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Estudo da ecofisiologia de plântulas e armazenamento de propágulos de Euterpe edulis Martius, visando a conservação in situ e ex situ da espécieNeuburger, Marilda January 2005 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pos-Graduação em Biologia Vegetal. / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:03:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O palmiteiro, Euterpe edulis Martius (Arecaceae) tem, na Floresta Ombrófila Densa da Encosta Atlântica, o seu principal habitat. Sua exploração é intensa e de forma não seletiva, levando à diminuição de suas populações naturais. Assim, é preciso reintroduzí-lo e planejar o extrativismo auto-sustentável, sendo para isso, necessário conhecer a ecofisiologia da espécie e maneiras de conservação do germoplasma. Neste trabalho verificou-se que: 1) O tempo de esgotamento das reservas das sementes de E. edulis não parece ser influenciado pelos fatores ambientais luz e fertilidade do solo. 2) Enquanto há reservas na semente de E. edulis o crescimento da planta em termos de massa seca, área foliar e número de folhas parece ser independente dos fatores ambientais luz e fertilidade do solo. 3) O nível de luz solar que chega ao interior da floresta parece ser limitante para o crescimento de E. edulis. 4) Há interação entre os fatores ambientais luz e fertilidade do solo em plantas crescendo sob condições de luz não limitantes. 5) O crescimento de E. edulis é maior sob maior nível de luz porque a taxa fotossintética (TAL) é maior. 6) O crescimento do eixo embrionário de plantas a 50% de luz foi bem maior do que a de plantas a 2% de luz. 7) A velocidade de crescimento de plantas apresenta duas fases, uma mais lenta, até cerca de 105 dias após a germinação, quando o crescimento é dado apenas as expensas de translocação das reservas da semente e uma outra fase mais rápida que coincide com o aparecimento de folhas fotossintetizantes, tornando o crescimento da planta independente das reservas da semente. 8) O encapsulamento em alginato reduziu a perda de água pelas sementes. 9) A desidratação ao ar livre reduziu o teor de água das sementes para os níveis próximos aos recomendados na literatura que conferem tolerância à criopreservação, sendo que este tratamento pode ser adotado como tratamento crioprotetor para futuros experimentos de imersão em nitrogênio líquido. 10) A presença da cápsula de alginato de sódio retardou o início da germinação mas não apresentou toxicidade às sementes, provavelmente, o efeito verificado foi devido apenas a um impedimento físico que a cápsula representou para a embebição ou trocas gasosas.
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Avaliação comparativa da utilização do sêmen criopreservado e fresco na fertilização dos óvulos de curimatã, Prochilodus lineatus (Valenciennes, 1836)Silva, Eduardo Borsato da January 2000 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. / Made available in DSpace on 2012-10-17T10:37:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Tendo como objetivo avaliar o sêmen criopreservado de curimatã, foi aplicada a técnica de criopreservação em vapor de nitrogênio, utilizando uma solução crioprotetora contendo DMSO (Dimetilsulfóxido), glicose e gema de ovo. Este trabalho foi realizado na fazenda Panamá, localizada no município de Paulo Lopes, durante o período de 19/01/1999 a 08/02/1999. Os exemplares utilizados tinham dois anos e eram provenientes de tanques de cultivo; as fêmeas com peso médio 1007g e machos com peso médio 450g, ambos induzidos hormonalmente com aplicações intraperitoniais de extrato de hipófise de carpa. Para a incubação de 3 g de óvulos foram elaboradas com materiais recicláveis as incubadoras do tipo funil com volume útil de 1,5 litros. Avaliadas as taxas de fertilização, o sêmen fresco apresentou média de 53,5 % e o criopreservado média de 46,5 %, os resultados não mostraram diferença significativa entre os tratamentos. Para o volume de 0,25 ml de sêmen criopreservado, contendo 0,06 ml de esperma e o restante de solução crioprotetora, foi realizada com sucesso a fertilização de até 15 g de óvulos. O volume máximo de solução ativadora para fertilizar 3 gramas de óvulos com 0,06 ml de esperma criopreservado deve ser entre 5 e 30 ml. Quando este valor é elevado para 60 ml foi observado uma redução de 30 % na taxa de fertilização.
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Criopreservação do sêmen do dourado, Salminus brasiliensis (Cuvier, 1816, CHARACIDAE)Zanandrea, Ana Carolina Volpato January 2013 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-06-26T01:22:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1
317337.pdf: 259329 bytes, checksum: 1a8f47df4108c45f0c9a3aea157ec3af (MD5) / O dourado Salminus brasiliensis é um peixe migrador que desperta interesse para piscicultura. Os procedimentos para a reprodução induzida são dominados, contudo, o uso de sêmen criopreservado continua apresentando uso restrito. Apesar da criopreservação ser eficiente para manter a motilidade espermática, as taxas de fertilização obtidas com sêmen criopreservado são inferiores às do sêmen fresco. Este trabalho visa contribuir para o conhecimento no uso de sêmen criopreservado na reprodução induzida do dourado. Os gametas foram obtidos da primeira geração de dourados provenientes do cruzamento de reprodutores selvagens. Foram realizados experimentos de descongelamento (ambiente x água), soluções ativadoras (água destilada, NaCl 0,45% ou NaHCO3 1%), motilidade espermática e fertilização com sêmen criopreservado de dourado comparando a solução crioprotetora ACP®-104 350 mOsm e metilglicol com a solução comumente utilizada para dourado, que consiste na mistura de dimetilsulfóxido, glicose, gema de ovo e água destilada. Para ambas as soluções foi avaliada a diluição do sêmen, sendo testadas diferentes proporções de sêmen:solução crioprotetora. O maior tempo de motilidade foi obtido com NaCl 0,45% e o descongelamento com água possibilitou maiores taxas de fertilização, sendo que a solução crioprotetora à base de glicose propiciou os melhores resultados. A motilidade e a taxa de fertilização do sêmen criopreservado com a solução à base de glicose não foram alteradas pela diluição sêmen:crioprotetor, porém, com o uso do ACP®-104 a motilidade espermática e a fertilização foram maiores com o aumento da diluição.
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Refrigeração e crioconservação do sêmen da cioba Lutjanus analis e do ariocó Lutjanus synagrisSanches, Eduardo Gomes January 2011 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T23:30:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Este trabalho teve a finalidade de desenvolver protocolos de refrigeração e de crioconservação do sêmen do ariocó Lutjanus synagris e da cioba Lutjanus analis. Para os testes de refrigeração a 4 ºC, três diluentes foram testados em atmosfera normal e atmosfera modificada (100% oxigênio). Posteriormente, um teste de fertilização foi realizado para avaliar a viabilidade do sêmen refrigerado. Para a crioconservação foram analisados os efeitos de três diluentes, diferentes proporções sêmen:diluente, concentrações de crioprotetor dimetilsulfóxido, tempos de equilíbrio e velocidades de congelamento sobre a taxa de motilidade e a duração da motilidade espermáticas e avaliada a capacidade de fertilização do sêmen crioconservado. Nos experimentos de refrigeração, a taxa de motilidade e a duração da motilidade foram mantidos adequados durante 72 horas para os diluentes A e B em atmosfera normal. Na atmosfera modificada, a qualidade do sêmen caiu drasticamente durante as primeiras 24 horas, independentemente do diluente utilizado, não propiciando vantagem em sua utilização. A taxa de fertilização com sêmen refrigerado por 24 horas não diferiu da com sêmen fresco, mas ambas diferiram (P<0,05) da obtida com sêmen refrigerado por 48 horas. Para a crioconservação do sêmen de ambas espécies a combinação que propiciou maior motilidade e duração da motilidade espermáticas (P<0,05) foi aquela proporcionada pelo emprego do diluente C (pH 8,2), na proporção de 1:3 (v/v), com crioprotetor (dimetilsulfóxido) a 10%, tempo de equilíbrio de 1 minuto e em velocidade de congelamento de -60 C/min. O sêmen crioconservado apresentou taxa de fertilização superior a 50% validando o presente protocolo para estas duas espécies de lutjanideos.
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Morfogênese e conservação in vitro para Tabebuia heptaphylla (Vellozo) Toledo (Bignoniaceae)Higa, Taiza Cristina January 2006 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2012-10-22T19:19:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
226760.pdf: 1223625 bytes, checksum: df5eb579858fd76715c6b7a144b25ad6 (MD5) / Tabebuia heptaphylla (Vellozo) Toledo (Bignoniaceae) (ipê-roxo-de-sete-folhas) é uma espécie nativa da Mata Atlântica, de importância ornamental, medicinal, no reflorestamento e na produção de madeira. Esta espécie produz sementes cuja viabilidade é reduzida drasticamente após poucos meses de armazenamento (3-15 meses). Sua propagação é tradicionalmente efetuada através de sementes, sendo assim limitada pelas dificuldades de coleta e pelo restrito potencial de armazenamento. Assim, visando ampliar o conhecimento sobre a espécie e abrir novas perspectivas para a propagação e conservação, o objetivo desse trabalho foi estudar o comportamento da T. heptaphylla na sua fase reprodutiva e quantificar suas respostas morfogenéticas em cultura in vitro. O monitoramento do período de floração e frutificação da Tabebuia heptaphylla no ano de 2004 e 2005, indicou que o início da fase reprodutiva da espécie está relacionado às condições climáticas do ambiente e que as alterações climáticas em 2005 podem ter induzido a baixa frutificação neste ano. Essas alterações no clima, podem ter reduzido tanto a quantidade e qualidade fisiológica dos órgãos reprodutivos, como a eficiência da polinização. O tempo de desenvolvimento do fruto foi de aproximadamente 80 dias e a antecipação de sua coleta resultou em baixa porcentagem de germinação. O uso de BAP, contudo mostrou efeito positivo na germinação de sementes imaturas. A presença de auxina (2,4-D e Picloran) afetou positivamente na produção de calos a partir de sementes imaturas. Um protocolo de micropropagação foi desenvolvido usando segmentos de caule de T. heptaphylla contendo as gemas apicais, nós foliares e cotiledonares, sendo que o uso de BAP no meio de cultura, na maioria dos tratamentos, foi mais efetivo na micropropagação que a adição de CIN nas mesmas concentrações. A idade do explante afetou as respostas morfogênicas. Em segmentos nodais foliares e cotiledonares, houve uma tendência de maior formação de calos e brotos em explantes advindos de plantas in vitro mais novas (2 meses de idade). Os explantes de T. heptaphylla demonstraram uma tendência de diminuir a formação de calos e brotos, após sucessivas subculturas, indicando uma perda gradativa no seu potencial morfogenético. Na conservação de propágulos vegetativos in vitro, os segmentos caulinares encapsulados em alginato de cálcio, contendo a gema apical, e os nós foliares e cotiledonares não mantiveram a sua viabilidade após 6 meses de armazenamento. Quanto a criopreservação de sementes de T. heptaphylla, a capacidade de germinação foi influenciada pela interação dos fatores: tempo de armazenamento e exposição ao nitrogênio líquido, sendo que as sementes armazenadas por 26 e 105 semanas não foram afetadas pela criopreservação. Sementes com 120 semanas de armazenamento tiveram sua porcentagem de germinação incrementada após a criopreservação.
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Cultura de calos e criopreservação de sementes de Cedrela fissilis Vellozo (Meliaceae)Laudano, Wellington Luiz de Souza January 2005 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:59:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1
224208.pdf: 597493 bytes, checksum: f9b8bd6abdd864d3673dad2d2538cd8b (MD5) / Cedrela fissilis Vellozo (Meliaceae) é uma espécie nativa da Floresta Atlântica, que produz madeira de grande valor econômico. Os objetivos deste trabalho foram estudar o crescimento de calos em diferentes condições de cultivo, realizar análises preliminares do teor de óleos essenciais e dos constituintes voláteis produzidos pelos mesmos e desenvolver estudos sobre a criopreservação de sementes e conservação in vitro de propágulos vegetativos. Em todos os experimentos foram utilizados segmentos nodais cotiledonares, exceto para testar o efeito de diferentes tipos de explantes, em que segmentos apicais e foliares também foram utilizados. O meio de cultura Murashige & Skoog foi utilizado em todos os experimentos, suplementado com 2,5 M de 6-benzilaminopurina (BAP) e 5 M de ácido a-naftalenoacético (ANA), 0,2% de Phytagel e com 58,4 mM de sacarose, exceto nos casos em que outras fontes de carbono foram testadas ou em que foram testadas diferentes concentrações de sacarose na ausência ou na presença de glutamina ou em que diferentes concentrações de BAP e ANA foram utilizadas separadamente ou em combinação. As culturas foram mantidas em sala de crescimento com temperatura controlada de 25 2ºC, sob fotoperíodo de 16 horas (exceto as submetidas ao escuro), provido por lâmpadas fluorescentes Philips TDL (22.3 µmol.m-².s-¹) e foram avaliadas, após quatro e oito semanas, dependendo do experimento, através da determinação da massa fresca, massa seca e do teor de água. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação de calos crescidos na luz em 2,5 M de BAP e 5 M de ANA . A extração dos constituintes voláteis foi realizada pelo método líquido-sólido e análise através de cromatografia gasosa. As sementes criopreservadas foram descongeladas em temperatura ambiente ou a 45 C, em banho-maria, por três minutos. Os segmentos nodais foliares foram armazenados, por seis semanas em meio de cultura Murashige & Skoog, com metade da concentração salina, desprovido de sacarose, a 25 C e a 5 C e após o período de armazenamento transferidos para o meio de cultura Murashige & Skoog, suplementado com 2,5 M de BAP e 5 M de ANA. Nenhuma diferença foi detectada entre os valores de massa fresca dos calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares e apicais e os maiores valores foram obtidos com 2,5 M de BAP e 5 M de ANA. Não foram detectadas diferenças entre os maiores valores em massa seca de calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares e foliares, obtidos com oito semanas de cultivo. Os calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares cresceram em todas as combinações de ANA e BAP testadas. Os maiores valores de massa seca foram obtidos em 2,5 M de ANA com 2,5 M de BAP, 5 M de ANA e 2,5 M ou 5 M de BAP. A maior massa seca dos calos ocorreu após oito semanas de cultivo em sacarose, sendo os valores observados para glicose e frutose semelhantes. Os maiores valores de massa seca dos calos foram obtidos com 58,4 mM ou 116,8 mM de sacarose e com 87,6 mM de sacarose e 2,73 mM de glutamina. Os calos apresentaram maior massa seca na luz, com oito semanas de cultivo e maior teor de água no escuro. Calos produzidos a partir de plântulas de diferentes idades não diferiram em massa seca, apenas no teor de água, que foi maior para os calos obtidos de explantes de plântulas com cinco semanas de idade. O rendimento de óleos essenciais extraídos por hidrodestilação, produzidos pelos calos foi de 1,17 % da massa seca. O linalol foi o composto majoritário produzido por calos crescidos na luz ou no escuro. Sete compostos voláteis foram identificados em calos crescidos no escuro e doze foram identificados em calos crescidos na luz. O germacreno apareceu em maior proporção nos calos crescidos na luz. A massa seca dos calos produzidos a partir de segmentos nodais foliares armazenados por seis semanas a 5 C foi maior do que a massa seca dos calos produzidos pelos segmentos apicais, não havendo diferença entre as massas secas quando ambos os explantes foram armazenados a 25 C. As sementes toleraram a criopreservação por quinze meses e o descongelamento lento. O estabelecimento de diferentes condições de cultivo de calos, a detecção de compostos de interesse nos mesmos e o estabelecimento de métodos que permitem a criopreservação, por longos períodos de tempo, e a conservação in vitro, por curtos períodos de tempo, de propágulos vegetativos indicam o potencial da aplicação de abordagens biotecnológicas para a produção de metabólitos secundários e conservação de germoplasma desta espécie.
Cedrela fissilis Vellozo (Meliaceae) is a native species of the Atlantic Forest, important for timber production. The aim of this work is to study callus growth in different culture conditions, to carry out preliminary analysis on the content of essential oils and its volatile components and to develop studies on seed cryopreservation and in vitro conservation of vegetative propagules. Cotyledonary nodal segments were used in all experiments, except when different type of explants were used. The Murashige & Skoog medium supplemented with 2,5 M 6-benzilaminopurine (BAP) and 5 M a-naphtaleneacetic acid (ANA), 0,2% Phytagel and 58,4 mM sucrose was used in all experiments, except when different carbon sources, different sucrose concentration, in the absence or presence of glutamine or different concentration of BAP and ANA, isolated or combined, were tested. The cultures were maintained under 25 2ºC, 16 hours photoperiod (except those kept in the dark), provided by fluorescent Philips TDL (22.3 µmol.m-².s-¹) tubes and were assessed after either four or eight weeks, depending on the experiment, for fresh mass, dry mass and water content. The essential oils were extracted by hydrodistillation from callus grown under light in 2,5 M BAP and 5 M ANA. The extraction of volatile components was carried out through the liquid-solid method and the analysis by gas chromatography. Seeds cryopreserved in liquid nitrogen and thawed either at room temperature or at 45 C, in a water bath, for three minutes. Leaf nodal segments and apical shoot segments were stored at either 25 C or 5 C, for six weeks in half strength Murashige & Skoog medium, deprived of sucrose, and transferred, after storage, to the Murashige & Skoog medium supplemented with 2,5 M BAP and 5 M ANA. No differences were detected in the fresh mass of calluses initiated either from cotyledonary nodal segments or apical segments and the highest values were obtained in the culture medium with 2,5 M BAP and 5 M ANA. No differences were detected in the highest dry mass values of calluses initiated from either cotyledonary nodal segments or leaf nodal segments, after eight weeks of culture. Growth of calluses initiated from cotyledonary nodal segments was achieved in all combination of ANA and BAP tested. Superior values of dry mass were obtained in 2,5 M ANA with 2,5 M BAP, 5 M ANA and 2,5 M or 5 M BAP. The highest callus dry mass occurred after eight weeks of culture in sucrose, and similar values were obtained for glucose and fructose. Superior values of callus dry mass were obtained on either 58,4 mM or 116,8 mM sucrose and on 87,6 mM sucrose and 2,73 mM glutamine. Calluses showed higher dry mass in the light, when cultivated for eight weeks. Calluses produced from seedlings with different age did not differ in dry mass, only the water content was higher in callus obtained from explants of five week-old seedlings. The content of essential oils produced by the callus was 1,17 % of the dry mass. Linalool was the major compound produced by callus grown either under light or in the dark. Seven volatile compounds were identified in callus grown in the dark and twelve were identified in callus grown in the light. Germacrene appeared in higher proportion in the callus grown in the light. The dry mass of calluses produced from leaf nodal segments stored for six weeks at 5 C was higher than the dry mass of calluses produced from the apical segments, and no difference in the dry mass was detected when both explants were stored at 25 C. Seeds tolerated cryopreservation for fifteen months and the slow thawing. The establishment of different callus culture condition, the detection of important compounds produced by the callus and the establishment of methods which allow long term seed cryopreservation, and short term in vitro conservation of vegetative propagules indicate the potential of application of biotechnological approaches for the production of secondary metabolites and germplasm conservation of this species.
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Efeito da criopreservação de esporos em nitrogênio líquido no desenvolvimento de plantas de Dicksonia sellowiana HookMoreira, Patrícia Almeida Barroso January 2005 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Biologia Vegetal / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:50:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Germinação in vitro, criopreservação e embriogênese somática em pupunhaSteinmacher, Douglas André January 2005 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2013-07-16T00:57:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Efeitos de diferentes níveis de luz, temperaturas e criopreservação na germinação de crescimento inicial de Rumohra adiantiformis (FORST.) Ching (Dryopteridaceae)Brum, Frâncis Maria Roxo de January 2001 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas / Made available in DSpace on 2013-12-05T20:53:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2001Bitstream added on 2014-09-25T22:21:35Z : No. of bitstreams: 1
178728.pdf: 23785904 bytes, checksum: ea1b9753e5633b136561e4eb7b3b507b (MD5) / Rumohra adiantiformis (Forst.) Ching é uma pteridófita terrestre, rupestre, epífita crescendo em habitats como solo arenoso descoberto, áreas arbustivas, rochas, florestas, ocorrendo desde o nível do mar até altitudes acima de 2400 m, nos Andes. É explorada para confecção de arranjos florais. Este trabalho foi desenvolvido para analisar efeitos de algumas temperaturas, níveis de luz e criopreservação sobre a germinação e crescimento inicial desta espécie. Esporos de R. adiantiformis atingiram 97% de germinação após 10 dias de cultivo sob temperaturas de 20 e 25 °C apresentando inibição e retardo a 30°C. Após 13 meses de armazenamento não houve perda de viabilidade de esporos. Com relação aos efeitos de diferentes níveis de luz, a maior porcentagem de germinação foi obtida pelo tratamento de 91% de redução da luminosidade, implantado na estação do inverno (5-26°C), do ano 2000, cuja curva estabilizou aos 8 dias de cultivo, com 97% de esporos germinados. Reduções de 28 e 46% dos níveis de luz, durante o verão (17-32°C) inibiram completamente a germinação após 40 dias de cultivo. A criopreservação por curtos e médios períodos constituiu-se em um método viável de armazenamento de esporos de R. adiantiformis quando não esterilizados e não crioprotegidos, acelerando os processos germinativos quando comparados ao controle. A esterilização associada a crioproteção reduziu e retardou drasticamente a germinação dos esporos. Não houve diferença estatística entre os teores de açúcares solúveis totais dos gametófitos oriundos de esporos criopreservados e do controle. A maior taxa de clorofila foi apresentada pelos gametófitos provenientes de esporos esterilizados, criopreservados com ou sem crioproteção e degelados lentamente. Não houve diferença estatística entre o peso de massa fresca e seca dos gametófitos oriundos de todos os tratamentos. Esporófitos provenientes de esporos criopreservados não diferiram do controle quanto ao tamanho da primeira fronde e ao número de frondes produzidas. As maiores taxas de crescimento relativo foram encontradas em esporófitos oriundos de esporos não esterilizados, criopreservados com crioprotetor e degelados lentamente e dos esporos esterilizados, criopreservados sem crioproteção e degelados lentamente. O menor teor de clorofila total foi obtido nos esporófitos provenientes de esporos não esterilizados, criopreservados sem crioproteção e degelados rapidamente. Os demais tratamentos não diferiram do controle. Todos os tratamentos de criopreservação produziram esporófitos com peso de massa fresca e seca inferiores ao controle
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Germinação, propagação in vitro e criopreservação de esporos de Dicksonia sellowiana (Presl.) Hook /Rogge, Gladys Daniela January 1999 (has links)
Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-18T16:13:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T03:17:12Z : No. of bitstreams: 1
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