Orientador: Shirlei Maria Recco-Pimentel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T05:52:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Medeiros_LilianRicco_M.pdf: 2806210 bytes, checksum: 5fcc0121fdf8339334ff0b102682d87f (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado

Orientador : Shirlei Maria Recco-Pimentel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T20:59:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosa_Cristina_M.pdf: 1905213 bytes, checksum: 73a500fb2ccda93c80afaa605b601931 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador : Eliana Regina Forni-Martins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T02:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_JuliaYamagishi_M.pdf: 5045326 bytes, checksum: a14be56e626e6c4bfcd0e31046a693ff (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A família Alismataceae, ordem Alismatales, é composta por plantas aquáticas ou semi aquáticas de folhas eretas ou flutuantes, que crescem em brejos ou solos encharcados. Dois dos 11 gêneros que compõem a família estão presentes nos neotrópicos. O gênero Echinodorus (26 espécies) possui cerca de 17 espécies no Brasil, sendo que nove ocorrem no estado de São Paulo. O gênero Sagittaria (25 espécies) possui cerca de seis espécies presentes no Brasil, com apenas três no estado de São Paulo. As plantas aquáticas apresentam uma série de problemas para a sistemática, pois muitas características morfológicas apresentam uma extensa plasticidade fenotípica, sendo muitas destas convergentes ou baseadas em aspectos não genéticos/hereditários. Com o objetivo de traçar tendências evolutivas/cariotípicas para o grupo e incorporar dados moleculares/citogenéticos para a família Alismataceae, foram investigadas nove espécies da família (incluindo uma ou mais populações de cada), através das técnicas convencional com Giemsa, bandamento C, bandamento CMA/DAPI e hibridação fluorescente in situ para a seqüência 45S do DNAr. As espécies apresentaram cariótipos com 2n=22 cromossomos, os quais variaram em comprimento (2,3 a 9, 1 _m) mostrando-se altamente assimétricos (TF% entre 12,9 e 20,5).Os números cromossômicos reforçam x=11 como o provável número básico para o grupo. Foram documentadas duas populações triplóides (2n=33) para a espécie Echinodorus tennellus, ambas apresentando anormalidades meióticas e alta inviabilidade de pólen, indicando a existência de citótipos para a espécie. Os procedimentos de bandamento cromossômico foram bastante eficientes para a caracterização de cada uma das espécies, indicando possível proximidade entre elas. Do mesmo modo, a hibridação in situ foi eficaz para demonstrar diferenças inter-populacionais nos sítios de hibridação em Sagittaria rhombifolia / Abstract: Alismataceae, order Alismatales, is composed of aquatic and semi-aquatic herbs, with emerged, submerged or floating leaves, growing in muddy and water-Iogged substrates. The family has 11 genera, two of which occur on the neotropical region. In Brazil, there are 17 species of Echinodorus (26 species) with nine in São Paulo state. In Sagittaria (25 species), there are six species in Brazil with only three in São Paulo state. Aquatic plants usually represent great problems for traditional systematics because a lot of morphological features exhibit extensive phenotypic plasticity and many characters are convergent or non-genetically based. In order to detect trends in the karyotypic evolution of this group as a whole, and incorporate molecular/cytogenetic data for the study of Alismataceae family, nine species (including one or more populations) of Alismataceae were investigated cytologically, with Giemsa staining, C-banding, CMA/DAPI banding and in situ hibridization with 45S rDNA sequence. Ali species presented 2n=22 chromosomes, showing a basic number x=11 for both genera, with chromosome size varying from 2.3 to 9.11lm and a high asymmetry index (TF% between 12.9 to 20.5). Two triploid (2n=33) populations of Echinodorus tennellus were observed, both presenting meiotic abnormalities and significative polen inviability. Banding procedures were efficient for species identification and detection of species similarity, oghether with in situ hibridization. In only one species, Sagittaria rhombifolia, inter-populational differences in the number and position of hibridization sites were found / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Orientadores: Eliana R. Forni Martins, Ana M. G. A. Tozzi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T16:19:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MendoncaFilho_CarlosVictor_D.pdf: 21249392 bytes, checksum: 0c732bdde31a7e067b5797cb9bd563a3 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O gênero Machaerium Pers. (Leguminosae Papilionoideae) abrange cerca de 120 espécies, com distribuição tipicamente neotropical e de ocorrência em diferentes tipos de hábitat. A maioria dos trabalhos sobre o gênero é quase sempre de caráter regional, onde os problemas taxonômicos têm sido perpetuados. Poucas espécies de Machaerium foram estudadas sob o ponto de vista biossistemático, incluindo a citotaxonomia. Estudos sobre as características de frutos, sementes e plântulas são também incipientes. Neste trabalho foi realizada a caracterização cromossômica de 18 espécies de Machaerium, sendo 16 novas contagens. O gênero apresenta número cromossômico 2n= 20, mas também foram encontradas espécies tetraplóides, com 2n= 40. As diferenças de ploidia auxiliaram na delimitação de algumas espécies. Um estudo da morfologia de frutos, sementes e plântulas de 19 espécies de Machaerium foi também realizado. As espécies foram agrupadas em categorias de acordo com o desenvolvimento do eixo embrionário, o número de pínulas na plúmula, o tipo de plântula e número de folíolos do primeiro nó eofilar. Estas informações auxiliaram no posicionamento das espécies dentro das seções do gênero e no estabelecimento de relações de afinidades entre as seções. Uma sinopse das seções de Machaerium também foi apresentada. Foram listadas 127 espécies, sendo duas espécies novas, e 13 variedades, totalizando 140 táxons para o gênero e 159 sinônimos, dos quais oito são novos. Foi sugerida a criação de uma nova seção para abrigar quatro espécies, com base em dados blastogênicos e listadas 41 espécies que não foram incluídas em nenhuma seção em trabalhos anteriores. Foram também listadas quatro espécies duvidosas e sete nomes inválidos. As seções do gênero foram lectotipificadas. A revisão taxonômica das espécies de Machaerium sect. Oblonga também foi apresentada. Foram apresentadas chave de identificação, descrições e ilustrações de 12 espécies e de uma variedade e a organografia de duas espécies novas que, posteriormente, serão publicadas. Foram listados cinco novos sinônimos e um nome novo e designados um epitipo e cinco lectótipos. Os dados fenológicos das espécies estudadas indicaram que elas não florescem simultaneamente numa mesma estação. As espécies ocorrem principalmente na região Sudeste e Sul do Brasil, mas são também encontradas espécies na Bahia e fora do Brasil, na Argentina, Paraguai, Peru, Bolívia, Colômbia, Venezuela, Guianas e Panamá. Foram observadas espécies com distribuição restrita, muito restrita e ampla. Algumas espécies amazônicas representam uma disjunção dentro de Machaerium sect. Oblonga / Abstract: The genus Machaerium (Leguminosae Papilionoideae) comprises about 130 species and is widespread in the Neotropics, in different habitat types. Most studies with this genus is mainly regional, and there are many taxonomic problems. Few species of Machaerium were studied in a biosystematics view, inc1uding citotaxonomy. Studies about the morphology of fruits, seeds and seedlings are meager. ln this work cytological studies were carried out for 18 species of Machaerium, 16 of which represent new counts. The species showed 2n=20, except for the three tetraploids, where 2n=40. Differences in ploidy help to delimit some species. The study of the morphology of fruits, seeds and seedlings of Machaerium, was also carried out. The species were grouped into categories related to the development of the embrio axis, the number of pinules in the plumule, the type of seedlings and the number of leaflets in the fusty eophyll node. This information¿s help on the placement of the species into sections. A synopses of the sections was also presented. The 140 taxa listed, inc1uded 127 species, two of them being new species and 13 varieties. A total of 159 synonyms were also listed, eight of which being new citations. it was suggested the creation of a new section to inc1ude four species, based on blastogenic data, whereas 41 species were not inc1uded in no section of the genus. F our dubius species and seven invalid names were also listed. The lectotipification of the sections of the genus were provided. It was also prepaired a taxonomic revision of Machaerium sect. Oblonga. Key for identification, descriptions and drawings of 12 species and one variety and the morphology of two new species were provided. Five new synonims and one new name were listed and one epitype and tive lectotypes were designated. The phenology of the species indicated they don't flowrish simultaneously, in a same season. The species occour mainly in the South and Southeastem Brazil, but also in Bahia, and outside Brazil, in Argentina, Paraguai, Peru, Bolivia, Colombia, Venezuela, Guianas and Panama. Species with restric, very restrict and wide distribution were observed. Some Amazonian species represented a disjunction inside Machaerium sect. Oblonga / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Eliana Regina Forni-Martins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_ItayguaraRibeiro_M.pdf: 2408340 bytes, checksum: 9b27a5548110ef1f9fc4b2aea92367a7 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A família Myrtaceae destaca-se como uma das famílias com maior riqueza de espécies na maioria das formações vegetacionais no sudeste do Brasil (cerrado, campos rupestres, floresta atlântica e florestas deciduais). Dada a sua grande riqueza de espécies, ocorrência em diferentes tipos de ambientes e grande semelhança morfológica entre suas espécies, apresenta inúmeros problemas taxonômicos. Estudos cromossômicos em espécies de Myrtaceae neotropicais (subfamília Myrtoideae) ainda são escassos. Grande parte dos estudos realizados concentra-se em espécies autralianas e africanas (subfamílias Leptospermoideae e Chamelaucioideae). Nas Myrtoideae, tem-se indicação de que a poliploidia é freqüente, ao contrário do restante da família, onde predominam espécies displóides. Estes estudos objetivaram: 1) contribuir para o conhecimento cromossômico da família, mediante a determinação de números cromossômicos; 2) fornecer subsídios para o entendimento da circunscrição e delimitação de suas espécies; 3) avaliar a importância da poliploidia na evolução do grupo e 4) fazer inferências sobre o processo reprodutivo de algumas espécies. A constância do número diplóide 2n=22 (exceto para os poliplóides) e o pequeno tamanho dos cromossomos dificultaram o uso de dados cariotípicos como subsídio à taxonomia da família Myrtaceae. A ocorrência de n=11 e 2n=22 em todas as espécies, distribuídas em todos os nove gêneros analisados, distribuídos nas diferentes subtribos (Eugeniinae, Myrciinae e Myrtiinae), não subsidia o esclarecimento de dúvidas taxonômicas, como a distinção ou junção dos gêneros Myrcia, Marlierea e Gomidesia e entre Myrciaria e Plinia. A ocorrência de poliploidia nos diferentes gêneros, em meio a outras espécies diplóides, não tem valor como caráter taxonômico em nível genérico. Foi possível verificar a ocorrência de raças cromossômicas (citótipos) diferenciadas pelo nível de ploidia em várias espécies. Foi confirmada a freqüente ocorrência de poliploidia (20% das espécies analisadas) ao contrário das variações por disploidia. Não foi verificada nenhuma anormalidade no processo meiótico, o que dá indícios de regularidade no processo de reprodução sexuada / Abstract: Myrtaceae is one of the most representative families in southeast Brazilian vegetational formations (savanna, ¿campos rupestres¿, atlantic forest and deciduos forest). Given the great number of species, morphological similarities between species and occurrence in varied habitats, the family presents many taxonomic problems. Chromosomic studies in Neotropical species of Myrtaceae (Myrtoideae) are still scarce. Most of the previously accomplished studies documented Australian and African species (Leptospermoideae and Chamelaucioideae). In the Myrtoideae, it is known that poliploidy is frequent, in opposition to the remainder of the family, where disploid species predominate. These studies aimed to: 1) contribute to the chromosomic knowledge of the family, by means of the chromosomic numbers determination; 2) supply subsidies for towards the circunscription and delimitation of the species; 3) evaluate the importance of poliploidy in the evolution of the group and 4) derive inferences on the reproductive processes of the some species. The constancy of the diploid number 2n=22 (with exception of poliploids) and the small chromosome size complicated the use of the karyotypic data as subsidies to taxonomy of the Myrtaceae family. The occurrence of n=11 and 2n=22 in all species of the genera analized, doesn't clarify taxonomic doubts, such as the unification or separation of genera like Myrcia, Marlierea and Gomidesia and Myrciaria and Plinia. Poliploidy occurrence in different genera, amongst diploid species, has no value as a taxonomic character at the generic level. It was possible to verify the occurrence of chromosomic races (cytotypes), differentiated by ploidy level in several species. We observed the high frequence of poliploidy (20%), in opposite of the disploidy variations. No abnormality in the meiotic process was verified, indicating regularity of the sexual reproduction process / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal

Orientador: Eliana Regina Forni Martins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:30:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mansanares_MarianaEsteves_D.pdf: 1785636 bytes, checksum: 8a6d2b6535290f7c8fa33138c901fd02 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A subtribo Lychnophorinae abrange nove gêneros, encontrados nos campos rupestres nos estados de Minas Gerais, Bahia e Goiás, tendo, a maioria das espécies, alto grau de endemismo. Um desses gêneros é Lychnophora, o qual apresenta discordância entre diferentes autores quanto ao seu limite e número de espécies (desde 68 a apenas 11). Essa diferença de interpretação baseia-se na sinonimização e na transferência de diversas espécies para gêneros próximos, como Lychnophoriopsis e Paralychnophora. Além disso, há dificuldades na delimitação de outros gêneros da subtribo Lychnophorinae, como Minasia, Proteopsis e Heterocoma. Foi iniciado o estudo citotaxonômico de espécies de Lychnophora e de outros gêneros da subtribo, objetivando a análise de características cromossômicas que pudessem ser úteis ao entendimento taxonômico do grupo como um todo. Foram determinados números cromossômicos de cerca de 49 espécies, constatando-se 2n=34, 36 ou 38. Esses números cromossômicos distribuem-se entre espécies de diversas seções de Lychnophora e também nos gêneros próximos, de forma que não podem ser usados como caracteres distintivos nos níveis intergenéricos e infragenéricos. Entretanto, números cromossômicos são muito importantes na diferenciação de algumas espécies de Lychnophora, cujos limites taxonômicos têm sido questionados. Por exemplo, no taxon sinonimizado como L. ericoides, diferentes números cromossômicos foram encontrados, sugerindo a validade das antigas espécies: 2n=34 para L. ericoides e L. pinaster, 2n=36 para L. gardneri e 2n=38 para L. pseudovillosissima. Outros caracteres cariotípicos foram analisados em sete espécies da subtribo, como tamanho e morfologia dos cromossomos, evidenciando uma relativa constância. Os cromossomos são pequenos, medindo entre 1,10 e 2,58?m, e são predominantemente metacêntricos, embora alguns submetacêntricos também tenham sido observados em algumas espécies. Estudos envolvendo a hibridação in situ, com a sonda de rDNA 45S, têm demonstrado grande diversidade nos resultados, com variação de dois a dez sítios de hibridação entre espécies. Assim, a comparação desses marcadores cromossômicos poderá trazer novos subsídios para a taxonomia de Lychnophora e de gêneros de Lychnophorinae. Adicionalmente, a análise da microsporogênese revelou a existência de algumas anormalidades meióticas em algumas espécies / Abstract: The subtribe Lychnophorinae is composed by 9 genera, most of them endemic to the Brazilian ¿campos rupestres¿ of Minas Gerais, Bahia and Goiás, with high degree of endemism in many species. In one genus, Lychnophora, there is disagreement between different authors regarding the species limit and number (from 11 to 68). This interpretation difference is based in sinonimization and in the transference of several species to closely related genera, like Lychnophoriopsis and Paralychnophora. Besides, there are difficulties in the delimitation of other genera of Lychnophorinae, like Minasia, Proteopsis and Heterocoma. The cytotaxonomic study of species of Lychnophora and of other genera of the subtribe was made, aiming out at increasing the knowledge of chromosome characteristics that could be useful to the understanding of the taxonomy of the group as a whole. Chromosome numbers of about 49 species were determined, with 2n=34, 36 or 38. These chromosome numbers were distributed among species of several sections of Lychnophora and also closely related genera, so that they can't be used as distinctive characters in the intergeneric and infrageneric levels below section level. However, chromosome numbers were very important for the differentiation of some species of Lychnophora, wich taxonomic limits have been questioned. For example, in L. ericoides, in wich some species were sinonimized, different chromosome numbers were found, suggesting the validity of the previous species: 2n=34 to L. ericoides and L. pinaster, 2n=36 to L. gardneri and 2n=38 to L. pseudovillosissima. Other karyotype characters were analyzed in seven species of the subtribe, like chromosomes size and morphology, showing constancy of these characters. The chromosomes are small, with 1,0 to 2,58 ?m, and they are mainly metacentric, however some submetacentrics were observed. Studies involving DNA in situ hybridization, with 45S rDNA, have demonstrated great diversity between species, with variation from two to ten hybridization sites. Thus, comparison of these chromosome molecular markers can bring new subsidies for the taxonomy of Lychnophora and Lychnophorinae. Microsporogenesis analysis revealed the existence of meiotic abnormalities in some species / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Neusa Diniz da Cruz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T14:51:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pierozzi_NeivaIzabel_M.pdf: 11615728 bytes, checksum: eb7025a5d435159f4c0a13fa38f2b7a5 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: Duas espécies diplóides (2n=22 cromossomos) e autoincompatíveis de café, Coffea dewevrei De Wild. et Th. Dur. e C. racemosa Lour., foram submetidas às técnicas de bandamento cromossômicos C, g e NOR. A finalidade foi verificar a adequação de tais técnicas na diferenciação longitudinal dos cromossomos mitóticos dessas duas espécies e com a elaboração posterior de um cariótipo individual que por comparação permitisse estabelecer prováveis relações filogenéticas. O tecido empregado para esta análise foi o endosperma de frutos jovens e imaturos que, além de ser um tecido triplóide (3n=33), é mole, cedendo facilmente ao esmagamento, dispensando pré-tratamentos e oferecendo boas preparações citológicas. A análise estatística, realizada para se garantir coleta de endospermas com maior atividade mitótica, revelou (a) não haver diferenças significativas entre diferentes temperaturas de coleta; (b) que a maior atividade mitótica dos endospermas era mais acentuada naqueles endospermas pequenos ( 1 a 4 mm) e nas camadas periféricas deste tecido, independente do tamanho. Os resultados obtidos pelo emprego das diferentes modificações das técnicas de bandamento C, G e NOR, revelaram que as mesmas são suficientemente sensíveis na promoção de diferenciações ao longo dos cromossomos das duas espécies de café estudadas. O emprego de solução de tripsina diluída produziu bandas nos cromossomos, acertada concentração, o mesmo não ocorreu com a uréia. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Two diploid (2n=22 chomosomes), self-incompatible coffee species, Coffea dewevrei De Wild. et Th. Dur. and C. racemosa Lour., were subjected to C-, G- and NOR banding techniques for longitudinal differentiation of mitotic chromosomes of these two species and in construction of individual katyotypes for analysis because it is soft, squashes easily, requires no pretreatments and gives cytological preparations. An analysis of the effects of endosperm size and temperature at which the material was collected, revealed that: (a) there were no significant differences between different temperatures; (b) mitotic activity was most intense in the smaller (1-4mm) endosperms and that the peripheral layers were more active at all sizes. The results obtained with the use of different C-, G-. or NOR banding modifications revealed that the endosperma chromosomes do show banding, in spite of their small size, although some variation in patterns occurs. Treatment with diluted trypsin, with adjusted concentrations, also produced banding while urea did not. A comparative analysis of patterns of C-bands, trypsin bands and those obtained with silver impregnation showed there was similarity betweem some sets when the ideograms of C. dewevrei and C. racemosa were comparede with the same banding techniques. Such similarities were more accentuated with G-banding followed by C- banding and impregnation. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Maria Luiza Silveira Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T11:12:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_AnaLuciaPereira_M.pdf: 14328575 bytes, checksum: d7759acb56e4a881940dfce7400daf2a (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: A concentração crítica de eletrólitos (CEC) da <' cromatina, considerada corno a concentração salina na qual o fenômeno de metacromasia é abolido, numa situação em que se emprega azul de toluidina corno corante catiônico e íons Mg2+ corno cátions inorgânicos, foi determinada em cromossomos politênicos de glândulas salivares do sciarídeo Trichosia pubescens, nas fases Ls, L7 e P1 do desenvolvimento larval. O objetivo era determinar se os valores de CEC variavam em áreas cromossômicas com diferente supra-estrutura e/ou composição nucleoprotéica. Constatou-se que a maioria das regiões cromossômicas em preparados fixados em etanol-ácido acético atingiram a CEC na concentração de MgCl2 O .10M e que sítios cromossômicos ricos em ribonucleoproteínas e/ ou pufes de RNA Edna exibiram valores superiores de CEC. Não foi detectado um padrão único de mudanças em valores de CEC ao longo da pufação, sugerindo-se complexidade e variações funcionais para tais pufes. As regiões heterocromáticas e/ ou sub-replicadas também tiveram valores de CEC superiores a O.10M devido aos seus diferentes níveis de condensação cromatínica, ou ao processo de síntese não sincronizada de DNA em comparação a outras regiões dos cromossomos. Os valores de CEC em cromossomos tratados com RNase foi mais elevado em decorrência da re-estruturação dos complexos nucleoprotéicos ou não formação de híbridos de DNA-RNA. O valor de CEC em cromossomos fixados em paraformaldeído foi superior aqueles obtidos nos preparados fixados em etanol-ácido acético (3: 1) , certamente devido ao diferente nível de preservação de proteínas promovido por estes fixadores. ­Numa variante do método de CEC, proposta para evidenciação de complexos ribonucleoprotéicos, a concentração de O.O5M de MgCl2 não foi ideal para cromossomos politênicos de Trichosia pubescens, diferindo de resultados já reportados para cromossomos politênicos de Drosophila aracataca. Micronucléolos distribuídos ao longo dos cromossomos ou dispersos no nucleoplasma, tiveram valores de CEC superiores em relação aos da maioria das regiões cromossômicas. Estes valores decresceram após tratamento com RNase, demonstrando que o RNA é o principal componente acontribuir com sítios de ligação às moléculas de azul de toluidina nessa estrutura / Abstract: The critical electrolyte u concentration (CEC) of chromatin, measured as the saline concentration which metachromasy is abolished, when employing toluidine blue as a cationic dye and Mg2_ ions as inorganic cations, was determined for the polytene chromosomes of salivary glands of the sciarid Trichosia pubescens. The Ls, L7 and P1 phases of larval development were studied. The objective was to determine the CEC values for various chromosome areas with different supra-structure and/or nucleoprotein composition. Most of the chromosome regions in preparations fixed with acetic acid-ethanol (1:3) attained the CEC concentration of O.10M MgCl2. Areas rich in ribonucleoprotein (RNP) and/or RNA and DNA puffs displayed high CEC values. A singular regular pattern of CEC values was not detected during puff development which, suggests the complexity and variable functions to these puffs. Heterochromatic and/or sub-replicated regions had CEC values above O.10M due to their different levels of chromatin condensation, or to the non synchronized process of DNA syntheses in comparison with the other chromosome regions. The CEC value of chromosomes treatmented with RNase was higher as aresult of the re-organization of nucleoprotein complexes or the non formation of DNA-RNA hybrids. The CEC value of paraformaldehyde fixed chromosomes was higher than that attained in the acetic acid-ethanol (1:3) fixed preparations, clearly due to the different levels of protein preparation confired by these fixatires '.' In a variant of the CEC method, proposed to evidentify nucleoprotein complexes, the concentration of O.O5M MgC12 was not ideal for polytene chromosomes of Trichosia pubescens, which differs form results already reported for Drosophila aracataca polytene chromosomes. Micronucleoli distributed along of the chromosomes or dispersed in the nucleoplasm had higher CEC values in relation to most of the chromosome regions. These values decrease after Rnase treatment, demonstrating that RNA is the principal component which contributes binding sites for toluidine blue molecules in this structure / Mestrado / Biologia Celular

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-05T17:10:26Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 329366 bytes, checksum: 1cad6e5eb2e8defef187b9ddf1d4c662 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T17:10:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 329366 bytes, checksum: 1cad6e5eb2e8defef187b9ddf1d4c662 (MD5) Previous issue date: 2005-07-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Passiflora edulis f. flavicarpa é considerada a espécie mais importante do gênero Passiflora, principalmente pelo seu interesse botânico, comercial e em programas de melhoramento. Análises citogenéticas desta espécie revelaram número cromossômico de 2n=18, porém, a caracterização de seus cromossomos tem sido apresentada na literatura com dados conflitantes quanto à posição do centrômero, ao número e localização de constrições secundárias e de regiões organizadoras de nucléolo (RONs). Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi adaptar metodologias que ampliassem a resolução das análises cromossômicas em P. edulis f. flavicarpa. Mais especificamente, aplicar técnicas citogenéticas convencionais e moleculares para determinar os aspectos morfológicos dos cromossomos e identificar as RONs. Os meristemas radiculares foram pré-tratados com o bloqueador mitótico Amiprofos metil (APM), 3 μM, durante um período de 16 horas à 4 oC e fixados. As preparações citogenéticas foram realizadas pela técnica de dissociação celular e secagem ao ar e submetidas à coloração convencional com Giemsa, à coloração com o fluorocromo laranja de acridina e à metodologia de FISH (Fluorescent in Situ Hybridization). As figuras cromossômicas foram observadas com objetiva de imersão e capturadas diretamente por uma videocâmera acoplada ao microscópio e a um computador. O bloqueador mitótico utilizado, juntamente com a técnica aplicada, proporcionou acúmulo de células prometafásicas e metafásicas adequadas para análise. Visualizaram-se nove pares de cromossomos bem espalhados nas lâminas, sem sobreposição e com constrições primárias e secundárias definidas, facilitando assim a montagem dos cariogramas. As análises do cariótipo revelaram comprimento médio dos cromossomos metafásicos de 3,75 μm (par 1) a 2,20 μm (par 9) e razões de braços indicando que os cromossomos de 2 a 7 são metacêntricos e o 1, 8 e 9 são submetacêntricos. Observou-se a presença de constrição secundária na porção subterminal do braço longo dos cromossomos 1 e 8 e porção subterminal do braço curto dos cromossomos 2 e 7, sendo que, na literatura, o número dessas constrições variou de um a três em preparações obtidas pela técnica de esmagamento. Com o fluorocromo laranja de acridina, foram observadas regiões emitindo fluorescência verde-amarelada no braço curto do cromossomo 7 e no braço longo do cromossomo 8, evidenciando dois cromossomos que apresentaram constrição secundária. A técnica de FISH, com a utilização de sonda de rDNA 18S, revelou quatro marcações fluorescentes em núcleos interfásicos e marcações fluorescentes nos mesmos pares cromossômicos marcados com laranja de acridina, em metáfase. As marcações obtidas com o fluorocromo correspondem em número e localização dos sítios de rDNA 18S, indicando que somente duas das quatro constrições secundárias encontradas com a coloração de Giemsa estão relacionadas com RON. Assim, considerando que diferenças intraespecíficas e de ecotipos não estejam envolvidas nas diferenças morfológicas pesquisadas, as metodologias aplicadas corroboraram a ampliação da resolução do cariótipo de P. edulis f. flavicarpa. Evidenciou-se, portanto, diferenças na posição do centrômero, número e localização das constrições secundárias e das RONs, quando comparadas aos resultados encontrados na literatura. / Passiflora edulis f. flavicarpa is considered the most important species from the genus Passiflora, mainly because of its botanical and commercial interests, as well as for breeding programs. Cytogenetical analyses of this species have revealed a chromosomic number of 2n=18, however, its chromosome characterization in the literature has been conflicting concerning the centromere position, the number and localization of secondary constrictions and of nucleolus organizer regions (NORs). In this context, the goal of the present work was to adapt methodologies that would amplify the resolution of the chromosomic analyses in P. edulis f. flavicarpa. More especifically, to apply conventional and molecular cytogenetical techniques in order to determine the morphological aspects of the chromosomes and identify the NORs. Root meristems were pre-treated with the mitotic blocker Amiprophos-methyl (APM), 3 μM, for 16 h at 4 °C and then fixated. The cytogenetic preparations were done using the cell dissociation and air-drying technique, followed by the conventional staining with Giemsa, staining with the fluorochrome Acridine Orange and the FISH (Fluorescent in Situ Hybridization) methodology. The chromosomic figures were observed with objective of immersion lenses and captured directly by a videocamera connected to the microscope and to a computer. The employed mitotic blocker, associated to the applied technique, provided the accumulation of prometaphase and metaphase cells adequate to analysis. It was possible to visualize nine pairs of chromosomes well-dispersed on the slides, without overlapping and showing well defined primary and secondary constrictions, so enabling the easier assembly of the xkaryograms. Analyses of the karyotype revealed a mean metaphasic chromosome length ranging from 3.75 μm (pair 1) to 2.20 μm (pair 9) and arm ratios indicating that the chromosomes from 2 to 7 are metacentric, while 1, 8 and 9 are submetacentric. The presence of secondary constrictions was observed on the subterminal portion of the long arm of chromosomes 1 and 8, and on the subterminal portion of the short arm of chromosomes 2 and 7, while in the literature, the number of these constrictions varied from one to three in preparations obtained with the squash technique. With the fluorochrome Acridine Orange, regions were observed emitting green-yellowish fluorescence on the short arm of chromosome 7 and on the long arm of chromosome 8, this way evidencing two chromosomes which presented secondary constriction. The FISH tecnnique, with use of 18S rDNA probe, revealed four fluorescent marks in interphasic nuclei and fluorescent marks on the same chromosome pairs marked in metaphase with Acridine Orange. The marks obtained with the fluorochrome correspond in number and position of the 18S rDNA sites, thus indicating that only two of the four secondary constrictions identified with the Giemsa coloration are related to NOR. Hence, considering that intraspecific and ecotype differences are not involved in the researched morphological differences, the applied methodologies reasserted the resolution amplification of the P. edulis f. flavicarpa karyotype. Therefore, differences on the centromere position, number and localization of the secondary constrictions and of the NORs were verified, when compared to results found on the literature.

Orientador: Fábio Porto-Foresti / Resumo: A ictiofauna neotropical é uma das mais ricas do mundo, sendo estimada a ocorrência de 9100 espécies de peixes. Dentre estes, o gênero Astyanax (Characiformes, Characidae) se destaca como um dos mais abundantes em espécies, sendo marcante a presença de cromossomos B neste grupo. Cromossomos B, ou supranumerários, são cromossomos adicionais aos cromossomos padrões do organismo e considerados dispensáveis. A origem destes cromossomos ainda é incerta, sendo os modelos mais aceitos a origem intraespecífica, em que os cromossomos B se originam dos próprios cromossomos da espécie e a origem interespecífica, em que os supranumerários se originariam dos cromossomos de outra espécie próxima através da hibridação. Uma das características que definem os cromossomos B é a sua transmissão que foge dos padrões mendelianos, levando a acumulação ou extinção destes elementos. Em peixes, cromossomos B estão presentes em 113 espécies, sendo a variante presente em Astyanax paranae um dos modelos de estudo para o grupo. Esta variante foi diagnosticada como um isocromossomo de origem intraespecífica, e sequencias presentes neste cromossomo também estão presentes nos cromossomos B de outras espécies do grupo, sugerindo uma origem comum. Entretanto, dados em relação à transmissão deste supranumerário ainda não são conhecidos. Diante disto, o objetivo do presente trabalho foi descrever o padrão de transmissão do cromossomo B presente em A. paranae através de cruzamentos dirigidos. A transmissão de cr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The neotropical ichthyofauna is one of the richest in the world, estimated in 9100 fish species. In this group, the genus Astyanax (Characiformes, Characidae) is considered one of the most abundant in species, being remarkable the presence of supernumerary or B chromosomes in the group. B chromosomes are additional chromosomes to the standard chromosomes and are considered dispensable. These elements are present in plants, animals and fungi and are generally formed by repetitive DNA sequences and fragments of ribosomal and histone genes. The origin of these chromosomes is still uncertain, and the most accepted model intraspecificrelated, where the B chromosomes arise from the same chromosomes of the species and the intraspecific origin, although the supernumerary ones would originate from the chromosomes of another related species by hybridization. One of the important characteristics of B chromosomes is related with their transmission, which does not follow Mendelian patterns, leading to the accumulation or extinction of these elements. In fish, B chromosomes are present in 113 species, and the variant present in Astyanax paranae is one of the studing models for the group. This variant was diagnosed as an isochromosome of intraspecific origin, and sequences present on this chromosome are also present on the B chromosomes of other related species, suggesting a common origin. However, data regarding the transmission of this supernumerary are still unknown. Therefore, the objec... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre