da organização das fibrilas de colágeno no endométrio durante a gestação de camundongos silvestres e deficientes em decorim. Os resultados mostraram que as fibrilas de colágeno em ambos os genótipos sofrem grande variação de forma e tamanho. Observou-se variação significante, na percentagem de distribuição dos diâmetros das fibrilas de colágeno existentes na região decidualizada em ambos os genótipos, porém foi maior nos animais Dcn-/-. Estes animais também apresentam maior percentagem de fibrilas finas quando comparados aos animais Dcn+/+. Observamos ainda que biglicam é expresso no endométrio não decidualizado dos animais Dcn-/-, no 3º dia de gestação. A expressão de lumicam mostrou-se nítida no estroma decidualizado e não decidualizado nos animais Dcn-/- no 7º dia de gestação e foi ausente nos animais Dcn-/-. Estes resultados mostraram que a ausência do decorim promove distúrbios no processo de agregação lateral das fibrilas espessas de colágeno. / The present study is an ultrastructural investigation into the organization of collagen fibrils in the pregnant endometrium of wild-type and decorin-deficient mice. Our results showed that collagen fibrils from both genotypes present a great variability of shape and size in cross section. Significant variation in the diameter of collagen fibrils exists in the decidualized endometrium from both groups of animals. In the decidualized endometrium, the diameter of collagen fibrils increases in both genotypes were higher in Dcn-/- than in Dcn+/+ animals. In the Dcn-/- animals the percentage of thin fibrils with diameter is also higher, when compared with Dcn+/+ animals. We also showed that Bgn is expressed in the non decidualized endometrium in the Dcn-/- animals, on day 3 of pregnancy. The expression of lumican showed a very sharp labeling in the decidualized stroma from day 7, and in the non decidualized estroma from Dcn-/- animals. These results suggest that the deficience of decorin may play a role on collagen fibrillogenesis in different stages of pregnancy.
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Efeitos do bloqueador do canal de cálcio (Verapamil) sobre fibroblastos dérmicos humanos. / Effects of calcium channel blocker (Verapamil) on human dermal fibroblasts.Boggio, Ricardo Frota 16 June 2008 (has links)
O excesso de tecido cicatricial (quelóides e cicatrizes hipertróficas) é um defeito do processo de cicatrização das feridas, caracterizado por um aumento na produção da matriz extracelular. Neste estudo, fibroblastos dérmicos humanos tratados com 50 <font face=\"symbol\">mM verapamil apresentaram discreta modificação na distribuição dos microfilamentos e alteraram sua morfologia de fusiformes para estrelados/arredondados. Estes efeitos poderiam estar associados a baixos níveis de cálcio citosólico. Esta hipótese foi confirmada através marcação de fibroblastos tratados com calcium green. Observamos também, que o verapamil inibiu a proliferação celular em 64,4%, aumentou a secreção de MMP1 e diminuiu o colágeno sintetizado pelos fibroblastos, sem aparentes efeitos citotóxicos. O metabolismo celular do cálcio está aparentemente relacionado a produção da matriz extracelular e portanto as patologias hipertróficas da cicatrização (quelóides e cicatrizes hipertróficas) podem responder ao tratamento com bloqueadores do canal de cálcio (verapamil). / Excessive scar tissue (keloids and hypertrophic scars) is a defective wound healing process characterized by overproduction of extracellular matrix. In the present study human dermal fibroblasts treated with 50 <font face=\"symbol\">mM verapamil changed their normal spindle-shaped morphology to stellate/rounded and showed discrete reorganization of microfilaments We hypothesized that these effects would be associated to lower levels of cytosolic Ca2+. Indeed, short time loading with calcium green confirmed that verapamil-treated fibroblasts exhibited lower intracellular calcium levels. We also observed that verapamil decrease cellular proliferation by 64.4%, increase the secretion of MMP1 and decrease synthesis of collagen in cultured fibroblasts. This alterations induced by verapamil are not associated with cytotoxic effects. The cellular calcium metabolism appears to regulate extracellular matrix production and so those hypertrophic disorders of wound healing (keloids and hypertrophic scars) may respond to therapy with calcium antagonist drugs (verapamil).
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Estudo histomorfofuncional de fígado de primatas (Callithrix jacchus) criados em cativeiro / Histomorphofunctional study in liver from captive Callithrix jacchus primates.Carvalho, Yuri Karaccas de 07 August 2012 (has links)
O Sagui-de tufo-branco (Callithrix jacchus) vem sendo utilizado como modelo experimental em inúmeras pesquisas. Entretanto, características anatômicas e fisiológicas dessa espécie são pouco conhecidas. O propósito do estudo foi avaliar microscopicamente o fígado de Callithrix jacchus criados em cativeiro. Neste estudo utilizou 31 saguis-do-tufo-branco do Centro de Primatas da Alemanha. Após a eutanásia, os fígados foram resfriados, dissecados, mensurados e rocessados por meio de técnicas histológicas. As colorações Hematoxilina e Eosina, Picrossírius, Fucsina Ácida, Gordon & Sweet´s e o Ácido Periódico de Schiff (PAS) foram usadas para observar respectivamente o arranjo do parênquima hepático, colágeno, reticulina e glicogênio. As mensurações foram organizadas em grupos conforme o sexo, a idade e o exame. A idade dos animais foi de 4,3±2,4 anos. A massa corpórea foi de 427±66g, com diferença significativa nos grupos exames. A massa do fígado foi 25,6±13,1g. O fígado de Callithrix jacchus apresenta lóbulos hepáticos pouco definidos. Os hepatócitos apresentaram-se poliédricos, mono ou binucleados. O colágeno estava nos capilares sinusóides, no espaço porta-hepático e na veia centrolobular, com valor de 6,59±3,66% (Picrossirius) e 5,89±3,37% (Fucsina Ácida). A reticulina mostrouse presente principalmente nos capilares sinusóides, com valor de 18,86±6,47%. O glicogênio estava distribuído ao longo do lóbulo hepático e com concentrações próximas à veia centrolobular, com valor de 23,92±7,72%. A alimentação e hábitos em cativeiro podem interferir no aumento de massa e no desenvolvimento de doenças. O parênquima hepático de Callithrix jacchus não apresentou grandes alterações nos diferentes grupos formados, além de se assemelhar a de outras espécies, o que reforça o uso dessa espécie como modelo experimental. / The marmoset-white stuff (Callithrix jacchus) has been used as an experimental model in many studies. However, anatomical and physiological characteristics of this species are poorly known. The purpose of this study was to evaluate microscopically the liver of captive Callithrix jacchus. Thirty one Callithrix jacchus from Primate Center in Germany were studied. After euthanasia, livers were cooled, dissected, measured and processed by histological techniques. The hematoxylin and eosin staining, Picrosirius, Acid Fuchsin, Gordon & Sweet\'s and periodic acid-Schiff (PAS) were used respectively to observe the arrangement of the hepatic parenchyma, collagen, reticulin and glycogen. The data collected were organized into groups according to sex, age and examination. The average age of the animals was 4.3±2.4 years. The average body weight was 427±66g, with a significant difference in the groups exams. The average mass of the liver was 25.6±13.1g. Despite Callithrix jacchus presented liver lobe, it was not well defined. Morphologically the hepatocytes were polyhedral, mono or binucleate. The collagen was in the sinusoidal capillaries in the portal space and the hepatic central vein, with a value of 6.59±3.66% (Picrosirius) and 5.89±3.37% (Acid Fuchsin). The reticulin was present mainly in the capillary sinusoids, with a concentration of 18.86±6.47%. The glycogen was distributed throughout the liver lobule and near the central vein, with a value of 23.92±7.72%. The feeding habits can interfere with the increase in mass and in the occurrence of disease on captive animals. The hepatic parenchyma of Callithrix jacchus showed no major changes in the different groups of this study. Additionally the hepatic parenchyma of Callithrix jacchus resembles other species, which reinforces the use of this species as an experimental model.
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Efeito de terapias na modulação do granuloma paracoccidioidomicótico. / Effect of Therapy on Paracoccidioidomicotic Granuloma Modulation.Molina, Raphael Fagnani Sanchez 07 December 2010 (has links)
A paracoccidioidomicose é uma micose sistêmica caracterizada por ser uma doença granulomatosa. As formas benignas da doença são caracterizadas por uma infecção localizada, contendo granulomas compactos com poucos fungos; já nas formas mais graves, ocorre um processo granulomatoso frouxo com focos de necrose e intensa disseminação fúngica. Objetivou-se avaliar o desenvolvimento de lesões granulomatosas em baço, fígado, pulmão e epiplon de camundongos, após infecção pela via intraperitoneal com o isolado de alta virulência, Pb18, em diferentes períodos de infecção após tratamento com fármacos, os quais possuem mecanismo de ação relacionado com a alteração no balanço entre a síntese e degradação dos produtos do colágeno, interferindo diretamente na formação do granuloma A citocina IFN-<font face=\"Symbol\">g, o antibiótico Tetraciclina e as drogas antiinflamatórias Lumiracoxib e Celecoxib. Avaliamos a presença de alguns componentes do granuloma (colágeno, células do infiltrado inflamatório, de citocinas primordiais para sintese/degradação da MEC do granuloma, presença de P. brasiliensis). / Paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic mycosis that is endemic in Latin America, whose causative agent is the thermal dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb). PCM is a granulomatous disease, and the formation of granulomas can be understood as a mechanism of the body to block and limit the invasiveness of the fungus or its antigenic components, once unable to lyse them. Bening forms of the disease are characterized by a localized infection, where granulomasa are compact and contain few fungi. More severe forms present loose granulomatous processes with foci of necrosis and severe fungal. Studies in which granulomatous response was developed in resistant (A/J) and susceptible (B10.A) mice to the high virulence isolate Pb18 showed the presence of different patterns of injuries related to the type of extracellular matrix (ECM) components and the different cells types in the area, suggesting a important role of these elements in the formation and constitution of the granuloma and thus the outcome of infection. In our project, we aimed to evaluate the development of granulomatous lesions in the spleen, liver, lung and omentum of mice susceptible to PCM after intraperitoneal infection with Pb18, at different periods of infection (acute and chronic) with or without treatment with drugs. These drugs have mechanisms of action closely related to the change in the balance between synthesis and degradation of collagen Thus, they interfere directly in the granuloma formation and in maintaining the viability of fungi and also with the development of fibrosis. Which is a common and devastating sequelae of numerous infections including the PCM, with the characteristic proliferation of fibroblasts and deposition of ECM. The treatments were chosen based on prior knowledge on their effects on the course of experimental murine PCM. IFN-<font face=\"Symbol\">g was chosen due to its antifibrotic effect, being an activator of macrophages in infection by P. brasiliensis and increasing the fungicidal effect of neutrophils. The antibiotic tetracycline was used because of its inhibitory effect on the synthesis of extracellular matrix, limiting antimicrobial activity and the ability of collagenase to degrade ECM. Finally, the antiinflammatory drugs Celecoxib and Lumiracoxib (inhibitors of the COX-2 enzyme) 11 were used because they cause an increase in the expression of collagen type III and type IV. We analyzed the components of the granuloma (collagen, inflammatory cells, cytokines essential for synthesis / degradation of the ECM of the granuloma, the presence of P. brasiliensis). Among the cytokines analyzed, we studied the importance of TNF-<font face=\"Symbol\">α in the formation of granulomas and regulation of matrix metalloproteinases (MMP) synthesis and function. We analyzed TGF-<font face=\"Symbol\">b because it negatively modulate the secretion of nitric oxide by macrophages and promote the accumulation of ECM and is believed to be the central mediator of the process of fibrosis in several pathologies. IFN-<font face=\"Symbol\">g was studied because of its correlation to the preferential Th1 immune response in diseases and infectious processes of fungal and bacterial infections, and also because it modulates fibroblast function.
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